CN103918654A - 氢溴酸槟榔碱抗雌鼠生育的方法 - Google Patents

Abstract

以氢溴酸槟榔碱为活性成分的抗雌鼠生育灭鼠剂，属于生物防治技术领域。作为一种生物自然灾害，长久以来鼠害问题对人类社会的发展造成了严重的危害，给农业、林业及畜牧业造成巨大的经济损失的同时，也严重危害着人类的健康。长久以来，人们采用各种方法进行害鼠的种群控制，包括传统的物理器械法、生态防治法及化学毒饵法。抗生育技术是近些年发展起来的一项新的害鼠控制技术，该技术相较于传统的鼠害控制方法，具有作用时间长、控制效果明显、环境毒副作用小等优点，因此在害鼠种群数量控制方面有着巨大的应用潜力。本发明涉及一种以氢溴酸槟榔碱为活性成分的雌性不育灭鼠剂用于控制鼠类的繁殖。本发明若能应用于农林牧业生产，将能有效控制害鼠种群数量，具有广阔的经济效益。

Description

氢溴酸槟榔碱抗雌鼠生育的方法

技术领域

本发明涉及用于鼠害控制的抗生育灭鼠剂，具体涉及一种以氢溴酸槟榔碱为活性成分的雌性不育剂用于控制鼠类繁殖。

背景技术

作为一种自然生物灾害，长久以来鼠害问题对人类社会的发展造成了严重的危害，给人类造成巨大的经济损失的同时，也严重危害着人类的健康。老鼠属于啮齿类动物，种类繁多、数量巨大、适应性强、分布广阔。据估计，全球目前共有鼠类2800余种，数量达到了数百亿只；数据显示，我国共有啮齿类动物13科187种，常见的害鼠种类则约有40多种，主要种类为褐家鼠、黄毛鼠、小家鼠、中华鼢鼠、草原鼢鼠、大仓鼠、黑线姬鼠、藏仓鼠、印度地鼠等。

害鼠主要以种子、果实、草类及根茎类为食，给农业、林业及畜牧业造成了严重的危害，也造成了巨大的经济损失。同时，害鼠还威胁着人类的健康，据统计，在我国与鼠类有关的人的疾病，就涉及到79种鼠。

槟榔为棕榈科植物槟榔的干燥成熟种子，约含0.3% -0.6%的生物碱。槟榔是全世界继烟草，酒精，咖啡后第四种能让人成瘾的物质，广泛地被东南亚人民咀嚼包括中国的湖南省和海南省。咀嚼槟榔不但能产生一种舒服感和温暖感，还有加强人的记忆，减少孕妇怀孕时呕吐，抗抑郁，抗艾滋病和抗炎症等作用。此外，槟榔还证明能改善脑内血流量，抗动脉硬化，防止心血管疾病，改善肩周炎，腰痛病和老年性痴呆症，促进胃肠消化吸收，抑制幽门螺旋杆菌等保健效果。但是另一方面，许多流行病学研究发现，咀嚼槟榔是导致口腔癌、咽喉癌的主要原因，同时咀嚼槟榔还会产生基因毒性、肝毒性和生殖毒性，引起基因突变和致畸等毒副作用。医学专家以为咀嚼槟榔是导致东南亚人们口腔癌常发的主要原因，因为常嚼食槟榔会造成口腔黏膜下纤维化。据报道，全球每年发生 39 万例口腔癌症，其中发生在南亚和东南亚地区的就有22. 8万例，占58%。而调查发现在这些口腔癌高发的地区居民大都有咀嚼槟榔或槟榔子的习俗。冯云枝等研究发现槟榔提取物能通过上调细胞间粘附分子，刺激成纤维细胞增殖而导致口腔黏膜下纤维化。同时发现槟榔提取物能够促进体外培养的人类口腔粘膜上皮角朊细胞分泌内皮素水平上调而诱导口腔黏膜下纤维化。Sinha等研究发现，在怀孕小鼠妊娠的6-15天给予槟榔水提物，会导致胚胎骨骼发育不成熟，吸收胎和死胎增多。Yang 等研究发现，如果妇女在怀孕期间常咀嚼槟榔会引起出生孩体重减少，男女婴比例鉴定，严重时会导致流产和畸形等不良后果。胡怡秀等，研究发现用槟榔提取液处理雄性小鼠后，会引起小鼠精子数量，活力明显减少，精子畸形率提高并降低雌鼠的受孕率。同时研究发现槟榔提取液对雄性精子指标的影响呈现出明显的剂量依赖性。Wu等用100mg/kg 的槟榔提取物分别连续处理雄性大鼠，15天，30天和50天后，发现槟榔提取物表现出明显的生殖毒性作用。槟榔提取物能导致精子数量减少30-57%，精子运动能力降低27-61%，畸形精子数显著增加。机理研究表明槟榔提取物主要是通过产生活性氧，提高机体丙二醛和降低唾液酸方式，引起睾丸组织氧分压升高而产生生殖毒性。

