CN103764608B - 用于治疗炎性肠病的茚衍生物 - Google Patents

用于治疗炎性肠病的茚衍生物 Download PDF

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CN103764608B CN 201280035083 CN201280035083A CN103764608B CN 103764608 B CN103764608 B CN 103764608B CN 201280035083 CN201280035083 CN 201280035083 CN 201280035083 A CN201280035083 A CN 201280035083A CN 103764608 B CN103764608 B CN 103764608B
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Abstract

本发明描述结构式I的化合物。本发明还提供式I的化合物的药理学可接受的异构体和盐。所述化合物可用于治疗炎性肠病。

Description

用于治疗炎性肠病的節衍生物

技术领域

[0001] 本发明设及用于治疗炎性肠病的新化合物。

背景技术

[0002] 炎性肠病(IBD)由两种特发性炎性疾病组成,溃瘍性结肠炎扣C)和克隆病(CD)。 UC与CD之间最大的区别在于发炎的肠组织的范围。CD中的炎症是不连续分节的,已知为 区域性肠炎,而UC则是浅表性炎症,其邻近且连续地从直肠延伸。目前,I抓的确切原因尚 不了解。运种疾病看起来与对促炎性和免疫调节分子的不平衡引起的肠上皮感染的扩大 粘膜免疫应答相关。IBD的遗传模式提示病理发病机理的复杂遗传组分,其可W由几种组 合的遗传突变组成。目前还没有IBD的特异性诊断测试,但是关于发病机理的了解有所进 步,我们的测试方法也是如此。I抓的治疗由诱导和维持缓解组成。I抓患者可W通过使用 5-氨基水杨酸来维持缓解。然而,虽然在UC中使用氨基水杨酸提供相当的益处,但是在轻 度至中度疾病的诱导缓解W及预防复发中,运些药物维持CD中的缓解的用处尚持有疑问, 并且不再推荐。活性疾病治疗的主要使用皮质酱类,其通常使用有限的时间W使得UC和CD 患者回到缓解,虽然设计为有限的全身吸收的局部给药的布地奈德对于维持缓解不再有益 处。诸如免疫抑制药物硫挫嚷岭和琉嚷岭W及甲氨蝶岭和环抱素的替代选择的效力是有限 的并且会诱导严重的副作用。抗TNFa抗体如英利昔单抗和阿达木单抗可W用于对标准免 疫抑制疗法无应答的患者。但是,许多患者对于抗TNFa疗法没有应答,运是由于他们特定 的表型或产生自身抗体。

发明内容

[0003] 本发明提供用于治疗包括克隆病和溃瘍性结肠炎在内的炎性肠病的化合物。

[0004] 特别地,本发明提供结构式I的化合物:

[0005]

Figure CN103764608BD00031

[0006] 本发明还提供式(I)的化合物的药理学可接受异构体和盐-化合物1。

[0007] 特别地,本发明提供结构式II所示的相对立体化学的化合物:

[0008]

Figure CN103764608BD00041

[0009] 本发明还提供式(II)的化合物的药理学可接受盐-化合物2。

[0010] 活性对映体已经通过它们的物理和化学性质并且通过普通和手性HPLC保留数据 进行分光光度表征。

[0011] 据发现特定的对映体形式对于治疗I抓特别有效。

[0012] 本发明还提供式III的化合物的N-甲基-(D)-葡糖胺盐:

[0013]

Figure CN103764608BD00042

[0014] 本发明的化合物可W多于一种形式结晶。运种特征称为多晶型现象,因此运样的 多晶型("多晶型物")在本发明的范围内。多晶型现象通常可W由于溫度、压力或运两者 的改变而发生。多晶型现象还可W源自结晶方法的变化。多晶型可W通过本领域已知的各 种物理特征如X射线衍射图样、溶解性和烙点相区别。

[0015] 本文所述的某些化合物能够W立体异构体存在。本发明的范围包括立体异构体的 混合物W及纯化或富集的混合物。本发明的范围还包括本发明的化合物的单独的异构体W 及它们的任何整体或部分平衡的混合物。本发明的某些化合物包含一个或多个手性中屯、。 因此,本发明包括本发明的化合物的外消旋物、纯化的对映体和对映体富集的混合物。本发 明的化合物包括外消旋和手性巧满二聚体。

[0016] 术语药学可接受的盐所涵盖的盐指本发明的化合物无毒的盐。本发明的化合物的 盐可W包括酸加成盐。

[0017] 本发明包括本发明的任何化合物的溶剂化物。术语溶剂化物指由溶质(在本发明 中为本发明的化合物或者其盐或生理学功能性衍生物)与溶剂W可变化学计量比形成的 复合物。用于本发明目的的此类溶剂应当不干扰溶质的生物学活性。合适溶剂的非限制性 实例包括但不限于水、甲醇、乙醇和乙酸。优选地,所用的溶剂为药学可接受的溶剂。合适 的药学可接受的溶剂的非限制性实例包括水、乙醇和乙酸。最优选地,所用的溶剂为水。

[0018] 本发明包括本发明的任何化合物的前药。术语前药指本发明化合物的任何药学可 接受的衍生物,其在向哺乳动物给药时能够(直接或间接)提供本发明的化合物或其活性 代谢物。运样的衍生物如醋和酷胺是本领域技术人员已知的。

[0019] 本发明还提供药物组合物,其包含任何上述的化合物。

[0020] 活性化合物可W存在于合适剂量的用于人的药物中W实现期望的效果。例如,最 终剂量可W为0. 1-lOmg/kg。

[0021] 可W散装化ulk)活性化学品的形式给药本发明的化合物。但是优选W药物制剂 或组合物的形式给药所述化合物。运样的制剂可W包含一种或多种药学可接受的赋形剂、 载体或稀释剂。

[0022] 本发明的化合物可W若干不同方式给药。所述化合物可W口服给药。用于口服给 药的优选药物制剂包括片剂、胶囊、囊片、溶液、混悬剂或糖浆。

[0023] 药物制剂可W提供为改进释放的形式,例如延时释放胶囊剂或片剂。

[0024] 药物可W口服、肠胃外、鼻内、透皮给药或通过吸入给药。

[00巧]药物制剂可W适合于通过任何合适的途径给药,例如通过口服(包括含服或舌 下)、直肠、鼻、局部(包括含服、舌下或透皮)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉内、静脉内或 皮内)途径。运样的制剂可W通过使活性成分与载体或赋形剂缔合来制备。

[0026] 适合于口服给药的药物制剂可W呈现为离散单元,如胶囊或片剂;粉末或颗粒; 溶液或混悬剂,各自具有水性或非水性液体;可食用泡沫或条(whip);或者水包油液体乳 液或油包水液体乳液。对于片剂或胶囊形式的口服给药,活性药物组分可W与口服的无毒 药物可接受的惰性载体如乙醇、甘油、水等组合。粉末可W通过将化合物粉碎成合适的细微 尺寸并与合适的药物载体如可食用碳水化合物如淀粉或甘露醇混合来制备。也可W包含调 味剂、防腐剂、分散剂和着色剂等。

