CN103826602A - 新型防晒霜组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于身体防晒的生态兼容组合物，尤其是用于保护人体健康，并与有机体生命相兼容，且对海洋环境无害（尤其是对含有珊瑚礁的热带环境无害）的防晒霜。

Description

新型防晒霜组合物
技术领域
本文涉及一种生态兼容的防晒霜组合物，特别是一种与海洋环境及其栖息生物所兼容的，尤其是与珊瑚礁有关的防晒霜组合物。
背景技术
珊瑚礁是世界上生物生产力和多样性最高的生态系统之一，代表着海洋生态多样性的热点区域，并直接供养着五亿人（Moberg and Folke1999，Wilkinson2004）。约60%的珊瑚礁目前受到若干自然和人类影响（Hughes et al2003;Pandolfi et al2003）。在过去的20年中，珊瑚白化（指寄宿在石珊瑚中的共生黄藻的流失）的频率急剧增加，空间广度急剧扩大（Hoegh-Guldberg1999;Hughes et al2003;Knowlton2001）。这一现象与温度异常、过量紫外线（UV）辐射或变化的光合辐射可用量以及细菌性病原体和污染物的存在有关（Brown et al2000;Bruno et al2007;Douglas2003;Glynn1996;Jones2004）。
全球范围内，用于个人护理和化妆的防晒产品的产量和消耗量正在增加，为环境污染带来潜在的重大影响。此类产品的退出也与海洋沿海地区旅游业的快速扩张有关（Wilkinson2004）。防晒霜和其他个人护理产品中所含的化合物在海水中可达到可检测水平（Daughton andTernes1999;Giokas et al2007）。这些化合物可能对环境有潜在危害；因此，一些最受欢迎的旅游景点目前已经禁止了防晒产品的使用，例如，墨西哥的海洋生态公园（Xcaret2007;Xel-ha2007）。因为，防晒霜是亲脂性的，其所含的UV过滤物可以在水生动物中积累（Giokas et al，2007），造成在其他外源化合物中已发现的类似影响（Balmer et al2005;Daughton and Ternes1999）。
防晒霜中所含的对羟基苯甲酸酯类（paraben）防腐剂和某些UV吸收剂具有雌激素活性（Daughton and Ternes1999;Schlumpf et al2004）。此外还发现，防晒霜成分可以发生各种光降解反应，令这些成分转化为有毒副产物（Giokas et al.2007及其中引用文献）。据另一发现，防晒霜会影响海洋细菌（Danovaro and Corinaldesi2003）。最近，全球范围的专门实验中观察到了防晒霜与硬珊瑚白化之间的紧密联系（Danovaro et al.2008）。特别地，这项研究还分析了防晒霜中所采用的某些UV过滤物质和一些商品防晒霜组合物对珊瑚礁的有害影响。
本发明的目的在于通过提供一种与珊瑚礁所在的海洋生态系统生态兼容的防晒霜组合物，以解决上述缺陷。
发明内容
商品防晒霜包含各种合成和天然的化合物，这些化合物全都对珊瑚礁所在的海洋环境具有潜在危害。发明人令人惊奇地选择了一些物质，其无论单独使用或组合使用，都不会对此类海洋环境造成危害，但同时能高效地为皮肤隔离日光辐射。
因此，本发明的目的在于提供一种生态兼容的防晒霜组合物，包含：
一种或多种紫外线（UV）过滤物，选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚（MBBT的IUPAC名称），2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯（DHHB的IUPAC名称），乙基己基三嗪酮（EHT的IUPAC名称）；
一种或多种抗氧化物，选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物；
以及不含对羟基苯甲酸酯类的防腐剂。
以下将以本发明的一些实施例作为例证，而非出于限定性目的，详细叙述并突出本发明的优点、特征和操作方式。
附图说明
图1：受试体系和对照体系（对照）中，珊瑚小穗（coral nubbins，指含活珊瑚虫的小枝）所在水环境中的病毒富集因子。图中显示了用于测试的各种不同处理物：a）芳香剂；b）霜剂；c）抗氧化剂；d）UV过滤物；e）对照。
图2：受试体系和对照体系（对照）中，珊瑚小穗（coral nubbins，指含活珊瑚虫的小枝）所在水环境中的原核生物富集因子。图中显示了用于测试的各种不同处理物：a）芳香剂；b）霜剂；c）抗氧化剂；d）UV过滤物；e）对照。
图3：培养实验中，珊瑚小穗（coral nubbins，指含活珊瑚虫的小枝）所在水环境中排出的黄藻总量。图中显示了用于测试的各种不同处理物：a）芳香剂；b）霜剂；c）抗氧化剂；d）UV过滤物；e）对照。
