CN102715339B - 基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了饲料生产技术领域内的一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,首先配制基于杏鲍菇菌渣的一期发酵培养基,然后在一期发酵培养基中接种酵母菌和芽孢杆菌,进行一期有氧发酵;再添加豆粕和菜子粕配制二期发酵培养基,最后在二期发酵培养基中接种乳酸菌和双歧杆菌并均匀混合,厌氧发酵成为成品。用该饲料喂养动物时,料肉比低,投入少、产出高,同时,有效利用了杏鲍菇生产中的废弃物。本发明获得的微生物饲料,原料不需灭菌,产品不需干燥处理,获得的生物饲料富含益生活菌、功能酶和辅助因子,且益生菌和活性酶全部保留,价廉物美,饲用时添加量可达5-40%,具有良好的经济效益和社会意义。
Description
技术领域
本发明属于饲料技术领域,特别涉及一种微生物饲料或微生物饲料添加剂。
背景技术
目前饲料产业市场规模巨大,并且以每年约15%的速率增加,但利润却很低,绝大多数是以粮食为原料进行生产,成本难以降低。以非粮原料通过系列微生物处理生产价廉物美的生物饲料,将是今后的发展方向之一。目前国内还只有少量的公司从事发酵饲料或生物饲料研发和生产,但也是以粮食为主要原料,所以成本难以大幅度的降低,不易实现大发展和高利润。个别公司采用厌氧发酵为主要工艺的生物饲料,利用玉米浆、糖渣浆、豆渣和果渣等非纤维质废弃物生产发酵饲料,尽管有些效果,但成本仍旧较高,原料来源有限,且在利用含有木质纤维素的废弃物中效果不佳。
益生菌,具有绿色安全、无抗药性、无残留、无毒副作用等优点,对动物具有防治疾病、促进生长、提高饲料利用率、保健等多方面的益生作用,可以完全或部分替代抗生素。欧盟在2006年在饲料添加剂中全面禁止使用低剂量的抗生素,这就更加促使了抗生素替代品的研究和应用。主力益生菌,如乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌、枯草杆菌都在美国FDA、饲料管理协会及中国农业部公布的益生菌中,枯草杆菌类能形成芽孢,将自己保护起来,发芽快,复活率高,最能耐酸、碱、盐及抗高温高压,因而在饲料加工、保存、通过胃酸环境等过程中有较高的稳定性。枯草杆菌类是好氧兼厌氧的特性,定植肠道后可夺取肠内有限的氧气,维持肠内厌氧环境,从而促进乳酸菌、双歧杆菌等的生长,抑制各种有害菌的繁殖。枯草杆菌类生产丰富的酶群、维生素、氨基酸、有机酸、寡糖等物质,提高饲料利用率和总体营养水平。枯草杆菌可也能促进机体免疫器官成熟,使T淋巴细胞和B淋巴细胞增多,提高机体的免疫力,使内源干扰素产生感应,同时,枯草杆菌可产生70多种包括枯草杆菌素等抗菌物质,能杀死或抑制大部分葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌、肠道杆菌、沙门氏菌、变形杆菌等有害菌。枯草杆菌能产生氨基氧化酶及分解硫化氢的酶类等,动物食用后,粪便恶臭大大降低。因此,枯草杆菌是有很大潜力的高成活率的益生菌,是生物饲料的重要菌种。
杏鲍菇是近年来中国重点开发的珍稀菇种之一。杏鲍菇出菇期的温度范围较窄,出口菇的质量要求较高,一般只采收1~2潮菇,生物学效率只有40%。菇农将废菌棒晒干后当柴烧,或者就丢弃在菇棚边,不但浪费了资源,还造成环境污染。由于杏鲍菇培养基由棉子壳、蔗渣、麦麸、豆粕或木屑等组成,加上利用不充分,因此,杏鲍菇菌棒中含有较丰富的营养物质,一种杏鲍菇废菌棒经检测湿基中粗蛋白质7.1% ,粗纤维21.1%,粗灰分5.1%,水份60%;具有较高的开发利用价值。如专利CN102273544A,公开了利用杏鲍菇废菌棒生产微生物饲料的方法。但在这个专利中,没有添加纤维素酶,降解纤维素效率大大降低,因为枯草杆菌、酵母菌、乳酸菌等都不能有效地降解木质纤维素。而且,该专利这些益生菌进行了一步发酵,需氧菌和厌氧菌生长有很大的矛盾,另外,最后产品需要干燥保存,能耗大,益生菌死亡率高,消化酶活性也较为降低。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,以利用杏鲍菇废菌棒生产低成本、且富含营养和益生菌的饲料。
本发明的目的是这样实现的: 一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,依次包括如下步骤:
1)配制一期发酵培养基:将杏鲍菇菌棒在潮湿状态下粉碎;再添加纤维素酶、铵盐、尿素、钙盐、钾盐和镁盐,并混合均匀;
2)在一期发酵培养基中接种酵母菌和芽孢杆菌,进行一期有氧发酵;
3)配制二期发酵培养基:经一期有氧发酵后的物料中添加豆粕和菜籽粕,混合均匀形成二期发酵培养基;
4)在二期发酵培养基中接种乳酸菌和双歧杆菌并均匀混合,在单向膜厌氧袋中进行二期厌氧发酵后,成为成品。
上述一期发酵培养基中的铵盐为硝酸氨、硫酸氨、氯化氨中的至少一种;钙盐为硝酸钙、氯化钙中的至少一种;镁盐为硫酸镁、硝酸镁、氯化镁中的至少一种;各组分的重量含量分别为:
纤维素酶 100~2000单位/Kg;
铵盐 0.1~3%;
尿素 0.1~3%;
钙盐 0.1~5%;
磷酸二氢钾 0.1~3%;
镁盐 0.01~1%;
余量为含水率45~55%且粉碎成20~100目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
本发明技术方案中,进行首次生产时,接种的酵母菌和芽孢杆菌采用菌液接种,菌液中活体菌含量为2×107cuf/ml以上,其中酵母菌菌液接种量为1~10%(重量),芽孢杆菌菌液接种量为1~10%(重量)。进行连续生产时,接种的酵母菌和芽孢杆菌采用上次发酵后的一期发酵培养基,接种量为1~20%(重量)。一期有氧发酵时间为8~72h,一期有氧发酵温度28~38℃。
本发明的技术方案中,二期发酵培养基的重量组分为:
菜籽粕 5~30%;
豆粕 5~30%;
余量为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
对于二期厌氧发酵,首次生产时,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用菌液接种,乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液中活体菌含量分别为5×107cuf/ml以上,先将乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液按体积比为(1:1)~(1:4)制成混合菌液再接种到二期发酵培养基中,混合菌液的接种量为1~12%(重量)。进行连续生产时,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用上次发酵后的二期发酵培养基,接种量为1~12%(重量)。二期厌氧发酵在常温下进行,发酵时间为0.5~3个月。
作为本发明的优选方案,所述酵母菌为:热带假丝酵母(Candida tropicalis)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的至少一种;双歧杆菌为:两岐双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 中的至少一种;芽孢杆菌为:地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的至少一种。
本发明的有益效果在于:通过添加纤维素酶,使得杏鲍菇中的纤维素能得到有效降解;一期有氧发酵为有氧发酵,发酵后酵母菌和芽孢杆菌大量增殖,酵母菌可使一期发酵培养基中含有丰富的蛋白质、B族维生素和氨基酸;芽孢杆菌能能产生多种消化酶,帮助动物对营养物质的消化吸收。芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性,同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶,如果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等,这些酶能够破坏植物饲料细胞的细胞壁,促使细胞的营养物质释放出来,并能消除饲料中的抗营养因子,减少抗营养因子对动物消化利用的障碍。酵母菌和芽孢杆菌的大量繁殖,可抑制其他有害菌的生长,可保证饲料的品质优良。在进行一期有氧发酵后,再进行二期厌氧发酵,乳酸菌和双歧杆菌在厌氧环境中增殖,酵母菌和芽孢杆菌吸收氧气,营造厌氧环境,有利于乳酸菌和双歧杆菌的快速生长,芽孢杆菌自身渐渐处于休眠或半休眠状态。芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌和双歧杆菌都为益生菌,具有促进动物生长,调节动物体胃肠道正常菌群、维持微生态平衡,改善胃肠道功能;提高食物消化率和生物效价;降低血清胆固醇,控制内毒素;抑制肠道内腐败菌生长:提高机体免疫力等作用。经该方法得到的产品,可直接作为饲料使用,也可作为饲料的添加剂使用,其含水率32%,由于有益生菌及厌氧和低pH值的抑制作用,其他杂菌不能繁殖,产品保质期可达1~3年,保存二到三个月益生菌活菌数达到高峰,可达200亿cfu/g。用该饲料喂养动物时,料肉比低,投入少、产出高,同时,有效利用了杏鲍菇生产中的废弃物。本发明获得的微生物饲料,原料不需灭菌,产品不需干燥处理,发酵产物中既有活的功能菌,也有丰富的酶群、维生素、脂类、有机酸、氨基酸、各种寡糖及辅住因子等,真正做到一物多用,这样的生物饲料富含益生活菌、功能酶和辅助因子,且益生菌和活性酶全部保留,价廉物美,饲用时添加量可达5~40%,具有良好的经济效益和社会意义。
具体实施方式
下述实施例中所用菌种仅为举例说明,不是对本发明的限制,本发明保护范围内的菌种且未列举在具体实施例中的菌种也都能实现本发明目的。
实施例1
一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,进行首次生产时,首先进行一期纤维素酶预处理和需氧益生菌发酵,具体做法如下:
(1)芽孢杆菌培养基
芽孢杆菌斜面和平板菌种培养基:采用蛋白胨10g、牛肉膏粉5g、氯化钠5g、琼脂15g、葡萄糖20 g、蒸馏水1000ml,混合后,调节pH=7.0±0.2。在121℃灭菌20min。
芽孢杆菌摇瓶种子培养基和种子罐培养基:牛肉膏5.0g/L、蛋白胨20.0g/L、葡萄糖5.0g/L、FeCl2·6H2O 0.07g/L、MnC12·7H2O 0.01g/L、MgSO4·7H2O 0.15g/L,调节pH =7.0,在121℃灭菌20min。
(2)酵母菌培养基
酵母菌斜面培养基和平板菌种培养基(100 ml):采用葡萄糖2 g、酵母浸出物1 g、蛋白胨2 g、琼脂2 g,pH 值约6.0。
摇瓶种子培养基和种子罐培养基:成分同酵母菌斜面培养基,不加琼脂。
(3)一期发酵培养基的配制
一期发酵培养基是杏鲍菇废菌棒经粉碎机在潮湿状态下粉碎,粉碎粒度为20~100目,本实施例中为40目,再添加纤维素酶,酶活力约1000 u/g,一期发酵培养基的组分如下:
纤维素酶 100单位/Kg;
硝酸氨 0.5%;
尿素 1%;
硝酸钙 0. 5%;
磷酸二氢钾 1%;
硫酸镁 0.1%;
余量为含水率50%的40目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
(4)培养方法
芽孢杆菌液体菌种培养。芽孢杆菌采用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis, CGMCC 1.813)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis, CGMCC 1.884)、纳豆杆菌(Bacillus natto, CGMCC 1.1086)。无菌条件下分别将4 ℃保存的上述芽孢杆菌菌种各接一环至斜面培养基中,37 ℃培养24h 复苏菌种。再在平板菌种培养基上划单菌落,挑取健壮种子,分别接种到上述芽孢杆菌摇瓶种子培养基,装液量200ml /L三角瓶,220 r/min,37℃,培养18h,再以2%的接种量混合接种到上述200L种子罐培养基扩大培养,220r/min,通气量为30L/min,培养16h后制得复合芽孢杆菌液体种子,活菌数可达1×109cfu/ml以上。
酵母菌液体菌种培养:
采用啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae, CGMCC 2.1527),热带假丝酵母(Candida tropicalis, CGMCC 2.637),产朊假丝酵母(Candida utilis, CGMCC 2.1180),无菌条件下分别将4 ℃保存的上述酵母菌菌种分别接种至斜面培养基中,32℃培养36 h 复苏菌种。再各挑单菌落在平板菌种培养基上划单菌落,挑取健壮种子,分别接种到上述酵母菌摇瓶种子培养基,装液量200ml /L三角瓶, 220r/min,32℃,培养24h,再以2%的接种量混合接种到上述200L种子罐培养基扩大培养,220r/min,通气量为30L/min,培养24h后制得复合酵母菌液体种子,活菌数可达1×109cfu/ml以上。
