CN103814015A - 用于治疗糖皮质激素受体介导的障碍的吲唑基酰胺衍生物的结晶形式 - Google Patents

Abstract

本发明涉及2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)-吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺的结晶形式、用于获得它们的方法、在它们制备中所使用的药物中间体、含有它们的药物组合物和它们在医学治疗中的用途。

Description

用于治疗糖皮质激素受体介导的障碍的吲唑基酰胺衍生物的结晶形式

技术领域

本发明涉及药物的新固态形式、含有它们的药物组合物以及用于获得它们的方法和所述新固态形式和含有它们的组合物在医学治疗中的用途。

背景技术

在药物组合物的配制中，希望药品为可易于处理及加工的形式。这一点不但从获得商业上可行的制造工艺的观点而言是重要的，而且从后续制造包含该活性化合物的药物制剂的的观点而言也是重要的。具体地，经配制用于吸入给药的药物组合物必须为允许实施适当加工技术(例如微粉化)和允许用适当的递送装置(例如干粉吸入器、计量吸入器、雾化器或鼻腔递送装置)递送的形式。

活性成分的化学稳定性、固态稳定性及“保存期限”也是非常重要的因素。药品以及含有其的组合物应当能够在相当长的时间内被有效贮存，而不展现活性组分的物理化学特性(例如其化学组成、密度、熔点、吸湿性和溶解度)的显著改变。

此外，也希望能够提供为尽可能化学上纯的形式的药物。

此外，已显示在给药于患者后，结晶的药物化合物提供更可靠和可再现的血浆浓度分布。

此外，化合物的不同结晶形式可表现出不同的物理化学特性例如熔点、溶解度和吸湿性。

此外，化合物的不同结晶形式可表现出不同的药代动力学特征，例如总的肺暴露、总的肺滞留、总的血液暴露、血浆暴露峰值和口服生物利用度。

此外，希望的是药物物质为热力学稳定的形式，目的是预防在所述制造或配制过程中或在向患者给药过程中或在给药后转化成另一种可选择形式的风险或使所述风险最小化。

无定形或半无定形物质在这方面可能存在显著的问题。例如，所述物质因不可靠的溶解度而通常难以处理及配制，且经常发现其为不稳定的以及化学上不纯的。

本领域技术人员将理解，如果一种药物能够容易地以稳定晶形存在，则可解决以上问题。

因而，在商业上可行以及药学上可接受的药物组合物的制造中，希望尽可能地提供基本上结晶且稳定形式的药物。

然而，需注意到并非总是可以实现该目标。通常的确不可能仅从分子结构预测化合物的结晶行为将如何。这通常只能凭经验来确定。

国际专利申请WO2008/076048披露了许多化合物，所述化合物已被发现作为糖皮质激素受体的调节剂是有用的，所述调节剂为通式(I)及其药用盐，所述通式(I)为:

(其中R¹、R^la、R²、R³、R⁴、R^x、A、W、X、Y和Z具有WO2008/076048说明书所给出的含义)。

WO2008/076048的实施例6还披露了具体化合物2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(下文中称作化合物(I))。通过WO2008/076048中描述的操作获得的化合物(I)是非结晶的。

发明内容

我们已发现，可制备结晶形式的化合物I，包括化合物(I)的新的热力学稳定的结晶形式或其药用盐。

因此，本发明一个方面提供基本结晶形式的化合物(I)或其药用盐。

本发明一个方面提供基本结晶形式的化合物(I)。

本发明一个方面提供化合物(I)的形式A。

在本发明的一个方面中，化合物(I)的形式A为基本结晶的。

在本发明的另一个方面中，化合物(I)的形式A为结晶的。

本发明一个方面提供化合物(I)的形式B。

在本发明的一个方面中，化合物(I)的形式B为基本结晶的。

在本发明的另一个方面中，化合物(I)的形式B为结晶的。

下面进一步详细描述化合物(I)的形式A和B。

在一定程度上，化合物(I)的任一种结晶形式可按溶剂化物存在，所述溶剂化物形成了本发明的一部分。化合物(I)的溶剂化物包括水合物和醇化物(例如丙醇溶剂化物和异丙醇溶剂化物)。

本发明另一方面提供化合物(I)的基本结晶的无水物(anhydrate)形式。在另一方面中，化合物(I)不是盐形式。在另一方面中，化合物(I)不是溶剂化物形式，即，其为“非溶剂化物(ansolvate)”。因此，术语“无水物”包括“非溶剂化物”。

我们已发现，化合物(I)可按性质上为基本结晶的形式获得。当本申请提及本发明化合物为晶体或结晶形式时，通过X-射线粉末衍射数据所确定的结晶度(degree of crystallinity)适当地为例如大于约60%，例如大于约80%，具体地大于约90%，更具体地大于约95%。在本发明的实施方案中，通过X-射线粉末衍射数据所确定的结晶度的程度大于约98%，其中结晶度(%crystallinity)是指总样品物质中结晶的重量%。

本申请上文提到，化合物(I)可按为无水物的结晶形式来制备。这意味着所述结晶形式含有小于10%的一种或多种水合物形式(例如，一水合物)的化合物(I)。

在本发明的另一方面中，化合物(I)的形式A和形式B为无水物结晶形式。

化合物(I)的形式B

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有以下位置(2-θ°)的峰：9.2，17.4和21.5。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有以下位置(2-θ°)的峰：9.2，11.8，15.7，17.4和21.5。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有如本申请下文表1中所述的位置(2-θ°)的峰。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图基本如图1所示。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于差式扫描量热曲线(在密闭的铝杯中在氮气气氛中，加热速度为每分钟5℃)表现出约109℃的熔化吸热起始温度。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于基本如图2中所示的差式量热曲线。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于差式扫描量热曲线是在密闭的铝杯中在氮气气氛中以每分钟5℃的加热速度测量的，并且表现出约109℃的熔化吸热起始温度和/或用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有以下位置(2-θ°)的峰：9.2，11.8，15.7，17.4和21.5。

在另一个方面中，化合物(I)的形式B的特征在于基本如图2所示的差式量热曲线和/或基本如图1所示的X-射线粉末衍射图。

适当的，本发明化合物的结晶变化形式(crystalline modification)基本不含所述化合物的其它结晶变化形式。例如，在一个实施方案中，化合物(I)的形式B基本不含化合物(I)的形式A。适当地，基本不含化合物(I)的其它结晶变化形式的化合物(I)的所述结晶变化形式包含小于例如20重量%，15重量%，10重量%，5重量%，3重量%或特别是小于1重量%的该化合物的其它结晶形式。

化合物(I)的结晶无水物可如本申请所述通过用一种或多种适当的溶剂或它们的混合物结晶化合物(I)来制备。

无水物可通过用基本不含水的溶剂系统(其可以是已被干燥过和/或可以是已在所述结晶过程中被干燥)结晶来制备。溶剂可在结晶过程中被干燥，例如通过降低待结晶的化合物于适当有机溶剂/含水溶剂系统中的混合物中的含水量(例如，通过增加所存在的有机溶剂的量和/或通过形成共沸混合物在连续蒸馏的条件下除去水)。然而，化合物(I)的结晶无水物也可用水和/或水/醇混合物来制备。

无水物形式的本发明化合物通常含有不多于2%，具体地不多于1%，更具体地不多于0.5%和更具体地不多于0.2%(w/w)的水，而不论所述水是否是结合的(结晶水或其它形式)。

为了确保所制备的本申请所述的结晶形式中不存在其它结晶形式，结晶可如下进行：通过在不存在其它结晶形式的晶核和/或籽晶(seed crystals)的情况下用所期望结晶形式的晶核和/或籽晶进行引晶。

本领域技术人员会理解的是，待结晶的化合物于溶液中的浓度和所用的溶剂系统可影响结晶温度和结晶时间。

于任意给定的温度下，不同的结晶形式在不同的有机溶剂中可能具有不同的溶解度。在该方面中，上述或其它溶剂可被用作"抗溶剂"(即，本发明化合物难溶(poorly soluble)其中的溶剂，但所述溶剂可与本发明化合物较易溶于其中的另一种溶剂混溶)，并可因此有助于所述结晶过程。

正如本领域技术人员所理解的，所得到的结晶形式既依赖于所述结晶过程的动力学又依赖于所述结晶过程的热力学。在某些热力学条件下(溶剂系统、温度、压力和本发明化合物的浓度)，一种结晶形式可能比另一种结晶形式(或事实上任一种其它结晶形式)更稳定。然而，相比之下可能具有相对低热力学稳定性的其它结晶形式可能是动力学有利的。因此，动力学因素例如时间、杂质分布、搅动、晶种存在与否等也额外可能影响出现哪种形式。因此，本申请讨论的操作也可由本领域技术人员视需要进行调整，目的是获得化合物(I)的具体结晶形式。

可用标准技术干燥本发明化合物。本领域技术人员理解的是，干燥温度和干燥时间可影响本发明化合物的固态性质和/或固态形式。例如，脱水可在低湿度和/或升高的温度和/或降低的压力下发生。因此，本发明化合物的结晶无水物也可通过使水合物脱水来形成。

制备化合物(I)的结晶形式

本发明另一个方面提供制备本发明化合物的方法，所述方法包括用适当的溶剂系统从化合物(I)的溶液、悬浮液或浆液中使化合物(I)结晶。在所述方法中，重要的是使所述溶液、悬浮液或浆液混合足够长的时间。时间长度依赖于饱和水平，其中高饱和的溶液可在数小时或一天或两天内结晶，而较低饱和的溶液可需要较长时间(例如一周或更长时间)。

适当的混合(例如通过搅拌)被认为是重要的，可能是因为其产生用于初级核化以及次级核化的位点，因此加速了所述结晶过程。如果籽晶是可得到的，则将籽晶(待结晶的形式的籽晶)加至所述溶液、悬浮液或浆液中将加速所述结晶过程，因为用于初级核化的时间会因此缩短。因此，本发明的另一个方法制备本发明化合物，所述方法包括用适当的溶剂从所述化合物的溶液、悬浮液或浆液中使化合物(I)结晶，其中使用相关化合物的晶种来引发和/或促进结晶。适当的溶剂包括醇(例如乙醇、丙醇和异丙醇)、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、含水系统和它们的适当混合物(例如，水/丙醇、水/异丙醇)。其它适当的溶剂包括醚溶剂(例如，甲基叔丁基醚)。也可根据情况使用抗溶剂(例如庚烷)。本发明的具体方法包括使用有利于晶体聚集的两溶剂系统，即使用良溶剂(good solvent)和抗溶剂，例如使用良溶剂1-丙醇和抗溶剂正庚烷或使用良溶剂甲基叔丁基醚和抗溶剂正庚烷。

化合物(I)的形式B可通过在适当的溶剂系统中结晶无定形形式的化合物(I)来制备。因此，在本发明的一个方面中，将无定形形式的化合物(I)悬浮在适当的溶剂系统中或将其在适当的溶剂系统中浆化(或部分溶解)，之后将所述悬浮液或浆液加热，然后使其冷却。在另一个方面中，将所述悬浮液或浆液加热至足够的温度以使化合物(I)溶解，然后使其冷却。在另一个方面中，将所述悬浮液或浆液加热至至少75℃(例如至少80℃，例如约87℃)。在另一个方面中，所述溶剂系统包括不会导致在室温形成化合物(I)的溶剂化物的任何适当的溶剂或溶剂的混合物。在另一个方面中，所述溶剂系统可包括化合物(I)仅部分(或至少部分)溶于其中的那些溶剂系统。在另一个方面中，所述溶剂系统包括两溶剂系统，所述两溶剂系统包含良溶剂和抗溶剂。在另一个方面中，所述溶剂系统包含极性有机溶剂例如醇类(例如低级烷基醇，例如C_1-6醇如1-丙醇或异丙醇)或乙酸酯类(例如乙酸异丙酯)和烷烃抗溶剂例如庚烷。在另一个方面中，所述溶剂系统包含乙酸异丙酯和正庚烷。在另一个方面中，正庚烷占在所述溶剂系统中使用的总溶剂的至少75%w/w(例如，至少85%，例如约90%)。即，所述溶剂系统可含有至多25%w/w(例如，最多15%，或约10%)的乙酸异丙酯。

