CN103783037A

CN103783037A - 一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液及制备方法

Info

Publication number: CN103783037A
Application number: CN201410040638.8A
Authority: CN
Inventors: 蔡成岗; 蒋新龙; 蒋益花
Original assignee: Zhejiang Shuren University
Current assignee: Zhejiang Shuren University
Priority date: 2014-01-28
Filing date: 2014-01-28
Publication date: 2014-05-14
Anticipated expiration: 2034-01-28
Also published as: CN103783037B

Abstract

本发明公开了一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液及制备方法，每100ml微乳液中包括0.1-0.5ml的植物精油、0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵、0.1-0.4ml无水乙醇、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温20，余量为无菌水。本发明的微乳液均匀、稳定，具有抑制链格孢等微生物生长，防治柑橘黑腐病效果。

Description

一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液及制备方法

技术领域

本发明属于食品防腐保鲜技术领域，尤其涉及一种具有抑制柑橘黑腐病菌链格孢菌作用的含有植物精油的微乳液及制备方法。

背景技术

植物精油通常用来制备香精、香水，但随着人们生活质量的飞速提高和环境意识的不断加强，植物精油的应用也逐渐扩大。植物精油在食品添加剂、害虫防治、杀菌抗菌和防腐等方面的功能，也日益受到人们的关注与重视。植物精油是一类植物源次生代谢物质，分子量较小，具有一定挥发性的油状液体物质。精油是从植物中提取出的具有特征性香气的一类物质，一般是借助蒸馏、浸提、压榨以及吸附等方法从植物的根、茎、叶、枝、干、花、果、籽以及分泌出的树脂、树膏中分离提取得到的。

植物精油不溶于水而易溶于各种有机溶剂，当与空气及光线经常接触会逐渐氧化变质，使精油的比重增加，颜色变深，失去原有香味，并能形成树脂样物质。植物精油的挥发性对其应用有一定的影响，如在抑菌方面随着挥发过程会降低其作用效果。

微乳液具有稳定性高、增溶量大、界面张力低等特点，被广泛应用于食品、医药、日用化工等领域，应用前景十分广阔。在食品领域中，微乳技术在饮料生产、热敏性物料包埋、食品防腐等方面的应用逐渐增多，目前成为研究热点。目前微乳液的制备方法主要包括超声波乳化或者高压均质乳化等方法，在乳化和均质过程中需添加适当的表面活性剂。

柑橘黑腐病主要是由柑橘链格孢菌引起的柑橘等水果产生的病害，具有黑心型、黑腐型、蒂腐型和干疤型等类型，对柑橘类果实造成了一定的危害。导致黑腐病菌的主要危害微生物为链格孢菌，目前研究人员正在研发新型安全和高效的抑菌剂，以减少传统农药造成的残留等危害。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液及制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液，每100ml微乳液中包括0.1-0.5ml的植物精油、0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、0.1-0.4ml无水乙醇、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温20，余量为无菌水。

进一步地，所述植物精油为艾叶精油或八角茴香精油。

一种上述用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液的制备方法，包括以下步骤：

（1）称量0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵，溶解于0.1-0.4ml无水乙醇中和1-4ml的无菌水中，配制得到质量浓度为0.5%-2%十六烷基三甲基溴化铵的乙醇水溶液；

（2）向步骤（1）得到的溶液中加入0.1-0.5ml的植物精油、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温，再添加无菌水至100mL，振荡1-5min；

（3）将步骤（2）配置的溶液置于高压均质机进行高压均质处理，压力400-700 bar，均质时间2-10 min，得到本发明防治柑橘黑腐病菌的微乳液

本发明的有益效果是：本发明基于植物精油作为高效的真菌防腐剂的特点以及微乳液具有的稳定等特征，通过将植物精油、乳化剂等成分进行微乳化处理，获得了具有良好稳定性和分散性的微乳液，该乳液对链格孢引起的柑橘黑腐病病害具有较好的防治效果，克服了精油的挥发性问题，也柑橘黑腐病菌的防治提供了新的方法。

附图说明

图1为实施例1对照组图；

图2为实施例1的微乳液对链格孢抑制效果图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明进一步说明。

本发明用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液，每100ml微乳液中包括0.1-0.5ml的植物精油、0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、0.1-0.4ml无水乙醇、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温20，余量为无菌水。

所述植物精油为艾叶精油或八角茴香精油

本发明用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液的制备方法，包括以下步骤：

（1）称量0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵，溶解于0.1-0.4ml无水乙醇中和1-4ml的无菌水中，配制得到质量浓度为0.5%-2%十六烷基三甲基溴化铵的乙醇水溶液。

（2）向步骤1得到的溶液中加入0.1-0.5ml的植物精油、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温，再添加无菌水至100mL，振荡1-5min。

（3）将步骤2配置的溶液置于高压均质机（ATS engineering INC）进行高压均质处理，其中压力400-700 bar，均质时间2-10 min，得到本发明防治柑橘黑腐病菌的微乳液。