[0027] 可W通过制备粉末、液体或悬浮液混合物并包裹在明胶或其他合适的壳物质内来 制备胶囊。可W将润滑剂如胶体娃、滑石、硬脂酸儀、硬脂酸巧或固体聚乙二醇加入混合物。 还可W加入崩解剂或增溶剂如碳酸巧或碳酸钢W在消化胶囊时提高药物的可用性。还可 W将其他物质如粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂渗入混合物。合适的粘合剂的实例包括 淀粉、明胶、天然糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶、黄巧胶、或者藻酸钢、簇甲基纤维素、聚 乙二醇等。运些剂型的合适的润滑剂包括例如油酸钢、硬脂酸钢、硬脂酸儀、苯甲酸钢、乙酸 钢、氯化钢等。合适的崩解剂非限制性地包括淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润±、黄原胶等。

[0028] 可W通过制备粉末混合物,制粒混合物,加入润滑剂和崩解剂并压制为片剂来制 备片剂。可W通过将适当粉碎的化合物与上述稀释剂或碱混合来制备粉末混合物。任选 存在的成分包括粘合剂如簇甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙締化咯烧酬,溶液阻滞剂如石 蜡,吸收促进剂如季盐,和/或吸收剂如膨润±、白陶±等。粉末混合物可W用粘合剂如糖 浆、淀粉糊或者纤维素或聚合物材料的溶液湿法制粒,并且通过筛进行压制。

[0029] 本发明的化合物还可W与自由流动的惰性载体组合并直接压缩为片剂而不进行 其他步骤如制粒。可W提供由合适材料如虫胶、糖或聚合材料的密封包衣W及抛光包衣如 蜡组成的透明或不透明的保护包衣。若合适,将着色剂加入运些包衣W区分不同单元剂量。

[0030] 口服液体如溶液、糖浆和馳剂可W制备为剂量单位形式,从而给定的量包含预定 量的化合物。糖浆可W例如通过将化合物溶于适当调味的水溶液来制备,而馳剂通过使用 无毒的醇媒介物来制备。混悬剂可W通过将化合物分散于无毒的媒介物中来配制。还可W 加入增溶剂和乳化剂如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙締山梨醇酸,防腐剂;调味剂如薄荷油、 或天然甜味剂、糖精、或其他人工甜味剂;等。

[0031] 在适当时,用于口服给药的剂量单位制剂可W微胶囊化。还可W制备制剂W延长 或持续释放,例如通过将颗粒物质包衣或包埋在合适的聚合物、蜡等中。

[0032] 本文所述的化合物及其盐、溶剂化物和生理功能衍生物还可脂质体递送系统 的形式给药,例如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡。脂质体可W由各种憐脂形成,例如 胆固醇、硬脂胺或憐脂酷胆碱。本发明的化合物及其盐、溶剂化物和生理功能衍生物还可W 通过使用单克隆抗体作为单独载体来递送,所述化合物分子偶联至所述单克隆抗体。

[0033] 化合物还可W与作为可祀向的药物载体的可溶性聚合物偶联。运类聚合物可W包 括例如聚乙締化咯烧酬(PVP)。化合物还可W偶联至生物可降解的聚合物,实现药物的控 释。运类聚合物包括聚乳酸、聚氯基丙締酸醋和水凝胶的嵌段共聚物。

[0034] 适合透皮给药的药物制剂可W作为离散贴剂呈递W保持与患者的皮肤/表皮紧 密接触延长的时间。例如,活性成分可W通过离子导入从贴剂递送。

[0035] 适合局部给药的药物制剂可W配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、散剂、溶液 剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油。对于外部组织的治疗,制剂可W作为局部软膏剂或 乳膏剂施用。

[0036] 对于口中的局部给药,制剂可W包括锭剂(lozenge)、锭剂(pastille)和漱口水。

[0037] 对于鼻给药,可W使用具有例如20-500微米粒径的粉末。粉末可W通过靠近鼻子 的粉末容器快速吸入通过鼻道来给药。作为鼻喷雾剂或滴鼻剂用于给药的合适制剂(其中 载体为液体)包括活性成分的水性或油性溶液。

[0038] 适合通过吸入给药的药物制剂包括精细颗粒粉尘或雾,其可W通过计量剂量加压 气溶胶、喷雾器或吹入器等制备。

[0039] 对于直肠给药,制剂可W作为栓剂或灌肠剂呈递。

[0040] 对于阴道给药,制剂可W为阴道栓剂、卫生棉条、乳膏剂、凝胶剂、喷雾剂等形式。

[0041] 对于肠胃外给药,制剂可W为水性和非水性无菌注射溶液剂,其可W包含各种添 加剂如抗氧化剂、缓冲剂、制菌剂和使得制剂与预期的受者血液等渗的溶质;W及水性和非 水性无菌混悬剂,其可W包括悬浮剂和增稠剂。制剂可W存在于单位剂量或多剂量容器中, 例如密封安飯和小瓶,并且可W储存在冷冻干燥(冻干)条件下,仅需在使用之前即时添加 无菌液体载体,例如注射用水。临时注射溶液或悬浮液可W制备自无菌粉末、颗粒等。

[0042] 本发明的化合物及其盐、溶剂化物和生理功能衍生物可W单独使用,或者与其他 治疗剂联用。本发明的化合物和其他药学活性物质可W-起或单独给药。如果单独给药, 给药可W同时或者W任何次序顺序进行。选择本发明的化合物和其他药学活性物质的量W 及给药的相对时间W实现期望的联合治疗效果。本发明的化合物及其盐、溶剂化物或生理 功能衍生物与其他治疗剂的联合给药可W通过在包含两种化合物的单一药物组合物中或 者在各自包含化合物之一的单独的药物组合物中同时给药来联合。在某些情况下,药物的 组合可顺序方式分别给药,其中一种物质首先给药,而第二物质第二或周围的其他方 式给药。运样的给药可W在相似的时间表或较长的时间进行。

附图说明

[0043] 从W下仅通过实例方式给出的说明会更清楚地理解本发明,其中:

[0044] 图1为X-射线晶体结构,示出对映体化合物4(时-(+)-甲基苄基胺盐(化合物9) 的绝对立体化学;

[004引图2为X-射线晶体结构,示出对映体化合物2做--甲基苄基胺盐(化合物8) 的绝对立体化学;

[0046] 图2A是来自晶体结构的化合物8分子的视图,示出采用的编号方案。据显示非氨 原子的各向异性原子位移楠球在50%概率水平。用任意小半径表示氨原子。仅示出主要的 无序组分;

[0047] 图3为30mg/kg的化合物2、3、4和5在5%DSS结肠炎中于7天中对疾病活动指 数(DAI)的影响图;

[0048] 图4为30mg/kg的化合物2、3、4和5在5%DSS结肠炎中于7天中对疾病活动指数 (DAI)的影响的条形图;

