CN104478616A - 一种高含量无机生物菌肥及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种高含量无机生物菌肥及其制备方法,本发明的生物菌肥是将解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的混合菌粉吸附在无机肥颗粒上,并在多种保护剂存在下保证在氮、磷、钾含量较高时生物菌仍能够存活,并具有较高的活性。本发明的制备方法是将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌三种菌液混合后制成高浓度混合菌粉,然后吸附在无机肥颗粒的表面,在其制备过程中,加入多种保护剂,从而保证了在较高氮、磷、钾含量的情况下微生物仍能够存活,并保持较高活性。

Description

一种高含量无机生物菌肥及其制备方法
技术领域
本发明属于微生物菌肥领域,具体是一种高含量无机生物菌肥及其制备方法。
背景技术
近年来,我国农业生产对肥料的需求量不断增加,由于化学肥料价格上涨,且大量使用造成环境污染及农产品污染,国家开始重视新型肥料特别是微生物菌肥的生产与使用。微生物菌肥是一类含有活体微生物的新型肥料,通过特定菌株代谢活动作用于作物和土壤,还可活化土壤微生物生态环境。
土壤主要由矿物质、有机质和微生物三大部分组成,土壤微生物的活性,对植物根部营养非常重要,因为土壤中的有益微生物直接参与土壤肥力的形成,包括土壤中物质和能量的转化、腐植质的形成和分解、养分的释放、氮素的固定等等。但纯自然状态下有益微生物数量不够,作用力也有限。因此,采用人为方式向土壤中添加有益微生物,就能够增加土壤中微生物的数量,增加微生物的整体活性,从而明显提高土壤的肥力。根据我国作物种类和土壤条件,采用微生物肥料与化肥配合施用,既能使作物增产,减少化肥使用量,降低成本,还能改善土壤及作物品质,减少污染。
复合微生物肥料由于含有大量的生物菌,其中有益菌在土壤中的增殖及代谢会抑制有害菌的生长,从而减轻农作物病害的发生,对于维护土壤健康也有一定作用。通过生物菌的活动,不但可以改变土壤的理化性状,提高土壤有机质的含量和转化效率,而且具有解钾、释磷、固氮的功能。生物菌肥施入土壤后,生物菌很快增殖,形成群体优势分解土壤中被固定的且植物不能吸收利用的氮、磷、钾,并固定空气中的游离氮,供作物吸收利用。生物菌肥本身无毒、无残留,且能分解土壤中化肥、农药的残留,溶解污水灌溉后的重金属残留,净化和修复土壤,提高作物产量和农产品品质。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种高含量无机生物菌肥及其制备方法,该生物菌肥是将解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的混合菌粉吸附在无机肥颗粒上,并在多种保护剂存在下保证在氮、磷、钾含量较高时生物菌仍能够存活,并具有较高的活性。
为解决上述技术问题,本发明提供了一种高含量无机生物菌肥,包括:
无机肥:400重量份;
解淀粉芽孢杆菌液:0.4重量份;
地衣芽孢杆菌液:0.4重量份;
枯草芽孢杆菌液:0.2重量份;
脱脂奶粉:0.05~0.10重量份;
粒径≥600目的二氧化硅:1.10~1.26重量份;
粒径≥200目的铁黑:0.2~0.4重量份;
碳酸钙:1.8~3.6重量份;
甘油:2重量份;
所述无机肥为N-P2O5-K2O总含量≥45%的无机复合肥,所述无机复合肥为颗粒状。
本发明的生物菌肥既具有高浓度无机肥的特性,又具有微生物菌肥特性,富含农作物所需的多种无机矿物元素,易被作物直接吸收利用,适用于多种作物、多种土壤,其中有益菌参与土壤中物质和能量的转化、腐植质的形成和分解、养分的释放、氮素的固定等,即能增强土壤肥力,又能改善土壤理化性质,从而改善土壤和作物品质。
为解决上述技术问题,本发明还提供了这种高含量无机生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.0~4.5重量份豆粉、2.6~3.0重量份玉米粉和0.42~0.50重量份葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有4.5~5.1重量份豆粉、3.2~3.5重量份玉米粉、0.50~0.58重量份葡萄糖和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.0~2.5重量份淀粉、3.0~3.2重量份蛋白胨、2.1~2.5重量份牛肉浸膏、3.5~3.8重量份葡萄糖和1.8~2.4重量份氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有2.5~3.0重量份淀粉、3.0~3.2重量份蛋白胨、2.5~2.8重量份牛肉浸膏、3.5~3.8重量份葡萄糖、2.0~2.6重量份氯化钠和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.2~3.6重量份棉籽饼粉、2.0~2.5重量份玉米粉、0.50~0.55重量份葡萄糖、0.80~1.20重量份氯化钠和1.0~1.2重量份磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.5~4.0重量份棉籽饼粉、2.5~3.0重量份玉米粉、0.50~0.55重量份葡萄糖、0.80~1.20重量份氯化钠、1.0~1.5重量份磷酸二氢钾和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、取40重量份解淀粉芽孢杆菌菌液、40重量份枯草芽孢杆菌菌液和20重量份地衣芽孢杆菌菌液混合,再加入5~10重量份脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100重量份混合菌液与100~120重量份粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向400重量份经过筛分无粉末的无机复合肥中加入2重量份甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入0.2~0.4重量份粒径≥200目的铁黑和1.8~3.6重量份碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入2.2~2.31重量份混合菌粉,混合均匀后,检验、包装即可。
