CN104173394B - 一种抗乳腺癌的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抗乳腺癌的药物组合物及其制备方法和用途，该药物组合物由活性成分和药用辅料制备而成，其中的活性成分为青棉花藤叶提取物。本发明涉及的药物组合物由单一的中草药提取制备而成，其可较强地抑制多种乳腺癌细胞的增殖，味少而效专，抗肿瘤活性显著。

Description

一种抗乳腺癌的药物组合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于中药材提取技术领域，涉及一种抗乳腺癌的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术
乳腺癌是威胁女性健康的常见恶性肿瘤之一，据资料统计，发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10％。它的发病常与遗传有关，以及40-60岁之间、绝经期前后的妇女发病率较高。仅约1-2％的乳腺患者是男性。通常发生在乳房腺上皮组织的恶性肿瘤，是一种严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一。主要症状表现为：乳腺肿块、乳腺疼痛、乳头溢液、乳头改变、皮肤乳腺癌细胞改变、腋窝淋巴结肿大。
随着健康观念的更新和新医学模式的建立，乳腺癌患者的生存及生活质量的改善和提高已成为临床治疗中必须考虑的重要问题。目前临床治疗乳腺癌的方案主要包括手术、放疗、化疗、内分泌治疗以及中医药治疗等。自乳腺癌根治术创立近100多年以来，手术一直是治疗乳腺癌的主要方法之一，尤其是病灶限于局部或淋巴结患者的首选方法。但是，研究表明，乳腺癌患者在初次手术之后仍然面临着较高的复发风险，其复发的高峰集中在大约2年左右。有关早期乳腺癌试验协作组(EBCTCG)的研究报告显示，术后化疗和内分泌治疗可以使乳腺癌的年病死率下降20％左右，辅助化疗使乳腺癌死亡率相对于下降约25％，辅助内分泌治疗可以使乳腺癌死亡率相对下降30％-40％，但是化疗、放疗、及内分泌治疗常产生胃肠道反应，白细胞降低，脱发等副作用。如何在增加乳腺癌放疗化疗疗效的同时，尽量降低其毒副作用，改善和提高生活质量逐渐引起了本领域研究人员的重视。由于中药具有多途径、多靶点、毒副作用低等优点，运用中药防治肿瘤越来越受到广大临床医师和患者的青睐，从中药中寻找抗乳腺癌药物也成为研究热点之一。
中药材青棉花藤叶为虎耳草科冠盖藤属植物冠盖藤Pileostegia viburnoidesHook.f.et Thoms.的叶。目前，该药材被报道具有祛风除湿，散瘀止痛，接骨的功效，主要用于腰腿酸痛，风湿麻木；外用治跌打损伤，骨折，外伤出血等疾病，尚无文献报道青棉花藤叶或其提取物具有抗肿瘤尤其是抗乳腺癌的生物活性。
发明内容
由于中药具有多途径、多靶点、毒副作用低等优点，本发明的目的在于通过研究大量中药材的生物活性，从而提供一种高效低毒的抗乳腺癌的中药组合物及其制备方法和用途。
为了实现本能发明的目的，发明人通过大量试验研究并不懈探索，最终获得了如下技术方案：
一种抗乳腺癌的药物组合物，该药物组合物由活性成分和药用辅料制备而成，所述的活性成分为青棉花藤叶提取物。
优选地，本发明所述的抗乳腺癌的药物组合物，其中所述的青棉花藤叶提取物为青棉花藤叶水提液的氯仿萃取部位。
本发明的第二个目的在于提供一种根据上述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其中该方法包括如下步骤：
(1)将青棉花藤叶原料用纯水加热回流提取，提取液被浓缩后以氯仿萃取，萃取液经试剂回收后干燥，粉碎，得青棉花藤叶提取物；
(2)将步骤(1)所得青棉花藤叶提取物与药用辅料混匀制备成药用制剂。
优选地，如上所述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其中步骤(1)中纯水加热回流提取2-4次，每次提取2-5h。
优选地，如上所述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其中步骤(1)中所述的氯仿萃取步骤为等体积萃取。
需要说明的是，本发明所涉及的青棉花藤叶选用虎耳草科冠盖藤属植物冠盖藤Pileostegia viburnoides Hook.f.et Thoms.的叶。
本发明人通过实验研究表明，青棉花藤叶提取物可较强地抑制多种乳腺癌细胞增殖，比如人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231。因此，本发明的另一个目的在于提供一种制药用途，即：上述的青棉花藤叶提取物在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的用途。进一步优选地：上述的青棉花藤叶提取物在制备抑制乳腺癌细胞增殖的药物中的用途。尤其是，本发明所述的青棉花藤叶提取物在制备抑制人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖的药物中的用途。
与现有技术相比，本发明涉及的药物组合物由单一的中草药提取制备而成，其可较强地抑制多种乳腺癌细胞的增殖，味少而效专，抗肿瘤活性显著。另外，该药物的活性成分来源于天然植物，因此毒副作用低，属于“绿色治疗药物”的范畴，可望被开发成抗肿瘤的一线用药。
具体实施方式
以下是本发明青棉花藤叶提取物干粉的制备实施例和效果试验例，对本发明做进一步说明。但是，本发明的保护范围并不受限于以下实施例，凡是基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1 青棉花藤叶提取物的制备
将青棉花藤叶去杂，清洗干净，粉碎至粒径32目左右，称取青棉花藤叶粉0.86kg，置于提取装置中，加入10L纯化水浸泡1h后加热回流提取3h，共提取2次，合并提取液，减压浓缩至提取液总量为青棉花藤叶原料重量的1.5倍(v/w)左右，加入等体积的氯仿萃取3次，合并萃取液，回收氯仿，并用冷冻干燥器冷冻干燥，粉碎，得青棉花藤叶提取物。
对比例1 青棉花藤叶提取物的制备
采用乙酸乙酯代替氯仿进行萃取，其他步骤和参数均同实施例1。
对比例2 青棉花藤叶提取物的制备
采用水饱和正丁醇代替氯仿进行萃取，其他步骤和参数均同实施例1。
实施例2 青棉花藤叶提取物人乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制试验研究
分别取实施例1、对比例1和对比例2制备的青棉花藤叶提取物干粉适量，以DMSO制备成质量浓度为10mg/ml的DMSO贮备液，分别命名为A1、A2、A3溶液。
人乳腺癌细胞MCF-7复苏后，于37℃、5％CO2细胞培养箱中培养，2～3d传代培养。将处于对数生长期的贴壁肿瘤细胞以200μl/孔接种于96孔培养板，每孔8000个细胞。贴壁生长24h后给药。制备4种质量浓度的A1、A2、A3溶液(25、50、100、200μg/ml)，每个浓度设3个复孔。48h取出培养板，每孔加入10％(m/V)的三氯乙酸(TCA)100μl固定细胞，4℃放置1h。弃固定液，用蒸馏水洗涤5次，空气中自然干燥，每孔加磺酰罗丹明B溶液100μl，室温下放置10-30min。用1％醋酸洗涤5次，自然干燥。最后加入150μl/孔Tris溶液，在平板振荡器上振荡5min。用酶标仪在515nm波长处测定光密度(OD)，用空白对照调零。以细胞内加DMSO作模型对照。按下式计算肿瘤细胞生长的抑制率：抑制率＝(OD模型对照一OD给药)/OD模型对照×100％。试验结果经统计后见表2。
通过表1的试验结果可以看出，A1可较强抑制人乳腺癌细胞MCF-7，其半数抑制浓度为68.39μg/ml；而A2和A3对人乳腺癌细胞MCF-7的生长有促进作用。
表1 各组人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率比较(％)
实施例3 青棉花藤叶提取物人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的抑制试验研究
分别取实施例1、对比例1和对比例2制备的青棉花藤叶提取物干粉适量，以DMSO制备成质量浓度为10mg/ml的DMSO贮备液，分别命名为A1、A2、A3溶液。
人乳腺癌细胞MDA-MB-231复苏后，于37℃、5％CO2细胞培养箱中培养，2～3d传代培养。将处于对数生长期的贴壁肿瘤细胞以200μl/孔接种于％孔培养板，每孔8000个细胞。贴壁生长24h后给药。制备4种质量浓度的A1、A2、A3溶液(25、50、100、200μg/ml)，每个浓度设3个复孔。48h取出培养板，每孔加入10％(m/V)的三氯乙酸(TCA)100μl固定细胞，4℃放置1h。弃固定液，用蒸馏水洗涤5次，空气中自然干燥，每孔加磺酰罗丹明B溶液100μl，室温下放置10-30min。用1％醋酸洗涤5次，自然干燥。最后加入150μl/孔Tris溶液，在平板振荡器上振荡5min。用酶标仪在515nm波长处测定光密度(OD)，用空白对照调零。以细胞内加DMSO作模型对照。按下式计算肿瘤细胞生长的抑制率：抑制率＝(OD模型对照一OD给药)/OD模型对照×100％。试验结果经统计后见表2。
通过表2的试验结果可以看出，A1可较强抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231，其半数抑制浓度为139.34μg/ml；而低剂量的A2对人乳腺癌细胞MCF-7的生长有抑制作用，而A3和高剂量的A2对人乳腺癌细胞MCF-7的生长有促进作用。
表2 各组人乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制率比较(％)