[0049] 图5为lOmg/kg的化合物5、7、2和6在5%DSS结肠炎中于7天中对疾病活动指数 (DAI)的影响图;

[0050] 图6为lOmg/kg的化合物5、7、2和6在5%DSS结肠炎中于7天中对疾病活动指数 (DAI)的影响的条形图。星号表示与媒介物对照组显著(P<0.05)差异(单向AN0VA)。

[0051] 图7为示出化合物6在5%DSS处理的小鼠中对体重减轻的影响图。数据是来自 6-7只小鼠/组的平均值+SEM;

[005引图8为示出化合物6在5%DSS处理的小鼠中对DAI的影响图。数据是来自6-7只 小鼠/组的平均值+SEM;

[005引图9为示出第7天化合物6在5%DSS处理的小鼠中对DAI的影响的条形图。数据 为平均值+SEM。星号表示与媒介物对照组显著(P<0.05)差异(单向AN0VA);

[0054] 图10为示出第7天化合物6在5%DSS处理的小鼠中对结肠长度的影响的条形图。 星号表示与媒介物对照组显著(P<〇.〇5)差异(单向AN0VA);

[0055] 图11示出来自小鼠末端结肠的代表性的苏木精和伊红染色的切片。示出较高的 放大倍数狂10);

[0056] 图12为示出化合物6对来DSS处理的小鼠的结肠的组织学评分的影响的条形图。 数据是来自5-6只小鼠的平均值+SEM。星号表示与媒介物对照组显著(P<0. 05)差异(单 向AN0VA)。注意,最大评分10 ;

[0057] 图13为条形图,其示出未处理的或者媒介物、泼尼松龙和化合物6处理的暴露于 5%DSS的小鼠的结肠中的髓过氧化物酶(MP0)活性。数据是5-6只小鼠的平均值+SEM。星 号表示与媒介物对照组显著(P<〇.〇5)差异(单向AN0VA);

[005引图14(A)-(C)为示出化合物6在用DSS处理的小鼠中对细胞因子(IL1 0、TNFa和IL6)水平的影响的条形图。数据是5-6只小鼠的平均值+SEM。星号表示与媒介物对照 组显著(P<0. 05)差异(单向AN0VA);

[0059] 图15为示出用媒介物或化合物6处理的IL10 /小鼠的体重减轻的图。按照周 一 /周Ξ/周五(MW巧剂量给药时间表向小鼠口服给药化合物6(300mg/kg/周)或媒介物。 小鼠在实验开始时为~4周龄,并且将其处理9周。将小鼠每周称重,并且数据呈现为9-12 只小鼠/组的平均值+SEM。监测小鼠的明显疾病、直肠脱垂,并且将垂死的动物人道地杀 死;

[0060] 图16为散点图,其示出来自第9周存活的动物(在化合物6或媒介物处理的组中 分别为11和9只小鼠)的单独小鼠的血清淀粉样蛋白A(SAA)水平。学生t-测试用来测 试组之间的统计学差异;

[0061] 图17为用媒介物或化合物6处理9周的IL10/小鼠的末端结肠的代表性苏木 精和伊红染色的切片;W及

[0062] 图18为散点图,其示出用媒介物或化合物6处理的IL10/小鼠的末端结肠的组 织学评分。散点图示出第9周存活的动物(在化合物6或媒介物处理的组中分别为11和 9只小鼠)的单独小鼠的组织学评分。学生t-测试用来测试组之间的统计学差异。

具体实施方式

[0063] 化合物1表示由酬化合物A的还原和去甲基化所获得的一对非对映体,所述化合 物A具有C-2处的手性中屯、,并且结果是一对对映体。

[0064]

Figure CN103764608BD00081

[0065] 用LiAlH4还原运种化合物获得下式的化合物

[0066]

Figure CN103764608BD00082

[0067] 运种化合物包含两种非对映体:

[0068]

Figure CN103764608BD00091

[0069] 非对映体B的水解产生化合物2和3

[0070]

Figure CN103764608BD00092

[0071] 非对映体C的水解产生化合物4和5

[0072]

Figure CN103764608BD00093

[0073] 非对映体可W化学或色谱拆分为它们的组成对映体。

[0074] 化合物4的绝对立体化学已通过化合物4 (时-(+)-甲基苄基胺盐(化合物9)的 单晶X-射线建立(图1)。

[0075] 通过化合物2 (巧--甲基苄基胺盐(化合物8)的单晶X-射线证实化合物2的 绝对立体化学(图2和2A)。

[0076] 一般巧麻方法

[0077] 如下文示例的对映体混合物的偶联的一般合成过程描述于W09720806A,其内容整 体援引加入本文。

[0078] 酸祈牛物化合物A的一般制备

[0079]

Figure CN103764608BD00101

[0080] 在氮气下向揽拌的偶联产物(4mmol,1.OOg)在叔下醇巧mL)和二乙酸(30mL)中 的溶液中加入(4-漠甲基)苯甲酸甲醋化mmol, 1.41g)。向其中缓慢地滴加叔下醇钟在叔 下醇(30mL)和二乙酸巧mL)中的溶液。随着每滴,混合物变为黄色,然后恢复到原来的灰 色。将混合物再揽拌3小时,直至TLC(80:20,己烧:乙酸乙醋)显示没有起始原料。通过 加入饱和畑典1来终止反应。分离层,并且将水层用二乙酸萃取(2xl20mL)。将合并的有机 层用水、盐水洗涂,在MgS〇4上干燥并蒸发。在去除大部分溶剂时固体产物从粗产物沉淀。 将其滤去并用冷二乙酸洗涂W获得0. 98g(62%)膏状固体。

[0081] 龙甲酸甲酯化合物的尿原

[0082]

Figure CN103764608BD00102

[008引向揽拌的苯甲酸甲醋化合物(1. 27mmol,0. 50g)在THF(15血)中的溶液中缓慢地 分批加入Ξ叔下氧基氨化侣裡(1. 9mmol,0. 48g)。通过化"80:20,己烧:乙酸乙醋)监测 反应,并且化后已消耗所有起始原料。

[0084] 通过倒在冰上来终止反应,并且通过将水性混合物与乙酸乙醋揽拌10-15min,然 后倒入分液漏斗,然后将其分离来将粗产物萃取入乙酸乙醋中。将合并的有机层用水、盐水 洗涂,在MgS〇4上干燥并蒸发W给出0. 34g(68%)膏状黄褐色固体。产物分离为约2:1比例 的两种非对映体的混合物。

[00巧] 两种非对映体的混合物的分析结果

[008引纯度她LC:94. 9% (作为2:1比例的非对映体)

[0087]δH(300MHz, CDC!3) : 2. 77-3. 60化H,m,3x C里),3. 85 (3H,S, (¾),[5. 02 (1H,S,哩-0 Η) ] 5. 18 (1H,S,哩-OH),[6. 23 (1H,S,哩=C) ]6. 43 (1H,S,哩=C),6. 90-6. 98 (2H,m,Ar-扫),7. 1 1-7. 21 (IH,m,Ar-己),7. 22-7. 31巧Η,m,Ar-己),7. 36-7. 42 (2H,m,Ar-己),7. 78-7. 84 (2H,m,Ar -H).

