CN103704471B - 一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，其原料含有以下成分：杏仁皮、固态发酵培养基、水和复合微生物发酵剂。实验结果表明：本发明提出的一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，提高了杏仁皮饲料的真蛋白质含量，并降低了有毒物质苦杏仁苷的含量。通过瘤胃尼龙袋降解试验表明，发酵后饲料的粗蛋白质和中性洗涤纤维的有效降解率得到了显著提高。

Description

一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料

技术领域

本发明涉及饲料工业反刍动物粗饲料加工利用领域，具体涉及一种多菌种固态发酵的杏仁皮生产的蛋白饲料。

背景技术

杏仁皮是杏仁的红棕色或者深黄色的种皮。杏仁皮中含有11.4%-13.1%的粗蛋白质、45%左右的碳水化合物，具有成为新型饲料的潜质。在工业中通过热烫漂方法从杏仁中脱去杏仁皮，脱去的杏仁皮作为废物丢弃，造成了很大的浪费也造成了环境污染。如果将杏仁皮作为饲料直接饲喂牲畜，则因为杏仁皮中可被吸收的营养价值低，导致饲喂效果差。

另外，杏仁皮中还含有一种重要的生物活性物质-苦杏仁苷，在动物体内会分解成有毒物质氢氰酸，在饲用之前需要设法降低其含量以达到安全饲喂水平，并提高适口性，从而提高杏仁皮的用量，

因此，如何提高杏仁皮等果皮废弃物的饲用价值、降低其有毒物质的含量，解决其对环境造成的污染，一直是困扰生产企业和科研应用技术人员的一个难题，也是亟需解决的问题。

固态发酵，是一种利用微生物在发酵基质中进行生物转化、降解的技术，具有能耗低、成本低、无污染等特点。发明人无意中发现，杏仁皮可通过复合菌固态发酵来生产饲料蛋白，并对发酵工艺包括发酵菌种、发酵基质、发酵条件进行优化，能够使杏仁皮的营养价值得到改善，同时减少对环境造成的污染。另外，微生物在适宜的生产条件下有可能会降解果皮、果渣中难以消化的和有毒有害成分，选择合适的菌种，进行饲料化生产，有望改善原料的营养价值。

目前文献和专利申请中有很多用于糟渣类产品的固态发酵生产蛋白饲料工艺研究，但大多是利用复合菌对马铃薯渣、番茄渣、豆渣、酒糟、醋糟等糟渣类产品的固态发酵利用，也有靳翔等（2008）在传统的面条工艺基础上，研究影响含有加州杏仁皮的经自然发酵酸面团(发酵剂)发酵的风味面条剪切质构特性的关键因素，发现发酵剂的发酵时间和添加量及杏仁皮添加量对酸面团发酵面条的最大剪切力的影响显著，含有加州杏仁皮的酸面团发酵面条的最佳工艺条件是发酵剂发酵时间33h、发酵剂量（自然发酵的面团）5%、杏仁皮量3%。但是，尚无利用黑曲霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌三个菌种组合对杏仁皮进行固态发酵生产蛋白饲料的报道。

发明内容

本发明的目的是以真蛋白质为指标，筛选出杏仁皮生物发酵的最佳菌种比例、发酵培养基基质、发酵工艺条件，而提供的一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，并真蛋白质、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、苦杏仁苷等含量的测定以及瘤胃尼龙袋实测常规营养成分降解率相结合的方法评价发酵效果。

本发明提供了一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，其原料含有以下成分：杏仁皮、固态发酵培养基、水和复合微生物发酵剂。

具体的，所述发酵饲料的原料含有以下配比的成分：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份，水140-300重量份和复合微生物发酵剂10-100体积份。

优选地，所述发酵饲料的原料含有以下配比的成分：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份，水156-240重量份和复合微生物发酵剂30-80体积份。

优选地，所述发酵饲料的原料含有以下配比的成分：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份，水180重量份，复合微生物发酵剂40体积份。