图4：添加防晒霜后排出黄藻的受损程度。图中显示了用于测试的各种不同处理物：a）芳香剂；b）霜剂；c）抗氧化剂；d）UV过滤物；e）对照。
图5：不同培养时间下的珊瑚小穗。板块a和b所示为在培养时间为0和72小时后的对照体系。板块c和图d所示为0和72小时后的受试珊瑚。
图6：接受UV测试的过滤物的耐光性。
具体实施方式
本发明涉及一种与含珊瑚礁的海洋生态系统生态兼容的防晒霜组合物。
本文所称的与含珊瑚礁的“海洋生态系统生态兼容”指的是，产品不会引起对海洋生物体或整体群落或整体栖息地的危害或改变。由于生态兼容的产品保护环境和生物多样性的健康，因此能够不受限制地使用。本文所述的实验，验证了暴露在各种化学成分之下的海洋生态系统的健康状况，以选择绝对无害的成分。注意，可生物降解的产品（如某些市场产品的相关声明）可能对环境有害从而不能达成生态兼容，因为可生物降解的概念仅涉及化合物的分解时间。
本发明的组合物包含：
一种或多种UV过滤物，选自MBBT、DHHB和EHT；
一种或多种抗氧化物，选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物，所述抗氧化物不含对羟基苯甲酸酯类的防腐剂。
本发明的描述中所称的“对羟基苯甲酸酯类”是指在化妆品工业中用作防腐剂的4-对羟基苯甲酸的酯类。最常用的对羟基苯甲酸酯类为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯。
从绿茶中提取的多酚类例如：Sigma公司有售的多酚-60（CAS N°138988-88-2）。
在其中一个实施例中，本发明的组合物可以包含一种或多种与海洋环境生态兼容的芳香剂，选自以下芳香剂：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子。
适用于本发明的芳香剂例如：FAROTTI SRL公司有售的芳香剂，例如番石榴和椰子、天然薰衣草、天然葡萄柚，其浓度优选为等同于或低于所述产品的0.3%。
为了增加贮藏寿命，在其中一个实施例中，所述组合物含有充当防腐剂的山梨酸，据本文所述的测试可知，未发现山梨酸在与其他化合物同时存在时，对珊瑚礁有害。
所述组合物可用不同的化妆品形式来制备，例如：霜剂、乳液、软膏、喷雾剂、唇膏。可以将选定的UV过滤物、抗氧化物、芳香剂和防腐剂与适用于将要生产的选定化妆品形式的不同载体（根据实验结果）相混合。
优选地，采用具有润肤剂效果的载体，所述载体选自：丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油和蜂蜡。
丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯（CAS number:68583-51-7）是丙二醇的衍生物，是丙二醇和脂肪酸的二酯；特别地，它是丙二醇二辛酸酯和丙二醇二葵酸酯的混合物。该产品在Labrafac名下有售。
适用于本发明的蜂蜡（CAS number:8012-89-3）在例如Apifil名下有售。
实验部分中记录的数据显示，过滤物MBBT、DHHB，抗氧化物醋酸生育酚、生育酚，以及芳香剂番石榴和椰子，是对珊瑚礁具有较高生态兼容性的化合物。因此，优选地，本发明的组合物含有MBBT或DHHB，醋酸生育酚或生育酚，且可选地含有芳香剂番石榴和椰子。
本发明基于选择适当的化合物，用于组成与海洋环境及其栖息生物，尤其是珊瑚礁，相兼容的防晒霜组合物。
防晒霜中的大多数常见化合物都证实为对所述环境有害，所述化合物包括：
对羟基苯甲酸酯类防腐剂；
抗坏血酸衍生物；
UV过滤物，选自双乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（BEMT）、肉桂酸、苯甲酮、樟脑衍生物、氧化钛；
芳香剂，选自白千层精油、依兰花提取物、印度簕竹（Bambousa Arundinacea）提取物、乳油木果脂（Karitè）；
载体，选自动物衍生油脂；
摩洛哥坚果油。
在其中一个实施例中，所述防晒霜混合物包含：
一种或多种UV过滤物，所述UV过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚，2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯，乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
且不含以下物质：
属于对羟基苯甲酸酯类或抗坏血酸衍生物类的防腐剂；
UV过滤物，选自双乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪、肉桂酸、苯甲酮、樟脑衍生物、氧化钛；
芳香剂，选自白千层精油、依兰花提取物、印度簕竹（Bambousa Arundinacea）提取物、乳油木果脂（Karitè）；
