CN104262226A - 手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用。该化合物如式I所示。本发明提供的制备伪核苷类化合物的原料是用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270微生物体系催化水解氮杂环状二酰胺类化合物得到。所用红球菌菌体用量可根据底物的用量来进行调节。反应溶剂为pH值6.0-8.0的常用缓冲溶液，温度为20-37℃，反应时间为0.1—120小时。该红球菌微生物催化体系具有可发酵培养和保存方便的特点。运用此生物转化制备手性氮杂环状二酰胺、单酰胺羧酸、二羧酸的方法，具有操作简便，反应高效，反应条件温和，对映选择性高，产物易分离，产物纯度高的特点，并用作新型伪核苷的合成。

Description

手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用
本申请是申请号为201110097981.2、申请日为2011年4月19日、发明创造名称为“手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用”的分案申请。 
技术领域
本发明涉及手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用。 
背景技术
伪核苷类化合物，也称非天然核苷类化合物，是一类在化学结构上与天然核苷相似的化合物，因而在体内能够干扰或直接用于核酸的代谢过程，阻断蛋白质、核酸的生物合成，因此，这些化合物在抗病毒和抗肿瘤药物中占有重要的地位。 
目前伪核苷类的化合物主要采用天然糖类化合物为原料，通过糖苷键的形成来合成伪核苷类化合物。其中糖苷键的选择性控制比较困难。本发明通过生物催化的方法先构建顺式或反式的手性假糖环骨架，避免了糖苷键的选择性控制。 
生物催化是迄今为止最具高效、高选择性和环境友好的过程，利用生物催化的方法合成一些具有高附加值的化学品，特别是手性化学品具有重要的应用前景和意义。腈是一类重要的有机合成中间体，腈的化学转化要求条件苛刻且选择性很差，而腈的生物转化反应具有条件温和、高选择性等优点，目前已经应用工业化制备相应的羧酸和酰胺衍生物，最著名的是1985年由日本Nitto公司(现更名为Mitsubishi Rayon公司)率先实现了微生物法合成丙烯酰胺的工业化。1998年丙烯酰胺的年产量超过4万吨，成为目前世界上最大规模的工业化生物转化途径之一。红球菌Rhodococcus rhodochrous J1还被瑞士Lonza AG公司用以工业化生产B族维生素烟酰胺和烟酸，其中烟酰胺的年产量已经超过3000吨。但是与酶催化酯水解和酯键形成反应相比，腈与酰胺的生物催化反应还相对较少。腈与酰胺的生物转化反应不仅能得到羧酸，而且通过动力学拆分与去对称化方法还能得到酯水解反应得不到的含氮有机化合物酰胺或腈。 
发明内容
本发明的目的是提供一种手性伪核苷类化合物及其制备方法与应用。 
本发明提供的手性伪核苷类化合物，为式I所示化合物； 
所述式I中，n为1-3的整数，m为0或1； 
*代表手性，为R或S构型； 
X为-OH、其中，R1为碳原子总数为1-5的烷基或磷酸基，R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种； 
Y为-OH、其中，R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种； 
R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。 
本发明提供的制备上述式I所示中m为0、Y为X为-OH、 的伪核苷类化合物的方法，为方法a或方法b，其中，方法a以式II所示化合物为起始反应物，包括如下步骤： 
1)将式II’所述化合物与SOCl2于N,N-二甲基甲酰胺中进行反应，反应完毕得到式IIa1所示化合物； 
所述式II’中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R3为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3； 
2)将步骤1)所得式IIa1所示化合物与NaN3和ZnBr2于由异丙醇和水组成的混合液中进行回流反应，反应完毕得到式IIb1所示化合物； 
3)将步骤2)所得式IIb1所示化合物与LiAlH4于四氢呋喃中进行回流反应，反应完毕得到式IIc1所示化合物； 
4)将步骤3)所得的式IIc1所示化合物于二氯甲烷中与乙酸酐、吡啶和4-二甲基氨基-吡啶进行反应，反应完毕得到所述式I中m为0、Y为X为-OH、 的伪核苷类化合物，也即式IId1所示化合物； 
所述式IIa1、式IIb1、式IIc1和式IId1中，n均为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2均为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；X为-OH、或
该方法的所述步骤1)中，所述式II’所述化合物、SOCl2与N,N-二甲基甲酰胺的用量比为1.0-10.0mmol：0.1-2mL：1-100mL，优选10mmol：1mL：4mL；所述反应步骤中，温度为-10℃-50℃，优选0℃，时间为0.5-24小时，优选1小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤2)中，所述式IIa1所示化合物、NaN3、ZnBr2与所述由异丙醇和水组成的混 合液的用量比为0.1-10.0mmol：0.2-20mmol：0.1-10mmol：1-10mL，优选1mmol：2mmol：0.5mmol：4.5mL；所述由异丙醇和水组成的混合液中，异丙醇和水的体积比为1-10：0.1-100，优选1:2；所述回流反应步骤中，时间为1-24小时，优选16小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤3)中，所述式IIb1所示化合物、LiAlH4与四氢呋喃的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：10mL；所述回流反应步骤中，时间为6-48小时，优选12小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤4)中，所述式IIc1所示化合物、乙酸酐、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二氯甲烷的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：0.01-1mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：1mmol：0.1mmol：10mL；所述反应温度为0-50℃，优选25℃，时间为6-48小时，优选12小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
方法b以式III’所示化合物为起始反应物，包括如下步骤： 
所述方法b包括如下步骤： 
1)将式III’所述化合物与SOCl2于DMF中进行反应，反应完毕得到式IIIa1所示化合物； 
所述式III’中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3，R3’为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3； 
2)将步骤1)所得式IIIa1所示化合物与NaN3和ZnBr2于由异丙醇和水组成的混合液中进行回流反应，反应完毕得到式IIIb1所示化合物； 
3)将步骤2)所得式IIIb1所示化合物与LiAlH4于四氢呋喃中进行回流反应，反应完毕得到式IIIc1所示化合物； 
4)将步骤3)所得的式IIIc1所示化合物于二氯甲烷中与乙酸酐、吡啶和4-二甲基氨基-吡啶进行反应，反应完毕得到所述式I中m为0、Y为X为-OH、 的伪核苷类化合物，也即式IIId1所式示化合物， 
所述式IIIa1、式IIIb1、式IIIc1和式IIId1中，n均为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2均为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；X为-OH、
上述方法的步骤1)中，所述式III’所述化合物、SOCl2与DMF的用量比为1.0-10.0mmol:0.1-2mL:1-100mL，优选10mmol：1mL：4mL；所述反应步骤中，温度为-10℃-50℃，优选0℃，时间为0.5-24小时，优选1小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤2)中，所述式IIIa1所示化合物、NaN3、ZnBr2与所述由异丙醇和水组成的混 合液的用量比为0.1-10.0mmol：0.2-20mmol：0.1-10mmol：1-10mL，优选1mmol：2mmol：0.5mmol：4.5mL；所述由异丙醇和水组成的混合液中，异丙醇和水的体积比为1-10：0.1-100，优选1:2；所述回流反应步骤中，时间为1-24小时，优选16小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤3)中，所述式IIIb1所示化合物、LiAlH4与四氢呋喃的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：10mL；所述回流反应步骤中，时间为6-48小时，优选12小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤4)中，所述式IIIc1所示化合物、乙酸酐、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二氯甲烷的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：0.01-1mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：1mmol:0.1mmol:10mL；所述反应温度为0-50℃，优选25℃，时间为6-48小时，优选12小时。按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
本发明提供的制备上述式I所示中m为1、Y为-OH或X为-OH、 的伪核苷类化合物的方法，包括如下步骤： 
1)将式II’所述化合物与LiAlH4于四氢呋喃中进行回流反应，反应完毕得到式IIa2所示化合物； 
所述式II’和式IIa2中，n均为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2均为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；R3为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、 -OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3； 
