CN103923131A - 利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法 - Google Patents

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王宜磊
许谦
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本发明涉及啤酒废酵母的再利用工艺，具体地说，涉及一种利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法。包括如下步骤：啤酒废酵母的脱苦与纯化；酵母自溶与酶法破壁；离心；超滤；纳滤；制备海藻糖和食品增鲜剂；本发明提供了一种高效的啤酒废酵母综合利用方法，可提高啤酒废酵母的利用率，达到废弃物最大资源化，对于减少资源浪费和环境污染具有重要意义，同时，本发明所述的啤酒废酵母的综合利用也显示出良好的市场前景和经济效益。

Description

利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法
技术领域
本发明涉及啤酒废酵母的再利用工艺，具体地说，涉及一种利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法。
背景技术
啤酒废酵母是啤酒工业的副产物，在啤酒生产过程中，经主发酵和后发酵的酿造工艺后大量产生。我国现有啤酒企业500多家，年产啤酒4200多万吨，每年产生啤酒废酵母60-90万吨。啤酒废酵母的产生对于整个生态环境具有重要的影响，因此，如能对啤酒废酵母加以综合利用，则可以较大限度地减轻环境污染，保护生态平衡，以便较快地实现绿色啤酒工业发展的目标。
啤酒废酵母中含有丰富的蛋白质、核酸、维生素、矿物质，以及海藻糖、甘露聚糖、葡聚糖等多糖物质。传统的啤酒废酵母处理方式为直接将啤酒废酵母泥经除杂脱苦得干净酵母泥，干制酵母粉；或者，将干净酵母泥加自溶剂自溶，自溶后离心得沉淀用来生产多糖，自溶后经离心处理得到的上清液一般直接放掉，既浪费资源又造成了环境污染。
此外，啤酒废酵母经自溶后产生的酵母抽提物是一种优良的天然调味料，添加到各类食品中能很好的改善产品风味，提高产品品质。目前，生产酵母抽提物的方法主要有：自溶法、酶分解法和酸分解法等。利用自溶法生产的酵母抽提物蛋白质分解率高、游离氨基酸含量高、风味好、成本较低，但呈味核苷酸含量低，而且，其裂解产物往往固液分离比较困难，还易引起其它微生物的污染。在传统工艺中，一般会加入无机盐(如氯化钠或一些非极性的有机溶剂)加速裂解，但在自溶后的上清液中进行酵母粉的提取时，会引入脱盐或去毒等复杂的工序。此外，一些工艺中采用酶解法加速自溶，但由于价格昂贵，只能局限于实验室分析。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，以解决上述的技术问题。
本发明是通过以下技术方案来实现的：
一种利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，其特征在于：包括如下步骤：
1、啤酒废酵母的脱苦与纯化
鲜啤酒废酵母泥加水稀释，经80-100目筛粗滤2次，得酵母悬浮液；向酵母悬浮液中加浓度为5％的酒石酸或浓度为2％的NaHCO3溶液；搅拌脱苦30分钟-90分钟后，按照4500转/分的转速进行离心旋转10分钟，弃掉上清液，沉淀物即为纯化的干净酵母泥；
2、酵母自溶与酶法破壁
2A、壳聚糖处理：按照干净酵母泥:水＝1:5的比例向纯化的干净酵母泥中加纯水，悬浮酵母细胞；在悬液中加入壳聚糖，所述壳聚糖的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.05～2％，且所述壳聚糖预先溶解在醋酸中；
2B、5’-磷酸二酯酶粗酶处理：向悬液中加入5’-磷酸二酯酶粗酶液，调pH值为2.5-7.5，并在30℃-54℃的温度条件下搅拌10-20小时；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.1-0.5％；