槟榔碱是槟榔提取物中的主要成分之一，被认为是引起槟榔毒副作用的主要原因。目前，槟榔碱除从槟郎中提取外，也可人工合成，氢溴酸槟榔碱为人工合成的槟榔碱的氢溴酸盐。赵成莹等研究表明小鼠过量摄取槟榔碱会导致肠胃肺脏等组织出血，肝脏和脾脏组织变色体积增大，最终因呼吸麻痹死亡，同时发现氢溴酸槟榔碱对小白鼠的急性LD₅₀为174.71 mg/kg。Moutasim等研究发现槟榔碱能通过毒蕈碱型乙酰胆碱受体来调节αVβ6 整合素的表达而促使口腔黏膜下纤维化引起口腔癌。Anupam等在研究槟榔碱遗传毒性时发现，通过口腔给药的方式处理小鼠会引起小鼠癌变几率升高，使细胞停滞在M1期，提高姐妹染色单体交换频率升高，并发现槟榔碱对细胞周期变化和染色体畸变的影响呈现出时间依赖关系。Dasgupta等研究发现槟榔碱处理小鼠后会抑制小鼠脾淋巴细胞的细胞循环而导致细胞凋亡，同时研究发现槟榔碱能通过上调血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶和抑制肝组织中过过氧化物歧化酶，过氧化氢酶，谷胱甘肽s转移酶等抗氧化剂，产生肝毒性作用。Chang等通过不同浓度槟榔碱体外对转基因斑马鱼的胚胎影响发现，槟榔碱能显著降低胚胎的存活率，并延缓胚胎发育。机理研究发现槟榔碱处理能明显改变胚胎p53，p21和cyclin D1等蛋白的表达量和空间构象，同时增加细胞内硫醇的损耗。Liu等也同样发现槟榔碱能在体外抑制小鼠胚胎滋养层的自然增长，雌性小鼠在怀孕后的第5，6，7连续灌服不同剂量的槟榔碱时，会明显减少怀孕鼠子宫中的胚胎着床数量，并表现出剂量的依赖性，但对其抗生育机制不清楚。Huang等研究发现槟榔碱具有肿瘤抑制作用，能通过降低肿瘤细胞白细胞介素-6和增加肿瘤抑制因子p53的水平来阻止基底细胞癌发生作用。除此之外，槟榔碱被报道具有DNA损伤和神经毒性等作用。

本发明全部使用人工合成的氢溴酸槟榔碱进行实验研究，通过给怀孕小鼠腹腔注射不同剂量的氢溴酸槟榔碱，发现氢溴酸槟榔碱处理能减少怀孕小鼠子宫中着床胚胎的数量，并呈现出剂量依赖性，为氢溴酸槟榔碱开发成新型植物源抗生育剂而奠定理论基础。进一步通过灌胃给药的实例操作，建立起氢溴酸槟榔碱抗雌鼠生育的抗生育方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种雌性不育灭鼠剂氢溴酸槟榔碱，通过阻断鼠类繁殖途径达到灭杀和控制鼠类的雌性不育灭鼠剂。

