CN103599817A - 免疫学化验系统和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种免疫学或免疫血液学化验的系统和方法，包括可以容纳化验标本的容器，保温器，标本分离系统，图像获取系统，以及吸移管管理器。该免疫学化验系统还可以包括洗涤器。还公开了一种免疫学化验方法，包括的步骤有，在包含过滤器的容器中放置免疫学化验标本；在容器中加入测试试剂，将容器中的标本和试剂的混合物保温，将容器中的标本和试剂混合物分离为已经反应和没有反应的成分；以及分析成分以确定在标本和试剂之间是否存在相互作用。容器底部的优选采用有助于将标本的反应成分均匀地扩散在容器的底部上的材料，从而更易于分析相互反应。

Description

免疫学化验系统和方法
本申请是申请人为“爱莫里大学”、申请日为“2004年6月24日”、申请号为“200480021043.2”、发明名称为“免疫学化验系统和方法”的中国发明专利申请的分案申请。
优先权要求
本申请要求同样未决的美国实用专利申请为优先权，所述实用专利申请于2003年6月24日提交，其名称为“免疫学化验系统及方法（Immunological Assay System and Method）”，序列号为10/602,981，并在此将其整体结合作为参考。
技术领域
本发明总体涉及一种免疫学化验系统，更特别地，涉及一种用于分离和分析免疫学和免疫血液学标本成分的系统和方法。
背景技术
免疫学化验设计用于检测抗体和抗原之间的反应。这些化验通常采用细胞，例如作为“抗原载体”的红血球（RBCs）或者小球（bead）。在适当的化验构造中，抗体可以交叉连接抗原载体，从最初单独的抗原载体和抗体而聚集产生大的三维抗原抗体。在其他构造中，抗体结合在抗原载体上而不与它们交叉连接。
在血库设定中，免疫血液学测试使用RBCs和抗体以确定输血捐赠者和接受者在输血之前的可配伍性。例如，如果接受者的抗体与捐赠者的RBCs产生交叉连接，捐赠者和接受者是不配伍的，结果会形成大的RBC聚集。现在商业上可用的测试试剂是设计用来区分这些聚集和单独的、非凝集的RBCs。例如在标准的“试管测试”中，RBCs与抗体混合，在大约1000X重力加速度（g）下离心分离很短的时间，大约30秒，以增强形成的抗原抗体复合体，然后用手轻轻地再次悬挂，从而可将凝集的RBCs从非凝集的RBCs中区别出来。试管测试要使用大量的劳动力，不能自动化，由于要依赖各个操作者的技巧，各个实验室的结果难以实现标准化。
一种可选的用于鉴别凝聚RBCs的近似法是自旋柱技术（columntechnology），它基于标准的色谱分析原理。有了这种方法，利用充满诸如小球、凝胶、或者聚丙烯酰胺的均质基体试管，便可分离聚集的和独立的RBCs。基体材料设计有特定大小的洞或微孔，从而在仔细控制的离心力作用下，大的（“4＋”）聚集几乎不能进入基体。然而，较小的聚集（“3＋”到“1＋”）依次进入基体增加等级，而未凝聚的RBCs不仅进入基体，而且完全沉积在试管底部。为了让单一均质色谱分析基体有效地将独立的RBC从不同尺寸的RBC聚集中分离出来，必须在精控制80Xg低速离心条件下，进行相对较长运行时间的离心分离，大约10分钟。与最佳离心分离状况的偏差，例如为缩短化验运行时间而采用较高的离心分离速度，，会导致RBCs的不良分离，损害确定血液捐赠者和接受者之间可配伍性的化验能力。这种方法在一定范围内可以自动化，较少地依赖于操作者的技术。
由于处理柱的生产成本，自旋柱技术相比试管测试昂贵许多。基体材料为溶液，典型地必须要有精控的包装、运输、和存储条件。另外，离心分离步骤的延长，其测试要比试管测试慢了，大约10分钟，而试管测试为大约30秒。解释化验的结果也需要对操作者进行培训，因为读出的是“模拟”刻度，即典型地必须估算RBC迁移通过基体的距离。
这种技术在免疫血液学测试中主要有三种应用：正向血型测定、逆向血型测定、以及抗体筛选。每一种都将单独讨论。
ABO/D正向测定（ABO/D Forward Typing）
正向测定用来检测在RBC表面上是否存在特殊的临床上重要的抗原。这些包括，但是不限于A－抗原、B－抗原，Rh（D）－抗原，以及其它包括Kell、Duffy等的RBC抗原。通常，测试各种这些抗原用在单独的测试/反应中。因此，需要三个单独的反应识别这三种RBC抗原。这种规程通常需要设立三个单独的试管/反应检测RBCs上是否存在A、B和Rh（D）抗原。
对于A和B抗原测定，我们现在主要使用老鼠抗体直接接触适合的抗原，尽管也可以使用人类的抗血清。理论上，如果检测设备，即流动血细胞计数器或其他适合的仪器，可以检测的话，则这些抗体可以用例如荧光或其它多种商业上可用的荧光染料直接标记。A和B抗原包括部分糖残余，然而准备来接触这些抗原的大多抗体是免疫球蛋白M（IgM）类的，因而难以直接标记。
IgM抗－A和抗－B抗体都具有凝聚RBCs的倾向，这是大多商业上可用于进行血型测定的技术的基础。然而，RBC凝聚防止细胞被流动血细胞计数器分析，因为大的凝聚物不能通过流动细胞，而会阻塞随后维持设备所需要的流动细胞。因此，RBC凝聚传统上与流动血细胞计数器不兼容。事实上，本领域以前的出版物提出RBCs靠抗体的凝聚实际限制了流动血细胞计数器在免疫血液学的应用。另外，流动血细胞计数器研制者通常寻求在流动血细胞计数器之前从标本中移除聚集/凝聚，从而不会阻塞该设备（例如，Berneman，Z.，N.R.vanBockstaele，W.M.Uyttenbroeck，C.Van Zaelen，J.Cole-Dergent，L.Muylle，以及M.E.Peetermans，“Flow-Cytometric AnalysisofErythrocytic Blood Group A Antigen Density Profile，”Vox Sang61:265(1991)；Garratty，G.，以及P.A.Arndt，“Applications of FlowCytofluorometry to Red Blood Cell Immunology，”Cytomery38:259(1999)；Sharon，R.，以及E.Fibach，“Quantitative Flow CytometricAnalysis of ABO Red Cell Antigens，”Cytomery12:545(1991)。
ABO/D逆向测定（ABO/D Reverse Typing）
