CN104541150A - 照明系统以及使用照明系统对photofrin进行体外效价测定的方法 - Google Patents

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Abstract

本文公开了一种照明系统和使用该照明系统对photofrin进行体外效价测定的方法。所述照明系统包含灯室、第一透镜、红外吸收滤光器、光学滤光器和第二透镜。所述灯室包含灯和光口。在操作中，来自所述灯的广谱光通过所述光口而离开所述灯室。随后，所述第一透镜使经由所述光口离开所述灯室的所述广谱光准直。随后，所述红外吸收滤光器将准直广谱光的第一部分传递至所述光学滤光器，并吸收所述广谱光中的红外光。随后，所述光学滤光器将所述准直广谱光的第二部分传递至所述第二透镜。随后，所述第二透镜将准直光的第二部分分散，从而为细胞培养板提供均匀辐照。本文还公开了使用所述照明系统对光敏剂进行研究的方法。

Description

照明系统以及使用照明系统对photofrin进行体外效价测定的方法
背景技术
除非在本文中另有说明，本部分中的材料并不是本申请权利要求的现有技术，且并不由于包含在本部分中而被承认为现有技术。
光动力疗法可用于治疗肿瘤性(neoplastic)疾病和非肿瘤性(non-neoplastic)疾病。该疗法涉及给予光敏剂(例如卟啉)以及随后以合适的剂量和波长对经光敏剂处理的细胞进行辐照(irradiation)。
是FDA批准的基于卟啉的抗肿瘤剂，该抗肿瘤剂在系统性给药后在肿瘤组织中积累，随后可在此处用630纳米的光对其进行位点特异性的辐照，引起活性氧物质的生成以及周围肿瘤块的死亡。在放行(released)用于临床使用之前，制备的多个批次(lots)的必须显示出具有期望水平的活性，即批次的效价(potency)必须被证实。生物药物活性的批次放行测定(包括效价测定)可为体内(in vivo)测定或体外(in vitro)测定，并应测量认为对临床效果起作用的药物的活性。
发明内容
一方面，本发明提供了一种照明系统，所述照明系统包含：灯室(lamphousing)，所述灯室包含灯和光口(light-port)，其中，来自所述灯的广谱光经由所述光口离开所述灯室；第一透镜，所述第一透镜使经由所述光口离开所述灯室的所述广谱光准直(collimate)；红外吸收滤光器，所述红外吸收滤光器传递(pass)准直广谱光的第一部分，并吸收通过所述光口并被所述第一透镜准直的所述广谱光中的红外光，其中，所述准直广谱光的第一部分包含所述准直广谱光的第二部分；光学滤光器(opticalfilter)，在所述准直广谱光的第一部分到达所述光学滤光器后，所述光学滤光器传递所述准直广谱光的第二部分；以及第二透镜，所述第二透镜使通过所述光学滤光器的准直光的第二部分分散。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述第一透镜包含会聚透镜。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述第一透镜包含菲涅耳透镜。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述灯包含氙弧灯。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述光学滤光器包含红外截止滤光器(infrared blocking filter)和短通滤光器(short pass filter)。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述红外截止滤光器吸收所述准直广谱光的第一部分中的残留红外光；以及其中，所述短通滤光器过滤掉所述准直广谱光的第一部分中波长大于650nm的光。
另一方面，本发明提供了照明系统，所述照明系统进一步包含反射器(reflector)，所述反射器将通过所述红外吸收滤光器的所述准直广谱光的第一部分反射。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，被所述反射器反射的所述准直广谱光的第一部分传播(propagates)至所述红外截止滤光器；以及其中，传播至所述红外截止滤光器的所述准直广谱光的第二部分，作为所述准直广谱光的第一部分中的一部分，通过所述红外截止滤光器并随后通过所述短通滤光器。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，被所述反射器反射的所述准直广谱光的第一部分传播至所述短通滤光器；以及其中，传播至所述短通滤光器的所述准直广谱光的第二部分，作为所述准直广谱光的第一部分中的一部分，通过所述短通滤光器并随后通过所述红外截止滤光器。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述反射器包含二向色镜(dichroic mirror)。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述二向色镜将通过所述光口和所述红外吸收滤光器的至少一部分红外光吸收。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述光学滤光器包含带通滤光器。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，将所述灯室密封，从而使得来自所述灯的所述广谱光仅经由所述光口离开所述灯室。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，将所述灯室密封，从而使得少于1％的来自所述灯的所述广谱光经由非光口处离开所述灯室。
另一方面，本发明提供了照明系统，所述照明系统进一步包含：环架(ring stand)；第一支撑环，所述第一支撑环可拆卸地附接至所述环架；以及基座。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述第二透镜包含第一散光透镜和第二散光透镜；以及其中，所述第一支撑环将所述第一散光透镜和所述第二散光透镜固定于合适位置。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述第一散光透镜包含第一平凸透镜；其中，所述第二散光透镜包含第二平凸透镜；其中，所述第一平凸透镜包含第一平侧和第一凸侧；其中，所述第二平凸透镜包含第二平侧和第二凸侧；以及其中，所述第一凸侧邻近于所述第二凸侧，在所述第一凸侧和所述第二凸侧之间有间隙(gap)。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述间隙在2毫米至4毫米的范围内，包含端值。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述间隙为3毫米。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述红外吸收滤光器包含红外吸收液体滤光器(infrared absorbing liquid filter)。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述红外吸收液体滤光器吸收通过所述光口的所述广谱光中的红外光的90％-100％，包含端值。
另一方面，本发明提供了照明系统，所述照明系统进一步包含：壁，其中，所述光口位于所述壁内；以及其中，所述第二透镜的位置在平行于所述壁的方向和垂直于所述壁的方向中的至少一个方向上是可调节的。
另一方面，本发明提供了照明系统，所述照明系统进一步包含：搁架(shelf)以及透镜滑动件(slider)，所述透镜滑动件包含用于传递光的第一孔；其中，所述搁架包含平行于所述壁的搁架升降器(riser)，其中，所述搁架包含垂直于所述壁的搁架顶部，其中，所述搁架顶部包含用于传递光的第二孔，其中，所述第二透镜可拆卸地附接至所述透镜滑动件，其中，所述透镜滑动件可拆卸地附接至所述搁架顶部，以及其中，所述第一孔的至少一部分在所述第二孔的至少一部分的上方或下方。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述搁架升降器包含第一平行调节槽；以及其中，所述搁架顶部包含第一垂直调节槽。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述壁包含基座壁和灯室壁。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述灯室包含顶部，其中，所述光口在所述顶部内，其中，所述第一透镜在所述光口内，以及其中，所述红外吸收滤光器、所述光学滤光器和所述第二透镜位于所述顶部上方的位置。
另一方面，本发明提供了照明系统，其中，所述灯室包含底部，其中，所述光口在所述底部内，其中，所述第一透镜在所述光口内，以及其中，所述红外吸收滤光器、所述光学滤光器和所述第二透镜位于所述底部下方的位置。
一方面，本发明提供了包括使用照明系统对细胞培养板内容物进行辐照的方法。
另一方面，本发明提供了使用照明系统对细胞培养板内容物进行辐照的方法，其中，所述细胞培养板包含光敏剂。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，所述方法包括：将所述光敏剂加至细胞培养板上的部分孔，从而形成光敏剂测定孔，所述孔包含癌细胞(carcinoma cells)；将所述光敏剂测定孔孵育第一预定时间段；任选地对所述光敏剂测定孔进行洗涤；利用照明系统以预定波长对所述光敏剂测定孔进行辐照，从而形成辐照孔，其中，均匀地(uniformly)对每个孔进行辐照；将所述辐照孔孵育第二预定时间段；以及确定所述孔中含有的所述癌细胞的存活性百分数。
又一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，对所述光敏剂测定孔进行洗涤的步骤为必需的(mandatory)。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，剩余部分的孔为对照孔。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，部分孔含有用于比较的参照药物。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，所述光敏剂为基于卟啉的抗肿瘤剂。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，所述基于卟啉的抗肿瘤剂为卟吩姆钠(porfimer sodium)。
又一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，使用400nm至650nm范围内的光对所述光敏剂测定孔进行辐照。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，所述癌细胞是A549人肺癌细胞。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，所述辐照步骤为标准化的(standardized)。
另一方面，本发明提供了对光敏剂进行研究的方法，其中，所述细胞培养板是不透明的黑色板。
通过阅读下面的详细说明并在适当情况下参照附图，这些以及其它方面、优势和替代物对本领域技术人员来说将是显而易见的。此外，应理解的是，这一概述和本申请文件全文所提供的其它说明仅为示例性地解释本发明，而不旨在对本发明进行限制。
附图说明
参照附图，本文描述了本发明的示例性实施方式，其中，用类似的附图标记表示类似的部件，其中：
图1为照明系统的框图；
图2为照明系统替代实施方式的框图；
图3为照明系统另一实施方式的框图；
图4为照明系统另一实施方式的框图；
图5为照明系统另一实施方式的立体图；
图6为图5说明的照明系统的透镜滑动件和相关元件的立体图；
图7为图5说明的照明系统的搁架和相关元件的立体图；
图8A为照明系统另一实施方式的侧立面视图；
图8B为图8A说明的照明系统的搁架和相关元件的主立面视图；
图8C为图8A说明的照明系统的透镜滑动件和相关元件的立体图；
图9为图8A说明的照明系统的主立面视图；
图10为使用根据本文公开的原理构建的照明系统来对细胞培养板内容物进行辐照的方法的流程图；
图11为效价测定的板布局表；
图12为A549细胞对的剂量响应的图示；
图13为辐照均质性(homogeneity)的图示；
图14A为对黑色板中的250μg/mL-0.977μg/mL的剂量响应的图示；
图14B为对清澈透明板中的250μg/mL-0.977μg/mL的剂量响应的图示。
具体实施方式
1.示例性构建
在本说明书中，冠词“a”或“an”用于引入示例性实施方式的要素。使用这些冠词的目的在于存在一个或多个所述要素。在所描述的至少为两个术语的列表中使用连词“或/或者(or)”的目的在于表明任意所列术语或任意所列术语的组合。序数词(例如“第一”、“第二”、“第三”等)的使用是为了区分各要素，而非为了表示这些要素的特定顺序。
图1说明了照明系统(总体表示为100)及其元件的一个实施方式。照明系统100包含灯室102、第一透镜108、红外吸收滤光器110、反射器112、光学滤光器114、第二透镜116和细胞培养板120。灯室102包含灯104和光口106。
在照明系统100中，第一透镜108在光口106内。红外吸收滤光器110与光口106相连。反射器112与红外吸收滤光器110相连。光学滤光器114与反射器112相连。第二透镜116位于距光学滤光器114一段间距118的位置。细胞培养板120位于距光学滤光器114一段间距122的位置。
在操作中，用来自灯104的光对细胞培养板120以及细胞培养板120的内容物进行辐照。灯104可以是一个或多个1000瓦的氙弧灯。首先，来自灯104的广谱光通过光口106而离开灯室102。可将灯室102密封，从而使得来自灯104的所述广谱光仅经由光口106离开灯室102。或者，可将灯室102密封，从而使得少于1％的来自灯104的所述广谱光经由非光口106处离开灯室102。
在所述广谱光通过光口106而离开灯室102后，由第一透镜108将所述广谱光准直。可将第一透镜108设置为多种配置。在第一配置中，第一透镜108可为50毫米(mm)焦距的会聚透镜。在该第一配置或另一配置中，第一透镜108可为菲涅耳透镜。此外，在该第一配置或另一配置中，第一透镜108可具有2英寸或3英寸(in)的直径。第一透镜108的直径还可以是其它实例。在配置的第二实例中，第一透镜108可包含两个以上透镜。根据第一透镜108的这些示例性实施方式中的一个或多个，第一透镜108可包含透镜固定器(holder)，所述透镜固定器配置用于支撑透镜(例如玻璃透镜)以及用于将第一透镜108连接至照明系统100的另一元件(例如红外吸收滤光器110、光口106、反射器112或定距件(spacer))。
在由第一透镜108将所述广谱光准直后，所述广谱光到达红外吸收滤光器110。红外吸收滤光器110吸收所述广谱光中的红外光。红外吸收滤光器110还将准直广谱光的第一部分传递至反射器112。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收滤光器110传递至反射器112后，反射器112将所述准直广谱光的第一部分反射。随后，所述准直广谱光的第一部分传播至光学滤光器114。或者，反射器112可仅将所述准直广谱光的第一部分中的一部分反射，随后，所述准直广谱光的第一部分中的一部分传播至光学滤光器114。反射器112可为一个或多个二向色镜。被反射器112反射至光学滤光器114的所述准直广谱光的第一部分可具有给定范围内的波长。例如，所述准直广谱光可具有400纳米(nm)至700nm的给定范围。也可以是其它给定范围。在一些实施方式中，反射器112吸收所述准直广谱光中的至少一部分红外光或至少一部分紫外光。根据这一设置，通过仅将可见光传递至光学滤光器114，反射器112的功能类似于光学滤光器。
在所述准直广谱光的第一部分传播至光学滤光器114后，光学滤光器114将所述准直广谱光的第二部分传递至第二透镜116。光学滤光器114可以是一个或多个带通滤光器。作为一个实例，传递至第二透镜116的光可为400nm至630nm范围(即无红外或紫外光)内的准直光。取决于何种光被反射器112反射并被光学滤光器114传递，可将不同范围的光传递至第二透镜116。作为另一实例，波长范围可为任何范围，例如在约595nm至约645nm、约620nm至约640nm、约615nm至约645nm、或约610nm至约650nm的范围。可使用窄带通滤光器来缩小范围。波长范围可以给定波长(例如630nm)为中心。可通过改变照明系统100的元件(例如反射器112和光学滤光器114)来选择不同的中心波长。