载体，选自动物衍生油脂、摩洛哥坚果油。
在其中一个具有非常高的生态兼容性的实施例中，所述组合物进一步含有山梨酸和/或一种或多种选自橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子的芳香剂。
在又一个具有高生态兼容性的实施例中，所述组合物主要由以下物质组成：
一种或多种UV过滤物，所述UV过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚，2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯，乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水。
在其中一个具有高生态兼容性的进一步实施例中，所述组合物主要由以下物质组成：
一种或多种UV过滤物，所述UV过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚，2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯，乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水。
在其中一个进一步的实施例中，所述组合物主要由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚和/或2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯；
醋酸生育酚和/或生育酚；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水；
一种或多种芳香剂，所述芳香剂选自：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子。
在又一个实施例中，所述组合物主要由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚和/或2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯；
醋酸生育酚和/或生育酚；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水；
一种或多种芳香剂，所述芳香剂选自：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子；
羟乙基纤维素和/或EDTA和/或氢氧化钠。
在又一个实施例中，所述组合物主要由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚、2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯和乙基己基三嗪酮；
醋酸生育酚；
山梨酸；
丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油和蜂蜡；
水；
羟乙基纤维素；
EDTA；
氢氧化钠。
上述实施例仅含有经过单独和整体测试证实与珊瑚礁完全生态兼容的化合物，且所述化合物（无需添加其他对海洋环境可能有害的化合物）形成适当的化妆品形式后，具有高耐光性和延长的贮藏寿命。
本发明的组合物种，MBBT、DHHB和EHT的含量百分比可以是组合物重量的3%-6%。
实施例
下列实施例仅用于说明而非限制本发明（例如，重量和浓度都仅是指示性的，因为SPF和UVA/UVB的吸收比率都必须经过具体配方调整，才能符合产品所称的SPF）。每种化合物的含量以重量百分比表示。
实施例1：在一个特定实施例中，本发明采用了下列配方的霜剂形式：
成分 w/w
MBBT 4%
DHHB 4%
EHT 1%
APIFIL 12%
LABRAFAC 15.5%
橄榄油 7%
醋酸生育酚 0.5%
羟乙基纤维素 0.2%
EDTA 0.05%
氢氧化钠 0.4%
山梨酸 1%
番石榴和椰子 0.3%
H2O 余量%
实施例2：在一个特定实施例中，本发明采用了下列配方的霜剂形式：
成分 w/w
MBBT 6%
DHHB 6%
EHT 2%
APIFIL 11%
LABRAFAC 14.5%
橄榄油 6%
醋酸生育酚 0.5%
羟乙基纤维素 0.2%
EDTA 0.05%
氢氧化钠 0.4%
山梨酸 1%
薰衣草 0.3%
H2O 余量%
实施例3：在一个特定实施例中，本发明采用了下列配方的霜剂形式：
Ingredients w/w
MBBT 8%
DHHB 8%
EHT 3%
APIFIL 10%
LABRAFAC 13.5%
橄榄油 5%
醋酸生育酚 0.5%
羟乙基纤维素 0.2%
EDTA 0.05%
氢氧化钠 0.4%
山梨酸 1%
橘桔 0.3%