[0088] 在可能时,最小非对映体的值在括号中给出。

[0089]δC口5. 5MHz,CDC!3) : 38. 3 (邱2),38. 4 (邱2),38. 6 (邱2),39. 9 (邱2),40. 3 (邱2),43. 4炬&),51. 9 (〇)0邱3),52. ο (〇)0£&),55. 9 (季£),56. 3(季£),82. ο炬H-OH),82.8炬H-OH),120. 5(叔0,120. 7(叔0,123. 5(叔£),123. 6(叔0,124. 0(叔£),124. 2(叔£),124. 5(叔 £),124.6(叔0,124.8(叔0,124. 9(叔£),125. 1(叔0,125. 2(叔0,126. 1(叔 £),126. 4(叔£),127. 0(季£),127. 1(季£),128. 0(叔£),128. 2(叔£),128. 5(叔 £),128.8(叔0,129. 0(叔0,129. 2(叔£),129. 5(叔0,2x130. 0 (2x叔£),2x130. 2 (2x 叔£),130. 7(叔£),140. 4(季£),141. 5(季0,142.8(季0,143. 2(季0,143. 5(季 £),143.6(季£),143. 7(季£),144. 2(季£),144. 3(季£),144. 5(季£),150. 4(季 £),152.6(季£),167. 0炬=0),167. 2炬=0).

[0090]龙甲酸甲酯部分的水解

[0091]

Figure CN103764608BD00111

[009引将醋置于圆底烧瓶中,然后向其中加入10%的化0H水溶液(ImL)然后加入足量的 甲醇W形成溶液化mL)。将溶液在40°C下加热并通过化"80:20,己烧:乙酸乙醋)监测。 约地后,未观察到进一步的醋。

[009引将混合物冷却并加入饱和畑4CI(P化2的溶液)。加入稀肥1W酸化抑(P肥)。将 产物从混浊溶液萃取入乙酸乙醋(3xl0mL)中。将合并的萃取物在MgS04上干燥并真空蒸 发W获得0.15g(定量)膏状固体。产物分离为约2:1比例的两种非对映体的混合物。 [0094] 两种非对映体的混合物的分析结果

[009引纯度她LC) :95. 2% (作为2:1比例的非对映体)

[0096] Sh(400MHz,CDC13):2. 81-3. 59化H,m,3x C里),[5. 05(lH,s,哩-OH)],5. 23(lH,s, 哩-OH),6. 46 (IH, s,哩=C),[6.66(IH, s,哩=C) ],6. 95-7. 03 (2H, m, Ar-扫),7. 12-7. 17 (IH, m, Ar-H),7. 21-7. 29巧H, m, Ar-H),7. 37-7. 43 (2H, m, Ar-H),7. 85-7. 91 (2H, m, Ar-H).

[0097] 在可能时,最小非对映体的值在括号中给出。

[0098]δ C (lOOMHz, CDC!3) : 37. 9也电),38. 1 (邸2),38. 2 (邸2),39. 5 (邸2),39. 9也电),4 3. 1炬&),55. 5(季0,55. 9(季0,81.6炬H-OH),82. 4炬H-OH),120. 2(叔£),120. 3(叔 £),123. 1(叔0,123. 2(叔£),123. 5(叔0,123. 9(叔0,124. 1(叔0,124. 4(叔 0,124. 5(叔£),124. 7(叔£),125. 9(叔£),126. 0(叔£),126. 5(叔0,2x126. 7(季哩叔 £),126. 9(季0,128. 1(叔0,128. 2(叔0,128. 4(叔£),2x129. 2(2x叔£),2x129. 4(2x叔 £),2x129. 8(2x叔0,2x129. 9(2x叔0,130. 4(叔0,140. 0(季£),141. 0(季£),142. 3(季 0,142. 7(季0,143. 0(季£),143. 2(季£),143.8(季£),144. 0(季£),144. 1(季 0,144. 7(季0,150. 0(季0,152. 0(季0,170.8炬=0),171. 1炬=0).

[0099]对映体的化学分离

[0100] 苯甲酸甲醋非对映体的N-B0CD-苯丙氨酸衍生物的制备和/或随后的非对映体 α1和α2(或者β1和β2)的分离

[0101]

Figure CN103764608BD00121

[0102] 注意:方法适用于两种非对映体,但是给出的实例用于第一非对映体。

[010引 将非对映体A(2. 5mmol,1.Og)和N-B0CD-苯丙氨酸(3.lmmol,0. 8g)置于装 有冷凝器的圆底烧瓶中,并且在氮气下悬浮于CHsCNOSmL)中。向该悬浮液中加入化晚 (3.Immol, 0. 3mL),然后力日入DCC(3.Immol, 0. 7g)和DMAP(100/0mol,0. 25mmol,0. 05g)在 GHjCNOmL)中的溶液。将混合物在50°C下揽拌20h,然后使其达到室溫。

[0104] 将白色固体滤出并在真空中去除溶剂。加入乙酸乙醋,并且将获得的溶液用 10%&5〇4、饱和Na肥〇3洗涂,在MgSO4上干燥并蒸发W获得2.Ig黄色油她LC83%纯,收率: 定量)。

[0105] 利用己烧/MTBE90:10通过快速色谱巧Og二氧化娃/g产物)分离非对映体α1 和α2。从4. 17g混合物获得1. 3g的α2衍生物(W及1. 71g的α1衍生物和0.3g两者 的混合物)。 。…引 龙甲酸甲酯化合物(α1、α2、目1或目2)的N-B0CD-龙巧氨酸祈牛物的水解

[0107]

Figure CN103764608BD00122

[010引 将非对映体α2(2. 3mmol,1. 45g)溶于甲醇(25血),加入化0Η(11. 5mmol,0. 45g), 将混合物在回流溫度下揽拌并通过TLC监测。2化后,消耗掉起始原料。

[0109] 将反应冷却至室溫并通过加入饱和畑4CI来终止。在真空中去除甲醇,并且用浓 肥1将水溶液酸化至抑1。用乙酸乙醋萃取产物,在Μ拆〇4上干燥并蒸发W给出1.6g黄色 胶状物,将其通过短二氧化娃柱用己烧:MTBE80:20作为洗脱剂进行纯化。获得0.44g酸衍 生物化合物5巧0%收率),通过HPLC其为97. 2%纯。

[0110] 注意:还利用甲醇中的10%Na0H水溶液在40-50°C下进行可选的水解。运个过程 花费几乎5天完成。

[0111 ]对映体α1、α2、目1、目2的分析结果

[0112] 来自非对映体Β的对映体-化合物3

[011引

Figure CN103764608BD00131

[0114] 描述:膏状无定形固体

[0115] 烙点:195-196°C

[0116] [α ]d:+98. 51(1. 07%,Me0H)

[0117] 纯度:99. 0〇/〇

[0118]δH(400MHz, CDCI3) : 2. W(1H,d,J=13. 28Hz,哩2),3. 00-3. 09 (2H,m,C里),3. 29 (IH, d, J=13. 36Hz,哩2),3. 43-3. 61 (2H,m,C里),5.27 (IH, s,哩-OH),6. 49 (IH, s,哩=C),7. 00 (2H, d, J=7.8細z, Ar-扫),7. 16-7. 32化H,m,Ar-己),7. 44 (2H,d,J=7. 24Hz, Ar-己),7. 90 (2H,d,J=7. 92Hz, Ar-H).

