CN103571728B - 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法 - Google Patents

脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103571728B
CN103571728B CN201310358602.XA CN201310358602A CN103571728B CN 103571728 B CN103571728 B CN 103571728B CN 201310358602 A CN201310358602 A CN 201310358602A CN 103571728 B CN103571728 B CN 103571728B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
total content
zearin
lipopeptid
lipopeptide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201310358602.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN103571728A (zh
Inventor
徐岩
张�荣
吴群
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xiongbaofu Liquor Industry Co ltd
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201310358602.XA priority Critical patent/CN103571728B/zh
Publication of CN103571728A publication Critical patent/CN103571728A/zh
Priority to EP14836131.4A priority patent/EP3034599B1/en
Priority to PCT/CN2014/080702 priority patent/WO2015021823A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103571728B publication Critical patent/CN103571728B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52Adding ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52Adding ingredients
    • A23L2/56Flavouring or bittering agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/88Taste or flavour enhancing agents
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12GWINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
    • C12G3/00Preparation of other alcoholic beverages
    • C12G3/04Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs
    • C12G3/06Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs with flavouring ingredients
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02Column chromatography
    • G01N30/88Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/8813Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample biological materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Alcoholic Beverages (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明属于食品领域,涉及脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途、其制备方法、其测定方法,以及一种白酒生产工艺。具体地,本发明涉及一种改善或提高饮品香气的方法,包括使用一种或者多种有效量的脂肽类化合物的步骤。本发明还涉及一种白酒生产工艺。采用HS‑SPME研究地衣素对白酒中香气化合物的挥发性影响。确定在20-30℃、30-50min为萃取温度和萃取时间。脂肽类化合物特别是地衣素对中国五种香型白酒中香气化合物挥发性具有显著的功能作用。脂肽类化合物特别是地衣素主要对酒中的酯类、醇类、酸类和苯酚类存在着明显的影响。

