CN104351052A - 铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于一种铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，培养基的组成其特征在于（按重量计）硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂和蒸馏水。该发明解决了自然繁殖力极低，人工两次移植培养，增加染菌率和培养基成本高的技术问题；这种发芽生根二合一培养基的铁皮石斛可以满足生产和人们的需求。

Description

铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法

技术领域

本发明属于植物培养基及栽培方法，特别涉及一种铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法。

背景技术

    铁皮石斛(Dendrobium candidum)俗称铁皮枫斗，又称黑节草，属于兰科附生兰类，属兰科石斛属植物，是药用石斛中的珍品，具有滋阴清热、益味生津、止咳润肺之功效，其含有的多糖、生物碱、氨基酸等成分具有提高免疫功能、抑制血栓形成、抑制肿瘤和延缓衰老的作用。由于人们对野生铁皮石斛的无节制采掘，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，而铁皮石斛的种子极小，无胚乳，自然繁殖力极低，很难用实生苗进行人工栽培；常规繁殖分株、扦插等方式的繁殖率低，生长周期长，远不能满足生产上的需要。因此，利用人工组培快速繁殖幼苗已成为种植种源的首要来源，是当前人们研究的主要技术问题。

然而，目前组培方式诱导原球茎、原球茎增殖、原球茎分化生芽、壮苗生根后完成组培苗的培养，这种方式原球茎分化生芽后需再转入生根培养基进行生根培养后才能完成组培苗的培养，两次移植培养，增加了染菌机率和人工及培养基成本。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术不足，提供一种生根发芽一次成功的二合一培养基，一次性移植铁皮石斛原球茎进行生芽生根，减少染菌机率及培养基成本的铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，培养基的组成其特征在于含有硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂和蒸馏水。

铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，其特征采用以下步骤：

a.将分子量101.21，浓度1900mg/L的硝酸钾；分子量80.04，浓度1650mg/L的硝酸铵；分子量136.09，浓度170mg/L的磷酸二氢钾；分子量246.47，浓度370mg/L的硫酸镁和分子量147.02，浓度440mg/L的氯化钙，均匀地混合在一起；

b.将分子量166.01，浓度0.83mg/L的碘化钾；分子量61.83，浓度6.2mg/L的硼酸；分子量223.01，浓度22.3mg/L的硫酸锰；分子量287.54，浓度8.6mg/L的硫酸锌；分子量241.95，浓度0.25的钼酸钠；分子量249.68，浓度0.025mg/L的硫酸铜；分子量237.93，浓度0.025mg/L的氯化钴分别用蒸馏水完全溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L；

c.将分子量372.25，浓度37.25mg/L的乙二胺四乙酸二钠；分子量278.03，浓度27.85mg/L的硫酸亚铁分别用蒸馏水，边加热边搅拌使其完全溶解，然后将两种溶液混合在一起，并将pH调至5.5，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中；

d.将浓度100mg/L的肌醇；浓度2mg/L的甘氨酸；浓度0.1mg/L的盐酸硫胺素；浓度0.5mg/L的盐酸吡哆醇；浓度0.5mg/L的烟酸；分子量342.31，浓度30mg/L的蔗糖；浓度7mg/L的琼脂，均匀地混合在一起。

e.将经过上述a、b、c、d处理好的各种混合物均匀地混合在一起，即可进行铁皮石斛的栽培。

    铁皮石斛的栽培方法：将制备好的培养基分别装入具有培养基4的铁皮石斛培养瓶体1中，，选取相同条件下生长良好的铁皮石斛原球茎5，在无菌条件下切成1 cm直径的铁皮石斛原球茎5团块；把2g铁皮石斛原球茎5接入培养基4中，盖上瓶盖和滤菌膜2，瓶盖和滤菌膜2上设有通气孔3，将培养瓶放置到培养温室（暖棚）中，室温保持在24~26℃左右，相对湿度在60%～80%，光照强度2 000 lx，每天光照12 h；培养90天。

本发明的有益效果是：该发明解决了自然繁殖力极低，人工两次移植培养，增加染菌率和培养基成本高的技术问题；这种发芽生根二合一培养基的铁皮石斛可以满足生产和人们的需求。

附图说明

以下结合附图，以实施例具体说明。

图1是铁皮石斛培养瓶的结构图。

图中：1-铁皮石斛培养瓶体；2-瓶盖和滤菌膜；3-通气孔；4-培养基；5-铁皮石斛原球茎。

具体实施方式

实施例，参照附图，一种铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，培养基的组成其特征在于（按重量计）硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂和蒸馏水。