H2O 余量%
实施例4：组合物的制备
组合物的制备过程如下所述：
表1中所示的相1和相3采用搅拌器在65℃下共同溶解。相2在相同温度下单独溶解，并总是持续搅拌。当达到相同温度时，将相2加入相1+3中，将其整体在65℃下混合数分钟。为获得具有均匀稠度的产品，混合在室温下进行，且仅在混合结束时才加入相4。对按此制备的三种化合物进行如本发明的实验部分所述的测试。
表1.制备具有不同SPF的三种实施例1、2和3的组分。
Figure BDA0000482698000000091
方法和实验数据
3.1.研究区域
野外试验是在印度尼西亚西拉丹岛奥龙度假村的海洋生物实验室（the Marine BiologyLaboratory of Onong Resort，Siladen Island，Indonesia）进行的。研究区域位于布纳肯国家公园（Bunaken National Park）中心，该公园被认为是世界上最重要的海洋保护区（MarineProtected Areas）之一。布纳肯国家公园位于一个大致环抱菲律宾、印度尼西亚和大堡礁的造礁珊瑚生物多样性三角区的中心。该珊瑚三角区中，黄藻珊瑚物种记录总数为约605种（Veronet al.，2009），其中66%普遍存在于该区域的所有生态区中。该区域的生态多样性总计达到世界种类总数的76%。目前在印度尼西亚群岛被记述的珊瑚品种已有约450种。布纳肯国家公园及邻近水域供养着多种多样的造礁（制造珊瑚礁）珊瑚群落，包括超过390个品种、63个属和15个科的硬珊瑚，还包括一些至今未记录的品种。这些珊瑚形成了按照深度、坡度和其他环境因素广泛分布的不同群落类型。该区域供养着由范围广泛的珊瑚品种组成的各种对该地域具有重要意义的种群，包括约20种世界珍稀品种。布纳肯国家公园展现出极高的位点内多样性。最丰富的位点中栖息着整个印度洋-太平洋地区中超过25-30%的造礁珊瑚品种。特别地，在研究区域中的最新研究发现，造礁珊瑚占了所有珊瑚品种的约90%，其中最高的珊瑚多样性发生在浅水中，可能与从礁石浅坡到脊顶再到礁坪的坡度、暴露和照明及其他因素的变化所导致的相对较高的栖息地异质性有关。最新研究报告，研究区域中出现许多鹿角珊瑚（Acropora）属的地方种（Wallace et al.，2001）。鹿角珊瑚属是西拉丹岛周围珊瑚礁中的一个较大的分类群，是多样性最高的造礁珊瑚属，其中包括114个遍及全球的品种和91个居于印度尼西亚群岛的品种（Wallace，1999）。像鹿角珊瑚这样的“构建种”是生态系统的关键组成部分，其丰度的变化对整个珊瑚礁群落的动态至关重要（Connell et al.，1997）。鹿角珊瑚种在许多当代印度尼西亚珊瑚礁的品种构成和丰度中都起到主导作用。
3.2.实验设计
在石珊瑚Acropora sp的小穗（即约3-6cm的小枝）上实施原地实验。令小穗与已知浓度的各种可能包含在所述生态兼容防晒霜组合物中的成分在微生态系统中共同培养。特别地，珊瑚小穗（各包括超过3000珊瑚虫）是由潜水员从深度约3m且位于珊瑚礁斜坡边缘上的同一群落中收集来的。以镊子对小穗进行采样，然后以通过0.02-μm滤纸过滤的海水进行清洗，以消除病毒和原核生物。对每个微生态系统，将一套小穗重复样本（n=3）浸入装有2L过滤海水的无菌聚乙烯袋中（Whirl-pack，Nasco公司，阿特金森堡，威斯康辛州，美国）；为试验20种成分及其各自的阳性和阴性对照系统，一共制备了27个微生态系统。实验处理、所用化合物浓度和控制系统如表2所述。在原地温度和光线条件下培养微生态系统72小时。
表2.微生态系统、处理类型、所用化合物浓度和培养时间列表。
Figure BDA0000482698000000111
实验中采用了阴性和阳性对照系统（对照）。阴性对照系统中加入了一种物质，即抗生丝裂霉素C，其能触发病毒感染，与目前市场上所有霜剂的使用中发生的情况相同。因此，其可以用来指示一种化合物的不良反应水平。阳性对照系统，标记为BLK PG和BLK，则仅是未添加任何化合物的微生态系统。
表3.受试过滤物浓度
过滤物 最高浓度 低SPF 中SPF 高SPF
MBBT 10% 4 6 8
DHHB 10% 4 6 8
EHT 5% 1 2 3
3.3.病毒丰度和原核生物丰度的测定
在实验开始（T0）和培养3和6小时后收集珊瑚小穗周围的海水子样本（15ml）。将采集的海水子样本转移到无菌试管中，不加固定剂，在-20℃下保存，直至进行病毒丰度和原核生物丰度的实验室定量分析。一旦抵达实验室，立即对海水样本进行处理。简要来说，取200μL海水，以1：10的比例用粗滤过的MilliQ水稀释，以0.02-μm孔径的滤纸（Anodisc滤纸;直径为25-mm，Al2O3;沃特曼（Whatman）公司）过滤，然后以20μL SYBR Green染料（储备液按1:20稀释;英杰（Invitrogen）公司，卡尔斯班，加利福利亚，美国）。将滤纸在黑暗中培养15分钟，然后置于玻璃片上，并滴加一滴由50%磷酸缓冲液（6.7mM，pH7.8）和50%含有0.25%抗坏血酸的丙三醇组成的抗荧光衰减封片剂（Shibata et al.2006;Helton et al.2006;Wen et al.2004）。将载片在-20℃下保存，直至进行显微镜分析。通过荧光显微镜（放大倍数：×1000;Zeiss Axioplan）检查至少10个光场，即每个重复样本中的至少200个细胞或病毒，来获得病毒和原核生物计数。病毒（和原核生物）富集度计算为病毒（和原核生物）丰度以及实验结束时的病毒（和原核生物）丰度的比例。