所述饲料中：

所述重量份可以是mg、g、kg等医药领域公知的单位，也可以是其倍数，如1/10、1/100、10倍、100倍等。

所述体积份可以是ml、L等医药领域公知的单位，也可以是其倍数，如1/10、1/100、10倍、100倍等。

当重量份为ml（毫升）时，体积份为g，当重量份为L（升）时，体积份为kg，二者单位互相对应。

所述杏仁皮为杏仁的种皮，为食品杏仁生产过程中剩余的残渣；

所述固态发酵培养基，其成分为：麸皮、尿素、硫酸铵、磷酸氢二钾和硫酸镁。

所述发酵培养基含有以下重复份的成分：麸皮10-20份、尿素1-2份、硫酸铵1-2份、磷酸氢二钾0.5-1份和硫酸镁0.1-0.3份。

优选地，发酵培养基含有以下重量份的成分：麸皮15份、尿素2份、硫酸铵2份、磷酸氢二钾0.5份和硫酸镁0.1份。

所述复合微生物发酵剂，其活性成分含有以下成分：黑曲霉、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌。

所述复合微生物发酵剂含有以下重量份的成分：黑曲霉10-40份、酿酒酵母10-20份、枯草芽孢杆菌10-20份，合计3×10⁸-8×10⁸个。

优选地，所述复合微生物发酵剂含有以下重量份的成分：黑曲霉20份、酿酒酵母10份、枯草芽孢杆菌10份，合计4×10⁸个。

上述复合微生物发酵剂中：

将黑曲霉以PDA培养基培养后，用无菌水冲洗上面的黑色孢子得到黑曲霉孢子悬浊液，调整浓度为10⁷个/ml，当重量份为g时，每体积份黑曲霉为1ml；

将酿酒酵母以PDA培养基培养至浓度为1⁰7个/ml，当重量份为g时，每体积份酿酒酵母为1ml；

将枯草芽孢杆菌以营养肉汤培养基培养至浓度为10⁷个/ml，当重量份为g时，每体积份枯草芽孢杆菌为1ml。

PDA培养基的组成为：马铃薯浸出液1L，葡萄糖20g，KH2PO43g,MgSO41.5g，维生素B110mg,琼脂15g，pH6.0，其中马铃薯浸出液的制备方法包括以下步骤：称取200g马铃薯，洗净、去皮，切成小块，加水1000ml后煮沸30min用纱布过滤成清液，加水至1000ml。

营养肉汤培养基的组成为：蛋白胨10g，牛肉膏粉3g，氯化钠5g，最终pH为7.4±0.2。

本发明还提供了上述杏仁皮发酵饲料的制备方法，该方法包括以下步骤：

1)按照复合微生物发酵剂的组成，配制复合微生物发酵剂，备用；

2)按照固态发酵培养基的组成，配制固态发酵培养基，备用；

3)配制湿料：将杏仁皮与固态发酵培养基按照配比混合均匀，然后按照料水比添加水，搅拌均匀，形成湿料；

4)将配方量的复合微生物发酵剂添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处下发酵3-5d，即成。

上述方法中：

所述步骤3）中料水的重量比为1:1.3-2.0，优选为1:1.5。

本发明还提供了上述饲料作为反刍动物饲料的原料的使用，按照牛羊营养需要量制定饲料配方。可参照以下配方配制肉羊或肉牛精料补充料：玉米50%，豆粕10%，棉粕10%，杏仁皮发酵饲料12%，小麦麸8%，葵花粕6.5%，石粉1%，磷酸氢钙0.5%，食盐1%，预混合饲料1%。

本发明提供的饲料具有以下优点：

1、本发明提供的杏仁皮发酵饲料中，其原料为：

1）复合微生物发酵剂：

黑曲霉能够释放纤维素酶、半纤维素酶及果胶酶，而且生长快、适应能力强，黑曲霉在固态发酵降解皮渣类产品纤维素组分的作用，打开植物细胞壁，使营养物质得以释放，更易于动物分解利用；