所述的硝酸钾（KNO3）：硝酸钾在农业市场用途十分广泛，硝酸钾属于二元复合肥。硝酸钾是无氯钾、氮复合肥料，植物营养素钾、氮的总含量可达60%左右，具有良好的物理化学性质。硝酸钾施用于烟草具有肥效高，易吸收，促进幼苗早发，增加烟草产量，提高烟草品质的重要作用。

所述的硝酸铵（NH4NO）：硝酸铵是无色无臭的透明结晶或呈白色的结晶，易溶于水，易吸湿结块。是铵盐受热易分解，遇碱分解。是氧化剂，用于化肥和化工原料。

所述的磷酸二氢钾（KH2PO4）：磷酸二氢钾密封保存，空气中稳定，在400℃时失去水，变成偏磷酸盐，用于配制缓冲液，测定砷、锑、磷、铝和铁，配制磷标准液，配制培养基，测定血清中无机磷、碱性磷酸酶活力。

所述的硫酸镁（MgSO4·7H2O）：硫酸镁可以用作制革、炸药、造纸、瓷器、肥料，以及医疗上口服泻药等。矿物质水添加剂.硫酸镁在农业中被用于一种肥料，因为镁是叶绿素的主要成分之一。通常被用于盆栽植物或缺镁的农作物，例如西红柿，马铃薯，玫瑰等。硫酸镁比起其他肥料的优点是溶解度较高。硫酸镁也被用作浴盐。

所述的氯化钙（CaCl2·2H2O）：氯化钙，一种由氯元素和钙元素构成的盐，化学式为CaCl2。它是典型的离子型卤化物，室温下为白色固体。它常见应用包括制冷设备所用的盐水、道路融冰剂和干燥剂。因为它在空气中易吸收水分发生潮解，所以无水氯化钙必须在容器中密封储藏。氯化钙及其水合物和溶液在食品制造、建筑材料、医学和生物学等多个方面均有重要的应用价值。

所述的碘化钾（KI）：白色立方结晶或粉末。在潮湿空气中微有吸湿性，久置析出游离碘而变成黄色，并能形成微量碘酸盐。光及潮湿能加速分解。其水溶液也会氧化而渐变黄色，可加少量碱防止。相对密度3.12。熔点680℃。沸点1420℃。广泛用于容量分析碘量法中配制滴定液。单倍体育种中配制伯莱德斯、改良怀特、MS和RM等培养基。粪便检验等。照相。制药。

所述的硼酸（H3BO3）：硼酸，为白色粉末状结晶或三斜轴面鳞片状光泽结晶，有滑腻手感，无臭味。溶于水、酒精、甘油、醚类及香精油中，水溶液呈弱酸性。大量用于玻璃（光学玻璃、耐酸玻璃、耐热玻璃、绝缘材料用玻璃纤维）工业，可以改善玻璃制品的耐热、透明性能，提高机械强度，缩短溶融时间。

所述的硫酸锰（MnSO4·4H2O）：硫酸锰其一水合物为微红色斜方晶体，相对密度为3.50，熔点为700℃，易溶于水，不溶于乙醇。其以多种水合物的形式存在。硫酸锰是合成脂肪酸的作物需要的微量元素，因此硫酸锰可以做为肥料施进土壤，可以增产。硫酸锰加到动物饲料中，有催肥的效果。硫酸锰也是制备其它锰盐的原料和分析试剂。

所述的硫酸锌（ZnSO4·7H2O）：无色或白色结晶、颗粒或粉末，别名皓矾。无气味。味涩。在干燥空气中风化，280℃失去全部结晶水，500℃以上分解。1g溶于0.6ml水、2.5ml甘油，不溶于乙醇。水溶液对石蕊呈酸性，pH约4.5。含1分子结晶水的较不易结块。相对密度1.97。熔点100℃。最小致死量（大鼠，经口）2200mg/kg。有刺激性。用于制造立德粉，并用作媒染剂、收敛剂、木材防腐剂等。

所述的钼酸钠（Na2MoO4·2H2O）：钼酸钠为白色菱形结晶体。可通过钼精矿氧化焙烧生成三氧化钼，用液碱浸取生成钼酸钠溶液，后经抽滤、浓缩、冷却、离心、干燥后可制得。

所述的硫酸铜（CuSO4·5H2O）：硫酸铜为天蓝色晶体，水溶液呈弱酸性，俗名胆矾、石胆、胆子矾、蓝矾。硫酸铜是制备其他铜化合物的重要原料。同石灰乳混合可得波尔多液，用作杀菌剂。硫酸铜也是电解精炼铜时的电解液。

所述的氯化钴（CoCl2·6H2O）：氯化钴（水合）是粉红色至红色结晶，无水物为蓝色。微有潮解性，易溶于水、乙醇、乙醚、丙酮和甘油。用于分析试剂，湿度和水分的指示剂，氨吸收剂。