3.4黄藻计数
在实验开始（T0）和培养6、12、24、36、48和72小时后收集珊瑚小穗周围的海水子样本（50ml）。以3%的戊二醛对子样本进行固定，然后取每个重复样本约6.0ml，以2.0-μm的聚碳酸酯滤纸进行过滤。将滤纸装在玻璃片上，使用标准光和UV光在荧光显微镜（ZeissAxioplan，Carl Zeiss公司，耶拿，德国;×400和×1000）下对黄藻进行计数。基于颜色、自体荧光和总细胞结构，从小穗排出或提取的黄藻被划分为：a）健康（H，棕色/亮黄色，完整/状况良好的黄藻）；b）浅色（P，淡黄色，空泡化，部分分解的黄藻）；透明（T，缺乏色素的空黄藻；Mise and Hidaka2003）。
3.5珊瑚白化的定量
为了对珊瑚白化水平进行定量（Siebeck et al.2006），在实验伊始及培养6、12、24、36、48和72小时后对珊瑚拍摄数码照片，并对照片实施了比色定量分析。照片是在与CanonPowerShot A620数码相机（佳能公司，东京，日本）等同的照明亮度下拍摄的，且在地面上放有比例尺。用照片编辑软件（Adobe Photoshop CS2）对照片上的色彩构成[蓝绿色、洋红色、黄色、黑色（CMYK）]进行了成功分析。以实验开始时和结束时珊瑚颜色的区别来测量白化水平。对不同颜色成分（CMYK）百分比的变异进行单因素方差分析（ANOVA）。为了对受试化合物的白化效果进行排名，用Primer5.0软件（Primer-E有限公司，普利茅斯，英国）对受试珊瑚的CMYK颜色成分变化进行Bray–Curtis相似性矩阵（Bray–Curtis similaritymatrix）和多维标度分析（multidimensional scaling analysis）。使用Primer5.0软件（Primer-E有限公司）的SIMPER工具，以受试珊瑚和对照珊瑚的CMYK颜色成分相异百分比来测量白化率。
4.实验结果
4.1.病毒和原核细胞丰度
培养实验中，病毒丰度显著增加了约1个数量级。系统BLK PG和D08的病毒富集度在1.9-37.4之间（图1）。实验结束时，病毒丰度在0.44-31.2x105病毒个数·ml-1之间，其端值分别出现在系统BLK PG和D15中。培养实验中，原核生物丰度增加了1-2个数量级。原核生物富集因子在宽范围内波动（图2）。在系统BLK PG中观察到最低富集因子（1.88），而系统D11的富集因子为78.16。除系统D07和BLK外，所有系统都在培养后观察到病毒和原核生物丰度比例（VPR）的轻微降低，系统D07和BLK中的VPR则不随时间变化。系统D22中的VPR降低了10倍。
4.2.黄藻丰度
培养初始，微生态系统中未发现排出黄藻。所有受试微生态系统中，黄藻数量随时间增长。珊瑚小穗周围的水环境中黄藻最终丰度范围在0.85-4.45x104cell ml-1之间，其中端值分别出现在系统D11（加入Joyful60029MC）和D18（加入L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐）（图3a，b，c，d，e）。
在某些情况下，受试系统中排出黄藻的丰度低于对照系统。统计分析表明，仅系统D15、D16、D17和D18中的排出细胞丰度显著高于BLK系统（P<0.01）。对所有其他化合物而言，对照系统和受试系统之间没有显著差异，暗示试验系统（D15、D16、D17和D18除外）中受试化合物的存在未增加珊瑚的黄藻排出速率。
微生态系统分析中，所观察到的黄藻分为如“材料和方法”一节中所述的三个主要类别（健康、浅色和透明）。培养结束时，珊瑚小穗周围的水环境中的三个类别具有不同的丰度（图4）。在所有试验系统中，浅色和透明的黄藻都是主导类别，平均占排出黄藻总量的44%和55%。健康黄藻总是属于较小的百分比，其范围在0-21%之间。
健康细胞的低丰度暗示，该实验的培养时间对所有受试系统中的黄藻带来了高水平的损害，包括阴性对照（BLK）系统。
4.3.珊瑚白化