逆向测定用于确定在血浆和血清中是否自然地存在抗－A和抗－B抗体。这种测试是对上述正向测定的确认，确保给予个体正确的血型。通常，测试这两种抗体各自都用于单独的测试/反应。典型的，使用三个单独盛放A组、B组、或O组试剂细胞的试管。对每个试管，将个体血浆加入、保温、洗涤，并随后加入商业上可用的荧光标记的辅助抗体，且所述抗体直接接触人类IgM。
如同正向测定，存在IgM抗－A和抗－B抗体（在人类起源的这种情况下）具有凝聚RBCs的倾向，这是大多商业上可用于进行血型测定的技术的基础。另外，如上所述，RBC凝聚防止细胞被流动血细胞计数器分析，因为大的凝聚物不能通过流动细胞，而会阻塞随后维持设备所需要的流动细胞。
对意外的RBC同种抗体的筛选
在此前输过血或者怀孕的个体、患者、或血液捐赠者中，抗体会产生异质的RBCs（RBC同种抗体）。与正向测定和逆向测定相同，当存在强大的同种抗体时，会出现包括RBC凝聚在内的问题。
因此，在工业中存在迄今未解决的需求，以解决前述的缺陷和不足。
发明内容
本文公开了用于免疫学和免疫血液学化验的系统和方法。简单的说，代表性的化验系统包括，可以容纳化验标本和试剂的容器，其中该容器包括带有不规则或不均匀形状表面的底部；紧密靠近保温器的标本分离系统；紧密靠近标本分离系统的图像获取系统；以及机器人吸移管管理器，包括距离范围可到达过滤器容器的机器人臂、保温器、标本分离系统和图像获取系统。带有不规则或不均匀表面的容器可以是过滤器容器，所述过滤容器由下述至少一种材料中选出：聚丙烯、尼龙、硝酸纤维素和聚偏氟乙烯。另外，过滤器容器还可以包括多个微孔。
另外，公开了用于免疫学和免疫血液学化验的方法。该免疫学方法识别标本和测试试剂之间的相互反应，其中测试试剂中一种包含抗原载体（RBC或小球），其它的包含抗体。在这方面，代表性的方法可以广泛的概括如下：提供容器；在容器中使免疫学标本和试剂的混合物反应；在容器中低速地离心分离标本和试剂的混合物，或者以较短时间；可选的洗涤RBCs或其它抗原载体；以及在容器中分析成分，以确定在标本和试剂成分之间是否存在相互作用。
同样公开的免疫学化验的方法包括，混合稀释的免疫血液学标本和稀释的试剂，从而形成标本混合物，通过流动血细胞计数器分析标本混合物，并确定在免疫血液学标本中是否存在预定的成分。同样公开的免疫学化验的系统包括，反应容器，免疫血液学标本的稀释浓度，试剂的稀释浓度，以及流动或毛细血细胞计数器。
在对后附附图和详细说明进行审视后，本领域的人员能够清楚了解所公开的化验系统和方法的其它方法、特征和优点。所有这些附加的方法、特征和优点都包括在本发明公开的范围内，并且被后附的权利要求所保护。
附图说明
参考附图可以更好的理解所公开的化验系统和方法。附图中的部件没必要成比例，重要的是清楚地示出本文所公开的原理。另外，在附图中，相同的参考标记在所有几幅图中都表示相应的部分。
图1所示为已公开的、具有代表性的免疫学系统。
图2（a）和（b）示出了图1中免疫学系统的过滤器容器中，标本和试剂混合物之间的相互作用。
图3的示意图示出了示出了图1中免疫学系统的代表性过滤器容器，绘出了相互作用的标本和试剂。
图4的示意图示出了示出了图1中免疫学系统的代表性分离系统组件，在操作中作为示例的是离心分离机。
图5的流程图是公开的代表性免疫学化验方法，其使用了图1的免疫学系统。
具体实施例
总体地，公开了用于分离和分析免疫学和免疫血液学标本成分的系统和方法。在这方面，所述免疫学化验系统的实施例克服了现有试管测试和自旋柱技术的缺点，同时所提供的免疫学化验技术更易于实现自动化。
在一个实施例中，免疫学化验系统是一种包括过滤容器系统的仪器，其中过滤容器系统具有一个或多个过滤器，由于在过滤器中存在多个特定尺寸的洞或微孔，其具有离散的分子重量和分子大小的截断。免疫学标本与实际混合并放在过滤器上。在使用真空、离心分离或其它方法将标本引导通过过滤器之后，不同的过滤器根据标本的尺寸而将样品成分彼此分离开。
在可选的实施例中，免疫学化验系统包括反应容器、稀释浓度的免疫血液学标本、稀释浓度的试剂、以及流动的或毛细的血细胞计数器。公开的可选系统也可以包括可选择的真空过滤系统和/或可选择的离心分离系统。
在另一可选实施例中，免疫学化验系统是一种包括容器系统的仪器，其中容器系统具有一个或多个容器，各容器的底面具有不均匀的表面形貌。为实现本文目的的“表面形貌”表示容器的底面具有表面形貌特征或者表面轮廓，使得部分底面升起高于其它的部分，或者包括凸起。“不均匀”表示底面不是完全光滑的，但是并不表示容器底部的升起表面形貌不可以是规则的构造，例如均匀间隔的成行的凸起。在商业上对许多制造商可以实现的一种便宜示例，就是用带有过滤材料的、用于覆盖底部的96井板（96－well plate）。这种过滤板常常用来将大于过滤器微孔尺寸的材料从小于过滤器微孔尺寸的材料中分离开，例如通过使用真空或离心分离迫使较小的材料通过。然而在一个实施例中，无需使材料移动通过过滤器。在这个实施例中，免疫学标本与试剂混合并放在容器中进行反应。所述过滤器具有不规则的表面，这样减缓了抗原载体（例如小球或者红血球（RBCs））在离心分离作用下向容器边缘的移动，因此离心分离的结果使得抗原载体基本均匀的分散在底部过滤材料上。使用这些过滤板的益处是，均匀分散的抗原载体薄膜不会在凝聚的抗体中形成大的凝聚或聚集，从而改善随后对试剂相互作用进行的分析。
这里抗原载体例如可以是合成的小球或试剂细胞，例如RBCs、WBCs或者血小板。为了本文的目的并且作为示例，抗原载体通常是指RBCs，但是熟悉本领域的人员可以想象到可用于化验系统和方法的其它的抗原载体。
如上所述，在底部带有过滤材料的96井化验板可以用作容器，其多种示例在商业上可用。当抗体和RBCs在井中反应并随后进行离心分离的时候，井底部的不规则表面形貌的表面形貌阻止RBC滚动和移动，使得RBCs在底部上均匀地扩散开。相反地，如果容器具有光滑的底部，例如在底部没有过滤材料的标准96井塑料化验板，离心分散力会使得所有RBCs沿着光滑的底部滚动，并停留在容器的角落中。在出现结合有RBCs的抗体时，光滑底板内的紧密填充的RBCs会形成大的凝聚或聚集，而在带有不规则底部表面形貌表面形貌的板中，分散的RBCs或者保持为单一的细胞，或者只形成小的凝胶。当以流动血细胞计数器作为图像获取系统而对标本进行分析时，可对单个的细胞和在不规则底部表面形貌表面形貌板中形成的小聚集简易而精确地进行分析。相反的，来自底部光滑板上的较大聚集会堵塞血细胞计数器，并使其不可使用，从而停止或阻碍对标本进行分析。
