CN103816118A - 一种多烯磷脂酰胆碱注射用组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种多烯磷脂酰胆碱注射用组合物及其制备方法,以甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺、胆固醇、注射用水、大豆油、甘氨酸-HCl缓冲溶液为原料,通过复方配伍制备得到多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,减少了安全隐患,提高了药效。
Description
技术领域
本发明涉及一种多烯磷脂酰胆碱注射用组合物及其制备方法,本发明属药物制剂领域的范畴。
背景技术
当患肝脏疾病时,肝脏的代谢活力受到严重损伤。多烯磷脂酰胆碱可提供高剂量、容易吸收利用的高能多烯磷脂酰胆碱,这些多烯磷脂酰胆碱的在化学结构上与重要的内源性磷脂一致。而磷脂是肝脏合成脂蛋白,从而把脂质从肝细胞转运到外周储存所必须的。缺乏磷脂由于脂蛋白合成受阻易导致脂肪肝。
多烯磷脂酰胆碱主要进入肝细胞,并以完整的分子与肝细胞膜及细胞器膜相结合,另外,可分泌入胆汁。因此多烯磷脂酰胆碱具有下列生理功能:通过直接影响膜结构使受损的肝功能和酶活力恢复正常;调节肝脏的能量平衡;促进肝组织再生;将中性脂肪和胆固醇转化成容易代谢的形式;稳定胆汁。
多烯磷脂酰胆碱注射液针对各种类型的疾病:肝炎、慢性肝炎、肝坏死、肝硬化、肝昏迷、、脂肪肝、胆汁阻塞、中毒、预防胆结石复发。还可用于手术前后的治疗(尤其是肝胆手术)、妊娠中毒、银屑病、神经性皮炎以及放射综合征。
当患肝脏疾病时,肝脏的代谢活力受到严重损伤。多烯磷脂酰胆碱注射液可提供高剂量容易吸收利用的高能多烯磷脂酰胆碱,这些多烯磷脂酰胆碱在化学结构上与重要的内源性磷脂一致,而且在功能上优于后者。它们主要进入肝细胞,并以完整的分子与肝细胞膜及细胞器膜相结合,另外,这些磷脂分子尚可分泌入胆汁。因此多烯磷脂酰胆碱注射液具有下列生理功能:通过直接影响膜结构使受损的肝功能和酶活力恢复正常。
孙安修等在《从纠纷病例谈合理用药》(中国临床医生2008年第36卷第10期,65-66页)提到:苯甲醇药理作用与危害苯甲醇具有局部止痛和防腐作用,可用于局部止痛及制剂的防腐。2%苯甲醇注射液作为青霉素、大观霉素等抗生素的溶媒,具有镇痛作用,可减少注射时的疼痛。2%苯甲醇注射液于20世纪70年代初在我国逐渐用于临床,作为青霉素溶剂使用,80年代中期前使用较为普遍。特别是用在儿童身上。苯甲醇浓度过高有刺激性,2%溶液对人和家兔红细胞作用2小时可产生溶血现象;对肌肉注射其刺激强度的顺序是:2%苯甲醇+青霉素>2%苯甲醇>0.5%苯甲醇+青霉素>生理盐水或注射用水+青霉素。2%苯甲醇主要是减轻注射时的疼痛,但注射的部位常在注射后产生硬结和刺激性疼痛,说明2%苯甲醇与青霉素联合应用不良反应对人体危害较大,有叠加现象。
苯甲醇可出现局部药品吸收不良,造成肌肉小范围变性、形成纤维瘢痕甚至肌肉组织坏死,或引起无菌炎症,从而引起臀肌挛缩。随着生长发育,一些行走姿势等功能就会受到影响。主要表现为步态异常,单侧臀肌挛缩呈跛行,双侧并列呈八字行,不能翘“二郎腿”。站立时双下肢轻度外旋,不能完全并拢。下蹲受限,双髋呈外展、外旋姿态。双膝分开呈现“蛙形腿”。
发明内容
由于市售多烯磷脂酰胆碱注射液中含有苯甲醇,新生儿和早产儿禁用。极少数病人可能对本品中所含的苯甲醇产生过敏反应。本发明的目的在于提供一种不含苯甲醇的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物。
具体而言,本发明的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,其特征在于:由如下原辅料制成:
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,由如下原辅料制成:
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,由如下原辅料制成:
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,其特征在于:由如下原辅料制成:
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物,其特征在于所述抗氧化剂选自维生素E、维生素C、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚中的一种或多种。
本发明目的还在于提供上述多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,按照如下制备方法制成:多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂,搅拌,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发0.5-2小时,形成均匀乳剂,配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,其特征在于所述继续减压蒸发的时间为1小时。
上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,其特征在于所述微孔滤膜过滤器孔径介于0.22-0.45μm之间。