每个微生态系统（包括对照系统）的所有重复样本中，都在培养的最初48小时内观察到了珊瑚粘液（包含黄藻和珊瑚组织）的排放。该观察结果与第4.2节中所述的黄藻排出结果一致。珊瑚碎片排放粘液可能与微生态系统的采样和准备中发生的机械应力有关。所有微生态系统（包括BLK系统）培养72小时后，都在珊瑚小穗上观察到轻微的颜色变化，可能是培养带来的压力所导致的结果。系统D18和MITO中观察到的变化最为明显，其中所有4种颜色通道都在培养结束时发生了显著改变。在系统D05、D08和BLK PG中，4种颜色通道中的3种都发生了改变。在其他所有系统中，有2种或1种颜色通道表现出显著变化。系统D03、D09、D10、D11、D21、D21表现出2种颜色通道的变化，而系统D01、D04、D05、D13、D14、D19、D20和BLK表现出仅1种颜色通道变化。在所有其他试验系统中，未在受试小穗上发现颜色变化。
4.4暴露在UVA光线下的防晒霜耐光性（～275kJ/m 2 ）
将2mg cm-2霜剂涂抹在玻璃片（5x5cm）上，并将其暴露在UVA光线下。
UVA的吸光度为320-400nm（DHHB过滤物的对应峰值），相对于UVB的吸光度290-320nm（EHT过滤物的对应峰值）来说过高。UVA吸光度应当在UVB的1/3左右。
广谱过滤物MBBT的光谱不可见，因为MBBT的消光系数低于DHHB和EHT，因此被后者的吸光度掩盖。MBBT应当表现为无最大和最小峰值的广谱。
此时，所得吸光度处于具有高SPF和低SPF的防晒霜的范围之内。
根据实验结果，可以得出结论：这些过滤物具有高度光稳定性。
4.5受试产品与珊瑚礁生态兼容性的测试标准小结
为了在每组化合物（即：底霜、芳香剂、抗氧化物和过滤物）中筛选最具有生态兼容性的产品，采用了以下标准：
1、珊瑚白化水平；
2、共生黄藻排出程度；
3、黄藻健康状况；
4、培养介质相对于对照的细菌富集度。
表4.按类别分组的生态兼容化合物简表
化合物组别 成分 生态兼容性
基础霜 类型1 高度兼容
类型2 兼容
类型3 兼容
芳香剂 番石榴&椰子 高度兼容
橘桔 兼容
薰衣草 兼容
葡萄柚 兼容
Antioxidants 醋酸生育酚 高度兼容
生育酚 高度兼容
视黄醇 兼容
多元酚-60 兼容
棕榈酸视黄酯 兼容
UV filters MBBT 高度兼容
DHHB 高度兼容
EHT 兼容
表5.培养期间的病毒丰度和富集度；培养时间（Incub.）、病毒总丰度（TVN）以及病毒富集因子（VEF）；所有数据均包含标准差（STD）和变异系数。
Figure BDA0000482698000000151
Figure BDA0000482698000000161
表6.培养期间的细菌丰度（细菌总数，TBN）及相关标准差和变异系数。
Figure BDA0000482698000000171
Figure BDA0000482698000000181
表7.各微生态系统中排出黄藻的健康个数、浅色个数和透明（即死亡）个数（单位：细胞个数/每毫升）。
体系 总数 STD CV 健康 STD CV 浅色 STD CV 透明 STD CV
D01 1.16E+04 2.93E+03 25.3 1.41E+03 9.22E+02 65.5 6.78E+03 9.51E+02 14.0 3.42E+03 1.07E+03 31.1
D02 1.81E+04 2.51E+03 13.9 3.35E+02 1.16E+02 34.6 6.11E+03 4.19E+02 6.9 1.17E+04 2.82E+03 24.1
D03 1.56E+04 2.92E+03 18.7 7.04E+02 1.42E+02 20.2 9.73E+03 2.62E+03 26.9 5.43E+03 2.01E+02 3.7
D04 1.28E+04 5.81E+02 4.5 2.68E+03 9.08E+02 33.8 5.90E+03 1.11E+03 18.8 4.23E+03 1.22E+03 29.0
D05 1.03E+04 1.45E+03 14.1 2.01E+02 0.00E+00 0.0 2.62E+03 7.26E+02 27.7 7.51E+03 8.13E+02 10.8
D06 1.81E+04 3.12E+03 17.2 6.04E+02 4.03E+02 66.7 8.45E+03 1.84E+03 21.8 9.06E+03 1.22E+03 13.5
D07 1.15E+04 7.26E+02 6.3 8.72E+02 2.32E+02 26.6 4.63E+03 1.01E+03 21.7 5.97E+03 3.07E+02 5.1
D08 1.44E+04 2.13E+03 14.8 9.39E+02 2.32E+02 24.7 4.90E+03 7.07E+02 14.4 8.59E+03 1.21E+03 14.1
D09 1.31E+04 6.97E+02 5.3 1.34E+03 3.07E+02 22.9 1.18E+04 1.80E+03 15.3 4.03E+02 0.00E+00 0.0
