CN104521903A - 柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法及其应用 - Google Patents

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李鸿筠
胡军华
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    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
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Abstract

本发明公开了一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，包括试虫自然接种饲养步骤，将供试药剂配制成设定浓度的药液的步骤；将盆栽苗木的带虫叶片整个浸泡于已配好的药液中，然后将浸泡过的带虫叶片用细软纱网封套起来步骤；将浸过药剂的盆栽苗木放在光暗周期L:D＝14∶10h，温度为25±1℃，相对湿度为75％的人工气候室中饲养的步骤；饲养24h后检查受试柑桔矢尖蚧的死亡与成活情况，记录其死亡数和成活数的步骤；采用活体植物对浸泡过药液的试虫进行培养，保证柑桔矢尖蚧食物的新鲜并为柑桔矢尖蚧提供充足的养分，通过模拟柑桔矢尖蚧的自然生长环境条件进行测试，有效提高生物测定结果的准确性和精确性，从而较为全面准确且精确的了解柑桔矢尖蚧种群抗性水平，为合理使用农药、制定抗性治理方案较为准确的提供依据。

Description

柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法及其应用
技术领域
本发明涉及植物虫害防治领域，特别涉及一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法及其应用。
背景技术
矢尖蚧成虫雌介壳箭头形，常微弯曲，长2—4mm，棕褐至黑褐色，边缘灰白色。前端尖、后端宽，1、2龄蜕皮壳黄褐色于介壳前端，介壳背面中央具l条明显的纵脊，其两侧有许多向前斜伸的横纹。以雌成虫和若虫固定在柑橘等植物叶片、枝梢、果实上吸食汁液，致叶片卷曲发黄凋落，枝条枯死，果实不能充分成熟，果味变酸，严重影响果实品质和产量。矢尖蚧生活习性：卵产于母体下，初孵若虫爬出母壳分散转移到枝、叶、果上固着寄生，仅1—2个小时即固着刺吸汁液，体渐缩短，次日开始分泌绵絮状蜡粉，2龄触角和足消失，于蜕皮壳下继续生长并分泌介壳，再蜕皮变为雌成虫。雄若虫1龄后即分泌绵絮状蜡质介壳。
室内生物测定是一种能够较全面、较准确了解昆虫田间种群抗性水平的手段，也是一种较为传统的了解抗性的方法，目前广泛使用的各种生物测定方法，如带叶浸苗法、点滴法，对供试昆虫损伤大，对照死亡率大，影响生测结果的准确性。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法及其应用，采用活体植物对浸泡过药液的试虫进行培养，保证柑桔矢尖蚧食物的新鲜并为柑桔矢尖蚧提供充足的养分，在柑桔矢尖蚧的所处的自然环境生长 条件下进行测试，同时又能避免柑桔矢尖蚧逃逸，有效提高生物测定结果的准确性和精确性，从而较为全面准确且精确的了解柑桔矢尖蚧种群抗性水平，为合理使用农药、制定抗性治理方案较为准确的提供依据。
本发明的柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，包括以下步骤：
a.试虫自然接种饲养：在柑桔矢尖蚧1龄若虫盛发期于野外采集发生危害严重的带虫柑桔叶片，将叶片上的若虫转移接种至待测试的盆栽苗木叶片上；
b.配药：将供试药剂配制成设定浓度的药液；
c.浸药：将盆栽苗木的带虫叶片整个浸泡于已配好的药液中；
d.室内饲养：将浸过药剂的盆栽苗木放在光暗周期L:D＝14∶10h，温度为25±1℃，相对湿度为75％的人工气候室中饲养；
e.结果检查：饲养24h后检查受试柑桔矢尖蚧的死亡与成活情况，记录其死亡数和成活数；
进一步，步骤a中，通过将叶片的带虫面与盆栽苗木叶片对接并用大头针固定，然后将盆栽苗木移入密闭网室进行自然接种饲养；
进一步，步骤c中，所述带虫叶片的浸泡时间为10秒。
本发明还公开一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法在植物保护领域中的应用。
本发明的有益效果：本发明的一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法及其应用，利用一龄若虫的可移动性进行自然接种，成活率更高，且不损伤试虫，采用活体植物对浸泡过药液的试虫进行培养，保证柑桔矢尖蚧食物的新鲜并为柑桔矢尖蚧提供充足的养分，通过模拟柑桔矢尖蚧的所处的自然生长环境进行测试，有效提高生物测定结果的准确性和精确性，从而较为全面准确且精确的了解柑桔矢尖蚧种群抗性水平，为合理使用农药、制定抗性治理方案较为准确的提供依据。
具体实施方式
本实施例的柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，包括以下步骤：
a.试虫自然接种饲养：在柑桔矢尖蚧1龄若虫盛发期于野外采集发生危害严重的带虫柑桔叶片，将叶片上的若虫转移接种至待测试的盆栽苗木叶片上；
b.配药：将供试药剂配制成设定浓度的药液；
c.浸药：将盆栽苗木的带虫叶片整个浸泡于已配好的药液中；
d.室内饲养：将浸过药剂的盆栽苗木放在光暗周期L:D＝14∶10h，温度为25±1℃，相对湿度为75％的人工气候室中饲养；
e.结果检查：饲养24h后检查受试柑桔矢尖蚧的死亡与成活情况，记录其死亡数和成活数；采用浸泡盆栽苗木的带虫叶片活体植物浸药并饲养的方式，模拟柑桔矢尖蚧的自然生长环境，无论是透气性和所食植物的新鲜度等都与自然条件并无差别，以此提高生物测定结果的准确性和精确性，从而较为全面准确且精确的了解柑桔矢尖蚧种群抗性水平，为合理使用农药、制定抗性治理方案较为准确的提供依据。
本实施例中，所述带虫叶片的浸泡时间为10秒；
本实施例中，通过将叶片的带虫面与盆栽苗木叶片对接并用大头针固定，然后将盆栽苗木移入密闭网室进行自然接种饲养.
将该柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法应用于植物保护领域中。
下面通过具体实施例对本发明做进一步的阐述。
实施例一
1.试虫培养条件 
在柑桔矢尖蚧1龄若虫盛发期(重庆4月下旬)，野外采集发生危害严重的柑桔叶片，带回室内，采用夹叶片法(就是把有虫的叶片一面对着盆栽苗木的叶片上，可以采用把室外幼虫叶片和盆栽叶片用大头针别在一起的方法接种)然后把盆栽苗木集中一个大的密闭网室进行自然接种饲养准备进行试验，待害虫转移接种后试验，试验时，挑选足够试验的矢尖蚧世代发生整齐的盆栽 苗木叶片进行试验，剔除不活跃和世代不整齐的个体，仅保留世代发育比较整齐的个体，然后把带虫枝条整个浸于已配好的不同浓度的药液中，浸渍时间10秒，然后把浸过药剂的盆栽苗木放在光暗周期为14∶10h、(25±1)℃、相对湿度75％的人工气候室中，每处理4次重复，正常饲养24h后检查死亡率，用剪刀剪取浸过药剂的网套枝条回实验室，用大头针检查试虫的死亡率。
2.试剂
2.1试验药剂
10％吡丙醚微乳剂    通用名：pyriproxyfen
10％啶虫脒醚微乳剂  通用名：acetamiprid
2.2其他试剂
二甲基甲酰胺(溶剂)
通用名Dimethylformamid成都鸿鹤化工试剂厂
3试验处理
3.1剂量设置
3.2试验重复
试验设置4次重复,每个重复30头以上的虫口.
3.3处理方式
3.3.1处理时间和次数
将饲养的柑桔矢尖蚧采用浸渍法进行处理,24小时后调查死亡情况,进行统计分析。
3.3.2使用器械和用药方法
用量筒，烧杯等器械首先将供试原药稀释到所需浓度的母液，然后用水稀释母液到预设的浓度，应用浸渍法对试虫进行处理。
3.3.2处理方法
将不同配比药剂按一定的比例分别配成5～7个稀释浓度，试验前先做预备试验选出供试药剂试验的最佳稀释浓度范围，根据预备试验选出的浓度范围将带有柑桔矢尖蚧的枝条浸入兑好的药液中浸10秒，另做4个浸清水作为对照，然后把浸过的盆栽苗木放在光暗周期为14∶10h、(25±1)℃、相对湿度75％的人工气候室中，每处理4次重复，正常饲养24h后检查死亡率，用剪刀剪取浸过药剂的网套枝条回实验室，检查死亡率。用机率值分析法计算毒力回归方程、LC50、标准误差等值。
4.计算方法
将浓度换算成ppm以后输入计算机(西南农业大学植物保护学院制作的irm软件)，得到毒力回归方程、LC50值、标准误差SD，根据LC50值和标准误计算95％置信限(见表1)。
5.评价
根据计算出的共毒系数(CTC)，5个配比中只4％吡·啶和8％吡·啶大于120，证明只这两个配比有增效作用，其中8％吡·啶(即1％吡丙醚+7％啶虫脒)的联合毒力最强，共毒系数为436.3539。根据计算结果，8％吡·啶LC50值比吡丙醚、啶虫脒单剂和其它配比小，表明矢尖蚧对8％吡·啶敏感；其SE值比其它配比和单剂小，表明毒力稳定性好，活性变幅小。同时吡丙醚的含量相对较低，成本比较低，增效作用最大。
表1吡丙醚·啶虫脒混剂防治柑桔矢尖蚧的毒力测定结果
表2吡丙醚·啶虫脒混剂防治矢尖蚧配方筛选原始数据表
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (4)

1.一种柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.试虫自然接种饲养：在柑桔矢尖蚧1龄若虫盛发期于野外采集发生危害严重的带虫柑桔叶片，将叶片上的若虫转移接种至待测试的盆栽苗木叶片上；
b.配药：将供试药剂配制成设定浓度的药液；
c.浸药：将盆栽苗木的带虫叶片整个浸泡于已配好的药液中；
d.室内饲养：将浸过药剂的盆栽苗木放在光暗周期L:D＝14∶10h，温度为25±1℃，相对湿度为75％的人工气候室中饲养；
e.结果检查：饲养24h后检查受试柑桔矢尖蚧的死亡与成活情况，记录其死亡数和成活数。
2.根据权利要求1所述的柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，其特征在于：步骤a中，通过将叶片的带虫面与盆栽苗木叶片对接并用大头针固定，然后将盆栽苗木移入密闭网室进行自然接种饲养。
3.根据权利要求2所述的柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法，其特征在于：步骤c中，所述带虫叶片的浸泡时间为10秒。
4.权利要求1～3任一项所述的柑桔矢尖蚧室内生物活性测定方法在植物保护领域中的应用。
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