[0119] 来自非对映体B的对映体β 2-化合物2

[0120]

Figure CN103764608BD00132

[0121] 描述:膏状无定形固体

[0122] 烙点:184-185°C

[012引[α]d:-114. 44(0. 18%,Me0H)

[0124] 纯度:99. 8〇/〇

[0125] δ H (400MHz, CDC!3) : 2. W(1H, d, J=13. 32Hz,哩2),3. 00-3. 09 (2H, m, C里),3. 29 (1H, d J=13. 2細z,哩2),3. 46 (IH, d 64Hz,哩2),3. 58 (IH, d 5細z,哩2),5. 27 (IH, s, C H-OH),6. 49 (IH, s,哩=C),7. 00 (2H, d, J=8. 04Hz, Ar-己),7. 15-7. :M化H, m, Ar-扫),7. 44 (2H, d ,J=7. 20Hz, Ar-H),7. 90 (2H, d, J=8. 04Hz, Ar-H).

[0126]来自非对映体C的对映体a1-化合物4

[0127]

Figure CN103764608BD00141

[012引描述:膏状固体

[0129] 烙点:136-140°C

[0130] [α ]d:-39. 3 (0.66%, MeOH)

[0131] 纯度:94.0〇/〇

[013引δH (400MHz, CDC!3) : 2. 90-3. 59化Η, m, 3x C里),5. 08 (IH,s,哩-OH),6. 70 (IH,s,CH =C),7. 05 (2H, d, J=8. 0細z,Ar-白),7. 19 (IH,t,J=7. 34Hz,Ar-己),7. 26-7. 47 (7H, 2x m,Ar-白) ,7. 93 (2H, d, J=8. 0細z, Ar-货.

[0133] 来自非对映体C的对映体a2-化合物5

[0134]

Figure CN103764608BD00142

[0135] 描述:膏状无定形固体

[0136] 烙点:195-196°C

[0137] [α ]d:+32. 1(1. 18%,Me0H)

[0138] 纯度:97. 2〇/〇

[0139] δH(400MHz,CDCI3) : 2. 94-3. 59化Η, m,3xC里),5. 08 (IH,s,哩-OH),6. 70 (IH,s,CH =C),7. 05 (2H,d,J=8. 12Hz,Ar-白),7. 19 (IH,t,J=7. 34Hz,Ar-己),7. 26-7. 47 (7H, 2xm,Ar-白) ,7. 93 (2H,d,J=8. 12Hz,Ar-H). 阳140] 册LC方法

[0141] 建立非手性和手性HPLC方法用于对映体化合物2、3、4、5的定性和定量分离。 阳14引对映体的HPLC拆分[0143]

Figure CN103764608BD00151

阳144]曲形成

[0145] 通过在适当的碱的存在下将化合物2、3、4和5的游离酸溶于水性或水性有机溶剂 并通过蒸发溶剂分离盐来制备盐。

[014引化合物6 :化合物2的N-甲基-做-葡糖胺盐(NMDG)

[0147]

Figure CN103764608BD00161

[0148]化合物6生理化学特性:

[014引外观:灰白色固体[0150]分子量:577(游离酸:382)

[01 5U 分子式:〔33Η3908Ν(游离酸:〔26&203)

[0152]烙点:165-167°C

[0153]化合物 6:[α]d:-76. 5(样品浓度:水中 200mg/10ml)

[0154]质量值a) :ES+仅[NMDG+Na]可见

[0155]元素分析:计算:C化8. 61),Η化.80),N(2. 42),0(22. 16).发现:"68. 44),Η化.80 ),Ν(2. 50),0(21.98)

[0156]δΗ(400MHz,DMSO) : 2. 48 (3H,表观s,NC里),2. 65 (IH,d,J=13. 5細z,肥货,2. 84-3. 02 (4H,m),3. 16 (IH,d,J=13. 60Hz,H哩),3. 40-3. 70 (7H,m),3. 85-3. 92 (IH,m),5. 06 (IH,s,C H-OH),5. 93 (IH,宽s,CH-OH),6. 41 (IH,s,哩=C),6. 80 (2H,d,J=7. 92Hz,Ar-H),7. 06-7. 41 ( 8H,m,Ar-白),7. 64 (2H,d,J=7. 80Hz,Ar-货.

[0157]δc(lOOMHz,DMSO) : 33. 8 炬&),37. 9 炬电),38. 2 炬电),39. 5 炬&),51. 6 炬&-的,55 .8 (季0,63. 5 炬&-0),69. 0 炬H-0),70. 3 炬H-0),70. 6 炬H-0),71. 3 炬H-0),81. 1 炬H-0H),12 0. 1 (叔 £),123. 4 (叔 £),123. 7 (叔 £),124. 3 (叔 £),124. 4 (叔 0,126. 1 (叔 0,126. 3 (叔 £),127. 0(叔0,127. 5(叔 0,2x128. 5(2x叔£),2x129.l(2x叔0,140. 4(季£),141. 1(季 £),142. 9 (季 £),144. 5 (季 £),145. 2 (季 £),154. 3 (季 £),170. 4 炬=0). 阳15引 X-射线研究

[0159]通过其(S)-(-)-甲基苄基胺盐(化合物8)的单晶X-射线分析建立化合物2的 绝对立体化学。结果在附录2中给出。结果与图2所示的立体化学一致。通过将醇(化合 物2-5)转化为它们的締酬并通过它们旋光性的相关性建立化合物4和5的绝对立体化学。 阳160] 《忡肠病(IBD)