D10 1.38E+04 4.65E+02 3.4 1.74E+03 3.07E+02 17.6 5.43E+03 1.01E+03 18.5 6.57E+03 8.13E+02 12.4
D11 8.45E+03 1.98E+03 23.4 2.01E+02 0.00E+00 0.0 2.88E+03 1.23E+03 42.6 5.43E+03 7.26E+02 13.4
D12 1.18E+04 6.47E+02 5.5 6.71E+01 1.16E+02 173.2 5.64E+03 7.26E+02 12.9 6.11E+03 6.47E+02 10.6
D13 1.71E+04 2.82E+03 16.5 6.71E+02 3.07E+02 45.8 6.31E+03 1.83E+03 29.0 1.01E+04 1.37E+03 13.5
D14 2.22E+04 1.82E+03 8.2 2.42E+03 6.04E+02 25.0 6.84E+03 1.07E+03 15.6 1.29E+04 1.31E+03 10.1
D15 2.48E+04 3.39E+03 13.7 1.07E+03 3.07E+02 28.6 9.33E+03 1.86E+03 19.9 1.44E+04 2.62E+03 18.2
D16 2.67E+04 1.74E+03 6.5 4.09E+03 6.47E+02 15.8 1.25E+04 1.91E+03 15.2 1.01E+04 4.03E+02 4.0
D17 4.45E+04 8.77E+02 2.0 1.48E+03 4.19E+02 28.4 1.88E+04 1.56E+03 8.3 2.42E+04 1.98E+03 8.2
D18 2.11E+04 1.34E+03 6.4 1.14E+03 4.19E+02 36.7 1.09E+04 1.60E+03 14.7 9.06E+03 1.94E+03 21.4
D19 1.23E+04 2.40E+03 19.5 1.07E+03 1.16E+02 10.8 5.30E+03 1.14E+03 21.6 5.97E+03 1.23E+03 20.6
D20 1.46E+04 6.47E+02 4.4 6.04E+02 2.01E+02 33.3 7.18E+03 1.23E+03 17.1 6.84E+03 9.22E+02 13.5
D21 1.83E+04 2.29E+03 12.5 1.07E+03 3.07E+02 28.6 8.59E+03 1.48E+03 17.3 8.65E+03 5.33E+02 6.2
D22 1.80E+04 6.15E+02 3.4 4.70E+02 1.16E+02 24.7 6.91E+03 5.81E+02 8.4 1.06E+04 1.14E+03 10.8
D23 2.00E+04 2.03E+03 10.1 7.38E+02 1.16E+02 15.7 7.58E+03 6.15E+02 8.1 1.17E+04 2.62E+03 22.4
D24 1.89E+04 1.69E+03 9.0 2.68E+02 1.16E+02 43.3 8.39E+03 6.15E+02 7.3 1.02E+04 1.23E+03 12.1
D25 1.64E+04 1.31E+03 8.0 3.35E+02 1.16E+02 34.6 8.86E+03 1.57E+03 17.8 7.25E+03 7.26E+02 10.0
MITO 2.20E+04 4.22E+03 19.2 0.00E+00 0.00E+00 0.0 5.25E+03 4.33E+02 8.2 1.68E+04 3.88E+03 23.2
BLK 1.64E+04 1.31E+03 8.0 3.35E+02 1.16E+02 34.6 8.86E+03 1.57E+03 17.8 7.25E+03 7.26E+02 10.0
BLK PG 2.66E+04 1.54E+03 5.8 8.05E+02 2.01E+02 25.0 1.03E+04 8.13E+02 7.9 1.55E+04 8.77E+02 5.7
表8.微生态系统中排出黄藻的健康、浅色和透明百分比。
Figure BDA0000482698000000201
表9.珊瑚的不同颜色部分的单因素方差（one-way ANOVA）分析结果。概率指标：**=P<0.01;*=P<0.05;NS=不显著。
Figure BDA0000482698000000211
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Claims (11)

1.一种生态兼容的防晒霜组合物，包含：
