CN104127442A - 一种用于保护肝脏的组合物 - Google Patents

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黄中洋
黄于真
黄景熙
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Abstract

本发明提供一种用于保护肝脏的组合物，其包含台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳。本发明的保护肝脏的组合物可保护化学性肝损伤。该台湾绿蜂胶萃取物可为台湾绿蜂胶之水或醇类萃取物。该台湾绿蜂胶萃取物含有一种或多种蜂胶素，该一种或多种蜂胶素可选自于由蜂胶素A-J(Propolin A-J)所组成的群组。

Description

一种用于保护肝脏的组合物
技术领域
本发明关于一种用于保护肝脏的组合物，其可为医药组合物或食品组合物。特定而言，本发明关于一种用于保护化学性肝损伤的组合物。
背景技术
蜂胶(Propolis)是蜜蜂收集自树芽、果实、树汁或其他植物来源的树脂混合物。来自不同地区的蜂胶可因蜜蜂所采食的蜜源植物而含有不同的活性成分。目前已知蜂胶依来源以及所含活性成分可大致分为六大类：源自欧洲北美的杨树型蜂胶(Poplarpropolis)、源自俄罗斯的桦树型蜂胶(Birch propolis)、巴西蜂胶(Brazil propolis)、源自古巴等地的红蜂胶(Red propolis)、源自太平洋地区如冲绳与台湾的绿蜂胶(Pacificpropolis)以及源自加那利岛的蜂胶(Canarian propolis)。
发明内容
本发明提供一种用于保护肝脏的组合物，其包含台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳。本发明的保护肝脏的组合物可保护化学性肝损伤。
在本发明的部分具体实施例中，该台湾绿蜂胶萃取物为台湾绿蜂胶的水或醇类萃取物。
根据本发明，该台湾绿蜂胶萃取物含有一种或多种蜂胶素。该一种或多种蜂胶素可选自于由蜂胶素A-J(Propolin A-J)所组成的群组。
无须进一步的阐述，相信本发明所属技术领域中具有通常知识者基于前述说明即可利用本发明至最广的程度。因此，可以理解以下的说明仅仅是作为例示说明，而非以任何方式限制其余的揭露内容。
附图说明
图1为台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳对四氯化碳所诱发肝损伤及其GOT活性的影响；
图2为台湾绿蜂胶萃取物对四氯化碳所诱发肝损伤及其GPT活性的影响；
图3为台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳对普拿疼所诱发肝损伤及其GOT活性的影响；
图4为台湾绿蜂胶萃取物对普拿疼所诱发肝损伤及其GPT活性的影响。
具体实施方式
以下是实施例及其试验数据等，但本发明的内容并不局限于这些实施例的范围。
除非另有指明，所有在此处使用的技术性和科学性术语具有如同本发明所属技艺中的通常技术者一般所了解的意义。
本文所使用的“约”一词，为所属技术领域统计学可接受的误差范围内的数值。
本发明提供一种用于保护肝脏的组合物，其包含台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳。根据本发明的较佳具体实施例，该组合物可保护化学性肝损伤。
在本发明的部分具体实施例中，该用于保护肝脏的组合物配制为食品组合物。
本文所使用的“食品组合物”一词是指日常饮食的食品以及日常饮食之外补充品，其形式包括但不限于胶囊、锭剂、丸剂、悬浮液、颗粒、食品或饮品。
在本发明中，“台湾绿蜂胶(Taiwanese green propolis)”一词是指产于台湾的翠绿色蜂胶，含有丰富的蜂胶素(propolins)。已知台湾绿蜂胶萃取物至少含有蜂胶素A-J。
本文所使用的“蜂胶素(propolins)”一词主要是泛指来自蜂胶的黄酮类化合物或其水合物，包括但不限于蜂胶素A-J：
式1(蜂胶素A)
式2(蜂胶素B)
式3(蜂胶素C)
式4(蜂胶素D)
式5(蜂胶素E)
式6(蜂胶素F)
式7(蜂胶素G)
式8(蜂胶素H)
式9(蜂胶素I)
式10(蜂胶素J)
本文所使用的“水合物”又称水化物，是指含有水的化合物，其中水可以是配位与其他部分相连，或以共价键相结合，化合物与水分子通过氢键结合形成结晶。本发明中，水合物是指一分子水在支链的尾端形成一个含有三级醇的化合物，例如蜂胶素A(propolin A)、蜂胶素B(propolin B)、蜂胶素E(propolin E)等。
在本发明的一具体实施例中，该组合物中台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳的重量比可为10-30wt％的台湾绿蜂胶萃取物或蜂胶素及40-75wt％的水解蜂王乳，较佳为1-10：3-30，更佳为1：10-15。
绿蜂胶萃取物的制备：
本发明的台湾绿蜂胶萃取物可通过以水或醇类(例如，乙醇)萃取台湾绿蜂胶以制备。水或醇类萃取液可进一步过滤以去除杂质，并经减压浓缩取得台湾绿蜂胶萃取物。萃取物经HPLC分析确认活性化合物的含量。
