CN103691157A - 流速可控的层析柱 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种流速可控的层析柱，属于生物纯化器械领域。本发明提供的层析柱，柱体顶端设置U型筛网，便于缓冲液、样品液、洗脱液等液体从柱体的四壁流下，避免引起飞溅；在出液口的下部设置流速控制器，可通过流速控制器对流速进行控制，且能够直接读出流速，方便实验操作，对层析操作中的流速进行量化，有利于对以后进行相同或者相似蛋白的纯化操作提供参考作用；柱头与柱体、柱体与柱尾都是可以拆分的，层析前对其进行组装，层析后，可以相互拆开，分别进行清洗、灭菌等处理。本发明结构简单，操作方便，蛋白的纯化效果好。

Description

流速可控的层析柱

  

技术领域

    本发明属于生物纯化器械，具体涉及一种流速可控的层析柱。 

背景技术

目前，多种化合物的组合物、天然产物及中药的分离纯化，主要是采用柱色谱，使用层析柱，通过柱层析过程来实现。传统的柱色谱是将混合化合物放置在玻璃柱柱床的顶端，使混合溶剂组成的洗脱剂( 流动相) 在重力作用下，通过装有吸附性介质材料( 固定相) 的垂直玻璃柱，分离得到各个较纯的产品( 纯品)，其原理是：由于混合化合物中各组分对色谱柱中固定相和流动相的亲和力不同，故根据混合化合物的性质选择合适的固定相和流动相，可以达到将其中各组分尽可能分离的目的，分离的产品在柱子出口分别被收集到各个收集瓶中，然后，鉴定各个收集瓶中的收集到的层析液，根据鉴定结果合并和浓缩各相同层析液，得到各个纯品。 

目前的层析柱存在以下问题：1. 在进行层析操作时不能控制液体的流速，如果样品液的流速过快，很容易造成目的蛋白与柱体内填料接触时间过短而不宜被吸附，如果洗脱液的流速过快，也不容易将目的蛋白交换洗涤下来；如果流速过慢，又会增加层析时间，由于流速的没有被量化，在下次处理同样或者相似的蛋白时，无法提供参考；2. 在进样时，样品溶液从层析柱顶端的中部直接流进柱体，容易造成柱体内填料飞溅至层析柱的内壁上。由于层析用的填料常常是比较昂贵的，飞溅至内壁上的填料没有在层析中得到充分的利用，影响层析效果。 

发明内容

为解决上述问题，本发明提供一种可拆分的层析柱，采用如下技术方案： 

一种流速可控的层析柱，包括柱头和柱体，所述柱头与柱体为螺纹连接，其特征在于，所述柱头的顶部设有供硅胶软管通过的通孔；所述柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网，所述U型筛网为上端开口、下端封闭的喇叭形状，所述U型筛网的侧壁含有通孔；所述U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜，所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网的表面积；所述柱体的底部通过螺纹连接与柱尾连接，所述柱尾的底部设有出液口；所述出液口的上部设置筛板,所述筛板的孔径为0.2~0.45μm；所述出液口的下部设置流速控制器。

优选地，所述柱头和柱体的连接处、柱体和柱尾的连接处设有密封圈，所述的密封圈为硅胶材质。 

优选地，所述筛板的上部设置醋酸纤维膜，所述醋酸纤维膜的直径不小于柱体的直径。 

本发明具有如下有益效果： 

1. 本发明提供的层析柱，在柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网，所述U型筛网为为上端开口、下端封闭的喇叭形状，并且U型筛网的侧壁含有通孔，如此设置，有利于缓冲液、样品液、洗脱液从柱体顶部进入时，是沿着柱体的四壁流下的，不会造成柱体内液体的飞溅，引起填料飞溅在柱体的四壁上，影响填料高度，从而影响蛋白的纯化效果。