酿酒酵母能够产生丰富的菌体蛋白，是发酵饲料富蛋白化的重要菌种；

枯草芽孢杆菌作为细菌也常常用于固态发酵，可快速消耗发酵设施中的氧气，造成厌氧环境，同时菌体合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类。

复合微生物发酵剂为真菌和细菌的复合组方，对杏仁皮进行发酵，从尽达到厌氧环境、减少霉变损失，而且打破杏仁皮的细胞壁、破坏纤维素结构，以菌体产生的酶分解细胞中的营养成分、供给菌体充足营养以利菌体生长等几个方面着手，保障杏仁皮发酵的有效性和高效性。

2）固态发酵体系中需要为微生物生长提供适当的营养物质，特别是碳源、氮源和矿物元素。固态发酵培养基中的麸皮作为主要发酵辅料，它可以同时作为碳源和氮源也能提供维生素和矿物元素，其多孔状结构可作用良好的吸附载体；尿素、硫酸铵常作为无机氮源，磷酸氢二钠常作为酸碱调节剂；硫酸镁则作为矿物元素来源。

2、制备方法：本发明提供的发酵条件包括接种量、料水比、发酵时间等因素，适当的接种量可以缩短发酵时间，过度的接种量导致菌体生长过快、过稠，造成营养物质的缺失，本发明中筛选的接种量和发酵时间能够使发酵生产的杏仁皮饲料的真蛋白含量最高。水分含量的动态观测和控制是难以做到的，但可以控制初始水分含量。不同物料对于水分的保持能力不同，没有统一的标准和要求，需要针对原料特性进行试验研究。

3、通过动物试验研究发酵后蛋白饲料的降解率：本发明通过瘤胃尼龙袋试验，研究固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料在发酵前和应用最优条件发酵后各营养物质降解率的变化情况。

4、实验结果表明：本发明提出的固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料的方法提高了发酵后杏仁皮蛋白饲料粗蛋白质、真蛋白质含量，并降低了有毒物质苦杏仁苷的含量。通过瘤胃尼龙袋降解试验表明，发酵后的蛋白饲料粗蛋白质和NDF的有效降解率得到了显著提高。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

所述杏仁皮由张家口市万全县洗马林镇禾久果仁加工厂提供，营养成分含量为：干物质98.12%,粗蛋白11.34%、中性洗涤纤维53.23%、酸性洗涤纤维45.56%、粗脂肪10.34%、粗灰分5.43%。

所述黑曲霉（Aspergillus niger CICC2103）和酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae CICC1017），购于中国微生物菌种保藏中心；所述枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）由中国农业科学院饲料研究所家畜营养与饲料研究室筛选并保存。

所述PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）的组成为：马铃薯浸出液1L，葡萄糖20g，KH₂PO₄3g,MgSO₄1.5g，维生素B₁10mg,琼脂15g，pH6.0。其中马铃薯浸出液的制备方法包括以下步骤：称取200g马铃薯，洗净、去皮，切成小块，加水1000ml后煮沸30min用纱布过滤成清液，加水至1000ml。

所述营养肉汤培养基的组成为：蛋白胨10g，牛肉膏粉3g，氯化钠5g，最终pH为7.4±0.2。

其他载体和饲料添加剂、原料皆可从饲料市场购买获得。

实施例1：以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料

1、原料：杏仁皮100g、固态发酵培养基20g，水180g和复合微生物发酵剂40ml。

2、制备方法：

1）配制复合微生物发酵剂：

种子培养基：

黑曲霉：孢子悬浊液，调整浓度10⁷个/ml；

啤酒酵母：PDA培养基，调整浓度10⁷个/ml；

枯草芽孢杆菌：营养肉汤液体培养基，调整浓度10⁷个/ml；

将上述三种培养基各取黑曲霉20ml、枯草芽孢杆菌10ml、酿酒酵母10ml制成复合微生物发酵剂40ml，混合均匀；

2）配制固态发酵培养基

取麸皮20g、尿素2g、硫酸铵2g、磷酸氢二钾0.5g、硫酸镁0.1g，混合均匀。

3）配制湿料

将杏仁皮100g与固态发酵培养基20g混合均匀，以料水比1:1.5（w/w）的比例添加水，搅拌均匀，形成湿料。

4）接种

将复合微生物发酵剂按照湿料总重13.3%（40ml）的接种量添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处（环境温度约30℃）下发酵3d，即成。