在所述准直广谱光的第二部分被光学滤光器114传递至第二透镜116后，第二透镜116将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板120。可将第二透镜116设置为多种配置。在第一配置中，第二透镜116可具有3in的直径。第二透镜116的直径还可以是其它实例。在配置的第二实例中，第二透镜116可包含两个以上透镜。根据第二透镜116的这些示例性实施方式中的一个或多个，第二透镜116可包含透镜固定器，所述透镜固定器配置用于支撑透镜(例如玻璃透镜)。
可将细胞培养板120设置为多种配置。一般说来，细胞培养板120可具有底部区域、顶部区域和竖直壁，该竖直壁从底部区域延伸至顶部区域。底部区域、顶部区域和竖直壁各自可为透明的(transparent)或不透明的(opaque)。出于这一说明的目的，透明可以是清澈透明(cleartransparent)，但不严格限于此。出于这一说明的目的，不透明可以是黑色不透明，但不严格限于此。底部区域和竖直壁可由相同材料(例如聚苯乙烯或一些其它材料)制成。底部区域和竖直壁可具有外表面和内表面。细胞培养板内放置的内容物可与底部区域和竖直壁的内表面相接触。
顶部区域可为开放的或被打开，使得内容物能够被置于细胞培养板120中，并使得其后能够移除这些内容物。顶部区域可包含可拆卸的盖子，例如透明盖子。细胞培养板120可包含多个孔，例如2、4、6、12、24、48或96个孔。所述多个孔可以是透明或不透明的。所述多个孔可由聚苯乙烯或一些其它材料制成。细胞培养板120可以是培养皿(petri dish)。
可对底部区域、顶部区域和竖直壁进行设置，从而为细胞培养板120提供设定的形状。一方面，细胞培养板120可为长方形。在该方面，所述竖直壁可包含限定了该长方形的外部边界的四个竖直壁。根据示例性的实施方式，其中两个竖直壁可具有12.8厘米(cm)的长和1.42cm的高，另两个竖直壁可具有8.55cm的长和1.42cm的高。另一方面，细胞培养板120可为圆形。细胞培养板120的设定形状也可采用其它实例，或竖直壁的规格(dimensions)也可采用其它实例。
可对光学滤光器114和第二透镜116之间的间距118以及光学滤光器114和细胞培养板120之间的间距122进行选择，从而对细胞培养板120进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二透镜116分散的光提供至细胞培养板120的整个区域或细胞培养板120的整个底部区域。
为对细胞培养板120进行均匀辐照，光学滤光器114和第二透镜116之间的间距118可以是13.6cm。为对细胞培养板120进行均匀辐照，光学滤光器114和第二透镜116之间的间距也可以是其它间距。间距118可以是光学滤光器114与第二透镜116彼此最接近的部分之间的间距。就图1中照明系统100的取向而言，所述部分可包括光学滤光器114的下侧和第二透镜116的上侧。或者，光学滤光器114和第二透镜116之间的间距118可以是光学滤光器114的竖直中心点与第二透镜116的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器114和第二透镜116之间的间距118指定为其它实例。
为对细胞培养板120进行均匀辐照，可以多种方式指定光学滤光器114和细胞培养板120之间的间距122。一方面，可将间距122指定为从光学滤光器114的最高点至细胞培养板120底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，间距122可以是95.5cm。另一方面，可将间距122指定为从光学滤光器114的最高点至细胞培养板120的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板120的顶部区域和细胞培养板120底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将光学滤光器114和细胞培养板120之间的间距122指定为光学滤光器114的最近点与细胞培养板120的最近点之间的间距。又一方面，可将光学滤光器114和细胞培养板120之间的间距122指定为光学滤光器114的竖直中心点和细胞培养板120的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器114和细胞培养板120之间的间距122指定为其它实例。
在照明系统100或本文所述的其它照明系统中，为了进行调节、清洁、修理、更换等，彼此相连的元件可以是可拆卸地相连，从而所述元件可彼此分离，并从所述照明系统中移除。彼此相连的元件部分可包含一个或多个密封件(seals)，从而防止(或至少减少)任何光从这些连接部分离开照明系统。本领域技术人员将理解的是，可通过使用一个或多个定距件来实现照明系统元件间所期望的间距，从而便于两个以上元件的连接。可将一个或多个定距件置于照明系统的元件之间，从而不对细胞培养板的均匀辐照产生影响。为了图的清楚性，定距件一般不示出。
在替代的实施方式中，光口106与红外吸收滤光器110相连。根据这一设置，红外吸收滤光器110与第一透镜108相连，且第一透镜108与反射器112相连。
在另一实施方式中，第一透镜108在光口106外。根据这一设置，光口106可与第一透镜108相连，第一透镜108可与红外吸收滤光器110相连，且红外吸收滤光器110可与反射器112相连。或者，光口106可与红外吸收滤光器110相连，红外吸收滤光器110可与第一透镜108相连，且第一透镜108可与反射器112相连。
在另一实施方式中，将灯室102、第一透镜108、红外吸收滤光器110、反射器112、光学滤光器114和第二透镜116各自置于桌(未示出)上方的平台(ledge)(未示出)上。根据这一设置，随后将细胞培养板120置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板120以及细胞培养板120的内容物维持在规定的温度。
在又一实施方式中，将反射器112倒置(inverted)。根据这一设置，反射器112将所述准直广谱光的第一部分向上反射。这样，光学滤光器114、第二透镜116和细胞培养板120各自位于反射器112的上方。根据这一实施方式，对细胞培养板120的均匀辐照包括将由第二透镜116分散的光提供至细胞培养板120的整个底部区域。
图2说明了照明系统(总体表示为200)及其元件的替代实施方式。照明系统200包含灯室202、第一透镜208、红外吸收滤光器210、反射器212、光学滤光器214、第二透镜216、细胞培养板220、环架224、第一支撑环226和基座228。灯室202包含灯204、反射镜(mirror)205和光口206。
在照明系统200中，第一透镜208在光口206内。红外吸收滤光器210与光口206相连。反射器212与红外吸收滤光器210相连。光学滤光器214与反射器212相连。由第一支撑环226对第二透镜216进行支撑。由第一支撑环226对第二透镜216的支撑可包括第二透镜216位于第一支撑环226上。第一支撑环226可拆卸地附接至环架224。第二透镜216位于距光学滤光器214一段间距218的位置。可使第一支撑环226沿环架224向上滑动，以调节光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218。可使第一支撑环226沿环架224向下滑动，以调节光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218。基座228与环架224相连。细胞培养板220位于距光学滤光器214一段间距222的位置。
可将照明系统200的元件设置为类似于图1说明的照明系统100的元件。例如，可将灯室202设置为类似于灯室102，可将灯204设置为类似于灯104，可将光口206设置为类似于光口106，可将第一透镜208设置为类似于第一透镜108，可将红外吸收滤光器210设置为类似于红外吸收滤光器110，可将反射器212设置为类似于反射器112，可将光学滤光器214设置为类似于光学滤光器114，可将第二透镜216设置为类似于第二透镜116，并可将细胞培养板220设置为类似于细胞培养板120。
在操作中，用来自灯204的光对细胞培养板220以及细胞培养板220的内容物进行辐照。首先，来自灯204的广谱光通过光口206而离开灯室202。所述广谱光可被反射镜205反射至光口206。也可使用除反射镜以外的其它物体来将所述广谱光反射至光口206。仅为简要描述照明系统200和本文所述其它照明系统的目的，可把将广谱光反射至光口206的元件称为反射镜。反射镜205可以是一个或多个凹面镜。根据这一设置，反射镜205可增加通过光口206的广谱光的强度(power)。此外，反射镜205可具有两个以上调节器(未示出)，使得反射镜205可在垂直平面上移动。所述两个以上调节器可用于优化对细胞培养板220进行辐照的广谱光。例如，所述两个以上调节器可用于使通过第一透镜208的广谱光集中(center)。作为另一实例，所述两个以上调节器可用于避免广谱光的最强部分通过与灯204相连的一个或多个电极的电弧(arc)。
在所述广谱光通过光口206而离开灯室202后，由第一透镜208将所述广谱光准直。
在由第一透镜208将所述广谱光准直后，准直广谱光到达红外吸收滤光器210。红外吸收滤光器210吸收所述准直广谱光中的红外光。红外吸收滤光器210还将所述准直广谱光的第一部分传递至反射器212。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收滤光器210传递至反射器212后，反射器212将所述准直广谱光的第一部分反射。随后，所述准直广谱光的第一部分传播至光学滤光器214。或者，反射器212可仅将所述准直广谱光的第一部分中的一部分反射，随后，所述准直广谱光的第一部分中的一部分传播至光学滤光器214。反射器212反射的光具有与反射器110反射的光相同的给定波长范围。
在所述准直广谱光的第一部分传播至光学滤光器214后，光学滤光器214将所述准直广谱光的第二部分传递至第二透镜216。光学滤光器214传递的光具有与光学滤光器114传递的光相同的给定波长范围。
在所述准直广谱光的第二部分被光学滤光器214传递至第二透镜216后，第二透镜216将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板220。
可对光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218以及光学滤光器214和细胞培养板220之间的间距222进行选择，从而对细胞培养板220进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二透镜216分散的光提供至细胞培养板220的整个区域或细胞培养板220的整个底部区域。
为对细胞培养板220进行均匀辐照，光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218可以是13.6cm。为对细胞培养板220进行均匀辐照，光学滤光器214和第二透镜216之间的间距也可以是其它间距。间距218可以是光学滤光器214与第二透镜216彼此最接近的部分之间的间距。就图2中照明系统200的取向而言，所述部分可包括光学滤光器214的下侧和第二透镜216的上侧。或者，光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218可以是光学滤光器214的竖直中心点与第二透镜216的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器214和第二透镜216之间的间距218指定为其它实例。
为对细胞培养板220进行均匀辐照，可以多种方式指定光学滤光器214和细胞培养板220之间的间距222。一方面，可将间距222指定为从光学滤光器214的最高点至细胞培养板220底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，间距222可以是95.5cm。另一方面，可将间距222指定为从光学滤光器214的最高点至细胞培养板220的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板220的顶部区域和细胞培养板220底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将光学滤光器214和细胞培养板220之间的间距222指定为光学滤光器214的最近点与细胞培养板220的最近点之间的间距。又一方面，可将光学滤光器214和细胞培养板220之间的间距222指定为光学滤光器214的竖直中心点和细胞培养板220的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器214和细胞培养板220之间的间距222指定为其它实例。
在替代的实施方式中，光口206与红外吸收滤光器210相连。根据这一设置，红外吸收滤光器210与第一透镜208相连，且第一透镜208与反射器212相连。
在另一实施方式中，第一透镜208在光口206外。根据这一设置，光口206可与第一透镜208相连，第一透镜208可与红外吸收滤光器210相连，且红外吸收滤光器210可与反射器212相连。或者，光口206可与红外吸收滤光器210相连，红外吸收滤光器210可与第一透镜208相连，且第一透镜208可与反射器212相连。
在又一实施方式中，将灯室202、第一透镜208、红外吸收滤光器210、反射器212、光学滤光器214和第二透镜216各自置于桌(未示出)上方的平台(未示出)上。根据这一设置，随后可将细胞培养板220置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板220以及细胞培养板220的内容物维持在规定的温度。
虽然图2说明了位于基座228一侧的细胞培养板220，在替代的设置中，基座228可绕环架224的竖直轴旋转，从而使得基座228位于如图2所示的细胞培养板220的位置，并可将细胞培养板220置于基座228之上。在又一替代设置中，可将环架224置于基座228的中心，并将细胞培养板220置于第一支撑环226下方、基座228一部分的上方的位置。
图3说明了照明系统(总体表示为300)及其元件的另一实施方式。照明系统300包含灯室302、第一透镜312、红外吸收滤光器314、光学滤光器316、第二透镜318、细胞培养板322、环架326、基座328和第一支撑环330。灯室302包含灯304、光口306、顶部308和底部310。
在照明系统300中，灯304在灯室302内。光口306在底部310内。红外吸收滤光器314、光学滤光器316和第二透镜318位于底部310下方的位置。第一透镜312在光口306内。红外吸收滤光器314与光口306相连。光学滤光器316与红外吸收滤光器314相连。由第一支撑环330对第二透镜318进行支撑。由第一支撑环330对第二透镜318的支撑可包括第二透镜318位于第一支撑环330上。第一支撑环330可拆卸地附接至环架326。所述第二透镜位于距光学滤光器316一段间距320的位置。可使第一支撑环330沿环架326向上滑动，以调节光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320。可使第一支撑环330沿环架326向下滑动，以调节光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320。基座328与环架326相连。细胞培养板322位于距光学滤光器316一段间距324的位置。
可将照明系统300的元件设置为类似于图1说明的照明系统100的元件。例如，可将灯室302设置为类似于灯室102，可将灯304设置为类似于灯104，可将光口306设置为类似于光口106，可将第一透镜312设置为类似于第一透镜108，可将红外吸收滤光器314设置为类似于红外吸收滤光器110，可将光学滤光器316设置为类似于光学滤光器114，可将第二透镜318设置为类似于第二透镜116，并可将细胞培养板322设置为类似于细胞培养板120。
在操作中，用来自灯304的光对细胞培养板322以及细胞培养板322的内容物进行辐照。首先，来自灯304的广谱光通过光口306而离开灯室302。
在所述广谱光通过光口306而离开灯室302后，由第一透镜312将所述广谱光准直。