2)将所述步骤1)所得式IIa2所示化合物与R4PhCH2CH2CHO和NaBCNH3于二氯甲烷或甲醇中进行反应，反应完毕得到式IIb2所示化合物；所述R4PhCH2CH2CHO中，R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种； 
所述式IIb2中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种；Ph为苯基； 
3)将所述步骤2)所得式IIb2所示化合物与盐酸和甲醛的水溶液进行回流反应，反应完毕得到式IIc2所示化合物，即所述式I中m为1、Y为-OH、X为的化合物； 
所述式IIc2中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种； 
4)将步骤3)所得的式IIc2所示化合物于二氯甲烷中与乙酸酐、吡啶和4-二甲基氨基-吡啶进行反应，反应完毕得到所述式I中m为1、Y为X为-OH、 的伪核苷类化合物，也即式IId2所示化合物， 
所述式IId2中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种；X为-OH、R1为碳原子总数为1-5的烷基或磷酸基。 
上述方法的步骤1)中，所述式II’所述化合物、LiAlH4与四氢呋喃的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：10mL；所述回流反应步骤中，时间为6-48小时，优选24小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤2)中，所述式IIa2所示化合物、R4PhCH2CH2CHO、NaBCNH3与二氯甲烷或甲醇的用量比为0.1-10mmol：0.1-10mmol：1-100mmol：1-100mL，优选1mmol：0.9mmol：2mmol：6mL；所述反应步骤中，温度为0-50℃，优选25℃，时间为12-48小时，优选24小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤3)中，所述式IIb2所示化合物、甲醛的水溶液、盐酸和氯仿的用量比为0.1-10mmol：0.1-20mL：1-40mL：0-40mL，优选1mmol：2.4mL：4.8mL：4.8mL；所述回流反应步骤中，时间为1-48小时，优选24小时；所述盐酸的质量百分浓度为10-35％，优选35％；所述甲醛的水溶液的质量百分浓度为10-35％，优选35％；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤4)中，式IIc2所示化合物、乙酸酐、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二氯甲烷用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：0.01-1mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：1mmol:0.1mmol:10mL；所述反应温度为0-50℃，优选25℃，时间为6-48小时，优选12小时。按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
本发明提供的制备上述式I中m＝1，X为-OH、Y为-OH或的伪核苷类化合物的方法，包括如下步骤： 
1)将式II’所述化合物与二甲氧基三聚氰氯、氮甲基吗啡啉和四氢异喹啉于二氯甲烷中进行反应，反应完毕得到式IIa3所示化合物； 
所述式II’和式IIa3中，n均为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2均为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；R3为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3；R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种； 
2)将步骤1)所得式IIa3所示化合物与SOCl2于DMF中进行反应，反应完毕得到式IIb3所示化合物； 
3)将步骤2)所得式IIb3所示化合物与由甲醇和二氯甲烷组成的混合液，通入干燥HCl气体，进行反应，反应完毕得到式IIc3所示化合物； 
4)将步骤3)所得式IIc3所示化合物与LiAlH4于四氢呋喃中进行回流反应，反应完毕得到式IId3所示化合物，也即所述式I中m＝1、X为Y为-OH的化合物； 
5)将步骤3)所得的式IId3所示化合物于二氯甲烷中与乙酸酐、吡啶和4-二甲基氨基-吡啶进行反应，反应完毕得到所述式I中m＝1，X为-OH、Y为 的伪核苷类化合物，也即式IIe3所示化合物， 
所述式IIb3-式IIe3中，n均为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2均为-H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、-Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；X为-OH、R1为碳原子总数为1-5的烷基或磷酸基，R4选自-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CH3、-OCH3、-NO2和-HSO3中的至少一种。 
上述方法的步骤1)中，所述式II’所述化合物、CDMT(二甲氧基三聚氰氯)、NMM(氮甲基吗啡啉)、四氢异喹啉和二氯甲烷的用量比为0.1-10mmol：0.1-20mmol：0.1-20mmol：0.1-10mmol：1-40mL，优选5mmol：1.2mmol：3mmol：1.1mmol：10mL；所述反应步骤中，温度为0-50℃，优选25℃，时间为6-48小时，优选12小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤2)中，所述式IIa3所示化合物、SOCl2与DMF的用量比为1.0-10.0mmol:0.1-2mL:1-100mL，优选4mmol：1mL：4mL；所述反应步骤中，温度为-10℃-50℃，优选0℃，时间为0.5-24小时，优选1小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤3)中，所述式IIb3所示化合物、由甲醇和二氯甲烷组成的混合液用量比为0.1-1mmol：1-15mL，优选0.5mmol：15mL；所述干燥HCl气体的通入体积为22.4mL-22.4L，优选1L；所述反应步骤中，温度为-10℃-50℃，优选0℃，时间为0.5-24小时，优选1小时；所述由甲醇和二氯甲烷组成的混合液中，甲醇和二氯甲烷的体积比为2：1；所述反应步骤中，温度为-20-0℃，优选-20℃，时间为0.5-12小时，优选1小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤4)中，所述式IIc3所示化合物、LiAlH4与四氢呋喃的用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：1mL-20mL，优选0.1mmol：10mmol：4mL；所述回流反应步骤中，时间为6-48小时，优选24小时；按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
所述步骤5)中，式IId3所示化合物、乙酸酐、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、二氯甲烷用量比为0.1-10mmol：0.5-50mmol：0.01-1mmol：1mL-20mL，优选1mmol：10mmol：1mmol:0.1mmol:10mL；所述反应温度为0-50℃，优选25℃，时间为6-48小时，优选12小时。按照上述优化条件反应规模范围为0.5mmol-100mmol； 
本发明还提供了制备上述式I所示化合物的起始原料化合物式II和式III所示化合物，其中式II所示化合物如下， 
所述式II中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。 
所述式II所示化合物为式II‘所示化合物， 
所述式II’中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、-Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；R3为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。 
本发明提供的制备上述式II所示化合物的方法，是通过去对称化催化水解反应与酯化反应而得，其反应方程式如下： 
该制备方法为下述方法a或方法b，其中，所述方法a包括如下步骤：用红球菌(Rhodococcus erythropolis AJ270)催化体系与式IV所示化合物进行催化水解反应后，再与碱和苄溴或对甲氧基苄溴于溶剂中进行酯化反应，反应完毕得到所述式II所示化合物， 
所述式IV中，R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN，n为1-3的整数； 
所述方法b包括如下步骤：用红球菌(Rhodococcus erythropolis AJ270)催化体系与式IV 所示化合物进行催化水解反应后，再与重氮甲烷的乙醚溶液进行酯化反应，反应完毕得到所述式II所示化合物， 
所述式IV中，R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN，n为1-3的整数。 
所述方法a和方法b中，所述红球菌催化体系由红球菌和pH值为6.0-8.0的缓冲溶液组成，具体为将所述红球菌接于所述pH值为6.0-8.0的缓冲溶液中30℃活化30分钟而得；所述缓冲溶液为Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液、K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液、Tris缓冲溶液、Hanks’缓冲溶液或PBS缓冲溶液；所述红球菌与式IV所示化合物的用量比为2g：1mmol-2g：1mol；所述红球菌催化体系中，红球菌与所述缓冲溶液的用量比为2g：50mL-2g:1L；所述催化水解反应步骤中，温度为20-37℃，优选30℃，时间为0.1-120小时，不同底物与用量优选不同时间，使得反应产物对映选择性在95％以上小时； 
所述方法a中，所述碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或碳酸铯，优选碳酸钾；所述溶剂选自丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和四氢呋喃中的至少一种，优选N,N-二甲基甲酰胺；所述碱、所述溶剂、苄溴或对甲氧基苄溴与所述式IV所示化合物的用量比为1.38g：2mL：1mL：1mmol；所述酯化反应步骤中，温度为10-30℃，优选25℃，时间为1-48小时，优选24小时； 