(5)一期有氧发酵:
上述混合芽孢杆菌液体种子以5%(重量)接种量,混合酵母菌液体菌种以5%(重量)接种量,接种到一期发酵培养基中并充分搅拌,要求菌液中活体菌含量为2.0×107cuf/ml以上,37℃通气发酵8h,得到第一批一期固态发酵半成品。
如进行连续生产,接种的酵母菌和芽孢杆菌菌种为上次一期发酵后的一期发酵培养基,接种量为10%(重量),这样循环接种利用,实现连续生产,而不需要每次都进行菌液的培养。
其次进行二期厌氧发酵,其具体做法如下:
(1)乳酸菌培养基
采用MRS斜面培养基:配方为蛋白胨10g/L,酵母粉5 g/L,牛肉膏5 g/L,葡萄糖20 g/L,柠檬酸二铵2 g/L,吐温80 1.0 ml/L,乙酸钠25 g/L,K2HPO4 2 g/L,MgSO4·7 H2O 0.58 g/L,MnSO4·4H2O 0.25 g/L,琼脂20,pH 7.0。
摇瓶和种子罐乳酸菌种子培养基(重量):大豆低聚糖2.25%、葡萄糖2.00%、蛋白胨1.25%、酵母粉1.25%、番茄汁6.50%、吐温 80.10%、磷酸氢二钾0.20%。pH= 6.5,1L的三角瓶装液量200 ml。
以上乳酸菌培养基配好后均在120℃条件下高压灭菌20min。
(2)双歧杆菌培养基
MRS斜面培养基:蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,牛肉膏5 g/L,葡萄糖20 g/L,柠檬酸二铵2 g/L,吐温80 1.0 ml/L,乙酸钠25 g/L,K2HPO4 2 g/L,MgSO4·7 H2O 0.58 g/L,MnSO4·4H2O 0.25 g/L,琼脂20 g/L,调pH =7.0。
厌氧瓶和种子罐双歧杆菌增殖培养基:蛋白胨5.0g,牛肉膏5.0g,胰蛋白胨10.0g,酵母浸出粉5.0g,葡萄糖10.0g,吐温80 1.0ml,K2HPO4 2.0g,乙酸钠5.0g,柠檬酸氢二铵2.0g,ZnSO4·7H2O 0.25g,MgSO4·7H2O 0.1g,聚果糖5g和碳酸钙1g 番茄汁65ml。加蒸馏水至1000ml,调pH=6.5。
以上双歧杆菌培养基配好后均在120℃条件下高压灭菌15min。
(3)培养方法
首次启动二期发酵要制作乳酸菌和双歧杆菌液体种子液。
乳酸菌种子液的培养
将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum, CGMCC 1.557),保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus, CGMCC 1.1482),嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus, CGMCC 1.2467),干酪乳杆菌(Lactobacillus casei, CGMCC 1.62) 各在MRS斜面培养基上划线活化,在37℃培养36h进行复壮,并形成单菌落,再各挑取单菌落,接种到乳酸菌种子培养基,37℃静置培养24h使溶氧维持为0,定时取样,测定生物量。再按2%接种量接种到种子罐乳酸菌种子培养基静置培养24h,通入氮气使溶氧维持为0,定时取样,测定生物量,活菌数可达1×109cfu/ml以上。
两岐双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,CGMCC 1.2477)种子培养
首先是菌种活化,取保存的菌种,在厌氧操作台上,在装有MRS固体斜面培养基上划线复壮,置于37 ℃厌氧培养36h,挑选强壮单菌落,接入装有10 ml液体MRS 培养基的充满氮气的厌氧管中,置于37℃厌氧培养24 h。再按1%接种量,接到1L厌氧瓶双歧杆菌增殖培养基中置于37℃厌氧培养24h,然后再按2%接种量接到种子罐双歧杆菌增殖培养基中,进行37℃厌氧培养,活菌数可达1×109cfu/ml以上。
(4) 二期发酵培养基的配制
在一期有氧发酵后一期发酵培养基中,加入菜籽粕和豆粕,菜籽粕和豆粕的加入量分别为总重量的20%,加入后充分混合均匀,形成二期发酵培养基,此时,二期发酵培养基的含水率约为28~35%。
(5)二期厌氧发酵