公开的免疫学化验系统可以用来测量抗体和细胞之间的相互作用，或者在有些情况下测量抗体和可以变为和/或构造为抗体载体的合成小球之间的相互作用。免疫学系统能够以至少两种不同的方式使用。一种方式，将例如RBCs、白血球（WBCs）、或血小板这样的患者的“细胞组分”与“试剂抗体”混合。混合物的成分可以被分离或者保留在原位，随后进行分析以确定细胞组分和试剂抗体之间是否存在相互作用。
另一种方法，免疫学系统可以用于化验方法，所述化验方法是将诸如血浆或血清这样的患者的含抗体标本或血清标本，与例如RBCs、WBCs、或者血小板这样的合成小球或者试剂细胞等抗原载体混合。该混合物可以被分离或者保留在原位，随后分析其成分，以确定抗体标本和试剂细胞或合成小球之间是否存在相互作用。
图1绘出了免疫学系统100的一个实施例。如图1所示的免疫学系统100的仪器包括，容器105，可以容纳化验标本；可选的保温器110，其中可以放置容器；标本分离系统115，布置在紧密靠近保温器110或布置在其中；可选的图像获取系统130，紧密靠近在标本分离系统115；以及可选的机器人吸移管管理器135，包括机器人臂，其距离范围可到达过滤器容器105、保温器110、标本分离系统115、和/或图像获取系统130。免疫学系统系统100也可以包括布置在其中的可选的洗涤器140，以及可选的转台系统145，在其中布置了标本固持器146，用于固持化验标本。另外免疫学系统系统100还可以包括装有化验标本的试管147和/或装有试剂的试管148。
在一个实施例中，容器105是过滤器容器。“过滤器容器105”表示可以容纳化验标本，并且在其中布置有一个或多个过滤器150。过滤器容器105优选包括具有惰性材料和多个微孔的过滤器150。在优选优选实施例中，多个过滤器容器105布置在单个的单元中，例如板106。在下文中，容器105可能指过滤器容器105，但在另一实施例中，容器105可以是另一类型的容器，例如底部表面具有不均匀表面形貌表面形貌的容器，如上面所讨论的。
布置在免疫学系统100中的可选保温器110的形状和大小使得过滤容器105可以布置在其中。尽管可以使用许多大小和形状的保温器，但在一个优选优选实施例中，保温器110的形状和大小使得多个过滤器容器105或过滤器容器板106可以布置在其中。保温器110还可以包括可选的加热元件，当将过滤器容器105布置在保温器110中的时候可以将它们加热。
标本分离系统115的形状和大小也使得过滤器容器105可以布置在其中。尽管可以使用许多大小和形状的标本分离系统，但在一个优选优选实施例中，多个过滤器容器105和/或过滤器容器板106可以布置在其中。只作为示例而不是作为限定，标本分离系统115可以是离心分离机125、过滤系统、和/或应用电场。标本分离系统115的类型是，当过滤容器105放在标本分离系统115中，布置在过滤器容器105中的化验标本147被吸通过过滤器150，从而根据大小将化验标本分离为不同的成分。在可选的实施例中，标本分离系统115可以是离心分离机125，离心分离机的处理会使得化验标本147中的任何反应成分，例如RBCs，在容器的底面上均匀地扩散，从而使得它们可以用可选的洗涤器140进行洗涤，并用图像获取系统130进行分析，而不会产生RBC凝聚。
只作为示例而不是作为限定，可选的图像获取系统130可以是相机、流动血细胞计数器、毛细血细胞计数器、特殊的镜头例如显微镜、或者甚至是人的眼睛。通常地，当化验标本从标本分离系统115移出之后，用图像获取系统130对其进行分析。图像获取系统130也可以分析过滤器容器105，从而确定是否存在布置在容器中的过滤器105上的材料。
图像获取系统130，特别是在采用流动血细胞计数器或者毛细血细胞计数器的时候，也可以用来确定过滤过滤器150上材料的尺寸和反应状态。例如，图像获取系统130可以确定材料的形式是单独的抗原载体还是聚集的抗原载体，以及确定荧光标记抗体是否结合了在过滤器150上的抗原载体，或者如果没有过滤器150的情况下，是否结合了容器中的抗原载体。
在系统中使用的可选机器人吸移管管理器135采用通常是熟悉本领域的人员已知并使用的类型。作为示例而不是作为限定，根据一个实施例可以使用的机器人吸移管管理器系统可以是Tomtec，Inc.（Hamden，Connecticut，U.S.A）或者CRS Robotics Corporation（Burlington，Ontario，Canada）制造或商业上可用的。
可选洗涤器140布置在机器人吸移管管理器135的机器人臂从图像获取系统130可以达到的距离范围内。洗涤器140的形状和大小使得过滤器容器105、多个过滤器容器105和/或过滤器容器板106可以布置在其中。设计洗涤器140设计为可以从化验混合物中存在的抗原载体上洗去所有试剂，并且通过过滤器容器105的过滤器150。或者，离心分离后当例如RBCs的抗原载体均匀地分散在过滤器容器105的底部上的时候，洗涤器140可以用来吸出或移去覆盖在RBC层上的流体，随后用移液或者其它方式分散更多的流体在RBCs上。这些包括洗涤的步骤可以多次重复。而且洗涤器140可以是多种构造，洗涤器140可以是真空或者移液系统。
图2绘出了组成图1中免疫学系统100的一个示例性过滤器容器105。图2（a）表示在放入离心分离机125进行标本分离之前，位于板构造106中并包含分析标本147的多个过滤器容器105，，图2（b）表示从离心分离机125移出之后的多个过滤器容器105。如图2所示，布置在过滤器容器105中的是过滤器150。注意在离心分离之后，抗体载体155均匀地分布在过滤容器105中的过滤器150的底部上。
过滤器150的微孔大小可以根据不同的实施例而改变。例如，过滤器150的微孔大小的范围可以从大约0.01微米（μm）到大约50μm。过滤器150的微孔大小依赖于过滤器容器105的应用情况。如果希望使用过滤器150而使例如RBC保持聚集，同时使得独立的红血球可以通过过滤器150的微孔，在该应用的一个实施例中，微孔大小的范围在大约3μm到大约40μm之间。然而，如果在使用过滤器150保持抗原载体的地方，过滤器容器只是用来将流体从抗原载体（例如RBCs、WBCs、血小板、或者合成小球）中过滤出来，但是可以让包含抗体的流体从其中通过，则在优选优选实施例中微孔大小的范围从大约0.1μm到大约3μm。更特别的，微孔大小的范围从大约0.2μm到大约1.2μm。这种方法的最佳微孔尺寸是0.45μm。
当过滤器150包含很小的微孔大小时，例如从大约0.2μm到大约1.2μm，过滤器可能无法均匀有效地将流体从抗原载体中过滤出来。这种情况下，过滤器150可以作为不规则表面形貌表面形貌的不均匀表面，使得当过滤器容器105放在标本分离系统115中，例如离心分离机125中的时候，化验标本中的反应成分均匀扩散在过滤器容器底面上。在离心分离之后，将RBCs或者其它抗原载体均匀分散在过滤器容器的底部上，减少了抗原载体的聚集或凝聚，使得图像获取系统130分析是否存在试验标本相互反应更加方便和更加精确，特别如果图像获取系统130是流动血细胞计数器或者毛细血细胞计数器的时候。
