CN103609522B - 一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法 - Google Patents

一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法，属于水产养殖技术领域，本发明的技术方案为：将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40～50d；其中，每天将幼鲵转移至浓度为2.5×10-4g/L～2.5×10-3g/L的雌二醇及其类似物的溶液中处理2～6h。本发明通过调节水温与使用外源雌二醇及其类似物对幼鲵的生长与性别分化进行控制，不仅保持了大鲵养殖企业幼鲵成活率较高及生长速度较快的优点，而且使幼鲵向雌性方向分化，解决了市场上雌鲵匮乏问题，对于促进大鲵养殖产业的可持续健康发展等具有重要的实践价值。

Description

一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法。
背景技术
大鲵是我国特有的有尾两栖动物，具有较大的食用价值。自20世纪80年代以来，由于大量非法捕猎、生境破坏等原因，导致了野生大鲵种群数量急剧下降，许多地区甚至已经灭绝。基于以上原因，社会各界开始进行大鲵的人工养殖并获得了成功。在自然环境条件下，野生大鲵的繁殖盛期在每年的8月底至9月，经过35～40天的体外胚胎发育，一般在10月中下旬才能孵化出膜，孵化后的大鲵幼体必须经过寒冷而漫长的冬春季节，该时期正好是大鲵幼体性腺分化的关键时期。已有的研究资料显示，在自然环境中野生大鲵的雌雄比例基本上为1:1。
但是，大鲵养殖企业为了使幼鲵的成活率及生长速度得到提高，在冬春季节将刚孵化出膜的幼鲵转移到室内，并使用井水进行饲养。由于冬春季节的井水水温明显高于自然河道的水温，使得人工饲养的幼鲵性别比例严重失调，且绝大多数个体分化为雄鲵，造成市场上雌鲵匮乏，这对大鲵这一古老物种的延续及大鲵产业可持续健康发展均构成极大威胁。
发明内容
本发明的目的在于提供一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法，该方法能够有效诱导大鲵幼体生长为雌性，同时使幼鲵的生长速度快、成活率高。
本发明是通过以下技术方案来实现：
一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法，是将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40～50d；其中，每天将幼鲵转移至浓度为2.5×10-4g/L～2.5×10-3g/L的雌二醇及其类似物的溶液中处理2～6h。
所述的雌二醇及其类似物为17-β雌二醇、2-甲氧基雌二醇、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、环戊丙酸雌二醇或炔雌醇。
与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
本发明通过调节水温与使用外源雌二醇及其类似物对幼鲵的生长与性别分化进行控制，不仅保持了大鲵养殖企业幼鲵成活率较高及生长速度较快的优点，而且使幼鲵向雌性方向分化，解决了市场上雌鲵匮乏问题，对于促进大鲵养殖产业的可持续健康发展等具有重要的实践价值。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。
1、饲养条件与材料
实验所用幼鲵及场地均由陕西省宁陕县某大鲵养殖场提供，该养殖场位于秦岭山脉南坡，地理坐标为34°02′48″N、108°07′44″E，海拔742m，是野生大鲵在宁陕县的主要自然分布区之一。
幼鲵是指大鲵从出膜一直到外鳃脱落的这段时间；
本实验用的幼鲵均是该场通过仿生态繁育技术模式繁殖的，出膜时间在2011年10月16日前后。实验前这些幼鲵均健康活跃，体重在1.12～1.48g之间。
2、水温对幼鲵性别分化及生长的影响
将幼鲵分别在中水温（12～14℃）与高水温（19～21℃）条件下饲养，每组10尾，记录幼鲵性别分化和生长情况。水温对幼鲵生长及性别分化影响结果如表1所示：
表1不同水温下清水组的幼鲵基本情况
注：取材时间为出膜约240d。M-1是指在中水温下测量的第1尾幼鲵，依次类推；H-1是指在高水温下测量的第1尾幼鲵，依次类推。
本实验室近年来从大鲵养殖户反馈的信息获知，人工饲养的幼鲵绝大多数个体分化为雄性，造成市场上雌鲵匮乏，原因可能是大鲵养殖户在冬春季节将刚孵化出膜的幼鲵转移到室内，使用井水进行饲养。由于冬春季节的井水水温明显高于自然河道的水温，使得人工饲养的幼鲵绝大多数个体分化为雄性，但个体的平均长度和体重均有增加，性腺分化的时间提前。分析其原因，可能是温度改变某些酶的活性，从而影响了性状。
从表1结果分析，幼鲵在两种不同水温梯度条件下，生长速度有显著差异。高水温（19～21℃）组的幼鲵生长快，中水温（12～14℃）组的生长慢；高水温能加快幼鲵生殖腺的发育，使其分化时间明显提前。
3、雌二醇及其类似物对幼鲵性别分化及生长的影响
