CN104334181A - 芳香族阳离子肽及其用途 - Google Patents

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Abstract

本文公开了与芳香族阳离子肽有关的组合物和方法。具体地讲，所述组合物和方法涉及与细胞色素c结合的芳香族阳离子肽。在一些实施例中，所述芳香族阳离子肽包括D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2和D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-2310)中的一种或多种。在一些实施例中，所述方法涉及增加细胞色素c的还原、增强通过细胞色素c的电子扩散、增强细胞色素c的电子容量和/或引发细胞色素c周围的新的π-π相互作用。

Description

芳香族阳离子肽及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2012年4月12日提交的美国临时申请No.61/623,348的权益和优先权，该临时申请全文以引用方式并入本文。
技术领域
本文公开了与芳香族阳离子肽有关的组合物和方法。具体地讲，所述组合物和方法涉及与细胞色素c结合的芳香族阳离子肽。
背景技术
本文所公开的芳香族阳离子肽可用于与线粒体功能障碍有关的治疗应用。当施用给需要其的哺乳动物时，所述肽定位于线粒体并改善该细胞器的完整性和功能。细胞色素c是被发现与线粒体内膜存在松散关联的小血红素蛋白，并且是电子传递链的组分。细胞色素c能够催化若干反应诸如羟基化和芳香族氧化，并通过氧化各种电子供体诸如2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)、2-酮-4-甲硫基丁酸和4-氨基安替比林而显示出过氧化物酶活性。
发明内容
在一个方面，本发明的技术提供了使用芳香族阳离子肽或其可药用的盐的方法。在一些实施例中，芳香族阳离子肽包括D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2和D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)中的一种或多种。
在一些方面，本公开提供了与细胞色素c和芳香族阳离子肽有关的方法和组合物。在一些实施例中，该方法涉及增加细胞色素c的还原、增强通过细胞色素c的电子扩散、增强细胞色素c的电子容量、和/或引发细胞色素c周围的新的π-π相互作用。在一些实施例中，包含细胞色素c的样本与有效量的芳香族阳离子肽或其盐接触。在一些实施例中，芳香族阳离子肽为D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2和D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)中的一种或多种。
在一些实施例中，细胞色素c以纯化的、分离的和/或浓缩的形式存在于样本中。在一些实施例中，细胞色素c以天然形式存在于样本中。例如，在一些实施例中，细胞色素c存在于一个或多个线粒体中。在一些实施例中，线粒体被分离。在其他实施例中，线粒体存在于细胞中或细胞制剂中。
在一些方面，本公开提供与线粒体呼吸有关的方法。在一些实施例中，该方法涉及增大线粒体的O2消耗、增加样本中的ATP合成、和/或增强除去细胞色素c的线粒体内膜(mitoplasts)中的呼吸。在一些实施例中，含有线粒体和/或除去细胞色素的线粒体内膜的样本与有效量的芳香族阳离子肽或其可药用的盐接触。在一些实施例中，芳香族阳离子肽包括D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2和D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)中的一种或多种。
在一些实施例中，线粒体以纯化的、分离的和/或浓缩的形式存在于样本中。在一些实施例中，线粒体以天然形式存在于样本中。例如，在一些实施例中，线粒体存在于细胞中或细胞制剂中。
在一些实施例中，芳香族阳离子肽包括D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2和D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)中的一种或多种。除此之外或作为另外一种选择，在一些实施例中，芳香族阳离子肽包括下列中的一种或多种：
D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Dmt-D-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Dmt-Lys-D-Phe-NH2
Phe-D-Arg-D-Phe-Lys-NH2
Phe-D-Arg-Phe-D-Lys-NH2
D-Phe-D-Arg-D-Phe-D-Lys-NH2
Lys-D-Phe-Arg-Dmt-NH2
D-Arg-Arg-Dmt-Phe-NH2
Dmt-D-Phe-Arg-Lys-NH2
Phe-D-Dmt-Arg-Lys-NH2
D-Arg-Dmt-Lys-NH2
Arg-D-Dmt-Lys-NH2
D-Arg-Dmt-Phe-NH2
Arg-D-Dmt-Arg-NH2
Dmt-D-Arg-NH2
D-Arg-Dmt-NH2
D-Dmt-Arg-NH2
Arg-D-Dmt-NH2
D-Arg-D-Dmt-NH2
D-Arg-D-Tyr-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Tyr-D-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Tyr-Lys-D-Phe-NH2
D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2
Lys-D-Phe-Arg-Tyr-NH2
D-Arg-Arg-Tyr-Phe-NH2
Tyr-D-Phe-Arg-Lys-NH2
Phe-D-Tyr-Arg-Lys-NH2
D-Arg-Tyr-Lys-NH2
Arg-D-Tyr-Lys-NH2
D-Arg-Tyr-Phe-NH2
Arg-D-Tyr-Arg-NH2
Tyr-D-Arg-NH2
D-Arg-Tyr-NH2
D-Tyr-Arg-NH2
Arg-D-Tyr-NH2
D-Arg-D-Tyr-NH2
Dmt-Lys-Phe-NH2
Lys-Dmt-D-Arg-NH2
Phe-Lys-Dmt-NH2
D-Arg-Phe-Lys-NH2
D-Arg-Cha-Lys-NH2
D-Arg-Trp-Lys-NH2
Dmt-Lys-D-Phe-NH2
Dmt-Lys-NH2
Lys-Phe-NH2
D-Arg-Cha-Lys-Cha-NH2
D-Nle-Dmt-Ahe-Phe-NH2
D-Nle-Cha-Ahe-Cha-NH2
其中，Cha为环己基丙氨酸，Nle为正亮氨酸，并且Ahe为2-氨基-庚酸。
在一个实施例中，肽由式I定义：
其中R1和R2各自独立地选自：
(i)氢；
(ii)直链或支链的C1-C6烷基；
R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自独立地选自：
(i)氢；
(ii)直链或支链的C1-C6烷基；
(iii)C1-C6烷氧基；
(iv)氨基；
(v)C1-C4烷基氨基；
(vi)C1-C4二烷基氨基；
(vii)硝基；
(viii)羟基；
(ix)卤素，其中“卤素”涵盖氯、氟、溴和碘；并且
n为1到5的整数。
在特定实施例中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12全为氢；并且n为4。在另一个实施例中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和R11全为氢；R8和R12为甲基；R10为羟基；并且n为4。
在一个实施例中，肽由式II定义：
其中R1和R2各自独立地选自：
(i)氢；
(ii)直链或支链的C1-C6烷基；
R3和R4各自独立地选自：
(i)氢；
(ii)直链或支链的C1-C6烷基；
(iii)C1-C6烷氧基；
(iv)氨基；
(v)C1-C4烷基氨基；
(vi)C1-C4二烷基氨基；
(vii)硝基；
(viii)羟基；
(ix)卤素，其中“卤素”涵盖氯、氟、溴和碘；
R5、R6、R7、R8和R9各自独立地选自：
(i)氢；
(ii)直链或支链的C1-C6烷基；
(iii)C1-C6烷氧基；
(iv)氨基；
(v)C1-C4烷基氨基；
(vi)C1-C4二烷基氨基；
(vii)硝基；
(viii)羟基；
(ix)卤素，其中“卤素”涵盖氯、氟、溴和碘；并且
n为1到5的整数。
在特定实施例中，R1和R2为氢；R3和R4为甲基；R5、R6、R7、R8和R9全为氢；并且n为4。
在一个实施例中，芳香族阳离子肽具有交替的芳香族氨基酸和阳离子氨基酸的核心结构基序。例如，所述肽可为由下列给出的式III至式VI中的任一式所定义的四肽：
芳香族氨基酸-阳离子氨基酸-芳香族氨基酸-阳离子氨基酸(式III)
阳离子氨基酸-芳香族氨基酸-阳离子氨基酸-芳香族氨基酸(式IV)
芳香族氨基酸-芳香族氨基酸-阳离子氨基酸-阳离子氨基酸(式V)
阳离子氨基酸-阳离子氨基酸-芳香族氨基酸-芳香族氨基酸(式VI)
其中，芳香族氨基酸为选自Phe(F)、Tyr(Y)、Trp(W)和环己基丙氨酸(Cha)的残基；而阳离子氨基酸为选自Arg(R)、Lys(K)、正亮氨酸(Nle)和2-氨基-庚酸(Ahe)的残基。
具体实施方式
应当理解，下文以各种详细程度描述了本发明的某些方面、模式、实施例、变型和特征，以便提供对本发明的实质性理解。
在实践本发明的过程中，使用了分子生物学、蛋白质生物化学、细胞生物学、免疫学、微生物学和重组DNA的许多常规技术。这些技术是熟知的且在(例如)以下文献中分别进行了阐释：Current Protocols in MolecularBiology,Vols.I-III,Ausubel,Ed.(1997)(《分子生物学实验室指南》，第I-III卷，Ausubel编辑，1997年)；Sambrook et al.,Molecular Cloning:ALaboratory Manual,Second Ed.(Cold Spring Harbor Laboratory Press,ColdSpring Harbor,NY,1989)(Sambrook等人，《分子克隆实验室手册》，第2版，冷泉港实验室出版社，纽约冷泉港，1989年)；DNA Cloning:APractical Approach,Vols.I and II,Glover,Ed.(1985)(《DNA克隆：一种实用方法》，第I卷和第II卷，Glover编辑，1985年)；OligonucleotideSynthesis,Gait,Ed.(1984)(《寡核苷酸合成》，Gait编辑，1984年)；Nucleic Acid Hybridization,Hames&Higgins,Eds.(1985)(《核酸杂交》，Hames和Higgins编辑，1985年)；Transcription and Translation,Hames&Higgins,Eds.(1984)(《转录和翻译》，Hames和Higgins编辑，1984年)；Animal Cell Culture,Freshney,Ed.(1986)(《动物细胞培养》，Freshney编辑，1986年)；Immobilized Cells and Enzymes(IRL Press,1986)(《固定化细胞和酶》，IRL出版社，1986年)；Perbal,A Practical Guideto Molecular Cloning；the series,Meth.Enzymol.,(Academic Press,Inc.,1984)(Perbal，《分子克隆实用指南》；丛书《酶学方法》，学术出版社，1984年)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells,Miller&Calos,Eds.(ColdSpring Harbor Laboratory,NY,1987)(《哺乳动物细胞的基因转移载体》，Miller和Calos编辑，纽约冷泉港实验室，1987年)；和Meth.Enzymol.,Vols.154and 155,Wu&Grossman,and Wu,Eds.(《酶学方法》，第154卷和第155卷，Wu和Grossman，Wu编辑)。