本发明通过如下技术方案实现。

本发明提供一种雌性不育灭鼠剂，其特征是采用不育剂氢溴酸槟榔碱作为活性成分用于对鼠类的杀灭。

1、 实验方法

1.1 动物实验和组织准备

小鼠试养一周后，每两只雌性小鼠与一只雄性小鼠合笼后过夜，第二天早上检查是否有阴道栓，有阴栓者即定为怀孕后的第一天（D1）。按照以下步骤进行动物实验，首先是将怀孕后的小鼠分为四个小组，分别为对照组，5 mg/kg/day氢溴酸槟榔碱处理组，10mg/kg/day氢溴酸槟榔碱处理组，和20mg/kg/day氢溴酸槟榔碱处理组，每组各12只。从怀孕的第一天到脱颈处死的这一天，药物处理组分别通过腹腔注射的方式给予5, 10和20 mg/kg体重剂量的氢溴酸槟榔碱，氢溴酸槟榔碱溶于生理盐水中。每天的剂量同样分成两半，分别于早上9点和下午6点以腹腔注射的方法给药。对照组按同样的方式腹腔注射等体积的生理盐水。到了第5天早上，所有的实验动物，脱颈处死后，将子宫解剖出来，并统计各子宫中的胚胎着床数和称量子宫重量。其次是将18只20 mg/kg/day 氢溴酸槟榔碱处理的怀孕小鼠和18只对照怀孕小鼠分别于怀孕后的第4, 5, 6天处死。解剖的子宫，一半固定在4%的多聚甲醛中用来做H&E染色观察和免疫组化分析，一半保存在−80℃中用来做western blotting 分析。

1.2子宫组织形态观察和免疫组化分析。

1. 2. 1 样品处理

将解剖出的子宫组织于4%多聚甲醛中固定约3-5 h后；将固定好的组织依次放入60%，70%，80 %，95 % 和100 %酒精中各1h，进行梯度脱水；二甲苯处理10 min后，石蜡浸渍约2 h，进行包埋；将包好的蜡块冰敷后进行切片每片约3-5μm。

1.2. 2 扫描电镜观察

将第5天的怀孕小鼠子宫在室温下用2.5%戊二醛固定1 h，0.1 M PBS冲洗3次，每次15 min，置于1%四氧化锇中室温放置1 h。接着样品分别于50 %、7 0%、8 0%、90 %、95 %乙醇脱水，每次15 mi n。最后放入乙酸异戊酯中15 min，临界点干燥，真空镀膜。处理好的标本用扫描电镜（JSM-5900LV, JEOL）观察。

1. 2. 3 HE染色

将妊娠第一天（D1）的36只小鼠随机分为6组，每组6只，3组作为对照组，另外3组为600 mg/kg/day的氢溴酸槟榔碱灌胃处理的实验组，连续灌胃至第四天（D4）时，处死一组对照组与一组实验组小鼠，取出子宫切成适当长度的片段后置于4%的多聚甲醛固定液中保存；同法，第五天（D5）与第六天（D6）各处死一组对照组与实验组小鼠，子宫于4%的多聚甲醛固定液中保存备用。

HE染色操作步骤如下：

（1）将处理组样品包埋于石蜡之中，切片（厚度4 μm至10 μm）常规脱蜡至水；

（2）将切片用苏木精染色5 min后，用水冲洗干净；

（3）运用乙醇进行分色处理数秒钟，之后用水冲洗2 min；

（4）伊红染色1 min，之后用95%的乙醇分色处理；

（5）运用无水乙醇处理两次，每次约20 min；

（6）运用二甲苯处理两次，每次约10 min；

（7）运用中性树胶封片、烤干；

（8）使用Image-Pro Plus 6.0软件进行结果分析。

1. 2. 4 IHC步骤

（1） 切片脱蜡和水化：首先将切片置于二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ各20 min进行脱蜡，随后依次用100 %、95%、80%、70%的酒精进行水化，最后用PBS（PH7.4）冲洗3个5分钟；

（2） 抗原热修复：将切片放于0.01M（PH 6.0）的枸橼酸盐缓冲液中，微波炉加热至96℃-100℃，10 min后取出取出后自然冷却至室温，分别用蒸馏水和PBS冲洗3次，每次5 min；

（3） 去氧化酶：将抗原修复后的切片置入含有3%双氧水盒中室温孵育10min，PBS洗3次，每次3 min ；

（4） 封闭和一抗孵育：擦去玻片上多余水分，滴加5%封闭用山羊血清后，37℃孵育10 min ，甩去多余血清，加入相应稀释一抗；

（5）二抗孵育：PBS漂洗3次（每次5min），加入相应二抗，37℃孵育30min，PBS 漂洗3次（每次3 min），加入相应三抗，37℃孵育30 min，PBS 漂洗3次。DA B显色，显示棕黄色，自来水终止反应；