Description

脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法
技术领域
本发明属于食品领域,涉及脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途、其制备方法、其测定方法,以及一种白酒生产工艺。
背景技术
食品中的基质化合物,影响着食品的香气感官与品质。香气从食品中迁移至消费者的嗅觉器官是一个受众多因素影响的过程,包括食品与香气成分之间的化学相互作用,物理学因素,消费者生理因素(咀嚼时间,效率,呼吸)等。考虑到感官感受是决定消费者喜好的重要因素,因此了解香气物质如何从食品释放并与嗅觉受体作用是食品化学研究中一个非常重要的课题。国外的经典研究,如鲜奶中的β-乳球蛋白,胶体中的β-环糊精,葡萄酒中的酚类化合物。目前对白酒特别是中国白酒中基质化合物的研究甚少。
现如今,白酒的品质主要关注于香气化合物的鉴定及定量,但光是香气化合物不能反映酒的香气感官,其中基质化合物决定影响着酒的香气品质。超高效液相色谱联用质谱技术(UPLC-MS),是现在研究大分子基质化合物的重要手段。顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱质谱(GC-MS)是现在研究大分子基质化合物对香气影响的重要手段。白酒中挥发性成分的研究较多,但对其非挥发性成分-大分子化合物的研究相对较少。
脂肽类化合物是芽孢杆菌产生的一类重要化合物,包括表面素(Surfactin)、地衣素(Lichenysin)、伊枯草菌素(Iturin)、丰原素(Fengycin)等,其具有抗菌、抗癌和消炎的重要功效。表面素现报道是一种强力的表面活性剂,可以将水的表面张力从70mN/m降低至36mN/m,临界胶束浓度为15.6mg/L。伊枯草菌素现报道是一种较强的抗生素,对真菌中的酵母和霉菌具有较强的抑制性能。其抑制性能,与表面素表现出增强抑制性能。丰原素现报道是一种抑制霉菌的抗生素,主要用于植物中的抑制致病霉菌。
然而,目前尚没有关于脂肽类化合物(例如地衣素)改善饮品特别是白酒的香气的相关报道。
发明内容
本发明人经过深入的研究和创造性的劳动,发现脂肽类化合物例如表面素(Surfactin)、地衣素(Lichenysin)、伊枯草菌素(Iturins)和丰原素(Fengycin)等,对于提升白酒的品质特别是改善香气发挥了重要作用。由此提供了下述发明:
本发明的一个方面涉及一种改善或提高饮品香气的方法,包括使用一种或者多种有效量的脂肽类化合物的步骤。具体地,脂肽类化合物的用量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
当添加到白酒中时,要考虑白酒自身中可能的地衣素含量。优选地,添加后的地衣素总的含量为500-1500μg/L,优选为600-1400μg/L、700-1300μg/L、800-1200μg/L、900-1100μg/L,特别优选为950-1050μg/L,例如1000μg/L。白酒中地衣素的含量可以采用本发明中的方法测定。
本发明的另一方面涉及一种制备脂肽类化合物的方法,其特征在于使用白酒进行分离纯化;
具体地,
将经过SPE C18小柱净化后的白酒,采用制备液相进行纯化;
更具体地,
色谱柱采用Xbridge Prep C18(250mm×19mm,10μm)反相色谱柱,210nm检测;分离采用的流动相配比为:0.1%的甲酸甲醇溶液(A),甲醇(B);一次分离程序:0-10min,40%B-25%B;10-50min,25%B-5%B;50-55min,5%B-0%B。
本发明的再一方面涉及一种测定白酒中脂肽类化合物特别是地衣素含量的方法,其为超高效液相色谱与质谱联用方法;
具体地,
超高效液相色谱参数:色谱柱采用UPLCTM BEH C18柱(100mm×2.1mm i.d.,1.7μm),柱温30℃,进样体积2μL,流速为0.3mL/min,流动相A:0.1%的甲酸甲醇溶液,B:甲醇;洗脱程序:0-0.1min,15%B;0.1-10min,0%B;10-11min,15%B;
质谱检测器(MSD)参数:正离子模式,雾化气压30psi;分离电压3.5KV,诱导碰撞电压20V,干燥气体N2,干燥温度100℃,离子扫描范围50-1500m/z。
应用Masslynx4.1软件对数据进行采集和分析。
本发明的再一方面涉及一种组合物,其含有一种或多种脂肽类化合物;可选地,所述组合物还含有药学上或者食品学上可接受的载体或者辅料;具体地,所述组合物为食品特别是饮品。具体地,脂肽类化合物的含量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
当组合物为白酒时,要考虑白酒自身中可能的地衣素含量。优选地,添加后的地衣素总的含量为500-1500μg/L,优选为600-1400μg/L、700-1300μg/L、800-1200μg/L、900-1100μg/L,特别优选为950-1050μg/L,例如1000μg/L。白酒中地衣素的含量可以采用本发明中的方法测定。
本发明的再一方面涉及脂肽类化合物在制备或生产饮品中的用途。具体地,脂肽类化合物的用量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