在由第一透镜312将所述广谱光准直后，准直广谱光到达红外吸收滤光器314。红外吸收滤光器314吸收所述准直广谱光中的红外光。红外吸收滤光器314还将所述准直广谱光的第一部分传递至光学滤光器316。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收滤光器314传递至光学滤光器316后，光学滤光器316将所述准直广谱光的第二部分传递至第二透镜318。作为实例，传递至第二透镜318的光可为400nm至630nm范围(即无红外或紫外光)内的准直光。可使用窄带通滤光器来缩小范围。
在所述准直广谱光的第二部分被光学滤光器316传递至第二透镜318后，第二透镜318将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板322。
可对光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320以及光学滤光器316和细胞培养板322之间的间距324进行选择，从而对细胞培养板322进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二透镜318分散的光提供至细胞培养板322的整个区域或细胞培养板322的整个底部区域。
为对细胞培养板322进行均匀辐照，光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320可以是13.6cm。为对细胞培养板322进行均匀辐照，光学滤光器316和第二透镜318之间的间距也可以是其它间距。间距320可以是光学滤光器316与第二透镜318彼此最接近的部分之间的间距。就图3中照明系统300的取向而言，所述部分可包括光学滤光器316的下侧和第二透镜318的上侧。或者，光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320可以是光学滤光器316的竖直中心点与第二透镜318的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器316和第二透镜318之间的间距320指定为其它实例。
为对细胞培养板322进行均匀辐照，可以多种方式指定光学滤光器316和细胞培养板322之间的间距324。一方面，可将间距324指定为从光学滤光器316的最高点至细胞培养板322底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，间距324可以是95.5cm。另一方面，可将间距324指定为从光学滤光器316的最高点至细胞培养板322的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板322的顶部区域和细胞培养板322底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将光学滤光器316和细胞培养板322之间的间距324指定为光学滤光器316的最近点与细胞培养板322的最近点之间的间距。又一方面，可将光学滤光器316和细胞培养板322之间的间距324指定为光学滤光器316的竖直中心点和细胞培养板322的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器316和细胞培养板322之间的间距324指定为其它实例。
在替代的实施方式中，第一透镜312在光口306外。根据这一设置，光口306可与第一透镜312相连，且第一透镜312可与红外吸收滤光器314相连。或者，光口306可与红外吸收滤光器314相连，且红外吸收滤光器314可与第一透镜312相连。
在另一实施方式中，光口306可与红外吸收滤光器314相连。根据这一设置，红外吸收滤光器314与第一透镜312相连，且第一透镜312与光学滤光器316相连。
在又一实施方式中，将灯室302、第一透镜312、红外吸收滤光器314、光学滤光器316和第二透镜318各自置于桌(未示出)上方的平台(未示出)上。根据这一设置，随后将细胞培养板322置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板322以及细胞培养板322的内容物维持在规定的温度。
虽然图3说明了位于基座328一侧的细胞培养板322，在替代的设置中，基座328可绕环架326的竖直轴旋转，从而使得基座328位于如图3所示的细胞培养板322的位置，并可将细胞培养板322置于基座328之上。在又一替代设置中，可将环架326置于基座328的中心，并将细胞培养板322置于第一支撑环330下方、基座328一部分的上方的位置。
图4说明了照明系统(总体表示为400)及其元件的另一实施方式。照明系统400包含灯室402、第一透镜412、红外吸收滤光器414、光学滤光器416、第二透镜418、细胞培养板422、环架426、基座428、第一支撑环430和第二支撑环432。灯室402包含灯404、光口406、顶部408和底部410。
在照明系统400中，灯404在灯室402内。光口406在顶部408内。红外吸收滤光器414、光学滤光器416和第二透镜418位于顶部408上方的位置。第一透镜412在光口406内。红外吸收滤光器414与光口406相连。光学滤光器416与红外吸收滤光器414相连。由第一支撑环430对第二透镜418进行支撑。由第一支撑环430对第二透镜418的支撑可包括第二透镜418位于第一支撑环430上。第一支撑环430可拆卸地附接至环架426。所述第二透镜位于距光学滤光器416一段间距420的位置。由第二支撑环432对细胞培养板422进行支撑。由第二支撑环432对细胞培养板422的支撑可包括细胞培养板422位于第二支撑环432上。第二支撑环432可拆卸地附接至环架426。细胞培养板422位于距光学滤光器416一段间距424的位置。基座428与环架426相连。可使第一支撑环430沿环架426向上滑动，以调节光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420。可使第一支撑环430沿环架426向下滑动，以调节光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420。可使第二支撑环432沿环架426向上滑动，以调节光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424。可使第二支撑环432沿环架426向下滑动，以调节光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424。
可将照明系统400的元件设置为类似于图1说明的照明系统100的元件。例如，可将灯室402设置为类似于灯室102，可将灯404设置为类似于灯104，可将光口406设置为类似于光口106，可将第一透镜412设置为类似于第一透镜108，可将红外吸收滤光器414设置为类似于红外吸收滤光器110，可将光学滤光器416设置为类似于光学滤光器114，可将第二透镜418设置为类似于第二透镜116，并可将细胞培养板422设置为类似于细胞培养板120，区别在于细胞培养板422包含多个各自具有清澈透明(clear)、而不是黑色不透明的底部的孔。
在操作中，用来自灯404的光对细胞培养板422以及细胞培养板422的内容物进行辐照。首先，来自灯404的广谱光通过光口406而离开灯室402。
在所述广谱光通过光口406而离开灯室402后，由第一透镜412将所述广谱光准直。
在由第一透镜412将所述广谱光准直后，准直广谱光到达红外吸收滤光器414。红外吸收滤光器414吸收所述准直广谱光中的红外光。红外吸收滤光器414还将所述准直广谱光的第一部分传递至光学滤光器416。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收滤光器414传递至光学滤光器416后，光学滤光器416将所述准直广谱光的第二部分传递至第二透镜418。作为实例，传递至第二透镜418的光可为400nm至630nm范围(即无红外或紫外光)内的准直光。可使用窄带通滤光器来缩小范围。
在所述广谱光的第二部分被光学滤光器416传递至第二透镜418后，第二透镜418将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板422。
可对光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420以及光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424进行选择，从而对细胞培养板422进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二透镜418分散的光提供至细胞培养板422的整个区域或细胞培养板422的整个底部区域。
为对细胞培养板422进行均匀辐照，光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420可以是13.6cm。为对细胞培养板422进行均匀辐照，光学滤光器416和第二透镜418之间的间距也可以是其它间距。间距420可以是光学滤光器416与第二透镜418彼此最接近的部分之间的间距。就图4中照明系统400的取向而言，所述部分可包括光学滤光器416的上侧和第二透镜418的下侧。或者，光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420可以是光学滤光器416的竖直中心点与第二透镜418的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器416和第二透镜418之间的间距420指定为其它实例。
为对细胞培养板422进行均匀辐照，可以多种方式指定光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424。一方面，可将间距424指定为从光学滤光器416的最高点至细胞培养板422底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，间距424可以是95.5cm。另一方面，可将间距424指定为从光学滤光器416的最高点至细胞培养板422的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板422的顶部区域和细胞培养板422底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424指定为光学滤光器416的最近点与细胞培养板422的最近点之间的间距。又一方面，可将光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424指定为光学滤光器416的竖直中心点和细胞培养板422的竖直中心点之间的间距。也可将光学滤光器416和细胞培养板422之间的间距424指定为其它实例。
在替代的实施方式中，第一透镜412在光口406外。根据这一设置，光口406可与第一透镜412相连，且第一透镜412可与红外吸收滤光器414相连。或者，光口406可与红外吸收滤光器414相连，且红外吸收滤光器414可与第一透镜412相连。
在另一实施方式中，光口406可与红外吸收滤光器414相连。根据这一设置，红外吸收滤光器414与第一透镜412相连，且第一透镜412与光学滤光器416相连。
在又一实施方式中，将灯室402、第一透镜412、红外吸收滤光器414、光学滤光器416和第二透镜418各自置于桌(未示出)上方的平台(未示出)上。根据这一设置，随后可将细胞培养板422置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板422以及细胞培养板422的内容物维持在规定的温度。
为简化图1-图4的框图的目的，分别用于将光学滤光器114、214、316和416连接至反射器112和212以及连接至红外吸收滤光器314和414的手段未示出。作为实例，这些手段可与图5中示出的将红外截止滤光器526连接至反射器524的手段相似。
图5-图7说明了照明系统500及其元件的另一实施方式。照明系统500包含灯室502、第一透镜(未示出)、红外吸收液体滤光器516、入口冷却管518、出口冷却管520、支撑构件521、泵522、冷却系统523、反射器524、红外截止滤光器526、短通滤光器528、第一散光透镜530、第一散光透镜固定器566、第二散光透镜532、第二散光透镜固定器568、调节杆533、第一调节定距件534、第二调节定距件535、搁架540、透镜滑动件542和细胞培养板(未示出)。灯室502包含灯(未示出)、反射镜(未示出)、光口(未示出)、顶部508、底部510和壁512。搁架540包含搁架顶部546、搁架升降器548、第一平行调节槽550、第一平行调节紧固件551、第二平行调节槽552、第二平行调节紧固件553、用于传递光的第二孔560、第一透镜滑动件附着件(attachment)561、第二透镜滑动件附着件562、第三透镜滑动件附着件563、第四透镜滑动件附着件564和座圈(race)565。透镜滑动件542包含用于传递光的第一孔544、第一垂直调节槽554、第一垂直调节紧固件555、第二垂直调节紧固件556、第二垂直调节槽557、第三垂直调节紧固件558和第四垂直调节紧固件559。
在照明系统500中，类似于图1-图4说明的照明系统中的灯，灯在灯室内。类似于图1-图4说明的照明系统中的光口，光口在灯室502内。可将反射镜设置为类似于图2说明的照明系统200的反射镜205。类似于图1-图4说明的照明系统中的第一透镜，第一透镜在光口内。第一透镜、红外吸收液体滤光器516、反射器524、红外截止滤光器526以及短通滤光器528各自位于顶部508和底部510之间的位置。底部510可为金属。可将细胞培养板设置为类似于图1说明的照明系统100中的细胞培养板120。
此外，在照明系统500中，类似于图1-图4说明的照明系统中红外吸收滤光器与光口相连，红外吸收液体滤光器516与光口相连。红外吸收液体滤光器516与入口冷却管518相连。由支撑构件521对入口冷却管518进行支撑。入口冷却管518与泵522相连。泵522与冷却系统523相连。所述连接可以是串联的(in-line)。红外吸收液体滤光器516与出口冷却管520相连。由支撑构件521对出口冷却管520进行支撑。出口冷却管520与泵522相连。
此外，在照明系统500中，反射器524与红外吸收液体滤光器516相连。红外截止滤光器526与反射器524相连。短通滤光器528与红外截止滤光器526相连。第一散光透镜530位于距短通滤光器528一段间距的位置，类似于图1-图4说明的照明系统中第二透镜位于距光学滤光器一段间距的位置。由第一散光透镜固定器566对第一散光透镜530进行支撑。第一散光透镜530邻近于第二散光透镜532，在第一散光透镜530和第二散光透镜532之间有间隙。可通过调节杆533、第一调节定距件534和第二调节定距件535对第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙进行调节。图5中示出了各自具有第一调节定距件534和第二调节定距件535的两个调节杆533，其足以能够对第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙进行调节。在一些实施方式中，各自具有第一调节定距件534和第二调节定距件535的三个以上调节杆533可等间距地围绕第一散光透镜530和第二散光透镜532分布。由第二散光透镜固定器568对第二散光透镜532进行支撑。第二散光透镜固定器568可拆卸地附接至透镜滑动件542。更具体地，第二散光透镜固定器568具有凸缘(flange)(未示出)，其靠(rest)在透镜滑动件542上。可使第二散光透镜固定器568的一部分位于用于传递光的第一孔544内，或位于用于传递光的第一孔544和第二孔560内。或者，第二散光透镜固定器568的一部分可延伸超出(beyond)用于传递光的第一孔544和用于传递光的第二孔560。透镜滑动件542可拆卸地附接至搁架顶部546。搁架顶部546位于相对于壁512垂直的方向536。搁架升降器548位于相对于壁512平行的方向538。
此外，在照明系统500中，可通过第一垂直调节槽554、第一垂直调节紧固件555、第二垂直调节紧固件556、第二垂直调节槽557、第三垂直调节紧固件558和第四垂直调节紧固件559对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512垂直的方向536上的位置进行调节。可通过第一平行调节槽550、第一平行调节紧固件551、第二平行调节槽552和第二平行调节紧固件553对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512平行的方向538上的位置进行调节。