（6）复染：苏木精复染3 min后，自来水冲洗干净，饱和碳酸锂蓝30 s，自来水冲洗干净，盐酸酒精分色1s左右，自来水冲洗干净；

（7）脱水封片：60%，70 %，80%，90 %，100 %乙醇各3 min ，二甲苯5 min，每个处理重复3次，中性树胶封片。每组取5张切片，随机选择5个不同视野，棕黄色显现为阳性。

1.2. 5 Western blot实验

蛋白质样品的制备：

收集怀孕D4、D5、D6的实验小鼠材料，按照以下步骤制取蛋白质样品：

（1）取990 μL的蛋白裂解液，置于1.5 mL的离心管中，之后再加入10 μL的PMSF，充分混匀；

（2）取出冻存的小鼠子宫样品，液氮快速研磨至粉状，取50-100 mg的蛋白样品置于裂解液中，冰上裂解1.5h。期间每隔20 min摇匀样品一次；

（3）4 ℃下14000 rpm离心5-8 min，取出上清液, 80 ℃保存，备用。

蛋白质浓度的测定：

所得样品蛋白质浓度的测定参照TIANGEN公司的BCA蛋白质定量试剂盒（BCA Protein Assay Kit）法进行浓度测定。

SDS-PAGE凝胶电泳：

根据所需条带蛋白的相对分子量选择合适的分离胶浓度，本实验所用分离胶浓度为10%和12%两种，操作步骤如下：

（1） 加样：每个EP管中加入4 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer，根据所测蛋白浓度，每个样品以50 μg的蛋白含量计算出加样体积，加入到EP管中，混匀；

（2） 变性处理：100℃水浴5 min，使蛋白样品完全变性，冷却后备用；

（3） 上样：每个EP管中的蛋白样品全部加入胶孔中，Maker为碧云天彩色预染蛋白质分子量标准，上样量为8 μL；

（4） 电泳：电泳槽中加入适量的1×SDS-PAGE凝胶电泳缓冲液，上样完成后，按照浓缩胶80 V，分离胶120 V进行凝胶电泳。

转膜：

（1） 切胶：将电泳完成的胶从胶板上剥离，以Marker为参照将胶切成合适的大小，置于转膜缓冲液中备用；

（2） 备膜：将硝酸纤维素膜裁剪成合适的大小（比胶略大），将裁剪好的硝酸纤维素膜用甲醇处理30 s，之后转移至转膜缓冲液中。同时也将转膜用的滤纸置于转膜缓冲液中备用；

（3） 装膜：在转移槽中，按照滤纸—硝酸纤维素膜—胶­—滤纸的顺序依次叠放好，注意在叠放的过程中不要留有气泡；

（4） 转膜：装膜完成后，将转移槽装入转膜仪中，按照设定的程序转膜30分钟。

免疫反应：

（1） 将转膜完成后的膜从转膜仪中取出，标记好正反面，用TBST漂洗；

（2） 封闭：将膜置于加有5%脱脂奶粉的封闭液中，4℃封闭过夜；

（3） 一抗孵化：将膜从封闭液中取出，按照实验所需裁剪成合适大小的条带，用TBST将膜加以清洗，之后将膜放入装有一抗的离心管（50 mL）中，摇床上低速孵化。根据一抗的类型，选择常温孵化2 h或是4℃冰箱过夜；

（4） 将一抗回收，将膜用TBST清洗3遍，每遍清洗8 min；

（5） 二抗孵化：清洗完成后，将膜放入装有二抗的离心管中，室温孵育1 min；

（6） 将膜在TBST离心管中漂洗3次，每次8 min。

化学发光、显影：

（1） 将膜放在保鲜膜上，置于显影仪器中；

（2） 按照实验所需取适量超敏ECL化学发光即用型底物A、B两种试剂，混合后用移液枪加入到膜上面，使其充分附着；

（3） 使用Image Lab软件进行显影，根据不同条带信号的强弱选择合适的曝光时间，每一时间段内曝光100张照片；

（4） 凝胶图象分析：用Image Lab 3.0软件对得到的图片进行分析。

1.2. 6 数据统计分析

数据用平均值±标准误表示,两组间比较采用t检验分析,*P<0.05 为显著差异，**P<0.01 为极显著差异，每个实验至少重复3次。

2 结果。

2. 1氢溴酸槟榔碱对怀孕小鼠胚胎数量和子宫重量的影响

统计结果表明氢溴酸槟榔碱处理组中怀孕小鼠的胚胎数量随着氢溴酸槟榔碱剂量的增加逐步减少。当怀孕小鼠注射剂量为20 mg/kg/day氢溴酸槟榔碱时，胚胎数量与对照组相比明显减少（P<0.01）， 胚胎数量仅为对照组胚胎数量的59 % 见图1A，C和D。子宫重量也随着氢溴酸槟榔碱剂量的增加逐步减少，当剂量为20 mg/kg/day氢溴酸槟榔碱时，处理后的子宫重量约为对照组的77 %，具有显著性差异（P<0.01），见图1B。

