CN103718694B - 一种促进广西美登木种子萌发的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进广西美登木种子萌发的方法，其种子萌发的最优外部因素组合是：25℃的恒温；光照强度3000lx,光照时间12h/d；培养基质为泥炭土；生长调节剂处理液为浓度3mg/L的赤霉素（GA3）。在这一条件下，不仅成活率最高，达88.0%，而且发芽势、平均根长、发芽整齐度、胚根茁壮度等指标都能达到较好效果。本方法为广西美登木的苗木繁殖奠定了良好基础，对濒危紧缺药用植物资源再生和持续利用具有十分积极的影响。

Description

一种促进广西美登木种子萌发的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体是一种促进广西美登木种子萌发的方法。
背景技术
美登木属(Maytenus)植物隶属于卫矛科(Celastracae)，为多年生灌木。该属植物的根、茎、叶含有抗癌活性成分美登木素(Maytansine)和美登布林(Maytanprrine)，对乳腺癌、淋巴肉癌、消化道癌等多种恶性肿瘤有显著疗效。在民间该属植物被广泛用作败毒抗癌、破淤消肿、抗败血症、抗炎、催涎的药物，临床上美登木属植物有消炎、止疼、解毒、增进食欲等作用。广西美登木(MaytenusguangxiensisC.Y.ChengetW.L.Sha)是广西岩溶特有的药用植物，由于生存环境恶化及多年来产区群众乱采滥伐,野生资源蕴藏量越来越少，处于濒危状态，已被《中国南部和西南部石灰岩珍稀濒危植物名录》列为稀有濒危植物。
广西美登木种子在自然条件下萌发率极低，资源再生缓慢，现有资源难以满足药材市场的需要,人工种植已经成为一种必然趋势。种子萌发是种子育苗的先决条件，常规的播种办法无法改变广西美登木种子低萌发率状况。种子低萌发率成为制约广西美登木人工种植的瓶颈。目前已有的研究多集中于美登木属植物的化学成分、药理药效等方面，鲜见有关广西美登木繁殖育苗的报道，而关于广西美登木种子萌发方面的研究仍是空白；已有的少量的在其他物种上关于种子萌发的研究，都是在特定条件下研究某个因素对发芽率的影响，这种单因素的研究方法未能探讨不同因素间的相互作用。种子萌发可受外部条件的光、温、水分、培养基质、外源激素及其浓度等多种因素的影响，这些因素间互相作用可以影响到种子萌发，应在这些因素中寻求一个最优的组合条件以利于种子的萌发达到最佳状态。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进广西美登木种子萌发方法。通过对种子萌发外部环境的多种因子的控制以促进种子萌发，提高种子的萌发率，为广西美登木的苗木繁殖奠定基础。
本发明一种促进广西美登木种子萌发的方法，包括如下步骤：
（1）培养基质的准备：培养基质为泥炭土，在使用之前两周，用0.5%的多菌灵溶液喷洒浸湿培养基质，进行消毒处理，自然条件下晾干以备用；
（2）种子的准备：将广西美登木种子用清水搓洗干净，采用水选法选取下沉的饱满种子，用0.5%KMnO4浸泡消毒20-40min，清水冲洗，滤干，以备发芽用；
（3）浸种：将准备好的种子置于干净的盆中，加入3倍于种子体积的1-5mg/L赤霉素处理液，常温下浸种10-14h；
（4）萌发培养：将准备好的培养基质分装入平底的盘，用蒸馏水浸湿，摊平，培养基质的厚度2cm左右；将浸种处理过的种子均匀的撒在培养基质上，置于人工气候培养箱内培养，培养条件为：25℃的恒温、光照强度3000lx,光照时间10-14h/d；以后根据培养基质的失水情况适当补充蒸馏水，使种子经常处于湿润状态。
优选的，步骤（2）所述种子的准备，用0.5%KMnO4浸泡消毒30min。
优选的，步骤（3）所述浸种，加入3倍于种子体积的3mg/L赤霉素处理液，常温下浸种12h。
优选的，步骤（4）所述萌发培养，人工气候培养箱内培养，培养条件为：25℃的恒温、光照强度3000lx,光照时间12h/d。
本发明的优点和积极效果：
针对广西美登木种子在自然条件下萌发困难、萌发率低的状况，本方法采用正交试验设计手段，综合探讨光照、温度、培养基质、外源激素及其浓度对广西美登木种子萌发的作用，公开了广西美登木萌发的最优外部因素组合。正交试验设计研究手段避免了已有的研究未能综合考虑不同因素间互相作用对种子萌发的影响；本方法在萌发培养之前，先对种子和培养基质进行消毒处理，减少了种子在萌发培养中出现发霉而影响萌发状况，使原本在自然条件下萌发率低的广西美登木种子经本方法处理后，在播种后约20d开始出现萌发，35d左右到达萌发的高峰，60d左右萌发结束，发芽率达到85%以上，发芽势达到60%以上，发芽较整齐，种子萌发出的胚根普遍比较茁壮。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明内容作进一步的说明，但不是对本发明的限定。
实施例1
（1）培养基质的准备：培养基质为泥炭土，在使用之前两周，用0.5%的多菌灵溶液喷洒浸湿培养基质，进行消毒处理，自然条件下晾干以备用；
（2）种子的准备：将广西美登木种子用清水搓洗干净，采用水选法选取下沉的饱满种子，用0.5%KMnO4浸泡消毒30min，清水冲洗，滤干，以备发芽用；
（3）浸种：将准备好的种子置于干净的盆中，加入3倍于种子体积的3mg/L赤霉素（GA3）处理液，常温下浸种12h；
（4）萌发培养：将准备好的培养基质分装入平底的盘，用蒸馏水浸湿，摊平，培养基质的厚度2cm左右；将浸种处理过的种子均匀的撒在培养基质上，置于人工气候培养箱内培养，培养条件为：25℃的恒温、光照强度3000lx,光照时间12h/d；以后根据培养基质的失水情况适当补充蒸馏水，使种子经常处于湿润状态。
当种子着床进行萌发培养以后，隔天观察并统计萌发种子数，以肉眼看到白色幼根为标准判断种子是否萌发。同时随机选20颗种子，在其萌发后第15天测定根长。当盘里的某一颗种子萌发后，往后一个月若再无别种子萌发即视为该批种子萌发已结束。
结果：播种后21d开始出现萌发，37d到达萌发的高峰，61d萌发结束，发芽率为88.0%，发芽势为63.3%，发芽较整齐，种子萌发出的胚根较茁壮。
实施例2
培养基质为河沙；浸种时，加入3倍于种子体积的1mg/L萘乙酸（NAA）处理液，常温下浸种12h。其余同实例1。
结果：播种后20d开始出现萌发，35d到达萌发的高峰，59d萌发结束，发芽率为60.0%，发芽势38.7%，发芽不整齐，种子萌发出的胚根较茁壮。
实施例3
培养基质为河沙；浸种时，加入3倍于种子体积的蒸馏水，常温下浸种12h。其余同实例1。
结果：播种后23d开始出现萌发，39d到达萌发的高峰，65d萌发结束，萌发率为30.7%，发芽势为14.7%，发芽不整齐，种子萌发出的胚根较细。
实施例4
培养基质为河沙；浸种时，加入3倍于种子体积的蒸馏水，常温下浸种12h；萌发培养，培养温度为30℃的恒温，其余同实例1。
结果：播种后23d开始出现萌发，55d到达萌发的高峰，61d萌发结束，发芽率达到10.0%，，发芽势为8.7%，种子发芽不整齐，种子萌发出的胚根较细。
下面表1显示实例1至4中不同处理方法对广西美登木种子发芽率、发芽势、平均根长、发芽整齐度、胚根的茁壮度的影响。
表1不同处理方法对广西美登木种子萌发状况的影响。
发芽率(%) 发芽势(%) 种子萌发15天后的平均根长(mm) 发芽整齐度 胚根茁壮度
实例1 88.0 63.3 11.8 较整齐 较茁壮
实例2 60.0 38.7 9.9 不整齐 较茁壮
实例3 30.7 14.7 13.1 不整齐 较细
实例4 10.0 8.7 12.8 不整齐 较细
综合考虑发芽率、发芽势、平均根长、发芽整齐度、胚根茁壮度5项指标，广西美登木种子萌发效果最好的萌发条件是：25℃的恒温；光照强度3000lx,光照时间12h/d；培养基质为泥炭土；生长调节剂处理液为浓度3mg/L的赤霉素（GA3）。在这一条件下，不仅成活率最高，达88.0%，而且发芽势、平均根长、发芽整齐度、胚根茁壮度等指标都能达到较好效果。