在操作中，用来自灯的光对细胞培养板以及细胞培养板的内容物进行辐照。灯室502可以是Newport Corporation出售的InstrumentsModel No.66921。首先，来自灯的广谱光通过光口而离开灯室。所述灯可以是1000瓦的氙短弧灯。所述1000瓦的氙短弧灯可以是NewportCorporation出售的Instruments Model No.6271。可由反射镜将所述广谱光反射至光口。根据这一设置，所述反射镜可增加通过光口的广谱光的强度。此外，所述反射镜可具有两个以上调节器(未示出)，使得反射镜可在垂直平面上移动。所述两个以上调节器可用于优化对细胞培养板进行辐照的广谱光。例如，所述两个以上调节器可用于使通过第一透镜的广谱光集中。作为另一实例，所述两个以上调节器可用于避免广谱光的最强部分通过与灯相连的一个或多个电极的电弧。可将灯室502密封，从而使得来自灯的广谱光仅经由光口离开灯室502。或者，可将灯室502密封，从而使得少于1％的来自灯的广谱光经由非光口处离开灯室502。
在所述广谱光通过光口而离开灯室502后，由第一透镜将所述广谱光准直。可将所述第一透镜设置为多种配置。在第一配置中，所述第一透镜可为50mm焦距的会聚透镜。在该第一配置或另一配置中，所述第一透镜可为菲涅耳透镜。此外，在该第一配置或另一配置中，所述第一透镜可具有2in或3in的直径。所述第一透镜的直径还可以是其它实例。在配置的第二实例中，所述第一透镜可包含两个以上透镜。根据所述第一透镜的这些示例性实施方式中的一个或多个，所述第一透镜可包含透镜固定器，所述透镜固定器配置用于支撑透镜(例如玻璃透镜)以及用于将所述第一透镜连接至照明系统500的另一元件(例如红外吸收液体滤光器516、光口、反射器524或定距件)。
在由所述第一透镜将所述广谱光准直后，准直广谱光到达红外吸收液体滤光器516。红外吸收液体滤光器516可以是Newport Corporation出售的Instruments Model No.6123。红外吸收液体滤光器516吸收所述准直广谱光中的红外光。红外吸收液体滤光器516可吸收所述准直广谱光中的红外光的90％-100％(包含端值)。还可使用红外吸收液体滤光器516的其它红外吸收范围。可通过使用泵522将冷却流体以一定流速经由入口冷却管518和出口冷却管520泵至红外吸收液体滤光器516的夹套(jacket)(未示出)，从而对红外吸收液体滤光器516的温度进行控制。所述冷却流体可以是冰冷却的水。可通过冷却系统523对所述冷却流体进行冷却。流速可以是6毫升每分钟(mL/min)。泵522可以是蠕动泵。红外吸收液体滤光器516还将所述准直广谱光的第一部分传递至反射器524。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收液体滤光器516传递至反射器524后，反射器524将所述准直广谱光的第一部分反射。随后，所述准直广谱光的第一部分传播至红外截止滤光器526。或者，反射器524可仅将所述准直广谱光的第一部分中的一部分反射，随后，所述准直广谱光的第一部分中的一部分传播至红外截止滤光器526。可将反射器524设置为多种配置。在第一配置中，反射器524可以是光束转向(beamturning)二向色镜。反射器524可以是Newport Corporation出售的Instruments Model No.66229。在该第一配置或另一配置中，反射器524可具有2.0的直径。反射器524也可以是其它直径。在第二配置中，反射器524可以是两个以上光束转向二向色镜。被反射器524反射至红外截止滤光器526的所述准直广谱光的第一部分可具有给定范围内的波长。例如，所述准直广谱光可具有400nm至700nm的给定范围。也可以是其它给定范围。在一些实施方式中，反射器524吸收所述准直广谱光中的至少一部分红外光或至少一部分紫外光。根据这一设置，通过仅将可见光传递至红外截止滤光器526，反射器524的功能类似于光学滤光器。
在所述准直广谱光的第一部分传播至红外截止滤光器526后，红外截止滤光器526吸收所述准直广谱光的第一部分中的残留红外光。红外截止滤光器526还将滤过的准直广谱光的第一部分传递至短通滤光器528。红外截止滤光器526可为50％红外截止滤光器。红外截止滤光器526可以是Newport Corporation出售的Instruments Model No.59043。
在所述滤过的准直广谱光的第一部分被红外截止滤光器526传递至短通滤光器528后，短通滤光器528将所述准直广谱光的第二部分传递至第一散光透镜530。短通滤光器528可具有650nm的截止值(cut-off)。如果反射器524传递大于650nm的波长，短通滤光器528将阻挡这样的波长。如果反射器524不传递大于650nm的任何波长，则所述短通滤光器可不阻挡任何波长。可将短通滤光器528的截止值指定为小于、等于、或大于短通滤光器528所传递的最大波长。此外，可将短通滤光器528的截止值指定为小于反射器524所传递的最大波长。短通滤光器528可以是Andover Corporation Part No.650-FL07-50。取决于何种光被反射器524反射并被短通滤光器528传递，可将不同范围的光传递至第一散光透镜530。例如，所述准直广谱光的第二部分可具有400nm至630nm的给定范围。作为另一实例，波长范围可为任何范围，例如在约595nm至约645nm、约620nm至约640nm、约615nm至约645nm、或约610nm至约650nm的范围。可使用窄带通滤光器来缩小范围。波长范围可以给定波长(例如630nm)为中心。可通过改变照明系统500的元件(例如反射器524和短通滤光器528)来选择不同的中心波长。可将第一散光透镜530设置为多种配置。在第一配置中，第一散光透镜530可具有3in的直径。第一散光透镜530也可以是其它直径。在该第一配置或另一配置中，第一散光透镜530可具有200mm的有效焦距。第一散光透镜530也可以具有其它有效焦距。
在所述准直广谱光的第二部分被短通滤光器528传递至第一散光透镜530后，第一散光透镜530将所述广谱光的第二部分传递至第二散光透镜532。可将第二散光透镜532设置为多种配置。在第一配置中，第二散光透镜532可具有3in的直径。第二散光透镜532也可以是其它直径。在该第一配置或另一配置中，第二散光透镜532可具有200mm的有效焦距。第二散光透镜532也可以具有其它有效焦距。
在所述准直广谱光的第二部分被第一散光透镜530传递至第二散光透镜532后，第二散光透镜532将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板。经由用于传递光的第一孔544和用于传递光的第二孔560，第二散光透镜532将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板。用于传递光的第一孔544的至少一部分可在用于传递光的第二孔560的至少一部分的上方或下方。
可对短通滤光器528和第一散光透镜530之间的间距、第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙、以及短通滤光器528和细胞培养板之间的间距进行选择，从而对细胞培养板进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二散光透镜532分散的光提供至细胞培养板的整个区域或细胞培养板的整个底部区域。
为对细胞培养板进行均匀辐照，短通滤光器528和第一散光透镜530之间的间距可以是13.6cm。为对细胞培养板进行均匀辐照，短通滤光器528和第一散光透镜530之间的间距也可以是其它间距。所述间距可以是短通滤光器528与第一散光透镜530彼此最接近的部分之间的间距。就图5中照明系统500的取向而言，所述部分可包括短通滤光器528的下侧和第一散光透镜530的上侧。或者，短通滤光器528和第一散光透镜530之间的间距可以是短通滤光器528的竖直中心点与第一散光透镜530的竖直中心点之间的间距。也可将短通滤光器528和第一散光透镜530之间的间距指定为其它实例。
为利用所述广谱光的第二部分对细胞培养板进行均匀辐照，第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙可以是3mm。第一散光透镜530和第二散光透镜532之间也可以是其它间隙。例如，第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙可以在2mm-4mm的范围内，包含端值。第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙可以是第一散光透镜530的最近点与第二散光透镜532的最近点之间的间距。或者，第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙可以是第一散光透镜530的竖直中心点与第二散光透镜532的竖直中心点之间的间距。也可将第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙指定为其它实例。
为对细胞培养板进行均匀辐照，可以多种方式指定短通滤光器528和细胞培养板之间的间距。一方面，可将所述间距指定为从短通滤光器528的最高点至细胞培养板底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，该间距可以是95.5cm。另一方面，可将所述间距指定为从短通滤光器528的最高点至细胞培养板的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板的顶部区域和细胞培养板底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将短通滤光器528和细胞培养板之间的间距指定为短通滤光器528的最近点与细胞培养板的最近点之间的间距。又一方面，可将短通滤光器528和细胞培养板之间的间距指定为短通滤光器528的竖直中心点和细胞培养板的竖直中心点之间的间距。也可将短通滤光器528和细胞培养板之间的间距指定为其它实例。
如上所述，可通过第一垂直调节槽554、第一垂直调节紧固件555、第二垂直调节紧固件556、第二垂直调节槽557、第三垂直调节紧固件558和第四垂直调节紧固件559对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512垂直的方向536上的位置进行调节。根据这一设置，可对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512垂直的方向536上的位置进行调节，以使第一散光透镜530的中心与短通滤光器528的中心对齐。可通过对第一垂直调节紧固件555在第一垂直调节槽554中的位置进行调节、对第二垂直调节紧固件556在第一垂直调节槽554中的位置进行调节、对第三垂直调节紧固件558在第二垂直调节槽557中的位置进行调节、以及对第四垂直调节紧固件559在第二垂直调节槽557中的位置进行调节，来对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512垂直的方向536上的位置进行调节。垂直调节紧固件(555、556、558和559)各自可为螺栓。垂直调节紧固件(555、556、558和559)可为其它紧固件，例如螺钉。对垂直调节紧固件(555、556、558和559)中的一个在垂直调节槽(554、557)中的一个中的位置进行调节可涉及使垂直调节紧固件(555、556、558和559)在垂直调节槽(554、557)内平移(translating)。
如上所述，可通过调节杆533、第一调节定距件534和第二调节定距件535对第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙进行调节。可通过对第一调节定距件534沿调节杆533的位置和第二调节定距件535沿调节杆533的位置中的至少一者进行调节，来对第一散光透镜530和第二散光透镜532之间的间隙进行调节。调节杆533可具有螺纹，以与第一调节定距件534和第二调节定距件535接合(engage)。第一调节定距件534可以是垫圈(washer)。类似地，第二调节定距件535可以是垫圈。
如上所述，可通过第一平行调节槽550、第一平行调节紧固件551、第二平行调节槽552和第二平行调节紧固件553对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512平行的方向538上的位置进行调节。根据这一设置，可对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512平行的方向538上的位置进行调节，以使第一散光透镜530的中心与短通滤光器528的中心对齐。可通过对第一平行调节紧固件551在第一平行调节槽550中的位置进行调节、以及对第二平行调节紧固件553在第二平行调节槽552中的位置进行调节，来对第一散光透镜530和第二散光透镜532在相对于壁512平行的方向538上的位置进行调节。第一平行调节紧固件551和第二平行调节紧固件553各自可为螺钉。第一平行调节紧固件551和第二平行调节紧固件553可以是其它紧固件，例如带有相应螺母的螺栓。对第一平行调节紧固件551在第一平行调节槽550中的位置进行调节可涉及使第一平行调节紧固件551在第一平行调节槽550内平移。类似地，对第二平行调节紧固件553在第二平行调节槽552中的位置进行调节可涉及使第二平行调节紧固件553在第二平行调节槽552内平移。
如上所述，透镜滑动件542可拆卸地附接至搁架顶部546。可通过将第一垂直调节紧固件555附接至第一透镜滑动件附着件561、将第二垂直调节紧固件556附接至第二透镜滑动件附着件562、将第三垂直调节紧固件558附接至第三透镜滑动件附着件563、并将第四垂直调节紧固件559附接至第四透镜滑动件附着件564，来将所述透镜滑动件可拆卸地附接至所述搁架顶部。透镜滑动件附着件(561、562、563和564)各自可为具有相应螺母(未示出)的槽或孔。透镜滑动件附着件(561、562、563和564)可以是其它附着件，例如带螺纹的孔。透镜滑动件542与搁架540间也可以是其它连接。
虽然图7示出第一透镜滑动件附着件561、第二透镜滑动件附着件562、第三透镜滑动件附着件563和第四透镜滑动件附着件564为圆形，本领域技术人员将理解的是，561、562、563和564可为长槽，从而可对第一散光透镜530和第二散光透镜532进行额外的调节。
在替代的实施方式中，反射器524与短通滤光器528相连。根据这一设置，短通滤光器528与红外截止滤光器526相连。
在另一实施方式中，光口与红外吸收液体滤光器516相连。根据这一设置，红外吸收液体滤光器516与第一透镜相连，且第一透镜与反射器524相连。
在另一实施方式中，第一透镜在光口外。根据这一设置，光口可与第一透镜相连，第一透镜可与红外吸收液体滤光器516相连，且红外吸收液体滤光器516可与反射器524相连。或者，光口可与红外吸收液体滤光器516相连，红外吸收液体滤光器516可与第一透镜相连，且第一透镜可与反射器524相连。根据这些实施方式，红外截止滤光器526或短通滤光器528应位于红外吸收液体滤光器516或反射器524的下游，以避免光的热量损坏(cracking)红外截止滤光器526或短通滤光器528。
在另一实施方式中，将灯室502、第一透镜、红外吸收液体滤光器516、反射器524、红外截止滤光器526、短通滤光器528、第一散光透镜530和第二散光透镜532各自置于桌(未示出)上方的平台(未示出)上。根据这一设置，随后可将细胞培养板置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板以及细胞培养板的内容物维持在规定的温度。
在又一实施方式中，将反射器524倒置。根据这一设置，反射器524将所述准直广谱光的第一部分向上反射。这样，红外截止滤光器526、短通滤光器528、第一散光透镜530、第二散光透镜532和细胞培养板各自位于反射器524的上方。根据这一实施方式，对细胞培养板的均匀辐照包括将由第二散光透镜532分散的光提供至细胞培养板的整个底部区域。