2. 2氢溴酸槟榔碱对子宫组织形态的影响

HE染色观察发现在怀孕第5天时，20 mg/kg/day氢溴酸槟榔碱处理的小鼠子宫内膜上皮细胞快速生长，且子宫内腔张开并产生分支，而对照组小鼠子宫内膜细胞生长正常，内腔关闭无分支（图2A1和A2）。同时发现第6天时20 mg/kg/day 氢溴酸槟榔碱处理的小鼠子宫无脱膜分化的现象无着床胚胎，而此时对照组小鼠子宫正常脱膜分化并出现着床成功的胚胎，脱膜分化是正常小鼠怀孕后第六天必须经历的一个过程有助于胚胎着床（图2B1和B2）。

2.3 IHC分析氢溴酸槟榔碱对怀孕小鼠子宫组织ERα 和PR蛋白的影响

免疫组化观察发现ERα和PR蛋白都能在子宫腺体、基质细胞和上皮细胞表达，棕黄色为目的蛋白（见图3A）。统计分析结果显现氢溴酸槟榔碱处理同样能显著提高ERα和PR蛋白在子宫组织的表达量（P<0.05，见图3B）。

2.4 Western blotting分析氢溴酸槟榔碱对怀孕小鼠子宫组织ERα 、PR、E-cadherin、β-catenin和 MMP2蛋白的影响

Western blotting结果统计分析发现氢溴酸槟榔碱处理后子宫组织中ERα 和PR蛋白表达量明显上调（图4）； 发现氢溴酸槟榔碱处理能显著上调E-cadherin 和β-catenin并下调MMP2在子宫组织中的表达（图5）。

本发明与现有技术相比具有以下优点。

1、本发明中雌性不育剂氢溴酸槟榔碱对雌鼠生育能力的控制极其显著。实验证明，对交配受孕成功后的雌性小鼠，以20 mg/kg/day 的氢溴酸槟榔碱处理怀孕小鼠时，胚胎的数量和子宫重量分别是空白对照组的59 %和77 %，表明低剂量的氢溴酸槟榔碱即可对雌鼠的生育产生显著影响。

2、本发明中雌性不育剂氢溴酸槟榔碱对鼠类的子宫有一定的损伤作用。氢溴酸槟榔碱抗生育机理研究表明，20 mg/kg/day的氢溴酸槟榔碱能通过改变怀孕小鼠子宫内膜组织形态和子宫内膜容受性而导致胚胎着床数量减少，产生抗生育作用。具体表现为氢溴酸槟榔碱能使小鼠怀孕后第5天子宫内腔打开和泡软突严重受损，第6天子宫内膜脱膜分化失败而改变子宫内膜的正常形态。

3、本发明中雌性不育剂氢溴酸槟榔碱对鼠类子宫内胚胎着床的关键受体ERα, PR, E-cadherin, β-catenin 和MMP-2表达水平产生影响。免疫组化实验表明，ERα和PR蛋白都能在子宫基质细胞、腺体细胞和上皮细胞中表达。平均光密度分析发现与对照组相比氢溴酸槟榔碱能明显提高（P<0.05）；Western blotting结果统计分析也发现氢溴酸槟榔碱处理后子宫组织中ERα 和PR蛋白表达量明显上调。Western blotting实验结果还表明，氢溴酸槟榔碱处理能显著上调E-cadherin 和β-catenin并下调MMP2在子宫组织中的表达（P<0.05）。这一结果表明氢溴酸槟榔碱能对雌鼠胚胎着床期间的关键受体产生影响，从而损害子宫内膜的容受状态导致胚胎着床失败。这就意味着氢溴酸槟榔碱能够通过影响胚胎的着床从而导致雌鼠不育，控制鼠类的繁殖从而达到对鼠类种群的控制。

