CN104543602A - 一种柳枝稷青贮加工方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种柳枝稷青贮加工方法，向柳枝稷中同时添加复合菌剂和纤维素复合酶进行厌氧发酵；其中，所述复合菌剂是由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳球菌分别发酵，再将所得发酵液混合而得；所述纤维素复合酶选自崩溃酶D9515、纤维素酶V2010、纤维素酶C9748或半纤维素酶笑果中一种或两种以上。本发明所述的青贮加工方法有效改善柳枝稷青贮的发酵水平，发酵产物中pH值低，粗蛋白含量和体外干物质消化率高，洗涤纤维、纤维素、半纤维素和木质素含量均一定程度的降低。本发明所述青贮加工方法生态安全，应用简易，成本低廉，显著提高青贮效果。

Description

一种柳枝稷青贮加工方法

技术领域

本发明涉及一种柳枝稷青贮加工方法，属于农业技术领域。

背景技术

近年来，随着我国畜牧业的发展，带动了草地禾本科牧草产业的迅速发展。优质禾本科牧草越来越受到人们的青睐。但是随着家畜头数的不断增加，天然生长的这些牧草已不能满足家畜全年的营养需要，因此生产者通过人工种植优质高产的牧草来解决这一矛盾。柳枝稷等禾本科牧草，生产力高，具有优良牧草特性和水土保持能力，且抗逆性极强，可在干旱和半干旱地区、低洼易涝和盐碱地区、土壤贫瘠的山区和半山区种植，作为引种牧草的研究逐步受到关注。

目前，国内对柳枝稷的研究集中在栽培和管理方面，在贮存方面鲜有报道。从世界范围来看，牧草的保藏主要以晒制干草和制作青贮为主。干草调制主要以自然干燥为主，但在牧草收获季节通常面临雨季，由于雨淋等原因造成的干物质的损失可达20％-30％。就目前来来，青贮技术是牧草保藏的理想措施。因为青贮保藏期间生成乙醇、乙酸、乳酸等高能物质，使总能的损失降低，同时也可以减少营养成分的损失，保持青绿饲料的营养成分。青贮饲料还具有适口性好，消化率高，调制方便，保藏投入低等优点。微生物添加剂作为有机添加剂，具有生态安全，应用方便、价格低廉等优点。目前，市场上已有很多此种微生物产品，其中乳酸菌、纤维素分解菌和酶制剂等微生态制剂的开发和应用受到广泛关注。添加的酶制剂主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶等，在青贮中应用较多的酶是纤维素分解酶，其存在于黑曲霉和木霉的培育物中。青贮发酵时，乳酸菌只能利用可溶性糖而不能利用纤维素或半纤维素，鲜作物中WSC含量过低时，乳酸菌添加剂不会发生作用。禾本科牧草中含有大量的纤维素和半纤维素，葡萄糖等可溶性糖含量较低，在青贮时结合使用乳酸菌和纤维素酶，把纤维素和半纤维素分解为葡萄糖、木糖等单糖，从而在促进乳酸发酵的同时也可以提高动物的消化率。

在稻草、玉米秸秆青贮过程中同时添加乳酸菌和纤维素酶均有报道。如CN1568755A公开了一种用于制备青贮饲料的添加剂，该添加剂包含混合菌粉、混合酶粉。CN1409986A公开了一种青贮专用乳酸菌接种剂，其中含有植物乳杆菌原粉，戊糖片球菌原粉，纤维素酶，半纤维素酶等。但由于选用的菌种及酶的来源、使用剂量不同,作用的底物也不一样,故将这类添加剂用于柳枝稷青贮过程中，效果并不理想。

发明内容

本发明目的是提供一种柳枝稷青贮加工方法，可有效改善青贮饲料的发酵品质。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种柳枝稷青贮加工方法，即在柳枝稷青贮同时添加复合菌剂和纤维素复合酶进行厌氧发酵。

其中，所述复合菌剂添加量为4.5×10⁷-5.5×10⁷CFU/g鲜质量(FM)，优选5.2×10⁷CFU/g鲜质量(FM)；所述纤维素复合酶的添加量为2.0-10.0mg/kg干物质(DM)；优选8mg/Kg干物质(DM)。

其中，所述复合菌剂是由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳球菌分别发酵，再将所得发酵液混合而得；其中混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为90-96：3.5-6：0.5-4，且菌落形成单位总数目为0.8×10¹²-1.2×10¹²CFU/ml。。

其中，所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，保藏编号为JCM 1149T；

所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，保藏编号为CGMCCNo.6733；

所述乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)，保藏编号为ATCC11007。

所述混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比优选为94：4.5：1.5，菌落形成单位总数目为1×10¹²CFU/ml。

本发明所述的复合菌剂可以使接种的乳酸菌迅速成为发酵饲料中的优势菌，有效控制发酵饲料的微生物区系。

所述纤维素复合酶选自崩溃酶D9515、纤维素酶V2010、纤维素酶C9748或半纤维素酶笑果中一种或两种以上。优选纤维素酶C9748。

其中所述崩溃酶D9515来源于Basidiomycetes sp.；所述纤维素酶V2010来源于Aspergillus sp.；所述纤维素酶C9748来源于Trichoderma longibrachiatum；所述半纤维素酶笑果来源于Aspergillsoryzae；其中，所述D9515、V2010、C9748均购自美国Sigma-Aldrich公司，所述半纤维素酶笑果由浙江湖州笑果生物科技公司提供。

作为本发明优选的实施方式，所述柳枝稷青贮加工方法如下：

将复合菌剂与纤维素复合酶C9748混合，加少量水均匀喷洒柳枝稷表面，厌氧发酵；

其中复合菌剂添加量为5.2×10⁷CFU/g FM，纤维素复合酶添加量为8mg/Kg DM；

其中，所述复合菌剂中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为94：4.5：1.5，且菌落形成单位总数目为1.0×10¹²CFU/ml。

本发明所述的青贮加工方法有效改善柳枝稷青贮的发酵水平。发酵产物中pH值低，粗蛋白含量和体外干物质消化率高，洗涤纤维、纤维素、半纤维素和木质素含量均一定程度的降低。本发明所述青贮加工方法生态安全，应用简易，成本低廉，显著提高青贮效果。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1复合菌剂的制备

将植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌分别接种于MRS-S培养基中，30℃静置培养72h，所得发酵液按比例混合，其中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为94：4.5：1.5，且菌落形成单位总数目为1×10¹²CFU/ml，即得青贮接种剂。

实施例2柳枝稷青贮加工方法

步骤如下：

将实施例1所得复合菌剂与纤维素复合酶C9748混合，加少量水均匀喷砂柳枝稷表面，其中复合菌剂添加量为5.2×10⁷CFU/gFM，纤维素复合酶添加量为8mg/Kg DM；将柳枝稷装入2L螺口瓶中压实密封，进行厌氧发酵30天。

实施例3柳枝稷青贮加工方法

按照实施例2所述青贮加工方法进行发酵，区别在于:

1)所述纤维素复合酶为崩解酶D9515，CAS号85186-71-6，来源于Basidiomycetes sp.，购自Sigma-Aldrich公司；

2)复合菌剂添加量为4.5×10⁷CFU/g FM，纤维素复合酶添加量为10mg/Kg DM.

实施例4柳枝稷青贮加工方法

按照实施例2所述青贮加工方法进行发酵，区别在于:

1)所述纤维素复合酶为细胞壁降解酶V2010，SigmaL，来源于Basidiomycetes sp.，购自Sigma-Aldrich公司。

2)复合菌剂添加量为5.5×10⁷CFU/g FM，纤维素复合酶添加量为2mg/Kg DM.

实施例5柳枝稷青贮加工方法

按照实施例2所述青贮加工方法进行发酵，区别在于:

1)所述纤维素复合酶为木聚糖酶笑果，来源于Aspergills oryzae购自浙江湖州笑果生物科技公司。

2)复合菌剂添加量为5.3×10⁷CFU/g FM，纤维素复合酶添加量为4mg/Kg DM.

实验例1青贮效果试验

对比例1：采用CN1568755A实施例1所得接种剂按照实施例2方法对柳枝稷进行青贮，发酵30天。

对比例2：采用CN1409986A实施例1所得接种剂按照实施例2方法对柳枝稷进行青贮，发酵30天。

空白对照组：将柳枝稷不添加任何添加剂，直接按照实施例2方法进行青贮，发酵30天。

对实施例2-5以及对比例1、2所得发酵产物进行检测，并以空白对照组计算，其结果如下表。

由表可知，采用本发明所述的复合菌剂与复合酶同时对柳枝稷进行青贮加工，发酵产物中pH值低，粗蛋白含量和体外干物质消化率高，中性/酸性洗涤纤维、纤维素、半纤维素含量均一定程度的降低，青贮效果显著提高。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种柳枝稷青贮加工方法，其特征在于，向柳枝稷中同时添加复合菌剂和纤维素复合酶进行厌氧发酵；

其中，所述复合菌剂是由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳球菌分别发酵，再将所得发酵液混合而得；

所述纤维素复合酶选自来源于Basidiomycetes sp.的崩溃酶D9515、来源于Aspergillus sp.的纤维素酶V2010、来源于Trichodermalongibrachiatum的纤维素酶C9748或来源于Aspergills oryzae的半纤维素酶笑果中一种或两种以上。

2.根据权利要求1所述的加工方法，其特征在于，所述复合菌剂添加量为4.5×10⁷-5.5×10⁷CFU/g鲜质量。

3.根据权利要求2所述的加工方法，其特征在于，所述复合菌剂添加量为5.2×10⁷CFU/g鲜质量。

4.根据权利要求1所述的加工方法，其特征在于，所述混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为90-96：3.5-6：0.5-4，且菌落形成单位总数目为0.8×10¹²-1.2×10¹²CFU/ml。

5.根据权利要求4所述的加工方法，其特征在于，所述混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为94：4.5：1.5，且菌落形成单位总数目为1.0×10¹²CFU/ml。

6.根据权利要求1所述的加工方法，其特征在于，所述纤维素复合酶的添加量为2.0-10.0mg/kg干物质。

7.根据权利要求6所述的加工方法，其特征在于，所述纤维素复合酶的添加量为8mg/Kg干物质。

8.根据权利要求1所述的加工方法，其特征在于，所述纤维素复合酶选自来源于Trichoderma longibrachiatum的纤维素酶C9748。

9.根据权利要求1所述的加工方法，其特征在于，将复合菌剂与纤维素复合酶C9748混合，加少量水均匀喷洒柳枝稷表面，厌氧发酵；

其中复合菌剂添加量为5.2×10⁷CFU/g FM，纤维素复合酶添加量为8mg/Kg DM；

其中，所述复合菌剂中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比为94：4.5：1.5，且菌落形成单位总数目为1.0×10¹²CFU/ml。