所述方法b中，所述重氮甲烷的乙醚溶液的浓度为0.1-1mol/L，优选0.5mol/L；所述酯化反应步骤中，温度为-20—10℃，优选0℃，时间为2-24小时，优选12小时。 
本发明还提供了式III所示化合物， 
所述式III中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN。；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3，R3’为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。 
所述式III所述化合物为式III’所示化合物， 
所述式III’中，n为1-3的整数；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、-Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3，R3’为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。 
本发明提供的制备上述式III所示化合物的方法，是通过动力学拆分与酯化反应而得，其反应方程式如下： 
该制备方法为下述方法a或方法b，其中，所述方法a包括如下步骤：用红球菌(Rhodococcus erythropolis AJ270)催化体系与式V所示化合物进行催化水解反应后，再与碱和碘甲烷、苄溴或对甲氧基苄溴于溶剂中进行酯化反应，反应完毕得到所述式III所示化合物， 
所述式V中，R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN，n为1-3的整数； 
所述方法b包括如下步骤：用红球菌(Rhodococcus erythropolis AJ270)催化体系与式V所示化合物进行催化水解反应后，再与重氮甲烷的乙醚溶液进行酯化反应，反应完毕得到所述式III所示化合物， 
所述式V中，R2为H、-CH3、-CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2C6H5、-CH2C6H5OCH3、Cbz、-CH2CH2COCH3、-CH2CH2COOCH3、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2CHO或-CH2CH2CN，n为1-3的整数。 
所述方法a和方法b中，所述红球菌催化体系由红球菌和pH值为6.0-8.0的缓冲溶液组成，具体为将所述红球菌接于所述pH值为6.0-8.0的缓冲溶液中30℃活化30分钟而得；所述缓冲溶液为Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液、K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液、Tris缓冲溶液、Hanks’缓冲溶液或PBS缓冲溶液；所述红球菌与式IV所示化合物的用量比为2g：1mmol-2g：1mol；所述红球菌催化体系中，红球菌与所述缓冲溶液的用量比为2g：50mL-2g:1L；所述催化水解反应步骤中，温度为20-37℃，优选30℃，时间为0.1-120小时，不同底物与用量优选不同时间，使得反应产物对映选择性在95％以上； 
所述方法a中，所述碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或碳酸铯，优选碳酸钾；所述溶剂选自丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和四氢呋喃中的至少一种，优选N,N-二甲基甲酰胺；所述碱、所述溶剂、苄溴或对甲氧基苄溴与所述式IV所示化合物的用量比为1.38g：2mL：1mL：1mmol；所述酯化反应步骤中，温度为10-30℃，优选25℃，时间为1-48小时，优选24小时； 
所述方法b中，所述重氮甲烷的乙醚溶液的浓度为0.1-1mol/L，优选0.5mol/L；所述酯化反应步骤中，温度为-20—10℃，优选-15℃，时间为2-24小时，优选12小时。 
上述两微生物催化-酯化过程中所述生物催化底物(substrate)制备方法可根据文献来源分为以下三类。 
第一类：制备上述式IV所示顺式和式V反式-N-取代2,5-二取代四氢吡咯二酰胺化合物，其中n＝1。此类化合物是由2,5-二取代四氢吡咯二腈化合物化学水解制备。腈类化合物是按照下述文献提供的方法进行制备的：Takahashi,K.；Saitoh,H.；Ogura,K.；Iida,H.Heterocycles1986,24,10,2905。 
第二类：制备上述式IV所示顺式和式V反式-2,6-二取代六氢哌啶二酰胺化合物，其中n＝2。按照下述文献方法进行制备：Takahashi K.；Mikajiri T.；Kurita H.；Ogura K.；Iida H.,J.Org.Chem.1985,50,4372-4375. 
第三类：制备上述式IV所示顺式和式V反式-2,7-二取代氮七元环二酰胺化合物，其中n＝3。按照文献方法：Ogura K.；Shimamura Y.；Fujita M.,J.Org.Chem.1991,56,2920-2922。 
上述两微生物催化-酯化过程中所使用的红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270样品最初是使用Anderson生物粒子采样器中从含有25mM的乙腈琼脂培养基上分离得到的，样品源最初则采集于英国泰恩河畔废弃的工业厂区附近的干燥的土壤中。对AJ270菌其细胞壁的枝菌酸和二氨基庚二酸化学分类学研究确认了其属于Rhodococcus菌种。直到2005年，通过对其16SrRNA基因序列的研究，确认了Rhodococcus AJ270属于Rhodococcus erythropolis菌系。具体参考下述两篇文献： 
a.Blakey A.J.；Colby J.；Williams E.；O’Reilly C.,FEMS Microbiol.Lett.1995，129,57-61. 
b.O’Mahony R.；Doran J.；Coffey L.；Cahill O.J.；Black G.W.；O’Reilly C.；Antonie van Leeuwenhoek2005,87,221-232. 
Rhodococcus AJ270是一种源自土壤的微生物，并被证明是一种高活性的含腈水合酶/酰胺水解酶体系的整细胞催化剂。已有研究表明，与其他菌株相比，红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270具有很好的底物广谱性，可以高效地催化脂肪腈、芳香腈和芳杂环腈类化合物的水解。(Wang M.-X.Enantioselective biotransformations of nitrile in organic synthesis.Top.Catal.2005,35,117-130) 
另外，以本发明所提供的伪核苷类化合物为活性成分的抗肿瘤药物属于本发明的保护范围。在实际操作中，为达到更好的药效，可根据需要在上述伪核苷类化合物中添加各种辅剂。另外，本发明所提供的伪核苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用也属于本发明的保护范围。所述肿瘤为肝癌或肺癌。上述抗肿瘤药物可为抗Bel-7402肝癌细胞或A-549肺癌细胞的药物。 
本发明提供的制备伪核苷类化合物的原料是用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270微生物体系催化水解氮杂环状二酰胺类化合物得到。所用红球菌菌体用量可根据底物的用量来进行调节。反应溶剂为pH＝6.0-8.0的常用缓冲溶液，温度为20-37℃，反应时间为0.1—120小时。该红球菌微生物催化体系具有可发酵培养和保存方便的特点。运用此生物转化制备手性氮杂环状二酰胺、单酰胺羧酸、二羧酸的方法，具有操作简便，反应高效，反应条件温和，对映选择性高，产物易分离，产物纯度高的特点，并用作新型伪核苷的合成。 
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述反应物如无特别说明均能从公开商业途径而得。本发明中Cbz的中文名称均为苄氧羰基。 
实施例1：伪核苷类化合物1’的合成 
1)将实施例15制备所得式II’所示化合物X’(Cbz，中文名称苄氧羰基)10mmol溶解在4毫升干燥DMF中，加入1毫升二氯亚砜SOCl2，0℃下搅拌1小时，根据TLC监测反应原料已经消失。反应液经过乙酸乙酯萃取并用乙酸乙酯硅胶柱层析，得到式IIa1所示化合物 单氰基单羧酸酯(也即反应式中1-1所示化合物)，油状液体，产率为90％。 
2)取出2mmol步骤1)所得单氰基单羧酸酯放入到25毫升茄形瓶中，加入4mmol叠氮酸钠NaN3，1mmol溴化锌ZnBr2以及由6毫升水和3毫升异丙醇组成的混合液，回流反应16小时。降温后，用1N HCl调节pH小于7，乙酸乙酯萃取。然后用硅胶柱层析，淋洗液为乙酸乙酯：甲醇＝20:1(体积比，1％醋酸作为添加剂)，收到无色油状物，即为式IIb1所示化合物，(也即反应式中1-2所示化合物，该化合物为化合物1的前体)，产率为58％。 
3)取1mmol步骤2)所得1-2所示化合物，加入10mmol锂铝氢及10mL四氢呋喃回流12小时，经过阳离子交换树脂纯化得到式IIc1所示化合物(也即反应式中化合物1)，为白色固体，产率83％。 
化合物1：solid,mp185℃(D2O/300MHz)δ3.86-3.75(m,2H),3.64-3.58(m,1H),2.80-2.71(m,1H),2.32(m,3H),2.27-2.14(m,3H),1.95-1.77(m,1H)；(75MHz/D2O)δ163.0,67.6,63.6,62.5,39.5,28.6,26.8.(KBr)3432,3259,1634,1023cm-1；MS(ESI)m/z184.1(M++1,15％),206.1(M++23,100％).Anal.Calcd.for:[M+H]C7H14N5O,184.1198,Found:[M+H]184.1193. 
由上可知，该化合物结构正确，为反应式中化合物1。 
4)将步骤3)所得化合物1取1mmol，溶解在10mL二氯甲烷中，加入10mmol乙酸酐，1mmol吡啶，0.1mmol4-二甲基氨基吡啶，在25℃搅拌12小时，得到本发明提供的式I所示伪核苷类化合物1’，其中，n为1，m为0，Y为R2为-CH3、X为-OCOCH3。 
化合物1’：solid,mp105℃(D2O/300MHz)δ3.91-3.70(m,2H),3.60-3.45(m,1H),2.88-2.81(m,1H),2.35(m,3H),2.22-2.10(m,6H),2.01-1.75(m,1H)；(75MHz/D2O)δ162.5,65.6,62.6,61.5,39.2,28.4,27.2,20.7.(KBr)3432,3259,1634,1023cm-1；Anal.Calcd.for:[M+H]C9H15N5O2,226.1304,Found:[M+H]226.1300. 
