CN103860466A

CN103860466A - 氯替泼诺纳米胶束滴眼液

Info

Publication number: CN103860466A
Application number: CN201310597270.0A
Authority: CN
Inventors: 吉民; 张瑛; 张伟明; 张艳; 王少平
Original assignee: SUZHOU BEAUTY OF TAIHU-LAKE MEDICINE Co Ltd
Current assignee: SUZHOU BEAUTY OF TAIHU-LAKE MEDICINE Co Ltd
Priority date: 2012-11-22
Filing date: 2013-11-22
Publication date: 2014-06-18

Abstract

本发明公开了一种氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其包括如下质量含量的组分：氯替泼诺或其盐0.01%-5%，两亲性嵌段聚合物载体0.1%-50%，非离子型表面活性剂0-50%，其他眼用制剂附加剂0.01-20%，其余为注射用水。本发明制得的眼用制剂，能够增加角膜细胞的渗透性，并延长药物在眼内作用时间，提高疗效。

Description

氯替泼诺纳米胶束滴眼液

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是一种用于治疗眼部炎症的纳米胶束滴眼剂，具体涉及氯替泼诺纳米胶束滴眼液。

背景技术

皮质醇药物有良好的抗炎作用，但是在治疗的同时也伴随着毒性的发生，为此人们努力寻找低毒性的皮质醇类药物。氯替泼诺（Loteprednol etabonate）为一种类皮质激素。氯替泼诺作为“软药”是根据Bodor原理研究设计的，解决了皮质醇类药物的毒性问题，同时抗炎性强的特点得到了进一步的加强。与泼尼松龙不同，氯替泼诺易被水解为无活性的有机酸，当用于眼睛后，可透过角膜在前房迅速转化为非活性代谢物，降低了系统毒性，其抗炎作用强度大于地塞米松1.5倍，和醋酸氢化泼尼松相当，但氯替泼诺在眼压升高方面比醋酸氢化泼尼松安全。适用于眼睑和球结膜、角膜和眼球前部的甾体敏感的炎症的治疗，如：过敏性结膜炎、红斑性角膜炎、浅层点状角膜炎、带状疱疹性角膜炎、虹膜炎、睫状体炎、选择性感染性结膜炎。

胶束(micelles，亦称胶团)是胶体分散系中的一种，属于缔合胶体。胶束在药学中长期用于难溶性药物的增溶，聚合物胶束(polymeric micelles)不仅用于增溶，而且可以作为药物载体。如难溶于水的两性霉素B，用PEG-聚（β-苯甲酰-天冬氨酸酯）制成聚合物胶束，溶解度可提高到5g/L，是原来溶解度的1万倍。近年来，聚合物胶束用作载体成为给药系统研究的热点，可以用于提高药物稳定性，延缓释放，提高药效，降低毒性，和具有靶向性。如将P388白血病大鼠用阿霉素及其聚合物胶束进行药理对照实验，阿霉素中毒剂量是30mg/kg，而其聚合物胶束是600mg/kg，即胶束使其毒性大为降低。用聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺聚合物胶束（低浓度时很稳定，粒径7～35nm），发现与血浆无明显作用，在血液循环中能长时间存在，且在荷Lewis肺癌的小鼠癌组织及EL T4淋巴癌中浓集，如包载难溶的抗癌药，也在癌中浓集，说明该胶束有良好的稳定性和靶向性。

聚合物胶束可由合成的双亲性表面活性剂在水中自组装形成。但聚合物胶束是内核疏水、外层亲水的实心结构，空白胶束粒径通常在10～50nm之间。胶束核心包载固态疏水药物后可成为纳米球或亚微球，包载液态疏水药物后可成为纳米乳或亚微乳，粒径均大于空白胶束。胶束也可在其亲水基团之间包载亲水药物，但载药量较低。

