CN103808923A - 一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置 - Google Patents

一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置,其中所述装置包括移位器具及固定于其上的至少一个磁分离器具、用于分别盛放磁分离荧光免疫检测所需各种试剂的反应杯孔容器。本发明的可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置,其可通过磁分离器具与反应杯孔容器的相对位移运动实现磁微粒在不同反应杯孔容器溶液中的吸附/释放,相较于现有技术本发明可对反应杯孔容器溶液中磁微粒实施有效的快速吸附/释放,期望能够更快的进行检测并提供分析结果,其结果重复性好且实验灵敏度和准确度较高,材料存储稳定期长,可提供用于多项目测定免疫平台。

Description

一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置
技术领域
 本发明涉及免疫学检测领域,具体指一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置。
背景技术
在免疫学检测领域,传统的ELISA(Enzyme Linked Immuno  Sorbent Assay)检测技术对于辅助医学临床诊断起到重要的作用,而相应的自动化分析装置及其配套试剂在临床实验室中被广泛应用。
虽然市场上多种自动化检测分析装置及配套试剂的检测分析原理各不相同,但大体上都以连续的自动化操作实现临床标本中特定物质的快速检测分析,其检测分析方法均以聚苯乙烯、聚氯乙烯等材料制作而成的反应板孔、反应杯、反应吸头等作为载体,将特异性的生物活性分子固定于其表面来捕获检测样品中的待测物质,然后通过特异性反应模式及示踪系统进行分析测定。
发明内容
基于上述现有技术,本发明将可移动式磁分离技术用于免疫学检测反应,提供了一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置,其装置可自动化处理所有步骤直至产生检测分析结果,相较于现有技术,本发明期望能够更快的进行检测并提供分析结果。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案为:
一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,所述装置包括移位器具及固定于其上的至少一个磁分离器具、用于分别盛放磁分离荧光免疫检测所需各种试剂的反应杯孔容器。
作为上述技术方案的改进,所述移位器具包括分别用于固定磁分离器具的垂直移位器具、用于固定反应杯孔容器的水平移位器具。
作为上述技术方案的改进,所述磁分离器具包括内芯、外壳,其内芯与外壳可通过所述垂直移位器具作活塞式垂直运动。
进一步地,所述外壳为柱形,其可通过所述垂直移位器具作旋转式圆周运动。
进一步地,所述内芯为磁性材料,所述外壳为惰性材料。
更进一步地,所述外壳其旋转式圆周运动频率在0.5~10Hz之间,优选在1~8Hz之间,尤其在1.5~3Hz之间。
作为上述技术方案的改进,所述反应杯孔容器上布置有若干反应杯孔及用于测定荧光反应强度的读数池,其可通过所述水平移位器具作直线运动或圆周运动。
一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法,所述方法包括
a、通过磁分离器具与反应杯孔容器的相对位移运动实现磁微粒在反应杯孔容器溶液中的吸附/释放;
b、重复上述步骤直至进行读数操作;
c、通过读数测定反应杯孔容器中的荧光反应强度实现待分析溶液中特定物质的快速分析。
作为上述技术方案的改进,所述磁分离器具吸附/释放运动时间在0.5~20分钟之间,优选在1~8分钟之间,尤其在1.5~3分钟之间。
本发明带来的有益效果有:
本发明的可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法及装置,其可通过磁分离器具与反应杯孔容器的相对位移运动实现磁微粒在不同反应杯孔容器溶液中的吸附/释放,在检测反应的每一步,磁分离器具多次位移进入含有不同反应溶液的反应杯孔容器中对磁微粒进行吸附/释放,直至最后的读数步骤,相较于现有技术本发明可对反应杯孔容器溶液中磁微粒实施有效的快速吸附/释放,期望能够更快的进行检测并提供分析结果,其结果重复性好且实验灵敏度和准确度较高,材料存储稳定期长。本发明内容可提供用于多项目测定免疫平台。
附图说明
下面结合附图及具体实施例对本发明作进一步说明,
附图1是本发明结构示意图;
附图2是本发明优先实施例中反应杯孔容器结构示意图;
附图3是本发明第二实施例中反应杯孔容器结构示意图;
附图4是本发明另一实施例中反应杯孔容器结构示意图。
具体实施方式
参照附图1,本发明的装置包括移位器具、磁分离器具及反应杯孔容器6,所述的移位器具又可分为垂直移位器具8和水平移位器具9,其中磁分离器具固定于垂直移位器具8上,反应杯孔容器6固定于水平移位器具9上,二者可在移位器具的动作下产生相对位移,本发明即通过此相对位移运动实现磁微粒在不同反应杯孔容器6溶液中的吸附/释放,实现待分析溶液中特定物质的快速检测分析。
具体的,所述的磁分离器具包括内芯1、外壳2,内芯1为磁性材料,外壳2为惰性材料,不会与反应液发生任何化学或生物反应,其中外壳2为圆柱形,且外壳2顶部设有开口,底部无开口,内芯1通过连接构件4连接到固定器具5上,磁分离器具外壳2的上部通过一带圆孔的连接器具3连接到垂直移位器具8,在垂直移位器具8的带动下,磁分离器具的内芯1与外壳2可以通过活塞式垂直运动及外壳2的旋转式圆周运动进行磁微粒的吸附/释放。