[0161]炎性肠病(IBD)由两种特发性炎性疾病组成,溃瘍性结肠炎扣C)和克隆病(CD)。UC与CD之间最大的区别在于发炎的肠组织的范围。CD中的炎症是不连续分节的,已知为 区域性肠炎,而UC则是浅表性炎症,其邻近且连续地从直肠延伸。目前,I抓的确切原因尚 不了解。运种疾病看起来与对促炎性和免疫调节分子的不平衡引起的肠上皮感染的扩大粘 膜免疫应答相关。I抓的遗传模式提示病理发病机理的复杂遗传组分,其可W由几种组合的 遗传突变组成。目前还没有I抓的特异性诊断测试,但是关于发病机理的了解有所进步,测 试方法也是如此。I抓的治疗由诱导和维持缓解组成。I抓患者可W通过使用5-氨基水杨 酸来维持缓解。然而,虽然在UC中使用氨基水杨酸提供相当的益处,但是在轻度至中度疾 病的诱导缓解W及预防复发中,运些药物维持CD中的缓解的用处尚持有疑问,并且不再推 荐。活性疾病治疗的主要使用皮质酱类,其通常使用有限的时间W使得UC和CD患者回到 缓解,虽然设计为有限的全身吸收的局部给药的布地奈德对于维持缓解不再有益处。诸如 免疫抑制药物硫挫嚷岭和琉嚷岭W及甲氨蝶岭和环抱素的替代选择的效力是有限的并且 会诱导严重的副作用。抗TNFa抗体如英利昔单抗和阿达木单抗可W用于对标准免疫抑制 疗法无应答的患者。但是,许多患者对于抗TNFa疗法没有应答,运是由于他们特定的表型 或产生自身抗体。 阳刪 急忡小鼠DSS结肠《横巧

[0163] 葡聚糖硫酸钢值S巧结肠炎模型为实验小鼠模型,其表现出在人UC中观察到的许 多症状,例如腹泻、血便、粘膜溃瘍、结肠缩短、体重减轻W及某些结肠细胞因子的改变。该 研究广泛用作研究UC的发病机理的模型,并且还用作筛选治疗UC的新的治疗发明的模 型。

[0164] 在运些研究中,使用急性结肠炎模型,在BALB/c小鼠的饮用水中给药5%DSS。运种 剂量方案诱导严重的急性结肠炎,在第7-8天,小鼠具有明显的直肠出血和显著的体重减 轻;除非事先处死,在第10-12天所有小鼠均已死亡。

[0165] 业显

[0166] 6-8周龄的无特定病原体的BALB/c小鼠获得自商业供应商化arlanUK)。向小鼠 喂食福照饮食并在正压下关在单独的通风笼(TecniplastUK)中。 阳167] DSS化理

[0168] 将DSS(5%)溶于饮用水中。在第0-7天WlOmg/kg或30mg/kg的剂量口服给药化 合物,并且在第8天或第9天宰杀小鼠,运取决于疾病的严重程度。每天检查小鼠的发病率, 并且记录每只小鼠的体重。根据解剖、结肠长度和组织学确定结肠炎的诱导。回收结肠并 储存在-20°C下用于免疫性分析。将所有化合物和实验组随机按字母顺序标记。在整个实 验中,所有数据记录W盲方式进行。盒/组上的编码直至分析数据之后才破解,即标记A、 B、C等的盒鉴定为未处理的、DSS处理的或DSS+化合物处理的。

[0169] 为了定量结肠炎的程度,基于体重减轻、便血和粪便一致性确定疾病活动指数 (DAI)。对每个参数给出评分,评分的总和用作DAI。对于每个处理组,n=8。

[0170]

Figure CN103764608BD00171

[0171]定义:

[0172] 1便漉-粪便未形成,但是在操作时变成糊。

[0173] 2腹泻-没有粪便形成,肛口周围皮毛染色。

[0174] 3严重出血-肛口周围的皮毛上有新鲜血液,粪便中过多血液。 巧]化合物的给药

[0176]用于口服管饲法(0. 1血/os(p.o.)/10g体重)的所有化合物制备为0.5%簇甲基 纤维素/2%Tween80中的悬浮液,剂量为3-30mg/Kg。最初将作为游离酸的化合物溶于无 水乙醇并W14+1用0. 5%簇甲基纤维素/2%Tween80稀释;运导致悬浮液中的细微沉淀,而 N-甲基-(D)-葡糖胺盐在单独的媒介物中可溶。 。177] 单她的对映体化合物2、3、4巧5在5%DSS小鼠结肠《中的效果

[0178]每天向在饮用水中给予5%DSS的BALB/cW30mg/kgP.0.给药化合物2、3、4和5, 其为0. 5%簇甲基纤维素/2%Tween80中的悬浮液,进行7天。DAI测量运个模型中疾病的 程度。化合物4在运个变量上没有活性,在任何时间点DAI均没有任何显著(P〉0. 05)差异 (图3)。在第7天,化合物2和化合物5显著(P<0. 5)减少DAI可观的幅度,从媒介物对照 的9. 0 + 0. 53减少至化合物5的3. 2 + 0. 73和化合物2的2. 5 + 0. 71,运两者之间没有显著 差异(图4)。相比之下,化合物3减少DAI至仅5. 3 + 0. 6。运显著地(P〉0. 05)比化合物 2或化合物5的效果差。此外,虽然在第7天化合物3处理的小鼠的DAI统计上(P<0. 05) 低于媒介物对照(图4),但是在第6天化合物3和媒介物之间没有统计上(P〉0. 05)的差异 (图3)。总而言之,在4种对映体,化合物2、3、4和5中,化合物2和5在30mg/kg下在运 个模型中具有高度活性。化合物3具有最小活性,其显著(P<0. 05)低于化合物2和化合物 5。化合物4在运个5%DSS小鼠结肠炎模型中几乎没有活性。 引化合物2巧5的曲的洗择

[0180] 作为对映体化合物2和化合物5的有限水溶解性的结果,我们尝试合成化合物5 的5种盐。合成钢盐、钟盐、巧盐、α-甲基苄基胺盐和N-甲基-(D)-葡糖胺盐。钢盐和巧 盐未成功。名为钟盐、α-甲基苄基胺盐和Ν-甲基-(D)-葡糖胺盐的化合物5的3种盐用 于溶解度和分配系数(1〇评)研究。

[0181] 确定4种化合物的溶解度:

[0182]

Figure CN103764608BD00181

[0183] *估计值

[0184] 令人惊讶的是,确定在运组类似的化合物中化合物5Ν-甲基-(D)-葡糖胺盐 (化合物7)是最可溶的化合物,达到可观的幅度,在Milli-RO水中溶解度为>60, 000μg/ 血,在pH4缓冲液中为0. 14μg/血,在抑7. 0中为>60, 000μg/血,并且在抑9. 0缓冲液 中为〉3,000yg/血。用化合物2Ν-甲基-(D)-葡糖胺(化合物6)获得几乎相同的值, 在Mi11i-RO水中溶解度为>60, 000μg/mL,在抑4缓冲液中为0. 5μg/mL,在抑7. 0中为 〉60, 000μg/mU并且在抑9. 0和缓冲液中为〉3, 000μg/mL。

[01财利用HPLC方法(反相C18HPLC柱)在中性、酸性和碱性抑下研究化合物5和相 关的类似化合物的分配系数。

[0186] 确定4种化合物的分配系数:

[0187]

Figure CN103764608BD00191

[018引发现化合物5的每种盐的分配系数相似。认为运种情况是因为当盐在溶液中时, 化合物分解为母体化合物5和相关的盐离子。因此测量的分配系数来自母体离子而不是盐 分子。