水解蜂王乳(H-RJ)的制备：
蜂王乳加纯水充份混合，在4℃离心4000rpm、10分钟。离心后的上清液加入蛋白水解酶(protease A)，在温度约50℃，转速150rpm震荡培养箱作用约2小时进行蜂王乳蛋白水解。之后，以90℃高温将protease A的活性去除，再进行减压浓缩。将原来离心的沉淀物与浓缩液混合，再进行冷冻干燥得到水解蜂王乳(H-RJ)。
绿蜂胶萃取物的保护肝脏活性测试与比较
肝脏为人体最大、机能最复杂的重要代谢器官。它在醣、脂质、蛋白质、维生素、激素、胆汁等物质代谢中，均有重要作用；同时肝脏还有分泌、排泄、生物转化等方面的功能。肝细胞含有丰富的肽，并合成许多肽和某些凝血因子，储存和释放造血因子，参与血液凝固和造血过程。肝脏也是机体重要屏障器官，其解毒功能对机体有重要保护作用。当肝功能损伤时则代谢障碍，并影响其他脏器功能，严重则危及生命。
造成肝脏疾病的主要因素有病毒性、酒精性与化学性三大类，而在老鼠动物模式的病理切片中与人体有一致之病理现象者为化学性肝损伤。
四氯化碳(CCl4)与普拿疼(Panadol)诱导大白鼠肝损伤实验
将研究组别(每组10-12只雄性SD或Wistar大白鼠(200-250克))分为：(A)对照组：正常饮食组；(B)负对照组：四氯化碳处理组或普拿疼处理组；(C)正对照组：水飞蓟素(Silymarin)处理组；及(D)实验组：试验样品处理组(二种剂量，其中之一相当于人体建议摄取量，另一组则相当于人体建议摄取量的5-10倍)。
A组灌食橄榄油或玉米油(0.5ml)，B-D组灌食20％CCl4/橄榄油或玉米油(0.5ml)，每周两次(星期一及四)；并于星期二、三、五、六或每日，A、B组灌食生理盐水或d.d.H2O(distilled deionized H2O，蒸馏去离子水)，C组灌食水飞蓟素(200mg/kg)，D组则灌食试验样品，共为期八周。所有实验动物分别于第一周、第三周及第六周投予试验样品(或生理盐水或d.d.H2O或水飞蓟素)后2小时，以尾部采血方式检测肝脏的生化功能：GOT(AST)与GPT(ALT)。最后于第八周结束时牺牲，以颈动脉或腹大动脉采血检验肝脏生化功能，并剖腹取肝脏标本，秤重后将最大右叶肝割取两块l cm x l cm样本固定于10％的中性福尔马林(Formaline)液中，石蜡包封切片后分别作HE、Masson及网状纤维染色来进行病理学观察。
使用CCl4诱发肝损伤的实验结果见图1及图2，其中台湾绿蜂胶萃取物以TP表示，TP(H)代表高剂量的TP，而TP(L)代表低剂量的TP，水解蜂王乳以H-RJ表示。在低剂量组以150mg/60kg/天的TP加上2g/60kg/天的H-RJ的剂量比例给予喂食；在高剂量组以450mg/60kg/天的TP加上2g/60kg/天的H-RJ的剂量比例给予喂食。实验数据显示，以150.0mg/mL台湾绿蜂胶萃取物培养大鼠肝细胞后，即可观察到肝细胞GOT/GPT值下降；同样情形，使用高剂量450.0mg/mL台湾绿蜂胶萃取物后，也可使大鼠肝细胞GOT/GPT值下降，因此，本发明的一较佳实施例台湾绿蜂胶萃取物能够显著降低因四氯化碳氧化损伤，所引起的细胞坏死现象发生，提升细胞存活率。
使用普拿疼诱发肝损伤的实验结果请参图3-4，其中第一组至第八组分别表示正常饮食组(对照组)、负对照组、正对照组、单独给予2g/60kg/天的H-RJ2、单独给予150mg/60kg/天的TP、低剂量组(LD)是以75mg/60kg/天的TP加上2g/60kg/天的H-RJ、高剂量组(HD)是以150mg/60kg/天的TP加上2g/60kg/天的H-RJ以及最后一组150mg/60kg/天的TP加上1g/60kg/天的H-RJ。实验数据显示，使用普拿疼药物所引起的细胞损伤与坏死现象，若使用150.0mg/mL台湾绿蜂胶萃取物后，即可使肝细胞GOT/GPT值下降。
以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (8)

1.一种用于保护肝脏的组合物，其特征在于：所述组合物包含台湾绿蜂胶萃取物及水解蜂王乳。
2.根据权利要求1所述的用于保护肝脏的组合物，其中该台湾绿蜂胶萃取物为台湾绿蜂胶的水或醇类萃取物。
3.根据权利要求1所述的用于保护肝脏的组合物，其中该台湾绿蜂胶萃取物含有一种或多种蜂胶素。
4.根据权利要求3所述的用于保护肝脏的组合物，其中该一种或多种蜂胶素选自于由蜂胶素A-J所组成的群组。
5.根据权利要求1所述的用于保护肝脏的组合物，其保护化学性肝损伤。
6.根据权利要求1所述的用于保护肝脏的组合物，其含有10-30wt％的台湾绿蜂胶萃取物或蜂胶素及40-75wt％的水解蜂王乳。
7.根据权利要求6所述的用于保护肝脏的组合物，其中台湾绿蜂胶萃取物或蜂胶素与水解蜂王乳的比例为1-10：3-30。
8.根据权利要求7所述的用于保护肝脏的组合物，其中台湾绿蜂胶萃取物或蜂胶素与水解蜂王乳的比例为1：10-15。
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