CN103977180A - 一种具有抗抑郁作用的中药物质组方及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物研究开发领域，涉及一种药物物质，特别涉及一种具有抗抑郁作用的药物物质及其制备方法。由远志汤经过乙醇提取、大孔吸附树脂纯化得到，富集了远志汤中的酚酸类成分、萜类成分、苯丙素类成分，同时经过大鼠嗅球损毁抑郁模型试验证明，本发明中药物组合物可增加大鼠脑部海马区5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量，从而达到抗抑郁的目的。

Description

一种具有抗抑郁作用的中药物质组方及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于药物研究开发领域，涉及一种药物物质，特别涉及一种具有抗抑郁作用的药物物质及其制备方法。

背景技术

抑郁症是一种最常见的精神疾病。随着现代生活工作节奏的加快，各种应激因素的增多，人们的心理压力逐渐增大，社会上抑郁症患者日趋增加。抑郁症病因很复杂，至今尚未完全阐明。虽然一些西药如氯丙米嗪、氟西汀、文拉法辛、米氮平等对抑郁症有一定的治疗作用，但其依然存在抗抑郁谱窄、不良反应多、易产生耐药性以及价格昂贵等缺陷。

远志汤作为临床常用对药，具有宁心安神、开窍祛痰、抗惊厥、改善记忆和抗肿瘤等作用，由远志、石菖蒲组成。该方中远志行气散郁、益智慧；石菖蒲开心孔、明耳目，发散药性、引药入经。二者配伍，可镇静安神、改善记忆、治疗抑郁。目前临床上，远志汤及其加减方多用于治疗痴呆、失眠、抑郁等病症。

本发明发现了一种具有抗抑郁作用的中药药物物质组合，并以药效关联的类型成分及指标性成分为综合考量，建立了稳定可靠、适合实际生产的同时制备工艺和科学全面的质量控制方法，有利于进一步创新药物的研发。目前，未见从远志汤中纯化制备抗抑郁药物物质组合的相关报道，也未见有关该组合物在治疗抑郁疾病方面的相关研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗抑郁活性的药物物质，本发明的另一个目的在于提供其制备方法，本发明的第三个目的在于提供其质量检测及控制方法，本发明的第四个目的在于提供其抗抑郁作用。本发明的第五个目的在于提供该药物物质组合物的制品及其在药品、食品领域的应用。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明中药药物物质组合可由如下2组药用植物及其代用品种，包括其药用部位及非药用部位，药材及其饮片组合制成。

组1远志、台湾远志、荷包山桂花、小花远志、坝王远志、尾叶远志、华南远志、香港远志等及其炮制品生远志、制远志、蜜远志等远志同属植物及其炮制品。

组2菖蒲、石菖蒲、长苞菖蒲、金钱蒲等石菖蒲同属植物及其炮制品及其炮制品。

本发明中药药物物质，可经上述原料药组合后以乙醇、或其他醇类、稀醇、或其他有机溶剂或水提取再通过大孔吸附树脂或其他色谱方法，如聚酰胺色谱法等，或溶剂萃取法等纯化得到。

本发明中药药物物质可由上述原料药的提取物经进一步富集纯化后或上述原料药的大孔树脂制备物混合而成。

本发明药物物质可经化学合成或结构修饰，生物合成或生物转等途径获得。

本发明中药药物组合优选为以下原料药制成：

远志  10～500重量份    石菖蒲  10～500重量份。

本发明药物物质制备方法包括如下步骤：

步骤1：选取上述原料药；

步骤2：乙醇提取；

步骤3：大孔吸附树脂纯化；离心，大孔吸附树脂纯化；

该药物物质中远志总萜含量为5～80％，总酚酸含量为5～80％，其中3，6’-二芥子酰基蔗糖含量0.1～50％；石菖蒲总苯丙素含量为3～80％，其中β-细辛醚含量0.1～50％；总酚酸含量为1～70％，其中儿茶酸含量0.001～30％。所述的远志属、菖蒲属制备物中远志酚类有效组分含量优选为50～70％，且含3，6’-二芥子酰基蔗糖5～10％；萜类成分含量优选为30～40％，且含细叶远志皂苷20～30％。石菖蒲制备物中酚类成分含量优选为50～70％，且含原儿茶酸0.1～1％，苯丙素类成分含量优选为20～30％，且含β-细辛醚3～10％。