Claims (4)

1.一种促进广西美登木种子萌发的方法，包括如下步骤：
（1）培养基质的准备：培养基质为泥炭土，在使用之前两周，用0.5%的多菌灵溶液喷洒浸湿培养基质，进行消毒处理，自然条件下晾干以备用；
（2）种子的准备：将广西美登木种子用清水搓洗干净，采用水选法选取出下沉的饱满种子，用0.5%KMnO4浸泡消毒20-40min，清水冲洗，滤干，以备发芽用；
（3）浸种：将准备好的种子置于干净的盆中，加入3倍于种子体积的1-5mg/L赤霉素处理液，常温下浸种10-14h；
（4）萌发培养：将准备好的培养基质分装入平底的盘，用蒸馏水浸湿，摊平，培养基质的厚度2cm；将浸种处理过的种子均匀的撒在培养基质上，置于人工气候培养箱内培养，培养条件为：25℃的恒温、光照强度3000lx,光照时间10-14h/d；以后根据培养基质失水情况适当补充蒸馏水，使种子经常处于湿润状态。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是:步骤（2）种子的准备，用0.5%KMnO4浸泡消毒30min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是:步骤（3）浸种，加入3倍于种子体积的3mg/L赤霉素处理液，常温下浸种12h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是:步骤（4）萌发培养，人工气候培养箱内培养，培养条件为：25℃的恒温、光照强度3000lx,光照时间12h/d。
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