粒子型给药系统在体内的分布主要取决于粒径和粒子表面特性（如亲水性和电荷）。粒径小于50nm的胶束和泡囊具有优良的组织透过性，尤其是可在具有渗漏性血管的组织（如肿瘤、炎症区或梗死区）聚集，即所谓增强透过和滞留效应（EPR），因而具有天然的被动靶向作用。其粒径又大于可以被肾排泄的程度，而小于可以被单核细胞非特异摄取的限度，可以延长在体内的时间。也使其可以用亚微米微孔法过滤除菌。胶束还具有克服血-脑屏障（blood-brain barriers,BBB）的功能。近年来，纳米胶束作为眼用药物载体的研究和应用日益受到关注。纳米胶束释药机制独特，可通过融合作用使药物透过角膜上皮细胞。纳米胶束能够起到药物储库的作用，实现缓释和长效给药，且纳米胶束具有一定的生物黏附性，能增加药物与角膜的接触时间，因此有利于药物的角膜透过；因此，将氯替泼诺制成纳米胶束滴眼液，可实现药物的缓释和长效作用，减少用药次数，减少药物浓度的波动，并能使药物在防水中的AUC增加，消除半衰期延长，提高药物的生物利用度，药效学与药动学一致。同时降低药物的毒副作用，提高患者的顺应性。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种缓释长效作用的氯替泼诺纳米胶束滴眼液。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

一种氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其包括如下质量含量的组分：氯替泼诺或其盐0.01%-5%，两亲性嵌段聚合物载体0.1%-50%，非离子型表面活性剂0-50%，其他眼用制剂附加剂0.01-20%，其余为注射用水。

本发明滴眼液中的活性成分为依碳氯替泼诺或氯替泼诺的其他盐型（包括硫酸盐、盐酸盐、乳酸盐、硝酸盐、酒石酸酸盐、枸橼酸盐）。氯替泼诺或其盐优选的质量含量为0.1%-1%。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，两亲性嵌段聚合物载体为两种聚合物组成的嵌段聚合物，通常用线形嵌断共聚物，其亲水区的材料主要是聚乙二醇（PEG）、聚氧乙烯（PEO）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或聚维酮，构成疏水区的材料主要是聚氧丙烯、聚苯乙烯、聚己内酯、聚氨基酸、聚乳酸、精胺、短链磷脂等。这两类材料可以构成各种二嵌断（AB）或三嵌断（BAB）两亲性共聚物。本载体包括聚氧乙烯-聚天冬氨酸共聚物、聚氧乙烯-聚羟氨酸共聚物、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-聚β-苄基-L-天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-聚乳酸共聚物、聚乙二醇-聚苯甲天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺聚合物或其衍生物等的一种或几种。优选的配方使用聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺或聚乙二醇-聚乳酸。两亲性嵌段聚合物载体的质量含量优选为0.1%-40%，进一步优选1%-10%。

本发明中，非离子型表面活性剂为吐温80、泊洛沙姆188（Poloxamer188）、去氧胆酸钠中的一种或几种。非离子型表面活性剂的质量含量优选为0-10%，进一步优选0.01%-10%。

本发明中的其他眼用制剂附加剂包括渗透压调节剂、pH调节剂、抗氧剂、防腐剂、助悬剂中的一种或几种，质量含量优选为0.01%-10%，进一步优选0.1%-5%。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，渗透压调节剂为了氯化钠、葡萄糖、甘露醇、甘油、木糖醇、山梨醇、硼酸、硼砂中的一种或几种。优选的配方使用氯化钠、葡萄糖或甘油。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，抗氧剂为丁羟基苗香醚、丁羟基甲苯、没食子酸丙醋、叔丁基对苯二酚、维生素E、维生素C、维生素C棕榈酸酯、各种亚硫酸盐、焦亚硫酸盐、硫代硫酸盐中的一种或几种。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，助悬剂为环糊精及其衍生物、纤维素及其衍生物、卡波普、聚乙烯醇、聚维酮、右旋糖酐、聚乙二醇中的一种或几种。优选的处分使用卡波普、聚维酮或环糊精。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，防腐剂为苯扎氯铵、依地酸钠（依地酸钠本身是没有抑菌作用，但少量的依地酸钠能使其他抑菌剂对绿脓杆菌的作用增强）、三氯叔丁醇、羟苯酯类、苯氧乙醇等。优选的配方使用苯扎氯铵和依地酸钠。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，PH调节剂为磷酸盐缓冲液、硼酸缓冲液、硼酸盐缓冲液中的一种。

