CN103598143A - 小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型。装置由螺丝套件和近视头架两部分组成。螺丝套件包括螺杆、垫片及螺帽,缝合于小鼠头顶部作为第一支点固定近视头架。近视头架具可塑性,由腰孔,连接杆,镜架及鼻托四部分组成。腰孔用于与螺杆固定及前后距离微调;镜架用于固定镜片,可根据小鼠眼球位置调整;鼻托固定于鼻部,作为第二支点加固近视头架;连接杆连接上述三部分。本发明与现有技术相比,手术创伤小;整体性能强,稳定、安全可靠;非接触性设计,不影响小鼠生理习性,且利于反复操作及测量;装置材料易获取,成本低。
Description
技术领域
本发明涉及近视研究领域中小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型。
背景技术
近视动物模型是近视研究的重要组成部分,对探讨近视发病机理和寻求防治措施起到至关重要的作用。自上世纪70年代初小鸡近视眼模型的建立,目前已有多种模式生物建立了近视模型,包括恒河猴、豚鼠、小鼠、斑马鱼等。这其中小鼠因其遗传背景清晰,且建立了一系列成熟的基因敲除及转基因模型,近10年来已成为国内外普遍采用的造模对象。
小鼠近视的诱导方法主要有形觉剥夺法(Form deprivation myopia, FDM)和离焦镜片诱导法(Lens induced myopia, LIM)。形觉剥夺法应用比较广泛,具体操作方法又包括了眼睑缝合法、半透明膜法、塑料眼罩法、项圈+眼罩法以及头架+眼罩法;离焦镜片诱导法报道相对少,包括单纯眼罩法、项圈+眼罩法及屈光手术等。各种方法的特点简介如下:
眼睑缝合法是Tejedor, J首创的经典方法,操作简单,但易被小鼠破坏,存在感染风险,且压迫眼球可能影响其健康,有逐渐被淘汰的趋势;半透明膜法由国内复旦大学研究组设计,类似于弥散镜片,将半透明膜固定于眼周,操作简单,同样容易被小鼠破坏;塑料眼罩法温州医学院发明,将特制的塑料眼罩缝合固定于小鼠的诱导眼一侧,操作简单,但稳定性可能不高;项圈+眼罩法由Schaeffel F首创,是目前应用比较多的方法,项圈可减少小鼠对眼罩的破坏,但容易影响其进食饮水及精神状态,且限制生理性“洗脸”清洁动作;单纯眼罩法最先由Barathi V A报道,可将诱导镜片的圆形底座先固定在眼周,再将镜片固定在底座上,置于眼前,操作简单,但易被破坏;屈光手术法理论可行,尚未见相关的研究论文报道。
头架+眼罩法由Faulkner A E 首创,充分利用了颅骨与眼球位置相对固定的特点,是目前小鼠近视模型研究领域比较成功的制作方法。该制作方法需暴露小鼠局部颅骨,刮除骨膜,通过骨钉、丙烯酸树脂头座等装置将遮眼镜框置于小鼠的诱导眼前,可进行遮眼镜框的前后距离调整,并配有对侧平衡杆以稳定装置。头架+眼罩法实现了模型制作时不直接接触小鼠眼球或眼周组织,可根据不同鼠龄调整遮眼镜框位置,能方便地对眼球进行操作和测量,利于眼部健康的维护。但该方法也存在明显的缺点:1)手术操作复杂,技术难度高,对小鼠创伤大;2)诱导装置复杂且成本高,仅能在少数有条件的实验室开展;3)头顶固定装置对局部组织的影响大,脱落后再次造模的可能性小。
总之,目前小鼠近视模型的诱导方法很多,各有利弊。相对而言,项圈能够限制小鼠的搔抓,但会显著影响正常的生活习性;头顶固定最稳定,但手术复杂且技术难度高,成本也高,目前小鼠近视模型的制作尚缺乏一种既稳定、安全、经济又微创的方法。
发明内容
本发明目的在于尽可能克服目前小鼠近视诱导方法的缺点,不安装项圈限制小鼠的正常习性,吸取头顶固定稳定性高的经验,提出一种小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型,相对稳定、安全、经济又微创。
一种小鼠近视模型的诱导装置,包括螺丝套件和近视头架两部分,所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
优选地,所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件,包括螺杆,螺帽及垫片。
优选地,所述的近视头架具有可塑性,包括腰孔、连接杆、镜架及鼻托四部分,连接杆分别与腰孔、镜架、鼻托相连;腰孔呈椭圆形,用于与螺杆固定及前后距离微调,镜架设有多个镜片托用于固定镜片,鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
一种小鼠近视模型的诱导方法,步骤如下:
1)小鼠麻醉后头颈部剃毛,垂直耳根连线作长1厘米的纵行皮肤切口;
2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心,缝合固定螺杆于周边组织,再缝合皮肤切口;
3)安装垫片,将腰孔置于垫片上,根据眼球位置调节前后距离,使眼球中心与镜架中心相对应,再用螺帽固定近视头架;
4)对鼻托进行形态微调,使之与小鼠鼻部相吻合,缝合固定鼻托;
5)利用镜片托固定镜片于镜架的一只上,并在连接杆上作标记;得到所述的小鼠近视模型。
一种利用所述的方法得到的小鼠近视模型,小鼠的诱导眼呈近视化发展,与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
本发明的有益效果在于:
1) 手术创伤较头架+眼罩法小,仅涉及皮肤及肌肉缝合;
2) 装置整体不接触眼球或眼周结构,操作安全;
3) 螺丝固定的方法方便拆卸,利于日常维护及检测;
4) 头架前后距离及镜架位置可调,适合不同日龄的小鼠造模;
5) 双支点固定,稳定可靠,无须单独饲养;
6) 不安装项圈,不影响小鼠进食进水,也不限制“洗脸”行为;
7) 装置可自行采购或制作,成本低。
附图说明
图1是本发明的螺丝套件结构示意图;
图2是本发明的近视头架结构示意图;
图3是小鼠佩戴本发明装置的正视效果图;
图4是小鼠佩戴本发明装置的右视效果图;
图中,螺杆1、螺帽2、垫片3、腰孔4,连接杆5,镜架6,鼻托7。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施方式对本发明做进一步的说明。
一种小鼠近视模型的诱导装置,包括螺丝套件(如图1所示)和近视头架(如图2所示)两部分,所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
优选地,所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件,包括螺杆1,螺帽2及垫片3。
优选地,所述的近视头架具有可塑性,包括腰孔4、连接杆5、镜架6及鼻托7四部分,连接杆5分别与腰孔4、镜架6、鼻托7相连;腰孔4呈椭圆形,用于与螺杆1固定及前后距离微调,镜架设有多个镜片托用于固定镜片,鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
一种小鼠近视模型的诱导方法(如图3、4所示),步骤如下:
1)小鼠麻醉后头颈部剃毛,垂直耳根连线作长1厘米的纵行皮肤切口;
2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心,缝合固定螺杆1于周边组织,再缝合皮肤切口;
3)安装垫片3,将腰孔4置于垫片3上,根据眼球位置调节前后距离,使眼球中心与镜架6中心相对应,再用螺帽2固定近视头架;
4)对鼻托7进行形态微调,使之与小鼠鼻部相吻合,缝合固定鼻托7;
5)利用镜片托固定镜片于镜架6的一只上,并在连接杆5上作标记;
得到所述的小鼠近视模型。
一种利用所述的方法得到的小鼠近视模型,小鼠的诱导眼呈近视化发展,与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
实施例
我们采用出生后21~24天的C57BL6小鼠作为模式动物,安装好所述诱导装置,右眼镜架安装离焦镜片作为实验眼,左眼镜架不安装镜片作为对照。诱导4周后进行验光及生物学参数测量,发现实验眼呈近视化发展,与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
Claims (5)
1.一种小鼠近视模型的诱导装置,其特征在于,它包括螺丝套件和近视头架两部分,所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
2.根据权利要求1所述的小鼠近视模型的诱导装置,其特征在于,所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件,包括螺杆(1),螺帽(2)及垫片(3)。
3.根据权利要求1或2所述的小鼠近视模型的诱导装置,其特征在于,所述的近视头架具有可塑性,包括腰孔(4)、连接杆(5)、镜架(6)及鼻托(7)四部分,连接杆(5)分别与腰孔(4)、镜架(6)、鼻托(7)相连;腰孔(4)呈椭圆形,用于与螺杆(1)固定及前后距离微调,镜架设有多个镜片托用于固定镜片,鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
4.一种小鼠近视模型的诱导方法,其特征在于,步骤如下:
1)小鼠麻醉后头颈部剃毛,垂直耳根连线作长1厘米的纵行皮肤切口;
2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心,缝合固定螺杆(1)于周边组织,再缝合皮肤切口;
3)安装垫片(3),将腰孔(4)置于垫片(3)上,根据眼球位置调节前后距离,使眼球中心与镜架(6)中心相对应,再用螺帽(2)固定近视头架;
4)对鼻托(7)进行形态微调,使之与小鼠鼻部相吻合,缝合固定鼻托(7);
5)利用镜片托固定镜片于镜架(6)的一只上,并在连接杆(5)上作标记;得到所述的小鼠近视模型。
5.一种利用权利要求4所述的方法得到的小鼠近视模型,小鼠的诱导眼呈近视化发展,与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
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