本发明中,当饮品为白酒时,要考虑白酒自身中可能的地衣素含量。优选地,添加后的地衣素总的含量为500-1500μg/L,优选为600-1400μg/L、700-1300μg/L、800-1200μg/L、900-1100μg/L,特别优选为950-1050μg/L,例如1000μg/L。白酒中地衣素的含量可以采用本发明中的方法测定。
本发明的再一方面涉及脂肽类化合物在改善或提高饮品香气中的用途。具体地,脂肽类化合物的用量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
本发明的再一方面涉及脂肽类化合物在提高饮品中香气化合物挥发性和/或降低异嗅化合物挥发性的用途;具体地,所述香气化合物为酯类、醇类和酸类化合物中的任意一种或者多种,所述异嗅化合物为苯酚类化合物中的任意一种或者多种。具体地,脂肽类化合物的用量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
在本发明的一个实施方案中,采用顶空固相微萃取-气质连用(HS-SPME-GC-MS)法测定脂肽类化合物对挥发性香气成分的影响;具体地,步骤如下:
20mL顶空瓶中加入8mL样品,进行顶空固相微萃取。顶空固相微萃取的条件为:三相萃取头(DVB/CAR/PDMS,50/30μm),20-30℃预热5min,萃取吸附30-50min,GC解吸5min。GC条件色谱柱:DB-Wax(60m×0.325mm×0.25μm);升温程序:50℃保持2min,以6℃/min的速率升至230℃,保持15min;进样口温度250℃,载气He,流速2mL/min;不分流。MS条件EI电离源,离子源温度230℃,电子能量70eV,扫描范围35.00-350.00amu。
本发明的再一方面涉及一种白酒生产工艺,包括使用一种或多种脂肽类化合物的步骤。具体地,脂肽类化合物的用量为大于1μg/L、大于10μg/L、大于100μg/L、1-1000μg/L、1-500μg/L、1-200μg/L、1-100μg/L、1-10μg/L、10-1000μg/L、10-500μg/L、10-200μg/L、10-100μg/L、100-1000μg/L、100-900μg/L、100-500μg/L、100-200μg/L或者200-500μg/L。
当添加到白酒中时,要考虑白酒自身中可能的地衣素含量。优选地,添加后的地衣素总的含量为500-1500μg/L,优选为600-1400μg/L、700-1300μg/L、800-1200μg/L、900-1100μg/L,特别优选为950-1050μg/L,例如1000μg/L。白酒中地衣素的含量可以采用本发明中的方法测定。
本发明中,
所述脂肽类化合物,如果没有特别说明,选自表面素(Surfactin)、地衣素(Lichenysin)、伊枯草菌素(Iturins)和丰原素(Fengycin)中的任意一种或者多种。如果没有特别说明,所述地衣素为选自如下的7种同系物即式(I)-(VII)中的任意一种或者多种:
上述式(I)-(VII)的质荷比(m/z)依次为993、1007、1021、1035、1049、1007、1021。
所述白酒风味化合物包括香气化合物和异嗅化合物,如果没有特别说明,所述香气化合物是指酯类、醇类和酸类化合物中的任意一种或者多种,所述异嗅化合物是指苯酚类化合物中的任意一种或者多种。具体地,所述的酯类、醇类和酸类化合物或者苯酚类化合物为白酒特别是中国白酒中的酯类、醇类和酸类化合物或者苯酚类化合物。
本发明中,所述食品优选为饮品;具体地所述饮品为酒类(白酒、黄酒、红酒等);更具体地,所述酒类为白酒例如中国白酒;进一步具体地,所述中国白酒为酱香型、浓香型、清香型、豉香型或药香型白酒。
发明的有益效果
本发明人采用HS-SPME研究脂肽类化合物(地衣素)对白酒中香气化合物的挥发性影响。确定在20-30℃、30-50min为萃取温度和萃取时间。脂肽类化合物特别是地衣素对中国各种香型白酒中香气化合物挥发性具有显著的功能作用。脂肽类化合物特别是地衣素主要对酒中的酯类、醇类、酸类和苯酚类存在着明显的影响。
附图说明
图1:萃取时间对白酒中香气化合物(酯类、醇类和酸类)和异嗅化合物(苯酚类)挥发性的影响。
图2:地衣素的分离收集的洗脱曲线。(每一个峰对应的是一个同系物)。
图3:地衣素(质荷比1035.6)的MS/MS图谱。
图4:地衣素(分子量1034.6)的1H核磁图谱(图4A)和13C核磁图谱(图4B)。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1:地衣素改善或提高白酒品质和香气的感官评价实验
1.实验用品
地衣素(式I-式VII混合物):可以商购或者根据现有技术中公开的文献中的记载进行制备,也可以参考下面的实施例4中的方法制备。本实施例具体使用按照实施例4制备的地衣素,其为七种同系物的混合物(七种同系物等比例混合)。
式V地衣素:商购或者参考现有技术例如如下文献制备:Yakimov,M.M.;Abraham,W.-R.;Meyer,H.;Giuliano,L.;Golyshin,P.N.,Structural characterization of lichenysin A components by fast atombombardment tandem mass spectrometry.Biochimica et BiophysicaActa1999,1438(2),273-280。