[0189] 在中性、碱性和酸性条件下成功地确定了化合物2N-甲基-D-葡糖胺盐(化合物 6)的分配系数化oglOP0W),分别为3. 5、4. 3和2. 6。

[0190] 选择N-甲基-(D)-葡糖胺作为化合物2和化合物5的盐候选物。

[0191]lOmg/kg的对映体化合物2巧化合物5P1及它们的N-甲基-化)-葡糖胺曲(化合 物6巧7)在5%DSS小鼠结肠《中的效果

[0192] 考虑到化合物2和5在30mg/kg下于5%DSS模型中表现出相当大的活性,我们重 新检测它们的活性,连同它们的N-甲基-做-葡糖胺盐,WlOmg/kg的较低剂量,作为0. 5% 簇甲基纤维素/2%Tween80中的悬浮液或溶液每天给药持续7天。在补偿它们增加的分子量 的盐的剂量中未进行调整。在lOmg/kg下,当与媒介物对照比较时,化合物5和7在5%DSS 小鼠结肠炎模型中均对DAI没有显著(P〉0. 05)影响(见图5)。相比之下,在第7天,N-甲 基-(D)-葡糖胺盐化合物2和化合物6在lOmg/kg下显著(P<0. 05)并有效地将DAI从 9. 3 + 0. 51 (媒介物)分别减少至2. 1 + 0. 7和3. 3 + 0. 52 (图6)。

[0193] 总之,化合物2(及其N-甲基-值)-葡糖胺盐,化合物6)在四种对映体中最有效 的,并且是唯一在lOmg/kg的较低剂量水平下保持活性的对映体。 阳194]对5%DSS小鼠结肠《一定淑兩剂量的化合物6的效果W及与泼巧扮龙的比巧

[0195] 化合物6被选为最看好的对映体。测试不同剂量水平下化合物6在结肠炎的5%DSS 小鼠模型中的活性W确定是否有剂量/反应关系,并且与有效的口服类固醇泼尼松龙进行 比较,泼尼松龙常用于使患有IBD的急性发作的患者返回缓解。

[0196] 向小鼠给药剂量水平3、10和30mg/Kg的化合物6 (相当于6. 6-20mg/Kg的化合物 2)。一组DSS处理的小鼠还用泼尼松龙,5mg/Kg处理。泼尼松龙是临床上用于治疗人IBD 的皮质酱类,并且运个研究中使用的量是泼尼松龙用于运个模型的最佳剂量。用饮用水中 的5%DSS处理BALB/c小鼠3天后,结肠炎的迹象明显。运表现为体重减轻(图7)和疾病 DAI的增加(图8)。但是,每天口服给药7天之后,3个剂量(3、10和30mg/Kg)的化合物6 在小鼠中未引起明显反应。化合物6在所检查疾病的多个参数中减轻急性DSS处理后结肠 炎的严重程度。化合物6在DSS模型中缓解疾病的能力是剂量依赖性的。30mg/Kg的化合 物6在DSS模型中是治疗性的,相对于5mg/Kg的泼尼松龙具有相当或更好的效力。

[0197] 运些症状的严重程度是逐步发展的;在第7天,DSS处理的小鼠已损失多达15% 的体重,并且所有小鼠已灌注直肠出血。解剖当天的DAI值显示,用3-30mg/kg化合物6处 理的小鼠在每个剂量水平下具有显著(P<0.05-P<0.01)低于媒介物对照的DAI。泼尼松龙 巧mg/kg)也显著(P<0. 01 ;AN0VA;Dunnett多比较测试)减少DAI评分(图9)。

[0198] 在第7天解剖时,与来自未用DSS处理的小鼠的结肠相比,在所有DSS处理组中 结肠长度均有显著缩短(P<〇. 05-P<0. 01 ;AN0VA;Dunnett多比较测试)(图10)。当与媒 介物对照相比时,最低剂量的3mg/kg的化合物6在抑制结肠缩短中没有显著效果,而10 和30mg/kg组W及泼尼松龙组具有显著效果。30mg/kg的化合物6的显著优于泼尼松龙 (P<0. 〇5 ;AN0VA;Dunnett多比较测试)(图 10)。

[0199]DSS处理之后,远端结肠的组织切片表现出广泛的隐窝损伤和细胞浸润(图11)。

[0200] 利用任意评分系统定量结肠损伤的程度。相对于媒介物组,10和30mg/Kg的化 合物6在结肠病理中引起剂量依赖性和高度统计学显著的减少(P<0. 01 ;Kr址sal-Wallis AN0VA;Dunnett多比较测试)。相比之下,相对于媒介物处理的小鼠,泼尼松龙巧mg/Kg)处 理组的组织学评分没有显著改善(图12)。

[0201] 与显示小鼠结肠中的炎症的组织学结果一致,在仅给药媒介物的DSS处理的小鼠 中结肠髓过氧化物酶(MP0)活性显著(P<0. 001 ;Kr址sal-WallisAN0VA;Dunnett多比较测 试)升高。代表炎性嗜中性粒细胞浸润入肠壁的水平的结肠髓过氧化物酶活性(MP0)通过 DSS处理增加几乎8倍,但是被30mg/kg的化合物6和泼尼松龙显著(P<0. 05)减少,在第7 天分别为63%和54%。

[020引结肠细胞因子水平的定量显示DSS处理诱导IL1M图14(a))、TNFa(图 14化))和IL6(图 14(c))分别升高至 0. 744 + 0. 076ng/mg、1.478±0. 378ng/mg 和1. 057 + 0. 1784ng/mg。在每种情况下,化合物6引起运些细胞因子水平的显著 (P<0. 05, 30mg/kg)和剂量依赖性降低。泼尼松龙巧mg/kg)也减少(p<0. 05)细胞因子水平 的运些升高;对于每种细胞因子,在第7天,5mg/kg泼尼松龙和30mg/kg的较高剂量水平的 化合物6之间没有显著差异。

[020引总的来说,每天口服给药7天之后,3个剂量(3、10和30mg/Kg)的化合物6在小 鼠中未引起明显反应。通过所检查疾病的多个参数,化合物6减轻急性5%DSS处理之后的 结肠炎的严重程度,并且减轻疾病的能力是剂量依赖性的。此外,30mg/Kg的化合物6在DSS 模型中是治疗性的,相对于泼尼松龙巧mg/Kg)具有相当或更好的效力。 阳204]憬忡ILIO^横巧

[0205]在IL10 /基因中具有缺失的小鼠自发地发展慢性结肠炎,发病的年龄和疾病的 严重程度取决于小鼠品系的背景和动物居住的条件。居住在运个研究中使用的条件下的 IL10 /小鼠结肠炎的发病也是品系依赖性的,相对于巧7BL/6品系动物,在BALB/c品系小 鼠中,在死亡率方面,具有较早的发病和更大的严重程度。在运个实验中,动物在9周中根 据MWF方案接受口服处理。最初,两组小鼠逐渐增重(图15)。媒介物处理的小鼠从处理的 第5周停止增重,而化合物6处理的小鼠保持增重直至第8周。在第9周,动物体重显著减 轻,在每组中在第60天将一只垂死的动物人道地杀死。随着其他小鼠体重减轻并发展疾病 的临床症状,在第9周(第63天)将两组选择性宰杀并分析。虽然通过Kaplan-Meier分 析,相对于化合物6处理的小鼠巧.2%),媒介物处理组(25%)有较大的死亡率,但是在9周 中IL10-/-小鼠的存活率没有统计学差异。