上述步骤2中，将原料药远志用0～80％乙醇回流提取1～4次，每次提取0.5～2小时；将原料药石菖蒲用40～80％乙醇回流提取2～4次，每次提取0.5～3小时。

上述步骤3中，将步骤2所得远志提取物加水分散溶解，使水溶液浓度为0.02～0.1g/mL，通过弱极性或非极性大孔吸附树脂，吸附流速为1～5BV/h，树脂柱径高比为1∶4～1∶10，上样液浓度为0.02～0.1g/mL，水洗脱1～5倍树脂体积进行除杂，水除杂流速为1～5BV/h，10～60％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得总酚酸类含寡糖酯类，酮类有效组分；60～95％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得总萜类有效组分。

上述步骤3中，将步骤2所得石菖蒲提取物加0～60％乙醇回流提取1～5次，每次0.5～2.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至无醇味，提取物加5-10倍水分散溶解，以2000～6000转/分钟的转速离心30～50min，沉淀即为苯丙素类有效组分，上清液通过弱极性或极性大孔吸附树脂，吸附流速为1～5BV/h，树脂柱径高比为1∶4～10，上样液浓度为0.02～0.1g/mL，水洗脱1～5倍树脂体积进行除杂，水除杂流速为1～5BV/h，10～95％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得酚酸类有效组分。

将以上所得药物物质，加入常规辅料，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液。

本发明中药药物物质由远志汤经过乙醇提取、大孔吸附树脂纯化得到，富集了远志汤中的酚酸类成分、萜类成分和苯丙素类成分，同时经过大鼠抑郁模型试验证明，本发明药物物质可使模型大鼠脑中5-HT含量上升，NE含量上升，从而治疗抑郁疾病。

以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实验例1  本发明抗抑郁活性部位致大鼠嗅球损毁模型的改善作用

(一)实验材料

1.实验动物

SD大鼠，雄性，体重230-250g。由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。

2.药品与试剂

受试药：远志汤抗抑郁活性部位(有效组分混合物)；盐酸氟西汀分散片，生产批号：0745A。

3.器材

大鼠脑立体定位仪，电烙铁等。

(二)实验方法与结果

1.分组及给药

大鼠饲养1周后，随即分成5组：空白对照组、假手术组、模型组。模型组进行嗅球损毁手术，假手术组同模型组，但不损伤嗅球。大鼠术后恢复性喂养2周，按体重随机分为模型组、远志汤抗抑郁活性部位组、盐酸氟西汀组。另设空白对照组和假手术组。分组后，远志汤组给药2g生药量/kg；阳性药组给药2mg/kg，连续灌胃给药5天。模型组、空白组、假手术组分别给予等体积生理盐水。

2.大鼠嗅球损毁模型建立方法

大鼠用水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，固定在脑立体定位仪上，消毒头部皮肤，暴露三缝(冠状缝、矢状缝、人字缝)二囱(前囱、后囱)，用棉球搽去骨膜。在前囟前8mm，正中线两侧2mm，用牙科钻钻2个直径约2mm的孔，用特制的顶部尖锐的电烙铁热切断嗅球，并停留3s以完全损毁两侧嗅球组织，伤口用止血海绵填塞，并喷洒青霉素钠粉末1-2滴，缝合皮肤。术后维持室温25℃以保持大鼠体温，经过2周的恢复后进行实验。假手术组不损伤嗅球，其余处理同模型组。

3.神经递质检测方法

大鼠断头于冰台上迅速剖取海马部位，-80℃保存待测。检测前待测样品分别称重，按100mg组织加入1000μL冰冷的生理盐水(0.09mol/L)，匀浆，14000r/min高速离心10min，取上清，采用ELISA法，按试剂盒说明书进行检测。主要检测海马中5-HT、NE的含量。

4.统计方法

使用SAS8.0统计软件进行分析，实验结果以均数±标准误表示。采用两样本t检验和非参数检验(Mann-Whitney Test)进行两两比较，采用单因素方差分析(ANOVA)进行多组间比较，组间差异采用LSD(方差齐)或者Games-Howell法(方差不齐)，分别将记忆巩固测试阶段各组给药大鼠与模型组大鼠和正常组大鼠进行比较，求得组间差异。