式VII地衣素:商购或者参考现有技术例如如下文献制备:Yakimov,M.M.;Abraham,W.-R.;Meyer,H.;Giuliano,L.;Golyshin,P.N.,Structural characterization of lichenysin A components by fastatom bombardment tandem mass spectrometry.Biochimica etBiophysica Acta1999,1438(2),273-280。
白酒酒样:郎酒酒样(添加之前,该酒样中地衣素本身含量100μg/L;添加到1000μg/L)。
2.实验方法
(1)将地衣素应用于酒样中,混合物地衣素、式V地衣素、式VII地衣素的添加量分别均为900μg/L(即添加到1000μg/L)。
(2)采用感官评价差异。
感官品评方法如下:
酒样品评由20位国家白酒评委在室温进行品评打分。
酒样样品稀释酒度至相同的度数(例如55度,不足55度的可以不稀释)进行品评。感官评价满分110分,从色、香、味、风格和空杯留香五个方面进行打分品评,比较酒质差异,每个方面的满分依次为10分、25分、50分、15分、10分;其中对于空杯香,倒干后放置30分钟进行打分比较强度。
3.实验结果
如下面的表1所示。
表1:添加地衣素对酒中感官评价的影响
表1中的数据显示,地衣素处理酒样,白酒综合品质得到显著改善,空杯留香得到明显增强。
实施例2:模拟体系中SPME萃取条件的优化
采用HS-SPME-GC-MS研究几种香气化合物(酯类、醇类和酸类)和异嗅化合物(苯酚类)在模拟体系中的挥发性,首先确定HS-SPME的实验方法和条件参数,如下:
20mL顶空瓶中加入8mL白酒样品,进行顶空固相微萃取。顶空固相微萃取的条件为:三相萃取头(DVB/CAR/PDMS,50/30μm),20-30℃预热5min,萃取吸附30-50min,GC解吸5min。
GC条件色谱柱:DB-Wax(60m×0.325mm×0.25μm);升温程序:50℃保持2min,以6℃/min的速率升至230℃,保持15min;进样口温度250℃,载气He,流速2mL/min;不分流。
MS条件EI电离源,离子源温度230℃,电子能量70eV,扫描范围35.00-350.00amu。
以几种香气化合物和异嗅化合物的挥发性面积为基准,确定在20-30℃、30-50min为萃取温度和萃取时间(见图1)。
实施例3:地衣素对白酒中的香气化合物的挥发性的影响
1.实验用品
地衣素(式I-式VII混合物):同实施例1。
式V地衣素:同实施例1。
式VII地衣素:同实施例1。
白酒酒样1-3:分别为郎酒酒样、浓香酒样、清香酒样。
2.实验方法
(1)将地衣素应用于酒样中,混合物地衣素、式V地衣素、式VII地衣素的添加量分别均为100μg/L。
(2)影响的评价/分析参考实施例2中的方法进行。
3.实验结果
结果如下面的表2所示(空白对照为不添加地衣素)。
表2:添加地衣素对酒中香气化合物和异嗅化合物挥发性的影响
由表2可见,地衣素主要对酒中的香气化合物如酯类、醇类、酸类,以及异嗅化合物苯酚类的挥发性存在着明显的功能作用。地衣素抑制了苯酚类的挥发,促进了酯类、醇类、酸类的挥发。其中,异嗅化合物苯酚类化合物的挥发明显降低,即地衣素有利于降低白酒中异嗅化合物的挥发量,降低量在50%-70%之间。
实施例4:白酒中脂肽类化合物(地衣素)的分离纯化
1.实验仪器和设备
白酒中脂肽类化合物的纯化采用SPE C18小柱(Waters),提取仪器为waters2767Sample Manager,Waters2489UV/visibleDetector,以及Waters 2535 Quaternary Gradient Module。
白酒中地衣素的质谱鉴定采用Waters Acquity UPLC和SynaptQ-TOF system。
2.实验方法和实验步骤
(1)白酒中脂肽类化合物的分离纯化
白酒中挥发性成分的研究较多,但对其非挥发性成分-大分子化合物的研究相对较少。酒样经过提取纯化后的样品,采用制备液相进行纯化。
酱香型白酒(郎酒)经过SPE C18小柱净化后的样品,采用制备液相进行纯化。色谱柱采用Xbridge Prep C18(250mm×19mm,10μm)反相色谱柱,210nm检测。分离采用的流动相配比为:0.1%的甲酸甲醇溶液(A),甲醇(B)。一次分离程序:0-10min,40%B-25%B;10-50min,25%B-5%B;50-55min,5%B-0%B。样品经过蒸发浓缩后得到纯品。
(2)结构验证
质谱检测器(MSD)参数:正离子模式,雾化气压30psi;分离电压3.5KV,诱导碰撞电压20V,干燥气体N2,干燥温度100℃,离子扫描范围50-1500m/z。应用Masslynx4.1软件对数据进行采集和分析。
3.实验结果
从白酒中分离提取纯化得到地衣素。还可以分离出表面素、伊枯草菌素和丰原素。
其中,地衣素产品分别得到七个同系物化合物。从图2可以看出,经过制备后,获得993.6(671.4)、1007.6(685.4,671.4)、1021.6(685.4,671.4)、1035.6(685.4)、1049.6(685.4)七个不同结构的化合物纯品。
表3中分别列举了七个纯品的分子量,母离子,主要子离子和色谱纯度。
表3:地衣素的质谱及纯度
实施例5:白酒中脂肽类化合物的质谱鉴定
为了确认该化合物的结构信息,本发明人采用质谱和核磁对其进行化合物鉴定。采用Q-TOF-MS对质荷比1035.6(685.4)的化合物进行质谱裂解分析。
1.实验仪器和设备
白酒中脂肽类化合物的质谱鉴定采用Waters Acquity UPLC andSynapt Q-TOF system。