本发明的方法是将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌三种菌液混合后制成高浓度混合菌粉,然后吸附在无机肥颗粒的表面,在其制备过程中,加入多种保护剂,从而保证了在较高氮、磷、钾含量的情况下微生物仍能够存活,并保持较高活性。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对发明作进一步说明。此处所描述的具体实施方式仅以解释发明,并不用于限定本发明的保护范围。
实施例一
高含量无机生物菌肥,包括:
N15-P15-K15的无机复合肥:1T;
解淀粉芽孢杆菌液:1kg;
地衣芽孢杆菌液:1kg;
枯草芽孢杆菌液:500g;
脱脂奶粉:250g;
粒径≥600目的二氧化硅:2.75kg;
粒径≥200目的铁黑:0.5kg;
碳酸钙:4.5kg;
甘油:5kg;
所述无机复合肥为颗粒状。
其制备方法包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.0kg豆粉、3.0kg玉米粉和0.42kg葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有4.5kg豆粉、3.5kg玉米粉、0.50kg葡萄糖和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.5kg淀粉、3.0kg蛋白胨、2.1kg牛肉浸膏、3.8kg葡萄糖和1.8kg氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.0kg淀粉、3.0kg蛋白胨、2.5kg牛肉浸膏、3.8kg葡萄糖、2.0kg氯化钠和0.01kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.6kg棉籽饼粉、2.0kg玉米粉、0.50kg葡萄糖、1.20kg氯化钠和1.0kg磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有4.0kg棉籽饼粉、2.5kg玉米粉、0.55kg葡萄糖、1.20kg氯化钠、1.5kg磷酸二氢钾和0.01kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、分别取40kg解淀粉芽孢杆菌菌液、40kg枯草芽孢杆菌菌液和20kg地衣芽孢杆菌菌液混合,加入10kg脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100kg混合菌液与100kg粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到有效活菌数为100亿/克的混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向1T经过筛分无粉末的无机复合肥中加入5kg甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入0.5kg粒径≥200目的铁黑和4.5kg碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入5.5kg混合菌粉,混合均匀后,制得有效活菌数为0.4~0.5亿/克的高含量无机生物菌肥,然后检验、包装即可。
实施例二
高含量无机生物菌肥,包括:
N20-P15-K15的无机复合肥:1T;
解淀粉芽孢杆菌液:1kg;
地衣芽孢杆菌液:1kg;
枯草芽孢杆菌液:500g;
脱脂奶粉:125g;
粒径≥600目的二氧化硅:3.15kg;
粒径≥200目的铁黑:0.8kg;
碳酸钙:7.2kg;
甘油:5kg;
所述无机复合肥为颗粒状。
其制备方法包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.5kg豆粉、2.6kg玉米粉和0.50kg葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有5.1kg豆粉、3.2kg玉米粉、0.58kg葡萄糖和0.01kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.0kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.5kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖和2.4kg氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有2.5kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.8kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖、2.6kg氯化钠和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.2kg棉籽饼粉、2.5kg玉米粉、0.55kg葡萄糖、0.80kg氯化钠和1.2kg磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