5.实验结果

表1远志汤抗抑郁活性部位药效结果

注：&P＜0.05，与正常对照组比较；*P＜0.05，与模型组比较

(三)结论

与模型组相比，本制剂抗抑郁活性部位中剂量组可使模型大鼠脑海马区中5-HT含量升高，NE含量升高，从而达到抗抑郁的目的。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

实施例1：胶囊剂

远志  500g    石菖蒲  500g

按上述比例取原料药远志饮片500g，60％乙醇4L回流提取3次，每次提取1.5小时，减压回收溶剂，得提取物；加水分散溶解，使水溶液浓度为0.1g/mL(以折生药材量计，其中萜浓度为6.453mg/ml，总酚类浓度为5.953mg/ml)，通过DM130大孔吸附树脂，树脂径高比1∶6；上样量与树脂体积比1∶8，吸附流速为3BV/h，水洗2倍柱体积除杂，除杂流速为3BV/h。30％醇5倍柱体积3BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得酚类有效组分；90％醇5倍柱体积6BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得萜类有效组分。

取原料药石菖蒲饮片500g，50％乙醇5L回流提取2次，每次提取2小时，减压回收溶剂，得提取物；提取物加6倍水分散(以折生药材量计，其中苯丙素浓度为5.478mg/ml，酚酸类浓度为7.229mg/ml)，以5000r转/分钟的转速速离心40min，沉淀即为苯丙素类有效组分。上清液上样于树脂类型AB-8大孔吸附树脂；树脂径高比为1∶10；上样量与树脂体积比为1∶10，吸附流速为2BV/h；水洗1.7倍柱体积除杂，除杂流速为4BV/h。50％醇5倍柱体积4BV/h洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，干燥，即得酚酸类有效组分。按得率混合各有效部位，使加入常规辅料，按照常规工艺制成胶囊剂；

总萜的含量测定方法：

对照品：细叶远志皂苷；

试剂：0.5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸，冰醋酸；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于西林瓶中，蒸干后放冷，空白随行，依次加入0.2ml5％香草醛-冰醋酸溶液及0.8ml高氯酸后，于60℃恒温水浴中保温15min，取出放冷，加5ml冰醋酸后，摇匀，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于580±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总萜含量为32.23％；

远志制备物中总酚含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液2ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置40min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

石菖蒲制备物中总酚含量测定方法：

对照品：咖啡酸；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液1ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置20min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

总苯丙素的含量测定方法：

对照品：α-细辛醚；

试剂：氯仿，甲醇；

测定方法：精密取样品适量于100ml容量瓶中，氯仿适量溶解，超声处理5min，氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。取续滤液适量至25ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，以备测定；

测定方法：将上述样品于260±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总苯丙素含量为26.20％。

酚酸类、萜类和苯丙素类指标性成分的含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、原儿茶酸、α-细辛醚；

色谱柱：Thermo分析柱GOLD-C18(250mm，4.6mm，5μm)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：200-500nm；流动相：乙腈(A)-0.05％乙酸(B)；

梯度条件

经测定3，6’-二芥子酰基蔗糖含量不低于6.2％，细叶远志皂苷含量不低于20％，原儿茶酸含量不低于0.15％，β-细辛醚含量不低于3.2％。

实施例2：片剂

远志  500g    石菖蒲  500g

按上述比例取原料药远志饮片500g，70％乙醇4L回流提取3次，每次提取1.5小时，减压回收溶剂，得提取物；加水分散溶解，使水溶液浓度为0.1g/mL(以折生药材量计，其中萜浓度为6.453mg/ml，总酚类浓度为5.953mg/ml)，通过DM130大孔吸附树脂，树脂径高比1∶6；上样量与树脂体积比1∶8，吸附流速为3BV/h，水洗2倍柱体积除杂，除杂流速为3BV/h。30％醇5倍柱体积3BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得酚类有效组分；90％醇5倍柱体积6BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得萜类有效组分。

取原料药石菖蒲饮片500g，50％乙醇5L回流提取2次，每次提取2小时，减压回收溶剂，得提取物；提取物加6倍水分散(以折生药材量计，其中苯丙素浓度为5.478mg/ml，酚酸类浓度为7.229mg/ml)，以5000r转/分钟的转速速离心40min，沉淀即为苯丙素类有效组分。上清液上样于树脂类型AB-8大孔吸附树脂；树脂径高比为1∶10；上样量与树脂体积比为1∶10，吸附流速为2BV/h；水洗1.7倍柱体积除杂，除杂流速为4BV/h。50％醇5倍柱体积4BV/h洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，干燥，即得酚酸类有效组分。按得率混合各有效部位，使加入常规辅料，按照常规工艺制成片剂；