在过滤器容器105的不同实施例中，过滤器的厚度也可以根据过滤器150的应用而变化。例如，过滤器150的厚度范围可以从大约3μm到大约5mm。在优选实施例中，过滤器150在大约3μm到大约100μm之间。最优的，过滤器150的厚度在大约10μm到75μm之间。
如上所述的，在过滤器容器105的不同实施例中，过滤器可以使用不同类型的材料制造。在优选实施例中，过滤器150包括惰性材料和多个微孔。过滤器150的惰性材料可以根据过滤器150的使用而变化。
举例来说，如果过滤器150的功能是使离心分离之后的反应成分在过滤器150的表面上均匀扩散开，作为示例而不是作为限定，过滤器150的惰性材料可以是聚丙烯、尼龙、硝酸纤维素和聚偏氟乙烯材料。优选的，过滤器由下述材料中的一种制成：具有0.45μm大小微孔的聚丙烯（由Whatman plc of Kent，U.K.制造并在商业上可用的
Figure BDA0000391129450000121
）；具有0.45μm大小微孔的硝酸纤维素（由Whatman plc制造并在商业上可用的
Figure BDA0000391129450000122
）；具有0.45μm大小微孔的尼龙6，6（由Nalge Nunc International of Rochester，New York，USA制造并在商业上可用的Silent ScreenTM）；具有1.2μm大小微孔的尼龙6，6（由Nalge Nunc International制造并在商业上可用的Silent ScreenTM）；具有0.2μm大小微孔的薄膜（由Nalge Nunc International of Rochester，New York，USA制造并在商业上可用）；具有1.0μm大小微孔的聚偏氟乙烯（PVDF）（由Millipore Inc.of Bedford，Massachusetts，USA制造并在商业上可用的
Figure BDA0000391129450000123
）；具有1.2μm大小微孔的PVDF（由Millipore Inc.制造并在商业上可用）；具有0.2μm大小微孔的PVDF（由Corning Life Sciences of Acton，Massachusetts，USA制造并在商业上可用）；以及具有0.25μm大小微孔的PVDF（由Corning LifeSciences制造并在商业上可用）。在一个实施例中，发现具有0.45μm大小微孔的聚丙烯作为最佳的过滤器材料150。
图3示出了图2绘出容器105的可选的实施例容器106。容器106可以代替免疫学系统系统100中的容器105。容器106可以包括带有上述不均匀表面形貌表面形貌的底部，或者上述任何的过滤器材料。不均匀的表面形貌表面形貌或过滤器材料有助于在如下所述的离心分离之后，在容器106的底面上均匀地扩撒抗原载体155。
图4绘出了离心分离器125，它是标本分离系统115的一种，是免疫学系统系统100的组成部分。应当理解，任何已为本领域的人员所熟知和使用的离心分离系统都可以用作离心分离机125。例如，由Beckman Coulter，Inc.（Fullerton，California，U.S.A）制造并且商业上可用的典型离心分离机，可以根据一个实施例使用，只要该离心分离机改为固持着过滤器容器105和/或过滤器板106。图4中所示的离心分离机125示出了在优选优选实施例中使用的离心分离的角度。尽管可以使用许多角度，在优选优选实施例中过滤器容器105放在“摇摆桶转子(swinging bucket rotor)”中，当离心分离机静止时，从相对于旋转轴1750°的角度开始，在离心分离过程中移动到90°的角度，并在离心分离结束的时候返回到0°的角度。
在免疫学系统系统100的一个实施例中，过滤器容器105、标本、以及过滤器150的定位使得标本分离系统115能够让标本接触到过滤器150，并使得标本中小于过滤器150标称微孔大小的成分通过过滤器，进入过滤器150下面的收集池中，从而与标本中尺寸太大而无法通过过滤器微孔并保留在过滤器150上面的过滤器容器105中的成分相分离开。
在免疫学系统系统100的一个实施例中，容器105可以包括带有上述不均匀表面形貌表面形貌的底部，或者上述任何的过滤器材料。不均匀的表面形貌表面形貌或过滤器材料有助在容器105的底面上均匀地扩撒抗原载体155。不均匀表面形貌或者过滤器材料防止抗原载体155在离心分离的过程中只迁移到容器105的某一部分或边部。如果抗原载体155在离心分离的过程中只迁移到容器105的一个部分，则抗原载体155就会凝聚为大块而难以扩散开，从而无法通过图像获取系统130准确地读取。因此，容器105改善了可以从图像获取系统130获得的结果，特别当图像获取系统130是流动血细胞计数器或者毛细血细胞计数器的时候。
另一个实施例包括免疫学化验方法。通常，该方法包括将稀释的免疫血液学标本与稀释的试剂混合从而形成标本混合物，通过流动血细胞计数器分析标本混合物，并确定免疫血液学标本中是否存在预定的成分。例如该方法可以用于下面类型的化验中。
ABO/D正向测定（ABO/D Forward Typing）
公开方法的一个实施例主要是使用无标记的老鼠抗体，随后检测其存在要使用商业上可用的荧光标记的辅助的抗体直接接触老鼠免疫球蛋白M（IgM）。
为了使这种技术可用于使用流动血细胞计数器的血型测定，可以采用下面的方法。主要的IgM抗体被稀释到不再存在RBC凝聚，或者只在很小的范围存在，随后混合BBCs和抗体，接下来洗去RBCs。尽管可以使用许多可能的稀释，但大约1：500到1：1000的稀释会获得最佳的结果。这种方法减少了与正向测定相关的试剂成本。直到这种方法公开为止，通常在本领域中都认为高的抗体滴度对于灵敏血型测定是必须的。然而有了现在这种方法，重要的试验数据表示，由于可用流动血细胞计数器进行灵敏检测，灵敏血型测定可以使用上述的稀释抗体进行。例如，在表1中示出了代表性数据，其中使用了不同稀释度的抗－A抗体（1：50到1：1000）为O组RBCs（不具有A抗原）或者A组RBCs（具有A抗原）染色。通过流动血细胞计数器取得了RBCs的荧光信号，并计算出平均的荧光度。注意因为O组RBCs没有A抗原，因而其荧光度很低，。值得注意的是即使当抗－A抗体稀释到1：1000的时候，A组RBCs的平均荧光度（19.5）仍然显著大于O组RBCs（4.11）。因此，当使用流动血细胞计数器检测抗体－RBC相互作用的时候，通常用于免疫血液学测试的抗体可以被稀释到的浓度相对于通常在本领域中认定的可能浓度要低很多。