化合物(I)的形式B的结晶也可通过添加形式B的籽晶(如果可获得)得以促进。因此，本发明的一个方面提供通过所述引晶方法可获得的结晶形式。为了通过该方法获得形式B，可将无定形形式的化合物(I)悬浮在适当的溶剂系统(溶剂系统V)中或将所述无定形形式的化合物(I)在适当的溶剂系统(溶剂系统V)中浆化(或至少部分溶解在适当的溶剂系统中(溶剂系统V))，之后添加形式B的晶种(例如，0.2%w/w至1.5%w/w，例如0.5%w/w至1.0%w/w如0.5%w/w)，然后任选添加抗溶剂(抗溶剂W)。在本发明的另一个方面中，溶剂系统V包括不导致形成化合物(I)的溶剂化物的任何适当的溶剂或溶剂的混合物。在另一个方面中，溶剂系统V可包括化合物(I)仅部分(或至少部分)可溶于其中的那些溶剂系统。在另一个方面中，溶剂系统V包括两溶剂系统，所述两溶剂系统包含良溶剂和抗溶剂。

在一个实施方案中，溶剂系统V包含极性有机溶剂例如醇类(例如低级烷基醇如C_1-6醇)和烷烃抗溶剂例如庚烷。在另一个方面中，溶剂系统V包含1-丙醇和正庚烷。在另一个方面中，正庚烷占在溶剂系统V中使用的总溶剂系统的至少50%w/w(例如，至少60%，如约70%)。即，溶剂系统V可含有至多50%w/w(例如，至多40%，或约30%)的1-丙醇。在另一个方面中，抗溶剂W为烷烃抗溶剂例如正庚烷。在本发明的另一个方面中，将溶剂系统V加热，然后冷却，接着加入籽晶，进一步使所述混合物冷却，然后加入抗溶剂W。在另一个方面中，将溶剂系统V加热至至少55℃(例如至少60℃，例如约65℃)，然后使其冷却至40℃至50℃(例如，45℃至50℃，例如约50℃)，接着加入形式B的籽晶(例如，0.2至1.5%w/w，例如0.5至1.0%w/w，例如0.5%w/w)并将混合物逐渐冷却至至少室温(例如至少25℃，例如至少15℃，例如至少8℃)。

在本发明的另一个实施方案中，溶剂系统V包含醚有机溶剂和烷烃抗溶剂例如庚烷。在另一个方面中，溶剂系统V包含甲基叔丁基醚和正庚烷。在另一个方面中，正庚烷占在溶剂系统V中使用的总溶剂系统的至少20%w/w(例如，约30%)。即，溶剂系统V可含有至多80%w/w(例如，至多约70%)的甲基叔丁基醚。在另一个方面中，抗溶剂W为烷烃抗溶剂例如正庚烷。在本发明的另一方面中，将溶剂系统V加热，然后冷却，接着加入籽晶。在另一个方面中，将溶剂系统V加热至至少30℃(例如约35℃)，然后使其冷却至20℃至25℃(例如约21℃)，接着加入形式B的籽晶。

在本发明的另一个实施方案中，本申请提及的化合物(I)的无定形形式是经由实施例1步骤(ii)至(vii)中描述的路线合成的。

术语"悬浮"和"浆化"(或"部分溶解")是本领域技术人员容易理解的。例如，为了形成悬浮液或浆液，加入过量的固体物质(相对于其在所述溶剂中的溶解度)，从而使在整个"悬浮"或"浆化"操作过程中在溶剂系统中存在(未溶解的)固体。

化合物(I)的结晶形式B也可通过用化合物(I)的形式B的晶种对化合物(I)的可选择形式(本申请下文中称作"形式A")于溶剂系统中的悬浮液进行引晶来制备。化合物(I)的形式A的制备描述在下面实施例4和实施例5中。形式A的X-射线粉末衍射图特征峰列表显示于下面表2中，和X-射线粉末衍射衍射图显示于下面的图3中。化合物(I)的形式A的特征性差式量热曲线显示于下面的图4中。

本申请进一步提供的是可通过所述(结晶)转化方法获得的化合物(I)的结晶形式。本领域技术人员理解的是，悬浮过程本质上是"浆化"过程或涉及至少部分(但不是全部)溶解在溶剂系统中的过程。

因此，本发明一个方面提供的是将化合物(I)的一种结晶形式(例如，一种无水形式)转化成另一种。具体地，可将形式A转化成形式B。因此，本申请提供的是可通过所述(结晶)转化方法获得的结晶形式。

为了通过该方法获得化合物(I)的形式B，可将形式A悬浮在适当的溶剂系统中或使形式A在适当的溶剂系统中浆化(或至少部分溶解在适当的溶剂系统中)，之后加入形式B的晶种(例如，1.0至2.5%w/w，例如2%w/w)。在本发明的一个方面中，用于通过悬浮或浆化获得化合物(I)的形式B(即，用于实现化合物(I)的形式A向形式B的转化)的溶剂系统包括不导致形成化合物(I)的溶剂化物的任意适当的溶剂或溶剂的混合物。在另一个方面中，溶剂系统可包括化合物(I)仅部分(或至少部分)可溶于其中的那些溶剂系统。在另一个方面中，所述溶剂系统包括两溶剂系统，所述两溶剂系统包含良溶剂和中等溶剂(moderate solvent)。在另一个方面中，所述溶剂系统包含极性有机溶剂例如醇类(例如低级烷基醇，如C_1-6醇)和水。在另一个方面中，所述溶剂系统包含异丙醇和水。在另一个方面中，水占用于获得形式B的总溶剂系统的至少60%w/w(例如，至少75%，如约80%)。即，所述溶剂系统可含有至多40%w/w(例如，至多25%，或约20%)的异丙醇。

为了得到化合物(I)的形式B而在所述溶剂系统中发生的相转移可耗费数小时或数天(例如，4天，参见下文的实施例3)，但所述时间的长度可根据例如所述方法的温度(或者如果在低温进行其可耗费更长时间)或所述溶液的浓度等而减小。然而，本领域技术人员可容易地确定转化成形式B所耗费的时长。

我们已发现，化合物(I)的形式B当与之前已制备的化合物(I)的其它形式相比时(例如与无定形游离碱形式或与形式A相比时)具有改进的物理性质。例如，化合物(I)的形式B与无定形游离碱形式相比具有不同的吸湿性分布，这在包含本发明化合物的制剂中是有用的。此外，化合物(I)的形式B具有与形式A相比不同的溶解度分布和/或溶出速度(在不同的溶剂中，例如缓冲的含水系统或丙醇/庚烷系统)和与形式A相比不同的熔点，这些性质在所述制备方法和在包含本发明化合物的制剂中是有用的。此外，我们已发现，通过使用本申请所述的结晶或转化方法，可制备具有高化学纯度的化合物(I)的形式B。

另外，我们已发现，化合物(I)的形式A在本申请所述的转化方法中被转化成形式B，这表明形式B为化合物(I)热力学较稳定形式(至少在相关温度范围)并可特别有利于用作药物。

此外，我们已发现化合物(I)的形式B与化合物(I)的其它形式(例如形式A)相比表现出不同的药代动力学性质。化合物(I)的形式B与形式A相比表现出增加水平的总肺暴露(表达为"曲线下面积或AUC)。另外，化合物(I)的形式B与形式A相比表现出降低水平的峰值血药浓度(peak blood level)(表达为C_max)。药代动力学性质上的不同可导致药理学效力上的不同并可提供改进的安全裕度。

本申请使用的术语"稳定性"包括化学稳定性和固态稳定性。

“化学稳定性”包括在正常贮存条件下能以分离固态形式或者以固体制剂的形式(可按与药用载体、稀释剂或辅料的混合物形式来提供)储存的化合物，具有不显著程度的化学降解或分解。

“固态稳定性”包括在正常贮存条件下能以分离固态形式或者以固体制剂的形式(可按与药用载体、稀释剂或辅料的混合物形式来提供)储存的化合物，具有非显著程度的固态转化作用(如结晶作用、重结晶作用、结晶性丧失、固态相转变、水合作用、脱水作用、溶剂化作用或去溶剂化作用)。

“正常贮存条件”的实例包括长时间(即大于或等于6个月)在介于-80至+50℃之间的温度(优选介于0至40℃之间且更优选在环境温度，诸如介于15至30℃之间)、在介于0.1至2巴之间的压力(优选在大气压力)和/或暴露于460勒克斯(lux)的UV/可见光下。在所述条件下，可发现本发明的化合物的化学降解/分解或固态转化视情况为小于约15%，更优选小于约10%，且特别是小于约5%。技术人员将理解上述温度与压力的上限与下限代表正常贮存条件的极端，并且在正常贮存期间不会经历这些极端的某些组合(如50℃的温度和0.1巴的压力)。

术语“正常贮存条件”也可包括介于5至95%(优选10至60%)之间的相对湿度。然而，在本发明的某些结晶形式的情况下，因在正常温度/压力下长时间暴露于某些极端的相对湿度，因此可能发生由于水合作用和/或脱水作用造成的构象或晶体结构改变。

尽管本发明化合物(即，所述结晶形式)优选不为盐形式，但可提及的盐包括酸加成盐和碱加成盐。

下文中描述了本发明化合物的制备与表征。例如在下文中所述，可使用X射线粉末衍射(XRPD)法容易地对本发明化合物的不同结晶形式进行表征。也可使用标准DSC技术。

本领域技术人员还可理解的是，所获得的结晶形式可显著地受制备待结晶化合物所采用的合成方法的影响。具体地，因素诸如在任意之前步骤(并且具体是在倒数第二步和/或倒数第一步(immediately preceeding step))中使用的反应物质的性质、试剂的性质、溶剂的性质和纯化技术(如果有的话)的性质可能全部会影响所获得的结晶形式。

我们已发现，一种用于制备化合物(I)的可选择的合成方法(未披露在WO2008/076048中)能够可靠地制备形式B。因此，在本发明的另一个实施方案中，提供用于制备化合物(I)的可选择的方法。

因此，在本发明的一个方面中，提供用于制备化合物(I)的形式B的方法。

制备化合物(I)

另一个方面提供用于制备化合物(I)的方法，所述方法包括使式(II)化合物与式(III)的酰化剂偶联，

其中L¹为烷氧基或三氟乙酰氧基。在另一个方面中，所述酰化剂为三氟乙酸乙酯。在另一个方面中，化合物(II)为盐酸盐-形式。

式(III)化合物为商购的或其可用公知的化学方法从商购起始物质来制备。可用于使式(II)化合物和式(III)化合物偶联的方法是本领域公知的。例如，所述偶联反应可通过以下方式来进行：在适当的碱(例如，有机碱例如三乙胺)的存在下和在适当的温度(例如，环境温度)，在适当的溶剂(例如，醚溶剂例如甲基叔丁基醚)中使式(II)和式(III)化合物混合适当的时间(例如，24小时)。

在另一个方面中，提供用于制备式(II)化合物的方法，所述方法包括对式(IV)化合物进行脱保护:

其中R¹为烷基(未取代的或被甲硅烷基烷基取代)、二烷基氨基、芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)或杂芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。在另一个方面中，R¹为芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。

可用于使式(IV)化合物脱保护的方法是本领域公知的。例如，在其中R¹为芳基的情况下，所述脱保护可通过以下方式进行：在适当的温度(例如，60-100℃，例如75℃)，在适当的碱(例如，无机碱例如碳酸钾)的存在下，使式(IV)化合物与适当的脱保护剂例如硫醇亲核试剂(例如，巯基乙酸)在适当的溶剂(例如，有机溶剂例如乙腈)中混合适当的时间(例如，18小时)。可选择地，所述脱保护可通过以下方式进行：使用其它公知的脱保护剂，例如强酸(例如氢溴酸或硫酸)、强还原剂(例如，磨碎的镁或钠/液氨或萘-钠(sodiumnaphthalene)或三丁基锡烷)或碘化钐。用于进行该脱保护的可选择方法描述在标准化学教材例如Greene,T.W.&Wuts,P.G.M.(2006),Greene's ProtectiveGroups in Organic Synthesis,Wiley-Interscience；or Kocienski,P.(2005),Protecting Groups,Thieme中。