实施例2：以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料

1、原料：杏仁皮100g、固态发酵培养基20g，水156g和复合微生物发酵剂30ml。

2、制备方法：

1）配制复合微生物发酵剂：

种子培养基：

黑曲霉：孢子悬浊液，调整浓度10⁷个/ml；

啤酒酵母：PDA培养基，调整浓度10⁷个/ml；

枯草芽孢杆菌：营养肉汤液体培养基，调整浓度10⁷个/ml；

将上述三种培养基各取黑曲霉10ml、枯草芽孢杆菌10ml、酿酒酵母10ml制成复合微生物发酵剂30ml，混合均匀；

2）配制固态发酵培养基

取麸皮15g、尿素1g、硫酸铵1g、磷酸氢二钾0.5g、硫酸镁0.2g，混合均匀。

3）配制湿料

将杏仁皮100g与固态发酵培养基20g混合均匀，以料水比1:1.3（w/w）的比例即156g添加水，搅拌均匀，形成湿料。

4）接种

将复合微生物发酵剂按照湿料总重10.9%（30ml）的接种量添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处（环境温度约30℃）下发酵5d，即成。

实施例3：以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料

1、原料：杏仁皮100g、固态发酵培养基20g，水240g和复合微生物发酵剂50ml。

2、制备方法：

1）配制复合微生物发酵剂：

种子培养基：

黑曲霉：孢子悬浊液，调整浓度10⁷个/ml；

啤酒酵母：PDA培养基，调整浓度10⁷个/ml；

枯草芽孢杆菌：营养肉汤液体培养基，调整浓度10⁷个/ml；

将上述三种培养基各取黑曲霉20ml、枯草芽孢杆菌20ml、酿酒酵母10ml制成复合微生物发酵剂50ml，混合均匀；

2）配制固态发酵培养基

取麸皮20g、尿素1.8g、硫酸铵1.5g、磷酸氢二钾0.8g、硫酸镁0.3g，混合均匀。

3）配制湿料

将杏仁皮100g与固态发酵培养基20g混合均匀，以料水比1:2.0（w/w）的比例即240g添加水，搅拌均匀，形成湿料。

4）接种

将复合微生物发酵剂按照湿料总重13.9%（50ml）的接种量添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处（环境温度约30℃）下发酵4d，即成。

实施例4：以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料

1、原料：杏仁皮100g、固态发酵培养基20g，水240g和复合微生物发酵剂80ml。

2、制备方法：

1）配制复合微生物发酵剂：

种子培养基：

黑曲霉：孢子悬浊液，调整浓度10⁷个/ml；

啤酒酵母：PDA培养基，调整浓度10⁷个/ml；

枯草芽孢杆菌：营养肉汤液体培养基，调整浓度10⁷个/ml；

将上述三种培养基各取黑曲霉40ml、枯草芽孢杆菌20ml、酿酒酵母20ml制成复合微生物发酵剂80ml，混合均匀；

2）配制固态发酵培养基

取麸皮20g、尿素2g、硫酸铵2g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁0.3g，混合均匀。

3）配制湿料

将杏仁皮100g与固态发酵培养基20g混合均匀，以料水比1:2.0（w/w）的比例即240g添加水，搅拌均匀，形成湿料。

4）接种

将复合微生物发酵剂按照湿料总重22.2%（80ml）的接种量添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处（环境温度约30℃）下发酵3d，即成。