首次启动二期厌氧发酵要制作混合乳酸菌和双歧杆菌液体种子液,混合乳酸菌种子液和双歧杆菌种子液按体积比1:2混合,以5%接种量接种到二期厌氧发酵培养基上,要求乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液中活体菌含量分别为5×107cuf/ml以上,充分搅拌后,装入单向膜厌氧袋,常温下保存,即进行二期厌氧发酵,产品保质期可达1到2年,保存二到三个月活菌数达到高峰,可达200亿cfu/g固体。
如进行连续的二期厌氧发酵,在上一次二期厌氧发酵0.5个月后,以此成品为种子,按10%接种量,接到新配制的二期发酵培养基中,搅拌充分后,装入单向膜厌氧袋,常温下保存,即进行二期厌氧发酵,可进行连续生产,产品保质期可达1到3年,保存二个月活菌数达到高峰,可达200亿cfu/g,样品检测结果见表1。
表1,二期厌氧发酵成品检测结果
检测项目 | 干基(%) | 标准 |
粗蛋白质(%) | 26.9 | >15 |
粗脂肪(g/kg) | 20.12 | >15 |
粗纤维 | 8.8 | <9 |
异硫氰酸酯 | 0.018 | <0.075 |
恶唑烷硫酮 | 0.006 | |
粗灰分(%) | 9.65 | <10 |
钙(%) | 0.78 | 0.4-0.8 |
水溶性氯化物(%) | 0.51 | 0.3-0.8 |
霉菌总数(cfu/g) | 4.25×104 | <4.5×104 |
沙门氏菌(cfu/25g) | 0 | 不得检出 |
黄曲霉毒B1(μg/kg) | 4.05 | <20 |
产品效果实验
试验点为福建省南靖县丰田镇猪场,取60只断奶小猪(长白猪),20公斤左右,混合放养,随机组合成两组,每组30只,试验日粮配方如表2,饲养90天,试验结果如表3。
表2 试验猪日粮配方(%)
日粮组成 | 试验组 | 对照组 |
玉米 | 61 | 61 |
豆粕 | 19 | 29 |
麸皮 | 5 | 5 |
预混料 | 5 | 5 |
微生物饲料 | 10 | 0 |
合计 | 100 | 100 |
表3 微生物饲料试验结果
项目 组别 | 试验组 | 对照组 |
实验猪数量(头) | 30 | 30 |
平均始重(kg/头) | 19.8±1.31 | 20.2±1.23 |
平均末重(kg/头) | 97±1.11 | 85±1.62 |
全期净增重(kg/头) | 77.2 | 64.8 |
平均日增重(kg/头·日) | 0.857 | 0.72 |
平均耗料量(kg/头) | 177.56 | 174.96 |
日采食量(kg/头·日) | 1.97 | 1.94 |
料肉比 | 2.3:1 | 2.7:1 |
本发明的饲料成本价为1860元/吨,售价为3400元每吨,和豆粕的价格差不多,所以以10%的本发明微生物饲料代替10%的豆粕,从日粮饲料成本上刚好差不多。但是使用本发明饲料的料肉比从2.7:1下降到2.3:1,尽管日采食量从1.94上升到1.97,但是日增重更是从0.72上升到0.857.总体上讲,全期毛重相对于对照组增加12.4Kg,猪价以14元/Kg算增加173元,饲料只增了2.6Kg,相当于10元不到,因此每头猪直接增加收入约163元,不包括用药减少,生病减少,猪价略高等增收因素,总体上讲,使用本发明的饲料,饲用和经济效果非常明显。
实施例2
一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征在于依次包括如下步骤:
首先,配制一期发酵培养基:将杏鲍菇菌棒在潮湿状态下粉碎;再添加纤维素酶、铵盐、尿素、钙盐、钾盐和镁盐,并混合均匀;一期发酵培养基中的铵盐为硝酸氨、硫酸氨、氯化氨中的至少一种;钙盐为硝酸钙、氯化钙中的至少一种;镁盐为硫酸镁、硝酸镁、氯化镁中的至少一种;各组分的重量含量分别为:纤维素酶 2000单位/Kg;铵盐 0.15%;尿素0.15%;钙盐2%;磷酸二氢钾1%;镁盐1%;余量为含水率45%的杏鲍菇菌棒粉碎物。
其次,在一期发酵培养基中接种酵母菌和芽孢杆菌,进行一期有氧发酵;酵母菌为:任意比例的热带假丝酵母(Candida tropicalis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)的混合菌;芽孢杆菌为任意比例的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和枯草芽孢杆菌的混合菌。有氧发酵时间为72h,温度为28~38℃。接种的酵母菌和芽孢杆菌采用菌液接种,菌液中活体菌含量为2×107cuf/ml以上,其中酵母菌菌液接种量为5%(重量),芽孢杆菌菌液接种量为8%(重量)。