由上可知，该化合物结构正确，为式I所示化合物，也即反应式中化合物1’。 
实施例2：伪核苷类化合物2’的合成 
1)将实施例8制备所得式III’所示化合物X”(Cbz，中文名称苄氧羰基)10mmol溶解在4毫升干燥DMF中，加入1毫升二氯亚砜SOCl2，0℃下搅拌1小时，根据TLC监测反应原料已经消失。反应液经过乙酸乙酯萃取并用乙酸乙酯硅胶柱层析，得到式IIIa1所示化合物单氰基单羧酸酯(也即反应式中化合物2-1)，油状液体，产率为90％。 
2)取出2mmol步骤1)所得单氰基单羧酸酯放入到25毫升茄形瓶中，加入4mmol叠氮酸钠NaN3，1mmol溴化锌ZnBr2以及由6毫升水和3毫升异丙醇组成的混合液回流反应16小时，降温后，用1N HCl调节pH小于7，乙酸乙酯萃取。然后用硅胶柱层析，淋洗液为乙酸乙酯：甲醇＝20:1(1％醋酸作为添加剂)，收到白色固体物，为式IIIb1所示化合物(也即反应式中2-2所示化合物，该化合物为化合物2的前体)，产率为90％。 
3)取1mmol步骤2)所得2-2所示化合物，加入10mmol锂铝氢，10mL四氢呋喃回流12小时，经过阳离子交换树脂纯化得到式IIIc1所示化合物(也即反应式中化合物2)，为白色固体，产率83％。 
化合物2：solid,mp194℃(D2O/300MHz)δ4.91-4.88(m,1H),3.76-3.75(m,2H),3.47-3.44(m,1H),2.43-2.26(m,3H),2.30(s,3H),1.97-1.86(m,1H)；(75MHz/D2O)δ158,67.0,60.7,59.3,35.7,27.4,25.5.(KBr)3432,3259,1634,1023cm-1；MS(ESI)m/z184.1(M++1,15％),206.1(M++23,100％).Anal.Calcd.for:[M+H]C7H14N5O,184.1198,Found:[M+H]184.1193. 
由上可知，该化合物结构正确，为反应式中化合物2。 
4)取步骤3)所得化合物21mmol，溶解在10mL二氯甲烷中，加入10mmol乙酸酐，1mmol吡啶，0.1mmol4-二甲基氨基吡啶，在25℃搅拌12小时，得到本发明提供的式I所示伪核苷类化合物2’，其中，n为1，m为0，Y为R2为-CH3、X为-OCOCH3。 
化合物2’：solid,mp154℃(D2O/300MHz)δ4.77-4.50(m,1H),3.86-3.75(m,2H),3.52-3.34(m,1H),2.33-2.16(m,6H),2.30(s,3H),1.97-1.86(m,1H)；(75MHz/D2O)δ155,67.5,60.2,58.3,33.7,27.3,24.5,20.7.(KBr)3432,3259,1634,1023cm-1；Anal.Calcd.for:[M+H]C9H15N5O2,226.1304,Found:[M+H]226.1307. 
由上可知，该化合物结构正确，为式I所示化合物(也即反应式中化合物2)。 
实施例3：式I所示伪核苷类化合物3’的合成 
1)将5mmol实施例15制备所得式II’所示化合物X’溶解在50毫升四氢呋喃中，加入锂铝氢1.9克(50mmol)，回流24小时后，加入2N氢氧化钠水溶液淬灭反应，经过硅藻土抽滤，阳离子交换树脂纯化，得到式IIa2所示伯胺化合物(具体为上述反应方程式中3-1所示化合物)，产率79％。 
2)将步骤1)所得式IIa2所示伯胺化合物0.625mmol与0.6mmol苯乙醛混合在4毫升二氯甲烷中，加入1.2mmol氰基硼氢化钠，25℃反应24小时后，用1N HCl将产物从有机相中萃取，然后调节pH大于7，用乙酸乙酯将产物从水中萃取。进一步用阳离子交换树脂层析得到式IIb2所示化合物(具体为上述反应方程式中3-2所示化合物)，产率54％。 
3)取步骤2)所得式IIb2所示化合物0.5mmol，加入1.2毫升质量百分浓度为35％的甲醛水溶液，2.4毫升质量百分浓度为35％的浓盐酸，2.4毫升氯仿，回流24小时反应完毕后，调节体系pH值为9，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，ODS常规柱层析，流动相为甲醇：水＝1:1，层析完毕得到式IIc2所示化合物(具体为上述反应方程式中3所示化合物)，产率78％。 
化合物3：oil，1HNMR(D2O/300MHz)δ7.11-6.99(m,4H),3.63-3.57(m,3H),3.63-3.33(m,1H),2.84-2.72(m,3H),2.69-2.37(m,2H),2.28(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.95-1.79(m,1H),1.51-1.38(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ134.9,134.4,128.7,126.5,126.1,125.6,67.7,64.7,63.5,61.1,56.99,39.99,29.8,29.1,26.1；IR(KBr)3411，2934,1641,1450,1050cm-1；MS(ESI)m/z261.4(M++1,100％),Anal.Calcd.for[M+H]C16H25N2O,261.1967,Found:[M+H]261.1961. 
由上可知，该化合物结构正确，为反应式中化合物3。 
4)将步骤3)所得式IIc2所示化合物1mmol溶解在10mL二氯甲烷中，加入10mmol乙酸酐，1mmol吡啶，0.1mmol4-二甲基氨基吡啶，在25℃搅拌反应12小时，反应完毕得到本发明提供的式I所示伪核苷类化合物3’。 
该式I所示伪核苷类化合物3’中，n为1，R2为-CH3，m为1，Y为其中，R4为H，X为-OCOCH3。 
化合物3’：oil，1HNMR(D2O/300MHz)δ7.21-6.95(m,4H),3.65-3.52(m,3H),3.67-3.31(m,1H),2.85-2.70(m,3H),2.67-2.33(m,2H),2.28(s,3H),2.10-2.02(m,4H),1.95-1.79(m,1H),1.51-1.38(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ134.5,134.7,128.3,126.4,126.1,122.6,67.7,62.7,61.5,60.1,56.4,39.5,29.7,28.1,22.1,21.9；IR(KBr)3411，2934,1641,1450,1050cm-1；MS(ESI)m/z261.4(M++1,100％),Anal.Calcd.for[M+H]C18H26N2O2,303.2073,Found:[M+H]303.2070. 
由上可知，该化合物结构正确，为式I所示化合物。 
实施例4：式I所示伪核苷类化合物4’的合成 
1)将5mmol实施例15制备所得式II’所示化合物X’溶解在10毫升二氯甲烷中，加入1.2mmol二甲氧基三聚氰氯(CDMT)，3mmol氮甲基吗啉(NMO)，室温搅拌1小时后，加入1.1mmol四氢异喹啉(THIQ)，继续搅拌过夜。加入1N HCl水溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，乙酸乙酯柱层析，收到玻璃状化合物，即为式Iia3所示伯胺化合物(具体为上述反应方程式中4-1所示化合物)，产率90％。 
2)将4mmol步骤1)所得4-1所示化合物溶解在4毫升干燥DMF中，加入1毫升二氯亚砜。0℃下搅拌1小时，根据TLC监测反应原料已经消失。反应液经过乙酸乙酯萃取并用乙酸乙酯硅胶柱层析，得到式IIb3所示化合物(具体为上述反应方程式中化合物4-2)，为白色固体，产率为78％。 
3)将0.5mmol步骤2)所得4-2所示化合物溶解在5毫升二氯甲烷中，加入甲醇10毫升，冷冻到-20℃，边搅拌边通入干燥盐酸气体1小时，计量为1L，并在-20℃下静止过夜。反应液体滴入到0℃冷却的6N盐酸水溶液中。用碳酸氢钠调整pH为7，乙酸乙酯萃取。无水硫酸钠干燥。硅胶柱层析，得到式IIc3所示化合物(具体为上述反应方程式中化合物4-3)，产率58％。 
4)将0.1mmol步骤3)所得4-3所示化合物溶解在4毫升四氢呋喃中，加入10mmol的锂铝氢，回流24小时后，用2N氢氧化钠处理反应，乙酸乙酯萃取，然后经过ODS常规柱层析，流动相为甲醇：水＝1:1.得到式IId4所示化合物(具体为上反应方程式中化合物4)，产率81％。 
化合物4：oil，1HNMR(D2O/300MHz)δ7.11-6.99(m,4H),3.63-3.57(m,3H),3.63-3.33(m,1H),2.84-2.72(m,3H),2.69-2.37(m,2H),2.28(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.95-1.79(m,1H),1.51-1.38(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ134.9,134.4,128.7,126.5,126.1,125.6,67.7,64.7,63.5,61.1,56.99,39.99,29.8,29.1,26.1；IR(KBr)3411，2934,1641,1450,1050cm-1；MS(ESI)m/z261.4(M++1,100％),Anal.Calcd.for[M+H]C16H25N2O,261.1967,Found:[M+H]261.1961. 