本发明目的还在于提供上述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物在制备治疗肝脏疾病药物上的应用。
本发明涉及的甘氨酸-盐酸缓冲液的配制方法:50毫升0.2mol/L甘氨酸+5毫升0.2mol/L HCl,再加水稀释至200毫升。
本发明的发明点在于,避免采用刺激性较大、有过敏风险的苯甲醇作为辅料;疗效确切、安全性好。
具体实施方式
实施例1
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂维生素E,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1.5小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.22μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例2
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂维生素E,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例3
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂维生素C,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1.5小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.22μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例4
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂维生素C,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例5
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1.5小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.22μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例6
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂维生素E,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例7
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1.5小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.22μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实施例8
多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发1小时,形成均匀乳剂,在10000级的配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
实验例1
1仪器与材料
1.1仪器
ACS-A电子计重秤和BS600L电子天平(上海友声衡器有限公司);FA1004电子天平(上海良平仪器仪表有限公司);移液器(大龙医疗设备(上海)有限公司)。
1.2试药
0.9%氯化钠注射液(四川科伦药业股份有限公司,批号:C100606B1,规格:2.25g∶250mL);甲硫酸新斯的明注射液(郑州羚锐制药股份有限公司,批号:1303081,规格:1mg∶2mL);硫酸阿托品注射液(徐州莱恩药业有限公司,批号:1304152,规格:0.5mg∶1mL);卵白蛋白(美国Sigma公司,批号:A-5252,规格:每瓶10g);本发明实施例2
1.3动物
日本大耳白家兔6只,体重2.0~2.5kg,♀♂不限;豚鼠40只,体重300~400g,♀♂各半,均购于四川省实验动物专委会养殖场,生产许可证号:SCXK(川)2013-14。
2方法
2.1血管刺激性实验
2.1.1溶液的制备。取本发明实施例21.44mL,加0.9%氯化钠注射液稀释成48mL,作为受试溶液,其中本发明实施例2浓度为0.3mg/mL。另取硫酸阿托品注射液1.92mL和甲硫酸新斯的明注射液3.84mL,加0.9%氯化钠注射液稀释成48mL混合溶液,作为保护药物,其中药物浓度分别为硫酸阿托品0.02mg/mL、甲硫酸新斯的明0.04mg/mL。
2.1.2分组。取家兔6只,随机分为对照组和受试组,每组3只,受试组家兔编号为1、2、3,对照组家兔编号为4、5、6,♀♂不限。
2.1.3给药剂量的选择。为充分显示本发明实施例2对血管的刺激性,应选用最大的临床给药剂量作为参考。该品种临床使用分为负荷剂量与维持剂量,视手术情况而定,因此无固定剂量。其为肌松药,会造成呼吸抑制,综合考虑药物剂量和给药的可行性,一次使用剂量不能过大。预实验中发现,本发明实施例2肌松作用非常明显,呼吸抑制程度深,单次使用最大剂量(负荷剂量0.6mg/kg)后,即使使用大剂量的新斯的明和阿托品也无法恢复动物呼吸。考虑该品种药理作用的特殊性,本实验适当降低家兔给药剂量,定为负荷剂量的0.5倍,即0.3mg/kg。