然后,配制二期发酵培养基:经一期有氧发酵后的物料中添加豆粕和菜籽粕,混合均匀形成二期发酵培养基;二期发酵培养基的重量组分为:菜籽粕5% ;豆粕30%;余量为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
最后,在二期发酵培养基中接种乳酸菌和双歧杆菌并均匀混合,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用菌液接种,双歧杆菌为两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为任意比例的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)和嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)的混合菌。乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液中活体菌含量分别为5×107cuf/ml以上,先将乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液按体积比为1:1混合制成混合菌液再接种到二期发酵培养基中,混合菌液的接种量为1%(重量)。混合后的物料在单向膜厌氧袋中进行二期厌氧发酵3个月后,成为成品。
实施例3
一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征在于依次包括如下步骤:
首先,配制一期发酵培养基:将杏鲍菇菌棒在潮湿状态下粉碎;再添加纤维素酶、铵盐、尿素、钙盐、钾盐和镁盐,并混合均匀;一期发酵培养基中各组分的重量含量分别为:铵盐为硝酸氨0.08%、硫酸氨0.05%、氯化氨1%;钙盐为硝酸钙2.5%、氯化钙2%;镁盐为硫酸镁0.05%、硝酸镁0.05%;纤维素酶 2000单位/Kg;尿素1%;磷酸二氢钾1%;水50%;余量为60目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
其次,在一期发酵培养基中接种酵母菌和芽孢杆菌,进行一期有氧发酵;接种的酵母菌和芽孢杆菌采用实施例1中发酵后的一期发酵培养基,接种量为20%(重量)。
然后,配制二期发酵培养基:经一期有氧发酵后的物料中添加豆粕和菜籽粕,混合均匀形成二期发酵培养基;二期发酵培养基的重量组分为:菜籽粕15% ;豆粕 25%;60%为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
最后,在二期发酵培养基中接种乳酸菌和双歧杆菌并均匀混合,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用实施例1中发酵后的二期发酵培养基,接种量为5%(重量)。混合后的物料在单向膜厌氧袋中进行二期厌氧发酵2个月后,成为成品。
实施例4
与实施例2的不同之处在于,一期发酵培养基的配方(重量):
纤维素酶1500单位/Kg;硝酸氨1%、硫酸氨1%、氯化氨1%;尿素3%;硝酸钙0.1%、氯化钙0.2%;磷酸二氢钾2%;硫酸镁0.01%、硝酸镁0.5%;余量为含水率45%的20目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
实施例5
与实施例2的不同之处在于,一期发酵培养基的配方(重量):
纤维素酶100单位/Kg;氯化氨0.1%;尿素0.1%;氯化钙0.1%;磷酸二氢钾0.1%;硝酸镁0.05%、氯化镁0.05%;余量为含水率55%的100目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
实施例6
与实施例2的不同之处在于,一期发酵培养基的配方(重量):
纤维素酶2000单位/Kg;硫酸氨2%、氯化氨1%;尿素3%;氯化钙5%;
磷酸二氢钾3%;氯化镁1%;余量为含水率55%的80目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
实施例7
与实施例2不同之处在于,二期发酵培养基的配方(重量):
菜籽粕30% ;
豆粕 20%;