.5kg棉籽饼粉、3.0kg玉米粉、0.50kg葡萄糖、0.80kg氯化钠、1.0kg磷酸二氢钾和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、分别取40kg解淀粉芽孢杆菌菌液、40kg枯草芽孢杆菌菌液和20kg地衣芽孢杆菌菌液混合,加入5kg脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100kg混合菌液与120kg粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到有效活菌数为100亿/克的混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向1T经过筛分无粉末的无机复合肥中加入5kg甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入0.8kg粒径≥200目的铁黑和7.2kg碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入5.775kg混合菌粉,混合均匀后,制得有效活菌数为0.4~0.5亿/克的高含量无机生物菌肥,然后检验、包装即可。
实施例三
高含量无机生物菌肥,包括:
N20-P15-K10的无机复合肥:1T;
解淀粉芽孢杆菌液:1kg;
地衣芽孢杆菌液:1kg;
枯草芽孢杆菌液:500g;
脱脂奶粉:200g;
粒径≥600目的二氧化硅:3kg;
粒径≥200目的铁黑:1kg;
碳酸钙:9kg
甘油:5kg;
所述无机复合肥为颗粒状。
其制备方法包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.5kg豆粉、2.6kg玉米粉和0.50kg葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有5.1kg豆粉、3.2kg玉米粉、0.58kg葡萄糖和0.01kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.0kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.5kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖和2.4kg氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有2.5kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.8kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖、2.6kg氯化钠和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.2kg棉籽饼粉、2.5kg玉米粉、0.55kg葡萄糖、0.80kg氯化钠和1.2kg磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.5kg棉籽饼粉、3.0kg玉米粉、0.50kg葡萄糖、0.80kg氯化钠、1.0kg磷酸二氢钾和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、分别取40kg解淀粉芽孢杆菌菌液、40kg枯草芽孢杆菌菌液和20kg地衣芽孢杆菌菌液混合,加入8kg脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100kg混合菌液与111kg粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到有效活菌数为100亿/克的混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向1T经过筛分无粉末的无机复合肥中加入5kg甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入1kg粒径≥200目的铁黑和9kg碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入5.7kg混合菌粉,混合均匀后,制得有效活菌数为0.4~0.5亿/克的高含量无机生物菌肥,然后检验、包装即可。
实施例四
高含量无机生物菌肥,包括:
N20-P15-K15的无机复合肥:1T;
解淀粉芽孢杆菌液:1kg;
地衣芽孢杆菌液:1kg;
枯草芽孢杆菌液:500g;
脱脂奶粉:150g;
粒径≥600目的二氧化硅:3kg;
粒径≥200目的铁黑:0.9kg;
碳酸钙:8.1kg;
甘油:5kg;
所述无机复合肥为颗粒状。
其制备方法包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.5kg豆粉、2.6kg玉米粉和0.50kg葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有5.1kg豆粉、3.2kg玉米粉、0.58kg葡萄糖和0.01kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.0kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.5kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖和2.4kg氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有2.5kg淀