2.实验方法和实验步骤
采用高效液相色谱联用质谱进行检测。色谱柱采用UPLCTM BEHC18柱(100mm×2.1mm i.d.,1.7μm),柱温30℃,进样体积2μL,流速为0.3mL/min。流动相A:0.1%的甲酸甲醇溶液,B:甲醇。洗脱程序:0-0.1min,15%B;0.1-10min,0%B;10-11min,15%B。质谱检测器(MSD)参数:正离子模式,雾化气压30psi;分离电压3.5KV,诱导碰撞电压20V,干燥气体N2,干燥温度100℃,离子扫描范围50-1500m/z。
3.实验结果
如图3所示。
从图3中可以看出,其地衣素氨基酸段结构与文献报道的地衣素基本吻合,氨基酸段为N’-Gln-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Ile-C’,脂肪酸段为C15脂肪酸。
其它6种同系物化合物的实验数据类似。
实施例6:白酒中脂肽类化合物的核磁鉴定
1.实验仪器和设备
核磁共振仪(Bruker AM 600)。
2.实验方法和实验步骤
采用核磁共振仪(Bruker AM 600)分析1H和13C NMR图谱,溶剂为氘代甲醇,实验温度为323K。
3.实验结果
如图4、表4-5所示。
表4:地衣素(分子量1034.6)的1H核磁图谱化学位移
表5:地衣素(分子量1034.6)的13C核磁图谱化学位移
从图4(A)的1H谱可以看出,该化合物中存在的化学位移,这些官能团正是形成环肽的重要官能团。其中,存在7个化学位移和存在1个化学位移,刚好构成7个氨基酸与1个羟基脂肪酸形成的环肽。表4的1H谱中的信息比较不全,不能完全反映化合物的结构信息。
从图4(B)的13C谱可以看出,该化合物存在着相应的 的化学位移,这些官能团也正是形成环肽的重要官能团。其中,存在7个化学位移和存在1个化学位移,刚好构成7个氨基酸与1个羟基脂肪酸形成的环肽。从核磁数据来看,该环脂肽必定由7个氨基酸与1个羟基脂肪酸形成的。表5的13C谱中的信息基本反映出化合物的结构信息。
推断地衣素(分子量1034.6)的分子式如下:
其它6种同系物的实验结果类似。
实施例7:白酒中脂肽类化合物的分子结构式的确定
经过质谱和核磁数据比对分析,确认酒中的挥发性-大分子化合物为脂肽类化合物,包括表面素、地衣素、伊枯草菌素和丰原素。
实施例8:白酒样品中地衣素的测定
1.实验仪器和设备
白酒样品中地衣素的定量方法使用Waters Acquity UPLC以及Synapt Q-TOF system。
2.实验方法和实验步骤
采用超高效液相色谱联用质谱进行检测。色谱柱采用UPLCTMBEH C18柱(100mm×2.1mm i.d.,1.7μm),柱温30℃,进样体积2μL,流速为0.3mL/min。流动相A:0.1%的甲酸甲醇溶液,B:甲醇。洗脱程序:0-0.1min,15%B;0.1-10min,0%B;10-11min,15%B。质谱检测器(MSD)参数:正离子模式,雾化气压30psi;分离电压3.5KV,诱导碰撞电压20V,干燥气体N2,干燥温度100℃,离子扫描范围50-1500m/z。
从表6中的标准曲线计算出其酒中的含量。
3.实验结果
如表6-7所示。
表6:中国白酒中地衣素的标准曲线(LC-MS/MS)
分子量 M+(m/z) MS/MS主要子离子 斜率 截距 R2 n 线性范围(μg/L)
992.6 993.6 671.4 0.155 -66.84 0.999 4 17.5-17500
1006.6 1007.6 685.4 1.392 64.6 0.999 4 65-65000
1006.6 1007.6 671.4 25.07 -157.5 0.999 3 150-15000
1020.6 1021.6 685.4 4.578 -133.3 0.999 4 47.5-47500
1020.6 1021.6 671.4 3.336 -86.18 0.999 4 35-35000
1034.6 1035.6 685.4 2.784 -582.9 0.997 5 16-160000
1048.6 1049.6 685.4 1.913 -5.37 0.999 3 75-7500
表7:几种主要香型白酒中的地衣素含量(μg/L)情况(LC-MS/MS)
分子量 M+(m/z) MS/MS主要子离子 药香 豉香 浓香 清香 酱香
1006.6 1007.6 685.4 42.42 0.74 1.84 2.62 1.64
1006.6 1007.6 671.4 929.69 12.50 64.39 36.82 128.57
1020.6 1021.6 685.4 305.97 5.01 22.50 21.49 48.27
1020.6 1021.6 671.4 143.98 2.22 8.14 7.09 11.86
1034.6 1035.6 685.4 399.75 1.60 15.72 31.69 33.68
1048.6 1049.6 685.4 16.68 0.33 1.21 0.63 0.38
1838.4 22.39 113.81 100.34 224.41
从表6可以看出,检测限基本在1μg/L以上,极大的提高了地衣素的检测灵敏度。现有的二极管阵列检测手段一般在10mg/L以上的检测浓度。
从表7中可以看出,白酒中地衣素的含量在10-1000μg/L之间,但是不同的样品之间地衣素含量差别极大。
结果还表明,本发明建立了一套高灵敏度的饮品特别是白酒中地衣素的定量测定方法(LC-MS/MS)。