实验例1：固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料营养价值变化

1、实验分组：

实验组分为以下几组：

A：以黑曲霉30ml（10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

B：以啤酒酵母30ml（10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

S：以枯草芽孢杆菌30ml（10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

A+B：以黑曲霉+枯草芽孢杆菌30ml（1:1,10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

A+S：以黑曲霉+啤酒酵母30ml（1:1,10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

B+S：以枯草芽孢杆菌+啤酒酵母30ml（1:1,10⁷个/ml）、其他条件同实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

实施例1：以实施例1发酵的杏仁皮发酵饲料；

实施例2：以实施例2发酵的杏仁皮发酵饲料；

实施例3：以实施例3发酵的杏仁皮发酵饲料；

实施例4：以实施例4发酵的杏仁皮发酵饲料；

并且设置空白组，不添加任何菌液一起发酵。每个组4个重复。

2、测定指标及方法如下：

发酵蛋白质饲料真蛋白质的测定：将发酵后培养基洗涤脱去可溶性氮之后，按照半微量凯氏定氮法（GB/T12091-1989）测定粗蛋白含量，所得结果即为发酵培养基的真蛋白含量。

其他营养成分：包括干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）采用张丽英的饲料测定方法进行。

苦杏仁苷含量的测定：测定发酵前后杏仁皮苦杏仁苷含量，苦杏仁苷含量测定参照李强使用的紫外分光光度法。

3、数据统计：数据采用SAS软件进行统计分析。

4、结果：见表1。

表1：发酵前后杏仁皮营养物质含量,%

组别	干物质	真蛋白质	苦杏仁苷	NDF	ADF
						A	94.56±0.34	14.42±0.42ab	-	48.60±1.99b	37.17±1.00b
B	92.91±0.01	12.07±0.08c	-	49.57±2.88b	37.89±0.98b
						S	93.53±0.13	12.87±0.14c	-	49.17±3.12b	37.18±2.68b
A+B	92.12±0.08	14.23±0.45b	-	49.74±2.62b	36.88±0.57b
						A+S	93.78±0.11	14.18±0.78b	-	51.28±2.78b	39.87±1.91ab
B+S	94.01±0.25	12.42±0.23c	-	47.75±2.91b	38.18±1.99b
						实施例1	95.56±0.84	15.52±0.87a	2.35±0.21b	47.62±1.19ab	37.24±0.61b
实施例2	94.11±0.41	14.68±0.14ab	2.57±0.49b	48.50±0.78ab	38.32±3.87b
						实施例3	94.53±0.73	14.85±0.08ab	2.82±0.30b	51.76±0.49ab	38.97±0.84b
实施例4	93.24±0.34	14.52±0.01ab	2.41±0.18b	50.34±3.43ab	37.49±0.75b
						空白组	98.12±0.07	11.54±0.15c	3.61±0.34a	52.12±0.23a	43.72±0.12a

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P<0.05），下表同。

由表1可知，单菌发酵试验中，黑曲霉组的固态发酵效果最好。该组发酵后培养基的真蛋白含量显著高于枯草芽孢杆菌组和酿酒酵母组（P<0.05）。可以将黑曲霉等菌种作为发酵菌种使用。由复合菌种的发酵结果可知，黑曲霉参与的发酵组的真蛋白含量显著高于B+S组（P<0.05）。实施例1高于其他各组，实施例2、3、4数值上也高于除实施例1外的其他各组，分别比空白组真蛋白质含量提高了25.64%、21.39%、22.69%、20.52%。

作为杏仁皮中苦味及毒素的来源，苦杏仁苷的含量显著减少（P<0.05），一定程度上提高了杏仁皮在反刍动物饲料中的用量。

结果表明：本发明提供的固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料的方法能够有效提高杏仁皮真蛋白质含量，并降低有毒物质苦杏仁苷的含量。

实验例2：固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料瘤胃降解效果研究

1、试验材料

1.1菌种：所述黑曲霉（Aspergillus niger CICC2103）和酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae CICC1017），购于中国微生物菌种保藏中心；所述枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）由中国农业科学院饲料研究所家畜营养与饲料研究室筛选并保存。