50%为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
实施例8
与实施例2不同之处在于,二期发酵培养基的配方(重量):
菜籽粕5% ;
豆粕 5%;
90%为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
实施例9
与实施例2不同之处在于,二期发酵培养基的配方(重量):
菜籽粕15% ;
豆粕 25%;
60%为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
实施例10
与实施例1不同之处在于,所述酵母菌为热带假丝酵母(Candida tropicalis);双歧杆菌为:两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);芽孢杆菌为:地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。
实施例11
与实施例1不同之处在于,所述酵母菌为产朊假丝酵母(Candida utilis);双歧杆菌为:两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus);芽孢杆菌为:纳豆杆菌(Bacillus natto)。
实施例12
与实施例1不同之处在于,所述酵母菌为任意比例的产朊假丝酵母(Candida utilis)和啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae);双歧杆菌为:两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为任意比例的保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei);芽孢杆菌为任意比例的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、纳豆杆菌(Bacillus natto)。
实施例13
与实施例1不同之处在于,所述酵母菌为热带假丝酵母(Candida tropicalis)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的复合菌;双歧杆菌为:两岐双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的复合菌;芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。
实施例14
与实施例1不同之处在于,所述酵母菌为啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae);双歧杆菌为:两岐双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei);芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、纳豆杆菌(Bacillus natto)的复合菌。
上述实施例仅仅是一些离散的值,本发明的技术方案并不仅仅局限于上述实施例,本发明中,一期发酵培养基和二期发酵培养基可有更大范围的选择,一期发酵培养基的重量组成可以是:
纤维素酶 100~2000单位/Kg;铵盐可以硝酸氨、硫酸氨、氯化氨中的至少一种,用量0.1~3%;尿素 0.1~3%;钙盐可以是硝酸钙、氯化钙中的至少一种,用量0.1~5%;磷酸二氢钾0.1~3%;镁盐可以是硫酸镁、硝酸镁、氯化镁中的至少一种,用量0.01~1%;余量为含水率45~55%的20~100目的杏鲍菇菌棒粉碎物。
二期发酵培养基的配方可以是:
菜籽粕5~30% ;可选择5%、30%、15%、20%等。
豆粕 5~30%;可选择5%、30%、15%、20%等。
余量为上述任一实施例中的有氧发酵后一期发酵培养基。
所用的菌种可以在如下范围内选择,酵母菌为:热带假丝酵母(Candida tropicalis)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的至少一种;双歧杆菌为:两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);乳酸菌为:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 中的至少一种;芽孢杆菌为:地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、纳豆杆菌(Bacillus natto)中的至少一种。同一分类的菌种中,可以是单一菌种,也可以是混合菌种。