图8A-图8C和图9说明了照明系统(总体表示为800)及其元件的另一实施方式。照明系统800包含灯室802、第一透镜(未示出)、红外吸收液体滤光器816、入口冷却管818、出口冷却管820、支撑构件821、泵822、冷却系统823、反射器824、红外截止滤光器826、短通滤光器828、第一平凸透镜830、第一平凸透镜固定器870、第二平凸透镜832、第二平凸透镜固定器872、调节杆841、第一调节定距件842、第二调节定距件843、基座壁848、搁架850、透镜滑动件852和细胞培养板(未示出)。灯室802包含灯(未示出)、反射镜(未示出)、光口(未示出)、顶部808、底部810和壁812。第一平凸透镜830包含第一凸侧836和第一平侧(未示出)。第二平凸透镜832包含第二凸侧840和第二平侧(未示出)。搁架850包含搁架顶部854、搁架升降器856、第一平行调节槽858、第一平行调节紧固件859、第二平行调节槽860、第二平行调节紧固件861、用于传递光的第二孔868、座圈(未示出)、第一透镜滑动件附着件(未示出)、第二透镜滑动件附着件(未示出)、第三透镜滑动件附着件(未示出)和第四透镜滑动件附着件(未示出)。透镜滑动件852包含第一垂直调节槽862、第一垂直调节紧固件863、第二垂直调节紧固件864、第二垂直调节槽865、第三垂直调节紧固件866、第四垂直调节紧固件867和用于传递光的第一孔(未示出)。
在照明系统800中，类似于图1-图4说明的照明系统中的灯，灯在灯室802内。类似于图1-图4说明的照明系统中的光口，光口在灯室802内。类似于图1-图4说明的照明系统中的第一透镜，第一透镜在光口内。第一透镜、红外吸收液体滤光器816、反射器824、红外截止滤光器826以及短通滤光器828各自位于顶部808和底部810之间的位置。底部810可为金属。
此外，在照明系统800中，类似于图1-图4说明的照明系统中红外吸收滤光器与光口相连，红外吸收液体滤光器816与光口相连。红外吸收液体滤光器816与入口冷却管818相连。由支撑构件821对入口冷却管818进行支撑。入口冷却管818与泵822相连。泵822与冷却系统823相连。所述连接可以是串联的。红外吸收液体滤光器816与出口冷却管820相连。由支撑构件821对出口冷却管820进行支撑。出口冷却管820与泵822相连。
此外，在照明系统800中，反射器824与红外吸收液体滤光器816相连。红外截止滤光器826与反射器824相连。短通滤光器828与红外截止滤光器826相连。第一平凸透镜830位于距红外截止滤光器826一段间距的位置，类似于图1-图4说明的照明系统中第二透镜位于距光学滤光器一段间距的位置。由第一平凸透镜固定器870对第一平凸透镜830进行支撑。第一平凸透镜830邻近于第二平凸透镜832，在第一凸侧836与第二凸侧840之间有间隙。可通过调节杆841、第一调节定距件842和第二调节定距件843对第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙进行调节。图8A中示出了各自具有第一调节定距件842和第二调节定距件843的两个调节杆841，其足以能够对第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙进行调节。在一些实施方式中，各自具有第一调节定距件842和第二调节定距件843的三个以上调节杆841可等间距地围绕第一平凸透镜830和第二平凸透镜832分布。由第二平凸透镜固定器872对第二平凸透镜832进行支撑。第二平凸透镜固定器872可拆卸地附接至透镜滑动件852。更具体地，第二平凸透镜固定器872具有凸缘(未示出)，其靠在透镜滑动件852上。可使第二平凸透镜固定器872的一部分位于用于传递光的第一孔内，或位于用于传递光的第一孔和第二孔868内。或者，第二平凸透镜固定器872的一部分可延伸超出用于传递光的第一孔和用于传递光的第二孔868。透镜滑动件852可拆卸地附接至搁架顶部854。搁架850与基座壁848相连。搁架升降器856位于相对于壁812平行的方向844。搁架顶部854位于相对于壁812垂直的方向846。第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812平行的方向844上的位置是可调节的。第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812垂直的方向846上的位置是可调节的。
可将照明系统800中的元件设置为类似于图5-图7说明的照明系统500中的元件。例如，可将灯室802设置为类似于灯室502，可将灯设置为类似于照明系统500的灯，可将光口设置为类似于照明系统500的光口，可将第一透镜设置为类似于照明系统500的第一透镜，可将反射镜设置为类似于照明系统500的反射镜，可将红外吸收液体滤光器816设置为类似于红外吸收液体滤光器516，可将入口冷却管818设置为类似于入口冷却管518，可将出口冷却管820设置为类似于出口冷却管520，可将泵822设置为类似于泵522，可将冷却系统823设置为类似于冷却系统523，可将反射器824设置为类似于反射器524，可将红外截止滤光器826设置为类似于红外截止滤光器526，可将短通滤光器828设置为类似于短通滤光器528，可将搁架850设置为类似于搁架540，可将搁架顶部854设置为类似于搁架顶部546，可将搁架升降器856设置为类似于搁架升降器548，可将第一平行调节槽858设置为类似于第一平行调节槽550，可将第一平行调节紧固件859设置为类似于第一平行调节紧固件551，可将第二平行调节槽860设置为类似于第二平行调节槽552，可将第二平行调节紧固件861设置为类似于第二平行调节紧固件553，可将用于传递光的第二孔868设置为类似于用于传递光的第二孔560，可将第一透镜滑动件附着件设置为类似于第一透镜滑动件附着件561，可将第二透镜滑动件附着件设置为类似于第二透镜滑动件附着件562，可将第三透镜滑动件附着件设置为类似于第三透镜滑动件附着件563，可将第四透镜滑动件附着件设置为类似于第四透镜滑动件附着件564，可将座圈设置为类似于座圈565，可将透镜滑动件852设置为类似于透镜滑动件542，可将第一垂直调节槽862设置为类似于第一垂直调节槽554，可将第一垂直调节紧固件863设置为类似于第一垂直调节紧固件555，可将第二垂直调节紧固件864设置为类似于第二垂直调节紧固件556，可将第二垂直调节槽865设置为类似于第二垂直调节槽557，可将第三垂直调节紧固件866设置为类似于第三垂直调节紧固件558，可将第四垂直调节紧固件867设置为类似于第四垂直调节紧固件559，并可将用于传递光的第一孔设置为类似于用于传递光的第一孔544。此外，可将细胞培养板设置为类似于图1说明的照明系统100中的细胞培养板120。
在操作中，用来自灯的光对细胞培养板以及细胞培养板的内容物进行辐照。首先，来自灯的广谱光通过光口而离开灯室。可由反射镜将所述广谱光反射至光口。
在所述广谱光通过光口而离开灯室802后，由第一透镜将所述广谱光准直。
在由第一透镜将所述广谱光准直后，准直广谱光到达红外吸收液体滤光器816。红外吸收液体滤光器816吸收所述准直广谱光中的红外光。红外吸收液体滤光器816可吸收所述广谱光中的红外光的90％-100％(包含端值)。还可使用红外吸收液体滤光器816的其它红外吸收范围。可通过使用泵822将冷却流体以一定流速经由入口冷却管818和出口冷却管820泵至红外吸收液体滤光器816的夹套(未示出)，从而对红外吸收液体滤光器816的温度进行控制。所述冷却流体可以是冰冷却的水。可通过冷却系统823对所述冷却流体进行冷却。流速可以是6mL/min。红外吸收液体滤光器816还将所述准直广谱光的第一部分传递至反射器824。
在所述准直广谱光的第一部分被红外吸收液体滤光器816传递至反射器824后，反射器824将所述准直广谱光的第一部分反射。随后，所述准直广谱光的第一部分传播至红外截止滤光器826。或者，反射器824可仅将所述准直广谱光的第一部分中的一部分反射，随后，所述准直广谱光的第一部分中的一部分传播至红外截止滤光器826。反射器824反射的光具有与反射器524反射的光相同的给定波长范围。
在所述广谱光的第一部分传播至红外截止滤光器826后，红外截止滤光器826吸收所述准直广谱光的第一部分中的残留红外光。红外截止滤光器826还将滤过的广谱光的第一部分传递至短通滤光器828。
在所述滤过的准直广谱光的第一部分被红外截止滤光器826传递至短通滤光器828后，短通滤光器828将所述广谱光的第二部分传递至第一平凸透镜830。短通滤光器828传递的光具有与短通滤光器528传递的光相同的给定波长范围。可将第一平凸透镜830设置为多种配置。在第一配置中，第一平凸透镜830可具有3in的直径。第一平凸透镜830也可以是其它直径。在该第一配置或另一配置中，第一平凸透镜830可具有200mm的有效焦距。第一平凸透镜830也可以具有其它有效焦距。第一平凸透镜830可为Newport Corporation Part No.KPX229。
在所述准直广谱光的第二部分被短通滤光器828传递至第一平凸透镜830后，第一平凸透镜830将所述准直广谱光的第二部分传递至第二平凸透镜832。可将第二平凸透镜832设置为多种配置。在第一配置中，第二平凸透镜832可具有3in的直径。第二平凸透镜832也可以是其它直径。在该第一配置或另一配置中，第二平凸透镜832可具有200mm的有效焦距。第二平凸透镜832也可以具有其它有效焦距。第二平凸透镜832可为Newport Corporation Part No.KPX299。第一平凸透镜固定器870和第二平凸透镜固定器872可为独立元件或为单个单元，例如NewportCorporation Part No.6216。
在所述准直广谱光的第二部分被第一平凸透镜830传递至第二平凸透镜832后，第二平凸透镜832将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板。经由用于传递光的第一孔和用于传递光的第二孔868，第二平凸透镜832将所述准直广谱光的第二部分分散至细胞培养板。用于传递光的第一孔的至少一部分可位于用于传递光的第二孔868的至少一部分的上方或下方。
可对短通滤光器828和第一平凸透镜830之间的间距、第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙、以及第二平凸透镜832和细胞培养板之间的间距进行选择，从而对细胞培养板进行均匀辐照。“均匀地辐照”和“均匀的辐照”是指将由第二平凸透镜832分散的光提供至细胞培养板的整个区域或细胞培养板的整个底部区域。
为对细胞培养板进行均匀辐照，短通滤光器828和第一平凸透镜830之间的间距可以是13.6cm。为对细胞培养板进行均匀辐照，短通滤光器828和第一平凸透镜830之间的间距也可以是其它间距。所述间距可以是短通滤光器828与第一平凸透镜830彼此最接近的部分之间的间距。就图8A-图8C和图9中照明系统800的取向而言，所述部分可包括短通滤光器828的下侧和第一平凸透镜830的上侧。或者，短通滤光器828和第一平凸透镜830之间的间距可以是短通滤光器828的竖直中心点与第一平凸透镜830的竖直中心点之间的间距。也可将短通滤光器828和第一平凸透镜830之间的间距指定为其它实例。
为利用所述广谱光的第二部分对细胞培养板进行均匀辐照，第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙可以是3mm。第一凸侧836和第二凸侧840之间也可以是其它间隙。例如，第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙可以在2mm-4mm的范围内，包含端值。第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙可以是第一凸侧836的最近点和第二凸侧840的最近点之间的间距。或者，第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙可以是第一凸侧836的竖直中心点与第二凸侧840的竖直中心点之间的间距。也可将第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙指定为其它实例。
为对细胞培养板进行均匀辐照，可以多种方式指定短通滤光器828和细胞培养板之间的间距。一方面，可将所述间距指定为从短通滤光器828的最高点至细胞培养板底部区域的外表面的间距。在这方面，作为第一种情况，该间距可以是95.5cm。另一方面，可将所述间距指定为从短通滤光器828的最高点至细胞培养板的顶部区域的间距。根据上述第一种情况，如果竖直壁(细胞培养板的顶部区域和细胞培养板底部区域的外表面之间的距离)具有1.42cm的高度，则所述间距可为94.08cm。另一方面，可将短通滤光器828和细胞培养板之间的间距指定为短通滤光器828的最近点与细胞培养板的最近点之间的间距。又一方面，可将短通滤光器828和细胞培养板之间的间距指定为短通滤光器828的竖直中心点和细胞培养板的竖直中心点之间的间距。也可将短通滤光器828和细胞培养板之间的间距指定为其它实例。
如上所述，可通过第一平行调节槽858、第一平行调节紧固件859、第二平行调节槽860和第二平行调节紧固件861对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812平行的方向844上的位置进行调节。根据这一设置，可对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812平行的方向844上的位置进行调节，以使第一平凸透镜830的中心与短通滤光器828的中心对齐。可通过对第一平行调节紧固件859在第一平行调节槽858中的位置进行调节、以及对第二平行调节紧固件861在第二平行调节槽860中的位置进行调节，来对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812平行的方向844上的位置进行调节。对第一平行调节紧固件859在第一平行调节槽858中的位置进行调节可涉及使第一平行调节紧固件859在第一平行调节槽858内平移。类似地，对第二平行调节紧固件861在第二平行调节槽860中的位置进行调节可涉及使第二平行调节紧固件861在第二平行调节槽860内平移。
如上所述，可通过调节杆841、第一调节定距件842和第二调节定距件843对第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙进行调节。可通过对第一调节定距件842沿调节杆841的位置和第二调节定距件843沿调节杆841的位置中的至少一者进行调节，来对第一凸侧836和第二凸侧840之间的间隙进行调节。调节杆841可具有螺纹，以与第一调节定距件842和第二调节定距件843接合。
如上所述，可通过第一垂直调节槽862、第一垂直调节紧固件863、第二垂直调节紧固件864、第二垂直调节槽865、第三垂直调节紧固件866和第四垂直调节紧固件867对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812垂直的方向846上的位置进行调节。根据这一设置，可对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812垂直的方向846上的位置进行调节，以使第一平凸透镜830的中心与短通滤光器828的中心对齐。可通过对第一垂直调节紧固件863在第一垂直调节槽862中的位置进行调节、对第二垂直调节紧固件864在第一垂直调节槽862中的位置进行调节、对第三垂直调节紧固件866在第二垂直调节槽865中的位置进行调节、以及对第四垂直调节紧固件867在第二垂直调节槽865中的位置进行调节，来对第一平凸透镜830和第二平凸透镜832在相对于壁812垂直的方向846上的位置进行调节。对垂直调节紧固件(863、864、866和867)中的一个在垂直调节槽(862、865)中的一个中的位置进行调节可涉及使垂直调节紧固件(863、864、866和867)在垂直调节槽(862、865)内平移。
在替代的实施方式中，反射器824与短通滤光器828相连。根据这一设置，短通滤光器828与红外截止滤光器826相连。
在另一实施方式中，光口与红外吸收液体滤光器816相连。根据这一设置，红外吸收液体滤光器816与第一透镜相连，且第一透镜与反射器824相连。
在另一实施方式中，第一透镜在光口外。根据这一设置，光口可与第一透镜相连，第一透镜可与红外吸收液体滤光器816相连，且红外吸收液体滤光器816可与反射器824相连。或者，光口可与红外吸收液体滤光器816相连，红外吸收液体滤光器816可与第一透镜相连，且第一透镜可与反射器824相连。根据这些实施方式，红外截止滤光器826或短通滤光器828应位于红外吸收液体滤光器816或反射器824的下游，以避免光的热量损坏红外截止滤光器826或短通滤光器828。
在另一实施方式中，将灯室802、第一透镜、红外吸收液体滤光器816、反射器824、红外截止滤光器826、短通滤光器828、第一平凸透镜830和第二平凸透镜832各自置于桌(未示出)上方的平台(未示出)上。根据这一设置，随后将细胞培养板置于位于桌上的温控装置(未示出)上。可将所述温控装置设置为多种配置。例如，所述温控装置可为加热装置或冷却装置。所述温控装置可将细胞培养板以及细胞培养板的内容物维持在规定的温度。