1.2试验动物：选用3只体重67±1.3kg、装有永久瘤胃瘘管的杜×寒F1代羯羊。试验羊单圈饲养，每日基础日粮供给量为按照维持需要的1.3倍配制日粮，日粮精粗比为40:60。每日于8:00和18:00饲喂两次，中午添干草一次，自由饮水。

1.3尼龙袋：300目尼龙布缝制而成。规格6cm×10cm，袋底部两角呈钝圆形，双线缝合。用蜡烛烤焦尼龙袋的散边，并使用在瘤胃中不易退色的记号笔编号。新尼龙袋要放置在瘤胃内72h，取出、洗净、在65℃烘箱中烘干后，方可使用。

2、试验分组

对照组：未发酵杏仁皮。

试验1组：按照实施例1发酵的杏仁皮蛋白饲料。

试验2组：按照实施例2发酵的杏仁皮蛋白饲料。

试验3组：按照实施例3发酵的杏仁皮蛋白饲料。

试验4组：按照实施例4发酵的杏仁皮蛋白饲料。

3、瘤胃降解率测定

尼龙袋孔径为300目，裁成12cm×8cm的尼龙布，对折后用细涤纶线缝双道，制成10cm×6cm的尼龙袋。散边用酒精灯烤焦，防止尼龙布脱丝。将杏仁皮样品粉碎过2.5mm筛，准确称取样品2g（精确到0.0001g）装入尼龙袋中。每只羊瘤胃中，每个样品在每个时间点设置2个平行，将两个尼龙袋固定在一端有开口的长约25cm的半软塑料管上，借助细木棒将尼龙袋送入瘤胃的腹囊处。塑料管的另一端通过尼龙绳与瘘管塞连接到一起固定。每只羊的瘤胃内放置6根塑料软管。尼龙袋在瘤胃内停留的时间为0、6、12、24、48、72h，于晨饲前1h放入尼龙袋，在不同的时间点依次放入瘤胃内，最终在同一时间点取出。尼龙袋从瘤胃内取出后放入冷水中，再用自来水冲洗至澄清。将洗净后的尼龙袋放入65℃干燥箱中烘干48h，回潮24h。将同一时间点的两个尼龙袋残渣合在一起装入自封袋，干燥处保存备用。

试验2、3、4组只测定24h降解率。

计算干物质（DM）、有机物（OM）、粗脂肪（EE）、粗蛋白质（CP）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）的降解率，公式为：营养物质降解率=（降解前营养物质的质量－降解后残留物中营养物质的质量）/降解前营养物质的质量×100%。

4、数据统计：数据采用SAS软件进行统计分析。

5、结果：

5.1发酵前后杏仁皮各营养成分在不同时间点的瘤胃降解率：见表2。

表2：发酵前后杏仁皮各营养成分在不同时间点的瘤胃降解率（%）

由表2可知：

DM降解率，在第0、6、12、24h四个时间点，实施例1的发酵杏仁皮要显著高于原杏仁皮（P<0.05）。但48h之后，两种杏仁皮的DM降解率差异不显著，并且趋于稳定。

OM降解率，在第6、12、48h三个时间点差异显著，其余时间点差异不显著。

CP降解率，实施例1的各个时间点的CP降解率均显著（P<0.05）高于原杏仁皮。

NDF降解率，在第0、6、12h实施例1的降解率要显著大于原杏仁皮（P<0.05），后三个时间点降解率差异不显著（P>0.05）。

ADF降解率，除0h外，实施例1的各个时间的瘤胃降解率均大于原杏仁皮，而且差异显著（P<0.05）。

总结：在0～24h中，实施例1的DM、OM、CP、NDF、ADF瘤胃降解率分别比未发酵杏仁皮提高了8.6%-24.6%、7.6%-17.6%、12.8%-62.8%、25.2%-27.8%、61.5%-165.0%。

实施例2、3、4在24h的降解率也符合上述基本规律。

结果表明：应用本发明采用多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，其营养物质瘤胃降解率显著高于未发酵杏仁皮。