下文提供了本说明书中使用的某些术语的定义。除非另有定义，否则本文所用的全部技术和科学术语通常具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的意思相同的意思。
如本说明书和所附权利要求中所用，除非内容另有明确规定，否则单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代。例如，提及“一个细胞”包括两个或更多个细胞的组合，等等。
如本文所用，将药剂、药物或肽“施用”给受试者包括将化合物引入到或递送到受试者以执行其预期功能的任何途径。可以通过任何合适的途径来执行施用，包括口服、鼻内、肠胃外(静脉内、肌内、腹腔内或皮下)、或者局部施用。施用包括自身施用和由其他人施用。
如本文所用，术语“氨基酸”包括天然存在的氨基酸和合成的氨基酸，以及以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是通过遗传密码编码的氨基酸以及后来被修饰的那些氨基酸，例如，羟基脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和O-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构的化合物，所述基本化学结构即结合至氢、羧基、氨基和R基团的α-碳，所述氨基酸类似物例如为高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。这样的类似物具有经修饰的R基团(例如，正亮氨酸)或经修饰的肽主链，但保持与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指具有与氨基酸的通用化学结构不同的结构、但以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥作用的化学化合物。氨基酸在本文中可通过它们通常已知的三字母符号表示或通过IUPAC-IUB生物化学命名委员会(IUPAC-IUBBiochemical Nomenclature Commission)推荐的单字母符号表示。
如本文所用，术语“有效量”是指足以获得期望的治疗和/或预防效果的量。在治疗性或预防性应用的背景下，施用给受试者的组合物的量将取决于疾病的类型和严重性，以及诸如总体健康状况、年龄、性别、体重和对药物的耐受性的个体特性。所述量还取决于疾病的程度、严重性和类型。熟练的技术人员将能够根据这些因素和其他因素来确定合适的剂量。所述组合物还可结合一种或多种另外的治疗化合物来施用。
“分离的”或“纯化的”多肽或肽基本上不含来自衍生出该药剂的细胞或组织来源的细胞材料或其他污染性多肽，或者当化学合成时基本上不含化学前体或其他化学物质。例如，分离的芳香族阳离子肽将不含可能干扰该药剂的诊断或治疗用途的物质。此类干扰物质可包括酶、激素和其他蛋白质类的和非蛋白质类的溶质。
如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，意指包含通过肽键或经修饰的肽键(即，肽电子等排体)彼此连接的两个或更多个氨基酸的聚合物。多肽既指短链(通常称为肽、糖肽或寡聚物)，也指较长的链(通常称为蛋白质)。多肽可包含与20种基因编码的氨基酸不同的氨基酸。多肽包括通过诸如翻译后加工的天然过程或本领域中熟知的化学修饰技术修饰的氨基酸序列。
如本文所用，术语“治疗”或“处理”或“缓解”是指治疗性处理和防范性或预防性措施两者，其中目的是预防或减缓(减轻)目标病理状况或障碍。还应当理解，所描述的治疗或预防医学病症的各种模式旨在表示“实质性的”，其包括完全治疗或预防以及不完全治疗或预防，并且其中实现了某种生物学或医学相关的结果。
如本文所用，“预防”或“防止”障碍或病症是指统计样本中相对于未治疗的对照样本降低治疗样本的障碍或病症的发生率，或者相对于未治疗的对照样本延迟障碍或病症的一种或多种症状的发作或减轻其严重程度的化合物。
预防或治疗的方法
本发明的技术涉及通过施用某些芳香族阳离子肽来治疗或预防疾病。
所述芳香族阳离子肽是水溶性且高极性的。尽管有这些特性，但所述肽能够容易地穿过细胞膜。芳香族阳离子肽通常包括通过肽键共价连接的最少两个或三个氨基酸、或最少四个氨基酸。芳香族阳离子肽中存在的氨基酸的最大数目为通过肽键共价连接的约20个氨基酸。在一些实施例中，氨基酸的最大数目为约12个、约9个或约6个。
芳香族阳离子肽的氨基酸可以是任何氨基酸。如本文所用，术语“氨基酸”用于指包含至少一个氨基和至少一个羧基的任何有机分子。通常，至少一个氨基位于相对于羧基的α位。所述氨基酸可以是天然存在的。天然存在的氨基酸包括(例如)通常在哺乳动物蛋白中发现的二十种最常见的左旋(L)氨基酸，即，丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(He)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、和缬氨酸(Val)。其他天然存在的氨基酸包括(例如)与蛋白质合成无关的代谢过程中合成的氨基酸。例如，氨基酸鸟氨酸和瓜氨酸是在哺乳动物新陈代谢中在尿素生成期间合成的。天然存在的氨基酸的另一个例子包括羟基脯氨酸(Hyp)。
所述肽任选地包含一种或多种非天然存在的氨基酸。最佳地，所述肽不具有天然存在的氨基酸。所述非天然存在的氨基酸可以是左旋(L-)、右旋(D-)、或其混合物。非天然存在的氨基酸是那些通常不在活生物体的正常代谢过程中合成且不在蛋白质中天然存在的氨基酸。此外，非天然存在的氨基酸合适地也不会被常见的蛋白酶识别。非天然存在的氨基酸可以存在于肽中的任何位置处。例如，非天然存在的氨基酸可位于N-端、C-端、或者位于N-端和C-端之间的任何位置处。
非天然的氨基酸可(例如)包括天然氨基酸中不存在的烷基、芳基或烷基芳基。非天然烷基氨基酸的一些例子包括α-氨基丁酸、β-氨基丁酸、Y-氨基丁酸、δ-氨基戊酸和ε-氨基己酸。非天然的芳基氨基酸的一些例子包括邻氨基苯甲酸、间氨基苯甲酸和对氨基苯甲酸。非天然的烷基芳基氨基酸的一些例子包括邻氨基苯乙酸、间氨基苯乙酸和对氨基苯乙酸、以及γ-苯基-β-氨基丁酸。非天然存在的氨基酸包括天然存在的氨基酸的衍生物。天然存在的氨基酸的衍生物可以(例如)包括对天然存在的氨基酸添加一种或多种化学基团。
例如，可以将一种或多种化学基团添加至苯基丙氨酸或酪氨酸残基的芳香环的2’、3’、4’、5’或6’位、或者色氨酸残基的苯并环的4’、5’、6’或7’位中的一者或多者。所述基团可以是可添加至芳香环的任何化学基团。此类基团的一些例子包括支链的或非支链的C1-C4烷基，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基或叔丁基；C1-C4烷基氧基(即，烷氧基)；氨基；C1-C4烷基氨基以及C1-C4二烷基氨基(例如，甲基氨基、二甲基氨基)；硝基；羟基；卤素(即，氟、氯、溴或碘)。天然存在的氨基酸的非天然存在的衍生物的一些具体例子包括正缬氨酸(Nva)和正亮氨酸(Nle)。
肽中氨基酸的修饰的另一个例子是将肽的天冬氨酸或谷氨酸残基的羧基衍生化。衍生化的一个例子是与氨或伯胺或仲胺例如甲胺、乙胺、二甲胺或二乙胺的酰胺化。衍生化的另一个例子包括与例如甲醇或乙醇的酯化。另一种此类修饰包括赖氨酸、精氨酸或组氨酸残基的氨基的衍生化。例如，这些氨基可以被酰化。一些合适的酰基包括(例如)苯甲酰基或者包括上文提及的C1-C4烷基中任一者的烷酰基，诸如乙酰基或丙酰基。
非天然存在的氨基酸优选地对常见蛋白酶具有抵抗性，并且更优选地对常见蛋白酶不敏感。对蛋白酶具有抵抗性或者不敏感的非天然存在的氨基酸的例子包括上文提及的任一种天然存在的L-氨基酸的右旋(D-)形式、以及L-和/或D-非天然存在的氨基酸。尽管D-氨基酸存在于通过与细胞的正常核糖体蛋白合成机制不同的方法而合成的某些肽抗生素中，但它们通常不存在于蛋白质中。如本文所用，D-氨基酸被认为是非天然存在的氨基酸。
为最大程度降低蛋白酶敏感性，肽应当具有少于5个、优选地少于4个、更优选地少于3个、并最优选地少于2个由常见蛋白酶识别的连续L-氨基酸，而与氨基酸是天然存在的或非天然存在的无关。在一些实施例中，肽仅具有D-氨基酸，而不具有L-氨基酸。如果肽包含蛋白酶敏感的氨基酸序列，则所述氨基酸中的至少一个优选地为非天然存在的D-氨基酸，由此提供蛋白酶抗性。蛋白酶敏感序列的例子包括可由常见蛋白酶诸如肽链内切酶和胰蛋白酶容易地切割的两个或更多个连续的碱性氨基酸。碱性氨基酸的例子包括精氨酸、赖氨酸和组氨酸。
与肽中氨基酸残基的总数目相比，在生理pH下，芳香族阳离子肽应当具有最少数目的净正电荷。生理pH下的净正电荷的最少数目将在下文称为(pm)。肽中氨基酸残基的总数目将在下文称为(r)。下文讨论的净正电荷的最少数目都是在生理pH下。如本文所用的术语“生理pH”是指哺乳动物体的组织和器官的细胞中的正常pH。例如，人的生理pH通常为大约7.4，而哺乳动物中的正常生理pH可以为从约7.0至约7.8的任一pH。
如本文所用的“净电荷”是指存在于肽中的氨基酸所携带的正电荷的数目和负电荷的数目的平衡。在本说明书中，应当理解，净电荷是在生理pH下测定的。在生理pH下带正电的天然存在的氨基酸包括L-赖氨酸、L-精氨酸和L-组氨酸。在生理pH下带负电的天然存在的氨基酸包括L-天冬氨酸和L-谷氨酸。
通常，肽具有带正电的N-端氨基和带负电的C-端羧基。所述电荷在生理pH下彼此抵消。作为计算净电荷的例子，肽Tyr-Arg-Phe-Lys-Glu-His-Trp-D-Arg具有一个带负电的氨基酸(即，Glu)和四个带正电的氨基酸(即，两个Arg残基、一个Lys和一个His)。因此，上述肽具有3个净正电荷。
在一个实施例中，芳香族阳离子肽在生理pH下的净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)之间具有某种关系，其中3pm是小于或等于r+1的最大数。在该实施例中，净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)之间的关系如下：