Claims (5)

1.一种抗乳腺癌的药物组合物，由活性成分和药用辅料制备而成，其特征在于，所述的活性成分为青棉花藤叶提取物，所述的青棉花藤叶提取物为青棉花藤叶水提液的氯仿萃取部位，制备方法为：将青棉花藤叶原料用纯水加热回流提取，提取液被浓缩后以氯仿萃取，萃取液经试剂回收后干燥。
2.一种根据权利要求1所述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
(1)将青棉花藤叶原料用纯水加热回流提取，提取液被浓缩后以氯仿萃取，萃取液经试剂回收后干燥，粉碎，得青棉花藤叶提取物；
(2)将步骤(1)所得青棉花藤叶提取物与药用辅料混匀制备成药用制剂。
3.根据权利要求2所述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中纯水加热回流提取2-4次，每次提取2-5h。
4.根据权利要求2所述抗乳腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的氯仿萃取步骤为等体积萃取。
5.青棉花藤叶提取物在制备抑制乳腺癌细胞增殖的药物中的用途，所述的青棉花藤叶提取物为青棉花藤叶水提液的氯仿萃取部位，制备方法为：将青棉花藤叶原料用纯水加热回流提取，提取液被浓缩后以氯仿萃取，萃取液经试剂回收后干燥。
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