Claims (31)

1.一种提高饮品香气的方法,包括使用一种或者多种有效量的脂肽类化合物的步骤;其中,所述饮品为酒类,并且所述酒类为白酒、黄酒或红酒;所述脂肽类化合物为地衣素;所述地衣素为选自如下的式(I)-(VII)中的任意一种或者多种:
2.根据权利要求1所述的方法,其中,
所述白酒为中国白酒。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述中国白酒为酱香型、浓香型、清香型、豉香型或药香型白酒。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为500-1500μg/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为600-1400μg/L。
6.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为700-1300μg/L。
7.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为800-1200μg/L。
8.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为900-1100μg/L。
9.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为950-1050μg/L。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,脂肽类化合物的总的含量为1000μg/L。
11.脂肽类化合物在提高饮品香气或者提高饮品中香气化合物挥发性和/或降低异嗅化合物挥发性的用途;其中,所述饮品为酒类,并且所述酒类为白酒、黄酒或红酒;所述脂肽类化合物为地衣素;所述地衣素为选自如下的式(I)-(VII)中的任意一种或者多种:
12.根据权利要求11所述的用途,其中,所述香气化合物为酯类、醇类和酸类化合物中的任意一种或者多种,所述异嗅化合物为苯酚类化合物中的任意一种或者多种。
13.根据权利要求11或12所述的用途,其中,
所述白酒为中国白酒。
14.根据权利要求13所述的用途,其中,所述中国白酒为酱香型、浓香型、清香型、豉香型或药香型白酒。
15.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为500-1500μg/L。
16.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为600-1400μg/L。
17.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为700-1300μg/L。
18.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为800-1200μg/L。
19.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为900-1100μg/L。
20.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为950-1050μg/L。
21.根据权利要求11或12所述的用途,其中,脂肽类化合物的总的含量为1000μg/L。
22.一种白酒生产工艺,包括使用一种或者多种脂肽类化合物提高白酒香气的步骤;其中,所述脂肽类化合物为地衣素;所述地衣素为选自如下的式(I)-(VII)中的任意一种或者多种:
23.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,
所述白酒为中国白酒。
24.根据权利要求23所述的白酒生产工艺,其中,所述中国白酒为酱香型、浓香型、清香型、豉香型或药香型白酒。
25.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为500-1500μg/L。
26.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为600-1400μg/L。
27.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为700-1300μg/L。
28.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为800-1200μg/L。
29.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为900-1100μg/L。
30.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为950-1050μg/L。
31.根据权利要求22所述的白酒生产工艺,其中,脂肽类化合物的总的含量为1000μg/L。
CN201310358602.XA 2013-08-16 2013-08-16 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法 Active CN103571728B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310358602.XA CN103571728B (zh) 2013-08-16 2013-08-16 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法
EP14836131.4A EP3034599B1 (en) 2013-08-16 2014-06-25 Use of lipopeptide compound for improving aroma of alcoholic beverages and determination method thereof
PCT/CN2014/080702 WO2015021823A1 (zh) 2013-08-16 2014-06-25 脂肽类化合物用于改善饮料酒香气的用途及其测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310358602.XA CN103571728B (zh) 2013-08-16 2013-08-16 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103571728A CN103571728A (zh) 2014-02-12
CN103571728B true CN103571728B (zh) 2016-08-10

Family

ID=50044444

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310358602.XA Active CN103571728B (zh) 2013-08-16 2013-08-16 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法

Country Status (3)

Country Link
EP (1) EP3034599B1 (zh)
CN (1) CN103571728B (zh)
WO (1) WO2015021823A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103571728B (zh) * 2013-08-16 2016-08-10 江南大学 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法
CN115436531B (zh) * 2022-10-20 2024-06-25 茅台学院 一种基于大曲非挥发性物质鉴别大曲质量的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102105070A (zh) * 2008-06-24 2011-06-22 鹿特诺瓦营养品和食品有限公司 用作味道调节剂的环脂肽

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522261A (en) * 1983-04-05 1985-06-11 The Board Of Regents For The University Of Oklahoma Biosurfactant and enhanced oil recovery
JP2005028559A (ja) * 2003-07-08 2005-02-03 Shinobu Ito ナノカプセル
KR100851063B1 (ko) * 2007-01-25 2008-08-12 경상대학교산학협력단 바실러스 퍼밀러스 hy1균주를 이용한 설펙틴 고함유청국장 및 간장의 속성 제조방법
CN101372502A (zh) * 2007-08-22 2009-02-25 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种枯草芽孢杆菌脂肽类抗菌物质的分离提取方法
CN101240014B (zh) * 2008-03-07 2011-01-26 山东省科学院生物研究所 一种具有生理活性的脂肽复合物及其制备方法与应用
CN103571728B (zh) * 2013-08-16 2016-08-10 江南大学 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102105070A (zh) * 2008-06-24 2011-06-22 鹿特诺瓦营养品和食品有限公司 用作味道调节剂的环脂肽

Also Published As

Publication number Publication date
WO2015021823A1 (zh) 2015-02-19
CN103571728A (zh) 2014-02-12
EP3034599A1 (en) 2016-06-22
EP3034599B1 (en) 2018-12-05
EP3034599A4 (en) 2017-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hernandez-Orte et al. The development of varietal aroma from non-floral grapes by yeasts of different genera
Niu et al. Evaluation of the perceptual interaction among ester aroma compounds in cherry wines by GC–MS, GC–O, odor threshold and sensory analysis: An insight at the molecular level
Della Corte et al. A rapid LC–MS/MS method for quantitative profiling of fatty acids, sterols, glycerolipids, glycerophospholipids and sphingolipids in grapes
Arbulu et al. Untargeted metabolomic analysis using liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry for non-volatile profiling of wines
Gruz et al. Rapid analysis of phenolic acids in beverages by UPLC–MS/MS
Li et al. Identification of floral fragrances in tree peony cultivars by gas chromatography–mass spectrometry
Nasi et al. Identification of free and bound volatile compounds as typicalness and authenticity markers of non-aromatic grapes and wines through a combined use of mass spectrometric techniques
Park et al. Metabolomic approach for discrimination of processed ginseng genus (Panax ginseng and Panax quinquefolius) using UPLC-QTOF MS
Biasoto et al. Flavour characterization of red wines by descriptive analysis and ESI mass spectrometry
Gong et al. Curie-point pyrolysis–gas chromatography–mass spectroscopic analysis of theabrownins from fermented Zijuan tea
Caffrey et al. Direct analysis of glycosidic aroma precursors containing multiple aglycone classes in Vitis vinifera berries
Zhang et al. Isolation, identification, and quantification of lichenysin, a novel nonvolatile compound in Chinese distilled spirits
Tang et al. Characterization of aroma profile and characteristic aromas during lychee wine fermentation
Gu et al. Comparative metabolomics in vanilla pod and vanilla bean revealing the biosynthesis of vanillin during the curing process of vanilla
CN103571728B (zh) 脂肽类化合物用于改善白酒香气的用途及其测定方法
Wang et al. Identification of volatile compounds and metabolic pathway during ultrasound-assisted kombucha fermentation by HS-SPME-GC/MS combined with metabolomic analysis
Barnaba et al. Targeted and untargeted high resolution mass approach for a putative profiling of glycosylated simple phenols in hybrid grapes
Yan et al. Chemical markers of a rare honey from the traditional spice plant Amomum tsao–ko Crevost et Lemarié, via integrated GC–MS and LC-MS approaches
Jia et al. Cross-modal interactions caused by nonvolatile compounds derived from fermentation, distillation and aging to harmonize flavor
Xiao et al. Identification of key aromas of Chinese muskmelon and study of their formation mechanisms
Fayad et al. Understanding sweetness of dry wines: First evidence of astilbin isomers in red wines and quantitation in a one-century range of vintages
Roman et al. Press fractioning of grape juice: a first step to manage potential atypical aging development during winemaking
Caffrey et al. Characterization of Humulus lupulus glycosides with porous graphitic carbon and sequential high performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry and high performance liquid chromatography fractionation
Bernardi et al. Jelly Palm (Butia odorata) wine: Characterization of volatile compounds responsible for aroma
Schloß et al. Biosynthesis and characterization of 15N6-labeled phomopsin A, a lupin associated mycotoxin produced by Diaporthe toxica

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20180316

Address after: No. 1800 road 214122 Jiangsu Lihu Binhu District City of Wuxi Province

Co-patentee after: Hebei Baoding house wine industry Co.,Ltd.

Patentee after: Jiangnan University

Address before: No. 1800 road 214122 Jiangsu Lihu Binhu District City of Wuxi Province

Patentee before: Jiangnan University

TR01 Transfer of patent right
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 214122 1800 Lihu Avenue, Binhu District, Wuxi, Jiangsu

Co-patentee after: HEBEI XIONGAN BAOFU WINE INDUSTRY CO.,LTD.

Patentee after: Jiangnan University

Address before: 214122 1800 Lihu Avenue, Binhu District, Wuxi, Jiangsu

Co-patentee before: Hebei Baoding house wine industry Co.,Ltd.

Patentee before: Jiangnan University

CP01 Change in the name or title of a patent holder
CP03 Change of name, title or address

Address after: 214000 1800 Lihu Avenue, Binhu District, Wuxi, Jiangsu

Patentee after: Jiangnan University

Country or region after: China

Patentee after: Xiongbaofu Liquor Industry Co.,Ltd.

Address before: No. 1800 road 214122 Jiangsu Lihu Binhu District City of Wuxi Province

Patentee before: Jiangnan University

Country or region before: China

Patentee before: HEBEI XIONGAN BAOFU WINE INDUSTRY CO.,LTD.

CP03 Change of name, title or address