表1：氨基酸数目和净正电荷(3pm≤p+1)
(r) 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
(pm) 1 1 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 5 6 6 6 7
在另一个实施例中，芳香族阳离子肽的净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)之间具有某种关系，其中2pm是小于或等于r+1的最大数。在该实施例中，净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)之间的关系如下：
表2：氨基酸数目和净正电荷(2pm≤p+1)
(r) 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
(pm) 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 10 10
在一个实施例中，净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)相等。在另一个实施例中，肽具有3个或4个氨基酸残基和最少1个净正电荷，适当地，最少2个净正电荷且更优选地最少3个净正电荷。
还重要的是，与净正电荷的总数目(pt)相比，芳香族阳离子肽具有最少数目的芳香基团。芳香基团的最少数目在下文将称为(a)。具有芳香基团的天然存在的氨基酸包括氨基酸组氨酸、色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。例如，六肽Lys-Gln-Tyr-D-Arg-Phe-Trp具有2个净正电荷(由赖氨酸和精氨酸残基提供)以及3个芳香基团(由酪氨酸残基、苯丙氨酸残基和色氨酸残基贡献)。
芳香族阳离子肽还应当在芳香基团的最少数目(a)和生理pH下净正电荷的总数目(pt)之间具有某种关系，其中除了当pt为1时a也可以为1之外，3a为小于或等于pt+1的最大数。在该实施例中，芳香基团的最少数目(a)与净正电荷的总数目(pt)之间的关系如下：
表3：芳香基团和净正电荷(3a≤pt+1或a＝pt＝1)
(pt) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
(a) 1 1 1 1 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 5 6 6 6 7
在另一个实施例中，芳香族阳离子肽的芳香基团的最少数目(a)与净正电荷的总数目(pt)之间具有某种关系，其中2a为小于或等于pt+1的最大数。在该实施例中，芳香族氨基酸残基的最少数目(a)与净正电荷的总数目(pt)之间的关系如下：
表4：芳香基团和净正电荷(2a≤pt+1或a＝pt＝1)
(pt) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
(a) 1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 10 10
在另一个实施例中，芳香基团的数目(a)与净正电荷的总数目(pt)相等。在一个实施例中，芳香族阳离子肽可具有
(a)至少一个净正电荷；
(b)最少三个氨基酸；
(c)最多约二十个氨基酸；
(d)净正电荷的最少数目(pm)与氨基酸残基的总数目(r)之间的关系，其中3pm为小于或等于r+1的最大数；以及
(e)芳香基团的最少数目(a)与净正电荷的总数目(pt)之间的关系，其中除了当a为1时pt也可为1外，3a为小于或等于pt+1的最大数。
羧基，尤其是C-端氨基酸的末端羧基，适当地与(例如)氨进行酰胺化，以形成C-端酰胺。或者，C-端氨基酸的末端羧基可以与任一伯胺或仲胺进行酰胺化。所述伯胺或仲胺可以(例如)是烷基、尤其是支链的或非支链的C1-C4烷基或者芳香胺。因此，在肽的C端的氨基酸可以转化为酰胺基、N-甲基酰胺基、N-乙基酰胺基、N,N-二甲基酰胺基、N,N-二乙基酰胺基、N-甲基-N-乙基酰胺基、N-苯基酰胺基或N-苯基-N-乙基酰胺基。未出现在芳香族阳离子肽的C端的天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸和谷氨酸残基的游离的羧酸基也可被酰胺化，不论它们存在于肽内何处。这些内部位置处的酰胺化可以与氨或上述伯胺或仲胺中的任何一者进行。
芳香族阳离子肽包括但不限于下列示例性肽：
D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2
D-Arg-D-Dmt-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Dmt-D-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Dmt-Lys-D-Phe-NH2
D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2
Phe-D-Arg-D-Phe-Lys-NH2
Phe-D-Arg-Phe-D-Lys-NH2
D-Phe-D-Arg-D-Phe-D-Lys-NH2
Lys-D-Phe-Arg-Dmt-NH2
D-Arg-Arg-Dmt-Phe-NH2
Dmt-D-Phe-Arg-Lys-NH2
Phe-D-Dmt-Arg-Lys-NH2
D-Arg-Dmt-Lys-NH2
Arg-D-Dmt-Lys-NH2
D-Arg-Dmt-Phe-NH2
Arg-D-Dmt-Arg-NH2
Dmt-D-Arg-NH2
D-Arg-Dmt-NH2
D-Dmt-Arg-NH2
Arg-D-Dmt-NH2
D-Arg-D-Dmt-NH2
D-Arg-D-Tyr-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Tyr-D-Lys-Phe-NH2
D-Arg-Tyr-Lys-D-Phe-NH2
D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2
Lys-D-Phe-Arg-Tyr-NH2
D-Arg-Arg-Tyr-Phe-NH2
Tyr-D-Phe-Arg-Lys-NH2
Phe-D-Tyr-Arg-Lys-NH2
D-Arg-Tyr-Lys-NH2
Arg-D-Tyr-Lys-NH2
D-Arg-Tyr-Phe-NH2
Arg-D-Tyr-Arg-NH2
Tyr-D-Arg-NH2
D-Arg-Tyr-NH2
D-Tyr-Arg-NH2
Arg-D-Tyr-NH2
D-Arg-D-Tyr-NH2
Dmt-Lys-Phe-NH2
Lys-Dmt-D-Arg-NH2
Phe-Lys-Dmt-NH2
D-Arg-Phe-Lys-NH2
D-Arg-Cha-Lys-NH2
D-Arg-Trp-Lys-NH2
Dmt-Lys-D-Phe-NH2
Dmt-Lys-NH2
Lys-Phe-NH2
D-Arg-Cha-Lys-Cha-NH2
D-Nle-Dmt-Ahe-Phe-NH2
D-Nle-Cha-Ahe-Cha-NH2
其中，Cha为环己基丙氨酸，Nle为正亮氨酸，并且Ahe为2-氨基-庚酸。
在一个实施例中，所述肽具有μ型阿片受体激动剂活性(即，它们将μ型阿片受体活化)。通过放射性配体结合至克隆的μ型阿片受体或通过利用豚鼠回肠的生物测定可以评估μ型阿片的活性(Schiller et al.,Eur J MedChem,35:895-901,2000(Schiller等人，《欧洲医药化学杂志》，第35卷，第895-901页，2000年)；Zhao et al.,J Pharmacol Exp Ther,307:947-954,2003(Zhao等人，《药理学和实验治疗学杂志》，第307卷，第947-954页，2003年))。μ型阿片受体的活化通常引起止痛作用。在某些情况中，具有μ型阿片受体激动剂活性的芳香族阳离子肽为优选的。例如，在短期治疗期间，诸如在急性病或急性病症中，使用活化μ型阿片受体的芳香族阳离子肽可能是有利的。这样的急性病和急性病症通常与中等疼痛或严重疼痛有关。在这些情况中，芳香族阳离子肽的止痛作用可有利于人类患者或其他哺乳动物的治疗方案。然而，不活化μ型阿片受体的芳香族阳离子肽也可以根据临床需要与止痛药一起使用或不与止痛药一起使用。具有μ型阿片受体激动剂活性的肽通常是那些在N端(即，第一氨基酸位置)处具有酪氨酸残基或酪氨酸衍生物的肽。
或者，在其他情况中，不具有μ型阿片受体激动剂活性的芳香族阳离子肽为优选的。例如，在长期治疗期间，诸如在慢性疾病状态或病症中，可能禁忌使用活化μ型阿片受体的芳香族阳离子肽。在这些情况中，芳香族阳离子肽的潜在的副作用或上瘾作用可排除在人类患者或其他哺乳动物的治疗方案中使用活化μ型阿片受体的芳香族阳离子肽。潜在的副作用可包括镇静、便秘和呼吸抑制。在这样的情况中，不活化μ型阿片受体的芳香族阳离子肽可以是适当的治疗。不具有μ型阿片受体激动剂活性的肽通常在N端(即，氨基酸位置1)处不具有酪氨酸残基或酪氨酸衍生物。N端处的氨基酸可以是与酪氨酸不同的任何天然存在的或非天然存在的氨基酸。在一个实施例中，N端处的氨基酸为苯丙氨酸或其衍生物。苯丙氨酸的示例性衍生物包括2′-甲基苯丙氨酸(Mmp)、2',6'-二甲基苯丙氨酸(2′,6′-Dmp)、N,2′,6′-三甲基苯丙氨酸(Tmp)、和2′-羟基-6′-甲基苯丙氨酸(Hmp)。
本文提及的肽和它们的衍生物还可包括功能性变体。如果某种肽具有与所述的肽相同的功能，则该变体被看作是功能性变体。该类似物可以为(例如)肽的置换变体，其中一个或多个氨基酸被另一种氨基酸置换。在一些实施例中，肽的置换变体包括保守氨基酸置换。氨基酸可根据其物理化学特性进行如下分组：
(a)非极性氨基酸：Ala(A)Ser(S)Thr(T)Pro(P)Gly(G)Cys(C)；
(b)酸性氨基酸：Asn(N)Asp(D)Glu(E)Gln(Q)；
(c)碱性氨基酸：His(H)Arg(R)Lys(K)；
(d)疏水性氨基酸：Met(M)Leu(L)Ile(I)Val(V)；以及
(e)芳香族氨基酸：Phe(F)Tyr(Y)Trp(W)His(H)。
肽中的氨基酸被同一组中的另一种氨基酸置换称为保守置换，且可以保留原始肽的物理化学特性。相反，肽中的氨基酸被不同组中的另一种氨基酸置换通常更有可能改变原始肽的物理化学特性。
可以通过本领域熟知的任何方法来合成肽。用于以化学方式合成肽的合适方法包括(例如)Stuart和Young在以下文献中描述的方法：SolidPhase Peptide Synthesis,Second Edition,Pierce Chemical Company(1984)(《固相肽合成》，第二版，皮尔斯化学公司，1984年)和MethodsEnzymol.,289,Academic Press,Inc,New York(1997)(《酶学方法》，第289页，学术出版社，纽约，1997年)。
芳香族阳离子肽的预防和治疗用途。
本文所述的芳香族阳离子肽可用于预防或治疗疾病。具体地讲，本公开提供了通过施用本文所述的芳香族阳离子肽来治疗处于疾病的危险中(或易受疾病影响)的受试者的预防和治疗方法。因此，本发明方法提供了通过将有效量的芳香族阳离子肽施用给需要该芳香族阳离子肽的受试者来预防和/或治疗受试者的疾病。