1）在高水温（19～21℃）条件下，每天分别用低浓度（2.5×10-4g/L）、中浓度（1.4×10-3g/L）与高浓度（2.5×10-3g/L）的17-β雌二醇溶液浸浴幼鲵2～6h，其余时间用清水饲养，连续处理40～50d。每组10尾，记录幼鲵性别分化和生长情况。
在高水温（19～21℃）条件下，当雌二醇及其类似物浓度较高时，雌性率达100%；当雌二醇及其类似物为低浓度时，雌性率为87.5%（结果如表2）。但是在高水温条件下，雌二醇及其类似物对幼鲵生长具有一定的抑制作用，且雌二醇及其类似物处理时间越长，抑制作用越强，雌二醇及其类似物浓度越大抑制作用也越大。依据使幼鲵“雌性比例高、生长速度快”的原则，本发明使用雌二醇及其类似物浓度为低浓度。
表2在高水温下雌二醇及其类似物处理40d的幼鲵基本情况
注：取材时间为出膜约240d。E2A-1是指出膜约240d，在高水温、低浓度17-β雌二醇处理40d，E2A组测量的第1尾大鲵，依次类推；E2B-1是指出膜约240d，在高水温、中浓度雌二醇及其类似物处理40d，E2B组测量的第1尾大鲵，依次类推；E2C-1是指出膜约240d，在高水温、高浓度雌二醇及其类似物处理40d，E2C组测量的第1尾大鲵，依次类推。
2）其它雌二醇及其类似物对对幼鲵性别分化及生长实验
①选取2‐甲氧基雌二醇作为诱导剂，将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40d，每天将幼鲵转移至浓度为2.5×10-4g/L的2‐甲氧基雌二醇溶液中处理3h；
②选取戊酸雌二醇作为诱导剂，将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养45d，每天将幼鲵转移至浓度为1.6×10-3g/L的戊酸雌二醇溶液中处理4h；
③选苯甲酸雌二醇作为诱导剂，将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养50d，每天将幼鲵转移至浓度为2.5×10-3g/L的苯甲酸雌二醇溶液中处理2h；
④选环戊丙酸雌二醇作为诱导剂，将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40d，每天将幼鲵转移至浓度为1.4×10-3g/L的环戊丙酸雌二醇溶液中处理6h；
⑤选炔雌醇作为诱导剂，将幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40d，每天将幼鲵转移至浓度为1.4×10-3g/L的炔雌醇溶液中处理3h。
结果表明，在一定剂量的雌二醇及其类似物诱导下，幼鲵性腺能够分化为雌性。
已有的研究表明，性激素在动物胚胎发育早期，对性别分化有显著的诱导作用，这在哺乳类中很明显，在两栖类中更加明显。性激素诱导性腺分化主要作用于性腺皮部和髓部的分化上，当皮部分化占优势时，即分化为雌性（雌激素可促使皮部的分化占优势），因而导致雌性比例增加；反之，雄激素相对增加时，促进髓部分化而成为雄性。同时，性激素的诱导作用也决定了生殖细胞的分化和形成，当原生殖细胞进入发达的生殖腺皮部时便分化成卵母细胞，并被一层上皮细胞包围起来形成卵泡；反之，原生殖细胞进入髓部就形成精母细胞。
本发明显示，高温组的清水组，雌性率为25.0%；高水温组用低浓度雌二醇及其类似物处理40d的幼鲵雌性率为87.5%；高水温组用高浓度与中浓度雌二醇及其类似物处理40d的幼鲵雌性率均高达100%，表明在高水温条件下，幼鲵性腺的分化也极易受雌二醇及其类似物影响，在一定剂量的雌二醇及其类似物诱导下，幼鲵性腺能够分化为雌性。
本发明还显示，在高水温（19～21℃）条件下的清水组幼鲵生长速度最快；在高水温条件下，用低浓度雌二醇及其类似物处理40d的幼鲵生长速度较快；在高水温条件下，用高浓度与中浓度雌二醇及其类似物处理40d的幼鲵生长速度均较慢。表明在高水温条件下，雌二醇及其类似物对幼鲵生长具有一定的抑制作用，且雌二醇及其类似物处理时间越长，抑制作用越强，处理剂量越大抑制作用也越大。
基于以上实验结果，依据使幼鲵“雌性比例高、生长速度快”的原则，来筛选培育雌鲵最佳水温、雌二醇及其类似物处理浓度及处理时间的方案。经过综合分析，本发明认为，理想雌鲵培育的最优方案应该同时满足如下5个条件：
①用雌二醇及其类似物处理幼鲵；
②处理温度保持在19～21℃；
③雌二醇及其类似物处理浓度为2.5×10-4g/L；
④每天用雌二醇及其类似物处理2～6h；
⑤一共培养40～50d。

Claims (1)

1.一种定向诱导大鲵幼体雌性化生长的方法，其特征在于，将体重在1.12～1.48g之间的幼鲵在温度为19～21℃的清水中连续培养40～50d；其中，每天将幼鲵转移至浓度为2.5×10-4g/L～2.5×10-3g/L的雌二醇及其类似物的溶液中处理2～6h；
所述的雌二醇及其类似物为17-β雌二醇、2-甲氧基雌二醇、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、环戊丙酸雌二醇或炔雌醇。
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