附图说明

图 1 不同剂量氢溴酸槟榔碱对怀孕小鼠胚胎数量和体重的影响。A. 胚胎数量统计结果（n=12）；B. 子宫重量统计结果（n=12），*P<0.05，**P<0.01，与对照组相比；C. 对照子宫图片；D. 氢溴酸槟榔碱处理子宫图片。→：着床胚胎。

图 2 氢溴酸槟榔碱对小鼠子宫形态的影响。#：关闭的子宫内腔，&：张开的子宫内腔，Ge：腺体，S：基质细胞，Le：子宫内膜上皮细胞，Em：胚胎，D5：怀孕后第5天，D6：怀孕后第6天。放大倍数为100×。

图 3 氢溴酸槟榔碱对子宫 ER α和 PR 蛋白表达的影响。A：氢溴酸槟榔碱对子宫ERα和PR 蛋白表达的免疫组化图；B：氢溴酸槟榔碱对子宫ERα和PR相对蛋白表达强度分析（IHC）。Ge：腺体，S：基质细胞，Le：子宫内膜上皮细胞，Em：胚胎。D4：怀孕后第4天，D5：怀孕后第5天，D6：怀孕后第6天，棕黄色代表目的蛋白，*P<0.05，**P<0.01，与对照组相比（n=5）。放大倍数为200×。

图 4 Western blotting 检测 ER α和 PR 蛋白的相对表达。(A) Western blotting检测ERα和PR图。(B) ERα和PR蛋白相对表达水平，*P<0.05，**P<0.01，与相应对照组比较。

图 5 Western blotting 检测 E-cadherin, β -catenin 和 MMP2 蛋白的相对表达。(A) Western blotting检测E-cadherin, β-catenin和 MMP2图。(B) E-cadherin, β-catenin和 MMP2蛋白相对表达水平，*P<0.05，**P<0.01，与相应对照组比较。

具体实施方式

下文将通过实施实例对本发明做进一步说明，但实施实例不以任何方式限制本发明。

实例1：

选用纯度为98 %的氢溴酸槟榔碱为不育剂药物，以受孕第一天的ICR雌性小鼠为研究对象，以100 mg/kg/day的剂量连续灌胃给药5天，发现胚胎着床平均数量与对照组相比无明显差异，表明100 mg/kg/day剂量的氢溴酸槟榔碱对雌鼠胚胎着床情况无较大影响。

实例2：

选用纯度为98 %的氢溴酸槟榔碱为不育剂药物，以受孕第一天的ICR雌性小鼠为研究对象，以200 mg/kg/day的剂量连续灌胃给药5天，发现胚胎着床平均数量与对照组相比减少超过40 %，表明200 mg/kg/day剂量的氢溴酸槟榔碱可对雌鼠胚胎着床数量产生一定影响。

实例3：

选用纯度为98%的氢溴酸槟榔碱为不育剂药物，以受孕第一天的ICR雌性小鼠为研究对象，以300 mg/kg/day的剂量连续灌胃给药5天，发现胚胎着床平均数量与对照组相比减少达到70 %，实例表明为300 mg/kg/day剂量的氢溴酸槟榔碱不育率可达到70%，表明氢溴酸槟榔碱具有较好的抗生育效果。

实例4：选用纯度为98%的氢溴酸槟榔碱为不育剂药物，以受孕第一天的ICR雌性小鼠为研究对象，以500 mg/kg/day的剂量连续灌胃给药5天，发现受孕小鼠致死率达到100 %，表明氢溴酸槟榔碱除了具有较好的抗生育作用，对雌鼠还有一定的毒杀作用。

Claims (5)

1.一种抗生育灭鼠剂，其特征在于，所述抗生育灭鼠剂是以氢溴酸槟榔碱作为活性组分的抗生育剂。

2.权利要求1所述的抗生育灭鼠剂，其特征在于，所述鼠类为雌鼠类动物。

3.权利要求1或2中所述的抗生育灭鼠剂，其特征在于，所述氢溴酸槟榔碱为人工合成的槟榔碱的氢溴酸盐。

4.一种灭鼠方法，其特征在于，通过使用权利要求1-3任一项所述的抗生育灭鼠剂，控制雌鼠的生育及其种群的数量。

5.权利要求4所述的方法 ，包括在鼠类繁殖开始或繁殖期内，每鼠每天按照100 mg/kg-500 mg/kg体重进行口服/灌胃给药的方法，连续给药5-7天，即可控制雌性鼠类生育及其数量。