2.1.4给药方法。受试组家兔注射本发明实施例2前,分别于每只家兔的股二头肌注射保护药物0.5mL/kg,15min后于家兔左耳耳缘静脉注射本发明实施例20.3mg/kg,同时在右耳耳缘静脉注射保护药物1mL/kg;对照组家兔于左耳耳缘静脉注射与本发明实施例2等体积的0.9%氯化钠注射液。每天给药1次,连续3d。
2.1.5观察指标。于每次给药前和给药后1、6h以及末次给药后48h,肉眼观察各组家兔注射部位血管有无变化、充血、出血、组织变性坏死等刺激反应。末次给药后48h,颈动脉放血处死家兔,于注射进针处近心端1cm处剪取2cm耳缘及血管,用福尔马林-酒精-醋酸混合固定液(FAA液)进行固定,常规脱水,石蜡包埋切片,苏木精-伊红(HE)染色,在光学显微镜下观察其病理学变化,包括表皮及真皮是否有变性、坏死、充血,耳静脉血管是否有血管壁坏死及炎细胞浸润、血管周围炎细胞浸润、血栓。
2.2全身主动过敏性实验
2.2.1溶液的制备。取本发明实施例21.44、0.48mL,分别用0.9%氯化钠注射液稀释至48mL,作为高、低剂量组溶液,其中本发明实施例2浓度分别为0.3、0.1mg/mL。取卵白蛋白,用0.9%氯化钠注射液制备成浓度2mg/mL的溶液。取硫酸阿托品注射液和甲硫酸新斯的明注射液,用0.9%氯化钠注射液稀释成混合溶液,其中硫酸阿托品和甲硫酸新斯的明的浓度分别为0.02和0.04(低剂量组给药前的保护药物剂量)、0.01和0.02(低剂量组给药时的保护药物剂量)、0.06和0.12(高剂量组给药前的保护药物剂量)、0.03和0.06(高剂量组给药时的保护药物剂量)mg/mL。
2.2.2分组。取豚鼠40只,按体重分为阴性对照组、阳性对照组和本发明实施例2高、低剂量组,每组10只,♀♂各半。
2.2.3给药方法。致敏给药:本发明实施例2高、低剂量组豚鼠注射本发明实施例2致敏前,分别肌肉注射对应给药前保护药物0.5mL/kg,15min后腹腔注射本发明实施例20.6、0.2mg/kg,注射完本发明实施例2后立即静脉注射对应给药时保护药物2mL/kg;阴性对照组和阳性对照组分别腹腔注射与本发明实施例2等体积的0.9%氯化钠注射液和卵白蛋白溶液。隔日致敏给药1次,共给药3次。激发给药:末次致敏给药后14d,本发明实施例2高、低剂量组豚鼠注射本发明实施例2激发前,分别肌肉注射对应给药前保护药物0.5mL/kg,15min后于豚鼠足背静脉注射本发明实施例21.8、0.6mg/kg,注射完本发明实施例2后立即静脉注射对应给药时保护药物2mL/kg;阴性对照组和阳性对照组分别静脉注射与本发明实施例2等体积的0.9%氯化钠注射液和卵白蛋白溶液。激发给药1次。
2.2.4观察指标。每次致敏给药和激发给药后观察各组豚鼠有无过敏反应症状。致敏期间每天观察每只豚鼠的症状。初次致敏、最后一次致敏和激发当天测定每只豚鼠的体重。详细观察激发给药后30min内每只豚鼠的反应、过敏反应症状的出现及消失时间,最长观察3h。按过敏反应评价标准进行评级。过敏反应症状详见表1;过敏反应评价标准详见表2。
2.3数据处理
计数资料采用Fisher精确检验法统计,计量资料采用t检验统计。P<0.05表示差异具有显著性。
3结果
3.1家兔血管刺激性实验
结果表明,在阿托品和新斯的明的保护下,本发明实施例2对家兔无明显肉眼可见的血管刺激性,对其静脉血管无病理性损伤。
3.2豚鼠全身主动过敏性实验
致敏期间各组豚鼠无过敏反应症状。激发后,本发明实施例2高、低剂量组以及阴性对照组豚鼠无死亡现象发生,阳性对照组豚鼠有1只死亡。致敏和激发时各组豚鼠体重均有所增加,各组比较有显著性差异(P<0.05)。
Claims (9)
5.根据权利要求1-4任一所述的注射用组合物,其特征在于所述抗氧化剂选自维生素E、维生素C、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚中的一种或多种。
6.根据权利要求1-5所述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,其特征在于:按照如下制备方法制成:多烯磷脂酰胆碱加入注射用水,将甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和胆固醇加入大豆油,室温溶解,待溶解后,将以上两种液体混合后加入抗氧化剂,搅拌,探头超声形成初乳,置于密闭容器中,室温下减压旋转蒸发至形成胶态,另取甘氨酸-HCl缓冲溶液加入密闭容器,继续减压蒸发0.5-2小时,形成均匀乳剂,配滤室内,将已配好的乳剂用蠕动泵输送至己安装好的微孔滤膜过滤器,进行除菌过滤,开始的滤液立回流至原液桶中,待澄明度检查合格后,药液用已高压灭菌的血清瓶接收;除菌完毕后,药液移入灌装室,灌装,即得。
7.根据权利要求6所述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,其特征在于所述继续减压蒸发的时间为1小时。
8.根据权利要求6所述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物的制备方法,其特征在于所述微孔滤膜过滤器孔径介于0.22-0.45μm之间。
9.权利要求1-6所述的多烯磷脂酰胆碱注射用组合物在制备治疗肝脏疾病药物上的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140528 |