CN104189480A

CN104189480A - 抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉

Info

Publication number: CN104189480A
Application number: CN201410369003.2A
Authority: CN
Inventors: 严中明
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-07-30
Filing date: 2014-07-30
Publication date: 2014-12-10

Abstract

本发明提供了一种抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉，其中，按照重量单位配置如下各组分：马齿苋、鸦胆子、穿心莲各100-150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各60-80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各40-60g，甘草各20-30g，PVP-1为1-3g、次氯酸钠5-20g。本发明配比简单，使用方便，专门针对石斑鱼神经坏死病，防治效果好。

Description

抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉

技术领域：

本发明涉及药物技术领域，尤其涉及一种抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉。

背景技术：

病鱼表现厌食，上浮于水面，表现螺旋状或旋转游动，或腹部朝上漂浮于水面，难于下沉，病鱼腹部肿大，有的鳔肿大充血，外观无其它明显病变。组织学检查可见中枢神经组织脑细胞和视网膜细胞空泡化。该病的病原属诺达病毒科(Nodaviridae)。此病毒于1989年发现，1990年首次报道。此后，在世界各地相继有3目8科15种海水养殖鱼类发生过此病。可通过水平和垂直传播，此病主要影响苗种生产期的仔鱼和幼鱼，严重者可在一周内达100 %死亡，仔鱼期病鱼厌食，于水面飘游，鳔肿大，除此外无其他外观症状，死亡率极高。幼鱼期病鱼可出现螺旋式垂直游动，死亡率较仔鱼期低。组织学检查可见脑细胞和视网膜因细胞坏死和毁坏形成的空胞。电镜观察可见细胞质内球形病毒粒子，直径25～30 nm，病毒基因由两段单链RNA组成。病理检查可见中枢神经系统、脊髓以及视网膜组织大量细胞形成空泡，出现神经性降解。该病主要流行在石鲷、骖、石斑鱼、红鳍东方鲍等鱼的仔鱼和幼鱼上，死亡率一般可达40%～100%，也有部分种类的成鱼会被感染。近年来，在广东养殖的青石斑鱼、紫带百斑鱼等鱼的苗种上也造成了巨大的损失。由于该病毒在海水中可存活60天以上，所以病毒可以附着在卵表面或在水中游离而感染仔鱼。目前防治此病主要使用消毒剂进行消毒处理。对该病毒毒有效的消毒剂主要有卤素类、乙醇类、碳酸及pH值12的强碱溶液，如用次氯酸钠50毫克/升处理10分钟等。中药或其提取物用于抗病毒，有一定的优越性，如药物残留物低，所以，研究中药抗病毒药物用于治疗病毒性神经坏死病是必要的。

发明内容：

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，提供一种配比简单，使用方便，专门针对海水养殖鱼类的病毒性神经坏死病的养殖水杀毒，防治效果好的抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉。

为了实现上述目的，本发明提供了一种抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉，其中，按照重量单位配置如下各组分：

马齿苋、鸦胆子、穿心莲各100-150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各60-80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各40-60g，甘草各20-30g，PVP-1为1-3g、次氯酸钠5-20g。

或者，按照重量单位配置如下各组分：

马齿苋、鸦胆子、穿心莲各100-120g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各60-70g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各40-50g，甘草各20-25g，PVP-1为1-2g、次氯酸钠10-20g。

或者，按照重量单位配置如下各组分：

马齿苋、鸦胆子、穿心莲各120-150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各70-80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各50-60g，甘草各25-30g，PVP-1为2-3g、次氯酸钠8-12g

抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉的制备方法如下：

将上述中药组合物中的各原料药组分（马齿苋、鸦胆子、穿心莲、桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮、苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇、甘草）分别研磨成细粉，混合，获得混合物，将混合物加入到6~8 倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4 小时，煎煮3 次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3 倍量的醇浓度为90%~95% 的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎，加入粉状的PVP-1和次氯酸钠。即得药粉200g左右。

使用：此药物投放水中使用，药粉200g为1立方米水的消毒用量。

本发明的优点为，配比简单，使用方便，专门针对病毒性神经坏死病病毒，消毒后的养殖水，病毒性神经坏死病发病率低。对病毒性神经坏死病的防治效果好。

具体实施方式：

实验：

材料：马齿苋、鸦胆子、穿心莲各100-150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各60-80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各40-60g，甘草各20-30g，PVP-1为1-3g、次氯酸钠5-20g制得的粉剂。

治疗对比，随机选用出血性疾病的石斑鱼，分为3组，每组30只，单纯使用次氯酸钠消毒为组一，使用臭氧过滤后的海水为组二、本发明为组三，每组30条分别放于3立方米的海水内，同等条件下，以诺达病毒侵染，三天后观察。发现，

组别	死亡数	有效率%
			组一	10	66.7
组二	14	53.3
			组三	6	80.0

抗病毒实验数据：

对石斑鱼的体内抗病毒实验

取鱼，按体重随机分2组：病毒感染对照组和正常动物对照组，除正常对照组外，将石斑鱼轻度麻醉，以15个LDSD的石斑鱼肠弧病毒侵染，每只0.1ml，从感染前一天开始分别放养于上述组一、组二、组三的水中，连续3天，称取体重后固定，解剖，取肝脏计算肝指数值，计算肝指数抑制率