3、离心
自动裂解后的酵母悬浮液按照4000转/分的转速进行离心旋转20分钟，静置；将上清液与沉淀物分离，得到的沉淀物为酵母细胞壁；
4、超滤
将步骤3获得的上清液在0.05-0.5Mpa的压力下，过2nm-20nm超滤膜，得到超滤滤过液和超滤浓缩液；所述超滤膜截留分子量大于500的蛋白质、核酸及其降解物，保留大分子物质在超滤浓缩液中；
5、纳滤
步骤4中获得的超滤滤过液再过1nm-2nm纳滤膜，得到纳滤浓缩液和纳滤滤过液；所述纳滤膜将分子量为200-300的物质截留在纳滤浓缩液中；
6、制备海藻糖
将步骤5中获得的纳滤浓缩液在温度为50℃-90℃、浓度为10％-50％的乙醇溶液中抽提10分钟-30分钟，干燥后即制得海藻糖成品；
7、制备食品增鲜剂
将步骤4中获得的超滤浓缩液和步骤5中获得的纳滤滤过液混合后，向混合液中加入发酵物料，在30℃的温度条件下培养12小时；喷雾干燥后，即制得食品增鲜剂；所述发酵物料与混合液的重量比为1:5；所述发酵物料为纯化脱苦酵母与可溶性淀粉按照1:1的比例制备。
有益效果：与现有技术相比，本发明提供了一种高效的啤酒废酵母综合利用方法，可提高啤酒废酵母的利用率，达到废弃物最大资源化，对于减少资源浪费和环境污染具有重要意义，同时，本发明所述的啤酒废酵母的综合利用也显示出良好的市场前景和经济效益。具体地说，本发明具有以下优点：
1、用纳滤滤过液和超滤浓缩液作为生产食品增鲜剂的液体使用，既利用了其中的核苷酸等增味物质又节约了水源，做到了水的循环利用，减轻了对环境的造成的污染；
2、采用5’-磷酸二酯酶粗酶液处理悬液，代替现有技术中价格昂贵的酶解法，不仅大大降低了成本，而且效果较好；
3、制备的食品增鲜剂可用于食品加工，既能提高鲜味(代替味精)，也可进一步作为生产特鲜酱油的增鲜添加剂；
4、制备的海藻糖是优质的食品添加剂，具有较好的保健作用；作为一种应急代谢物，海藻糖能赋予动物、植物和微生物等抵抗营养缺乏、高温、低温、干燥、高渗透压和有毒物质等恶劣环境的能力，尤其海藻糖具有优良的在逆性环境(冻结、干燥和高渗透压)下保护生物体细胞膜和蛋白质等活性大分子的功能，在生物制品、化妆品、食品中有广泛的用途。
具体实施方式
以下参考具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1：
本实施例所述利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，包括如下步骤：
1、啤酒废酵母的脱苦与纯化
鲜啤酒废酵母泥加水稀释，经80-100目筛粗滤2次，得酵母悬浮液；向酵母悬浮液中加浓度为5％的酒石酸或浓度为2％的NaHCO3溶液；搅拌脱苦30分钟后，按照4500转/分的转速进行离心旋转10分钟，弃掉上清液，沉淀物即为纯化的干净酵母泥；
2、酵母自溶与酶法破壁
2A、壳聚糖处理：按照干净酵母泥:水＝1:5的比例向纯化的干净酵母泥中加纯水，悬浮酵母细胞；在悬液中加入壳聚糖，所述壳聚糖的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.05～2％，且所述壳聚糖预先溶解在醋酸中；
2B、5’-磷酸二酯酶粗酶处理：向悬液中加入5’-磷酸二酯酶粗酶液，调pH值为2.5-7.5，并在30℃-54℃的温度条件下搅拌10-20小时；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.1-0.5％；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液制备方法是：称取一定量的新鲜麦芽根，加少许石英砂、少量水研磨数分钟，按原料与水按1:9加水，在5℃下浸提24小时，过滤得5’-磷酸二酯酶粗酶液；
3、离心
自动裂解后的酵母悬浮液按照4000转/分的转速进行离心旋转20分钟，静置；将上清液与沉淀物分离，得到的沉淀物为酵母细胞壁，酵母细胞壁可用于进一步处理制备其他物质；
4、超滤