另一个方面中，提供用于制备式(II)化合物的方法，所述方法包括用本领域公知的方法(例如上述方法和在本申请实施例中描述的方法)对式(V)化合物进行脱保护:

在本发明的另一个方面中，提供用于制备式(IV)化合物的方法，所述方法包括由氨基-醇(VI)原位形成经保护的氮丙啶(X)，然后用羟基吲唑(XI)原位使氮丙啶环开环:

其中R¹为烷基(未取代的或被甲硅烷基烷基取代)、二烷基氨基、芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)或杂芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。在另一个方面中，R¹为芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。

得到游离碱形式的式(VI)化合物的方法(即，不是盐形式)描述在WO2008/076048(实施例6b)中。式(VI)化合物的盐酸盐的形成描述在本申请的实施例中。式(VII)化合物为商购的或其可用公知的化学方法从商购起始物质来制备。得到式(XI)化合物的方法描述在WO2008/079073(实施例1)和本申请的实施例中。可用于形成式(IV)化合物的方法是本领域公知的，例如在本申请实施例中描述的那些方法。

本发明的另一个方面提供用于制备式(V)化合物的方法，所述方法包括从氨基-醇(VI)原位形成经保护的氮丙啶(XV)，然后用羟基吲唑(XI)使氮丙啶环-原位开环:

得到游离碱形式的式(VI)化合物(即，不是盐形式)的方法描述在WO2008/076048(实施例6b)中。式(VI)化合物的盐酸盐的形成描述在本申请的实施例中。式(XII)化合物是商购的。得到式(XI)化合物的方法描述在WO2008/079073(实施例1)和本申请的实施例中。

可用于形成式(V)化合物的方法是本领域公知的。例如，可通过以下方式制备式(XIII)化合物：在适当的碱的存在下(例如，有机碱如N-甲基吗啉)和在适当的温度(例如，环境温度)，使式(VI)化合物与式(XII)化合物混合适当的时间(例如，1小时)。可通过以下方式制备式(XIV)化合物：在适当的温度(例如，40℃)，将甲磺酰氯直接加至含有式(XIII)化合物和适当碱(例如，有机碱如N-甲基吗啉)的反应混合物中，保持适当的时间(例如，16小时)。可通过以下方式制备式(XV)化合物：在适当的溶剂(例如有机溶剂，如2-甲基四氢呋喃)和在适当的温度(例如，环境温度)，将适当的碱(例如无机碱，如无机碱例如氢氧化钠)加至式(XIV)化合物中。可选择地，在进行本领域技术人员公知的后处理方法(例如，用酸性水溶液例如盐酸水溶液洗涤，然后用水洗)后，可将所述适当的碱(例如无机碱，如氢氧化钠)直接加至含有式(XIV)化合物的反应溶液中式(V)化合物可通过以下方式制备：在适当的温度将(例如，40℃)，将式(XI)化合物直接加至含有式(XV)化合物和适当的碱(例如无机碱如氢氧化钠)的反应混合物中。

关于本发明方法的其它信息和可由此获得的产物描述在本申请的实施例中。

在本申请的另一个实施方案中，提供式(IV)化合物：

其中R¹为烷基(未取代的或被甲硅烷基烷基取代)、二烷基氨基、芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)或杂芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。在另一个方面中，提供本申请定义的化合物(IV)或其盐作为药物中间体的用途。

在另一个方面中，R¹为芳基(未取代的或被卤素、卤代烷基、烷基或NO₂中的一个或多个取代)。

在本发明的另一个实施方案中，提供式(V)化合物。在另一个方面中，提供如本申请定义的化合物(V)或其盐作为药物中间体的用途。

在本发明的另一实施方案中，提供盐酸盐-形式的式(II)化合物(化合物(XVI))。在另一个方面中，提供如本申请所定义的化合物化合物(XVI)作为药物中间体的用途。

烷基基团和烷基部分是直链或支链并且包含例如，1至6(例如1-4)个碳原子。烷基的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基或叔丁基。

芳基基团和部分是单环或多环芳族环，包含例如，6至14(例如6至10)个碳原子。芳基的实例为苯基或萘基。

二烷基氨基是指-N(烷基)₂，其中烷基如上所定义。

二烷基氨基的实例为二甲基氨基或二乙基氨基。

卤代烷基是指被一个或多个卤素原子取代的如上所定义的烷基。卤代烷基的实例为三氟甲基和三氟乙基。

甲硅烷基烷基是指-Si(烷基)₃，其中烷基如上所定义。甲硅烷基烷基的实例为三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基。

我们已发现，该得到化合物(I)的合成方法具有优于之前在WO2008/076048中描述的新方法的诸多优点。不再需要大规模色谱分析法，避免了大量的时间、资源分配和纯化成本。原位形成中间体而不需要额外的分离降低了对重要后处理和反应混合物处理的需求。此外，避免了WO2008/076048中描述的低收率的铜促进偶联步骤，氧氮之间对氮的选择性增强，以及更好的总反应控制。此外，我们已发现，本申请描述的该新的合成方法和结晶步骤可靠地提供化合物(I)的形式B。

医学用途

因为本发明化合物具有与糖皮质激素受体结合的能力，所以它们可用作抗炎药物，并且还可显示出抗变应性(antiallergic)作用、免疫抑制性(immunosuppressive)作用和抗增殖性(anti-proliferative)作用。因此，本发明化合物或其可药用盐可用作在哺乳动物(例如人)中治疗或预防一种或多种以下病理状态(病症)的药物：

(i)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的肺病：

任意起源的慢性阻塞性肺病(chronically obstructive lung disease)，主要是支气管哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)；

不同起源的支气管炎；

成人呼吸窘迫综合征(ARDS)，急性呼吸窘迫综合征；

支气管扩张(Bronchiectases)；

各种形式的再构造性肺病(restructive lung disease)，主要是变应性肺泡炎(allergic alveolitis)；

各种形式的肺水肿(pulmonary edema)，主要是中毒性肺水肿(toxicpulmonary edema)；

结节病(sarcoidosis)和肉芽肿病(granulomatosis)，如伯克病(Boeck’sdisease)；

(ii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的风湿性疾病/自身免疫性疾病/变性关节病：

各种形式的风湿性疾病，尤其是类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、急性风湿热(acute rheumatic fever)、风湿性多肌痛(polymyalgia rheumatica)、胶原性疾病(collagenosis)、贝切特病(

 disease)；

反应性关节炎(reactive arthritis)；

其它起源的炎性软组织疾病(inflammatory soft-tissue disease)；

变性关节病(关节病(arthrosis))中的关节炎症状；

创伤性关节炎(traumatic arthritide)；

其它起源的胶原性疾病，例如系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematodes)、盘状红斑狼疮(discoid lupus erythematosus)、硬皮病(sclerodermia)、多肌炎(polymyositis)、皮肌炎(dermatomyositis)、结节性多动脉炎(polyarteritis nodosa)、颞动脉炎(temporal arteritis)；

斯耶格伦综合征(

 syndrome)、斯蒂尔综合征(Still’s syndrome)、费尔蒂综合征(Felty’s syndrome)；

白癜风(Vitiligo)；

软组织风湿病(soft-tissue rheumatism)；

(iii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的变态反应：

各种形式的变态反应，例如血管神经性水肿(Quincke’s edema)、昆虫叮咬、对药物、血液衍生制品(blood derivative)、造影剂等的变态反应、过敏性休克(anaphylactic shock)、荨麻疹(urticaria)、变应性血管病(allergic vasculardisease)；

变应性脉管炎(Allergic vasculitis)

炎性脉管炎(inflammatory vasculitis)

(iv)血管炎症(Vascular inflammations)(血管炎(vasculitides))：

结节性全动脉炎(panarteritis nodosa)、颞动脉炎、结节性红斑(erythemanodosum)；

结节性多动脉炎；

韦格纳肉芽肿病(Wegner’s granulomatosis)；

巨细胞动脉炎(Giant-cell arteritis)；

(v)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的肾病：

肾病综合征；

所有肾炎，例如肾小球肾炎；

(vi)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的肝病：

急性肝细胞分解(acute liver cell decomposition)；

不同起源的急性肝炎，例如病毒性、中毒性或药物诱发的急性肝炎；

慢性攻击性肝炎和/或慢性间歇性肝炎；

(vii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的胃肠疾病：

节段性回肠炎(regional enteritis)(克罗恩病(Crohn’s disease))；

胃炎(Gastritis)；

返流性食管炎(Reflux esophagitis)；

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)；

其它起源的胃肠疾病，例如例如先天性啖性腹泄(native sprue)；

(vii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的直肠病：

肛门湿疹(anal eczema)；

龟裂(fissure)；

痔疾(haemorrhoids)；

特发性直肠炎(idiopathic proctitis)；

(ix)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的眼病：

变应性角膜炎(allergic keratitis)、色素层炎(uvenitis)、虹膜炎(iritis)；

结膜炎(conjunctivitis)；

睑炎(blepharitis)；

视神经炎(optic neuritis)；

脉络膜炎(chorioiditis)；

交感性眼炎(sympathetic ophthalmia)；

(x)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的耳-鼻-喉区疾病：

变应性鼻炎、枯草热(hay fever)；

外耳炎(otitis externa)，例如由接触性皮炎、感染等引起的外耳炎；

中耳炎(otitis media)；

(xi)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的神经疾病：

脑水肿(cerebral edema)，主要是肿瘤引起的脑水肿；

多发性硬化(multiple sclerosis)；

急性脑脊髓炎(acute encephalomyelitis)；

不同形式的惊厥(convu1Sion)，例如婴儿点头状痉挛(infantile noddingspasm)；

脑膜炎(Meningitis)；

脊髓损失(spinal cord injury)；

中风(Stroke)；

(xii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的血液病：

获得性溶血性贫血(acquired haemolytic anemia)；

血小板减少(thrombocytopenia)，例如特发性血小板减少(idiopathicthrombocytopenia)；

M.霍奇金病(M.Hodgkins)或非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkinslymphomas)，

血小板增多(thrombocythemias)，

红细胞增多症(erythrocytoses)；

(xiii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的肿瘤疾病：

急性淋巴性白血病(acute lymphatic leukaemia)；

恶性淋巴瘤(malignant lymphoma)；

淋巴肉芽肿病(lymphogranulomatosis)；

淋巴肉瘤(lymphosarcoma)；

广泛性转移(extensive metastasis)，主要在乳腺癌和前列腺癌中；

(xiv)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的内分泌疾病：

内分泌眼眶病(endocrine orbitopathy)；

甲状腺危象(thyrotoxic crisis)；

德奎尔万甲状腺炎(de Quervain’s thyroiditis)；

桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)；

甲状腺功能亢进(hyperthyroidism)；

巴泽多病(Basedow’s disease)；

肉芽肿性甲状腺炎(Granulomatous thyroiditis)；

淋巴腺样甲状腺肿(Lymphadenoid goiter)；

(xv)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的移植；

(xvi)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的重度休克病症(severe shock condition)，例如过敏性休克(anaphylactic shock)；

(xvii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的替代疗法：

先天原发性肾上腺机能不全(innate primary suprarenal insufficiency)，例如先天性肾上腺性性腺综合征(congenital adrenogenital syndrome)，后天原发性肾上腺机能不全(acquired primary suprarenal insufficiency)，例如艾迪生病(Adidison’s disease)、自身免疫性肾上腺炎(autoimmune adrenalitis)、感染后(meta-infective)、肿瘤、转移等；

先天继发性肾上腺机能不全(innate secondary suprarenal insufficiency)，例如先天性垂体机能减退(congenital hypopituitarism)；

后天继发性肾上腺机能不全(acquired secondary suprarenalinsufficiency)，例如感染后(meta-infective)、肿瘤等；