总萜的含量测定方法：

对照品：细叶远志皂苷；

试剂：0.5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸，冰醋酸；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于西林瓶中，蒸干后放冷，空白随行，依次加入0.2ml5％香草醛-冰醋酸溶液及0.8ml高氯酸后，于60℃恒温水浴中保温15min，取出放冷，加5ml冰醋酸后，摇匀，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于580±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总萜含量为32.23％；

远志制备物中总酚含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液2ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置40min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

石菖蒲制备物中总酚含量测定方法：

对照品：咖啡酸；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液1ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置20min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

总苯丙素的含量测定方法：

对照品：α-细辛醚；

试剂：氯仿，甲醇；

测定方法：精密取样品适量于100ml容量瓶中，氯仿适量溶解，超声处理5min，氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。取续滤液适量至25ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，以备测定；

测定方法：将上述样品于260±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总苯丙素含量为26.20％。

酚酸类、萜类和苯丙素类指标性成分的含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、原儿茶酸、α-细辛醚；

色谱柱：Thermo分析柱GOLD-C18(250mm，4.6mm，5μm)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：200-500nm；流动相：乙腈(A)-0.05％乙酸(B)；

梯度条件

经测定3，6’-二芥子酰基蔗糖含量不低于6.2％，细叶远志皂苷含量不低于20％，原儿茶酸含量不低于0.15％，β-细辛醚含量不低于3.2％。

实施例3：丸剂

远志  500g    石菖蒲  500g

按上述比例取原料药远志饮片500g，55％乙醇4L回流提取3次，每次提取1.5小时，减压回收溶剂，得提取物；加水分散溶解，使水溶液浓度为0.1g/mL(以折生药材量计，其中萜浓度为6.453mg/ml，总酚类浓度为5.953mg/ml)，通过DM130大孔吸附树脂，树脂径高比1∶6；上样量与树脂体积比1∶8，吸附流速为3BV/h，水洗2倍柱体积除杂，除杂流速为3BV/h。30％醇5倍柱体积3BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得酚类有效组分；90％醇5倍柱体积6BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得萜类有效组分。

取原料药石菖蒲饮片500g，50％乙醇5L回流提取2次，每次提取2小时，减压回收溶剂，得提取物；提取物加6倍水分散(以折生药材量计，其中苯丙素浓度为5.478mg/ml，酚酸类浓度为7.229mg/ml)，以5000r转/分钟的转速速离心40min，沉淀即为苯丙素类有效组分。上清液上样于树脂类型AB-8大孔吸附树脂；树脂径高比为1∶10；上样量与树脂体积比为1∶10，吸附流速为2BV/h；水洗1.7倍柱体积除杂，除杂流速为4BV/h。50％醇5倍柱体积4BV/h洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，干燥，即得酚酸类有效组分。按得率混合各有效部位，使加入常规辅料，按照常规工艺制成丸剂；

总萜的含量测定方法：

对照品：细叶远志皂苷；

试剂：0.5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸，冰醋酸；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于西林瓶中，蒸干后放冷，空白随行，依次加入0.2ml5％香草醛-冰醋酸溶液及0.8ml高氯酸后，于60℃恒温水浴中保温15min，取出放冷，加5ml冰醋酸后，摇匀，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于580±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总萜含量为32.23％；

远志制备物中总酚含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液2ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置40min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

石菖蒲制备物中总酚含量测定方法：

对照品：咖啡酸；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液1ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置20min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

总苯丙素的含量测定方法：

对照品：α-细辛醚；

试剂：氯仿，甲醇；

测定方法：精密取样品适量于100ml容量瓶中，氯仿适量溶解，超声处理5min，氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。取续滤液适量至25ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，以备测定；

测定方法：将上述样品于260±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总苯丙素含量为26.20％。

酚酸类、萜类和苯丙素类指标性成分的含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、原儿茶酸、α-细辛醚；

色谱柱：Thermo分析柱GOLD-C18(250mm，4.6mm，5μm)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：200-500nm；流动相：乙腈(A)-0.05％乙酸(B)；