表1：即使是在很低的抗体浓度下，表明用于检测抗体－抗原相互反应的流动血细胞计数器的灵敏性的代表性数据
理想的辅助抗体也是在适合的稀释度下使用。所使用的抗体滴度过高常常会产生凝聚。尽管可以使用许多可能的稀释，但大约1：100的稀释会获得最佳的结果。同样，这种方法也减少了与正向测定相关的试剂成本。尽管IgM分子通常难以直接结合荧光标签，但是准备标记的IgM抗体就不再需要使用辅助的抗体，因此减少了凝聚。另外，在用流动血细胞计数器检测细胞上抗体的标准使用中，大多抗体必须与细胞保温在4℃。因此，出乎意料的，可以在室温下在大约1：100的稀释度中有效地进行辅助抗体的保温。
最后，即使使用如上所述的适合的抗体稀释度，如果细胞在典型试管中靠离心分离进行洗涤，则因为所有细胞都聚在一起形成紧密的单个粒，可以靠抗体而交联，从而仍然会有些凝聚产生。这个凝聚水平对于流动血细胞计数器太大了。因此，除了使用上述的主要和辅助抗体的适合的稀释度，还可以采用洗涤处理从而不让RBC凝聚。已知有两种这样的处理：（1）快速自动流动血细胞计数器测试（RAFT）技术，其采用真空过滤，将细胞在过滤器上扩散开，使它们彼此靠得不够紧密从而不会有效交联。这种技术在美国临时专利申请60/179,248，美国专利申请09/773,826，以及专利合作条约专利申请PCT/US01/03206中都有叙述，所有这些都在本文中结合作为参考；以及（2）不使用真空过滤，而是在低速进行离心分离的微量滴定过滤板，如本文中下面叙述的。
如上所述，常规的化验方法通常需要设立三个分开的试管/反应来检测RBCs上是否存在A、B、和Rh（D）抗原。然而，通过利用已公开的方法和装置来使用流动血细胞计数器，所有三个抗原可以同时在单个的试管中检测。可以以多种方式进行这类的多路技术。
在一个实施例中，抗－A、抗－B和抗－Rh（D）抗体每个都可以单独地直接地标记为不同的荧光指示器分子。例如，通过使用商业可用的工具将人类IgG抗－Rh（D）抗体直接用荧光异硫氰酸盐（FITC）标记，便可以将其用于这种应用。在可选实施例中，如果IgM抗体使源于不同的种类（例如，人类IgM抗－A和老鼠IgM抗－B），随后可以使用不同的辅助抗体（包括不同的荧光标签）在它们之间进行区分（例如山羊的抗－人类IgM和山羊的抗－老鼠IgM）。
ABO逆向测定（ABO Back Typing）
与正向测定相反，不可能控制主要抗体的力量，因为它会根据患者的不同而改变。因此，在洗涤过程中使用适合的方法会避免RBC凝聚。如上所述，这种方法使用了美国专利申请09/773,826，以及专利合作条约专利申请PCT/US01/03206中的技术，或者本文下面所述的技术。如同正向测定一样，适当确定辅助抗体的滴度，从而限制凝聚。下面在表2中详细示出了这种ABO后退血型测定方法的示例。
表2：示例性流动血细胞计数器ABO/Rh（D）测试规程
Figure BDA0000391129450000171
意外RBC同种抗体的筛选
对意外RBC同种抗体进行筛选的已公开化验方法与上述用于逆向测定类似。例如，公开的化验可以根据上面表2中的示例进行。
而另一实施例包括免疫学化验方法180，如图5中的流程图所示。免疫学化验方法180包括的可选步骤有，如程序块185中看到的，将免疫学化验标本放在过滤容器105或容器106中。如程序块190中所示，下一步包括将化验试剂加到过滤器容器105或106中。下一个可选步骤，如程序块195中所示，是混合带有试剂的标本，从而形成标本混合物200。如程序块205所示，该方法包括的可选步骤是保温标本混合物200。
在保温步骤中，如程序块205所示，标本混合物200可以保温的温度范围是从大约4℃到大约37℃。在优选实施例中，标本混合物200保温的温度范围是在大约室温（20－25℃）和大约37℃之间。标本混合物200保温的时间范围可以从无保温到大约30分钟保温时间。在优选实施例中，保温时间的范围是大约2到大约5分钟。
在可选的保温之后，下一个可选步骤，如程序块210所绘，是将标本混合物200分离成为不同的成分。完成这个步骤通常是将包含标本混合物200的过滤器容器105和/或板106放置在标本分离系统115中。如果在程序块210的分析步骤中使用的标本分离系统115是离心分离机125，则优选离心分离速度比率是从大约100到大约1,000X重力加速度（g），尽管也可以使用其它的速度。在优选实施例中，离心分离的最大速度范围从大约250g到400g。离心分离的时间范围从大约5秒到大约5分钟。尽管也可以使用其它的时间，在优选实施例中，离心分离的最大时间是大约1分钟。
在标本离心分离之后，RBCs或其它抗原载体均匀地分散在容器底部上，过量的流体会包含没有与抗原载体反应的剩余的抗体或其它试剂。浮在表层的流体可以从容器105/106中可选进行移除，如程序块212中所示。作为示例而不是作为限定，可以通过移液，例如机器人移液，或者简单的倒出未反应的成分而完成移除。
如果浮在表层的流体被移除，保持在过滤器容器底部的抗原载体可选地可以被洗涤。完成这种洗涤处理可以靠增加缓冲溶液到抗原载体，如程序块213所示。作为示例但不是限定，缓冲溶液可以是盐水，例如0.9％氯化钠（NaCl）溶液；磷酸盐缓冲盐水；或者是在化验方法过程中可以保存细胞成分生命力的任何生理盐溶液。在优选实施例中使用了0.9％（w/v）NaCl溶液，pH7.4。缓冲液通过移液或其他方式加入。
在加入缓冲溶液之后，可选地，缓冲溶液会与抗原载体一起保温，如程序块205所示，随后可选的，如程序块210所示，从浮在表层的流体中分离出抗原载体，以及可选的，如程序块212所示，移除浮在表层的流体。这种处理可以重复一次到大约十次，直到充分洗涤标本混合物200可以应用。
洗涤步骤可以包括的步骤是，提供生理盐溶液，以及在标本混合物200中加入大约10毫升到大约5毫升的生理盐溶液。随后可选的洗涤步骤包含在程序块205、210、212和213中，标本可以与增加的试剂反应，例如其它的抗体，进行程序块190所示的步骤。可以按照图中箭头所示的顺序重复该步骤任意次数，但是优选在一次和五次之间。