在又一实施方式中，将反射器824倒置。根据这一设置，反射器824将所述准直广谱光的第一部分向上反射。这样，红外截止滤光器826、短通滤光器828、第一平凸透镜830、第二平凸透镜832和细胞培养板各自位于反射器824的上方。根据这一实施方式，对细胞培养板的均匀辐照包括将由第二平凸透镜832分散的光提供至细胞培养板的整个底部区域。
对于本文所述照明系统的任何实施方式而言，可用测光计对灯和细胞培养板之间的光进行测量(可通过探头检测)。所述测光计可以是手持式功率计(power meter)，例如Newport Corporation Part No.1916-R。所述探头可以是测量探头或传感器，例如Newport Corporation Part No.818P-001-12。
2.操作实例
可用照明系统100对细胞培养板120的内容物进行辐照。该方法对于以上讨论的任何示例性照明系统均适用。细胞培养板可包含光敏剂。
如图10所示，提供了用于对光敏剂进行研究的方法1000。方法1000包括将所述光敏剂加至细胞培养板上的部分孔，从而形成光敏剂测定孔(1002)，所述孔包含癌细胞；选择第一预定时间段(1004)；以及将所述光敏剂测定孔孵育第一预定时间段(1006)。所述癌细胞可以是例如A549人肺癌细胞。所述方法也可使用任何类型的细胞系，例如癌细胞系、肿瘤细胞系和正常细胞系。所述细胞培养板可以是不透明的黑色板。
方法1000还包括选择预定波长(1008)；以及任选地对所述光敏剂测定孔进行洗涤(1010)。方法1000还包括利用照明系统以预定波长对所述光敏剂测定孔进行辐照来形成辐照孔，从而形成均匀辐照孔(1012)。例如，可在约400nm至约650nm对所述光敏剂测定孔进行辐照。在其它实施方式中，可在不同波长对所述光敏剂测定孔进行辐照，例如在约595nm至约645nm、约620nm至约640nm、约615nm至约645nm、或约610nm至约650nm的范围。取决于所使用的光敏剂的类型，可使用不同的波长。辐照步骤可为标准化的，从而使得每次以相同的方式重复该步骤。以上具体讨论的照明系统100提供了所述标准化。
方法1000还包括选择第二预定时间段(1014)；将所述辐照孔孵育第二预定时间段(1016)；以及确定所述孔中含有的所述癌细胞的存活性百分数(1018)。
在一些实施方式中，对所述光敏剂测定孔进行洗涤的步骤(1010)是必需的。剩余部分的孔可以是对照孔。部分孔可含有用于比较的参照药物。
所述光敏剂是基于卟啉的抗癌剂，所述基于卟啉的抗癌剂可以是卟吩姆钠。
实施例
1.概述
用固定的接种密度进行A549细胞的细胞传代，以降低由细胞培养条件导致的测定变化。就各测定而言，以每个孔10,000个细胞(0.1mL的体积)将细胞接种于组培处理过的(tissue-cultured treated)无菌黑色的96孔板中，并在5％CO2的气氛中37℃孵育过夜。在极低光照条件下操作，将在生理盐水中复水(reconstituted)至2.5mg/mL，并在培养基中进一步稀释至所希望的最终测定浓度的两倍(典型地为140μg/mL)。随后由该140μg/mL的溶液制备两倍稀释系列，并根据图11示出的表格，将稀释后的药物按1:1(v/v)加至细胞。
用黑色盖子将板遮盖住，并在培养箱内放置四小时，使得药物被细胞吸收。随后将板从培养箱内取出，将药物吸出，使用Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水(DPBS)对孔进行洗涤，并将预热的新鲜培养基加入孔中。用箔条(foil strips)将不进行辐照的孔列遮盖住，将黑色盖子换成清澈透明盖子，随后将板移至光束下方的辐照模板(irradiation template)，辐照10分钟(共3.3焦耳)。将板送回培养箱中，24小时后使用XTT对存活性进行评价。对于无辐照时的活性以及无药物时光对细胞的影响而言，用箔条遮盖住的孔是重要对照。
对第1列中的孔(高药物浓度，无细胞)在450nm的光吸收进行评估，以保证药物不会干扰XTT测定。相对于第10列(细胞对照，无药物、无光)的平均值，计算第2-9列和第11列中各孔的存活性百分数。对于获得的各剂量响应，将存活性百分数相对于浓度进行四参数logistic(4PL)非线性回归分析。将回归曲线的拐点(C值)定义为EC50，并用于计算相对效价。利用Softmax v5.4.2(Molecular Devices，Inc.)或Prism v.5.04(GraphPad，Software Inc.)软件进行曲线拟合和EC50计算。还对第9列和第11列的平均存活性百分数进行了计算。
典型的测定结果在图12中示出。左侧的S型曲线是标准制剂的剂量响应曲线，右侧的曲线是含有标称(nominal)活性一半的制剂的剂量响应曲线。标准品与测试样品的EC50之比为0.5。
可对本文所述的发明进行修改，通过对合适的滤光器进行选择而在不同波长(包括红外或紫外波长)下对细胞进行辐照。取决于细胞类型、药物和滤光器效率，可改变药物吸收和辐照时间来获得所希望的结果。
2.具体方法
解冻A549细胞的方法
1.材料和试剂
1.1.A549人肺癌细胞(ATCC–Cat.No.：CCL-185)
1.2.25cm2培养瓶(flasks)(Corning–Cat.No.：431463，或等同物)
1.3.75cm2培养瓶(Corning–Cat.No.：431464，或等同物)
1.4.50mL管子(Fisher Scientific–Cat.No.17-512F，或等同物)
1.5.血细胞计数器
1.6.RPMI-1640(+)酚红(Lonza–Cat.No.：12-167F，或等同物)
1.7.HI-FBS(Gibco–Life Technologies–Cat No.：10082-147，或等同物)
1.8.200mM L-谷氨酰胺(Lonza–Cat.No.：17-605E，或等同物)
1.9.0.25％胰蛋白酶-EDTA(Gibco–Cat.No.：25200-056，或等同物)
2.仪器
2.1.配有吊篮式转头(swinging bucket rotor)的Forma Scientific离心机(Model 5682，或等同物)
2.2.设定为37℃的水浴
2.3.设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱
3.制备的试剂
3.1.RPMI-1640完全培养基
3.1.1.装入含有酚红的RPMI-1640基础培养基的500mL瓶
3.1.2.加入50mL HI-FBS
3.1.3.加入5.5mL 200mM L-谷氨酰胺
4.步骤
4.1.从液氮储库(storage)中取出一小瓶(vial)A549肺癌细胞，在保证小瓶紧闭后，保持除小瓶盖子外的整体浸入37℃的水浴中，直到小瓶的内容物开始解冻而仍存有冰，从而对小瓶进行快速解冻。
4.2.用70％乙醇对小瓶进行充分喷淋，用纸巾擦拭，并置于层流操作台(laminar flow hood)中。
4.3.将小瓶的内容物转移到50mL锥形管，该锥形管含有9mL含有酚红的RPMI-1640完全培养基(步骤3.1)(本方法中，以下称为完全培养基)。
4.4.在室温下、在设定为1200RPM(220RCF)的吊篮式转头中将该管离心五分钟。
4.5.弃去上清液并轻弹该管，以使细胞重悬于留在该管中的残留体积中。
4.6.加入5mL完全培养基，将细胞溶液转移至25cm2培养瓶，随后将该培养瓶置于具有5％CO2的37℃培养箱中。
4.7.每日对培养瓶进行监测，当细胞达到约80％汇合度(confluence)后，移除培养基，通过在培养瓶中加入2mL DPBS对细胞进行洗涤。保证全部细胞均被洗净，并弃去DPBS。
4.8.加入1mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA来对细胞进行预洗涤，将培养瓶倾斜以覆盖(coat)全部细胞，并弃去胰蛋白酶。
4.9.再加入1mL胰蛋白酶，倾斜以覆盖全部细胞，随后在37℃培养箱中放置4分钟，或直至细胞脱离。
4.10.通过在培养瓶中加入4mL完全培养基来终止胰蛋白酶反应，随后收集全部细胞并转移至50mL锥形管。
4.11.使用血细胞计数器对细胞溶液进行计数，根据需要，使用如下接种密度以合适的数量将细胞接种至75cm2培养瓶中：
细胞需要的天数 接种密度
3天 每75cm2培养瓶加入0.4×10E+06个细胞
4天 每75cm2培养瓶加入0.3×10E+06个细胞
5天 每75cm2培养瓶加入0.25×10E+06个细胞
4.12.当75cm2培养瓶中的细胞已准备好接种至96孔测定板中时(约80％汇合度)，从培养瓶中移除培养基。
4.13.在培养瓶中加入5mL DPBS，旋转以洗净全部细胞，随后移除并弃去DPBS。
4.14.在培养瓶中加入2mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA，倾斜以覆盖全部细胞，随后移除并弃去胰蛋白酶。
4.15.再加入2mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA，再次倾斜以覆盖全部细胞，随后将培养瓶在37℃培养箱中放置6分钟，或直至细胞脱离。
4.16.一旦细胞脱离，加入8mL完全培养基，收集细胞并将该体积转移至50mL锥形管。
4.17.继续进行“将A549细胞接种入96孔测定板的方法”。
对A549细胞进行传代的方法
1.材料和试剂
1.1.A549人肺癌细胞(ATCC–Cat.No.：CCL-185)
1.2.25cm2培养瓶(Corning–Cat.No.431463，或等同物)
1.3.75cm2培养瓶(Corning–Cat.No.431464，或等同物)
1.4.50mL管子(Fisher Scientific–Cat.No.：14-432-22，或等同物)
1.5.DPBS(Lonza–Cat.No.：17-512F，或等同物)
1.6.血细胞计数器
1.7.RPMI-1640(+)酚红(Lonza–Cat.No.：12-167F，或等同物)
1.8.HI-FBS(Gibco–Life Technologies–Cat No.：10082-147，或等同物)
1.9.200mM L-谷氨酰胺(Lonza–Cat.No.：17-605E，或等同物)
1.10.0.25％胰蛋白酶-EDTA(Gibco–Cat.No.：25200-056，或等同物)
2.仪器
2.1.配有吊篮式转头的Forma Scientific离心机(Model 5682，或等同物)
2.2.设定为37℃的水浴
2.3.设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱
3.制备的试剂
3.1.RPMI-1640完全培养基
3.2.装入含有酚红的RPMI-1640基础培养基的500mL瓶
3.3.加入50mL HI-FBS
3.4.加入5.5mL 200mM L-谷氨酰胺
4.步骤
4.1.每日对培养瓶进行监测，当细胞达到约80％汇合度后，移除培养基，通过在培养瓶中加入2mL DPBS对细胞进行洗涤。保证全部细胞均被洗净，并弃去DPBS。
4.2.加入1mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA来对细胞进行预洗涤，将培养瓶倾斜以覆盖全部细胞，并弃去胰蛋白酶。
4.3.再加入1mL胰蛋白酶，倾斜以覆盖全部细胞，随后在37℃培养箱中放置4分钟，或直至细胞脱离。
4.4.通过在培养瓶中加入4mL完全培养基来终止胰蛋白酶反应，随后收集全部细胞并转移至50mL锥形管。
4.5.使用血细胞计数器对细胞溶液进行计数，根据需要，使用如下接种密度以合适的数量将细胞接种至75cm2培养瓶中：
细胞需要的天数 接种密度
3天 每75cm2培养瓶加入0.4×10E+06个细胞
4天 每75cm2培养瓶加入0.3×10E+06个细胞
5天 每75cm2培养瓶加入0.25×10E+06个细胞
4.6.当75cm2培养瓶中的细胞已准备好接种至96孔测定板中时(约80％汇合度)，从培养瓶中移除培养基。
4.7.在培养瓶中加入5mL DPBS，旋转以洗净全部细胞，随后移除并弃去DPBS。
4.8.在培养瓶中加入2mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA，倾斜以覆盖全部的细胞，随后移除并弃去胰蛋白酶。
4.9.再加入2mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA，再次倾斜以覆盖全部细胞，随后将培养瓶在37℃培养箱中放置6分钟，或直至细胞脱离。
4.10.一旦细胞脱离，加入8mL完全培养基，收集细胞并将该体积转移至50mL锥形管。
4.11.继续进行“将A549细胞接种入96孔测定板的方法”。
将A549细胞接种入96孔测定板的方法
1.材料和试剂
1.1.75cm2培养瓶(Corning–Cat.No.：431464，或等同物)
1.2.50mL管子(Fisher Scientific–Cat.No.：14-432-22，或等同物)
1.3.DPBS(Lonza–Cat.No.：17-512F，或等同物)
1.4.血细胞计数器(Fisher Scientific–Cat.No.：S17040，或等同物)
1.5.RPMI-1640(+)酚红(Lonza–Cat.No.：12-167F，或等同物)
1.6.RPMI-1640(-)酚红(Lonza–Cat.No.：12-918F，或等同物)
1.7.热失活的FBS(Gibco–Life Technologies–Cat No.：10082-147，或等同物)
1.8.200mM L-谷氨酰胺(Lonza–Cat.No.：17-605E，或等同物)
1.9.0.25％胰蛋白酶-EDTA(Gibco–Cat.No.：25200-056，或等同物)
1.10.组培处理过的黑色96孔测定板，具有通用的黑色盖子(分别为Costar 3916和Corning 3935)*
1.11.50mL试剂储液槽(reagent reservoir)(Fisher Scientific–Cat.No.：07-200-127，或等同物)
2.仪器
2.1.配有吊篮式转头的Forma Scientific离心机(Model：5682，或等同物)
2.2.设定为37℃、具有5％CO2的水浴
2.3.Finnpipette 12通道数字型移液器(Fisher Scientific–Cat.No.：21-377-830，或等同物)
3.制备的试剂
3.1.含有或不含酚红的RPMI-1640完全培养基
3.1.1.装入RPMI-1640基础培养基的500mL瓶
3.1.2.加入50mL热失活的胎牛血清
3.1.3.加入5.5mL 200mM L-谷氨酰胺
4.步骤
4.1.细胞应在75cm2培养瓶中达到约80％汇合度。
4.2.移除培养基，通过在培养瓶中加入5mL DPBS对细胞进行洗涤。保证全部细胞均被洗净，随后移除并弃去DPBS。
4.3.加入2mL 0.25％胰蛋白酶-EDTA来对细胞进行预洗涤，将培养瓶倾斜以覆盖全部细胞，随后移除并弃去胰蛋白酶。
4.4.再加入2mL胰蛋白酶，倾斜以覆盖全部细胞，随后在37℃培养箱中放置6分钟，或直至细胞脱离。
4.5.通过在培养瓶中加入8mL完全培养基来终止胰蛋白酶反应，随后收集全部细胞并转移至50mL锥形管。
4.6.使用血细胞计数器对细胞溶液进行计数，并记录细胞密度。
4.6.1.细胞密度＝___细胞/mL
4.7.基于板的数量，计算测定所需的细胞数量。
4.7.1.___板×1E+06细胞/板＝需要___个细胞
4.8.计算所需的细胞悬浮液体积，并转移至50mL锥形管。
4.8.1.所需的细胞(步骤4.7.)/细胞密度(步骤4.6.)___＝需要转移___mL细胞悬浮液
4.9.加入10-20mL完全培养基，以220×g将管子离心5分钟。
4.10.弃去上清液，随后快速弹动沉淀，以使细胞重悬于留在该管中的残留体积中。
4.11.基于测定板的数量，将细胞重悬于合适体积的完全培养基中：
4.11.1.___板×10mL/板＝___mL完全培养基
4.12.将重悬的细胞体积转移至50mL储液槽，并根据如下模板，使用多通道移液器将100μL细胞悬浮液加入96孔板的合适的孔中。
注意：保证在此步骤中细胞均匀分散，如有需要，用移液器重悬。
4.13.在第一行和最后一行(板中的第A行和第H行)的全部孔中加入200μL DPBS。
4.14.在培养基对照孔(MC)中加入200μL不含酚红的完全培养基。
4.15.在药物对照孔(DC)中加入100μL不含酚红的完全培养基。
4.16.将随黑色板而来的清澈透明盖子换为黑色盖子，并将板在设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱中放置24小时。
