CN1044722C - 一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 - Google Patents
一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1044722C CN1044722C CN95105969A CN95105969A CN1044722C CN 1044722 C CN1044722 C CN 1044722C CN 95105969 A CN95105969 A CN 95105969A CN 95105969 A CN95105969 A CN 95105969A CN 1044722 C CN1044722 C CN 1044722C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid
- slide
- dyeing
- staining
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Coloring (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明属于一种细菌染色用试剂以及使用该试剂染色方法。该试剂分为A、B、C三种溶液,主要由三氯化铁、甲醛、单宁酸、氢氧化钠、硝酸根、氨水等配制而成,该试剂可长期贮存而不失效,用于细菌鞭毛染色细菌培养只需5-8小时即可,染色时间缩短为40-90秒,制片可在37℃温箱中干燥,因而染色速度快,操作简便。本发明方法染色后的细菌鞭毛粗大、清晰、立体感强,易于辩认。
Description
本发明属于一种细菌染色用试剂,以及使用该试剂染色的方法。
细菌鞭毛极为纤细,因此在普通光学显微镜中不能看到,通常采用一些特殊的染色方法将鞭毛显示出来。鞭毛染色的主要原理都是采用不稳定的胶体溶液作媒染剂,在鞭毛上生成沉淀,然后再进行染色。镀银染色法是一种常用的方法。原有的镀银染色法所使用的试剂包括甲液和乙液。甲液由丹宁酸、三氯化铁,福尔马林、氢氧化钠和蒸馏水配制而成,乙液为硝酸银溶液。上述试剂配备好后应在当日内使用,次日效果就较差,第三日该试剂就不能使用了。由于这种试剂不能长期贮存因此为实际工作造成很多麻烦。原有镀银染色法对菌种要求高,一般应接种后培养16-24小时后使用,如长期未移种,最好连续移种2-3次后再使用。另外染色过程中涂片是在室温下干燥,染色时间需三到五分钟。因此染色的整个操作时间较长。另外此法染色后鞭毛仍很纤细有清晰,效果不稳定,成功率低。
本发明目的是为镀银法细菌鞭毛染色提供一种新的试剂及其染色方法。该试剂可长期贮存不失效,染色操作简便、速度快,并且染色效果好。
本发明目的是通过如下方案实现的:本发明染色试剂包括有A液、B液、C液、A、B、C三种溶液配为:
A液:1.5-2.5%FeCL3水溶液 50ml
36%甲醛 0.3-0.5ml
B液:20%单宁酸 10-25ml
1.0mol/l NaOH水溶液 0.1-0.4ml
蒸馏水 24.6-39.9ml
C液:2%AgNO3水溶液 50ml
浓氨水 0.90-0.93ml
本发明试剂的染色方法如下:在清洁的载玻片上滴加少许蒸馏水,用灭菌接种针在经5-8小时培养的新鲜单个菌落上挑取少量菌苔点滴在载玻片上,玻片倾斜使菌液涂在玻片上,干燥后备用。取洁净试管滴加等量的A液与B液充分混匀,加热到出现蒸气颜色由黑兰变为透明棕色为止。稍冷却后滴在载玻片上染片40-90秒用流水洗尽。滴加C液后将玻片置于酒精灯上稍加热至产生微量蒸气而不干,染色30-60秒后流水洗去染液。
下面详细叙述本发明技术内容。
一、染色试剂的制备:
A液:1.5-2.5%FeCL3水溶液50ml加入36%甲醛0.3-0.5ml混匀。
B液:20%单宁酸10-25ml加1.0mol/L NaOH水溶液
0.1-0.4ml混匀后加水补充至50ml。
C液:2%AgNO3水溶液50ml缓慢加入浓氨水至出现很浓的沉淀,边摇动边继续滴入浓氨水到恰好沉淀消失成澄清液为止。
二、染色方法:
1、玻片的清洗:同常规方法
2、制片:在清洁的载玻片一端滴少许蒸镏水,用灭菌接种针沾少量蒸镏水在培养5-8小时的新鲜单个菌落上挑取少量菌苔轻轻点滴在载玻片上。将载玻片缓缓倾斜菌液涂布在玻片上,可在室温下自然干燥,也可放入37℃恒温箱中干燥。
3、染色:取一洁净试管滴加等量A液与B液充分混匀,加热到出现蒸气颜色由黑兰变为透明棕色止。稍冷后(不烫手)在玻片上滴加少许上述混合液染片40-90秒,然后用流水缓缓洗尽。再滴加少许C液,将玻片置于酒精灯上稍加热至微量冒蒸气而不干,染色30-60秒用流水冲去染液即可。