水平移位器具9可用来承载盛放备用试剂的反应杯孔容器6,反应杯孔容器6上规则布置有若干反应杯孔7及用于测定荧光反应强度的读数池,备用试剂分布在反应杯孔容器6的不同反应杯孔7中,这些试剂可由磁微粒、检测抗原、抗体及其示踪标记复合物、荧光底物等组成,上述反应杯孔7中的一个或几个也可用来放置想要分析的样品。
在实际应用中,由于垂直移位器具8,磁分离器具的内芯1、外壳2相对位移结合并朝向反应杯孔7移位,然后浸入含有磁微粒溶液的反应杯孔7中进行吸附磁微粒操作,然后通过垂直移位器具8,内芯1-外壳2-磁微粒复合物被相对位移,同时由于水平移位器具9,反应杯孔容器6发生相对位移并使另一反应杯孔7移动至内芯1-外壳2-磁微粒复合物正下方,随后,继续通过垂直位移器具8,内芯1-外壳2-磁微粒复合物被相对位移浸入另一反应杯孔7溶液中,随后使内芯1与外壳2相对位移分离,同时外壳2以旋转式圆周运动释放磁微粒,至此完成一次磁微粒吸附/释放。
基于上述操作,磁微粒可以从一个反应杯孔7完全转移至另一反应杯孔7中,使得整个免疫检测反应复合物完全彻底转移,操作更加简单快捷,分析结果更加准确、重复性好。
值得一提的是,在本发明中,所述磁微粒由聚苯乙烯外表面包裹四氧化三铁磁芯构成,其外表面粘附有活性成分,所述的活性成分能够与反应液中特定物质发生化学或生物反应。同时,磁微粒具有固相表面积大、均一等特点,其和生物分子之间是特异性结合而不是非特异性吸附,优化反应同时也能降低了反应液的本底,所以实验灵敏度和准确度大幅度提高,材料存储稳定期长。在检测反应的每一步,磁分离器具多次位移进入含有不同反应溶液的反应杯孔容器6中对磁微粒进行吸附/释放,直至最后的读数步骤,反应杯孔容器6上布置有的读数池,在其中可用荧光来测量反应强度。
此外,本发明磁分离器具的外壳2可以以合适频率的连续旋转式圆周运动引起反应杯孔容器6中液体的共振,从而增加磁微粒与反应液中生物分子的接触面,使磁微粒表面活性成分与反应液中的生物分子之间的反应更容易发生,这使得可能更快速地获得分析结果。
具体的,磁分离器具外壳2的连续旋转式圆周运动频率在0.5~10Hz之间,优选在1~8Hz之间,尤其在1.5~3Hz之间,磁分离器具的吸附/释放运动时间在0.5~20分钟之间,优选在1~8分钟之间,尤其在1.5~3分钟之间。
为使得磁分离器具外壳2的底部位于反应杯孔7的正上方,本发明反应杯孔容器6可参照附图2至附图4具体布置方式,并可通过水平移位器具9控制其作直线运动或圆周运动。
本发明还提供了一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法,所述方法包括
a、通过磁分离器具与反应杯孔容器6的相对位移运动实现磁微粒在反应杯孔容器6溶液中的吸附/释放;
b、重复上述步骤直至进行读数操作;
c、通过读数测定反应杯孔容器6中的荧光反应强度实现待分析溶液中特定物质的快速分析。
本发明内容可提供用于多项目测定免疫平台。
最后,以上所述只是本发明的较佳实施例而已,本发明并不局限于上述实施方式,只要其以相同的手段达到本发明的技术效果,都应属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述装置包括移位器具及固定于其上的至少一个磁分离器具、用于分别盛放磁分离荧光免疫检测所需各种试剂的反应杯孔容器(6)。
2.根据权利要求1所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述移位器具包括分别用于固定磁分离器具的垂直移位器具(8)、用于固定反应杯孔容器(6)的水平移位器具(9)。
3.根据权利要求2所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述磁分离器具包括内芯(1)、外壳(2),其内芯(1)与外壳(2)可通过所述垂直移位器具(8)作活塞式垂直运动。
4.根据权利要求3所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述外壳(2)为柱形,其可通过所述垂直移位器具(8)作旋转式圆周运动。
5.根据权利要求3所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述内芯(1)为磁性材料,所述外壳(2)为惰性材料。
6.根据权利要求4所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述外壳(2)其旋转式圆周运动频率在0.5~10Hz之间,优选在1~8Hz之间,尤其在1.5~3Hz之间。
7.根据权利要求2所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析装置,其特征在于:所述反应杯孔容器(6)上布置有若干反应杯孔(7)及用于测定荧光反应强度的读数池,其可通过所述水平移位器具(9)作直线运动或圆周运动。
8.一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法,其特征在于:所述方法包括
a、通过磁分离器具与反应杯孔容器(6)的相对位移运动实现磁微粒在反应杯孔容器(6)溶液中的吸附/释放;
b、重复上述步骤直至进行读数操作;
c、通过读数测定反应杯孔容器(6)中的荧光反应强度实现待分析溶液中特定物质的快速分析。
9.根据权利要求8所述的一种可移动式磁分离荧光免疫检测分析方法,其特征在于:所述磁分离器具吸附/释放运动时间在0.5~20分钟之间,优选在1~8分钟之间,尤其在1.5~3分钟之间。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104714026A (zh) * 2014-12-31 2015-06-17 北京热景生物技术有限公司 一种甲胎蛋白异质体的分离检测组合物、系统及其应用
CN109060783A (zh) * 2018-10-25 2018-12-21 成都博奥新景医学科技有限公司 一种基于磁棒法的单人份化学发光免疫检测方法及系统

Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6121055A (en) * 1987-12-01 2000-09-19 Roche Diagnostics Corporation Methods and devices for conducting specific binding assays
CN1295669A (zh) * 1998-02-06 2001-05-16 生物磁性有限公司 转移材料的装置和系统
US20040157224A1 (en) * 2003-01-29 2004-08-12 Roh Hee Joun Kit for separating and purifying nucleic acids or various biological materials, and system for automatically performing separation or purification of biological materials using the same
US20060269385A1 (en) * 2005-05-24 2006-11-30 Festo Corporation Apparatus and method for transferring samples from a source to a target
CN101149376A (zh) * 2006-09-19 2008-03-26 财团法人工业技术研究院 磁珠式检体分离装置
CN201060199Y (zh) * 2007-03-26 2008-05-14 台湾圆点奈米技术开发有限公司 全自动磁珠操作平台
US20090176308A1 (en) * 2007-11-13 2009-07-09 Stratec Biomedical Systems Ag Apparatus and method for the purification of biomolecules
CN102027367A (zh) * 2008-02-29 2011-04-20 西北大学 促进生物反应的屏障
CN202011883U (zh) * 2007-12-12 2011-10-19 里兰斯坦福初级大学理事会 用于捕获和分离目标细胞的装置
CN102338806A (zh) * 2010-07-23 2012-02-01 南京英诺华科技有限公司 一种新型随机任选式多项目全自动免疫分析系统
CN102419375A (zh) * 2011-08-24 2012-04-18 四川迈克生物科技股份有限公司 全自动化学发光免疫分析仪
CN102636649A (zh) * 2012-03-04 2012-08-15 无锡市第四人民医院 基于抗体功能化磁性纳米材料和上转换荧光纳米材料检测癌胚抗原的试剂盒
CN102656465A (zh) * 2009-12-16 2012-09-05 株式会社日立高新技术 试样处理装置、试样处理方法以及所使用的反应容器
CN102998473A (zh) * 2012-12-19 2013-03-27 北京利德曼生化股份有限公司 全自动化学发光免疫分析仪
CN103308679A (zh) * 2013-06-03 2013-09-18 江苏大学 用纳米荧光碳点免疫标记检测细菌的方法
CN103604939A (zh) * 2013-12-03 2014-02-26 南京医科大学第二附属医院 一种基于微纳磁珠电磁转移技术的全自动发光免疫分析系统

Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6121055A (en) * 1987-12-01 2000-09-19 Roche Diagnostics Corporation Methods and devices for conducting specific binding assays
CN1295669A (zh) * 1998-02-06 2001-05-16 生物磁性有限公司 转移材料的装置和系统
US20040157224A1 (en) * 2003-01-29 2004-08-12 Roh Hee Joun Kit for separating and purifying nucleic acids or various biological materials, and system for automatically performing separation or purification of biological materials using the same
US20060269385A1 (en) * 2005-05-24 2006-11-30 Festo Corporation Apparatus and method for transferring samples from a source to a target
CN101149376A (zh) * 2006-09-19 2008-03-26 财团法人工业技术研究院 磁珠式检体分离装置
CN201060199Y (zh) * 2007-03-26 2008-05-14 台湾圆点奈米技术开发有限公司 全自动磁珠操作平台
US20090176308A1 (en) * 2007-11-13 2009-07-09 Stratec Biomedical Systems Ag Apparatus and method for the purification of biomolecules
CN202011883U (zh) * 2007-12-12 2011-10-19 里兰斯坦福初级大学理事会 用于捕获和分离目标细胞的装置
CN102027367A (zh) * 2008-02-29 2011-04-20 西北大学 促进生物反应的屏障
CN102656465A (zh) * 2009-12-16 2012-09-05 株式会社日立高新技术 试样处理装置、试样处理方法以及所使用的反应容器
CN102338806A (zh) * 2010-07-23 2012-02-01 南京英诺华科技有限公司 一种新型随机任选式多项目全自动免疫分析系统
CN102419375A (zh) * 2011-08-24 2012-04-18 四川迈克生物科技股份有限公司 全自动化学发光免疫分析仪
CN102636649A (zh) * 2012-03-04 2012-08-15 无锡市第四人民医院 基于抗体功能化磁性纳米材料和上转换荧光纳米材料检测癌胚抗原的试剂盒
CN102998473A (zh) * 2012-12-19 2013-03-27 北京利德曼生化股份有限公司 全自动化学发光免疫分析仪
CN103308679A (zh) * 2013-06-03 2013-09-18 江苏大学 用纳米荧光碳点免疫标记检测细菌的方法
CN103604939A (zh) * 2013-12-03 2014-02-26 南京医科大学第二附属医院 一种基于微纳磁珠电磁转移技术的全自动发光免疫分析系统

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104714026A (zh) * 2014-12-31 2015-06-17 北京热景生物技术有限公司 一种甲胎蛋白异质体的分离检测组合物、系统及其应用
CN109060783A (zh) * 2018-10-25 2018-12-21 成都博奥新景医学科技有限公司 一种基于磁棒法的单人份化学发光免疫检测方法及系统

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