如程序块215所示，在可选的分离步骤210、可选的流体移除步骤212、以及可选的洗涤步骤213之后，过滤器105和/或板106可以进行分析以确定标本200中是否存在反应。将过滤器105和/或板106放在图像获取系统130中，分析标本200。如果在分析步骤中，靠图像获取系统130在过滤器150上的材料中检测到化验标本和试剂之间的相互作用，如程序块215中所示，便完成了免疫学化验方法180。根据是否发生了反应，例如化验标本中的细胞成分和抗体试剂之间是否具有相互作用，来确定化验结果。
细胞成分以抗体凝聚或者在一起结块的形式，来表明发生了相互作用。可通过图像获取系统130检测这种凝结。同样，通过用图像获取系统130检测细胞试剂和抗体成分是否存在凝聚，该化验方法可以用来检测化验标本中的抗体成分和细胞试剂之间的相互作用。或者，在这些化验中使用的抗体可以结合荧光染料或其它的标记。这样，标记的抗体和抗原载体之间的相互作用可以作为抗原载体的荧光标记用流动血细胞计数器或者毛细血细胞计数器检测。在这个实施例中，优选的是使得RBCs或其它抗原载体的任何凝聚最小化。
应当强调的是，上述的公开化验系统和方法的实施例，只是实施的可能示例，在这里只是为了清楚理解所公开的原理而进行阐明。根据上述实施例可以在实际上不背离本发明的精髓和原理的情况下作出许多变化和改变。所有这样的改变和变化都包含在后面权利要求所公开和保护的范围之内。

Claims (31)

1.一种免疫学化验系统，包括：
可以容纳化验标本和试剂的容器，
其中该容器包括带有不均匀表面的底部，其中所述不均匀表面由过滤器或所述容器的底部表面的表面形貌特征所提供，其中所述过滤器包括惰性材料并且被构造成使得在离心分离的过程中反应成分分布在不均匀底部表面上同时显著地防止反应成分通过过滤材料，并且其中所述标本和试剂混合物包含红血球和抗体；
紧密靠近保温器的标本分离系统；
其中所述标本分离系统包括离心分离机，所述离心分离机被设计成用来将所述化验标本和所述试剂分离成不同的成分；
紧密靠近所述容器的图像获取系统；
其中所述图像获取系统被设计成检测所述试剂和所述化验标本中的成分之间是否存在相互作用，其中所述相互作用通过凝聚来证实；其中所述图像获取系统由流动细胞计数器或毛细细胞计数器组成，并且其中所述图像获取系统紧密靠近标本分离系统。
2.如权利要求1所述的免疫学化验系统，还包括可以在其中放置所述容器的保温器，其中在所述化验标本和所述试剂反应的同时所述保温器容纳着所述容器。
3.如权利要求1所述的免疫学化验系统，还包括机器人吸移管管理器，其包括机器人臂，其距离范围可到达所述容器、保温器、标本分离系统和图像获取系统，其中机器人吸移管管理器被设计用来在所述容器、保温器、标本分离系统和图像获取系统之间输送化验标本或试剂。
4.如权利要求1所述的系统，其中所述过滤器包含选自聚丙烯、尼龙、硝酸纤维素和聚偏氟乙烯中的材料。
5.如权利要求1所述的系统，其中所述过滤材料具有0.2μm至1.2μm的孔尺寸。
6.如权利要求1所述的系统，所述过滤器包含选自如下材料的材料：具有0.45微米（μm）大小微孔的聚丙烯；具有0.45μm大小微孔的硝酸纤维素；具有0.45μm大小微孔的尼龙6,6；具有1.2μm大小微孔的尼龙6,6；具有0.2μm大小微孔的HPVM薄膜；具有1.0μm大小微孔的聚偏氟乙烯（PVDF）；具有1.2μm大小微孔的PVDF；具有0.2μm大小微孔的PVDF；以及具有0.25μm大小微孔的PVDF。
7.一种免疫学化验系统，包括：
反应容器,该反应容器包括带有不均匀表面的底部，其中所述不均匀表面由过滤器或所述容器的底部表面的表面形貌特征所提供，其中所述过滤器包括惰性材料并且被构造成使得在离心分离的过程中反应成分分布在不均匀底部表面上同时显著地防止反应成分通过过滤材料；
可以在其中放置所述容器的保温器，其中在所述化验标本和试剂反应的同时所述保温器容纳着所述容器；
稀释浓度的免疫血液学标本；
稀释浓度的试剂；以及
图像获取装置，其中所述图像获取装置由流动细胞计数器或毛细细胞计数器组成，其中所述细胞计数器被设计成检测试剂和化验标本中的成分之间是否存在相互作用，其中所述相互作用通过凝聚来证实；以及
离心分离系统，其形状和尺寸被构造成允许反应容器布置在其内。
8.如权利要求7所述的系统，其中所述免疫血液学标本包括红血球、抗原和同种抗体中的至少一种。
9.如权利要求7所述的系统，其中所述试剂包括抗体和患者血浆中的至少一种。
10.如权利要求7所述的系统，其中系统检测A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少一种。
11.如权利要求7所述的系统，其中系统检测A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少两种。
12.如权利要求7所述的系统，其中系统检测A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少三种。
13.一种免疫学化验方法，包括：
提供容器，该容器的底部具有不均匀表面，其中所述不均匀表面由过滤器或所述容器的底部表面的表面形貌特征所提供，其中所述过滤器包括惰性材料并且被构造成使得在离心分离的过程中反应成分分布在不均匀底部表面上，并且显著地防止相互作用的成分通过过滤材料；
使免疫学标本和试剂的混合物在所述容器中反应，其中所述标本和试剂混合物包含红血球和抗体；
离心分离所述容器中的标本和试剂的混合物，其中所述不均匀表面导致标本中相互作用的成分在离心分离的过程中均匀地分散在所述容器的底部表面上，而没有迁移到所述容器内的单个区域；以及
分析所述容器中位于底部表面上的反应成分以确定在标本和试剂成分之间是否存在相互作用，其中所述相互作用通过凝聚来证实，并且其中通过流动细胞计数器或毛细细胞计数器来分析所述相互作用。
14.如权利要求13所述的方法，其中所述离心分离包括在大约1,000g的最大速率下进行的离心分离。
15.如权利要求13所述的方法，其中所述离心分离包括在大约250g到400g的速率下进行的离心分离。
16.如权利要求13所述的方法，还包括从容器中分离出标本和试剂混合物中任何没有反应的部分。
17.如权利要求13所述的方法，还包括对标本和试剂的混合物进行温育。
18.如权利要求13所述的方法，其中标本和试剂的混合物包括红血球和抗体。
19.如权利要求13所述的方法，其中所述过滤器包括多个微孔。
20.如权利要求19所述的方法，其中过滤器包括的材料选自有以下材料组成的组：具有0.45微米（μm）大小微孔的聚丙烯；具有0.45μm大小微孔的硝酸纤维素；具有0.45μm大小微孔的尼龙6,6；具有1.2μm大小微孔的尼龙6,6；具有0.2μm大小微孔的HPVM薄膜；具有1.0μm大小微孔的聚偏氟乙烯（PVDF）；具有1.2μm大小微孔的PVDF；具有0.2μm大小微孔的PVDF；以及具有0.25μm大小微孔的PVDF。