本发明试剂由于采用了分别配制的A、B、C三种溶液,因而可以长期贮存而不失效,使用时将A液与B液混合加热染片,再加C液染色。使用本发明试剂染色细菌只需培养5-8小时即可染色,同时染色的时间从3-5分钟缩短40至90秒。载玻片制作过程中不仅可在室温中干燥又可放入37℃恒温箱中干燥,这样加快了干燥的速度。因此本发明的染色方法操作简便工作时间短。另外本发明染色过程中由于采用了A、B液混匀加热染片后,滴加C液加热染色的方法使得胶体溶液的沉淀量增多,并且易沉淀在鞭毛上,因而染色后鞭毛粗大、清晰,立体感强,易于辨认。经分光光度仪扫描可以看出生成胶体化合物的量增多,因而染色效果明显优于原有镀银染色法。
实施例:
一、试剂的制备
A液:2%FeCL3水溶液50ml加入36%甲醛0.4ml混匀。
B液:20%单宁酸水溶液20ml加入1.0mol/L NaOH水溶液0.3ml混匀,加入20.7ml蒸镏水混匀。
C液:2%AgNO3水溶液50ml缓慢加入浓氨水至出现很浓的白色沉淀,边摇动边继续滴加浓氨水至恰好沉淀消失成澄清液为止,浓氨水滴加量为0.9ml。
二、染色:
1、按常规方法清洗玻片备用。
2、在清洁的载玻片一端滴少许蒸镏水,使用灭菌接种针沾少量蒸镏水,在培养5-8小时的新鲜单个菌落上挑取少量菌苔,轻轻点滴在载玻片上的蒸镏水上。将玻片缓缓倾斜菌液涂布在玻片上,将玻片放入37℃恒温箱中干燥后备用。
3、取一洁净试管滴加5滴A液与B液充分混匀后,加热到出现蒸气,此时溶液颜色由黑兰变为透明棕色。待溶液稍冷不烫手后用该混合液在制好的玻片上染片60秒种,然后用流水缓缓洗尽。在玻片上滴加少许C液,将玻片置于酒精灯上稍加热至微量冒蒸气而不干,染色50秒种后,流水冲去染液即可
4、经上述方法染色后的菌体为棕黑色,鞭毛黑色粗大清晰。
Claims (3)
1、一种细菌鞭毛镀银法染色试剂,其特征在于:该镀银染色试剂包括有A液、B液、C液;
所述的A液由1.5-2.5%的FeCl3水溶液50ml加入36%的甲醛0.3-0.5ml混合而成;
所述的B液由20%单宁酸10-25ml加1.0mol/L NaOH水溶液0.1-0.4ml混匀后加水补充至50ml而成;
所述的C液由2%AgNO3水溶液50ml缓慢加入浓氨水0.90-0.93ml,至出现很浓的沉淀,边摇动边继续滴入浓氨水至恰好沉淀消失成澄清液止。
2、使用权利要求1所述的染色试剂进行细菌鞭毛镀银染色方法,包括玻片清洗,制片、染色,其特征在于:染色按下述方法进行:
(1)制片:在清洁的载玻片一端滴少许蒸馏水,用灭菌接种针沾少量蒸馏水在培养5-8小时的新鲜单个菌落上挑取少量菌苔点滴在载玻片上,玻片倾斜使菌液涂布在玻片上,干燥;
(2)染色:取洁净试管滴加等量A液与B液充分混匀,加热到出现蒸气颜色由黑兰变为透明棕色止,稍冷后染片40-90秒,流水洗尽,滴加C液,将玻片置于酒精灯上稍加热至微量冒蒸气而不干,染色30-60秒,流水洗尽染液。
3、根据权利要求2所述的细菌鞭毛镀银法染色方法,其特征在于:制作完毕的玻片可在室温下干燥,也可在37℃恒温箱中干燥。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN95105969A CN1044722C (zh) | 1995-06-05 | 1995-06-05 | 一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN95105969A CN1044722C (zh) | 1995-06-05 | 1995-06-05 | 一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1137569A CN1137569A (zh) | 1996-12-11 |
CN1044722C true CN1044722C (zh) | 1999-08-18 |
Family
ID=5075697
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN95105969A Expired - Fee Related CN1044722C (zh) | 1995-06-05 | 1995-06-05 | 一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1044722C (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107179228A (zh) * | 2017-06-07 | 2017-09-19 | 徐娜娜 | 一种细菌鞭毛染色方法 |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109238810B (zh) * | 2018-11-23 | 2021-06-04 | 中国科学院水生生物研究所 | 淡水纤毛虫干银染色样品的快速制备方法 |