一种或多种紫外线过滤物，所述紫外线过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）-4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚，2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯，乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶中提取的多酚类化合物；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
且所述防晒霜组合物不含以下物质：
对羟基苯甲酸酯类防腐剂；
抗坏血酸衍生物；
选自双乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪、肉桂酸、苯甲酮、樟脑衍生物和氧化钛的紫外线过滤物；
选自白千层精油、依兰花提取物、印度簕竹提取物和乳油木果脂的芳香剂；
选自动物衍生油脂和摩洛哥坚果油的载体。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，进一步包含一种或多种芳香剂，所述芳香剂选自：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，进一步包含山梨酸。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下物质组成：
一种或多种紫外线过滤物，所述紫外线过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚、2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯、乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶中提取的多酚类化合物；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下物质组成：
一种或多种紫外线过滤物，所述紫外线过滤物选自2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚，2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯，乙基己基三嗪酮；
一种或多种抗氧化物，所述抗氧化物选自醋酸生育酚、生育酚、视黄醇、以及从绿茶提取的多酚类化合物；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水。
6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚和/或2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯；
醋酸生育酚和/或生育酚；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水；
一种或多种芳香剂，所述芳香剂选自：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚和/或2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯；
醋酸生育酚和/或生育酚；
山梨酸；
一种或多种载体，所述载体选自丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油、蜂蜡；
水；
一种或多种芳香剂，所述芳香剂选自：橘桔、薰衣草、葡萄柚、番石榴和椰子；
羟乙基纤维素和/或EDTA和/或氢氧化钠。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，由以下物质组成：
2，2-亚甲基-双-（2H-苯并三唑-2基）4-（1，1，3，3-四甲基丁基）-苯酚、2-[4-二乙氨基-2-羟苯甲酰基]苯甲酸己酯和乙基己基三嗪酮；
醋酸生育酚；
山梨酸；
丙二醇二辛酸酯/二葵酸酯、橄榄油和蜂蜡；
水；
羟乙基纤维素；
EDTA；
氢氧化钠。
9.根据权利要求1至6任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物中所含的紫外线过滤物的质量百分比浓度为3-6%。
10.根据权利要求1至9任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物的形式为霜剂、乳液、软膏、喷雾剂、唇膏。
11.根据权利要求1至10任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物对海洋环境无害，尤其是对珊瑚礁无害。
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