在一个实施例中，上文所述的肽可用于治疗与线粒体通透性转变(MPT)有关的任何疾病或病症。减少经受MPT的线粒体的数量并预防MPT很重要，因为MPT与哺乳动物的若干常见疾病和病症有关。此类疾病和病症包括但不限于组织或器官的局部缺血和/或再灌注、缺氧、神经退行性疾病，等等。需要治疗或预防MPT的哺乳动物是那些患有这些疾病或病症的哺乳动物。
哺乳动物的组织或器官中的局部缺血是多层面的病理状况，其由氧气剥夺(缺氧)和/或葡萄糖(例如，底物)剥夺引起。组织或器官的细胞中的氧气和/或葡萄糖剥夺导致能量产生量减少或完全丧失，并随之造成跨越细胞膜的活性离子转运的功能丧失。氧气和/或葡萄糖剥夺还导致其他细胞膜中的病理改变，包括线粒体膜的通透性转变。此外，其他分子(诸如通常在线粒体内区室化的凋亡蛋白)可渗出到细胞质中并造成凋亡细胞死亡。严重的局部缺血可导致坏死细胞死亡。特定组织或器官中的局部缺血或缺氧可能由该组织或器官的供血丧失或严重减少引起。供血丧失或严重减少可(例如)由血栓栓塞性中风、冠状动脉粥样硬化、或周围性血管疾病引起。受局部缺血或缺氧影响的组织通常为肌肉，例如心肌、骨骼肌或平滑肌。受局部缺血或缺氧影响的器官可以为发生局部缺血或缺氧的任何器官。受局部缺血或缺氧影响的器官的例子包括脑、心脏、肾脏和前列腺。例如，心肌局部缺血或缺氧通常由动脉粥样硬化的阻塞或血栓性阻塞引起，动脉粥样硬化的阻塞或血栓性阻塞导致通过心脏动脉供血和毛细血管供血而向心脏组织的氧气输送减少或丧失。此类心脏局部缺血或缺氧可导致受影响的心肌疼痛和坏死，并且最终可导致心力衰竭。骨骼肌或平滑肌的局部缺血或缺氧可由类似的原因引起。例如，肠道平滑肌或四肢骨骼肌的局部缺血或缺氧也可由动脉粥样硬化的阻塞或血栓性阻塞引起。
再灌注是指对其中血流减少或阻塞的任何器官或组织进行血流恢复。例如，可对受局部缺血或缺氧影响的任何器官或组织进行血流恢复。血流恢复(再灌注)可通过本领域技术人员已知的任何方法进行。例如，对局部缺血心脏组织的再灌注可由血管成形术、冠状动脉旁路移植术、或使用溶血栓药物引起。
本文所述的方法还可用于治疗或预防与MPT有关的神经退行性疾病。与MPT有关的神经退行性疾病包括(例如)帕金森氏病、阿尔茨海默病、亨廷顿氏病和肌萎缩侧索硬化症(ALS，也称葛雷克氏病)。本文所公开的方法可用于延迟这些以及其他与MPT有关的神经退行性疾病的发作或延缓其进展。本文所公开的方法尤其可用于治疗患有与MPT有关的早期神经退行性疾病的人类以及用于易患这些疾病的人类。
上述芳香族阳离子肽还可用于预防或治疗胰岛素抵抗、代谢综合征、烧伤和继发性并发症、心力衰竭、糖尿病并发症(例如糖尿病视网膜病变)、眼科病症(例如脉络膜新生血管性疾病、视网膜变性和氧诱导的视网膜病变)。
上述芳香族阳离子肽还可用于减轻有需要的哺乳动物中的氧化损伤。需要减轻氧化损伤的哺乳动物为那些经受与氧化损伤有关的疾病、病症或治疗的哺乳动物。通常，氧化损伤由例如活性氧簇(ROS)和/或活性氮簇(RNS)的自由基引起。ROS和RNS的例子包括羟基自由基(HO·)、超氧阴离子自由基(O2 -)、一氧化氮(NO·)、过氧化氢(H2O2)、次氯酸(HOCl)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)。在一个实施例中，有需要的哺乳动物可为正经受与氧化损伤有关的治疗的哺乳动物。例如，哺乳动物可能正经受再灌注、局部缺血或缺氧。
在另一个实施例中，芳香族阳离子肽可用于预防与疾病或病症的氧化损伤有关的脂质过氧化和/或炎性过程。脂质过氧化是指脂质的氧化修饰。脂质可存在于细胞膜中。细胞膜脂质的这种修饰通常导致细胞膜功能的改变和/或损伤。此外，脂质过氧化还可发生于细胞外源的脂质或脂蛋白中。例如，低密度脂蛋白易受脂质过氧化影响。与脂质过氧化有关的病症的例子为动脉粥样硬化。减轻与动脉粥样硬化有关的氧化损伤很重要，因为动脉粥样硬化涉及到例如心脏病发作和冠状动脉疾病。
炎性过程包括免疫系统的激活。通常，免疫系统被抗原物质激活。抗原物质可以是任何被免疫系统识别的物质，并包括自身来源的粒子和外源性粒子。产生自针对自身来源的粒子的炎性过程的疾病或病症的例子包括关节炎和多发性硬化。外来粒子的例子包括病毒和细菌。所述病毒可以是激活炎性过程并且与氧化损伤有关的任何病毒。病毒的例子包括甲型、乙型或丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、流感病毒、以及牛腹泻病毒。例如，肝炎病毒可以引发炎性过程和自由基形成，由此损伤肝脏。细菌可以是任何细菌，包括革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。革兰氏阴性菌在细菌壁中包含脂多糖。革兰氏阴性菌的例子包括埃希氏大肠杆菌(Escherichiacoli)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、变形杆菌属(Proteus)物种、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、沙雷氏菌属(Serratia)和类杆菌属(Bacteroides)。革兰氏阳性菌的例子包括肺炎球菌属(pneumococci)和链球菌属(streptococci)。与细菌引起的氧化应激有关的炎性过程的例子为败血症。通常，当革兰氏阴性菌进入血流时发生败血症。
由毒剂引起的肝脏损伤是另一种与炎性过程和氧化应激有关的病症。毒剂可以是任何导致肝脏损伤的药剂。例如，毒剂可以引起肝脏细胞的凋亡和/或坏死。此类药剂的例子包括醇、和药物，诸如为治疗疾病或病症而服用的处方药和非处方药。
本文所公开的方法还可用于减轻与任何神经退行性疾病或病症有关的氧化损伤。神经退行性疾病可以影响中枢神经系统和外周神经系统的任何细胞、组织或器官。这样的细胞、组织和器官的例子包括脑、脊髓、神经元、神经节、施万细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞以及小胶质细胞。神经退行性病症可以是急性病症，诸如中风或脑外伤或脊髓损伤。在另一个实施例中，神经退行性疾病或病症可以是慢性神经退行性病症。在慢性神经退行性病症中，自由基可以(例如)引起蛋白质损伤。此类蛋白质的例子为淀粉样β-蛋白。与自由基引起的损伤有关的慢性神经退行性疾病的例子包括帕金森氏病、阿尔茨海默病、亨廷顿氏病和肌萎缩侧索硬化症(也称葛雷克氏病)。
确定基于芳香族阳离子肽的治疗剂的生物效果。在各种实施例中，执行合适的体外或体内测定来确定具体的基于芳香族阳离子肽的治疗剂的效果以及其施用是否指示适用于治疗。在各种实施例中，可以对代表性的动物模型执行体外测定，以确定给定的基于芳香族阳离子肽的治疗剂是否在预防或治疗疾病或医学病症方面发挥期望的效果。在对人类受试者测试之前，可以在合适的动物模型系统中测试疗法中所用的化合物，所述动物模型系统包括但不限于大鼠、小鼠、鸡、猪、牛、猴、兔等。类似地，对于体内测试，在施用给人类受试者之前，可以使用本领域已知的任一动物模型系统。
预防性方法。在一个方面，本发明提供了一种通过将预防病症的发病或进展的芳香族阳离子肽施用给受试者来预防该受试者中的疾病的方法。在预防性应用中，将芳香族阳离子肽的药物组合物或药剂以一定量施用给易患疾病或病症或者处于疾病或病症的风险中的受试者，所述量足以消除或降低疾病的风险、减轻疾病的严重性或延迟疾病的发作，包括该疾病的生物化学、组织学和/或行为的症状、该疾病的并发症和该疾病发展期间呈现的中间病理表型。预防性的芳香族阳离子肽的施用可在反常的症状特点显现之前进行，使得疾病或障碍得到预防、或者使其进展得到延迟。可以基于上文描述的筛选测定法确定适当的化合物。
治疗性方法。技术的另一方面包括出于治疗目的来治疗受试者的疾病的方法。在治疗性应用中，将一定量的组合物或药物施用给疑似患有或已患有这样的疾病的受试者，所述量足以治愈或者至少部分地抑制该疾病的症状，包括该疾病的并发症和该疾病发展中的中间病理表型。因此，本发明提供了治疗患有疾病或医学病症的个体的方法。
施用模式和有效剂量
可以使用本领域的技术人员所知的用于使细胞、器官或组织与肽接触的任何方法。在一些实施例中，所述方法包括体外法、间接体内法或体内法。体内法通常包括将芳香族阳离子肽(诸如上文描述的那些)施用给哺乳动物，合适地施用给人。当用在体内以进行治疗时，芳香族阳离子肽以有效量(即，具有期望的治疗效果的量)施用给受试者。剂量和给药方案将取决于受试者中的损伤的程度、所使用的特定芳香族阳离子肽的特性(例如，其治疗指数)、该受试者以及该受试者的病史。
可以在临床前试验和临床试验期间利用内科医生和临床医生熟悉的方法来测定有效量。在所述方法中有用的肽的有效量可以通过用于施用药物化合物的多种熟知方法中的任一种来施用给需要该肽的哺乳动物。肽可以以全身方式或局部方式施用。
肽可以配制成可药用的盐。术语“可药用的盐”意指对于施用给患者诸如哺乳动物可接受的由碱或酸制备的盐(例如，对于给定的给药方案具有可接受的哺乳动物安全性的盐)。然而，应当理解，所述盐不需要是可药用的盐，诸如不旨在施用给患者的中间化合物的盐。可药用的盐可衍生自可药用的无机或有机碱，以及可药用的无机或有机酸。此外，当肽同时包含碱性部分(诸如胺、吡啶或咪唑)和酸性部分(诸如羧酸或四唑)时，可形成两性离子，且所述两性离子包括在本文中所用的术语“盐”内。由可药用的无机碱衍生出的盐包括铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、三价锰盐、二价锰盐、钾盐、钠盐和锌盐等。由可药用的有机碱衍生出的盐包括如下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，包括取代胺、环胺、天然存在的胺等，诸如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、葡甲胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。由可药用的无机酸衍生出的盐包括如下物质的盐：硼酸、碳酸、卤化氢(氢溴酸、盐酸、氢氟酸或氢碘酸)、硝酸、磷酸、氨基磺酸和硫酸。由可药用的有机酸衍生出的盐包括如下物质的盐：脂肪族羟基酸(例如，柠檬酸、葡糖酸、乙醇酸、乳酸、乳糖酸、苹果酸和酒石酸)、脂肪族单羧酸(例如，醋酸、丁酸、甲酸、丙酸和三氟乙酸)、氨基酸(例如，天冬氨酸和谷氨酸)、芳香族羧酸(例如，苯甲酸、对氯苯甲酸、二苯乙酸、龙胆酸、马尿酸和三苯基乙酸)、芳香族羟基酸(例如，邻羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、1-羟基萘-2-羧酸和3-羟基萘-2-羧酸)、抗坏血酸、二羧酸(例如，富马酸、马来酸、草酸和琥珀酸)、葡萄糖醛酸、扁桃酸、黏液酸、烟酸、乳清酸、双羟萘酸、泛酸、磺酸(例如，苯磺酸、樟脑磺酸、乙二磺酸(edisylic)、乙磺酸、羟乙磺酸、甲磺酸、萘磺酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2,6-二磺酸和对甲苯磺酸)、羟萘甲酸(xinafoic acid)等。在一些实施例中，盐为醋酸盐。除此之外或作为另外一种选择，在一些实施例中，盐为三氟醋酸盐。
本文所述的芳香族阳离子肽可以掺入到药物组合物以单独施用或联合施用给受试者来治疗或预防本文所述的疾病或医学病症。此类组合物通常包含活性剂和可药用的载体。如本文所用，术语“可药用的载体”包括可与药物施用相容的生理盐水、溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延缓剂等。也可将辅助性的活性化合物掺入到所述组合物中。
通常将药物组合物配制成与其计划施用途径相容。施用途径的例子包括肠胃外(例如，静脉内、皮内、腹腔内或皮下)、口服、吸入、经皮肤(局部)、眼内、离子电渗和经粘膜施用。用于肠胃外、皮内或皮下应用的溶液剂或混悬剂可包含以下组分：无菌稀释剂，诸如注射用水、生理盐水溶液、不挥发油、聚乙二醇、丙三醇、丙二醇或其他合成溶剂；抗菌剂，诸如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，诸如乙二胺四乙酸；缓冲液，诸如醋酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐；以及用于调节渗透压的试剂，诸如氯化钠或右旋糖。可使用酸或碱(诸如盐酸或氢氧化钠)来调节pH。肠胃外制剂可以封装在由玻璃或塑料制成的安瓿瓶、一次性注射器或多剂量瓶中。为了患者或治疗医师的方便，可以以装有一个疗程(例如，治疗7天)所需的所有用具(例如，药瓶、稀释液瓶、注射器和针头)的试剂盒的形式提供给药制剂。
适于注射用途的药物组合物可以包括无菌水溶液(在水溶性情况下)或者用于临时制备无菌注射液或分散液的分散剂和无菌粉末。对于静脉内施用，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(新泽西州帕西波尼的巴斯夫公司(BASF,Parsippany,N.J.))或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在所有情况下，用于肠胃外施用的组合物必须无菌且应当是达到易于注射的程度的流体。其在制造和存储条件下应当稳定且必须妥善保存以避免受到微生物(诸如细菌和真菌)的污染作用。
芳香族阳离子肽组合物可以包含载体，该载体可以是包括例如水、乙醇、多元醇(例如，丙三醇、丙二醇、以及液态聚乙二醇等)及其合适的混合物的溶剂或分散介质。例如，通过使用诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过保持所需粒度和通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。可通过各种抗菌剂和抗真菌剂例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞(thiomerasol)等来实现预防微生物的作用。可以包括谷胱甘肽和其他抗氧化剂以防止氧化。在很多情况下，将优选的是，在组合物中包含等渗剂，例如糖、多元醇(诸如甘露醇、山梨醇)或氯化钠。可通过在组合物中包含延迟吸收的试剂(例如，单硬脂酸铝或明胶)来引起可注射组合物的延长吸收。
可以通过将所需量的活性化合物掺入具有以上列出的一种成分或多种成分的组合的适当溶剂中、根据需要随后进行过滤灭菌来制备注射用无菌溶液。通常，通过将活性化合物掺入到包含基本分散介质以及以上列出的所需的其他成分的无菌溶媒中来制备分散液。在用于制备注射用无菌溶液的无菌粉末的情况中，典型的制备方法包括真空干燥和冷冻干燥，这可以产生活性成分及来自其先前灭菌过滤的溶液的任何另外所需成分的粉末。
口服组合物通常包含惰性稀释剂或可食用的载体。出于口服治疗施用的目的，活性化合物可以与赋形剂一起掺入并以片剂、锭剂或胶囊剂(例如，明胶胶囊剂)的形式使用。还可利用流体载体来制备口服组合物以用作洗口药。药学上相容的粘结剂和/或辅料可以被包括为组合物的一部分。所述片剂、丸剂、胶囊剂、锭剂等可包含具有相似性质的下列成分或化合物中的任一种：粘结剂，诸如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，诸如淀粉或乳糖；崩解剂，诸如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，诸如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，诸如胶态二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖或糖精；或者增味剂，诸如薄荷油、水杨酸甲酯或橙味调味剂。
对于通过吸入法施用，所述化合物可以以气溶胶喷雾的形式从包含合适推进剂(例如，诸如二氧化碳的气体)的加压容器或分配器或者喷雾器进行递送。此类方法包括美国专利No.6,468,798中描述的那些方法。
如本文所述的治疗性化合物的全身施用还可以通过经粘膜方法或经皮肤方法来进行。对于经粘膜施用或经皮肤施用，在制剂中使用适于渗透屏障的渗透剂。此类渗透剂通常是本领域已知的，并且例如，对于经粘膜施用而言，此类渗透剂包括清洗剂、胆汁盐和梭链孢酸衍生物。可以通过使用鼻喷入法来完成经粘膜施用。对于经皮肤施用而言，将活性化合物配制成本领域众所周知的药膏、软膏、凝胶或乳霜。在一个实施例中，经皮肤施用可以通过离子电渗法来进行。
治疗性肽可以在载体体系中配制而成。该载体可以是胶态体系。该胶态体系可以是脂质体、磷脂双分子层溶媒。在一个实施例中，该治疗性肽在脂质体中被胶囊包封，同时保持肽完整性。如本领域的技术人员将认识到，存在多种制备脂质体的方法。(参见Lichtenberg et al.,MethodsBiochem.Anal.,33:337-462(1988)(Lichtenberg等人，《生物化学分析方法》，第33卷，第337-462页，1988年)；Anselem et al.,LiposomeTechnology,CRC Press(1993)(Anselem等人，《脂质体技术》，CRC出版社，1993年))。脂质体制剂可延迟清除并增强细胞摄取(参见Reddy,Ann.Pharmacother.,34(7-8):915-923(2000)(Reddy，《药物治疗学年鉴》，第34卷，第7-8期，第915-923页，2000年))。活性剂还可以加载到由可药用的成分制备的粒子中，这些成分包括但不限于可溶的、不溶的、可渗透的、不可渗透的、可生物降解的或胃滞留的聚合物或脂质体。这类粒子包括但不限于纳米粒子、可生物降解纳米粒子、微粒、可生物降解微粒、纳米球、可生物降解纳米球、微球、可生物降解微球、胶囊剂、乳剂、脂质体、胶束以及病毒载体体系。
该载体也可以是聚合物，例如可生物降解的、生物相容的聚合物基体。在一个实施例中，治疗性肽可以嵌入聚合物基体中，同时保持蛋白质的完整性。聚合物可以是天然的，诸如多肽、蛋白质或多糖，或者可以是合成的，诸如聚α-羟基酸。例子包括由例如胶原、纤连蛋白、弹性蛋白、醋酸纤维素、硝酸纤维素、多糖、纤维蛋白、明胶以及其组合制成的载体。在一个实施例中，该聚合物为聚乳酸(PLA)或乳酸/乙醇酸共聚物(PGLA)。该聚合物基体可制备并分离成各种形式和尺寸，包括微球和纳米球。聚合物制剂可使治疗效果的持续时间延长(参见Reddy,Ann.Pharmacother.,34(7-8):915-923(2000)(Reddy，《药物治疗学年鉴》，第34卷，第7-8期，第915-923页，2000年))。人类生长激素(hGH)的聚合物制剂已用于临床试验。(参见Kozarich and Rich,Chemical Biology,2:548-552(1998)(Kozarich和Rich，《化学生物学》，第2卷，第548-552页，1998年))。
聚合物微球缓释制剂的例子在PCT公开WO 99/15154(Tracy等人)、美国专利No.5,674,534和5,716,644(均授予Zale等人)、PCT公开WO 96/40073(Zale等人)和PCT公开WO 00/38651(Shah等人)中有所描述。美国专利No.5,674,534和No.5,716,644以及PCT公开WO 96/40073描述了包含促红细胞生成素粒子的聚合物基体，该粒子通过盐稳定而不会聚集。
在一些实施例中，治疗性化合物与将保护治疗性化合物以防止其从身体中快速排出的载体一起制备，诸如包括植入体和微胶囊化的递送体系的控释制剂。可以使用可生物降解的生物相容的聚合物，诸如乙烯醋酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸(polylacetic acid)。可以利用已知的技术来制备此类制剂。该材料也可以从例如阿尔扎公司(AlzaCorporation)和诺瓦制药公司(Nova Pharmaceuticals,Inc.)商购获得。脂质体混悬剂(包括通过针对细胞特异性抗原的单克隆抗体靶向特定细胞的脂质体)也可以用作可药用的载体。这些物质都可以根据本领域技术人员已知的方法进行制备，例如如美国专利No.4,522,811中所述。
也可以配制该治疗性化合物以增强细胞内递送。例如，脂质体递送体系是本领域已知的，参见例如Chonn and Cullis,“Recent Advances inLiposome Drug Delivery Systems,”Current Opinion in Biotechnology 6:698-708(1995)(Chonn和Cullis，“脂质体药物递送体系的最新进展”，《生物技术新见》，第6卷，第698-708页，1995年)；Weiner,“Liposomesfor Protein Delivery:Selecting Manufacture and Development Processes,”Immunomethods,4(3):201-9(1994)(Weiner，“用于蛋白质递送的脂质体：选择制造商和开发工艺”，《免疫方法》，第4卷，第3期，第201-209页，1994年)；以及Gregoriadis,“Engineering Liposomes for Drug Delivery:Progress and Problems,”Trends Biotechnol.,13(12):527-37(1995)(Gregoriadis，“用于药物递送的工程化脂质体：进展和问题”，《生物技术趋势》，第13卷，第12期，第527-537页，1995年)。Mizguchi et al.,Cancer Lett.,100:63-69(1996)(Mizguchi等人，《癌症快报》，第100卷，第63-69页，1996年)描述了使用融合脂质体同时在体内和体外将蛋白质递送至细胞中。
治疗剂的剂量、毒性和疗效可以通过在细胞培养物或实验动物中的例如用于确定LD50(50％群体的致死剂量)和ED50(50％群体的有效治疗剂量)的标准制药过程来确定。毒性与治疗效果之间的剂量比是治疗指数，并且可以表示为比率LD50/ED50。优选表现出高治疗指数的化合物。尽管可以使用表现出毒性副作用的化合物，但应当小心设计递送体系，该体系将这类化合物靶向病变组织的位点，以最小化对未感染细胞的可能损伤，从而减少副作用。
从细胞培养试验和动物研究中获得的数据可用于制定适用于人类的剂量范围。此类化合物的剂量优选地处于包括毒性很小或无毒的ED50的循环浓度的范围内。根据使用的剂型和利用的施用途径，剂量可以在该范围内变化。对于该方法中使用的任何化合物，治疗有效剂量可以通过细胞培养试验进行初步估计。可以在动物模型中制定一剂量来实现包括如在细胞培养中所确定的IC50(即，该测试化合物实现对症状的半数最大抑制的浓度)的循环血浆浓度范围。此类信息可用于更准确地确定人类的可用剂量。可以例如通过高效液相色谱来测量血浆中的水平。
通常，足以实现治疗或预防效果的芳香族阳离子肽的有效量范围为约0.000001毫克/千克体重/天至约10,000毫克/千克体重/天。在一些实施例中，剂量范围为约0.0001毫克/千克体重/天至约100毫克/千克体重/天。例如，剂量可以是每天、每两天或每三天1毫克/千克体重或10毫克/千克体重，或者在每周、每两周或每三周1-10毫克/千克的范围内。在一个实施例中，肽的单次剂量的范围为0.1-10,000微克/千克体重。在一个实施例中，载体中芳香族阳离子肽浓度的范围为0.2至2000微克/递送毫升。示例性的治疗方案需要每天一次或每周一次施用。在治疗应用中，有时会需要在相对短的时间间隔使用相对高的剂量，直到疾病的进展能减缓或终止，并且优选地直到受试者显示疾病症状得到部分或完全改善。此后，可以对患者按预防性方案施用。
在一些实施例中，芳香族阳离子肽的治疗有效量可以限定为靶组织处10-11至10-6摩尔浓度，例如约10-7摩尔浓度的肽浓度。可以以0.01毫克/千克到100毫克/千克的全身剂量或按身体表面积计的等效剂量来递送该浓度。优化剂量的时间表，以维持靶组织处的治疗浓度，最优选地通过每天或每周单次施用，但也包括连续施用(例如，肠胃外输液或经皮肤施用)来进行。
熟练的技术人员将会知道，某些因素可能影响有效治疗受试者所需的剂量和时间，包括但不限于，疾病或障碍的严重程度、先前的治疗、受试者的总体健康状况和/或年龄，以及存在的其他疾病。此外，利用本文所述的治疗有效量的治疗组合物来治疗受试者可以包括单次治疗或一系列治疗。
根据本发明方法治疗的哺乳动物可以是任何哺乳动物，包括例如，家畜，如绵羊、猪、牛和马；宠物动物，如狗和猫；试验动物，如大鼠、小鼠和兔子。在合适的实施例中，哺乳动物是人类。
肽合成
芳香族阳离子肽可根据以下一般方法进行合成。采用固相肽合成，并且所有的氨基酸衍生物均可商购获得。肽组装完成后，采用常规方式将肽从树脂裂解下来。通过制备型反相色谱来纯化粗肽。在三种不同体系中，肽的结构同一性通过FAB质谱法进行确认，并且其纯度通过分析型反相HPLC和薄层色谱进行评估。将实现>98％的纯度。通常，采用5g树脂的合成试验产生约2.0-2.3g纯肽。
实例
本发明通过以下实例进行说明，这不应该理解为以任何方式进行限制。应当理解，这些方法可采用本文所公开的任何肽执行，并且不限于下文所述的示例性肽。
用于分离细胞色素c和线粒体的方法是本领域所熟知的(参见例如Richardson et.al.,Phytochemistry,Volume 9,Issue 11,November 1970,Pages2271-2280(Richardson等人，《植物化学》，第9卷，第11期，1970年11月，第2271-2280页)；Qproteome Mitochondria Isolation Kit,QIAGEN,27220Turnberry Lane,Suite 200Valencia,CA 91355(Qproteome线粒体分离试剂盒，凯杰公司，加利福尼亚州瓦伦西亚市27220坦伯利巷200室，邮编91355))。
实例1：使用肽实例1.D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 (P-231)的方法
A.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 有利于细胞色素c还原。
吸收光谱法(UltroSpec 3300Pro；220-1100nm)用于确定D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2是否调节细胞色素c还原。采用谷胱甘肽还原细胞色素c与Q带(450-650nm)中的多个偏移相关，其中显著的偏移在550nm处。D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2的添加预计会在550nm处产生显著的光谱权重偏移。时间相关光谱表明D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2增大了细胞色素c还原的速率。这些数据证实D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2改变了细胞色素c的电子结构，并且增强了Fe3+向Fe2+血红素的还原。因此，本文所公开的肽可用于增加细胞色素c还原。
B.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 增强通过细胞色素c的电子扩散。
执行循环伏安法(CV)，以确定D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2是否改变了细胞色素c的电子流和/或还原/氧化电位。使用Au工作电极、Ag/AgCl参比电极和Pt辅助电极来进行CV。D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2预计会同时增加细胞色素c的还原和氧化过程的电流。据预测，D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2将不会改变还原/氧化电位，但相反会增加通过细胞色素c的电子流，表明D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2减小了复合物III到IV之间的电阻。因此，本文所公开的肽可用于增强通过细胞色素c的电子扩散。
C.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 增强细胞色素c中的电子容量。
将进行光致发光(PL)以检查D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2对细胞色素c的血红素导带的电子结构、负责电子传递的能态的影响。Nd:YDO4激光器(532.8nm)将用于激发细胞色素c中的电子。据预测，细胞色素c状态的强PL发射将在650nm处被清晰识别。据预测，随着D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2的添加，PL强度将剂量依赖性地增大，意味着细胞色素c中导带的可用电子态增加。该结果表明D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2增大了细胞色素c的导带的电子容量，其与D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2介导的通过细胞色素c的电流增大一致。因此，本文所公开的肽可用于增强细胞色素c的电子容量。
D.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 引发细胞色素c血红素周围的新的π-π相 互作用。
将执行圆二色性(Olis分光偏振计，DSM20)以监控索雷氏带(反峰，在415nm处)，作为用于细胞色素c中的π-π*血红素环境的探针。据预测，D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2将促进该峰“红”移至440nm，表明D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2引发细胞色素c中的新的血红素-酪氨酸π-π*跃迁，而没有发生变性。该结果表明，通过向血红素提供用于电子隧道效应的额外的酪氨酸、或者减少外源酪氨酸残基和血红素之间的距离，D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2改变了血红素的直接环境。血红素周围的π–π*相互作用的增大将增强电子隧道效应，这有利于电子扩散。因此，本文所公开的肽可用于引发细胞色素c周围的π-π相互作用。
E.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 增加线粒体O 2 消耗。
使用氧描记器来测定离体的大鼠肾脏线粒体的氧气消耗。在状态2(仅400μM ADP)、状态3(400μM ADP和500μM底物)和状态4(仅底物)下，在不同浓度的D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2的存在下，测量呼吸速率。所有实验重复进行三次，其中n＝4-7。据预测，结果将表明D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2促进了电子传递至氧气，而不解偶联线粒体。
F.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 增加离体线粒体中的ATP合成。
通过在添加400mM ADP之后1分钟时测量从离体线粒体收集的呼吸缓冲液中的ATP来确定线粒体ATP合成的速率。通过HPLC分析ATP。所有实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，将D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2添加到离体的线粒体中会剂量依赖性地增大ATP合成的速率。该结果表明，由D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2引起的电子传递的增强与ATP合成有关。
G.肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH 2 增强除去细胞色素c的线粒体内膜的呼 吸。
为了证实细胞色素c在D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2对线粒体呼吸的作用中所起到的作用，在除去细胞色素c的线粒体内膜中确定D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2对线粒体O2消耗的影响，该线粒体内膜由冷冻一次的大鼠肾脏的线粒体制得。在具有或不具有100μM D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2的500μM琥珀酸盐存在下，测量呼吸速率。实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，数据将表明：1)D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2借助IMM紧密结合的细胞色素c而起作用；2)D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2可补救功能性细胞色素c的减少。
实例2：使用肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 的方法
A.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 有利于细胞色素c还原。
吸收光谱法(UltroSpec 3300Pro；220-1100nm)用于确定D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2是否调节细胞色素c还原。采用谷胱甘肽还原细胞色素c与Q带(450-650nm)中的多个偏移相关，其中显著的偏移在550nm处。D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2的添加预计会在550nm处产生显著的光谱权重偏移。时间相关光谱表明D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2增大了细胞色素c还原的速率。这些数据证实D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2改变了细胞色素c的电子结构，并且增强了Fe3+向Fe2+血红素的还原。因此，本文所公开的肽可用于增加细胞色素c还原。
B.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强通过细胞色素c的电子扩 散。
执行循环伏安法(CV)，以确定D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2是否改变了细胞色素c的电子流和/或还原/氧化电位。使用Au工作电极、Ag/AgCl参比电极和Pt辅助电极来进行CV。D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2预计会同时增加细胞色素c的还原和氧化过程的电流。据预测，D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2将不会改变还原/氧化电位，但相反会增加通过细胞色素c的电子流，表明D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2减小了复合物III到IV之间的电阻。因此，本文所公开的肽可用于增强通过细胞色素c的电子扩散。
C.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强细胞色素c的电子容量。
将进行光致发光(PL)以检查D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2对细胞色素c的血红素导带的电子结构、负责电子传递的能态的影响。Nd:YDO4激光器(532.8nm)将用于激发细胞色素c中的电子。据预测，细胞色素c状态的强PL发射将在650nm处被清晰识别。据预测，随着D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2的添加，PL强度将剂量依赖性地增大，意味着细胞色素c中导带的可用电子态增加。该结果表明D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2增大了细胞色素c的导带的电子容量，其与D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2介导的通过细胞色素c的电流增大一致。因此，本文所公开的肽可用于增强细胞色素c的电子容量。
D.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 引发细胞色素c血红素周围的新 的π-π相互作用。
将执行圆二色性(Olis分光偏振计，DSM20)以监控索雷氏带(反峰，在415nm处)，作为用于细胞色素c中的π-π*血红素环境的探针。据预测，D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2将促进该峰“红”移至440nm，表明D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2引发细胞色素c中的新的血红素-酪氨酸π-π*跃迁，而没有发生变性。该结果表明，通过向血红素提供用于电子隧道效应的额外的酪氨酸、或者减少外源酪氨酸残基和血红素之间的距离，D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2改变了血红素的直接环境。血红素周围的π–π*相互作用的增大将增强电子隧道效应，这有利于电子扩散。因此，本文所公开的肽可用于引发细胞色素c周围的π-π相互作用。
E.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 增加线粒体O 2 消耗。
使用氧描记器来测定离体的大鼠肾脏线粒体的氧气消耗。在状态2(仅400μM ADP)、状态3(400μM ADP和500μM底物)和状态4(仅底物)下，在不同浓度的D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2的存在下，测量呼吸速率。所有实验重复进行三次，其中n＝4-7。据预测，结果将表明D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2促进了电子传递至氧气，而不解偶联线粒体。
F.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 增加离体线粒体中的ATP合成。
通过在添加400mM ADP之后1分钟时测量从离体线粒体收集的呼吸缓冲液中的ATP来确定线粒体ATP合成的速率。通过HPLC分析ATP。所有实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，将D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2添加到离体的线粒体中会剂量依赖性地增大ATP合成的速率。该结果表明，由D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2引起的电子传递的增强与ATP合成有关。
G.肽D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强除去细胞色素c的线粒体内 膜的呼吸。
为了证实细胞色素c在D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2对线粒体呼吸的作用中所起到的作用，在除去细胞色素c的线粒体内膜中确定D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2对线粒体O2消耗的影响，该线粒体内膜由冷冻一次的大鼠肾脏的线粒体制得。在具有或不具有100μM D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2的500μM琥珀酸盐存在下，测量呼吸速率。实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，数据将表明：1)D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2借助IMM紧密结合的细胞色素c而起作用；2)D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2可补救功能性细胞色素c的减少。
实例3：使用肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2. (P-231-D)的方法
A.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 有利于细胞色素c还原。
吸收光谱法(UltroSpec 3300Pro；220-1100nm)用于确定D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2是否调节细胞色素c还原。采用谷胱甘肽还原细胞色素c与Q带(450-650nm)中的多个偏移相关，其中显著的偏移在550nm处。D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2的添加预计会在550nm处产生显著的光谱权重偏移。时间相关光谱表明D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2增大了细胞色素c还原的速率。这些数据证实D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2改变了细胞色素c的电子结构，并且增强了Fe3+向Fe2+血红素的还原。因此，本文所公开的肽可用于增加细胞色素c还原。
B.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强通过细胞色素c的电子扩散。
执行循环伏安法(CV)，以确定D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2是否改变了细胞色素c的电子流和/或还原/氧化电位。使用Au工作电极、Ag/AgCl参比电极和Pt辅助电极来进行CV。D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2预计会同时增加细胞色素c的还原和氧化过程的电流。据预测，D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2将不会改变还原/氧化电位，但相反会增加通过细胞色素c的电子流，表明D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2减小了复合物III到IV之间的电阻。因此，本文所公开的肽可用于增强通过细胞色素c的电子扩散。
C.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强细胞色素c的电子容量。
将进行光致发光(PL)以检查D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2对细胞色素c的血红素导带的电子结构、负责电子传递的能态的影响。Nd:YDO4激光器(532.8nm)将用于激发细胞色素c中的电子。据预测，细胞色素c状态的强PL发射将在650nm处被清晰识别。据预测，随着D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2的添加，PL强度将剂量依赖性地增大，意味着细胞色素c中导带的可用电子态增加。该结果表明D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2增大了细胞色素c的导带的电子容量，其与D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2介导的通过细胞色素c的电流增大一致。因此，本文所公开的肽可用于增强细胞色素c的电子容量。
D.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 引发细胞色素c血红素周围的新的 π-π相互作用。
将执行圆二色性(Olis分光偏振计，DSM20)以监控索雷氏带(反峰，在415nm处)，作为用于细胞色素c中的π-π*血红素环境的探针。据预测，D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2将促进该峰“红”移至440nm，表明D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2引发细胞色素c中的新的血红素-酪氨酸π-π*跃迁，而没有发生变性。该结果表明，通过向血红素提供用于电子隧道效应的额外的酪氨酸、或者减少外源酪氨酸残基和血红素之间的距离，D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2改变了血红素的直接环境。血红素周围的π–π*相互作用的增大将增强电子隧道效应，这有利于电子扩散。因此，本文所公开的肽可用于引发细胞色素c周围的π-π相互作用。
E.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 增加线粒体O 2 消耗。
使用氧描记器来测定离体的大鼠肾脏线粒体的氧气消耗。在状态2(仅400μM ADP)、状态3(400μM ADP和500μM底物)和状态4(仅底物)下，在不同浓度的D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2的存在下，测量呼吸速率。所有实验重复进行三次，其中n＝4-7。据预测，结果将表明D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2促进了电子传递至氧气，而不解偶联线粒体。
F.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 增加离体的线粒体中的ATP合 成。
通过在添加400mM ADP之后1分钟时测量从离体线粒体收集的呼吸缓冲液中的ATP来确定线粒体ATP合成的速率。通过HPLC分析ATP。所有实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，将D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2添加到离体的线粒体中会剂量依赖性地增大ATP合成的速率。该结果表明，由D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2引起的电子传递的增强与ATP合成有关。
G.肽D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH 2 增强除去细胞色素c的线粒体内膜 的呼吸。
为了证实细胞色素c在D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2对线粒体呼吸的作用中所起到的作用，在除去细胞色素c的线粒体内膜中确定D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2对线粒体O2消耗的影响，该线粒体内膜由冷冻一次的大鼠肾脏的线粒体制得。在具有或不具有100μM D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2的500μM琥珀酸盐存在下，测量呼吸速率。实验重复进行三次，其中n＝3。据预测，数据将表明：1)D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2借助IMM紧密结合的细胞色素c而起作用；2)D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2可补救功能性细胞色素c的减少。

Claims (7)

1.一种芳香族阳离子肽，包括肽序列D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)。
2.一种芳香族阳离子肽，包括肽序列D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)。
3.一种芳香族阳离子肽，包括肽序列D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2。
4.一种在包含细胞色素c的样本中增加细胞色素c还原的方法，包括使所述样本与有效量的所述芳香族阳离子肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)或D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2中的一种或多种接触。
5.一种在包含细胞色素c的样本中增强通过细胞色素c的电子扩散的方法，包括使所述样本与有效量的所述芳香族阳离子肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)或D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2中的一种或多种接触。
6.一种在包含细胞色素c的样本中增强细胞色素c的电子容量的方法，包括使所述样本与有效量的所述芳香族阳离子肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)或D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2中的一种或多种接触。
7.一种在包含细胞色素c的样本中引发细胞色素c周围的π-π相互作用的方法，包括使所述样本与有效量的所述芳香族阳离子肽D-Arg-Tyr-Lys-Phe-NH2(P-231)、D-Arg-D-Tyr-D-Lys-D-Phe-NH2(P-231D)或D-Arg-D-Dmt-D-Lys-D-Phe-NH2中的一种或多种接触。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6157481B2 (ja) 2011-09-29 2017-07-05 メイヨ ファンデーション フォア メディカル エディケイション アンド リサーチ 芳香族陽イオン性ペプチドおよびその使用方法
WO2016130143A2 (en) * 2015-02-13 2016-08-18 Stealth Peptides International, Inc. Therapeutic compositions including mitochondrial fission inhibitor peptides, variants thereof and methods of using the same
WO2017180535A1 (en) 2016-04-11 2017-10-19 Carnot, Llc Chiral peptides

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011091357A1 (en) * 2010-01-25 2011-07-28 Cornell University Aromatic-cationic peptides and uses of same
WO2011139992A1 (en) * 2010-05-03 2011-11-10 Stealth Peptides International, Inc. Aromatic-cationic peptides and uses of same

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5804558A (en) * 1993-07-20 1998-09-08 University Of California Protegrins
US20020173475A1 (en) * 2001-04-16 2002-11-21 Asim Dasgupta Methods to inhibit viral replication
DK1625149T3 (en) * 2003-05-01 2016-05-30 Cornell Res Foundation Inc METHOD AND carrying complexes for delivery of molecules to cells
BRPI0906404B8 (pt) * 2008-01-24 2021-05-25 Univ Louisiana State construção de fusão com domínio lítico, seus usos, composição farmacêutica, bem como processo para reduzir ou inibir seletivamente a proliferação de uma célula que expressa um receptor, ligante ou antígeno
WO2013059071A1 (en) * 2011-10-17 2013-04-25 Cornell University Aromatic-cationic peptides and uses of same
EP3466439A1 (en) * 2011-12-09 2019-04-10 Stealth Peptides International, Inc. Aromatic-cationic peptides and uses of same
EP2817021B1 (en) * 2012-02-23 2019-01-02 Cornell University Aromatic-cationic peptides and uses of same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011091357A1 (en) * 2010-01-25 2011-07-28 Cornell University Aromatic-cationic peptides and uses of same
WO2011139992A1 (en) * 2010-05-03 2011-11-10 Stealth Peptides International, Inc. Aromatic-cationic peptides and uses of same

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAIYING LIU ET AL.: "Control of the Electron Transfer Rate between Cytochrome c and Gold Electrodes by the Manipulation of the Electrode’s Hydrogen Bonding Character", 《LANGMUIR》 *
SEUNG-RYOUNG JUNG ET AL.: "Reduced Cytochrome c Is an Essential Regulator of Sustained Insulin Secretion by Pancreatic Islets", 《JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》 *
YUKI TAKAYAMA ET AL.: "Role of ³-Electron Systems in Stabilization of the Oxidized Tetraheme Architecture in Cytochrome c3", 《THE CHEMICAL SOCIETY OF JAPAN》 *

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