在本发明公开的技术方案的基础上,本领域的技术人员根据所公开的技术内容,不需要创造性的劳动就可以对其中的一些技术特征作出一些替换和变形,这些替换和变形均在本发明的保护范围内。
Claims (8)
1.一种基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征在于依次包括如下步骤:
1)配制一期发酵培养基:将杏鲍菇菌棒在潮湿状态下粉碎;再添加纤维素酶、铵盐、尿素、钙盐、钾盐和镁盐,并混合均匀;
所述一期发酵培养基中的铵盐为硝酸氨、硫酸氨、氯化氨中的至少一种;钙盐为硝酸钙、氯化钙中的至少一种;镁盐为硫酸镁、硝酸镁、氯化镁中的至少一种;各组分的重量含量分别为:
纤维素酶 100~2000单位/Kg;
铵盐 0.1~3%;
尿素 0.1~3%;
钙盐 0.1~5%;
磷酸二氢钾 0.1~3%;
镁盐 0.01~1%;
余量为含水率45~55%且粉碎成20~100目的杏鲍菇菌棒粉碎物;
2)在一期发酵培养基中接种酵母菌和芽孢杆菌,进行一期有氧发酵;
所述酵母菌为:热带假丝酵母(Candida tropicalis)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的至少一种;
芽孢杆菌为:地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的至少一种;
3)配制二期发酵培养基:经一期有氧发酵后的物料中添加豆粕和菜籽粕,混合均匀形成二期发酵培养基;
4)在二期发酵培养基中接种乳酸菌和双歧杆菌并均匀混合,在单向膜厌氧袋中进行二期厌氧发酵后,成为成品;
双歧杆菌为:两岐双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum);
乳酸菌为:植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是首次生产时,接种的酵母菌和芽孢杆菌采用菌液接种,菌液中活体菌含量为2.0×107cuf/ml以上,其中酵母菌菌液接种量为1~10%(重量),芽孢杆菌菌液接种量为1~10%(重量)。
3.根据权利要求2所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是进行连续生产时,接种的酵母菌和芽孢杆菌采用上次发酵后的一期发酵培养基,接种量为1~20%(重量)。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是一期有氧发酵时间为8~72h,温度为28~38℃。
5.根据权利要求1所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是二期发酵培养基的重量组分为:
菜籽粕 5~30% ;
豆粕 5~30%;
余量为一期有氧发酵后一期发酵培养基。
6.根据权利要求5所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是首次生产时,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用菌液接种,乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液中活体菌含量分别为5×107cuf/ml以上,先将乳酸菌菌液和双歧杆菌菌液按体积比为(1:1)~(1:4)制成混合菌液再接种到二期发酵培养基中,混合菌液的接种量为1~12%(重量)。
7.根据权利要求6所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是进行连续生产时,接种的乳酸菌和双歧杆菌采用上次发酵后的二期发酵培养基,接种量为1~12%(重量)。
8.根据权利要求5~7任一项所述的基于杏鲍菇菌渣的微生物饲料生产方法,其特征是二期厌氧发酵在常温下进行,发酵时间为0.5~3个月。
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