5)将步骤4)所得化合物4取出1mmol，溶解在10mL二氯甲烷中，加入10mmol乙酸酐，1mmol吡啶，0.1mmol4-二甲基氨基吡啶，在25℃搅拌12小时，反应完毕得到式I所示伪核苷类化合物4’。 
化合物4’：o7.21-6.95(m,4H),3.65-3.52(m,3H),3.67-3.31(m,1H),2.85-2.70(m,3H),2.67-2.33(m,2H),2.28(s,3H),2.10-2.02(m,4H),1.95-1.79(m,1H),1.51-1.38(m,2H)； 13CNMR(75MHz/CDCl3)δ134.5,134.7,128.3,126.4,126.1,122.6,67.7,62.7,61.5,60.1,56.4,39.5,29.7,28.1,22.1,21.9；IR(KBr)3411，2934,1641,1450,1050cm-1；MS(ESI)m/z261.4(M++1,100％),Anal.Calcd.for[M+H]C18H26N2O2,303.2073,Found:[M+H]303.2070. 
由上可知，该化合物结构正确，为式I所示化合物4’，其中，n为1，R2为-CH3，m为1，Y为其中，R4为H，X为-OCOCH3。 
实施例5：制备式III所示的化合物5、6和7 
其反应式如下： 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入溶解在2.5毫升二甲基亚砜中的1毫摩尔(247毫克)的式V1所示底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用高效液相监测，反应39小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析，洗脱液为乙酸乙酯- 乙酸乙酯：甲醇＝20:1，得到本发明提供的式III所示二酰胺化合物(具体为上述反应式中的化合物5)(产率：49％，ee>99.5％，Dicel-ADH)、单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的6)(产率：39％，ee>99.5％，Dicel-ADH)和二羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物7)(产率：6％，ee>99.5％，Dicel-ODH)。 
5：solid mp230℃；[α]D 25＝-38.0(c2.0,CH3OH)；1HNMR(DMSO-d6/300MHz)δ7.32-7.23(m,5H),7.16(br s,2H,CONH),6.87(br s,2H,CONH),3.81(d,1H,J＝13.4Hz),3.69(d,1H,J＝13.4Hz),3.56-3.54(m,2H),2.23-2.09(m,2H),1.71-1.61(m,2H)；13CNMR(75MHz/DMSO-d6)δ175.9,139.2,128.5,128.1,126.8,64.0,53.1,28.9；IR(KBr)3417(CONH2),1670,1628cm-1；MS(ESI)m/z248.2(M++1,100％),270.2(M++23,92.1).Anal.Calcd.for C13H17N3O2:C,63.14；H,6.93；N,16.99.Found:C,62.94；H,6.92；N,17.05. 
6：solid mp140℃；[α]D 25＝+121.5(c4.0,CHCl3)；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ7.35-7.21(m,5H),6.91(br s,1H,CONH),5.50(br s,1H,CONH),3.92(d,1H,J＝13.1Hz),3.84(d,1H,J＝13.1Hz),3.80-3.72(m,2H),3.69(s,3H),2.58-2.51(m,1H),2.09-2.03(m,1H),2.00-1.85(m,2H)； 13CNMR(75MHz/CDCl3)δ177.7,173.5,138.0,128.74,128.66,127.6,65.9,62.9,54.3,51.4,29.4,28.6；IR(KBr)3446(CONH2),1734,1685,1658cm-1；MS(ESI)m/z263.2(M++1,100％),285.2(M++23,64.3),301.2(M++39,4.9).Anal.Calcd.for C14H18N2O3:C,64.10；H,6.92；N,10.68.Found:C,63.85；H,6.90；N,10.94. 
7：oil；[α]D 25＝+10.7(c3.0,C6H6)；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ7.97(br s,1H,CONH),7.33-7.25(m,5H),5.57(br s,1H,CONH),3.90(d,1H,J＝13.2Hz),3.81(d,1H,J＝13.2Hz),3.63-3.51(m,2H),3.58(s,3H),2.20-2.14(m,1H),2.13-2.04(m,1H),1.89-1.87(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ177.9,175.7,137.2,129.3,128.5,127.6,67.7,66.2,59.0,52.0,30.7,30.4；IR(KBr)3415(CONH2),1736,1679cm-1；MS(ESI)m/z263.2(M++1,59.2),285.2(M++23,100％),301.2(M++39,21.2).Anal.Calcd.for C14H18N2O3:C,64.10；H,6.92；N,10.68.Found:C,64.25；H,6.87；N,10.92. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式III所示化合物。 
实施例6：制备式III所示的化合物8，9和10 
其反应式如下： 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体 洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入溶解在2.5毫升二甲基亚砜中的1毫摩尔(197毫克)的式V2底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用高效液相监测，反应7小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入浓度为0.5mol/L的重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯-乙酸乙酯：甲醇＝20:1，得到本发明提供的式III所示二酰胺化合物(具体为上述反应式中的化合物8)(产率：45％，ee>99.5％，Dicel-ADH)、单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物9)(产率36％，ee>96.8％，Dicel-ADH)和二羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物化合物10)(产率：10％，ee93.3％，Dicel-OJH)。 
8：mp222℃；[α]D 25＝-54.7(c1.5,CH3OH)；1HNMR(DMSO-d6/300MHz)δ7.23(br s,2H,CONH),6.87(br s,2H,CONH),5.95-5.84(m,1H),5.15-5.01(m,2H),3.55-3.53(m,2H),3.28(dd,1H,J＝13.6,7.2Hz),3.15(dd,1H,J＝13.5,5.7Hz),2.18-2.07(m,2H),1.69-1.59(m,2H)； 13CNMR(75MHz/DMSO-d6)δ176.0,136.4,116.5,64.3,52.5,28.9；IR(KBr)3415(CONH2),3381(CONH2),3200(CONH2),1660,1639cm-1；MS(ESI)m/z198.1(M++1,100％),220.2(M++23,17.1).Anal.Calcd.for C9H15N3O2:C,54.81；H,7.67；N,21.30.Found:C,54.75；H,7.71；N,21.36. 
9：mp104℃；[α]D 25＝+78.0(c1.0,CHCl3)；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ6.91(br s,1H,CONH),5.89-5.78(br s+m,1CONH+1H),5.20-5.10(m,2H),3.93(d,1H,J＝7.5Hz),3.69(s,3H),3.61(dd,1H,J＝10.9,3.3Hz),3.36-3.34(m,2H),2.54-2.47(m,1H),2.15-2.12(m,1H),1.96-1.87(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ178.2,173.5,134.8,118.0,65.4,63.3,53.1,51.4,29.3,28.6；IR(KBr)3377(CONH2),3190(CONH2),1728,1654cm-1；MS(ESI)m/z213.2(M++1,100％),235.2(M++23,6.5).Anal.Calcd.for C10H16N2O3:C,56.59；H,7.60；N,13.20.Found:C,56.57；H,7.61；N,12.94. 