21.如权利要求13所述的方法，其中过滤材料具有0.2μm至1.2μm的孔尺寸。
22.如权利要求13所述的方法，其中进行离心分离的最大时间是大约1分钟。
23.一种免疫学化验方法，包括：
将稀释的免疫血液学标本与稀释的试剂进行混合，从而在具有不均匀底部表面的容器中形成标本混合物，其中该容器的不均匀底部表面包括过滤材料，所述过滤材料具有与容器底部紧密邻接的底部表面和不均匀的顶面，该顶面被构造成使得在离心分离的过程中反应成分分布在不均匀底部表面上，并且其中所述过滤材料显著地防止相互作用的成分通过所述过滤材料；
通过流动细胞计数器分析标本混合物；以及
通过使用流动细胞计数器确定是否存在凝聚来确定在免疫血液学标本中是否存在预定的成分；以及
通过低速的离心作用在所述过滤材料的顶面上扩散标本混合物，从而有利于反应成分之间发生相互作用，同时显著地防止反应成分通过所述过滤材料。
24.如权利要求23所述的方法，其中免疫血液学标本包含红血球、抗原和同种抗体中的至少一种。
25.如权利要求23所述的方法，其中试剂包含抗体和患者血浆中的至少一种。
26.如权利要求23所述的方法，其中预定的成分是A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少一种。
27.如权利要求23所述的方法，其中预定的成分是A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少两种。
28.如权利要求23所述的方法，其中预定的成分是A-抗原、B-抗原、Rh（D）-抗原、Kell抗原、Duffy抗原、抗体和同种抗体中的至少三种。
29.如权利要求23所述的方法，还包括：
通过真空过滤器将标本混合物扩散在反应容器的底面上。
30.一种免疫学化验系统，包括：
可以容纳化验标本和试剂的容器，
其中该容器包括带有不均匀表面的底部，其中所述不均匀表面包括与容器底部紧密邻接的过滤材料，所述过滤材料被构造成显著地防止反应成分通过所述过滤材料并且导致化验标本中的反应成分分散在所述过滤材料的不均匀表面的顶面上；
紧密靠近所述容器的图像获取系统；
其中所述图像获取系统被设计成检测在过滤器上试剂和化验标本中的成分之间是否存在相互作用，其中所述相互作用通过凝聚来证实，
其中所述图像获取系统由流动细胞计数器或毛细细胞计数器组成，并且其中所述图像获取系统紧密靠近标本分离系统；以及
可以在其中放置所述容器的保温器，其中在化验标本和试剂反应的同时保温器容纳着所述容器。
31.一种免疫学化验系统，包括：
可以容纳化验标本和试剂的容器，
其中该容器包括带有不均匀表面的底部，其中所述不均匀表面包括单片过滤材料，所述过滤材料具有顶面与所述容器的底部紧密邻接的底部表面，所述顶面被构造成使得化验标本中的反应成分在所述过滤材料的顶面上分散，同时显著地防止反应成分通过所述过滤材料，所述过滤材料包括孔尺寸为约0.2μm至约1.2μm的多个孔；
紧密靠近所述容器的图像获取系统；
其中所述图像获取系统被设计成检测试剂和化验标本中的成分之间是否存在相互作用，其中所述相互作用通过凝聚来证实，并且其中所述图像获取系统由流动细胞计数器或毛细细胞计数器组成。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016188132A1 (en) * 2015-05-26 2016-12-01 Yantai Zestern Biotechnique Co., Ltd Multi-unit plate for immunoblot analysis

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2398748C (en) * 2000-01-31 2010-09-14 Emory University Immunological assay system and method
WO2009090991A1 (ja) * 2008-01-15 2009-07-23 Kyowa Medex Co., Ltd. 遠心分離装置及び該装置を用いる測定用サンプルの調製方法
AU2009350538B2 (en) * 2009-07-27 2014-09-18 Axis Ip Holding Pte Ltd An apparatus and method for particle analysis
JP5216051B2 (ja) * 2010-06-23 2013-06-19 株式会社日立ハイテクノロジーズ 自動分析装置および自動分析方法
JP5707601B2 (ja) * 2011-03-28 2015-04-30 日本光電工業株式会社 細胞培養装置
EP2817606B1 (en) 2012-02-24 2021-06-02 Instrunor AS Instrument for pretreating cell samples
EP3314224A4 (en) 2015-06-26 2019-05-15 Abbott Laboratories MOVABLE REACTION VESSEL FOR MOVING REACTION VESSES FROM A PROCESSING RAIL TO A ROTATING DEVICE IN A DIAGNOSTIC ANALYZER
US10379130B2 (en) 2015-06-26 2019-08-13 Abbott Laboratories Reaction vessel exchanger device for a diagnostic analyzer

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5578269A (en) * 1993-06-11 1996-11-26 Ortho Diagnostic Systems Inc. Automated blood analysis system with an integral centrifuge
US5968731A (en) * 1996-12-10 1999-10-19 The Regents Of The University Of California Apparatus for automated testing of biological specimens