肝指数=肝重（g）/体重（g）×100

肝指数抑制率=（病毒对照组肝指数均值-实验组肝指数均值）/病毒对照组肝指数均值×100%

肝指数越大，表示肝病变程度严重，（因出血病导致各脏器出血，选择一个脏器作为指标，也可以选择肺进行肺指数测定）

肝组织用10%甲醛固定，乙醇系列脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片厚度4-5微米，HE染色，用普通光学显微镜观察肝组织形态变化，选用广谱抗菌药（PVP-1）的抗病毒组作为对比，可以看出本发明效果明显优于广谱抗菌药。

肝部验证（病毒观察）的影响（n=10）

可以发现，本发明的对病毒抑制率明显高于直接使用PVP-1。

毒性对大鼠的实验：

急性经口（LD50）〉500mg/kg，

急性经皮（LD 50）〉2000mg/kg，

属于低毒。

具体例子1

费家一养殖场，面积1500平米，水深约5米，放养石斑鱼1万尾，8月中开始发病陆续死鱼，每天死亡鱼的数量成倍增加，最多日死石斑鱼达500 多尾。检测病鱼，组织学检查可见脑细胞和视网膜因细胞坏死和毁坏形成的空胞。电镜观察可见细胞质内球形病毒粒子，直径25～30 nm，病毒基因由两段单链RNA组成。病理检查可见中枢神经系统、脊髓以及视网膜组织大量细胞形成空泡，出现神经性降解。诊断为石斑鱼神经坏死病，使用本发明马齿苋、鸦胆子、穿心莲各150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各60g，甘草各30g，PVP-1为3g、次氯酸钠20g。

将上述中药组合物中的各原料药组分（马齿苋、鸦胆子、穿心莲、桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮、苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇、甘草）分别研磨成细粉，混合，获得混合物，将混合物加入到6~8 倍量的水中进行煎煮，每次煎煮2~4 小时，煎煮3 次，每次煎煮完后过滤，将滤液混合，进行减压浓缩获得浸膏，将浸膏加入到相对于混合物质量2~3 倍量的醇浓度为90%~95% 的乙醇溶液中，搅拌完全溶解，随后在4℃温度以下静置过夜，随后过滤，将滤液进行减压浓缩除去乙醇，获得的膏体粉碎，加入粉状的PVP-1和次氯酸钠。即得药粉150-200g左右。

先将病鱼隔离，死鱼捞出后，将此药物投入到海水中，每2天投放一次，在用药后的第1 天石斑鱼死亡数量为316尾，第2 天石斑鱼死亡数量139尾，第3 天死亡76 尾，第4 天没有鱼发病死亡。

例子2

魏家养殖场1200平米，放养8000尾，夏秋季节发现鱼类陆续死亡，最高日死亡456只，解剖发现，可见脑细胞和视网膜因细胞坏死和毁坏形成的空胞。电镜观察可见细胞质内球形病毒粒子，直径25～30 nm，病毒基因由两段单链RNA组成。病理检查可见中枢神经系统、脊髓以及视网膜组织大量细胞形成空泡，出现神经性降解。诊断为石斑鱼神经坏死病，使用本发明。

马齿苋、鸦胆子、穿心莲各100g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各60g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各40g，甘草各20g，PVP-1为2g、次氯酸钠10g。

先将病鱼隔离，死鱼捞出后，将此药物投入到海水中，每2天投放一次，在用药后的第1 天石斑鱼死亡数量为349尾，第2 天石斑鱼死亡数量215尾，第3 天死亡104尾，第4 天没有鱼发病死亡。

例子3，

方家养殖场1000平米，放养6000尾，夏秋季节发现鱼类陆续死亡，最高日死亡392只，电镜观察可见细胞质内球形病毒粒子，直径25～30 nm，病毒基因由两段单链RNA组成。病理检查可见中枢神经系统、脊髓以及视网膜组织大量细胞形成空泡，出现神经性降解。

诊断为石斑鱼神经坏死病，使用本发明。马齿苋、鸦胆子、穿心莲各120g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各70g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各30g，甘草各25g，PVP-1为1.5g、次氯酸钠12g

先将病鱼隔离，死鱼捞出后，将此药物投入到海水中，每2天投放一次，在用药后的第1 天石斑鱼死亡数量为294尾，第2 天石斑鱼死亡数量164尾，第3 天死亡69尾，第4 天没有鱼发病死亡。

综上，本发明配比简单，使用方便，专门针对石斑鱼神经坏死病，防治效果好。

Claims

1.一种抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉，其特征在于，按照重量单位配置如下各组分：

2.根据权利要求1所述抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉，其特征在于，按照重量单位配置如下各组分：

3.根据权利要求1所述抑制海鱼病毒性神经坏死病病毒的中药粉，其特征在于，按照重量单位配置如下各组分：

马齿苋、鸦胆子、穿心莲各120-150g，桂枝、茵陈、知母、生石膏、黄柏、白头翁、金银花、虎杖、白鲜皮各70-80g，苦参、秦皮、土谨皮、山慈菇各50-60g，甘草各25-30g，PVP-1为2-3g、次氯酸钠8-12g。