注意：将清澈透明盖子保留在无菌环境中，用于“在96孔测定板中对A549细胞进行辐照的方法”的辐照步骤中。
用 对A549细胞进行处理的方法
1.材料和试剂
1.1.15mL管子(Fisher Scientific–Cat.No.：14-959-49B，或等同物)
1.2.不含酚红的RPMI-1640基础培养基(Lonza–Cat.No.：12-918F，或等同物)
1.3.50mL试剂储液槽(Fisher Scientific–Cat.No.：07-200-127，或等同物)
1.4.0.9％无菌盐水溶液(Teknova–S5819，或等同物)
1.5.96孔聚丙烯稀释板(polypropylene dilution plates)(FisherScientific–Cat.No.：07-200-745)
1.6.小瓶
2.仪器
2.1.设定为37℃的水浴
2.2.设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱
2.3.Finnpipette 12通道数字型移液器(Fisher Scientific–Cat.No.：21-377-830，或等同物)
2.4.台式旋转振荡器(Hoefer Red Rotor，或等同物)
3.制备的试剂
3.1.不含酚红的RPMI-1640完全培养基(完全培养基)
3.1.1.装入RPMI-1640基础培养基的500mL瓶
3.1.2.加入50mL热失活的FBS
3.1.3.加入5.5mL 200mM L-谷氨酰胺
4.步骤
4.1.开始处理前，将不含酚红的RPMI-1640完全培养基(完全培养基)在设定为37℃的水浴中放置1小时。
4.2.所有步骤均在生物安全柜中无菌地进行。
4.3.将四个50mL锥形管标记如下：工作参照、工作测试、细胞对照和测试浓缩物(Test Concentrate)。
4.4.分出一份31.8mL的无菌盐水，用于注入管子，将其置于一边。
4.5.基于测定板的数量计算所需的完全培养基的体积，并在每个经标记的50mL锥形管中加入计算的体积。
4.5.1.___板×4.72mL＝每管___mL
4.6.基于测定板的数量计算用于注射的盐水体积或待稀释的溶液的体积，在标记为细胞对照的管子中加入计算的体积并充分混匀。
4.6.1.___板×280μL＝___μL
4.7.使用如下模板来设置测定稀释板。
4.7.1.1.1.[插入表]
4.8.在储液槽中加入约15mL完全培养基。
4.9.使用多通道移液器，将125μL完全培养基分配至稀释板的B3-G8孔中。每个测定板使用单独的稀释板。
4.10.将储液槽中的残留培养基去除，从细胞对照管中转移体积至储液槽，随后将125μL加至稀释板的B9-G10孔。
4.11.使用窗户遮挡物将工作环境调暗，需要实现环境光线低于0.3mW/cm2以保证不会无意中将活化。
4.12.从冰箱中取出足够份的参照标准品，在37℃水浴中解冻，用70％异丙醇灭菌(disinfect)，并置于生物安全柜中。
4.13.从盒子中取出小瓶，从小瓶顶部移除金属密封，在操作台表面轻敲小瓶，以将粉末从橡皮帽上清除，随后小心地去除橡皮帽，并将其倒置于操作台表面上。
4.14.使用10mL移液器，将标记为T的锥形管的内容物直接转移至小瓶，把橡皮帽盖好，在握住小瓶顶部和底部的同时颠倒数次以充分混匀。
4.15.将该体积倒回标记为测试浓缩物的50mL管中。
4.16.将步骤4.6.中计算的合适体积从标记为T的管中加至标记为工作测试的管中，并充分混匀。
4.17.将内容物充分混匀，并将步骤4.6.中计算的合适体积从小份参照标准品中加至标记为工作参照的管中，并充分混匀。
4.18.准备50mL储液槽，随后将工作参照管的内容物转移至该储液槽。
4.19.使用多通道移液器，将125μL分配入稀释板的B1-D2孔中。
4.20.再在B2-D2孔中加入125μL，使这些孔加入的总体积为250μL。
4.21.在稀释板的B11-D11孔中加入125μL。
4.22.在各测定板中进行重复，随后弃去残留体积和储液槽。
4.23.准备另一50mL储液槽，随后将工作测试管的内容物转移至该储液槽。
4.24.使用多通道移液器，将125μL分配入稀释板的E1-G2孔中。
4.25.再在E2-G2孔中加入125μL，使这些孔加入的总体积为250μL。
4.26.在各测定板中进行重复，随后弃去残留体积和储液槽。
4.27.使用带有6个通道/枪头的多通道移液器，将稀释板的B2-G2孔中的体积充分混合三次，随后将该体积的125μL转移至B3-G3孔，以生成第一稀释。
4.28.利用B8-G8孔重复该稀释模式。在转移并混合B8-G8孔中的体积后，弃去125μL，而不是将其转移至B9-G9。
4.29.从培养箱中将接种有A549细胞的板取出，置于生物安全柜中。保证细胞板和稀释板正确对齐，随后使用带有11个枪头的多通道移液器将100μL从稀释板的A1-D11孔转移至细胞板的相应行。在将该体积吸上来前，在稀释板中对各行轻轻混合3次，随后将该体积转移至细胞板。
4.30.使用带有11个枪头的多通道移液器将100μL从稀释板的E1-H11孔转移至细胞板的相应行。在将该体积吸上来前，在稀释板中对各行轻轻混合3次，随后将该体积转移至细胞板。
4.31.将黑色盖子盖在细胞板上，并置于转速设为低速的台式旋转振荡器上，打开振荡器，总共转20次以将所述体积充分混合。
4.32.将板放回培养箱中4小时，随后进行“在96孔板中对处理的A549细胞进行辐照的方法”。
在96孔板中对 处理的A549细胞进行辐照的方法
1.材料和试剂
1.1.DPBS(Lonza–目录号：17-512F，或等同物)
1.2.RPMI-1640(-)酚红(Lonza–目录号：12-918F，或等同物)
1.3.由组培处理过的黑色96孔测定板而来的保留的清澈透明盖子(Costar 3916)
1.4.50mL试剂储液槽(Fisher Scientific–目录号：07-200-127，或等同物)
1.5.激光防护镜
1.6.剪成3/4英寸条带的箔粘性板封条(foil adhesive plate seals)(Thermo-Fisher–目录号：AB-0626)
1.7.带有一半水一半冰的冰盒
1.8.用于弃去的孔体积的废液缸
2.仪器
2.1.设定为37℃的水浴
2.2.设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱
2.3.Finnpipette 12通道数字型移液器(Fisher Scientific–目录号：21-377-830，或等同物)
2.4.1000瓦弧灯(arc lamp)电源(Oriel Model 68820)
2.5.带有2英寸聚光器(condenser)的灯室中的1000瓦无臭氧氙弧灯(分别为Newport 6271和Oriel 66921)
2.6.Newport 2英寸铝液体滤光器(Newport 6123)
2.7.反射镜固定器、光束转向组装件–2英寸系列(Newport 66246)，带有400-630nm二向色镜(Newport 66229)
2.8.透镜(Newport KPX22976.2直径×200mm焦距)
2.9.多重滤光器固定器，2in系列，最大厚度2×0.75in，通光孔径1.8in(Newport 6215)，配有50％红外截止滤光器(Newport 59042)和截止值650nm的滤光器(Andover Corporation Part No.650-FL07-50)
2.10.多重滤光器固定器，3in系列，最大厚度3×0.75in，通光孔径2.8in(Newport 6216)
2.11.塑料垫圈定距件(Newport 6215-503)
2.12.配有1/8”内径(i.d.)聚乙烯管线(tubing)的蠕动泵，用于对铝液体滤光器进行冷却
2.13.计时器
3.制备的试剂
3.1.不含酚红的RPMI-1640完全培养基
3.1.1.装入RPMI-1640基础培养基的500mL瓶
3.1.2.加入50mL HI-FBS
3.1.3.加入5.5mL 200mM L-谷氨酰胺
4.步骤
4.1.开始辐照步骤前，将不含酚红的RPMI-1640完全培养基(本方法中，以下称为完全培养基)和DPBS在设定为37℃的水浴中放置1小时。
4.2.在辐照前至少45分钟，进行如下步骤：
4.2.1.将约1/3体积的水倒入冰盒中，随后加入一半体积的冰。
4.2.2.将流动管线(flow tubing)放入冰盒中，将管线浸没，随后用冰将冰盒填充至顶部。
4.2.3.打开循环机，以至少6mL/分钟的流速启动循环水。
4.3.在辐照前15分钟，进行如下步骤：
4.3.1.打开氙灯电源，按下“输出预调节”按钮，保证指针移至1000瓦。
4.3.2.戴上护目镜，随后按下电源上的“启动灯”按钮，将灯点亮。
4.3.3.准备用于遮盖对照孔的粘性箔条。
4.4.在细胞已与孵育4小时后，将房间调暗，随后将细胞板从培养箱中拿出，置于生物安全柜内。
4.5.使用预热的溶液，用DPBS填充一个储液槽，用完全培养基填充另一个储液槽。
4.6.使用带有12个枪头的多通道移液器移出并弃去A1-D12孔的内容物，注意保持枪头位于孔边缘，以使对单层细胞的破坏最小化。弃去枪头。
4.7.使用带有12个枪头的多通道移液器移出并弃去E1-H12孔的内容物，注意保持枪头位于孔边缘，以使对单层细胞的破坏最小化。弃去枪头。
4.8.小心地将200μL预热的DPBS加回孔中，从而将药物冲洗出，随后移出并弃去该体积。
4.9.缓慢地将200μL预热的完全培养基加回全部的孔。
4.10.使用粘性箔带遮盖A10-H11孔，注意将整列都挡住，且临近的非对照列不被挡住。
4.11.将黑色的板盖子替换为清澈透明盖子，将板移至灯下的模板台(template stage)，开始辐照10分钟。
4.12.10分钟后，将板放回操作台，去除粘性箔，并换回黑色盖子。
4.13.将板放回培养箱中24小时，随后进行“对处理的A549细胞进行XTT染色的方法”。
在96孔测定板中对 处理的A549细胞进行XTT染色的方法
1.材料和试剂
1.1.50mL管子(Fisher Scientific–Cat.No.14-432-22，或等同物)
1.2.DPBS(Lonza–Cat.No.：17-512F，或等同物)
1.3.50mL试剂储液槽(Fisher Scientific–Cat.No.：07-200-127，或等同物)
1.4.XTT钠盐(Sigma–Cat No.：X4626，或等同物)
1.5.吩嗪硫酸甲酯(Sigma–Cat.No.：P9625)
2.仪器
2.1.设定为37℃的水浴
2.2.设定为37℃、具有5％CO2的加湿培养箱
2.3.Finnpipette 12通道数字型移液器(Fisher Scientific–Cat.No.：21-377-830，或等同物)
2.4.Spectramax 340PC酶标仪
3.制备的试剂
3.1.XTT染色液
3.1.1.计算所需的XTT粉末的合适量。
3.1.1.1.___板×5mg/板＝共需要XTT___mg
3.1.1.2.所需的DPBS总体积＝mgXTT＝___mL
3.1.2.将XTT粉末溶于所需体积的预热的DPBS中。
3.1.3.向每mL溶解的XTT粉末中加入40μL PMS储液。
3.1.3.1.__mL XTT溶液×40μL PMS储液＝__μL PMS储液
4.步骤
4.1.从培养箱中取出经处理的96孔板，将其置于操作台中。
4.2.将XTT染色液分配入50mL储液槽中。
4.3.将50μL XTT染色液直接加入板的孔中，随后将板在培养箱中放置4小时以上，直到颜色变化充分显现。
4.4.在显色后，检查孔中的气泡，使用喷枪(flamer)或其它方法去除这些气泡。
4.5.在Spectramax酶标仪上读板，并记录使用430nm波长的OD值。
3.旨在确定体外效价测定可行性的研究的结果
构建光学系统(optical train)，使得能够对96孔组织培养板进行均匀照明。用对细胞进行处理继以在400-650nm进行辐照，导致了剂量依赖性的细胞杀灭。建立了用于确定测试批次(testlot)的相对于参照标准品的效价的测定系统，并对其线性度、特异性和鲁棒性(robustness)进行了评估。
材料和方法
细胞和培养基
A549人肺癌细胞获得自ATCC，并在具有10％热失活的胎牛血清和2％L-谷氨酰胺的RPMI培养基中生长。
试剂和材料
(Lot No.：0G067，到期日为2012年10月31日)获得自Pinnacle Biologics，Inc.。SN-38来自LKT Labs(Cat.No.CO154；St.Paul，MN)。卡铂(Carboplatin)来自Sigma(Cat.No.C2538)，紫杉醇来自Sigma(Cat.No.T1912)
步骤总结
使用的辐照设备在图1-图9中示出，并在上文有所描述。实施例2中提供了测试方法的概述。实施例3中提供了测试方法的详细描述。
结果
辐照设备
氙弧灯产生明亮的宽泛波长的辐照束，准直后仍保持明亮的中心。需要将这样的光束强度缺乏均质性的情况最小化，从而实现对96孔板整个区域的均匀辐照。就这一目的而言，将两个平凸透镜引入光路，以接近柯勒照明(图1)。在的最初剂量范围研究(数据未示出)后，对含有A549细胞的测定板各孔进行1.5μg/mL的相同处理，以评估辐照的均质性。对于这一实验，相对于无药物的第二板细胞计算存活性百分数。观察到细胞杀灭程度在板上的不同位置变化显著：位于板中部的孔显示出无杀灭(103％的存活性)。为解决这一辐照的非均质性，将最后的带通滤光器与样品之间的间距提高至约2倍，从54cm提高至95.5cm，而将平凸透镜的第一表面维持在距离截止值650nm的滤光器13.6cm处。通过增加光路的长度，将辐照的中心区域扩大，从而覆盖整个板的区域(图13)。由于光路增长，整体辐照减少，使得需要使用更高的浓度。
板类型的影响
最初的实验使用标准的清澈透明96孔板进行。当使用具有黑色盖子的黑色板来进行该测定时，得到较高的EC50，表明外部(extraneous)光到达清澈透明板中的细胞并导致额外的细胞杀灭(参见图14A和图14B、表1)。使用黑色板使得相对于清澈透明板，EC50一致性地提高至4倍。
表1板类型对EC50的影响
实验 清澈透明板EC50 黑色板EC50
PIN-004 1.87 8.08
PIN-008 2.49 10.1
2.46 9.48
2.33 9.59
平均值 2.29 9.31
示出了来自两次实验的数据。的剂量响应曲线为九个点(250μg/mL-0.977μg/mL，PIN-004)或六个点(30.0μg/mL-1.09μg/mL，PIN-008)。
化疗药物的影响
对广谱活性的化疗药物SN-38(20μM最高剂量)、伊立替康的活性代谢产物、卡铂(7.5mM最高剂量)和紫杉醇(20μM最高剂量)进行测试，以确定在所期望的测定条件下(即24小时孵育和XTT终点)是否能够实现足够的细胞杀灭。在测定条件下这些药物均不能产生足够的细胞杀灭，从而无法用作阳性对照或系统适用性对照(数据未示出)。
测定终点的选择
XTT和MTT是用于对线粒体功能(作为细胞存活性的体现)进行测量的两种类型的甲染料。使用XTT或MTT作为终点做出的剂量响应曲线。利用这两个终点获得的结果存在约15％的不同，然而其各自都产生一致的值(参见如下表2)。由于未知的效价将会根据参照批次来确定，EC50的绝对值并不关键。由于使用MTT染料需要额外的增溶步骤，选择XTT用于本测定。
表2XTT和MTT测定终点的比较
实验 EC50-XTT EC50-MTT
PIN-009 9.48 8.28
9.42 8.11
平均值 9.45 8.20
位置效应
对96孔板内样品位置的效应进行研究。实验设计包括一系列板，其中，改变两种样品和对照的位置。该两种样品代表“标准”样品(其在板上的高测试浓度(high test concentration)为70μg/mL)和效果减弱(sub-potent)的“测试”样品(其为用培养基对标准品进一步进行两倍稀释的样品，从而其高测试浓度为35μg/mL)。当进行回归分析时，两种样品都被处理为假设高测试浓度为70μg/mL，因此使得测试样品看起来具有标准品一半的效价。各板的样品设置如下表3所述。分析结果总结在如下表4中。
表3位置效应的样品设置
表4位置分析的结果
在如表3所述进行设置后，对各板进行相同测定。使用Prism对每板上的两种样品各自的EC50进行计算。计算全部板上的EC50平均值和各样品间的变异系数(CV)。将平均效价计算为EC50(标准)/EC50(测试)之比。还计算了无药物、经辐照(-D,+L)并具有70μg/mL药物、无辐照(+D,-L)与细胞对照(CC，无药物、无辐照)之比。
测定线性度