US6008040A (en) * 1995-07-07 1999-12-28 Synosys, Inc. Procedures for efficient separation of cells, cellular materials and proteins
CN2395278Y (zh) * 1999-11-04 2000-09-06 桂林市医疗电子仪器厂 尿分析仪的转盘式送检自动卸载装置
WO2002004921A2 (en) * 2000-07-07 2002-01-17 Coulter International Corp. Apparatus and method for biological sample preparation and analysis

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS561352A (en) * 1979-06-20 1981-01-09 Olympus Optical Co Ltd Container for corpuscular cohesion judgement
FR2577321B1 (fr) * 1985-02-08 1989-04-28 Lapierre Yves Dispositif et procede de mise en evidence d'agglutinats erythrocytaires
JPH087215B2 (ja) * 1987-08-24 1996-01-29 シュティフツング・フュア・ディアグノスティッシュ・フォルシュンク 抗原および／又は抗体の検出方法および検出用の試験キット
JP2731613B2 (ja) * 1989-12-12 1998-03-25 株式会社クラレ 酵素免疫測定用カートリツジ、それを用いた測定方法及び測定装置
SE9002579D0 (sv) * 1990-08-07 1990-08-07 Pharmacia Ab Method and apparatus for carrying out biochemical reactions
GR1002306B (el) * 1990-11-09 1996-05-08 Ortho Diagnostic Systems Inc. Αναλυση και διαταξη συγκολλησεως στηλης.
JPH04337446A (ja) * 1991-05-15 1992-11-25 Hitachi Ltd 微粒子計測方法、定量方法および微粒子計測装置
US5575978A (en) * 1992-03-27 1996-11-19 Abbott Laboratories Sample container segment assembly
US5603899A (en) * 1995-04-12 1997-02-18 Pharmacia Biotech, Inc. Multiple column chromatography assembly
US5776711A (en) * 1996-11-12 1998-07-07 The Regents Of The University Of California Simultaneous human ABO and RH(D) blood typing or antibody screening by flow cytometry
US5872860A (en) * 1997-03-13 1999-02-16 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Calibration cassette for use in calibrating an automated agglutination reaction analyzing system
CA2398748C (en) 2000-01-31 2010-09-14 Emory University Immunological assay system and method
DE60124705T2 (de) * 2000-04-28 2007-09-13 Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc. Automatische messpatrone und dazu gehoerendes messverfahren

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5578269A (en) * 1993-06-11 1996-11-26 Ortho Diagnostic Systems Inc. Automated blood analysis system with an integral centrifuge
US6008040A (en) * 1995-07-07 1999-12-28 Synosys, Inc. Procedures for efficient separation of cells, cellular materials and proteins
US5968731A (en) * 1996-12-10 1999-10-19 The Regents Of The University Of California Apparatus for automated testing of biological specimens
CN2395278Y (zh) * 1999-11-04 2000-09-06 桂林市医疗电子仪器厂 尿分析仪的转盘式送检自动卸载装置
WO2002004921A2 (en) * 2000-07-07 2002-01-17 Coulter International Corp. Apparatus and method for biological sample preparation and analysis

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016188132A1 (en) * 2015-05-26 2016-12-01 Yantai Zestern Biotechnique Co., Ltd Multi-unit plate for immunoblot analysis

Also Published As

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