本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液可采用组装溶剂蒸发法、透析法、乳化-溶剂挥发法或化学结合法制备而成，各方法可按现有常规方法操作。进一步的，其制备方法如下：

1、自组装溶剂蒸发法：将聚合物载体材料与氯替泼诺溶于有机溶剂中，再逐渐加到搅拌的水或水溶液中，形成聚合物胶束后，加热除去有机溶剂，加入其它附加剂，调整浓度即得。

2、透析法：将聚合物载体材料溶解在N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基亚砜（DMSO）或N,N-二甲基乙酰胺（DMAc）中，溶解后加入氯替泼诺；或者直接将聚合物载体材料和氯替泼诺一起溶解；溶解搅拌后置透析袋中，用水透析5～9h，透析后加入其余附加剂，调整浓度即得。

3、乳化-溶剂挥发法：将氯替泼诺溶于有机溶剂，同时将聚合物载体材料以及非离子型表面活性剂制成澄清的聚合物胶束水溶液，再在剧烈搅拌下将有机溶液倒入聚合物胶束溶液中，形成O/W型乳状液，继续搅拌使有机溶剂挥发，滤去游离的药物及其它小分子后，加入其余附加剂，调整浓度即得。此法所得的聚合物胶束载药量比透析法略高。

本发明制得的眼用制剂，能够增加角膜细胞的渗透性，并延长药物在眼内作用时间，提高疗效。动物实验研究结果表明，本发明的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，具有缓释和长效作用，能够提高药物的生物利用度，减少药物浓度的波动，较之普通滴眼液具有明显的优势。

附图说明

图1是本发明实施例3的透射电镜照片。

图2是激光粒度分析粒径图。

具体实施方式

实施例1

制备方法：将配方量的聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和氯替泼诺溶于300mL乙醇中，缓慢注入到50℃、磁力搅拌下的600ml注射用水中，50℃保温搅拌1h使乙醇挥发完全，置冰浴中探头超声5min，加入其它辅料，注射用水调整体积至1000ml，即得依碳酸氯替泼诺纳米胶束滴眼液。

实施例2

制备方法：将甲氧基聚乙二醇-聚乳酸作材料，同药物依碳酸氯替泼诺一起溶于DMF（或THF）中，60℃保温，转至透析袋中用注射用水透析，定时换透析液后，将被透析液离心，上清液0.45μm微孔过滤，加入其它附加剂，调整浓度即得依碳酸氯替泼诺胶束，粒径35～245nm，其中较大者外壳厚度约20nm。共聚物中疏水段愈长者粒径愈大（同时对依碳酸氯替泼诺增溶的效果亦愈大），用THF作溶剂者粒径远小于用DMF者，共聚物/溶剂比愈大者粒径也愈大。

实施例3

制备方法：将配方量的聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺、Poloxamer188溶于500mL注射用水中得到水相溶液；将配方量的依碳酸氯替泼诺溶于200ml氯仿中，将氯仿溶液倒入水相中，二者混合，剧烈振摇、超声使之形成O/W型乳剂，倒入圆底烧瓶中，于50℃下旋转蒸发出去氯仿，继续在30℃下旋转蒸发30min，置冰浴中探头超声5min，加入其它附加剂，注射用水调整体积至1000ml，即得。

粒径及形态观察

1、取各实施例产品适量，加入0.05mol/L磷酸盐缓冲液(PBs，pH7.0)得混悬液，稀释至后，滴至碳膜覆盖的铜网上，停留2-3min以便脂质体吸附，用滤纸吸走多于的液体，用2.0%磷钨酸染色3min，自然晾干，于透射电镜下观察粒子的形态并照相。可观察出纳米尺度胶束。图1为实施例3的放大25000倍照片。

2、精密称定实施例1产品适量，用注射用水水合并稀释至临床用药浓度，适当稀释后，用zeta plus激光粒度分析仪（美国Brookhaven公司）测定粒径。结果见图2。

动物实验

动物实验具体如下：

1.家兔离体角膜透过性实验

目的：研究眼用制剂的角膜透过性。

动物：白兔，体重2.5-3.0kg，雌雄不限。

试药：氯替泼诺纳米胶束滴眼液(实施例1)、(实施例2)、氯替泼诺生理盐水溶液。

扩散介质：以谷胱甘肽-碳酸氢钠林格溶液(GBR)为扩散介质，它由2部分溶液组成，一部分含氯化钠12.4g·L^-1、氯化钾0.716g·L^-1、磷酸二氢钠0.206g·L^-1、碳酸氢钠4.908g·L^-1；另一部分含氯化钙0.23g·L^-1、氯化镁0.318g·L^-1、葡萄糖1.80g·L^-1、谷胱甘肽(氧化型)0.184g·L^-1。上述二溶液低温储存，用前等量混合。

方法：将家兔耳缘静脉注射空气处死，20分钟内分离角膜，置于扩散池的供给池与接受池之间，接受池中装满谷胱甘肽-碳酸氢钠林格溶液作为扩散介质，供给池中加入供试品2mL，置于34℃恒温磁力搅拌器中，于不同时间点取样，样品经0.22μm微孔滤膜过滤后，HPLC测定，计算累计透过量。

结果：在6小时内氯替泼诺的角膜透过量为实施例2（80-90%）＞实施例1(75-85%)＞氯替泼诺生理盐水溶液(60-70%)，证明本发明的纳米胶束滴眼液能够有效促进氯替泼诺的角膜透过性，使更多的药物透过角膜到达房水，提高药物在房水中的浓度，从而更好地发挥药效。

2、家兔在体刺激性实验

目的：研究眼用制剂的角膜透刺激性。

动物：白兔，体重2.5-3.0kg，雌雄不限。肉眼观察：角膜无混浊，结膜无充血、水肿及分泌物，瞳孔圆形，两侧等大，对光反射良好。裂隙灯检查：角膜透明，无云翳、斑翳，虹膜纹理清晰，结膜无充血水肿。荧光素染色：10％荧光素钠注射液，临用前用生理盐水稀释10倍，用无菌玻棒沾取少许1％荧光素钠液于每兔眼滴一滴，2分钟后观察角膜未着色者为角膜正常，再用生理盐水冲洗，将结膜囊冲洗干净待用。经上述预选出无眼疾而健康大白兔用于本试验。

试药：氯替泼诺纳米胶束滴眼液(实施例2)、(实施例3)。

2.1眨眼次数测定

取预选健康动物12只，雌雄兼用。将每只动物眼睫毛剪去，分成三组，每组4只。分别给每只动物左侧眼结膜囊内滴氯替泼诺纳米胶束滴眼液0.1mL，右侧眼为对照。每次给药时压迫鼻泪管，并使眼被动闭合8～10s，随后立即记录10min内眨眼次数，分别计算4只动物左、右眼平均眨眼次数，评价药物对眼的刺激性(眨眼次数多则刺激性大)。

结果：记录各组动物滴眼药后10min内的眨眼次数，经统计学处理t检验，结果见下表：

表1兔眨眼次数测定结果（n＝4）

组别	眨眼次数/10min（左眼）	眨眼次数/10min（右眼）
			实施例2	7.5±1.52	7.3±0.89
实施例3	7.4±0.38	7.3±1.16
			氯替泼诺生理盐水	8.0±1.77	7.4±0.55

结果表明证明本发明的纳米胶束滴眼液能够有效减少氯替泼诺的角膜刺激性，提高患者的用药顺应性。10min内眨眼次数为氯替泼诺生理盐水溶液＞实施例2＞实施例3。

2.2眼刺激性试验

取预选健康动物4只，雌雄兼用，剪去每只动物眼睫毛，分别给每只动物眼结膜囊内滴氯替泼诺纳米胶束滴眼液0.1mL。每次给药时压迫鼻泪管，并使眼被动闭合8～10s。各组均每15min点眼一次，连续给药2h。将兔子全麻，荧光素染色，裂隙灯观察全身及眼表情况（角膜，结膜，虹膜），记录给药后（15min、1h、2h、12h、24h）眼的局部刺激反应情况。评分标准见附表。

结果如下：

表2滴眼液对兔眼刺激性评分

附表

表3眼刺激反应评分标准

表4眼刺激性评价标准

Claims

1.一种氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于包括如下质量含量的组分：氯替泼诺或其盐0.01%-5%，两亲性嵌段聚合物载体0.1%-50%，非离子型表面活性剂0-50%，其他眼用制剂附加剂0.01-20%，其余为注射用水。

2.根据权利要求1所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述氯替泼诺盐为氯替泼诺的硫酸盐、盐酸盐、乳酸盐、硝酸盐、酒石酸酸盐或枸橼酸盐；氯替泼诺或其盐的质量含量为0.1%-1%。

3.根据权利要求1所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述两亲性嵌段聚合物载体为两种聚合物组成的嵌段聚合物，其亲水区材料主要是聚乙二醇、聚氧乙烯或聚维酮，其疏水区的材料主要是聚氧丙烯、聚苯乙烯、聚己内酯、聚氨基酸、聚乳酸、精胺或短链磷脂；所述两亲性嵌段聚合物载体的质量含量为0.1%-40%。

4.根据权利要求3所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述两亲性嵌段聚合物载体选自聚氧乙烯-聚天冬氨酸共聚物、聚氧乙烯-聚羟氨酸共聚物、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-聚β-苄基-L-天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-聚乳酸、聚乙二醇-聚苯甲天冬氨酸共聚物、聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺聚合物或其衍生物的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述非离子型表面活性剂选自吐温80、泊洛沙姆188、去氧胆酸钠的一种或几种；所述非离子型表面活性剂的质量含量为0.01%-10%。

6.根据权利要求1所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述其他眼用制剂附加剂包括渗透压调节剂、PH调节剂、抗氧剂、防腐剂、助悬剂中的一种或几种。

7.根据权利要求6所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘露醇、甘油、木糖醇、山梨醇、硼酸、硼砂或其溶液中的一种或几种；所述抗氧剂为丁羟基苗香醚、丁羟基甲苯、没食子酸丙醋、叔丁基对苯二酚、维生素E、维生素C、维生素C棕榈酸酯、各种亚硫酸盐、焦亚硫酸盐、硫代硫酸盐中的一种或几种。

8.根据权利要求6所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述助悬剂为环糊精及其衍生物、纤维素及其衍生物、卡波普、聚乙烯醇、聚维酮、右旋糖酐、聚乙二醇中的一种或几种；所述防腐剂选自苯扎氯铵、三氯叔丁醇、依地酸钠、羟苯酯类化合物、苯氧乙醇中的一种或几种；所述pH调节剂为磷酸盐缓冲液、硼酸缓冲液或硼酸盐缓冲液。

9.根据权利要求1、7或8所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于所述两亲性嵌段聚合物载体选自聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺或聚乙二醇-聚乳酸；所述渗透压调节剂选自氯化钠或甘油；所述助悬剂选自卡波普或聚维酮；所述防腐剂选自苯扎氯铵或依地酸钠。

10.根据权利要求1所述的氯替泼诺纳米胶束滴眼液，其特征在于该氯替泼诺纳米胶束滴眼液采用组装溶剂蒸发法、透析法、乳化-溶剂挥发法或化学结合法制备而成。