梯度条件

经测定3，6’-二芥子酰基蔗糖含量不低于6.2％，细叶远志皂苷含量不低于20％，原儿茶酸含量不低于0.15％，β-细辛醚含量不低于3.2％。

实施例4：口服液体制剂

远志  500g    石菖蒲  500g

减压回收溶剂，得提取物；加水分散溶解，使水溶液浓度为0.1g/mL(以折生药材量计，其中萜浓度为6.453mg/ml，总酚类浓度为5.953mg/ml)，通过DM130大孔吸附树脂，树脂径高比1∶6；上样量与树脂体积比1∶8，吸附流速为3BV/h，水洗2倍柱体积除杂，除杂流速为3BV/h。30％醇5倍柱体积3BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得酚类有效组分；90％醇5倍柱体积6BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得萜类有效组分。

取原料药石菖蒲饮片500g，50％乙醇5L回流提取2次，每次提取2小时，减压回收溶剂，得提取物；提取物加6倍水分散(以折生药材量计，其中苯丙素浓度为5.478mg/ml，酚酸类浓度为7.229mg/ml)，以5000r转/分钟的转速速离心40min，沉淀即为苯丙素类有效组分。上清液上样于树脂类型AB-8大孔吸附树脂；树脂径高比为1∶10；上样量与树脂体积比为1∶10，吸附流速为2BV/h；水洗1.7倍柱体积除杂，除杂流速为4BV/h。50％醇5倍柱体积4BV/h洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，干燥，即得酚酸类有效组分。按得率混合各有效部位，使加入常规辅料，按照常规工艺制成口服液体制剂；

总萜的含量测定方法：

对照品：细叶远志皂苷；

试剂：0.5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸，冰醋酸；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于西林瓶中，蒸干后放冷，空白随行，依次加入0.2ml5％香草醛-冰醋酸溶液及0.8ml高氯酸后，于60℃恒温水浴中保温15min，取出放冷，加5ml冰醋酸后，摇匀，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于580±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总萜含量为32.23％；

远志制备物中总酚含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液2ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置40min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

石菖蒲制备物中总酚含量测定方法：

对照品：咖啡酸；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液1ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置20min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

总苯丙素的含量测定方法：

对照品：α-细辛醚；

试剂：氯仿，甲醇；

测定方法：精密取样品适量于100ml容量瓶中，氯仿适量溶解，超声处理5min，氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。取续滤液适量至25ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，以备测定；

测定方法：将上述样品于260±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总苯丙素含量为26.20％。

酚酸类、萜类和苯丙素类指标性成分的含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、原儿茶酸、α-细辛醚；

色谱柱：Thermo分析柱GOLD-C18(250mm，4.6mm，5μm)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：200-500nm；流动相：乙腈(A)-0.05％乙酸(B)；

梯度条件

经测定3，6’-二芥子酰基蔗糖含量不低于6.2％，细叶远志皂苷含量不低于20％，原儿茶酸含量不低于0.15％，β-细辛醚含量不低于3.2％。

实施例5：注射剂

远志  500g    石菖蒲  500g

减压回收溶剂，得提取物；加水分散溶解，使水溶液浓度为0.1g/mL(以折生药材量计，其中萜浓度为6.453mg/ml，总酚类浓度为5.953mg/ml)，通过DM130大孔吸附树脂，树脂径高比1∶6；上样量与树脂体积比1∶8，吸附流速为3BV/h，水洗2倍柱体积除杂，除杂流速为3BV/h。30％醇5倍柱体积3BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得酚类有效组分；90％醇5倍柱体积6BV/h洗脱，回收溶剂，减压干燥，得萜类有效组分。

取原料药石菖蒲饮片500g，50％乙醇5L回流提取2次，每次提取2小时，减压回收溶剂，得提取物；提取物加6倍水分散(以折生药材量计，其中苯丙素浓度为5.478mg/ml，酚酸类浓度为7.229mg/ml)，以5000r转/分钟的转速速离心40min，沉淀即为苯丙素类有效组分。上清液上样于树脂类型AB-8大孔吸附树脂；树脂径高比为1∶10；上样量与树脂体积比为1∶10，吸附流速为2BV/h；水洗1.7倍柱体积除杂，除杂流速为4BV/h。50％醇5倍柱体积4BV/h洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，干燥，即得酚酸类有效组分。按得率混合各有效部位，使加入常规辅料，按照常规工艺制成注射剂；