将步骤3获得的上清液在0.05-0.5Mpa的压力下，过2nm-20nm超滤膜，得到超滤滤过液和超滤浓缩液；所述超滤膜截留分子量大于500的蛋白质、核酸及其降解物，保留大分子物质在超滤浓缩液中；
5、纳滤
步骤4中获得的超滤滤过液再过1nm-2nm纳滤膜，得到纳滤浓缩液和纳滤滤过液；所述纳滤膜将分子量为200-300的物质截留在纳滤浓缩液中；
6、制备海藻糖
将步骤5中获得的纳滤浓缩液在温度为50℃、浓度为10％的乙醇溶液中抽提30分钟，干燥后即制得海藻糖成品；
7、制备食品增鲜剂
将步骤4中获得的超滤浓缩液和步骤5中获得的纳滤滤过液混合后，向混合液中加入发酵物料，在30℃的温度条件下培养12小时；喷雾干燥后，即制得食品增鲜剂；所述发酵物料与混合液的重量比为1:5；所述发酵物料为纯化脱苦酵母与可溶性淀粉按照1:1的比例制备。
实施例2：
本实施例所述利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，包括如下步骤：
1、啤酒废酵母的脱苦与纯化
鲜啤酒废酵母泥加水稀释，经80-100目筛粗滤2次，得酵母悬浮液；向酵母悬浮液中加浓度为5％的酒石酸或浓度为2％的NaHCO3溶液；搅拌脱苦60分钟后，按照4500转/分的转速进行离心旋转10分钟，弃掉上清液，沉淀物即为纯化的干净酵母泥；
2、酵母自溶与酶法破壁
2A、壳聚糖处理：按照干净酵母泥:水＝1:5的比例向纯化的干净酵母泥中加纯水，悬浮酵母细胞；在悬液中加入壳聚糖，所述壳聚糖的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.05～2％，且所述壳聚糖预先溶解在醋酸中；
2B、5’-磷酸二酯酶粗酶处理：向悬液中加入5’-磷酸二酯酶粗酶液，调pH值为2.5-7.5，并在30℃-54℃的温度条件下搅拌10-20小时；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.1-0.5％；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液制备方法是：称取一定量的新鲜麦芽根，加少许石英砂、少量水研磨数分钟，按原料与水按1:9加水，在5℃下浸提24小时，过滤得5’-磷酸二酯酶粗酶液；
3、离心
自动裂解后的酵母悬浮液按照4000转/分的转速进行离心旋转20分钟，静置；将上清液与沉淀物分离，得到的沉淀物为酵母细胞壁，酵母细胞壁可用于进一步处理制备其他物质；
4、超滤
将步骤3获得的上清液在0.05-0.5Mpa的压力下，过2nm-20nm超滤膜，得到超滤滤过液和超滤浓缩液；所述超滤膜截留分子量大于500的蛋白质、核酸及其降解物，保留大分子物质在超滤浓缩液中；
5、纳滤
步骤4中获得的超滤滤过液再过1nm-2nm纳滤膜，得到纳滤浓缩液和纳滤滤过液；所述纳滤膜将分子量为200-300的物质截留在纳滤浓缩液中；
6、制备海藻糖
将步骤5中获得的纳滤浓缩液在温度为70℃、浓度为30％的乙醇溶液中抽提20分钟，干燥后即制得海藻糖成品；
7、制备食品增鲜剂
将步骤4中获得的超滤浓缩液和步骤5中获得的纳滤滤过液混合后，向混合液中加入发酵物料，在30℃的温度条件下培养12小时；喷雾干燥后，即制得食品增鲜剂；所述发酵物料与混合液的重量比为1:5；所述发酵物料为纯化脱苦酵母与可溶性淀粉按照1:1的比例制备。
实施例3：
本实施例所述利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，包括如下步骤：
1、啤酒废酵母的脱苦与纯化
鲜啤酒废酵母泥加水稀释，经80-100目筛粗滤2次，得酵母悬浮液；向酵母悬浮液中加浓度为5％的酒石酸或浓度为2％的NaHCO3溶液；搅拌脱苦90分钟后，按照4500转/分的转速进行离心旋转10分钟，弃掉上清液，沉淀物即为纯化的干净酵母泥；
2、酵母自溶与酶法破壁
2A、壳聚糖处理：按照干净酵母泥:水＝1:5的比例向纯化的干净酵母泥中加纯水，悬浮酵母细胞；在悬液中加入壳聚糖，所述壳聚糖的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.05～2％，且所述壳聚糖预先溶解在醋酸中；