2. 本发明提供的层析柱，在柱体的底部设置柱尾，并且在柱尾的内部、出液口的上部设置筛板，并限定筛板的孔径为0.2~0.45μm，并在筛板上设置醋酸纤维膜作为优选方式，如此这样便可以达到蛋白纯化时的填料不会随着缓冲液、样品液、洗脱液一起，从锥形出口流失，但又不会影响缓冲液、样品液和洗脱液从锥形出口的流出效果；此外，将筛板设置在柱尾上，当纯化完成后，可以打开柱尾，很方便地取出柱体内的填料。 

3. 本发明提供的层析柱，U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜，可以对待分离的样品液进行初步分离，拦截粒径比较大的未处理完全的菌体等杂质，还可以避免层析样品堵塞U型筛网。 

4. 本发明提供的层析柱，在柱头和柱体的连接处、柱体和柱尾的连接处，都设有密封圈，便于柱头和柱体、柱体和柱尾的密闭，避免缓冲液、样品液、洗脱液从两者的缝隙处流出，造成浪费。 

5. 本发明提供的层析柱，在出液口的下部设置流速控制器，可通过流速控制器对流速进行控制，且能够直接读出流速，方便实验操作，对层析操作中的流速进行量化，有利于对以后进行相同或者相似蛋白的纯化操作提供参考作用。 

6. 本发明提供的层析柱，柱头与柱体、柱体与柱尾都是可以拆分的，层析前对其进行组装，层析后，可以相互拆开，分别进行清洗、灭菌等处理。本发明结构简单，操作方便，蛋白的纯化效果好。 

附图说明

    图1为本发明的结构示意图；其中，1表示柱头；2表示硅胶软管；3表示出液口；4表示流速控制器；5表示筛板；6表示U型筛网；7表示柱体；8表示柱尾。 

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。除下述实施方式外，本发明还可以有其他实施方式，凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围内。 

如图1所示，一种流速可控的层析柱，包括柱头1和柱体7，所述柱头1与柱体7为螺纹连接，其特征在于，所述柱头1的顶部设有供硅胶软管2通过的通孔；所述柱体7的顶部设置可拆卸的U型筛网6，所述U型筛网6为上端开口、下端封闭的喇叭形状，所述U型筛网6的侧壁含有通孔；所述U型筛网6的上部放置中速定性滤纸滤膜（在图中并没有标示出来，其设置在筛网的上部，但是不超过柱体顶部的水平位置），所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网6的表面积；所述柱体7的底部通过螺纹连接与柱尾8连接，所述柱尾8的底部设有出液口3；所述出液口3的上部设置筛板5,所述筛板5的孔径为0.2~0.45μm；所述出液口3的下部设置流速控制器4。 

优选地，所述柱头1和柱体7的连接处、柱体7和柱尾8的连接处设有密封圈，（在图中并没有标注出来），用于密封作用，所述的密封圈为硅胶材质，密封效果更佳。 

优选地，所述筛板5的上部设置醋酸纤维膜，所述醋酸纤维膜的直径不小于柱体7的直径。 

Claims (3)

1.一种流速可控的层析柱，包括柱头（1）和柱体（7），所述柱头（1）与柱体（7）为螺纹连接，其特征在于，所述柱头（1）的顶部设有供硅胶软管（2）通过的通孔；所述柱体（7）的顶部设置可拆卸的U型筛网（6），所述U型筛网（6）为上端开口、下端封闭的喇叭形状，所述U型筛网（6）的侧壁含有通孔；所述U型筛网（6）的上部放置中速定性滤纸滤膜，所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网（6）的表面积；所述柱体（7）的底部通过螺纹连接与柱尾（8）连接，所述柱尾（8）的底部设有出液口（3）；所述出液口（3）的上部设置筛板（5）,所述筛板（5）的孔径为0.2~0.45μm；所述出液口（3）的下部设置流速控制器（4）。

2.根据权利要求1所述的流速可控的层析柱，其特征在于，所述柱头（1）和柱体（7）的连接处、柱体（7）和柱尾（8）的连接处设有密封圈，所述的密封圈为硅胶材质。

3. 根据权利要求1所述的流速可控的层析柱，其特征在于，所述筛板（5）的上部设置醋酸纤维膜，所述醋酸纤维膜的直径不小于柱体（7）的直径。

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