(xviii)与炎性过程、变应性过程和/或增殖性过程并发的呕吐：

例如在细胞生长抑制剂诱导的呕吐中与5-HT3拮抗剂联用；

(xix)炎症起源的疼痛，例如腰痛(lumbago)。

在不对上述病症有所偏见的情况下，本发明化合物还可用于治疗以下疾病：例如I型糖尿病(胰岛素依赖性糖尿病)、吉-巴综合征(Guillain-Barrésyndrome)、经皮腔内血管成形术后的再狭窄(restenoses after percutaneoustransluminal angioplasty)、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、急性和慢性疼痛、动脉硬化(arteriosclerosis)、再灌注损伤(reperfusion injury)、热损伤(thermalinjury)、继发于创伤的多器官损伤(multiple organ injury secondary to trauma)、急性化脓性脑膜炎(acute purulent meningitis)、坏死性小肠结肠炎(necrotizingenterocolitis)和与血液透析有关的综合征(syndrome associated withhemodialysis)、白细胞除去法(leukopheresis)、粒细胞输注(granulocytetransfusion)、康恩综合征(Conies syndrome)、原发性和继发性醛甾酮过多症(primary and secondary hyperaldosteronism)、钠滞留增加(increased sodiumretention)、镁和钾排泄增加(多尿症(diuresis))、水滞留增加(increased waterretention)、高血压(单纯收缩期(isolated systolic)高血压和混合型收缩期/舒张期(combined systolic/diastolic)高血压)、心律失常(arrhythmias)、心肌纤维化(myocardial fibrosis)、心肌梗塞(myocardial infarction)、巴特综合征(Bartter’sSyndrome)、与儿茶酚胺水平过度有关的疾病(disorder associated with excesscatecholamine level)、舒张期和收缩期充血性心力衰竭(diastolic and systoliccongestive heart failure(CHF))、外周血管疾病(peripheral vascular disease)、糖尿病性肾病(diabetic nephropathy)、伴有水肿和腹水的肝硬化(cirrhosis withedema and ascites)、食管脉管曲张(oesophageal varicies)、肌无力(muscleweakness)、皮肤黑色素沉着增加(increased melanin pigmentation of the skin)、体重减轻(weight loss)、低血压(hypotension)、低血糖(hypoglycemia)、库欣综合征(Cushing’s Syndrome)、肥胖(obesity)、葡萄糖耐受不良(glucoseintolerance)、高血糖(hyperglycemia)、糖尿病(diabetes mellitus)、骨质疏松症(osteoporosis)、多尿症(polyuria)、多饮(polydipsia)、炎症(inflammation)、自身免疫性疾病(autoimmune disorder)、与器官移植有关的组织排斥(tissuerejection associated with organ transplant)、恶性肿瘤(malignancy)例如白血病(leukemias)和淋巴瘤(lymphomas)、风湿热(rheumatic fever)、肉芽肿性多动脉炎(granulomatous polyarteritis)、对骨髓细胞系的抑制(inhibition of myeloid cellline)、免疫增殖/细胞凋亡(immune proliferation/apoptosis)、对下丘脑-垂体-肾上腺轴的抑制和调节(HPA axis suppression and regulation)、高皮质醇血症(hypercortisolemia)、对Th1/Th2细胞因子平衡的调节(modulation of theThl/Th2cytokine balance)、慢性肾病(chronic kidney disease)、高钙血症(hypercalcemia)、急性肾上腺机能不全(acute adrenal insufficiency)、慢性原发性肾上腺机能不全(chronic primary adrenal insufficiency)、继发性肾上腺机能不全(secondary adrenal insufficiency)、先天性肾上腺增生(congenital adrenalhyperplasia)、Little综合征(Little’s syndrome)、系统性炎症(systemicinflammation)、炎性肠病(inflammatory bowel disease)、韦格纳肉芽肿病(Wegener’s granulomatosis)、巨细胞关节炎(giant cell arthritis)、骨关节炎(osteoarthritis)、血管神经性水肿(angioneurotic edema)、腱炎(tendonitis)、滑囊炎(bursitis)、自身免疫性慢性活动性肝炎(autoimmune chronic activehepatitis)、肝炎(hepatitis)、肝硬化(cinhosis)、脂膜炎(panniculitis)、炎性囊肿(inflamed cyst)、坏疽性脓皮症(pyoderma gangrenosum)、嗜酸细胞性筋膜炎(eosinophilic fasciitis)、复发性多软骨炎(relapsing polychondritis)、结节病(sarcoidosis)、斯威特病(Sweet’s disease)、I型反应性麻风(type1reactiveleprosy)、毛细血管瘤(capillary hemangiomas)、扁平苔藓(lichen planus)、结节性红斑痤疮(erythema nodosum acne)、多毛症(hirsutism)、中毒性表皮坏死松解症(toxic epidermal necrolysis)、多形红斑(erythema multiform)、精神病(psychosis)、认知障碍(cognitive disorder)(例如记忆紊乱(memorydisturbance))、心境障碍(mood disorder)(例如抑郁(depression)和双相性精神障碍(bipolar disorder))、焦虑障碍(anxiety disorder)和人格障碍(personalitydisorder)。

本文使用的术语“充血性心力衰竭”(CHF)或“充血性心脏病”是指以下的心血管系统病症，其中心脏不能有效泵出足够体积的血液来满足身体组织和器官系统的需要。通常，CHF的特征在于左心室衰竭(收缩期功能障碍)和肺内积液，其中根本原因在于一种或多种心脏病症或心血管病症，包括冠状动脉疾病、心肌梗塞、高血压、糖尿病、瓣膜性心脏病和心肌病。术语“舒张期充血性心力衰竭(diastolic congestive heart failure)”是指以心脏适当松弛和充血的能力受损为特征的CHF病症。相反地，术语“收缩期充血性心力衰竭(systolic congestive heart failure)”是指以心脏适当收缩和射血的能力受损为特征的CHF病症。

本领域技术人员应该认识到的是，生理疾病可按“慢性”病症或“急性”发作的形式存在。本文使用的术语“慢性”是指缓慢进展并长期持续的病症。因此，当确诊慢性疾病时，对其进行治疗，并且治疗持续整个疾病过程。相反地，术语“急性”是指短过程的恶化事件或发作，然后是缓解期。因此，对生理疾病的治疗既涉及急性事件又涉及慢性病症。在急性事件中，在症状发作时给药化合物，当症状消失时停药。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐，其用于治疗(例如上述疗法)中。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗糖皮质激素受体所介导的病症(例如上述病症)的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗炎性病症(例如关节炎)的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗呼吸病症(例如上述肺病)的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗哮喘的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗COPD的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗变应性鼻炎的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐在制备用于治疗肠易激综合征的药物中的用途。

本发明另一个方面提供本发明化合物或其可药用盐，其用于治疗炎性病症,哮喘,COPD,变应性鼻炎或肠易激综合征。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗糖皮质激素受体所介导的病症(例如上述病症)的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗炎性病症(例如关节炎)的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗呼吸病症(例如上述肺病)的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗哮喘的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗COPD的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗变应性鼻炎的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗肠易激综合征的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

本发明另一个方面提供在哺乳动物(例如人)中治疗糖皮质激素受体所介导的病症(例如上述病症)、炎性病症、哮喘、COPD、变应性鼻炎和/或肠易激综合征的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的本发明化合物或其药用盐。

在本说明书的上下文中，除非给出相反的具体说明，术语"治疗"也包括预防和防止。术语"治疗的"和"治疗地"应该相应地解释。

在本说明书中，除非另有说明，术语“抑制剂”和“拮抗剂”是指这样的化合物，所述化合物通过任何方式部分或完全地阻断导致激动剂所致应答产生的转导途径。激动剂可以是完全激动剂或部分激动剂。

除非另有说明，术语“紊乱”是指与糖皮质激素受体活性相关的任何病症和疾病。

药物组合物

为了将本发明化合物或其可药用盐用于对哺乳动物进行治疗性处置，通常按照标准药物实践将所述活性成分配制成药物组合物。

因此，本发明另一个方面提供包含本发明化合物或其可药用盐(活性成分)以及可药用辅料、稀释剂或载体的药物组合物。一个实施方案涉及包含本发明化合物或其可药用盐的药物组合物在治疗糖皮质激素受体所介导的病症(例如上述病症)、炎性病症、哮喘和/或COPD中的用途。

在另一个方面，本发明提供制备所述组合物的方法，所述方法包括将所述活性成分与可药用辅料、稀释剂或载体混合。基于给药模式，所述药物组合物可包含0.05-99%w(重量百分数)、例如0.05-80%w、例如0.10-70%w(例如0.10-50%w)的活性成分，所有重量百分数都基于总组合物。

对于需要治疗的病症，本发明的药物组合物可按标准方式给药，例如通过局部给药(如给药至肺和/或气道或给药至皮肤)、口服给药、直肠给药或肠胃外给药。因此，可将本发明化合物或其可药用盐配制成以下形式：例如气雾剂、粉剂(例如干粉剂或可分散粉剂)、片剂、胶囊剂、糖浆剂、颗粒剂、水性或油性溶液剂或混悬剂、(脂质)乳剂、栓剂、软膏剂、乳膏剂、滴剂或无菌可注射水性或油性溶液剂或混悬剂。

本发明的合适药物组合物为适于以单位剂量形式口服给药的药物组合物，例如含有0.1mg至10g活性成分的片剂或胶囊剂。

在另一个方面，本发明的药物组合物为适于静脉内注射、皮下注射、关节内注射或肌内注射的药物组合物。

在一个实施方案中，将本发明化合物或其可药用盐口服给药。

在另一个实施方案中，本发明化合物或其可药用盐通过吸入来给药。

在另一个实施方案中，本发明化合物或其可药用盐通过鼻腔给药

当治疗呼吸疾病例如慢性阻塞性肺病(COPD)或哮喘时，吸入(特别是口腔吸入)是给药本发明化合物(或其药用盐)特别有用的方法。当通过口腔吸入给药时，本发明化合物(或其药用盐)可有效地以μg范围内的每日剂量来有效使用，例如最高500μg，例如0.1-50μg，0.1-40μg，0.1-30μg，0.1至20μg或0.1-10μg本发明化合物(或其药用盐)作为活性成分。

本发明的药物组合物可通过口腔吸入以任意适当的形式和使用任意适当的吸入器装置来给药。适当的吸入器装置是本领域技术任意已知的，并且可以是手动启动或呼吸启动的。所述药物组合物可被配制成干粉、配制成混悬液(液体或气体形式)或配制成溶液(液体形式)，用于通过适当的吸入器装置通过口腔吸入来给药。

适于肺部给药的吸入器装置包括计量吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI),雾化器和软薄雾吸入器(soft mist inhaler)。多室装置可用于实现本发明化合物(或其药用盐)和一种或多种其它活性成分(当存在时)的递送。

优选的计量吸入器为压力计量吸入器(pMDI)。

在pMDI中使用的药物组合物可按包含活性成分和一种或多种赋形剂的溶液或混悬液形式提供，所述赋形剂包括所述活性成分溶于其中或分散于其中的适当推进剂。适当的推进剂是本领域技术人员已知的并且包括烃、氯氟碳和氢氟烷推进剂或任意所述推进剂的混合物。推进剂的实例为1,1,1,2-四氟乙烷(HFA或HFC134a)和1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(HFA或HFC227)，它们各自可单独使用或与其它推进剂和/或其它赋形剂组合使用。

pMDI装置含有装在压力容器内的药物组合物。所述活性成分通过启动所述pMDI装置的容器的阀门来递送。

启动可为手动启动的或呼吸启动的。在手动启动的pMDI中，所述装置是当使用者呼吸时由他们启动的，例如通过按压pMDI装置上的适当的释放机构。呼吸启动的pMDI是当患者吸气时通过pMDI的接嘴(mouthpiece)自动启动的。pMDI装置的实例包括例如HFA、

和

计量吸入器装置(例如pMDI)可与储雾装置(spacer device)联用。适当的储雾装置是本领域技术任意公知的并且包括

或

用在干粉吸入器装置中的药物组合物以包含活性成分和一种或多种赋形剂的干粉形式来提供，所述赋形剂通常包括适当的载体和/或稀释剂和/或涂覆剂。所述活性成分以可吸入形式提供，并且优选地，所述活性成分的颗粒具有小于约10μm的质量中值空气动力学直径，更优选为小于约5μm，例如1至5μm。本领域技术人员可用他们知道的标准技术测量所述质量中值空气动力学直径。所述活性成分的可吸入形式可通过多种技术来制备，包括喷雾干燥、冷冻干燥和微粉化。