所述的乙二胺四乙酸二钠（Na2.EDTA）：无味无臭或微咸的白色或乳白色结晶或颗粒状粉末。溶于水，不溶于乙醇、乙醚。作重金属解毒药、络合剂、抗氧增效剂、稳定剂及软化剂等；钙、镁及其他金属试剂，金属掩蔽剂。乙二胺四乙酸二钠是一种重要络合剂，用于络合金属离子和分离金属。

所述的硫酸亚铁（FeSO24·7H2O）：蓝绿色单斜结晶或颗粒。无气味。在干燥空气中风化。在潮湿空气中表面氧化成棕色的碱式硫酸铁。溶于水，几乎不溶于乙醇。无水硫酸亚铁是白色粉末，含结晶水的是浅绿色晶体，晶体俗称“绿矾”，溶于水水溶液为浅绿色。用于色谱分析试剂，点滴分析测定铂、硒、亚硝酸盐和硝酸盐，还原剂，制造铁氧体，聚合催化剂。

所述的肌醇：广泛分布在动物和植物体内，是动物、微生物的生长因子。最早从心肌和肝脏中分离得到。在80℃以上从水或乙酸中得到的肌醇为白色晶体，熔点253℃，密度 1.752 克/厘米3（15℃ )，味甜，溶于水和乙酸，无旋光性。可由玉米浸泡液中提取。主要用于治疗肝硬变、肝炎、脂肪肝、血中胆固醇过高等症。

所述的甘氨酸：又名氨基乙酸，为非人体必需氨基酸。甘氨酸是氨基酸系列中结构最为简单，人体非必需的一种氨基酸，在分子中同时具有酸性和碱性官能团，在水溶液中为强电解质，在强极性溶剂中溶解度较大，基本不溶于非极性溶剂，而且具有较高的沸点和熔点，通过水溶液酸碱性的调节可以使甘氨酸呈现不同的分子形态。

所述的盐酸硫胺素（VB1）：盐酸硫胺是硫胺的盐酸盐，是维生素B1的一种存在形式。盐酸硫胺素为白色针状结晶粉末，有微弱的类似米糠的气味，味苦，无水干燥品在空气中迅速吸收水分（4%）。用作营养增补剂。维生素B1在体内参与糖类的中间代谢。机体内维生素B1 不足，辅羧化酶活性下降，糖代谢受阻，从而影响整个机体代谢过程。

所述的盐酸吡哆醇（VB6）：别名维生素B6。白色或类白色的结晶或结晶性粉末；无臭，味酸苦。用作维生素强化剂。本品是机体内很多酶如转氨基酶、脱羧酶、消旋酶、脱氢酶、合成酶和羟化酶等的辅酶，且可帮助糖类和蛋白质的分解、利用。缺乏时有类似烟酸的缺乏症。

所述的烟酸（VB5或VPP）：烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，耐热，能升华。烟酸又名尼克酸、抗癞皮病因子。在人体内还包括其衍生物烟酰胺或尼克酰胺。它是人体必需的13种维生素之一，是一种水溶性维生素，属于维生素B族。烟酸在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体内脂质代谢，组织呼吸的氧化过程和糖类无氧分解的过程。

所述的蔗糖（sucrose）：蔗糖是人类基本的食品添加剂之一，已有几千年的历史。是光合作用的主要产物，广泛分布于植物体内，特别是甜菜、甘蔗和水果中含量极高。以蔗糖为主要成分的食糖根据纯度的由高到低又分为：冰糖、白砂糖、棉白糖和赤砂糖（也称红糖或黑糖），蔗糖在甜菜和甘蔗中含量最丰富，平时使用的白糖、红糖都是蔗糖。

所述的琼脂（agar）：琼脂是由麒麟菜、石花菜或江篱（属红藻）经加热至溶化后，加以冷却凝固而成的海藻精华。琼脂含有丰富的膳食纤维（含量为80.9%），蛋白质含量高，热量低，具有排毒养颜、泻火、润肠、降血压、降血糖和防癌作用，被联合国粮农组织确认为21世纪健康食品。

铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，其特征采用以下步骤：

f.将分子量101.21，浓度1900mg/L的硝酸钾；分子量80.04，浓度1650mg/L的硝酸铵；分子量136.09，浓度170mg/L的磷酸二氢钾；分子量246.47，浓度370mg/L的硫酸镁和分子量147.02，浓度440mg/L的氯化钙，均匀地混合在一起；

g.将分子量166.01，浓度0.83mg/L的碘化钾；分子量61.83，浓度6.2mg/L的硼酸；分子量223.01，浓度22.3mg/L的硫酸锰；分子量287.54，浓度8.6mg/L的硫酸锌；分子量241.95，浓度0.25的钼酸钠；分子量249.68，浓度0.025mg/L的硫酸铜；分子量237.93，浓度0.025mg/L的氯化钴分别用蒸馏水完全溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L；

h.将分子量372.25，浓度37.25mg/L的乙二胺四乙酸二钠；分子量278.03，浓度27.85mg/L的硫酸亚铁分别用蒸馏水，边加热边搅拌使其完全溶解，然后将两种溶液混合在一起，并将pH调至5.5，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中；

i.将浓度100mg/L的肌醇；浓度2mg/L的甘氨酸；浓度0.1mg/L的盐酸硫胺素；浓度0.5mg/L的盐酸吡哆醇；浓度0.5mg/L的烟酸；分子量342.31，浓度30mg/L的蔗糖；浓度7mg/L的琼脂，均匀地混合在一起。

j.将经过上述a、b、c、d处理好的各种混合物均匀地混合在一起，即可进行铁皮石斛的栽培。

铁皮石斛的栽培方法：将制备好的培养基分别装入具有培养基4的铁皮石斛培养瓶体1中，选取相同条件下生长良好的铁皮石斛原球茎5，在无菌条件下切成1 cm直径的铁皮石斛原球茎5团块；把2g铁皮石斛原球茎5接入培养基4中，盖上瓶盖和滤菌膜2，瓶盖和滤菌膜2上设有通气孔3，将培养瓶放置到培养温室（暖棚）中，室温保持在24~26℃左右，相对湿度在60%～80%，光照强度2 000 lx，每天光照12 h；培养90天。

铁皮石斛是降生附生草本兰科景天酸代谢植物，可每天24小时放氧。对甲醛、苯乙酸、一氧化碳、尼古丁等有高效的吸收能力，可谓室内空气绿色净化器。

铁皮石斛根系为气生根，喜阴，生长在树皮、碎石、水苔、苔藓等基质，主要靠扦插和组织培养进行繁殖，在每年的4月6月开花，兼备净室补氧，清新悦目的特点。居家封闭阳台、温室大棚是理想的栽培条件。具有药食和观赏兼用之特点，为医药界和家具百姓所喜爱，也受到国家积极高度重视。

Claims (3)

1.一种铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，培养基的组成其特征在于（按重量计）硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂和蒸馏水。

2.根据权利要求1所述的铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，其特征在于铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，其特征采用以下步骤：

    a.将分子量101.21，浓度1900mg/L的硝酸钾；分子量80.04，浓度1650mg/L的硝酸铵；分子量136.09，浓度170mg/L的磷酸二氢钾；分子量246.47，浓度370mg/L的硫酸镁和分子量147.02，浓度440mg/L的氯化钙，均匀地混合在一起；

    b.将分子量166.01，浓度0.83mg/L的碘化钾；分子量61.83，浓度6.2mg/L的硼酸；分子量223.01，浓度22.3mg/L的硫酸锰；分子量287.54，浓度8.6mg/L的硫酸锌；分子量241.95，浓度0.25的钼酸钠；分子量249.68，浓度0.025mg/L的硫酸铜；分子量237.93，浓度0.025mg/L的氯化钴分别用蒸馏水完全溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L；

    c.将分子量372.25，浓度37.25mg/L的乙二胺四乙酸二钠；分子量278.03，浓度27.85mg/L的硫酸亚铁分别用蒸馏水，边加热边搅拌使其完全溶解，然后将两种溶液混合在一起，并将pH调至5.5，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中；

    d.将浓度100mg/L的肌醇；浓度2mg/L的甘氨酸；浓度0.1mg/L的盐酸硫胺素；浓度0.5mg/L的盐酸吡哆醇；浓度0.5mg/L的烟酸；分子量342.31，浓度30mg/L的蔗糖；浓度7mg/L的琼脂，均匀地混合在一起；

e.将经过上述a、b、c、d处理好的各种混合物均匀地混合在一起，即可进行铁皮石斛的栽培。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的铁皮石斛生芽生根培养基和制备方法及其栽培方法，其特征在于铁皮石斛的栽培方法：将制备好的培养基分别装入铁皮石斛培养瓶体（1）中，每瓶装？克的培养基（4），选取相同条件下生长良好的铁皮石斛原球茎（5），在无菌条件下切成1 cm直径的铁皮石斛原球茎（5）团块；把2g铁皮石斛原球茎（5）接入培养基（4）中，盖上瓶盖和滤菌膜（2），瓶盖和滤菌膜（2）上设有通气孔（3），将培养瓶放置到培养温室（暖棚）中，室温保持在24~26℃左右，相对湿度在60%～80%，光照强度2 000 lx，每天光照12 h；培养90天。