CN104483470A - 一种无创性肝病检测诊断设备 - Google Patents

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余晓红
冯雨
杨旸
郑颖娟
黄幼玲
马珍珍
贺玲
詹秀英
吕宏迪
谢琳
杨廷桐
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Abstract

本发明公开了属于肝病治疗设备技术领域的一种无创性肝病检测诊断设备。其结构为：变压器的输出端与电源相连，变压器的另外两个输出端分别与多谐振荡器和射随跟随器相连，多谐振荡器与射随跟随器相连，射随跟随器与间歇振荡器相连，间歇振荡器与输出调波器相连，输出调波器通过导线与信号发射器相连，电源与操作台相连，操作台上设有全自动生化分析仪，血细胞分析仪，血凝仪和PCR检测设备。本发明的无创性肝病检测诊断系统，使得肝病的诊断无创伤增加了诊断效率，使用安全简单。

Description

一种无创性肝病检测诊断设备
技术领域
本发明属于肝病检测诊断设备技术领域，具体涉及一种无创性肝病检测诊断设备。
背景技术
乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒感染引起的以肝脏损害为主的传染病，逐步的由急性-慢性-纤维化-肝硬化-到肝癌的发展过程。HBV感染后有10％的感染者转化为慢性乙肝，慢性乙肝患者中有10％左右转化为肝硬化，肝硬化患者中又有10％发展为肝癌。乙肝不仅严重危害居民的健康而且造成严重的经济负担，因此己成为了社会严重的公共卫生问题，
在国际上，澳大利亚、北美和西欧国家乙肝表面HBV总感染率为4-6％，属于低流行区，东欧、日本、前苏联、地中海、南美地区HBv总感染率为20-50％，属于中流行地区；中国、南非、东南亚地区HBV总感染率＞50％，属于高流行区。据估计，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.6亿人为慢性HBV感染者，每年约有60万人死于与HBV有关的肝病或肝癌。
在慢性乙型肝炎长期的病程中，由于病毒感染持续，肝脏发生反复的炎症坏死激起再生修复，肝星状细胞活化，细胞外基质异常沉积引起肝纤维化，最终可导致肝硬化。病变继续活动，发生失代偿性肝硬化，最终发展为肝细胞肝癌。据世界卫生组织估计，约20％的慢性乙肝将发展成为肝硬化，HBV感染是引起肝硬化和HCC的主要原因，全球30％的肝硬化由HBV感染引起，而中国50％左右的肝硬化为HBV感染造成。
肝炎-纤维化-肝硬化是一个动态演变过程。慢性乙型肝炎的临床表现及病理生理过程非常复杂，因而临床上对肝组织病变活动程度判断较难。目前肝活组织检查被认为是诊断肝炎-纤维化-肝硬化的金标准，其优势不言而喻。但肝穿刺具有创伤性，有时可出现某些并发症，患者较难接受，难以在临床实践中广泛应用，且重复性差，更不易应用于治疗的随访研究，也存在着抽样误差和不同观察者间变异的局限性。虽然可以通过获得足够长度的肝组织和经验丰富的病理学家来缩小这些误差，但仍然存在着分级错误的风险。因此，最近有欧洲学者提出应该把肝穿刺活组织检查作为最好的分级标准而不是金标准。另外，由于该检查是一项有创性操作而难以普遍开展，更难以多次动态观察，故国内外学者一直致力于寻找无创性的诊断方法。
目前临床上仍然缺乏安全、简便、准确、重复性好的理想肝功能检测手段。传统的肝功能血清学检查，由于其特异性较差且肝脏的代偿功能大，因而指标的高低与肝细胞损害不成正比，而一些定量肝功能动态试验如引噪靛氰绿试验、磺澳肤钠排泄试验等，由于试验时间长，操作复杂、有创伤性以及试验药物潜在的药理学不良反应，导致患者耐受性差。在临床上未得以广泛应用。因此寻求建立了肝炎-肝纤维化-肝硬化非创伤性综合指标的诊断模式已经摆在了医学研究者的面前。研究肝炎-纤维化-肝硬化尤其是血清学指标与病理变化相结合是其关键，寻找早期诊断，评估进展，演变过程，预后的生物学标志物对于患者和临床医生都是重中之重。迄今为止尚未见到有类似的研究报道。国内外对于患者肝组织病变程度的非创伤性方法的研究是目前医疗界临床研究的热点与重点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种无创性肝病检测诊断设备。
一种无创性肝病检测诊断设备，它包括电源1，变压器2，多谐振荡器3，射随跟随器4，间歇振荡器5，输出调波器6，变压器2的输出端与电源1相连，变压器2的另外两个输出端分别与多谐振荡器3和射随跟随器4相连，多谐振荡器3与射随跟随器4相连，射随跟随器4与间歇振荡器5相连，间歇振荡器5与输出调波器6相连，输出调波器6通过导线与信号发射器7相连，所述电源1与操作台8相连，操作台8上设有全自动生化分析仪9，血细胞分析仪10，血凝仪11和PCR检测设备12。
所述操作台8上还设有无影灯。
所述全自动生化分析仪9用于检测血清肝功能、肝纤维化指标以及TGF-B1。
所述血细胞分析仪10用于检测血小板、红细胞、白细胞指标。
所述血凝仪11用于检测凝血指标。
所述PCR检测设备12用于筛查肝病病毒基因组分。
本发明的有益效果：本发明的无创性肝病检测诊断设备，使得肝病的诊断无创伤增加了诊断效率，使用安全简单。
附图说明
图1为本发明无创性肝病检测诊断设备结构示意图；
图中，1-电源，2-变压器，3-多谐振荡器，4-射随跟随器，5-间歇振荡器，6-输出调波器，7-信号发射器，8-操作台，9-全自动生化分析仪，10-血细胞分析仪，11-血凝仪，12-PCR检测设备。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种无创性肝病检测诊断设备，如图1所示，它包括电源1，变压器2，多谐振荡器3，射随跟随器4，间歇振荡器5，输出调波器6，变压器2的输出端与电源1相连，变压器2的另外两个输出端分别与多谐振荡器3和射随跟随器4相连，多谐振荡器3与射随跟随器4相连，射随跟随器4与间歇振荡器5相连，间歇振荡器5与输出调波器6相连，输出调波器6通过导线与信号发射器7相连，所述电源1与操作台8相连，操作台8上设有全自动生化分析仪9，血细胞分析仪10，血凝仪11和PCR检测设备12。所述操作台8上还设有无影灯。所述全自动生化分析仪9用于检测血清肝功能、肝纤维化指标以及TGF-B1。所述血细胞分析仪10用于检测血小板、红细胞、白细胞指标。所述血凝仪11用于检测凝血指标。所述PCR检测设备12用于筛查肝病病毒基因组分。
本实施例的肝病诊断芯片用于快速诊断肝病及其发病程度。本实施例的电源1采用220V，经变压器2变压或直接采用直流18V以下电源供电，经变压器2变压后的电流进入多谢振荡器，产生方波输给射随跟随器4，经射随跟随器4控制后的波形输入给间歇振荡器5，产生脉冲波形，脉冲波扫描患者病变部位，感受病人磁场变化，产生新的脉冲波信号，经输出调波器输出给导线，传递给信号发射器7，信号发射器7发射信号，传递给检测室的电脑设备用于分析。操作台8上设置的全自动生化分析仪9，血细胞分析仪10，血凝仪11和PCR检测设备12，用于全方位检测患者的患病信息，并追根溯源，得到最好的治疗建议。
应用本设备的受检对象均于取清晨空腹静脉血检测相关指标。肝功能指标包括：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丫一谷氨酞基转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)，采用美国Abbott公司生产的全自动生物化学分析仪。血小板参数包括：血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDw)，采用美国雅培公司CELL一DYN18oo型全自动血细胞分析仪检测。
采用PCR检测设备12进行PCR检测的步骤如下：
RNA的提取步骤：
肝切片组织中加入0.5mlTrizol后室温静置至充分溶解；加入氯仿0.1ml，充分震荡混匀后，4oC、12,000印m离心15min；将上清转移至另一洁净Eppendorf管中，加入异丙醇0.sml，上下颠倒混匀5次，室温静置10分钟，然后4oC、12,000印m离心10min后Eppendorf管底部可见白色片状沉淀；弃上清，加入1ml750,0的乙醇洗涤沉淀，4oC、7,500印m离心5min，小心倒去液体，空气中干燥短时间后加入20川DEPC水，用吸头反复吹打混匀，使其充分溶解.取总RNA标本2ml，稀释后在蛋白/核酸分析仪上测定OD值，计算RNA浓度；取适量总RNA标本，1.5％琼脂糖凝胶电泳(100V，20min)，紫外灯下观察其质量；RNA置于-70’C保存。
逆转录合成cDNA
(1)取总RNA1mg，逆转引物1ml(1mg单1)，加dEpe水至总体积12ml，轻轻混匀，70oC孵育5min后，立即置冰上30s；
(2)于冰上依次加入缓冲液4ml，lomMdNTp2ml，40U小1RNA酶抑制剂1ml，轻轻混匀，离心3～5s，37oC孵育5min；
(3)于冰上加入200U/mM-MLV逆转录酶1ml，总反应体积20ml，混匀后42oC孵育60min，然后70oC孵育10min，终止反应。
(4)cDNA于-20oC保存。
Real-timePCR
在每25mlpCR反应体系中含1mlcDNA，12.51SYBRMaster而x荧光染料混合物，上、下游引物各0.2ml。扩增条件为：预变性95oC10min；变性95oC15s，退火及延伸60OC1min，循环数为45。
PCR扩增
扩增反应体系(总体积为15mL)扩增反应流程：94oC变性5min；94oC变性355，59℃退火35s，72oC延伸35s，共36个循环；最后为72℃延伸10min，4℃保存。

Claims (6)

1.一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，它包括电源(1)，变压器(2)，多谐振荡器(3)，射随跟随器(4)，间歇振荡器(5)，输出调波器(6)，变压器(2)的输出端与电源(1)相连，变压器(2)的另外两个输出端分别与多谐振荡器(3)和射随跟随器(4)相连，多谐振荡器(3)与射随跟随器(4)相连，射随跟随器(4)与间歇振荡器(5)相连，间歇振荡器(5)与输出调波器(6)相连，输出调波器(6)通过导线与信号发射器(7)相连，所述电源(1)与操作台(8)相连，操作台(8)上设有全自动生化分析仪(9)，血细胞分析仪(10)，血凝仪(11)和PCR检测设备(12)。
2.根据权利要求1所述一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，所述操作台(8)上还设有无影灯。
3.根据权利要求1所述一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，所述全自动生化分析仪(9)用于检测血清肝功能、肝纤维化指标以及TGF-B1。
4.根据权利要求1所述一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，所述血细胞分析仪(10)用于检测血小板、红细胞、白细胞指标。
5.根据权利要求1所述一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，所述血凝仪(11)用于检测凝血指标。
6.根据权利要求1所述一种无创性肝病检测诊断设备，其特征在于，所述PCR检测设备(12)用于筛查肝病病毒基因组分。
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