通过将一系列效果过高(super-potent)和效果减弱的测试样品的实验得出的效价与理论效价进行比较，对测定线性度进行测试。为了最好地模拟不同效价的测试样品，将溶于1/4的标称溶解体积，从而生成理论效价为4的样品。在盐水中对该样品进行进一步稀释，从而生成标称效价为2、1、0.5和0.25的样品。随后对五种样品各自进行相同处理，在加入至测定板以用于确定相对于标称制备的样品(代表参照批次)的效价前，用培养基对这些样品进行稀释。这些分析的结果在如下表5中示出。在测试效价的极值4和0.25处，出现细胞杀灭过量或不足，EC50无法确定，或者所确定的EC50的置信区间很宽。
这些结果表明，需要仔细评定表观效价(apparent potencies)大于2或小于0.5的测试样品的批次，并且应考虑在测试样品的制备中进行调节，以在测定条件下获得适当的细胞杀灭量。
表5测定线性度
的理论效价和实验效价。理论效价反映了基于样品制备的预测效价。将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(变化的高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比得出。*EC50的置信区间宽是由于曲线拟合欠佳。**由于曲线拟合欠佳而无法计算。
鲁棒性测试
在以下系列的实验中，有意地对关键测定参数进行改变，以确定小的变化(variations)对于测定表现(performance)的影响。将所述变化设计为包括在测定的常规表现中会遇到的正常变化。
细胞接种密度
接种至96孔板各孔中的细胞数量不同于标称值1.0×104细胞/孔。测试的密度为0.8×104细胞/孔、1.0×104细胞/孔和1.2×104细胞/孔。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价(expected potency)为0.5。该实验的结果在如下表6中示出。结果表明，该测定可能对细胞接种密度敏感，约1.2×104的密度可导致效价确定不精确。
表6测定板接种密度的影响
接种密度 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
0.8×104细胞/孔 11.0 21.1 0.521
1.0×104细胞/孔 11.2 21.3 0.526
1.2×104细胞/孔 10.9 27.9 0.391
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比得出。*各条件的期望效价为0.5。
细胞传代数
当将A549细胞从液氮储库中取出时，初始传代数指定为P1。在本报告描述的实验实施过程中，这些细胞连续传代。在鲁棒性测试这方面的准备中，将第二瓶细胞解冻并进行培养。该实验比较了用第10代(P10)A549细胞与第17代(P17)A549细胞获得的结果。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价是0.5。该实验的结果在如下表7中示出。测试样品的P10数据不能得出很好的拟合回归，导致EC50值的置信区间很宽，然而，计算出的效价值接近期望值0.5。重要的是，用P17细胞进行的测定的EC50值和计算出的效价与测定中的P10数据以及测定的整体表现一致，表明P17细胞的适用性。
表7A549细胞传代数的影响
接种代数 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
P10 10.5 18.9** 0.556
P17 10.1 19.2 0.526
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。**置信区间宽是由于曲线拟合欠佳。
辐照时间
辐照时间从标称值10分钟改变为包括在8、9、10、11和12分钟的光辐照下进行的测定。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价为0.5。该实验的结果在如下表8中示出。该结果表明了随着辐照时间增加，EC50值降低的趋势。该效应在两种样品中似乎都是成比例的，并且在全部条件下都获得了在期望值0.5的11％内的效价。
表8辐照时间的影响
辐照时间 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
8分钟 12.0 24.5 0.490
9分钟 12.0 25.2 0.476
10分钟 11.1 22.8 0.487
11分钟 11.6 20.9 0.555
12分钟 10.8 21.0 0.514
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。吸收时间
使与细胞接触的时间量从标称值4小时改变为包括在吸收3.5、4和4.5小时进行的测定。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价为0.5。该实验的结果在如下表9中示出。EC50值与计算的效价的比较表明，与孵育4.5小时可影响EC50的绝对值，然而获得的效价值在期望值0.5的15％内。
表9吸收时间的影响
吸收时间 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
3.5小时 10.4 19.5 0.533
4.0小时 10.2 20.1 0.507
4.5小时 9.23 16.1 0.573
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。
辐照后的孵育时间
使在对细胞杀灭进行评价前对辐照板进行孵育的时间量从标称值24小时改变为包括在辐照后孵育22、24和26小时下进行的测定。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价为0.5。该实验的结果在如下表10中示出。EC50值与计算的效价的比较表明，22-26小时的辐照后孵育时间得出的效价在期望值的15％内。
表10辐照后的孵育时间的影响
辐照后时间 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
22小时 9.16 16.7 0.549
24小时 10.2 18.9 0.54
26小时 9.55 16.6 0.575
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。
辐照后的孵育温度
使在对细胞杀灭进行评价前对辐照板进行孵育的温度从标称值37℃改变为包括在35℃、37℃和39℃进行的测定。在各板上对标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)进行测定。测试样品的期望效价为0.5。该研究在两次实验中进行，各实验具有一个标称温度测定和一个测试温度测定。该实验的结果在如下表11中示出。结果表明，35℃-39℃的辐照后温度对样品的EC50或计算的效价几乎无影响。
表11辐照后的孵育温度的影响
辐照后温度 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
35℃ 9.68 21.6 0.448
37℃ 10.8 19.9 0.543
37℃ 9.9 20.0 0.495
39℃ 8.32 16.1 0.516
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。
不同操作者
测定可行性主要由KP(其被认为是实施该测定的专家)执行。为该研究的目的，通过让第二操作者AB观看KP操作和测定、并随后使用两个测定板(AB试用-1和AB试用-2)进行测定来对第二操作者AB进行培训。随后，AB与KP平行执行测定，以评估操作者间变化性(variability)。各操作者平行测定两个板，其含有标准样品(70μg/mL高测试浓度)和测试样品(35μg/mL高测试浓度)。测试样品的期望效价为0.5。该实验的结果在如下表12中示出。各样品获得的EC50绝对值存在操作者间的差异，AB一致性地获得低于KP的值。未观察到明显偏差(bias)，然而，在计算的样品效价中，全部效价值都在期望值0.5的13％内。这表明测定的EC50值可对操作者间的变化性敏感，然而计算的效价值是稳健的。对于EC50，为了将参照批次包括入系统适用性标准，需要通过对根本原因进行研究并进行适当修正操作，将EC50值的操作者间差异最小化。
表12操作者间变化性
操作者 EC50STD EC50测试 测试样品的效价*
AB试用测定-1 6.62 16.1 0.411
AB试用测定-2 6.76 12.6 0.537
操作者间测定
AB-1 6.37 13.7 0.465
AB-2 8.23 14.6 0.564
平均值 7.30 14.2 0.515
KP-1 9.45** 20.1 0.470
KP-2 9.96 19.8 0.503
平均值 0.971 20.0 0.487
将标准样品(70μg/mL高测试药物浓度)和测试样品(35μg/mL高测试药物浓度)的EC50值与实验得出的效价一起示出，所述实验得出的效价通过EC50(标准)/EC50(测试)之比计算出。*各条件的期望效价为0.5。**置信区间宽是由于曲线拟合欠佳。
总结：对照样品的表现(behavior)
系统适用性的关键方面将包括测定对照的可接受表现(acceptableperformance)。期望是，未接受药物但有光的细胞(-D,+L)以及接受高浓度药物但无光的细胞(+D,-L)的存活性应接近未接受药物或光的细胞对照(CC)的存活性。本报告中描述的实验的该分析的结果(在适用情况下)在如下表13中示出。全部样品的存活性百分数基于CC(将其设为1.00，其不包括在表内)。数据显示这些对照二者全部表现良好，平均值等于CC，变异系数为6-7％。
表13对照表现
将所指明的对照的存活性百分数制成表。+D,-L的阴影值来自于清澈透明板，显示出显著的细胞杀灭，将其从分析中排除。使用黑色板和盖子获得本表中的全部其它数据。

Claims (39)

1.一种照明系统，所述照明系统包含：
灯室，所述灯室包含灯和光口，其中，来自所述灯的广谱光经由所述光口离开所述灯室；
第一透镜，所述第一透镜使经由所述光口离开所述灯室的所述广谱光准直；
红外吸收滤光器，所述红外吸收滤光器传递准直广谱光的第一部分，并吸收通过所述光口并被所述第一透镜准直的所述广谱光中的红外光，其中，所述准直广谱光的第一部分包含所述准直广谱光的第二部分；
光学滤光器，在所述准直广谱光的第一部分到达所述光学滤光器后，所述光学滤光器传递所述准直广谱光的第二部分；以及
第二透镜，所述第二透镜使通过所述光学滤光器的准直光的第二部分分散。
2.如权利要求1所述的照明系统，其中，所述第一透镜包含会聚透镜。
3.如权利要求1所述的照明系统，其中，所述第一透镜包含菲涅耳透镜。
4.如权利要求1-3中任一项所述的照明系统，其中，所述灯包含氙弧灯。
5.如权利要求1-4中任一项所述的照明系统，其中，所述光学滤光器包含红外截止滤光器和短通滤光器。
6.如权利要求5所述的照明系统，其中，所述红外截止滤光器吸收所述准直广谱光的第一部分中的残留红外光；以及
其中，所述短通滤光器过滤掉所述准直广谱光的第一部分中波长大于650nm的光。
7.如权利要求5所述的照明系统，所述照明系统进一步包含：
反射器，所述反射器将通过所述红外吸收滤光器的所述准直广谱光的第一部分反射。
8.如权利要求7所述的照明系统，
其中，被所述反射器反射的所述准直广谱光的第一部分传播至所述红外截止滤光器；以及
其中，传播至所述红外截止滤光器的所述准直广谱光的第二部分，作为所述准直广谱光的第一部分中的一部分，通过所述红外截止滤光器并随后通过所述短通滤光器。
9.如权利要求7所述的照明系统，
其中，被所述反射器反射的所述准直广谱光的第一部分传播至所述短通滤光器；以及
其中，传播至所述短通滤光器的所述准直广谱光的第二部分，作为所述准直广谱光的第一部分中的一部分，通过所述短通滤光器并随后通过所述红外截止滤光器。
10.如权利要求7所述的照明系统，其中，所述反射器包含二向色镜。
11.如权利要求10所述的照明系统，其中，所述二向色镜将通过所述光口和所述红外吸收滤光器的至少一部分红外光吸收。
12.如权利要求1-11中任一项所述的照明系统，其中，所述光学滤光器包含带通滤光器。
13.如权利要求1-12中任一项所述的照明系统，其中，将所述灯室密封，从而使得来自所述灯的所述广谱光仅经由所述光口离开所述灯室。
14.如权利要求1-12中任一项所述的照明系统，其中，将所述灯室密封，从而使得少于1％的来自所述灯的所述广谱光经由非光口处离开所述灯室。
15.如权利要求1-14中任一项所述的照明系统，所述照明系统进一步包含：
环架；
第一支撑环，所述第一支撑环可拆卸地附接至所述环架；以及
基座。
16.如权利要求15所述的照明系统，
其中，所述第二透镜包含第一散光透镜和第二散光透镜；以及
其中，所述第一支撑环将所述第一散光透镜和所述第二散光透镜固定于合适位置。
17.如权利要求16所述的照明系统，
其中，所述第一散光透镜包含第一平凸透镜；
其中，所述第二散光透镜包含第二平凸透镜；
其中，所述第一平凸透镜包含第一平侧和第一凸侧；
其中，所述第二平凸透镜包含第二平侧和第二凸侧；以及
其中，所述第一凸侧邻近于所述第二凸侧，在所述第一凸侧和所述第二凸侧之间有间隙。
18.如权利要求17所述的照明系统，其中，所述间隙在2毫米至4毫米的范围内，包含端值。
19.如权利要求18所述的照明系统，其中，所述间隙为3毫米。
20.如权利要求1-19中任一项所述的照明系统，其中，所述红外吸收滤光器包含红外吸收液体滤光器。
21.如权利要求20所述的照明系统，其中，所述红外吸收液体滤光器吸收通过所述光口的所述广谱光中的红外光的90％-100％，包含端值。
22.如权利要求1-21中任一项所述的照明系统，所述照明系统进一步包含：
壁，
其中，所述光口位于所述壁内；以及
其中，所述第二透镜的位置在平行于所述壁的方向和垂直于所述壁的方向中的至少一个方向上是可调节的。
23.如权利要求22所述的照明系统，所述照明系统进一步包含：
搁架；以及
透镜滑动件，所述透镜滑动件包含用于传递光的第一孔，
其中，所述搁架包含平行于所述壁的搁架升降器；
其中，所述搁架包含垂直于所述壁的搁架顶部；
其中，所述搁架顶部包含用于传递光的第二孔；
其中，所述第二透镜可拆卸地附接至所述透镜滑动件；
其中，所述透镜滑动件可拆卸地附接至所述搁架顶部；以及
其中，所述第一孔的至少一部分在所述第二孔的至少一部分的上方或下方。
24.如权利要求23所述的照明系统，
其中，所述搁架升降器包含第一平行调节槽；以及
其中，所述搁架顶部包含第一垂直调节槽。
25.如权利要求24所述的照明系统，其中，所述壁包含基座壁和灯室壁。
26.如权利要求1-25中任一项所述的照明系统，
其中，所述灯室包含顶部；
其中，所述光口在所述顶部内；
其中，所述第一透镜在所述光口内；以及
其中，所述红外吸收滤光器、所述光学滤光器和所述第二透镜位于所述顶部上方的位置。
27.如权利要求1-25中任一项所述的照明系统，
其中，所述灯室包含底部；
其中，所述光口在所述底部内；
其中，所述第一透镜在所述光口内；以及
其中，所述红外吸收滤光器、所述光学滤光器和所述第二透镜位于所述底部下方的位置。
28.一种包括使用权利要求1-27中任一项所述的照明系统对细胞培养板内容物进行辐照的方法。
29.如权利要求28所述的方法，其中，所述细胞培养板包含光敏剂。
30.一种对光敏剂进行研究的方法，所述方法包括：
将所述光敏剂加至细胞培养板上的部分孔，从而形成光敏剂测定孔，所述孔包含癌细胞；
将所述光敏剂测定孔孵育第一预定时间段；
任选地对所述光敏剂测定孔进行洗涤；
利用如权利要求1-27中任一项所述的照明系统以预定波长对所述光敏剂测定孔进行辐照，从而形成辐照孔，其中，均匀地对每个孔进行辐照；
将所述辐照孔孵育第二预定时间段；以及
确定所述孔中含有的所述癌细胞的存活性百分数。
31.如权利要求30所述的方法，其中，对所述光敏剂测定孔进行洗涤的步骤为必需的。
32.如权利要求30或31所述的方法，其中，剩余部分的孔为对照孔。
33.如权利要求30-32中任一项所述的方法，其中，部分孔含有用于比较的参照药物。
34.如权利要求30-33中任一项所述的方法，其中，所述光敏剂为基于卟啉的抗肿瘤剂。
35.如权利要求34所述的方法，其中，所述基于卟啉的抗肿瘤剂为卟吩姆钠。
36.如权利要求30-35中任一项所述的方法，其中，使用400nm至650nm范围内的光对所述光敏剂测定孔进行辐照。
37.如权利要求30-36中任一项所述的方法，其中，所述癌细胞是A549人肺癌细胞。
38.如权利要求30-37中任一项所述的方法，其中，所述辐照步骤为标准化的。
39.如权利要求30-38中任一项所述的方法，其中，所述细胞培养板是不透明的黑色板。
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