10：oil；[α]D 25＝+72.0(c1.5,CHCl3)；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ5.90-5.88(m,1H),5.18-5.05(m,2H),3.89-3.85(m,2H),3.70(s,6H),3.40-3.33(m,2H),2.34-2.28(m,2H),1.93-1.92(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ174.7,135.3,117.7,63.6,53.5,51.6,28.4；IR(KBr)1738cm-1；MS(EI)m/z227(M+,3％),169(10),168(100％),108(11)；Anal.Calcd.for C11H17NO4:227.1158(M).Found:227.1161. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式III所示化合物。 
实施例7：制备式III所示的化合物5和11 
其反应式如下: 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加1毫摩尔(157毫克)的式V3底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应TLC监测，反应1小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升N,N’-二甲基二酰胺，1毫升苄溴，1.38克碳酸钾室温搅拌24小时进行酯化反应结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯-乙酸乙酯：甲醇＝20:1，得到本发明提供的式III所示二酰胺化合物(具体为上述反应式中的化合物5)(产率：45％，ee>99.5％，Dicel-ADH)和单酰胺羧酸苄酯(具体为上述反应式中的化合物11)(产率：36％，ee>99.5％，Dicel-ADH)。 
11：solid；104.0℃；IR(KBr)ν3396，3172(CONH2),1726,1657,cm-1；1H NMR(300MHz,CDCl3)(CDCl3/300MHz)δ7.40-7.10(m,10H),6.95(br s,1H),5.48(br s,1H),5.19(d,1H,J＝6.1Hz),5.08(d,1H,J＝6.1Hz),3.91-3.71(m,4H),2.55-2.50(m,1H),2.01-1.85(m,3H)；13C NMR(75MHz CDCl3)δ177.9,172.9,137.9,135.6,128.9,128.6,128.5,127.5,66.3,65.8,62.9,54.1,29.4,28.6；MS(ESI)m/z339.1(M++1，100％)，361.2(M++23，82％).Anal.Calcd.for C20H22N2O3:C,70.99；H,6.55；N,8.28；Found:C,70.66；H,6.62；N,8.43。 
由上可知，上述化合物结构正确，为式III所示化合物。 
实施例8、制备式III所示的化合物X“ 
其反应式如下： 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体 洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入溶解在2.5毫升二甲基亚砜中的1毫摩尔(291毫克)的式V4所示底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用高效液相监测，反应39小时后停止反应，得到含有产物式X所示化合物的反应液，将所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得含有式X所示化合物的滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯-乙酸乙酯：甲醇＝20:1，得单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的X“)，产率：39％，ee>99.5％，Dicel-ADH。 
X：solid mp150℃；1HNMR(DMSO-d6/300MHz)δ14.55(br,s,1H),7.58-7.30(m,7H),5.10-5.0(m,2H),4.90-4.45(m,2H),4.21-4.15(m,2H),2.46-2.38(m,2H),1.95-1.73(m,2H)； 13CNMR(75MHz/DMSO-d6)δ175.3,175.1,174.9,174.7,153.6,153.4,136.4,136.4,128.3,127.8,127.1,126.99,65.51,66.46,61.5,61.0,60.5,59.99,30.2,29.3,28.2.；IR(KBr)3373,2361,1712,1644,1590,1411,1352,1229cm-1；MS(ESI)m/z293.34(M++1,10％),315.29(M++23,100％).Anal.Calcd.for:C14H16N2O5C,57.53；H,5.52；N,9.58；Found:C,57.75；H,5.51,N,9.58. 
X“：oil；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ7.30-7.18(m,7H),5.00-4.80(m,2H),4.40-4.30(m,1H),4.01-3.95(m,1H),3.74(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.52-2.20(m,2H),1.95-1.66(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ176.0,175.8,175.1,173.5,153.4,152.1,136.9,136.5,128.2,128.1,128.0,127.5,127.3,68.2,68.1,61.5,61.1,60.5,59.1,52.1,52.0,29.6,29.4,29.1,28.8；IR(KBr)3432,3401,1688,1412,1355,1212,1116,1004cm-1；MS(ESI)m/z307.35(M++1,20％),329.29(M++23,100％).Anal.Calcd.for:C15H18N2O5C,58.82；H,5.92；N,9.15Found:C,58.87；H,5.99；N,9.10. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式III所示化合物X“。 
实施例9：制备式II所示的化合物12和13 
其反应式如下: 
具体实施方法： 
1)取2克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml～250ml)将菌体洗入带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加1毫摩尔～200毫摩尔(157毫克～30克)的式IV1底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应TLC监测，反应6小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，用离子交换树脂纯化，得到黄色固体，甲醇洗去黄色杂质得单酰胺单羧酸12(产率：92～96％，ee96％，Dicel-ADH)。再将残留物 用2毫升N,N’-二甲基甲酰胺，1毫升苄溴，1.38克碳酸钾室温25℃搅拌24小时进行酯化反应结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸苄酯(具体为上述反应式中的化合物13)(产率：96％，ee96％，Dicel-ADH)。 
12：solid；mp233-234℃IR(KBr)ν3308,3153,1696,1642,1447,1403,1330,1308cm-1； 1HNMR(D2O/300MHz)δ4.34(t,J＝7.2Hz,1H),4.11(t,J＝6.3Hz,1H),2.39-2.25(m,2H),2.05-1.91(m,2H)；13NMR(75MHz/D2O)δ173.8,171.4,61.8,60.3,29.8,29.2.MS(ESI)m/z159.35(M++1,7％),181.46(M++23,100％)；Anal.Calcd.for C6H10N2O3:C,45.57；H,6.37；N,17.71；Found:C,45.54；H,6.53；N,17.78. 
13：solid；mp58.0℃；IR(KBr)ν3422,3369(CONH2),1740,1663cm-1；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.78(br s,1H),7.28-7.14(m,10H),6.17(br s,1H),4.98(s,2H),3.89(d,1H,J＝6.6Hz),3.79(d，1H,J＝6.6Hz),3.63(t,1H,J＝7.3Hz),3.52(dd,1H,J＝16.2Hz,4.3Hz)2.19-1.88(m,4H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ177.1,174.1,136.4,134.7,128.5,127.8,127.6,127.3,126.8,67.1,65.9,65.5,58.2,29.8,29.5；MS(ESI)m/z(％)39.1(M++1,86％)361.2(M++23,100％)；Anal.Calcd.for C20H22N2O3:C,70.99；H,6.55；N,8.28；Found:C,70.65；H,6.71；N,8.53. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例10：制备式II所示的化合物14 
其反应式如下： 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加溶解在2.5毫升二甲基亚砜的1毫摩尔(171毫克)的式IV2底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应TLC监测，反应60小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入浓度为0.5mol/L的重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物14)(产率：80％，ee60.0％，Dicel-OJH)。 
14：solid，mp93.0℃IR(KBr)ν3419,(CONH2),1732,1683cm-1；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.62(br,1H),5.64(br,1H),3.68(s,3H),3.33-3.28(m,1H),3.13(dd,1H,J＝18.0,4.9Hz),2.41(s,3H),2.18-2.07(m,2H),1.95-1.81(m,2H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ177.5,174.6,69.6,68.2,52.1,40.9,30.3,29.9；MS(ESI)m/z(％)187.1(M++1,14％),209.1(M++23,100％).；Anal.Calcd.for C8H14N2O3:C,51.60；H,7.58；N,15.04；Found:C,51.14；H,7.40；N,15.38.。 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例11：制备式II所示的化合物15 