粉、3.2kg蛋白胨、2.8kg牛肉浸膏、3.5kg葡萄糖、2.6kg氯化钠和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.2kg棉籽饼粉、2.5kg玉米粉、0.55kg葡萄糖、0.80kg氯化钠和1.2kg磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.5kg棉籽饼粉、3.0kg玉米粉、0.50kg葡萄糖、0.80kg氯化钠、1.0kg磷酸二氢钾和0.02kg硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、分别取40kg解淀粉芽孢杆菌菌液、40kg枯草芽孢杆菌菌液和20kg地衣芽孢杆菌菌液混合,加入6kg脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100kg混合菌液与113kg粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到有效活菌数为100亿/克的混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向1T经过筛分无粉末的无机复合肥中加入5kg甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入0.9kg粒径≥200目的铁黑和8.1kg碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入5.65kg混合菌粉,混合均匀后,制得有效活菌数为0.4~0.5亿/克的高含量无机生物菌肥,然后检验、包装即可。

Claims (2)

1.一种高含量无机生物菌肥,其特征在于,包括:
无机肥:400重量份;
解淀粉芽孢杆菌液:0.4重量份;
地衣芽孢杆菌液:0.4重量份;
枯草芽孢杆菌液:0.2重量份;
脱脂奶粉:0.05~0.10重量份;
粒径≥600目的二氧化硅:1.10~1.26重量份;
粒径≥200目的铁黑:0.2~0.4重量份;
碳酸钙:1.8~3.6重量份;
甘油:2重量份;
所述无机肥为N-P2O5-K2O总含量≥45%的无机复合肥,所述无机复合肥为颗粒状。
2.一种制备如权利要求1所述的高含量无机生物菌肥的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)混合菌液的制备:
1)、解淀粉芽孢杆菌菌液的制备:
将解淀粉芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有4.0~4.5重量份豆粉、2.6~3.0重量份玉米粉和0.42~0.50重量份葡萄糖的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再菌体无菌转入已灭菌的含有4.5~5.1重量份豆粉、3.2~3.5重量份玉米粉、0.50~0.58重量份葡萄糖和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为180rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到解淀粉芽孢杆菌菌液;
2)、枯草芽孢杆菌菌液的制备:
将枯草芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有2.0~2.5重量份淀粉、3.0~3.2重量份蛋白胨、2.1~2.5重量份牛肉浸膏、3.5~3.8重量份葡萄糖和1.8~2.4重量份氯化钠的一级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有2.5~3.0重量份淀粉、3.0~3.2重量份蛋白胨、2.5~2.8重量份牛肉浸膏、3.5~3.8重量份葡萄糖、2.0~2.6重量份氯化钠和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在35~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到枯草芽孢杆菌菌液;
3)、地衣芽孢杆菌菌液的制备:
将地衣芽孢杆菌菌种经斜面活化、摇床培养制备成种子液;然后将制备的种子液无菌转入已灭菌的含有3.2~3.6重量份棉籽饼粉、2.0~2.5重量份玉米粉、0.50~0.55重量份葡萄糖、0.80~1.20重量份氯化钠和1.0~1.2重量份磷酸二氢钾的一级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至菌体生长达到对数期;最后再将菌体无菌转入已灭菌的含有3.5~4.0重量份棉籽饼粉、2.5~3.0重量份玉米粉、0.50~0.55重量份葡萄糖、0.80~1.20重量份氯化钠、1.0~1.5重量份磷酸二氢钾和0.01~0.02重量份硫酸锰的二级发酵罐中,控制温度在32~37℃,转速为200rpm培养至产芽孢率达到85%时停罐,得到地衣芽孢杆菌菌液;
4)、取40重量份解淀粉芽孢杆菌菌液、40重量份枯草芽孢杆菌菌液和20重量份地衣芽孢杆菌菌液混合,再加入5~10重量份脱脂奶粉,搅拌均匀,得混合菌液;
(2)混合菌粉的制备:
将100重量份混合菌液与100~120重量份粒径≥600目的二氧化硅混合均匀,干燥,得到混合菌粉;
(3)混合菌粉与无机复合肥混合:
向400重量份经过筛分无粉末的无机复合肥中加入2重量份甘油,在搅拌机I中搅拌均匀后,将混合物转入搅拌机II中,加入0.2~0.4重量份粒径≥200目的铁黑和1.8~3.6重量份碳酸钙,搅拌均匀后,再转入搅拌机III中,加入2.2~2.31重量份混合菌粉,混合均匀后,检验、包装即可。
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