下面根据实施例详细描述本发明，本发明的目的和效果将变得更加明显。

实施例1

本实施例中微乳液的配方含有精油（艾叶精油）、无水乙醇、乙酸乙酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、吐温20、无菌水等成分。首先称取CTAB粉末0.01 g于大试管中，加入0.2 mL无水乙醇，再加入0.8 mL无菌水，配制成质量百分数为1%的CTAB溶液（m/m），再吸取艾叶精油0.2mL，聚乙二醇辛基苯基醚2mL，乙酸乙酯1mL，吐温20 1mL，用漩涡振荡器振荡2min，至混匀成稳定状态，然后通过边混合边逐渐少量多次加入的方法加入蒸馏水，至混合物溶液总量为100 mL。然后通过高压均质机进行均质处理，均质压力500 bar，均质时间5min，即可得均匀一致的微乳液。高压均质后，乳液的粒径明显变小，稳定性显著提高，在PDA培养基中滴加50μL微乳液于链格孢菌落上，空白对照滴加50μL蒸馏水，于28 °C培养3天，滴加微乳液的菌落直径为未滴加菌落直径的30%，说明该实施例1制备的微乳液的明显抑菌性。

构建的精油微乳液其粒径分布如表1所示。

表1：实施例1构建微乳液粒度分布表

粒径范围（μm）	含量(%)	粒径范围（μm）	含量(%)	粒径范围（μm）	含量(%)
						68.6-76.3	0.05	117.1-130.4	12.05	200.1-222.7	6.72
76.3-85.0	0.27	130.4-145.1	16.84	222.7-247.8	2.07
						85.0-94.6	1.07	145.1-161.5	19.32	247.8-275.83	0.28
94.6-105.2	3.12	161.5-179.7	18.11
						105.2-117.1	6.93	179.7-200.1	13.17

如图1和图2所示，实施例1的微乳液比对照组具有明显抑菌性。

实施例2

本实施例中微乳液的配方含有精油（艾叶精油）、无水乙醇、乙酸乙酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、吐温20、无菌水等成分。首先称取CTAB粉末0.015 g于大试管中，加入0.3 mL无水乙醇，再加入0.7 mL无菌水，配制成质量百分数为1.5%的CTAB溶液（m/m），再吸取艾叶精油0.3mL，聚乙二醇辛基苯基醚3mL，乙酸乙酯1.5mL，吐温20 1.5mL，用漩涡振荡器振荡4min，至混匀成稳定状态，然后通过边混合边逐渐少量多次加入的方法加入蒸馏水，至混合物溶液总量为100 mL。然后通过高压均质机进行均质处理，均质压力600 bar，均质时间6min，即可得均匀一致的微乳液。高压均质后，乳液的粒径明显变小，稳定性显著提高，在PDA培养基中滴加50μL微乳液于链格孢菌落上，空白对照滴加50μL蒸馏水，于28 °C培养3天，滴加微乳液的菌落直径为未滴加菌落直径的30%，说明该实施例2制备的微乳液具有显著抑菌性。

实施例3

本实施例中微乳液的配方含有精油（艾叶精油）、无水乙醇、乙酸乙酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、吐温20、无菌水等成分。首先称取CTAB粉末0.005g于大试管中，加入0.1 mL无水乙醇，再加入0.9 mL无菌水，配制成质量百分数为0.5%的CTAB溶液（m/v），再吸取艾叶精油0.1mL，聚乙二醇辛基苯基醚1mL，乙酸乙酯0.5mL，吐温20 0.5mL，用漩涡振荡器振荡1min，至混匀成稳定状态，然后通过边混合边逐渐少量多次加入的方法加入蒸馏水，至混合物溶液总量为100 mL。然后通过高压均质机进行均质处理，均质压力400 bar，均质时间2min，即可得均匀一致的微乳液。高压均质后，乳液的粒径明显变小，稳定性显著提高，在PDA培养基中滴加50μL微乳液于链格孢菌落上，空白对照滴加50μL蒸馏水，于28 °C培养3天，滴加微乳液的菌落直径为未滴加菌落直径的40%，说明该实施例3制备的微乳液具有显著抑菌性。

实施例4

本实施例中微乳液的配方含有精油（八角茴香精油）、无水乙醇、乙酸乙酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵溶液、吐温20、无菌水等成分。首先称取CTAB粉末0.02g于大试管中，加入0.4 mL无水乙醇，再加入0.6 mL无菌水，配制成质量百分数为2%的CTAB溶液（m/v），再吸取八角茴香精油0.5mL，聚乙二醇辛基苯基醚6mL，乙酸乙酯4mL，吐温20 4mL，用漩涡振荡器振荡1min，至混匀成稳定状态，然后通过边混合边逐渐少量多次加入的方法加入蒸馏水，至混合物溶液总量为100 mL。然后通过高压均质机进行均质处理，均质压力700 bar，均质时间10min，即可得均匀一致的微乳液。高压均质后，乳液的粒径明显变小，微乳液稳定性明显提高，在PDA培养基中滴加80μL微乳液于链格孢菌落上，空白对照滴加80μL蒸馏水，于28 °C培养3天，滴加微乳液的菌落直径为未滴加菌落直径的25%，说明该实施例4制备的微乳液具有显著抑菌性。

上述实施例用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。

Claims

1.一种用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液，其特征在于，每100ml微乳液中包括0.1-0.5ml的植物精油、0.005-0.02g的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、0.1-0.4ml无水乙醇、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温20，余量为无菌水。

2.根据权利要求1所述用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液，其特征在于，所述植物精油为艾叶精油或八角茴香精油。

3.一种权利要求书1所述用于防治柑橘黑腐病菌的微乳液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（2）向步骤1得到的溶液中加入0.1-0.5ml的植物精油、1-6ml聚乙二醇辛基苯基醚、0.5-4ml乙酸乙酯、0.5-4ml吐温，再添加无菌水至100mL，振荡约1-5min；

（3）将步骤2配置的溶液置于高压均质机进行高压均质处理，压力约400-700 bar，均质时间约2-10 min，得到本发明防治柑橘黑腐病菌的微乳液。