其反应式如下: 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加1毫摩尔(197毫克)的式IV3底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应TLC监测，反应7天后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入浓度为0.5mol/L的重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物15)(产率：60％，ee95.2％，Dicel-ADH)。 
15：solid；mp72.0-74.0℃；IR(KBr)ν3364,3292,3265,1686,1650cm-1；[α]25 D-64°(c0.5,CHCl3)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.43(s,1H),7.37-7.42(m,1H),7.18-7.20(m,2H),7.03(s,1H),5.58(s,1H),3.73(d,J＝12.9Hz,1H),3.69(t,J＝8.6Hz,1H),3.51(d,J＝13.1Hz,1H),3.34-3.39(m,1H),2.98(q,J＝16.3Hz,1H),2.38-2.48(m,1H),2.13-2.25(m,1H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ179.5,139.7,131.4,130.5,130.1,127.1,122.6,66.1,61.6,50.9,23.0；MS(ESI)m/z(％)269[M+H]+,271[M+H+2]+；Anal.Calcd.for C11H13BrN2O:C,49.09；H,4.87；N,10.41.Found:C,49.10；H,4.68；N,10.23. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例12：制备式II所示的化合物16 
其反应式如下 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化 30分钟，然后一次性加溶解在2.5毫升二甲基亚砜的1毫摩尔(247毫克)的式IV4底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应TLC监测，反应4天后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入浓度为0.5mol/L的重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行甲酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的化合物16)(产率：15％，ee>99.5％，Dicel-ADH)。 
16：oil；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ7.97(br s,1H,CONH),7.33-7.25(m,5H),5.57(br s,1H,CONH),3.90(d,1H,J＝13.2Hz),3.81(d,1H,J＝13.2Hz),3.63-3.65(m,2H),3.58(s,3H),2.20-2.14(m,1H),2.13-2.04(m,1H),1.89-1.87(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ177.9,175.7,137.2,129.3,128.5,127.6,67.7,66.2,59.0,52.0,30.7,30.4；IR(KBr)3415(CONH2),1736,1679cm-1；MS(ESI)m/z263.2([M+23]+,100％),301.2([M+39]+,21.2％)；Anal.Calcd.For C14H18N2O3:C,64.10；H,6.92；N,10.68.Found:C,64.25；H,6.87；N,10.92. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例13：制备式II所示的化合物17 
其反应式如下: 
具体实施方法是： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入1毫摩尔(171毫克)2,6-二取代六氢哌啶酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用TLC监测，反应1小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤出去菌体，用水15毫升各洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升N,N’-二甲基甲酰胺，1毫升苄溴，1.38克碳酸钾室温25℃搅拌24小时进行酯化反应结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸苄酯(具体为上述反应式中的化合物17)(产率：96％，ee>99.5％，Dicel-ADH)。 
17：solid mp105.0℃IR(KBr)ν3420(CONH2),1744,1632cm-1；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.36-7.17(m,11H),5.68(br d,1H,J＝22.4Hz),5.07(t,2H,J＝12.6Hz),3.76(s,2H),3.23(dd,1H,J＝21.03,3.78Hz,),3.09(dd,1H,J＝18.8,4.0Hz),2.00-1.92(m,2H)1.89-1.62(m,3H)1.26-1.17(m,1H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ177.3,174.0,135.6,134.9,130.3,128.6,128.5,128.4,128.2,127.6,66.7,63.3,61.6,58.3；MS(ESI)m/z(％)353.2(M++1,100％),375.2(M++23,20％).；Anal.Calcd.for C21H24N2O3,C,71.57；H,6.86；N,7.95；Found:C,71.58；H,6.84,N,7.96.. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例14：制备式II所示的化合物18 
其反应式如下: 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入的1毫摩尔(185毫克)的式IV5酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用TLC监测，反应1小时后停止反应，所得反应液通过一层硅藻土抽滤出去菌体，用水15毫升各洗涤滤渣三次。 
2)将步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升N,N’-二甲基甲酰胺，1毫升苄溴，1.38克碳酸钾室温25℃搅拌24小时进行酯化反应结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得到本发明提供的式II所示化合物单酰胺羧酸苄酯(具体为上述反应式中的化合物18)(产率：74％,ee67％)。 
18:oil IR(KBr)ν3410(CONH2),1737,1670cm-1；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.41(br,1H),3.38-7.22(m,10H),5.95(br，1H),5.18-5.04(dd,J＝2H),3.74-3.63(dd.2H),3.61-3.60(1H),3.44-3.40(dd,1H),2.02-1.46(m,8H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ178.26,176.33,137.96,135.45,128.95,128.67,128.537,128.51,128.30,127.62,67.04,60.632,29.13,28.20,28.13,26.80；MS(ESI)m/z(％)367.18(M++1,20％),389.26(M++23,100％)；Anal.Calcd.for C22H26N2O3C,72.11；H,7.15；N,7.64；Found:C,72.07；H,7.10；N,7.79. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物。 
实施例15：制备式II所示的化合物X‘ 
其反应式如下： 
具体实施方法： 
1)取两克湿重的Rhodococcus erythropolis AJ270菌体(中国科学院化学研究所)，30℃条件下解冻30分钟，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的缓冲溶液(0.1M,pH7.0,50ml)将菌体洗入150毫升带螺纹口的Erlenmeyer平底烧瓶中，分散摇匀后放入摇床中30℃条件下活化30分钟，然后一次性加入溶解在2.5毫升二甲基亚砜中的1毫摩尔(291毫克)的式IV6所示底物酰胺，放入摇床中30℃，200rpm条件下进行催化水解反应。整个反应用高效液相监测，反应39小时后停止反应，得到含有产物式X所示化合物的反应液，将所得反应液通过一层 硅藻土抽滤除去菌体，依次用水20毫升洗涤滤渣三次。 
2)步骤1)所得滤液冷冻干燥(-50to-60℃)，将残留物用2毫升甲醇浸润，再滴入浓度为0.5mol/L的重氮甲烷的乙醚溶液在-15℃的条件下进行酯化反应12小时，结束后加入少量水，然后利用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥后，浓缩后利用100-200目的硅胶柱层析,洗脱液为乙酸乙酯，得单酰胺羧酸甲酯(具体为上述反应式中的x’)(产率：39％，ee>99.5％，Dicel-ADH)。 
x：solid mp198℃；1HNMR(DMSO-d6/300MHz)δ13.55(br,s,1H),7.88-7.33(m,7H),5.15-5.03(m,2H),4.94-4.90(m,2H),4.41-4.23(m,2H),2.36-2.28(m,2H),1.85-1.77(m,2H)； 13CNMR(75MHz/DMSO-d6)δ175.3,175.1,174.9,174.7,153.6,153.4,136.4,136.4,128.3,127.8,127.1,126.99,65.51,66.46,61.5,61.0,60.5,59.99,30.2,29.3,28.2.；IR(KBr)3373,2361,1712,1644,1590,1411,1352,1229cm-1；MS(ESI)m/z293.34(M++1,10％),315.29(M++23,100％).Anal.Calcd.for:C14H16N2O5C,57.53；H,5.52；N,9.58；Found:C,57.75；H,5.51,N,9.58. 
x’：solid mp104℃；1HNMR(CDCl3/300MHz)δ7.34-7.20(m,7H),5.07-4.90(m,2H),4.40-4.31(m,1H),4.11-4.05(m,1H),3.64(s,1.5H),3.55(s,1.5H),2.42-2.10(m,2H),1.85-1.76(m,2H)；13CNMR(75MHz/CDCl3)δ175.0,174.8,174.3,174.0,154.4,154.1,136.9,136.7,128.8,128.4,128.3,127.7,127.6,67.2,67.1,62.5,62.1,60.5,60.1,53.1,53.0,30.6,29.7,29.6,28.8；IR(KBr)3432,3401,1688,1412,1355,1212,1116,1004cm-1；MS(ESI)m/z307.35(M++1,20％),329.29(M++23,100％).Anal.Calcd.for:C15H18N2O5C,58.82；H,5.92；N,9.15Found:C,58.87；H,5.99；N,9.10. 