所述干粉组合物可采用粉末聚集物(powder agglomerate)或有序混合物(ordered mixture)的形式。

当所述干粉组合物采用有序混合物形式时，所述混合物可包含所述活性成分的可吸入颗粒，其中所述活性成分与有助于从所述干粉吸入器装置流入到肺内的载体颗粒一起配制。所述活性成分的颗粒粘附在载体颗粒上以形成有序的(相互作用的)粉末混合物。用于包裹在所述干粉组合物中的适当载体颗粒是已知的，并且包括糖例如，乳糖、葡萄糖、棉籽糖、松三糖、拉克替醇、麦芽糖醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇和淀粉。适当的载体为乳糖颗粒并且它们可具有大于90μm的质量中值空气动力学直径。

当所述干粉组合物采用粉末聚集物的形式时，所述聚集物可包含与一种或多种稀释剂配制的微颗粒形式的活性成分。适当的稀释剂包括糖，例如乳糖、甘露醇和蔗糖。

可在配制之前、过程中或之后对用在吸入用干粉组合物中的活性成分和/或赋形剂进行调控。调控可用于例如恢复所述颗粒的结晶性和维持所述颗粒的空气动力学性质。调控方法是公知的并且包括使颗粒暴露于受控的温度和湿度/溶剂蒸气。调控方法的实例包括在WO92/018110和WO95/05805中描述的那些。

干粉吸入器装置可为单剂量的、多个单剂量的或多剂量的(储库)吸入器，并可使用干粉或含粉末的胶囊。

在单剂量干粉吸入器装置中，通常在胶囊(例如明胶胶囊)中提供单独剂量并且在使用前装载在所述装置中。这些装置的实例包括

AeroliserTM、

和Eclipse装置。多个单位剂量的干粉吸入器装置含有许多个单独包装的剂量，其为多胶囊(例如明胶胶囊)形式或为罩泡包装形式。这些装置的实例包括装置和呼吸启动的干粉吸入器装置(具有用于放置粉末的安置在盘或环中的多个腔)，例如在WO2005/002654、WO2012/010877或WO2012/010878中披露的那些。在多-剂量(储库)干粉吸入器装置中，所述活性成分贮存在散装粉末储库中，从该储库中计量出单独的剂量。这些装置的实例包括

和

装置。

雾化器装置可例如用于给药水性悬浮液或优选地溶液形式的活性成分，进行或不进行适当的pH和/或张度调节，其为单剂量或多剂量制剂形式。适当的雾化器是本领域公知的并且包括

鼻腔给药本发明化合物(或其药用盐)可通过从适当的鼻腔递送装置(例如喷雾泵或MDI鼻腔递送装置，例如Rhinocort)进行喷雾来提供。可选择地，可用适当的DPI装置(例如

或

)以粉末形式来鼻腔给药本发明的化合物(或其药用盐)。

用在喷雾泵或MDI鼻腔递送装置中的药物组合物可包含分散或优选溶解于适当含水介质中的本发明化合物(或其药用盐)。当需要限制所述活性成分渗透到肺中并需要将所述活性成分保留在鼻腔内时，可能有必要的是使用活性成分的具有大于约10μm(例如10μm至50μm)中值质量空气动力学直径的颗粒。

使用缓冲剂，药用共溶剂如聚乙二醇、聚丙二醇、甘油或乙醇，或络合剂如羟丙基β-环糊精来辅助配制。

可通过药学领域熟知的常规操作来得到上述制剂。可通过常规手段对片剂进行肠溶性包衣，以提供例如邻苯二甲酸醋酸纤维素包衣。

本发明还涉及联合治疗或联用组合物，其中将本发明化合物或其可药用盐，或将包含本发明化合物或其可药用盐的药物组合物，与一种或多种用于治疗任何上述病症的药物同时(可在同一组合物中)或依次给药。

例如，为了治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、COPD、哮喘、肠易激综合征或变应性鼻炎，本发明化合物或其可药用盐可与用于治疗所述病症的一种或多种药物联用。当通过吸入来给药这样的组合产品时，所述一种或多种药物选自：

·PDE4抑制剂，包括同工型PDE4D的抑制剂；

·选择性β₂肾上腺素受体激动剂，例如间羟异丙肾上腺素(metaproterenol)、异丙肾上腺素(isoproterenol)、去甲肾上腺素(isoprenaline)、沙丁胺醇(albuterol)、柳丁氨醇(salbutamol)、福莫特罗(formoterol)、沙美特罗(sameterol)、特布他林(terbutaline)、奥西那林(orciprenaline)、甲磺酸比托特罗(bitolterol mesylate)、吡布特罗(pirbuterol)或茚达特罗(indacaterol)、olodaterol,米维特罗(milveterol)或维兰特罗(vilanterol)；

·毒蕈碱性受体(muscarinic receptor)拮抗剂(例如M1、M2或M3拮抗剂，如选择性M3拮抗剂)，如异丙托溴铵(ipratropium bromide)、噻托溴铵(titropium bromide)、氧托溴铵(oxitropium bromide)、哌仑西平(pirenzepine)或替仑西平(telenzepine)、阿地溴铵(aclidinium bromide)或格隆溴铵(glycopyrronium bromide)；

·类固醇(例如布地奈德)；

·趋化因子受体功能的调节剂(例如CCR1受体拮抗剂)；

·p38激酶功能的抑制剂；

·基质金属蛋白酶的抑制剂，最优选为靶向MMP-2、MMP-9或MMP-12的抑制剂；或

·嗜中性丝氨酸蛋白酶(neutrophil serine protease)的抑制剂，最优选为嗜中性弹性蛋白酶或蛋白水解酶3(proteinase3)的抑制剂。

在本发明的另一个实施方案中，当这样的组合用于治疗COPD、哮喘或变应性鼻炎时，本发明化合物或其可药用盐可通过吸入途径或口服途径来给药，并且其它药物例如黄嘌呤(如氨茶碱(aminophylline)或茶碱(theophylline))可通过吸入途径或口服途径来给药。本发明化合物或其可药用盐和其它药物例如黄嘌呤可一起给药。它们可依次给药。或者，它们可分开给药。

具体实施方式

实施例

下述实施例以及参考附图用于说明本发明，但是本发明不限于这些实施例。

可使用下面的缩写:

DSC     差式扫描量热计

HPLC       高效液相色谱法

MTDSC 调节的温度差示扫描量热仪

NMR   核磁共振

UV    紫外

XRPD  X-射线粉末衍射

PS80  聚山梨酯80

LOD   干燥损失

LC    液相色谱法

GC    气相色谱法

一般操作

X-射线粉末衍射分析(XRPD)是针对根据标准方法制备的样品进行的，所述标准方法为例如在以下文献中描述的那些方法：Giacovazzo,C.etal(1995),Fundamenta1S of Crystallography,Oxford University Press；Jenkins,R.and Snyder,R.L.(1996),Introduction to X-Ray Powder Diffractometry,JohnWiley & Sons,New York；Bunn,C.W.(1948),Chemical Crystallography,Clarendon Press,London；or Klug,H.P.&Alexander,L.E.(1974),X-rayDiffraction Procedures,John Wiley and Sons,New York。X-射线分析是用具有以下参数的Panalytical X′Pert PRO MPD仪器进行的:

·CuK_α(

)

·45kV和40mA

·2°≤2θ≤40°

·4°/min，增量为0.016°

·旋转硅片

·环境条件

将约2mg试验样品放置在样品架上并用平的Teflon棒摊铺在所述硅表面上。

本领域已知的是，可获得X-射线粉末衍射图，所述X-射线粉末衍射图具有一种或多种测量误差(取决于测量条件(例如所使用的仪器、样品制备或机器))。具体地，通常已知的是，X-射线粉末衍射图中的强度可随测量条件和样品制备波动。例如，X-射线粉末衍射领域的技术人员会意识到，所述峰的强度可根据所述样品在测试时的取向和所使用的仪器的型号和设置而变化。技术人员还会意识到，反射的位置可受所述样品在衍射仪中所处的精确高度和所述衍射仪的零校准的影响。所述样品的表面平面性也可具有小的影响。因此，本领域技术人员会理解的是，本申请提供的衍射图数据不应被理解为是绝对的并且提供与本申请披露的那些粉末衍射图基本相同的粉末衍射图的任意结晶形式落入本申请的范围内。大体上，X-射线粉末衍射图中衍射角的测量误差为约5%或更小，通常为±0.2°2-θ。

熔点是通过差式扫描量热法(DSC)用标准方法(例如在

,G.W.H.etal(1996),Differential Scanning Calorimetry,Springer,Berlin中描述的那些方法)确定的。通过如下方式研究试验样品对升高温度的量热响应：使用TAInstruments Q2000调节的温度差示扫描量热仪(MTDSC)，使用间隔40秒内±0.50℃调幅和5℃/分钟的斜线升温速率(ramp rate)。在氮气气氛下，将约1mg试验样品置于带有盖(没有任何折压)的铝杯中。当提及熔点时，其是指所述熔化吸热的起始温度(onset temperature)。

本领域技术人员理解的是，通过DSC测量的熔点可能会由于样品纯度、样品制备和测量条件(例如，加热速度)的变化而发生轻微变化。应理解的是，通过其它型号的仪器或通过使用不同于本申请之后描述的那些条件的条件可给出可选择的熔点读数。因此，本申请提及的熔点和吸热图不被认为是绝对值并且当解读DSC数据时要考虑所述测量误差。通常，使用DSC的测量误差以±0.5℃或更低变化。然而，本领域技术人员会意识到，熔点可随样品纯度和所述样品的结晶程度而变化。即使是低水平的杂质也可影响所测量的熔点。因此，本申请披露的熔点可自本申请提及的值以±5℃变化，并且当提及具有“约”某熔点的物质时，其被理解为具有自所提及的值±5℃的值。应当理解的是，当提及本申请所披露的熔点时，其是指熔化吸热的起始温度。本领域技术人员可使用常规优化/校准来设置差示扫描量热器的仪器参数，从而使得能够采集与本文所提供的数据相当的数据。

本领域技术人员还会理解的是，在本申请实施例中给出的溶解度测量结果可能会因为样品纯度、多晶型纯度、样品制备和测量条件(例如，温度、时间和搅动程度)而发生轻微变化。应当理解的是，通过使用不同于本申请之后描述的那些条件的条件可得到可选择的溶解度测量结果。因此，本申请提及的溶解度的测量结果不应被认为是绝对值。

本领域技术人员还应理解的是，在本申请实施例中给出的吸湿性测量结果可能会因为样品纯度、多晶型纯度、样品制备和测量条件(例如，所使用的仪器和参数)而发生轻微变化。应当理解的是，通过使用不同于本申请之后描述的那些条件的条件可得到可选择的吸湿性测量结果。因此，本申请提及的吸湿性的测量结果不应被认为是绝对值。

质子(¹H)核磁共振(NMR)谱是用Varian(Inova400MHz)或Bruker(Avance500或DPX300)光谱仪在25℃或300K获得的。将样品制备为于适当氘代溶剂(d₆-DMSO–d₆-二甲基亚砜、CDCl₃–d-氯仿或d₆-丙酮)中的溶液，任选地含有三甲基甲硅烷(TMS)。样品溶液也可含有用于分析确定的内标(马来酸或2,3,5,6-四氯硝基苯)和/或添加的三氟乙酸，从而从分析物共振中除去可交换的质子信号(例如，来自马来酸)。光谱数据被记录为一系列化学位移(δ,单位为ppm)，并使用标准缩写描述了每个信号(s=单峰，d=双峰，m=多重峰，t=三重峰，q=四重峰，br=宽峰等)。所提及的光谱相对于TMS(δ=0.00ppm)、d₅-DMSO(δ=2.50ppm)、氯仿(δ=7.24ppm)或d₅-丙酮(δ=2.05ppm)。如果测量了J-耦合常数，则将其列在所述共振的描述中。本领域公知的是，化学位移和J-耦合常数会因为样品制备(例如分析物浓度变化并且包括或忽略添加剂(例如，NMR测定参考物或三氟乙酸))上的变化而发生轻微变化。

用Mettler Toledo HR83Moisture Analyser或Perkin-Elmer TGA7Thermogravimetric Analyzer进行干燥损失分析。