CN112877245A (zh) * | 2021-02-23 | 2021-06-01 | 海南省临床微生物学检测与研究中心 | 幽门螺杆菌敏感、快速培养菌落形成及其效能评价方法 |
-
1995
- 1995-06-05 CN CN95105969A patent/CN1044722C/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
华西医大学报26(1) 1995.2.1 高庆伟等"铜绿色假单胞菌鞭毛染色方法探讨" * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107179228A (zh) * | 2017-06-07 | 2017-09-19 | 徐娜娜 | 一种细菌鞭毛染色方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1137569A (zh) | 1996-12-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN100503965C (zh) | 一种提高天然染料染色织物日晒牢度的方法 | |
CN101935464A (zh) | 一种耐碱性分散染料复配物 | |
CN1044722C (zh) | 一种细菌鞭毛镀银法染色试剂及其染色方法 | |
CN102691202A (zh) | 一种在织物表面制备一维光子晶体薄膜实现结构色的方法 | |
CN112129610B (zh) | 一种细菌荚膜染色方法及其用途 | |
JPS645623B2 (zh) | ||
CN1098387C (zh) | 碱性染色助剂 | |
CN1456741A (zh) | 织物隐形印花方法及其产品 | |
US4362530A (en) | Dyeing auxiliaries containing mixed anionic, cationic and non-ionic ethylene oxide adducts | |
CN1538004A (zh) | 一浴法染色的方法 | |
CN108003071A (zh) | 一种h酸高压碱熔工艺 | |
CN1025128C (zh) | 柞蚕丝绢、丝束漂染技术 | |
JPS5792054A (en) | Copper-containing reactive dye | |
CN1511897A (zh) | 一种阳离子染料数字印花墨水和数字印花墨水的印花方法 | |
US5908775A (en) | Method of textile printing by microorganism and microorganism for decolorization of azo-system dye | |
CN1504519A (zh) | 数字印花墨水及其染料精制方法和数字印花方法 | |
CN100441771C (zh) | 留白剂组合物 | |
CN112813702B (zh) | 一种基于红曲色素的非水介质染色方法 | |
US5045083A (en) | Light-fast dyeing of synthetic polyamide fibers: anionic dye, oxazolo-anilide and a copper complex | |
CN108049221A (zh) | 低温皂洗酶及其制备方法和应用,及低温皂洗工艺 | |
JPH0726162A (ja) | 反応性染料 | |
CH641874A5 (de) | Luftverdichtende, direkteinspritzende brennkraftmaschine. | |
CN101463567B (zh) | 纤维素纤维用耐液氨丝光和潮交链处理的活性黑染料 | |
CN113214707A (zh) | 一种表板染色剂及表板染色工艺 | |
CN1018560B (zh) | 羊毛及其织物的酸性媒介染料染色法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |