CN104285863B - 一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法 - Google Patents

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Abstract

一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，属于水产生物技术领域。该方法为雌核发育黄姑鱼养殖过程中用雄性激素诱导得到可育黄姑鱼伪雄鱼，所述的雄性激素为甲睾酮。上述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，设计合理，利用甲睾酮激素进行诱导，并科学合理地限定诱导步骤，使得最后得到的黄姑鱼雄性率达到86%以上，为黄姑鱼的定性育种提供理论和技术上的指导。

Description

一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法
技术领域
本发明属于水产生物技术领域，具体涉及一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法。
背景技术
黄姑鱼隶属于鲈形目（Perciformes）、石首鱼科（Sciaenidae）、黄姑鱼属（Nibea），在我国黄、渤海、东海及南海均有分布，是一种暖水性中下层鱼类。它生长快、抗病力强、肉质细嫩、口感独特，味道鲜美，其鳔是名贵的中药补品，具有较高的食用价值和药用价值。
网箱养殖黄姑鱼的过程中发现，黄姑鱼雌鱼比雄鱼重30%，而且随着黄姑鱼的生长，雌雄个体差距会进一步增大（徐冬冬等，渔业现代化，2010）；黄姑鱼人工育苗过程中发现，当黄姑鱼鱼苗体全长达1.5 cm时出现了自残现象，同时个体大小出现很大差异（楼宝等，现代渔业信息，2011）；同时，也有研究表明，全雌苗种比普通苗种生长速度更快（司飞等，河北渔业，2009）。人工雌核发育为鱼类的全雌化奠定了基础，但通过雌核发育方法仅能获得极少量苗种，不能满足黄姑鱼苗种市场化的需求，因此开展黄姑鱼伪雄鱼诱导方法的研究，对于全雌苗种规模化繁育具有重要的理论价值与应用价值。
黄姑鱼全雌化可以很好地解决在育苗和网箱养殖过程中遇到的问题，生产出可育伪雄鱼是鱼类全雌化的关键，但目前，国内外尚未有关于黄姑鱼伪雄鱼的文献报道。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法的技术方案。
所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于雌核发育黄姑鱼养殖过程中用雄性激素诱导得到可育黄姑鱼伪雄鱼，所述的雄性激素为甲睾酮。
所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于具体包括以下步骤：
1）将条石鲷精子诱导的雌核发育黄姑鱼养至20日龄大小，全长3.67±0.11cm；
2）饲养期间根据黄姑鱼的日龄控制饲养密度和水体底面积；
3）黄姑鱼从21日龄开始浸泡浓度为2ppb的甲睾酮溶液，每天2h，2h后完全换水；
4）甲睾酮溶液浸泡持续至黄姑鱼90日龄为止。
所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于所述的步骤2）中20-39日龄时饲养密度为每300L水体50尾鱼，水体底面积不应小于0.8m2；40-69日龄时饲养密度为每500L水体50尾鱼，水体底面积不应小于1.25m2；70-90日龄为每1000L水体50尾鱼，水体底面积不应小于2.00m2。
所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于黄姑鱼40日龄时开始投喂吸附有甲睾酮的颗粒饲料，该颗粒饲料中甲睾酮的浓度为1mg/kg，具体为40-50日龄投喂吸附有甲睾酮的开口饵料“鱼宝6号”， 51-60日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀1号”， 61-75日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀2号”， 76-90日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀3号”。
所述的甲睾酮在诱导雌核发育黄姑鱼成为黄姑鱼伪雄鱼中的应用。
本发明中甲睾酮，又称甲基睾丸酮，英文名称为17α-Methyltestosterone，化学名为17β-羟基-17α-甲基雄甾-4-烯-3-酮，分子式为C20H30O2。
本发明中用于甲睾酮激素母液配制方法如下：准确称量（0.050±0.0010）g甲睾酮激素；将称量好的甲睾酮溶解于AR分析纯无水乙醇中，并用500ml容量瓶定容；配制好的激素母液浓度为100ppm；4℃下，避光保存，保存期限为1个月。
本发明中吸附有甲睾酮的颗粒饲料制作方法如下：准确称量（0.0500±0.0010）g甲睾酮激素；将称量好的甲睾酮溶解于AR分析纯无水乙醇中，并用500ml容量瓶定容；使用50ml碱式滴定管准确量取50ml激素母液至小喷壶中；
准确称量（5000.00±1.00）g“鱼宝系列”、“鱼耀系列”饵料；将5000g饵料均匀平铺于100目筛绢网上；将50ml激素母液分5次均匀喷洒在饵料上，期间不停混匀饵料，20℃下阴干。
本发明中 “鱼宝6号”、“鱼耀1号”、“鱼耀2号”和“鱼耀3号”由日本林兼产业株式会生产销售。
上述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，设计合理，利用甲睾酮激素进行诱导，并科学合理地限定诱导步骤，使得最后得到的黄姑鱼雄性率达到86%以上，为黄姑鱼的定性育种提供理论和技术上的指导。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步说明本发明。
实施例1
（1）将条石鲷精子诱导的雌核发育黄姑鱼养至20日龄大小；
（2）饲养期间根据黄姑鱼的日龄控制饲养密度和水体底面积：20-39日龄时饲养密度为每300L水体50尾鱼，水体底面积不应小于0.8m2；40-69日龄时饲养密度为每500L水体50尾鱼，水体底面积不应小于1.25m2；70-90日龄为每1000L水体50尾鱼，水体底面积不应小于2.00m2
（3）从21日龄开始，雌核发育黄姑鱼每日浸泡甲睾酮溶液，甲睾酮溶液浓度为2ppb（即每100L养殖水体，加甲睾酮母液2ml），每天2h，2h后完全换水；
（4）黄姑鱼40日龄时开始投喂吸附有甲睾酮的饲料，饲料中甲睾酮的浓度为1mg/kg，具体为：黄姑鱼40-50日龄投喂开口饵料“鱼宝6号”；黄姑鱼51-60日龄投喂成鱼饵料“鱼耀1号”；黄姑鱼61-75日龄投喂成鱼饵料“鱼耀2号”；黄姑鱼76-90日龄投喂成鱼饵料“鱼耀3号”；
（5）激素浸泡和饲料投喂持续10周；
（6）黄姑鱼90日龄时，随机选取300尾，取其性腺，做石蜡切片；
（7）其中260尾为雄性腺性，40尾两性性腺，雄性率86.67%。

Claims (3)

1.一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于雌核发育黄姑鱼养殖过程中用雄性激素诱导得到可育黄姑鱼伪雄鱼，所述的雄性激素为甲睾酮，具体包括以下步骤：
1）将条石鲷精子诱导的雌核发育黄姑鱼养至20日龄大小；
2）饲养期间根据黄姑鱼的日龄控制饲养密度和水体底面积；
3）黄姑鱼从21日龄开始浸泡浓度为2ppb的甲睾酮溶液，每天2h，2h后完全换水；
4）甲睾酮溶液浸泡持续至黄姑鱼90日龄为止。
2.如权利要求1所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于20-39日龄时饲养密度为每300L水体50尾鱼，水体底面积不应小于0.8m2；40-69日龄时饲养密度为每500L水体50尾鱼，水体底面积不应小于1.25m2；70-90日龄为每1000L水体50尾鱼，水体底面积不应小于2.00m2。
3.如权利要求1所述的一种诱导雌核发育黄姑鱼伪雄鱼的方法，其特征在于黄姑鱼40日龄时开始投喂吸附有甲睾酮的颗粒饲料，该颗粒饲料中甲睾酮的浓度为1mg/kg，具体为40-50日龄投喂吸附有甲睾酮的开口饵料“鱼宝6号”， 51-60日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀1号”，61-75日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀2号”，76-90日龄投喂吸附有甲睾酮的成鱼饵料“鱼耀3号”。
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