大规模反应是在安装有热传递夹套和配备有适当辅助仪器的玻璃衬里钢反应器中进行的。大规模制备色谱法是用装备有内径为15cm的动力轴压缩柱的Novasep LC150制备性HPLC系统进行的。标准的实验室玻璃仪器和设备用于小规模方法。起始物质、溶剂和试剂是商购的并原样使用。

液相色谱法(LC)是在填充有十八烷基结合硅胶或苯基结合硅胶的反相柱上进行的。使用装备有UV检测器(λ=230nm，除非另有说明)的Agilent1100HPLC仪器。使用适于具体分析的固定相粒径、柱尺寸、流动相(乙腈和水，用三氟乙酸或甲酸铵/氨调节)、梯度时间表、流速和温度。用适当的稀释剂制备主要分析物浓度为约0.5mg mL^-1的样品溶液。

气相色谱法(GC)是用氦作为载气在DB-624毛细管柱上进行的。使用装备有火焰离子化检测器的Agilent6890GC仪器。

水分析是用Metrohm756KF电量计通过电量Kar1-Fischer滴定进行的。

化合物(I)的形式A和形式B的XRPD分析的总结

如本申请所述获得的化合物(I)形式A和形式B晶体是通过XRPD分析的并且结果列表显示如下(RI表示相对强度)并且显示在各自的图中。

表1显示化合物(I)的结晶形式B的XRPD-衍射图中的最显著峰。表2显示化合物的结晶形式A的XRPD-衍射图中的最显著峰。

已忽略了多个弱的和非常弱的峰。由于优选的取向效应，所忽略的弱峰中的一些可能变的较显著。

缩写

vs=非常强；s=强

附图说明

图1显示了化合物(I)的结晶形式B的XRPD-衍射图。

图2显示了化合物(I)的结晶形式B的差式扫描量热法分布。

图3显示了化合物(I)的结晶形式A的XRPD-衍射图。

图4显示了化合物(I)的结晶形式A的差式扫描量热法分布。

实施例1:制备化合物(I)的形式B

(i)2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(形式B)

将从实施例1，步骤(ii)获得的溶液用1-丙醇(17.0kg)进一步稀释并调整至60℃。缓慢加入正庚烷(50.4kg)，同时维持温度在60℃。将所述溶液冷却至50℃，加入化合物(I)的形式B的晶种(50g)以引发结晶并逐渐冷却至8℃。历时20分钟加入额外的正庚烷(25.5kg)，然后通过XRPD分析经过滤的晶体的样品，证实了形式B的结晶。将所述批次分成大致相等的两份来过滤，在过滤前，用额外更多的正庚烷(3.5kg)来稀释第二部分。将滤饼用冷的1-丙醇(7.2kg)和正庚烷(18.0kg)的混合物来洗涤并真空干燥。收率为9.15kg(18.7mol,77%)。含量测定(NMR)为99.8%和0.2%LOD，二者都是以质量计。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ9.50(d,J=8.5Hz,1H),8.17(d,J=0.8Hz,1H),7.73(m,2H),7.69(d,J=9.1Hz,1H),7.39(m,2H),7.26(dd,J=8.2,7.7Hz,1H),7.20(dd,J=9.1,2.4Hz,1H),7.13(d,J=2.4Hz,1H),6.98(d,J=7.7Hz,1H),6.95(m,1H),6.83(dd,J=8.2,2.6Hz,1H),5.27(d,J=6.4Hz,1H),4.25(m,1H),3.72(s,3H),1.33(d,J=6.8Hz,3H)。

通过实施例1获得的化合物(I)的形式(形式B)的XRPD衍射图显示在下面的图1中并且列表显示于上面的表1中。

通过实施例1获得的化合物(I)的形式(形式B)的DSC分布显示在下面的图2中。所述化合物表现出109℃的熔化吸热起始温度。

步骤(i)中所用的起始物质如下制备。

(ii)2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺

将三氟乙酸乙酯(14.3kg,101mol)和甲基叔丁基醚(11.2kg)线性洗液先后加入搅拌的(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐(14.15kg,25.1mol；含量测定=75.9质量%)于甲基叔丁基醚(35.9kg)和三乙胺(7.6kg,75mol)中的悬浮液中。将混合物在22℃搅拌24小时，该时间结束时，LC分析显示有0.8%残余的起始物质。

加入氢氧化钠(53kg,45mol)水溶液，将混合物搅拌30分钟(在此期间，过量的三氟乙酸乙酯被水解成三氟乙酸)，然后使其分层，接着弃去下层(水溶液)相。将上层(有机)相依次用盐酸水溶液(50kg,50mol)和水(54kg)洗涤，然后用0.6μm过滤器筛滤到干净的容器中。

然后通过在<70℃(大气压)蒸馏掉溶剂(31kg)来浓缩所述溶液。在<70℃减压(900-100mbar)蒸馏掉更多溶剂(37kg)，同时不断替换为1-丙醇(35kg)。分析显示有11.8kg(24.2mol)2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺和7.1kg1-丙醇，含有<0.05体积%的甲基叔丁基醚和<0.1%体积的水。将所述溶液直接用在结晶步骤中。收率为96%。

(iii)(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐

将N-[(1S,2R)-2-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-2-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-乙基]-4-硝基-苯磺酰胺(23.3kg,35.6mol；含量测定=88.1质量%)和碳酸钾(19.90kg,144mol；325-目筛分级别)加至搅拌的乙腈(322kg)中。在向反应混合物鼓泡1小时以除去氧气后，加入巯基乙酸(7.10kg,77.1mol)，然后加热至75℃。24小时后，加入额外的巯基乙酸(1.75kg,19.0mol)和碳酸钾(4.92kg,35.6mol)。再过18小时后，LC分析显示4-硝基-苯磺酰胺起始物质向胺产物的转化率为98.7面积%。

加入水(203.6kg)，然后通过在大气压蒸馏掉溶剂(126.9kg)来浓缩混合物。加入甲基叔丁基醚(165.8kg)，并且在使混合物沉降形成多层后，除去下层(水溶液)相。将有机相依次用1M氢氧化钠(235.6kg,225mol)、1M盐酸(229.7kg,240mol)和最后用饱和氯化钠水溶液(229.6kg)洗涤。

在通过在大气压蒸馏掉溶剂(151.9kg)将所述溶液浓缩后，将其用甲基叔丁基醚(328.1kg)稀释，再浓缩(蒸馏掉327.8kg溶剂)并在40℃用更多的甲基叔丁基醚(123.9kg)再次稀释。(所得混合物的含水量经确定为21g L^-1)。将浆液冷却至2℃，用更多的甲基叔丁基醚(152.2kg)稀释，然后过滤。将所述固体用甲基叔丁基醚(34.6kg)洗涤，然后在50℃真空干燥(最终LOD分析为0.2%)。收率为14.3kg(25.4mol,71摩尔%)。

含量测定为75.9%和2.5%残余的甲基叔丁基醚，二者都是以质量计(NMR)。剩余物质的主要部分为氯化钠。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ8.09(s,1H),7.68–7.63(m,3H),7.35–7.29(m,2H),7.30(dd,J=2.4,9.1Hz,1H),7.27(t,J=7.8Hz,1H),7.12(d,J=2.3Hz,1H),6.96–6.92(m,2H),6.84(dd,J=2.4,8.3Hz,1H),5.62(d,J=3.1Hz,1H),3.67(s,3H),3.66(qd,J=3.1,6.8Hz,1H),1.17(d,J=6.8Hz,3H)。在所记录的谱中，三个可互换的铵质子与马来酸(被添加到NMR样品中)和水的可互换质子融合。

(iv)N-[(1S,2R)-2-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-4-硝基-苯磺酰胺

将(1R,2S)-2-氨基-1-(3-甲氧基苯基)丙-1-醇盐酸盐(12.25kg,55.9mol；含量测定为99.4质量%)和4-硝基苯磺酰氯(13.6kg,61.4mol)于2-甲基四氢呋喃(260kg)中的浆液加热至40℃。历时30分钟加入N-甲基吗啉(28.4kg,280mol)和2-甲基四氢呋喃(23.9kg)的混合物，然后加入2-甲基四氢呋喃(12.5kg)线性洗液。在搅拌1小时后，LC分析显示胺起始物质向N-[(1R,2S)-2-羟基-2-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-乙基]-4-硝基-苯磺酰胺的转化率为99.9面积%(λ=254nm)。

在40℃，历时10分钟，先后加入甲磺酰氯(12.6kg,110mol)和2-甲基四氢呋喃(12.5kg)线性洗液。将反应混合物在40℃搅拌16小时，得到甲磺酸[(1R,2S)-1-(3-甲氧基苯基)-2-[(4-硝基苯基)磺酰基氨基]丙基]酯。

在用5M盐酸(61.1kg,283mol)和水(56.2kg)按顺序洗涤后，加入10M氢氧化钠(30.4kg,223mol)，然后加入水线性洗液(12.4kg)，从而形成(2S,3S)-2-(3-甲氧基苯基)-3-甲基-1-(4-硝基苯基)磺酰基-氮丙啶。

加入1-(4-氟苯基)吲唑-5-醇(14.32kg,61.2mol；含量测定为97.5质量%)并将反应混合物在40℃搅拌17小时，从而形成副标题化合物。(LC分析显示残余的氮丙啶中间体为0.8面积%，λ=254nm)。

在使混合物沉降后，除去下层的液相，然后将上层(有机)相依次用5M盐酸(60.7kg,284mol)和水(56.5kg)洗涤。在大气压蒸馏掉溶剂(200kg)，然后加入甲苯(129.2kg)，同时蒸馏掉额外的溶剂(122.0kg)，使甲苯的添加速度与蒸馏速度相匹配。(GC分析所述溶液，结果显示5.8体积%的2-甲基四氢呋喃)。

将所述溶液用甲苯(109.1kg)稀释，冷却至50℃，引晶(约2-5g副标题化合物，在甲苯中浆化)并进一步冷却至0℃。最后，过滤出固体，用甲苯(50.5kg)洗涤并在40℃真空干燥(最终的LOD分析为0.6%)。收率为23.30kg(35.6mol,64摩尔%)。含量测定为88.1%和12.8%甲苯，二者都是以质量计(NMR)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ8.47(d,J=8.3Hz,1H),8.08(d,J=8.8Hz,2H),8.02(s,1H),7.93(d,J=8.9Hz,2H),7.74–7.68(m,2H),7.60(d,J=9.1Hz,1H),7.40–7.34(m,2H),7.22–7.18(m,1H)*,7.08(dd,J=2.4,9.1Hz,1H),6.84(d,J=7.7Hz,1H),6.76–6.72(m,3H),5.01(d,J=4.5Hz,1H),3.72(dqd,J=4.5,6.8,8.3Hz,1H),3.65(s,3H),1.09(d,J=6.8Hz,3H)。标(*)的共振被甲苯信号遮蔽了。

(v)1-(4-氟苯基)吲唑-5-醇

制备5-羟基-1H-吲唑(12.4kg,91.5mol；含量测定为99质量%)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(1.44kg,1.57mol)和2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(1.35kg,3.18mol)于2-甲基四氢呋喃(42.5kg)中的浆液。向搅拌的混合物中依次加入叔丁醇钠(17.45kg,182mol)于2-甲基四氢呋喃(53.5kg)中的溶液、1-氯-4-氟苯(12.45kg,95.4mol)和2-甲基四氢呋喃(10.50kg)线性洗液。将浆液在73℃搅拌15小时(LC分析，结果显示残余的5-羟基-1H-吲唑为0.4面积%，其中λ=222nm)。

然后加入水(73.5kg)、庚烷(18.9kg)、10M盐酸(8.8kg,77mol)和水(12.3kg)线性洗液，接着冷却至50℃。相分离后，将副标题化合物用两部分氢氧化钠水溶液(91.5kg，浓度为0.7M，62mol；然后是51.3kg，浓度为1.0M，48mol)从有机相中萃取出来。将合并的氢氧化钠萃取物用乙醇(74.6kg)、乙酸(4.8kg,80mol)稀释，然后历时45分钟用乙酸(5.5kg,92mol)的乙醇(19.5kg)溶液逐渐稀释。冷却至-10℃后，过滤出固体，用水(37.1kg)和乙醇(19.8kg)的混合物洗涤，并在40℃真空干燥(最终LOD分析为0.3%)。收率为15.40kg(65.8mol,72摩尔%)。含量测定为97.5质量%(NMR)。

¹H NMR(500MHz,d₆-丙酮)δ8.31(s,1H),8.08(s,1H),7.82–7.78(m,2H),7.68(d,J=9.0Hz,1H),7.37–7.32(m,2H),7.20(d,J=2.0Hz,1H),7.10(dd,J=2.0,9.0Hz,1H)。

(vi)(1R,2S)-2-氨基-1-(3-甲氧基苯基)丙-1-醇盐酸盐

向N-[(1S)-2-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-2-氧代-乙基氨基甲酸叔丁酯(24.54kg,87.8mol)于甲苯(86kg)和异丙醇(53.5kg,890mol)中的溶液中加入异丙醇铝(3.7kg,18mol)。将反应混合物加热升至50℃并搅拌13小时，从而得到N-[(1S,2R)-2-羟基-2-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-乙基氨基甲酸叔丁酯。

历时1小时加入1M盐酸(50.6kg,50mol)，维持温度在15-25℃之间，然后加入水冲洗液(2kg)。相分离后，将水层用两部分乙酸乙酯(每部分34kg)萃取。将合并的有机物用饱和碳酸氢钠(50.3kg)和饱和氯化钠水溶液(50.3kg)洗涤。

真空浓缩有机溶液成油状物并加入乙酸乙酯(110kg)。真空浓缩有机溶液成油状物并加入乙酸乙酯(110kg)。

历时4小时加入氯化氢气体(9.7kg,266mol)，维持温度在0-5℃之间。将反应物加热至15℃并搅拌12小时。

加入甲基叔丁基醚(90kg)并将容器内容物冷却至0℃。将所述浆液在0℃搅拌2小时并真空过滤。将潮湿的滤饼用甲基叔丁基醚(72kg)浆洗，在0℃搅拌30分钟，然后真空过滤。将滤饼用甲基叔丁基醚(20kg)洗涤，然后在真空烘箱中在50℃干燥。收率为16.3kg(74.2mol,85摩尔%)。含量测定为99.1质量%(NMR)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ8.09(s,3H),7.28(t,J=8.0Hz,1H),6.94–6.91(m,2H),6.87–6.83(m,1H),6.03(d,J=4.2Hz,1H),4.91(t,J=3.5Hz,1H),3.75(s,3H),3.38(qd,J=3.0,6.7Hz,1H),0.94(d,J=6.7Hz,3H)。

(vii)N-[(1S)-2-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯

历时3小时，向冷却的(0-5℃)N-(叔丁基氧基羰基)-1-丙氨酸(45.0kg,238mol)于二氯甲烷(596.5kg)中的溶液中加入1,1-羰基二咪唑(52.5kg,324mol)，将所得溶液在0-5℃维持30分钟。历时1小时30分钟加入Ν,Ο-二甲基羟基胺盐酸盐(31.5kg,323mol)，将所得溶液在0-5℃维持30分钟。

在15℃搅拌14小时后，将反应混合物依次用两份1M盐酸(164.5kg,163mol和166kg,164mol)、10%碳酸氢钠水溶液(164.5kg)和20%氯化钠水溶液(199kg)洗涤，得到N-[(1S)-2-(甲氧基(甲基)氨基)-1-甲基-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯的有机相溶液(606kg)。将所述溶液的一半(303kg)通过蒸馏到四氢呋喃(220kg)中来进行溶剂交换。

将所述溶液冷却至低于10℃，历时1小时20分钟加入异丙基氯化镁(1.91M于四氢呋喃中)(54kg，约114mol)，维持温度在10-15℃之间，然后加入四氢呋喃冲洗液(3kg)。逐渐加入3-甲氧基苯基溴化镁(0.86M于THF中)(203kg，约202mol)，维持温度在10-15℃之间，然后加入四氢呋喃冲洗液(3kg)。

温热至20℃后，加入20%乙酸水溶液(101kg)，维持温度低于30℃，然后加入水冲洗液(5kg)。相分离后，将水层用乙酸乙酯(91kg)回提取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液溶液(101kg)洗涤，然后用饱和氯化钠水溶液(100kg)洗涤。

将有机层通过蒸馏溶剂交换成庚烷(80kg)，然后加入甲基叔丁基醚(6.3kg)并将所述浆液在20℃搅拌6小时。然后过滤出固体，用庚烷(15.75kg)和甲基叔丁基醚(4.25kg)的混合物洗涤并在真空烘箱中在50℃干燥。收率为26.2kg(93.8mol,79摩尔%)。

¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.55(m,2H),7.38(t,J=7.8Hz,1H),7.13(m,1H),5.61(m,1H),5.27(m,1H),3.85(s,3H),1.39-1.46(m,12H)。

实施例2:制备化合物(I)的形式B的籽晶

将无定形形式的2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(7.5g)(如下面实施例4步骤(i)至(iv)中所述来制备，但无步骤(i)中的结晶步骤)加至9:1v:v庚烷:乙酸异丙酯溶液(75mL)中。将所述溶液加热至87℃，这导致溶解。使所述溶液冷却至15℃。

过滤出所得产物并在真空烘箱中在40℃干燥至恒重。收率为6.40g(85%)。XRPD衍射图与形式B参考物(表1和图1)一致。DSC分布与形式B参考物(图2)一致。

实施例3:将化合物(I)的形式A转化成化合物(I)的形式B

将化合物(I)的形式A转化成化合物(I)的形式B

将化合物(I)的形式B的晶种(28.4g)加至搅拌的化合物(I)的形式A(1.45kg)于水(101L)和2-丙醇(22.5L)中的浆液中。将所述浆液在20-25℃搅拌4天，此时间结束时XRPD分析显示，向形式B的转化结束。过滤出形式B产物并在真空烘箱中在40℃干燥至恒重。收率为1.41kg(97%)。含量测定为98.8%(NMR)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ9.50(d,J=8.5Hz,1H),8.18(d,J=0.9Hz,1H),7.78–7.73(m,2H),7.70(d,J=9.1Hz,1H),7.42–7.35(m,2H),7.27(t,J=7.9Hz,1H),7.23(dd,J=2.4,9.1Hz,1H),7.15(d,J=2.2Hz,1H),7.01(d,J=7.8Hz,1H),7.00–6.98(m,1H),6.85(ddd,J=0.8,2.6,8.3Hz,1H),5.30(d,J=6.4Hz,1H),4.28(dqd,J=6.4,6.8,8.5Hz,1H),3.74(s,3H),1.36(d,J=6.8Hz,3H)。

实施例4:制备化合物(I)的形式A

(i)2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(形式A)

将三氟乙酸酐(1.14L,8.14mol)历时45分钟加至搅拌的20℃的(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐(2.58kg,5.42mol；含量测定为90质量%)于甲基叔丁基醚(9.30L)和三乙胺(2.80L,20.1mol)中的悬浮液中，保持温度低于40℃。5分钟后，LC分析显示剩余的胺起始物质为0.05面积%。

将反应混合物依次用水(9.28L)、1M盐酸(9.28L,9.28mol)、7%碳酸氢钠水溶液(9.28L,8.03mol)和水(9.30L)洗涤。在40-50℃减压(500mbar)蒸发有机相，溶解在2-丙醇(9.30L)中并在40-50℃、50-500mbar再次蒸发。

将残余物溶解在2-丙醇(18.6L)中，用1μm过滤器筛滤到干净的容器中，然后加入水直到溶液变浑浊(需要11.3L)。取出两份浑浊的溶液(0.325和1.30L)，将第一份与2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(1.1g)的形式A晶种一起在干净的烧瓶中搅拌直到产生稠厚的浆液，然后加入第二部分，继续搅拌直到浆液再次变稠厚。将主要的结晶容器加热至约60℃以使一些无定形固体的小沉积物溶解，然后冷却恢复至25℃。为了更好的运动性，将晶种浆液温热至约35℃，然后加至主要结晶容器中。在3小时搅拌过程中将所述浆液温热至30℃，从而降低粘度。然后历时15分钟加入水(5.70L)并继续搅拌16小时，同时使温度在30-38℃范围内缓慢变化。过滤温度为30℃的浆液并用2-丙醇(2.30L)和水(3.50L)的混合物洗涤。将所述固体在40℃减压干燥至恒定质量。收率为2.45kg(93%)。含量测定为99.4%(NMR)、0.04%水、0.1%2-丙醇(全部以质量计)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ9.52(d,J=8.4Hz,1H),8.18(s,1H),7.77–7.72(m,2H),7.70(d,J=9.1Hz,1H),7.43–7.37(m,2H),7.27(t,J=7.9Hz,1H),7.21(dd,J=2.4,9.1Hz,1H),7.14(d,J=2.3Hz,1H),6.99(d,J=7.8Hz,1H),6.97–6.95(m,1H),6.84(dd,J=2.3,8.1Hz,1H),5.28(d,J=6.3Hz,1H),4.26(dqd,J=6.3,6.8,8.4Hz,1H),3.73(s,3H),1.34(d,J=6.8Hz,3H)。

通过实施例4获得的化合物(I)的形式(化合物(I)的形式A)的XRPD衍射图显示在下面的图3中。

通过实施例4获得的化合物(I)的形式(化合物(I)的形式A)的DSC分布显示在下面的图4中。所述化合物表现出83℃的熔化吸热起始温度。

(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐起始物质如下所述制备。

(ii)(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐

将用下面的实施例4步骤(iii)获得的(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺溶液(37.8kg,7.89mol；含量测定为8.2质量%)蒸发成稠的油状物，然后重新溶解在乙酸乙酯(15.5L)中。将所述溶液用1M盐酸(15.4L,15.4mol)洗涤，然后用氯化钠水溶液(15.5L；含量测定为10质量%)洗涤。将所述溶液在40℃减压蒸发成稠的油状物并重新溶解在乙醇(6.2L)中。

在50℃，加入甲基叔丁基醚(21.6L)，然后将所述溶液冷却至0℃。过滤出结晶的(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐，用四份甲基叔丁基醚(每份6.2L)洗涤，并在40℃干燥至恒定质量。收率为2.98kg(6.27mol,79摩尔%)。含量测定为90.0质量%(NMR)。含有残余的甲基叔丁基醚。LC纯度为99.9%。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ8.60(s,3H),8.21(d,J=0.9Hz,1H),7.79–7.73(m,3H),7.44–7.38(m,2H),7.36(dd,J=2.4,9.2Hz,1H),7.33(t,J=7.2Hz,1H),7.18(d,J=2.3Hz,1H),7.02–6.99(m,2H),6.91–6.88(m,1H),5.79(d,J=3.0Hz,1H),3.75(s,3H),3.68(qd,J=3.0,6.8Hz,1H),1.22(d,J=6.8Hz,3H)。

(iii)(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺

通过在大气压共沸蒸馏将水从1-(4-氟苯基)-5-碘-吲唑(2.20kg,4.40mol；含量测定为67.6质量%)于丁腈(8.5L)中的溶液中除去，从馏出物中除去水相但将有机相送回到容器中。(之后，含水量经确定为1.3g L^-1)。加入碳酸铯(4.65kg,14.3mol)和(1R,2S)-2-氨基-1-(3-甲氧基苯基)丙-1-醇盐酸盐(1.17kg,5.29mol；含量测定为98.4质量%)并将混合物在50-60℃用氮气鼓泡60分钟。然后加入单独制备的碘化亚铜(I)(0.21kg,1.10mol)、N,N-二甲基甘氨酸(0.23kg,2.23mol)和三乙胺(0.31L,2.22mol)于丁腈(6.6L)中溶液(该溶液已在80℃用氮气鼓泡40分钟)。将反应混合物在105℃加热18小时。