总萜的含量测定方法：

对照品：细叶远志皂苷；

试剂：0.5％香草醛-冰醋酸溶液，高氯酸，冰醋酸；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于西林瓶中，蒸干后放冷，空白随行，依次加入0.2ml5％香草醛-冰醋酸溶液及0.8ml高氯酸后，于60℃恒温水浴中保温15min，取出放冷，加5ml冰醋酸后，摇匀，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于580±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总萜含量为32.23％；

远志制备物中总酚含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液2ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置40min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

石菖蒲制备物中总酚含量测定方法：

对照品：咖啡酸；

试剂：0.6％三氯化铁溶液，0.9％铁氰化钾溶液，0.3％十二烷基硫酸钠溶液，70％甲醇溶液，0.1mol/L盐酸溶液；

显色方法：精密吸取样品溶液适量于25ml棕色容量瓶中，加70％甲醇至5ml，再加入0.3％十二烷基硫酸钠溶液2ml，以及1∶1的0.6％三氯化铁-0.9％铁氰化钾混合溶液1ml，暗处放置5min，用0.1mol/L盐酸加至25ml刻度线，摇匀，暗处放置20min，以备测定；

测定方法：将上述显色后样品于760±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总酚酸含量为55.28％。

总苯丙素的含量测定方法：

对照品：α-细辛醚；

试剂：氯仿，甲醇；

测定方法：精密取样品适量于100ml容量瓶中，氯仿适量溶解，超声处理5min，氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。取续滤液适量至25ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，以备测定；

测定方法：将上述样品于260±2nm波长范围内测定，记录其最大吸光度值，经测定总苯丙素含量为26.20％。

酚酸类、萜类和苯丙素类指标性成分的含量测定方法：

对照品：3，6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、原儿茶酸、α-细辛醚；

色谱柱：Thermo分析柱GOLD-C18(250mm，4.6mm，5μm)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：200-500nm；流动相：乙腈(A)-0.05％乙酸(B)；

梯度条件

经测定3，6’-二芥子酰基蔗糖含量不低于6.2％，细叶远志皂苷含量不低于20％，原儿茶酸含量不低于0.15％，β-细辛醚含量不低于3.2％。

实施例6：胶囊剂的制备

取本发明中药药物物质组合200g，粉碎，过80目筛，与微晶纤维素100g混合均匀，以95％乙醇制粒，干燥，以20目筛整粒，灌装胶囊。

实施例7：片剂的制备

取本发明中药药物物质组合50g，粉碎，过80目筛，与微晶纤维素70g、羧甲基淀粉钠5g混合均匀，以5％PVP制粒，干燥，以20目筛整粒，加入硬脂酸镁2g，压片。

实施例8：滴丸剂的制备

取本发明中药药物物质组合60g，粉碎，过80目筛，混合均匀，投入180g加热熔融的聚乙二醇6000中，搅拌至溶解，转移至贮液瓶中，密闭并保温在80～90℃，调节滴丸机液滴定量阀门，由上往下滴入10～15℃的液体石蜡中，将形成的滴丸沥干并擦除液体石蜡，干燥。

实施例9：口服液的制备

取本发明中药药物物质组合70g，粉碎，过80目筛，混合均匀，与蜂蜜1000g、蔗糖200g、苯甲酸钠10g及蒸馏水2000ml混合，加热至85～90℃，搅拌使溶解，保温30min，滤过，滤液加水稀释至4000ml，搅拌均匀，灌封，灭菌。

实施例10：注射液的制备

取本发明中药药物物质组合100g，加注射用水适量使溶解，加配置量的0.02％的活性炭搅拌5～10min，滤过，滤液稀释至10L左右，加氯化钠调节渗透压至等渗，调节pH7.5～8.0，超滤，灌封，100℃灭菌30min。

实施例11：粉针剂的制备

取本发明中药药物物质组合100g，加注射用水及稀氢氧化钠适量使溶解，加配置量的0.02％的活性炭搅拌5～10min，滤过，滤液稀释至1L，调节pH6.5～7.8，超滤，喷雾干燥，干粉无菌分装。每支100mg，临用前加注射用水适量使溶解，用氯化钠输液250～500ml稀释后缓慢静脉滴注。