[0206] 从小鼠回收血清,并且分析血清淀粉样蛋白A(SAA)作为结肠炎严重程度的标记。 相对于媒介物处理的IL10 /小鼠,在化合物6处理的小鼠中有显著(P<0. 05 ;学生t-测 试)降低的SAA水平(图16)。

[0207] 用媒介物或化合物6处理的IL10 /小鼠的结肠组织切片如图17所示。

[020引将用媒介物或化合物6处理的IL10 /小鼠的结肠组织切片评分。相对于用媒 介物处理的小鼠,在接受化合物的IL10 /小鼠中结肠病理的程度显著减少(P<0. 05;学生 t-测试)(图18)。

[020引总的来说,相对于媒介物处理的小鼠,在9周中利用MWF方案在IL10/BALB/c品 系小鼠中用化合物6(300mg/kg/周)口服处理延迟体重减轻并减少结肠炎死亡数。在运个 慢性结肠炎的模型中,化合物6显著减少关于结肠炎症的血清标记的疾病指数和炎症的程 度及对结肠的损伤。鉴于化合物6在大鼠中的血浆半衰期(ti/2)为3小时,运特别值得关 注。通过标准MWF剂量给药时间表,实验期间小鼠不会暴露于化合物6大量时间。

[0210] 本发明并不限于上文所述的实施方案,其细节可W变化。

[02川附录1[0212] 使用的缩写列表

[021引

[0214]

Figure CN103764608BD00221

Figure CN103764608BD00231

[021引附录2

[0216]X-射线研究

[0217] 利用SuperNova,Dual,Cuatzero,Atlas衍射仪和表1所列的参数对化合物 2(巧甲基苄基胺盐(化合物8)进行单晶X-射线衍射分析。

[021引表1.化合物8,化合物2的(S)-(-)-甲基苄基胺盐的数据收集和结构精修

[0219]

Figure CN103764608BD00232

[0220]

Figure CN103764608BD00241

[0221] 细化总结:

[0222] 有序的非Η原子,XYZ 自由细化 有序的非Η原子,U 各向异性 Η原子(碳上),ΧΥΖ 骑在连接的原子上的理想化位置 Η原子(碳上),U键合的原子适当多个U(eq) Η原子(杂原子上),XYZ 自由细化 Η原子(杂原子上),U 各向同性 无序的原子,OCC 用约束至总俸酌两部分模型细化 无序的原子,ΧΥΖ 自由细化 无序的原子U 自由细化

[0223] •单晶X-射线数据表明化合物6的结构为单斜晶系,空间群Ρ2ι,在不对称单元中 具有化合物的6 -个分子(表2)。

[0224] 表2.化合物8的样品和晶体数据

[0225]

Figure CN103764608BD00251

[0226] •绝对立体化学确定为对于化合物2在C9和CIO处的S、S,对于甲基苄基胺阳离 子在C33处的S。考虑确定为0. 04 (14)的Flack参数和盐W前的立体化学的现有知识进行 分配。

[0227] •还利用Bijvoet对差异上的贝叶斯统计确定绝对立体化学,运导致手性中屯、C9、 CIO和C33处的立体化学分别是S、S和S的可能性为1. 000并且R、R和R为0. 000。运支 持来自Flack参数测量的S、S和S分别分配给C9、CIO和C33。

[022引•来自单晶X-射线结构的计算的X-射线粉末衍射图样与图2 (或下文)所示的立 体化学一致。

[022引表3.化合物8的原子坐标和等同各向同性的原子位移参数(A2)nU(eq)定义为正 交化的Uij张量的痕迹的Ξ分之一。

[0230]

Figure CN103764608BD00261

[0231] 表4.化合物8的选择的键长度,f乂)

[0232]

Figure CN103764608BD00271

[023引表5.化合物8的选择的键角,(° )

[0234]

Figure CN103764608BD00281

[0235] 表6.化合物8的选择的转角

[0236]

Figure CN103764608BD00291

[0237]表7.化合物8的各向异性的原子位移参数,(A2)。各向异性的原子位移因子指数 采用W下形式:-2 312 比2日*2。11+. . . +2hkaVUi2 [023引

Figure CN103764608BD00301

阳23引 附录3

[0240]化合物 1 4-((-1-¾基-2,3-二氨-1H,1'H-2, 2'-联巧-2-基)甲基)苯甲 酸

[02川化合物 2 4-(((IS, 25)-1-¾基-2,3-二氨-1H,1'H-2, 2'-联巧-2-基)甲 基)苯甲酸

[024引化合物3 4-(((化2时-1-径基-2,3-二氨-1H,1'H-2,2'-联巧-2-基)甲 基)苯甲酸

[024引化合物 4 4-(((lR,2S)-l-^基-2,3-二氨-1H,1'H-2,2'-联巧-2-基)甲 基)苯甲酸

[0244]化合物 5 4-(((15,2时-1-径基-2,3-二氨-1H,1'H-2,2'-联巧-2-基)甲 基)苯甲酸

[0245] 化合物6 6-(甲基氨基)己烧-1,2,3,4,5-戊醇4-(((15,2訂-1-径基-2,3-二 氨H-2,2'-联巧-2-基)甲基)苯甲酸盐

[0246] 化合物7 6-(甲基氨基)己烧-1,2,3,4,5-戊醇4-(((15,2时-1-径基-2,3-二 氨H-2,2'-联巧-2-基)甲基)苯甲酸盐

[0247] 化合物8 做-1-苯基乙基锭4-(((lS,2巧-1-径基-2,3-二 氨H-2,2'-联巧-2-基)甲基)苯甲酸盐

[024引化合物9 佩-1-苯基乙基锭4-(((lR,城-1-径基-2,3-二 氨H-2,2'-联巧-2-基)甲基)苯甲酸盐

Claims (8)

1. 下式的化合物及其药学可接受的盐
Figure CN103764608BC00021
2. 下式的化合物及其药学可接受的盐
Figure CN103764608BC00022
3. 下式的化合物及其药学可接受的盐
Figure CN103764608BC00023
4. 下式的化合物的N-甲基-(D)-葡糖胺盐:
Figure CN103764608BC00024
5. -种药物组合物,其包含有效量的权利要求1-4中任一项的化合物以及药学可接受 的载体。
6. 权利要求1-4中任一项的化合物在制备用于预防或治疗炎性肠病的药物中的用途。
7. 权利要求1-4中任一项的化合物在制备用于预防或治疗溃疡性结肠炎的药物中的 用途。
8. 权利要求1-4中任一项的化合物在制备用于预防或治疗克隆病的药物中的用途。
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