2B、5’-磷酸二酯酶粗酶处理：向悬液中加入5’-磷酸二酯酶粗酶液，调pH值为2.5-7.5，并在30℃-54℃的温度条件下搅拌10-20小时；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.1-0.5％；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液制备方法是：称取一定量的新鲜麦芽根，加少许石英砂、少量水研磨数分钟，按原料与水按1:9加水，在5℃下浸提24小时，过滤得5’-磷酸二酯酶粗酶液；
3、离心
自动裂解后的酵母悬浮液按照4000转/分的转速进行离心旋转20分钟，静置；将上清液与沉淀物分离，得到的沉淀物为酵母细胞壁，酵母细胞壁可用于进一步处理制备其他物质；
4、超滤
将步骤3获得的上清液在0.05-0.5Mpa的压力下，过2nm-20nm超滤膜，得到超滤滤过液和超滤浓缩液；所述超滤膜截留分子量大于500的蛋白质、核酸及其降解物，保留大分子物质在超滤浓缩液中；
5、纳滤
步骤4中获得的超滤滤过液再过1nm-2nm纳滤膜，得到纳滤浓缩液和纳滤滤过液；所述纳滤膜将分子量为200-300的物质截留在纳滤浓缩液中；
6、制备海藻糖
将步骤5中获得的纳滤浓缩液在温度为90℃、浓度为50％的乙醇溶液中抽提10分钟，干燥后即制得海藻糖成品；
7、制备食品增鲜剂
将步骤4中获得的超滤浓缩液和步骤5中获得的纳滤滤过液混合后，向混合液中加入发酵物料，在30℃的温度条件下培养12小时；喷雾干燥后，即制得食品增鲜剂；所述发酵物料与混合液的重量比为1:5；所述发酵物料为纯化脱苦酵母与可溶性淀粉按照1:1的比例制备。

Claims (1)

1.一种利用啤酒废酵母制备海藻糖和食品增鲜剂的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)啤酒废酵母的脱苦与纯化
鲜啤酒废酵母泥加水稀释，经80-100目筛粗滤2次，得酵母悬浮液；向酵母悬浮液中加浓度为5％的酒石酸或浓度为2％的NaHCO3溶液；搅拌脱苦30分钟-90分钟后，按照4500转/分的转速进行离心旋转10分钟，弃掉上清液，沉淀物即为纯化的干净酵母泥；
(2)酵母自溶与酶法破壁
(2A)壳聚糖处理：按照干净酵母泥:水＝1:5的比例向纯化的干净酵母泥中加纯水，悬浮酵母细胞；在悬液中加入壳聚糖，所述壳聚糖的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.05～2％，且所述壳聚糖预先溶解在醋酸中；
(2B)5’-磷酸二酯酶粗酶处理：向悬液中加入5’-磷酸二酯酶粗酶液，调pH值为2.5-7.5，并在30℃-54℃的温度条件下搅拌10-20小时；所述5’-磷酸二酯酶粗酶液的用量为鲜啤酒废酵母泥的0.1-0.5％；
(3)离心
自动裂解后的酵母悬浮液按照4000转/分的转速进行离心旋转20分钟，静置；将上清液与沉淀物分离，得到的沉淀物为酵母细胞壁；
(4)超滤
将步骤(3)获得的上清液在0.05-0.5Mpa的压力下，过2nm-20nm超滤膜，得到超滤滤过液和超滤浓缩液；所述超滤膜截留分子量大于500的蛋白质、核酸及其降解物，保留大分子物质在超滤浓缩液中；
(5)纳滤
步骤(4)中获得的超滤滤过液再过1nm-2nm纳滤膜，得到纳滤浓缩液和纳滤滤过液；所述纳滤膜将分子量为200-300的物质截留在纳滤浓缩液中；
(6)制备海藻糖
将步骤(5)中获得的纳滤浓缩液在温度为50℃-90℃、浓度为10％-50％的乙醇溶液中抽提10分钟-30分钟，干燥后即制得海藻糖成品；
(7)制备食品增鲜剂
将步骤(4)中获得的超滤浓缩液和步骤(5)中获得的纳滤滤过液混合后，向混合液中加入发酵物料，在30℃的温度条件下培养12小时；喷雾干燥后，即制得食品增鲜剂；所述发酵物料与混合液的重量比为1:5；所述发酵物料为纯化脱苦酵母与可溶性淀粉按照1:1的比例制备。
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