Claims (12)

1.一种具有抗抑郁作用的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要由如下方法制成： 

步骤1：选取如下原料药： 

远志  10～500重量份    石菖蒲  10～500重量份 

步骤2：乙醇提取； 

步骤3：弱极性或非极性大孔吸附树脂纯化； 

该药物物质原料药远志提取物中总萜含量为5～80％，总酚酸含量为5～80％，其中3，6’-二芥子酰基蔗糖含量0.1～50％；石菖蒲提取物中总苯丙素含量为3～80％，其中β-细辛醚含量0.1～50％；总酚酸含量为1～70％，其中儿茶酸含量0.001～30％。 

2.如权利要求1所述的中药提取物，其特征在于步骤1中原料药的组成为： 

远志  500g    石菖蒲  500g 。

3.如权利要求1或2所述的中药提取物，其特征在于步骤2中，将原料药远志用40～80％乙醇回流提取2～4次，每次提取0.5～2小时；优选用60％乙醇回流提取3次，每次1.5小时；将原料药石菖蒲用40～80％乙醇回流提取2～4次，每次提取0.5～3小时。 

4.如权利要求1或2所述的中药提取物，其特征在于步骤3中，将步骤2所得所得远志提取物加水分散溶解，使水溶液浓度为0.02～0.1g/mL，通过弱极性或非极性大孔吸附树脂，吸附流速为1～5BV/h，树脂柱径高比为1∶4～1∶10，上样液浓度为0.02～0.1g/mL，水洗脱1～5倍树脂体积进行除杂，水除杂流速为1～5BV/h，10～60％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得总酚酸类含寡糖酯类，酮类有效组分；60～95％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得总萜类有效组分。 

5.如权利要求1或2所述的中药提取物，其特征在于将步骤2所得石菖蒲提取物加40～60％乙醇回流提取1～5次，每次0.5～2.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至无醇味，提取物加5-10倍水分散溶解，以2000～6000转/分钟的转速离心30～50min，沉淀即为苯丙素类有效组分，上清液通过弱极性或极性大孔吸附树脂，吸附流速为1～5BV/h，树脂柱径高比为1∶4～10，上样液浓度为0.02～0.1g/mL，水洗脱1～5倍树脂体积进行除杂，水除杂流速为1～5BV/h，10～95％乙醇洗脱3～10倍树脂体积，洗脱流速为1～5BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得酚酸类有效组分。 

6.如权利1～5所述中药药物物质组合其特征在于可由如下2组药用植物及其代用品种，包括其药用部位及非药用部位，药材及其饮片组合制成. 

组1远志、台湾远志、荷包山桂花、小花远志、坝王远志、尾叶远志、华南远志、香港远志等及其炮制品生远志、制远志、蜜远志等远志同属植物及其炮制品。 

组2菖蒲、石菖蒲、长苞菖蒲、金钱蒲等石菖蒲同属植物及其炮制品及其炮制品。 

7.如权利1～5所述中药药物物质组合其特征在于可经上述原料药组合后以乙醇、或其他醇类、稀醇、或其他有机溶剂或水提取再通过大孔吸附树脂或其他色谱方法，如聚酰胺色谱法等，或溶剂萃取法等纯化得到。 

8.如权利1～5所述中药药物物质组合其特征在于可由权利6中所述原料药的提取物经进一步富集纯化后或上述原料药的大孔树脂制备物混合而成。 

9.如权利1～5所述中药药物物质组合其特征在于可经化学合成或结构修饰，生物合成或生物转等途径获得。 

10.如权利要求1～9所述中药药物物质组合，其特征在于可加入本领域公知的各种药用辅料，按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，也可制成长效和缓释制剂、控释制剂、靶向制剂等其他传输系统给药制剂。所制得药剂可作为人药、兽药、植物用药使用或施用。 

11.如权利要求1～9所述中药药物物质组合，其特征在于可加入公知的食品添加剂如防腐剂、抗氧化剂剂、着色剂、增稠剂和稳定剂、膨松剂、甜味剂、酸度剂、增白剂、香料等制成具有预防保健功能的保健食品或饮品。 

12.如权利要求1～9任一所述的中药药物物质组合在制备具有抗菌及增效抗菌、抗炎、解热、镇痛、止咳、化痰药物中的应用。