冷却至25℃后，将反应混合物用水(两部分，各11L)和1M盐酸(11L,11mol)洗涤。将有机层在60℃通过减压溶剂蒸发浓缩成稠厚的油状物。加入乙酸乙酯(11L)，然后将所述混合物在40℃通过减压溶剂蒸发浓缩的大粗制(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺盐酸盐。通过相同的方法从更多的1-(4-氟苯基)-5-碘-吲唑(2.14kg,4.38mol；含量测定为69.3质量%)来制备额外批次的粗制产物，并将两批次都溶解在乙酸乙酯(21.6L)中。将所述溶液用0.01N乙二胺四乙酸二钠水溶液(EDTA二钠)(21.6L)和氯化钠的水溶液(3.6L；含量测定为20质量%)的混合物洗涤，然后用乙酸乙酯(1.0L)稀释。将所述溶液用0.1N EDTA二钠水溶液(每部分21.6L)和氯化钠(每部分3.6L；含量测定为20质量%)的混合物洗涤两次，然后用碳酸氢钠水溶液(21.6L；含量测定为7.0质量%)洗涤，然后用氯化钠水溶液(21.6L；含量测定为10质量%)洗涤。

将所述溶液分成数份(每个周期0.2L，59个周期)在Kromasil

10μm硅胶(2.0kg)上进行色谱分析(用含有1%二乙基胺的15:85v:v乙醇:异己烷(每周期20L)洗脱)。每周期结束时，将所述柱用1:1乙醇:乙酸乙酯(3L)洗涤，然后用15:85v:v乙醇:异己烷(4L)平衡；两种溶液都含有1%二乙基胺。减压浓缩所选的级分并减压浓缩得到含有1.21kg(3.09mol)(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-胺的溶液。收率为35%，LC纯度为92.5面积%(λ=254nm)。

(iv)1-(4-氟苯基)-5-碘-吲唑

将2-氟-5-碘苯甲醛(3.70kg,14.2mol；含量测定为96.1质量%)和4-氟苯基肼盐酸盐(2.50kg,14.2mol；含量测定为92.4质量%)于N-甲基吡咯烷酮(25L)中的混合物在20℃搅拌5小时。

加入碳酸铯(13.89kg,42.6mol)并将混合物在115℃搅拌3.5小时。在将反应温度调整至80℃后加入水(18.3L)，并且一旦所述固体溶解，使所述混合物分层。弃去下层。

将上层和N-甲基吡咯烷酮(2L)冲洗液转移到搅拌的水(11.3L)中，在整个添加过程中维持在62℃。在冷却至20℃后，过滤出1-(4-氟苯基)-5-碘-吲唑，用两部分水(16.0L和17.5L)洗涤，然后用2-甲基戊烷(16.5L)洗涤，并且在20℃抽吸干燥约18小时。收率为6.28kg(11.9mol,84摩尔%)。含量测定(LC)为64%，20%的水，两者都是以质量计。LC纯度为98.6%(λ=254nm)。

¹H NMR(400MHz,d₆-DMSO)δ8.31(d,J=0.9Hz,1H),8.28(dd,J=0.7,1.6Hz,1H),7.78–7.73(m,2H),7.70(dd,J=1.6,8.8Hz,1H),7.61(ddd,J=0.7,0.9,8.9Hz,1H),7.45–7.38(m,2H)。

实施例5:制备化合物(I)的形式A的籽晶

将无定形形式的2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺(125mg)(如上面实施例4中所述制备，但无步骤(i)中的结晶步骤)溶解在二氯甲烷(3ml)中，将40μl该溶液转移到LC-小瓶中。然后向所述LC-小瓶中加入80μl有机溶剂混合物(乙酸乙酯:庚烷(1:99%))并将所得混合物在40℃搅拌7天。将所得晶体通过XRPD来分析。XRPD衍射图与形式A参考物(图3)一致。DSC分布与与形式A参考物(图4)一致。

实施例6:得到化合物(I)的形式B的可选择的结晶操作

根据实施例1步骤(ii)至(vii)制备2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺，但无步骤(ii)中的溶剂交换(即，不蒸馏掉甲基叔丁基醚并且之后替换为1-丙醇)。

实际上，在紧跟实施例1的过滤步骤后的步骤(ii)中，通过添加更多的甲基叔丁基醚将所述甲基叔丁基醚溶液的浓缩物调整至5.5ml溶液/g2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺。此时，缓慢加入2.2ml正庚烷/g并将所述溶液加热至35℃。然后将所述溶液冷却至21℃。将所述溶液用形式B晶体引晶。将形成的晶体浆液搅拌过夜。加入5ml正庚烷/g并在搅拌5小时后过滤出所述晶体。将所述晶体用0.4ml甲基叔丁基醚/g和0.6ml正庚烷/g的混合物洗涤。将所述晶体在40℃真空干燥。结晶收率:86%。XRPD衍射图与形式B参考物(表1和图1)一致。DSC分布与形式B参考物(图2)一致。

实施例7:化合物(I)的形式B的溶解度

制备2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺的形式B于含有1.2mM枸橼酸缓冲液、0.05%PS80和9mg/g氯化钠的溶液中的两种悬浮液，浓度分别为0.5mg/g和0.05mg/g，并且pH为3.8(用氢氧化钠调整)。将所述悬浮液在5℃静置两个月，然后使其温热至室温并转移到5mL小瓶中。将每种悬浮液离心两次(Sigma2-16KCH,8000rpm,25℃)并在每次离心后将上清液转移到新的小瓶中。在室温用HPLC确定所述上清液的溶解度(Agilent Technologies1100)。

形式B的溶解度=7μg/mL。

实施例8:化合物(I)的形式B的吸湿性。

2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺的形式B对湿度变化的重量应答是用DVS Advantage(表面测量系统)重量蒸气吸收(GVS)仪器测量的。使用以下条件评估约10mg样品:在干燥条件下120min，然后干燥至90%相对湿度，随后放置在以步幅10%降低的湿度水平条件下。

形式B在80%相对湿度的湿气吸收为=0.07%。

实施例9:经吸入的化合物(I)的形式A和形式B在大鼠肺和大鼠血液中的药代动力学性质

经吸入途径给药时的化合物(I)的形式A和形式B的总的肺暴露和血液暴露的水平(表达为"曲线下面积"或AUC)和血液含量峰值水平(表达为C_max)是用下面的方案测量的。

1.吸入

通过吸入途径进行的暴露是用仅鼻部"流经(flow-past)"暴露室(MinisterAG,Switzerland)进行的。将化合物(I)的形式A和B以干粉吸入剂(DPI)的形式给药于大鼠(10分钟暴露)并且在给药后最长24小时测量血浆中的化合物浓度。

吸入系统的校准。

小的动物吸入系统(MIVIS)用来递送和测量所吸入的剂量。为了测量气雾剂浓度，使用光散射仪器(Casella950AMS,London,UK)。暴露前，通过提取过滤器样品来评估物质相关因子(substance correlation factor)(AP40Millipore,n=2+2)。按照与将动物连于吸入系统的方式相同的方式将所述过滤器固定在所述吸入系统中。通过HPLC分析过滤器上化合物(I)形式A和B的量。将相关因子用在剂量测量程序中，在所述程序中，颗粒浓度和潮气量用于评估所吸入的剂量。Casella上的目标浓度为1,5mg/m³(Casella编号:034022，范围:0-2000)。通过流速为0.25L/min的过滤器采样(2+2)来证实所述校准。

粒径测量.

用Mercer Seven Stages Impactor(In-Tox products USA)(n=7+1过滤器，流速为0.25L/min)测量接近吸入侧(inhalation side)的粒径。所吸入颗粒的沉积可能性被认为与之前就大鼠所报道的沉积可能性类似(Raabe OG,Yeh HC,Newton GJ,Phalen RF,Velasques DJ.Deposition of inhaled monodisperseaeroso 1S in small rodents.In:Walton WH,editor.Inhaled Particles IV.New York:Pergamon Press；1977.p3-21)。

试验系统(DPI).

将微粉化化合物(I)形式A和B(30%API,70%乳糖)在中等粉尘容器中压制(压力=1.2Bar)，并且通过改良的Wright Dust Feed(WDF)在历时10分钟内通过从经压制的片剂上擦扫所述物质来生成气雾剂。通过Motomatic II控制WDF上的速度(1200-1400rpm)，并且流经WDF的速度为8.0L/min。向每个动物通道供应的空气速度为0.3L/min，其为210g大鼠每分钟呼吸量的约2倍，并被认为足以满足所述动物的氧气需求(Crosfill ML,Widdicombe JG.Physical characteristics of the chest and lungs and the work of breathing indifferent mammalian species.J Physiol1961；158(1):1-14)。在吸入过程中监测呼吸量和颗粒浓度。

处理.

目标肺剂量为50μg/kg(10分钟吸入)。所述给药在早晨进行。在实验期间持续对大鼠进行观察并且直至在给药后至少2小时。

计算吸入的剂量(ID)

吸入的剂量=((室浓度*暴露时间*每分钟呼吸量)/体重(kg))

计算全身剂量(BP)

全身剂量=吸入的剂量*沉积在体内的分数

计算肺剂量(LP)

肺剂量=吸入的剂量*沉积在肺内的分数

2.终止

在吸入化合物后的24小时内，将动物定期处死。通过腹膜内(ip)给药过量的戊巴比妥(60mg/mL,10mL/kg)进行麻醉。称量动物并提取最终血液样品。打开肋架并切下肺和气管。将切下的器官称重。

3.生物分析

通过含有体积标志物(volume marker)的冷的酸化的乙腈对所述血液样品进行蛋白沉淀。离心后，稀释上清液以与流动相匹配并用LC-MS/MS对提取物进行量化。分析用肺部样品如下制备：首先在液氮中将所述肺粉碎，然后通过适应性聚焦声能(Covaris)在林格溶液中匀化。通过含有体积标志物的冷的酸化的乙腈对所述匀浆进行蛋白沉淀，并且在离心后，稀释上清液以与通过LC-MS/MS(具有Agilent1200二元泵和CTC自动采样器的Agilent6460三重四级杆)进行分析所用的流动相匹配。

4.计算

通过LC-MS/MS分析来自所述实验的肺和血液样品。通过房室模型(2室)用WinNonlin分析浓度对时间分布。通过该方式，获得用于计算峰面积(AUC)和C_max的参数。

通过该方法获得的化合物(I)的形式A和形式B的总的肺暴露值(肺AUC)、血液含量峰值(血液C_max)和总的血液暴露值(血液AUC)列表显示在下面的表3中。

表3

	形式A	形式B
			肺AUC(hr*nmol/L)	9110	21289

血液Cmax(nmol/L)	83	55
			血液AUC(hr*nmol/L)	288	246

Claims (13)

1.结晶形式，其为2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-[1-(4-氟苯基)吲唑-5-基]氧基-1-(3-甲氧基苯基)丙-2-基]乙酰胺形式B("化合物(I)的形式B")。

2.权利要求1的化合物(I)的形式B，特征在于用波长的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有以下位置(2-θ°)的峰：9.2，17.4和21.5。

3.权利要求1的化合物(I)的形式B，特征在于用波长

的X-射线测量的X-射线粉末衍射图具有以下位置(2-θ°)的峰：9.2，11.8，15.7，17.4和21.5。

4.权利要求1的化合物(I)的形式B，特征在于所述形式具有基本如图1所示的X-射线粉末衍射图。

5.药物组合物，其包含权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B和药用助剂、稀释剂或载体。

6.权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B，其用在疗法中。

7.权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B在制备用于治疗呼吸病症的药物中的用途。

8.权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B在制备用于治疗COPD的药物中的用途。

9.权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B在制备用于治疗哮喘的药物中的用途。

10.在哺乳动物(例如人)中治疗呼吸病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B。

11.在哺乳动物(例如人)中治疗COPD的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B。

12.在哺乳动物(例如人)中治疗哮喘的方法，所述方法包括向需要所述治疗的哺乳动物给药有效量的权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B。

13.权利要求1-4中任一项的化合物(I)的形式B与一种或多种选自下列药物的组合产品:

·PDE4抑制剂；

·选择性β₂肾上腺素受体激动剂；

·毒蕈碱性受体拮抗剂；

·类固醇；

·趋化因子受体功能的调节剂；

·p38激酶功能的抑制剂；

·基质金属蛋白酶的抑制剂，最优选为靶向MMP-2、MMP-9或MMP-12的抑制剂；或

·嗜中性丝氨酸蛋白酶的抑制剂，最优选为嗜中性弹性蛋白酶或蛋白水解酶3的抑制剂。

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