5.2发酵前后杏仁皮的动态降解率参数：见表3。

表3：发酵前后杏仁皮营养成分的瘤胃动态降解模型参数

由表3可知，DM降解模型参数，快速降解部分a，两种杏仁皮差异不显著（P>0.05）；慢速降解部分b，原杏仁皮高于发酵杏仁皮（P<0.05）；b的降解速率c，发酵杏仁皮产品要大于原杏仁皮。与原杏仁皮相比，发酵后杏仁皮产品DM的ED有所提高，但差异不显著（P>0.05）。OM降解模型参数，发酵前后杏仁皮的b、c差异显著（P<0.05），但是发酵后杏仁皮产品的OM有效降解率ED差异不显著（P>0.05）。CP降解模型参数，除b差异不显著（P>0.05）外，其余参数均为发酵杏仁皮产品显著高于原杏仁皮（P<0.05）。发酵杏仁皮产品的ED也显著高于原杏仁皮（P<0.05）。NDF、ADF降解模型参数，发酵前后杏仁皮的NDF降解模型参数均差异不显著（P>0.05）；ADF的a、ED值显著高于原杏仁皮（P<0.05）。

结果表明：应用本发明提供的固态发酵杏仁皮生产蛋白饲料的方法得到的发酵产物能够有效地提高粗蛋白质和中性洗涤纤维的有效降解率。

总结：本发明提供的一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，提高了杏仁皮饲料的真蛋白质含量，并降低了有毒物质苦杏仁苷的含量；另外通过瘤胃尼龙袋降解试验表明，发酵后饲料的粗蛋白质和中性洗涤纤维的有效降解率得到了显著提高。杏仁皮来源广泛，产量大，如果合理的加以利用就可以作为一类新型的反刍动物非常规饲料原料。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (7)

1.一种以多菌种固态发酵生产的杏仁皮发酵饲料，其特征在于，所述发酵饲料的原料由以下配比的成分组成：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份、水140-300重量份和复合微生物发酵剂10-100体积份；所述复合微生物发酵剂，其活性成分含有以下体积份的成分：黑曲霉10-40份、酿酒酵母10-20份、枯草芽孢杆菌10-20份，合计3×10⁸-8×10⁸个；所述固态发酵培养基由以下重量份的成分组成：麸皮10-20份、尿素1-2份、硫酸铵1-2份、磷酸氢二钾0.5-1份和硫酸镁0.1-0.3份，所述重量份以g为基准，所述体积份以ml为基准。

2.根据权利要求1所述的发酵饲料，其特征在于，所述发酵饲料的原料由以下配比的成分组成：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份，水156-240重量份和复合微生物发酵剂30-80体积份。

3.根据权利要求1所述的发酵饲料，其特征在于，所述发酵饲料的原料由以下配比的成分组成：杏仁皮100重量份、固态发酵培养基20重量份，水180重量份，复合微生物发酵剂40体积份。

4.根据权利要求1-3任一项所述的发酵饲料，其特征在于，所述固体发酵培养基由以下重量份的成分组成：麸皮15份、尿素2份、硫酸铵2份、磷酸氢二钾0.5份和硫酸镁0.1份。

5.根据权利要求1-3任一项所述的发酵饲料，其特征在于，所述复合微生物发酵剂，其活性成分含有以下体积份的成分：黑曲霉20份、酿酒酵母10份、枯草芽孢杆菌10份，合计4×10⁸个。

6.一种制备权利要求1-5任一项发酵饲料的制备方法，该方法包括以下步骤：

1)按照复合微生物发酵剂的组成，配制复合微生物发酵剂，备用；

2)按照固态发酵培养基的组成，配制固态发酵培养基，备用；

3)配制湿料：将杏仁皮与固态发酵培养基按照配比混合均匀，然后按照料水比添加水，搅拌均匀，形成湿料；

4)将配方量的复合微生物发酵剂添加在湿料中，混匀后，密闭，放置在阴凉干燥处下发酵3-5d，即成。

7.权利要求1-5任一项所述发酵饲料在制备反刍动物的饲料原料中的应用。