由上可知，上述化合物结构正确，为式II所示化合物X‘。 
实施例16：式I所示伪核苷类化合物的抗肿瘤活性 
四氮唑[MTT,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide]是一种能接受氢原子的染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的formazon，而死细胞则无此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波长下用酶标仪测定光密度值，既可定量测出细胞的存活率。实验方法如下：选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，用胰酶消化后，用10％小牛血清的RPMI1640培养液配成5000个/ml的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每孔接种100ul，37℃，5％CO2培养24h。 
实验组加样品10ul，每孔终体积为200ul，用1640培养液补足。37℃，5％CO2培养3d。 
弃上清液，每孔加入100ul新鲜配制的0.5mg/ml MTT的无血清培养液，37℃继续培养4h。小心弃上清，并加入200ulDMSO溶解MTT formazon沉淀，用微型超声振荡器混匀，在酶标仪上测定波长544nm处的光密度值。 
肿瘤细胞生长抑制率＝(OD对照-OD实验)/(OD对照-OD空白)×100％ 
已经测得实施例1制备所得伪核苷化合物1对Bel-7402(肝癌细胞)的生长抑制率为1.96％，A-549(肺癌细胞)的生长抑制率为1.96％。由上可知，本发明实施例1制备所得伪核苷化合物1对Bel-7402(肝癌细胞)以及A-549(肺癌细胞)的生长都有一定的抑制作用。 

Claims (8)

1.式II所示化合物，
所述式II中，n为1；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：所述式II所示化合物为式II‘所示化合物，
所述式II’中，n为1；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz；R3为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。
3.一种制备权利要求1或2所述化合物的方法，为下述方法a或方法b，其中，所述方法a包括如下步骤：用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270催化体系与式IV所示化合物进行催化水解反应后，再与碱和苄溴或对甲氧基苄溴于溶剂中进行酯化反应，反应完毕得到权利要求1或2所述化合物，
所述式IV中，R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz，n为1；
所述方法b包括如下步骤：用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270催化体系与式IV所示化合物进行催化水解反应后，再与重氮甲烷的乙醚溶液进行酯化反应，反应完毕得到权利要求1或2所述化合物，
所述式IV中，R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz，n为1。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述方法a和方法b中，所述红球菌催化体系由红球菌和pH值为6.0-8.0的缓冲溶液组成；所述缓冲溶液为Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液、K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液、Tris缓冲溶液、Hanks’缓冲溶液或PBS缓冲溶液；所述红球菌与式IV所示化合物的用量比为2g：1mmol-2g：1mol；所述红球菌催化体系中，红球菌与所述缓冲溶液的用量比为2g：50mL-2g:1L；所述催化水解反应步骤中，温度为20-37℃，时间为0.1-120小时；
所述方法a中，所述碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或碳酸铯；所述溶剂选自丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和四氢呋喃中的至少一种；所述碱、所述溶剂、苄溴或对甲氧基苄溴与所述式IV所示化合物的用量比为1.38g：2mL：1mL：1mmol；所述酯化反应步骤中，温度为10-30℃，时间为1-48小时；
所述方法b中，所述重氮甲烷的乙醚溶液的浓度为0.1-1mol/L；所述酯化反应步骤中，温度为-20—10℃，时间为2-24小时。
5.式III所示化合物，
所述式III中，n为1；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3、或-Cbz；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3，R3’为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。
6.根据权利要求5所述的化合物，其特征在于：所述式III所述化合物为式III’所示化合物，
所述式III’中，n为1；*代表手性，为R或S构型；R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz；R3为-NH2、-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3，R3’为-OH、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH＝CH2、-OCH2C6H5或-OCH2C6H5OCH3。
7.一种制备权利要求5或6所述化合物的方法，为下述方法a或方法b，其中，所述方法a包括如下步骤：用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270催化体系与式V所示化合物进行催化水解反应后，再与碱和苄溴或对甲氧基苄溴于溶剂中进行酯化反应，反应完毕得到权利要求5或6所述化合物，
所述式V中，R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz，n为1；
所述方法b包括如下步骤：用红球菌Rhodococcus erythropolis AJ270催化体系与式V所示化合物进行催化水解反应后，再与重氮甲烷的乙醚溶液进行酯化反应，反应完毕得到权利要求5或6所述化合物，
所述式V中，R2为-H、-CH3、-CH2CH3或-Cbz，n为1。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述方法a和方法b中，所述红球菌催化体系由红球菌和pH值为6.0-8.0的缓冲溶液组成；所述缓冲溶液为Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液、K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液、Tris缓冲溶液、Hanks’缓冲溶液或PBS缓冲溶液；所述红球菌与式IV所示化合物的用量比为2g：1mmol-2g：1mol；所述红球菌催化体系中，红球菌与所述缓冲溶液的用量比为2g：50mL-2g：1L；所述催化水解反应步骤中，温度为20-37℃，时间为0.1-120小时；
所述方法a中，所述碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化钠或碳酸铯；所述溶剂选自丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和四氢呋喃中的至少一种；所述碱、所述溶剂、苄溴或对甲氧基苄溴与所述式V所示化合物的用量比为1.38g：2mL：1mL：1mmol；所述酯化反应步骤中，温度为10-30℃，时间为1-48小时；
所述方法b中，所述重氮甲烷的乙醚溶液的浓度为0.1-1mol/L；所述酯化反应步骤中，温度为-20—10℃，时间为2-24小时。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110857276A (zh) * 2018-08-22 2020-03-03 中国科学院化学研究所 一类手性β-羟基酰胺类化合物及其制备方法与应用
CN114957030A (zh) * 2021-02-24 2022-08-30 中国科学院化学研究所 一类手性环状化合物及其制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005095339A1 (en) * 2004-03-31 2005-10-13 Pfizer Products Inc. Dicyanopyrrolidines as dipeptidyl peptidase iv inhibitors
WO2009109517A1 (en) * 2008-03-05 2009-09-11 Neurosearch A/S Novel 3,8-diaza-bicyclo[3.2.1]octane- and 3,9-diaza-bicyclo[3.3.1]-nonane-3-carboxylic acid ester derivatives and their use as monoamine neurotransmitter re-uptake inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005095339A1 (en) * 2004-03-31 2005-10-13 Pfizer Products Inc. Dicyanopyrrolidines as dipeptidyl peptidase iv inhibitors
WO2009109517A1 (en) * 2008-03-05 2009-09-11 Neurosearch A/S Novel 3,8-diaza-bicyclo[3.2.1]octane- and 3,9-diaza-bicyclo[3.3.1]-nonane-3-carboxylic acid ester derivatives and their use as monoamine neurotransmitter re-uptake inhibitors

Non-Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ACS: "RN：22328-83-2", 《STN-REGISTRY数据库》 *
ACS: "RN：35140-05-7", 《STN-REGISTRY数据库》 *
ACS: "RN：35140-06-8", 《STN-REGISTRY数据库》 *
D. S. KEMP，等: "Base-catalyzed epimerization behavior and unusual reactivity of N-substituted derivatives of 2,5-dicarbalkoxypyrrolidine. Preparation of a novel mixed carbamic carbonic anhydride by a 4-(dimethylamino)pyridine-catalyzed acylation", 《JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY》 *
D. S. KEMP，等: "Stereoselective decarboxylation of a geminal dicarboxylic acid. Synthesis of cis-5-(hydroxymethyl)-D-proline derivatives", 《JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY》 *
DAVID SNELL，等: "Enantioselective hydrolysis of racemic ibuprofen amide to S-(1)-ibuprofen by Rhodococcus AJ270", 《ENZYME AND MICROBIAL TECHNOLOGY》 *
GORDON LOWE，等: "Synthesis of β-lactams by photolytic Wolff rearrangement", 《JOURNAL OF THE CHEMICAL SOCIETY, PERKIN TRANSACTIONS I: ORGANIC AND BIO-ORGANIC CHEMISTRY》 *
MIN SHI，等: "Chiral C2-Symmetric 2,5-Disubstituted Pyrrolidine Derivatives as Chiral Catalyst Ligands in the Reaction of Diethylzinc with Arylaldehydes", 《TETRAHEDRON: ASYMMETRY》 *
STEPHEN W. WRIGHT，等: "cis-2,5-Dicyanopyrrolidine Inhibitors of Dipeptidyl Peptidase IV: Synthesis and in Vitro, in Vivo, and X-ray Crystallographic Characterization", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
TOMIHISA OHTA，等: "Direct chain elongation of N-carbamoylpyroglutamate. An efficient synthesis of(-)-pyrrolidine-2,5-dicarboxylic acid", 《CHEMISTRY LETTERS》 *
VLADIMIR S. KUBYSHKIN，等: "Synthesis of 7-azabicyclo[2.2.1]heptane-1,4-dicarboxylic acid, a rigid non-chiral analogue of 2-aminoadipic acid", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *
YASUHIRO KAWANAMI，等: "Asymmetric alkylation of carboxyamides by using trans-2,5-disubstituted pyrrolidines as chiral auxiliaries", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *
YOSHIHISAM ORIMOTO，等: "Enzymes and catalysts. I. Pig liver esterase-catalyzed hydrolysis of heterocyclic diesters", 《CHEMICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110857276A (zh) * 2018-08-22 2020-03-03 中国科学院化学研究所 一类手性β-羟基酰胺类化合物及其制备方法与应用
CN110857276B (zh) * 2018-08-22 2021-03-02 中国科学院化学研究所 一类手性β-羟基酰胺类化合物及其制备方法与应用
CN114957030A (zh) * 2021-02-24 2022-08-30 中国科学院化学研究所 一类手性环状化合物及其制备方法与应用
CN114957030B (zh) * 2021-02-24 2023-09-22 中国科学院化学研究所 一类手性环状化合物及其制备方法与应用

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