CN103551569A - 牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，包括下述步骤：金纳米粒子水溶液中加入牛血清白蛋白，金纳米粒子与牛血清白蛋白的质量比为1:（1～5），；一边进行超声波振荡处理一边向上述溶液中缓慢滴加0.5～2倍体积的有机溶剂，继续超声波振荡，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。优点是：采用本发明的方法能快捷高效地将金纳米粒子包埋到由牛血清白蛋白形成的纳米球中。
Description
技术领域
本发明涉及纳米材料领域，为纳米复合粒子的合成方法，尤其涉及一种牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法。
背景技术
近年来，金纳米粒子（包括金纳米壳、金纳米笼、金纳米棒、金纳米星、多边形金纳米粒子，等）在生物医学方面得到了广泛的关注和研究。金纳米粒子拥有特殊的光电性质，是一种具有重要生物医学应用前景的纳米生物医学材料。
上述具有特殊结构的金纳米粒子（如金纳米棒）具有强烈的表面等离子共振效应，在光束的照射下能将光能高效地转化成热能，因此，在医学领域，金纳米粒子可以用作肿瘤的光热治疗。此外，金纳米粒子还可以作为其它治疗药物的运送载体，也可以用于生物成像（如光声成像）。可以说，金纳米粒子在生物医学上的应用十分广泛。
然而，一种治疗方式对肿瘤的生长抑制效果是有限的，如单独使用金纳米粒子对肿瘤进行热疗，其效果不及热化疗（热疗+化疗）。实际上，临床上对于肿瘤的治疗，多采用多种模式的综合治疗，也就是多模治疗。鉴于此，本发明通过溶剂转换的方法在金纳米粒子表面包覆牛血清白蛋白，牛血清白蛋白壳层中能装载大量的药物，该药物发挥的作用（如化疗、光动力治疗，等）将与金纳米粒子的光热效应协同高效摧毁肿瘤细胞。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种简便快捷的牛血清白蛋白（BSA）包覆金纳米粒子的制备方法。
本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是一种牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，包括下述步骤：
1） 金纳米粒子水溶液中加入牛血清白蛋白，金纳米粒子与牛血清白蛋白的质量比为1:（1～5）；
2） 一边超声波振荡一边向上述溶液中缓慢滴加0.5～2倍体积的有机溶剂，继续超声波振荡，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
所述的超声波振荡过程在0.5小时以上，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
所述金纳米粒子与牛血清白蛋白的质量比优选为1:（1.5～4）。
在上述方案的基础上，所述的金纳米粒子可以为金纳米球、金纳米棒、金纳米笼和金纳米壳中的一种或多种的组合。且所用的金纳米粒子可以采用现有的各种方法制备。
在上述方案的基础上，步骤1）中，所述金纳米粒子水溶液的浓度为0.5～2 mg/ml。
在上述方案的基础上，所述的有机溶剂为无水乙醇、乙二醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇、丙酮、四氢呋喃的一种或几种的组合。
在上述方案的基础上，滴加完有机溶剂后，再加入少量的1%戊二醛水溶液，超声波振荡。
本发明的牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法可以包含戊二醛水溶液的加入步骤，以进一步提高牛血清白蛋白的包覆持久性。
在上述方案的基础上，所述1%戊二醛水溶液的加入量为5～100μL。
所述1%戊二醛水溶液的加入量优选为20～80μL。
本发明的有益效果是：
采用本发明的方法能够成功制备牛血清白蛋白包覆的金纳米粒子，并且快捷高效。
附图说明
图1为金纳米粒子（金包硒化金，即Au/AuSe）的透射电镜照片。
图2为牛血清白蛋白包覆金纳米粒子（BSA/Au/AuSe）的透射电镜照片。
图3为牛血清白蛋白包覆金纳米粒子（BSA/Au/AuSe）的扫描电镜照片。
图4为金纳米粒子（金纳米星）的透射电镜照片。
图5为牛血清白蛋白包覆金纳米粒子（BSA/金纳米星）的透射电镜照片。
具体实施方式
实施例1
金纳米粒子（Au/AuSe）的制备（金纳米壳）
向10ml水中搅拌滴加1000μL 25mM的氯金酸水溶液，200μL 29mM的二氧化硒溶液，1000μL 0.2M的碳酸钾溶液；继续缓慢滴加3.0mL 1.0mg/mL的硼氢化钠溶液，溶液由紫红色变为深咖啡色；继续搅拌10min，制得如图1所示的金纳米粒子（Au/AuSe）。
牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备
1） 向2 ml金纳米粒子水溶液（浓度0.5 mg/ml）中加入4mg的牛血清白蛋白（金纳米粒子与牛血清白蛋白质量比1:4）；
2） 一边进行超声波振荡处理一边缓慢滴加2 ml无水乙醇（上述溶液1倍体积），继续超声波振荡1h；
3） 滴加40μL的1%戊二醛溶液，继续超声波振荡1h，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
使用透射电镜和扫描电镜表征金纳米粒子和BSA/金纳米粒子的形貌。由图1可看出金纳米粒子在透射电镜下显示为10nm左右的衬度很高的黑点，图2则表明金纳米粒子已经被包埋在BSA中，并且包埋率比较高，整个BSA/金纳米粒子大小在200nm左右。图3的扫描电镜照片显示出BSA/金纳米粒子以球形为主且大小比较均匀。
实施例2
金纳米粒子的制备与实施例1相同
牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备
1） 向2 ml金纳米粒子水溶液（浓度0.5 mg/ml）中加入2.4 mg的牛血清白蛋白（金纳米粒子与牛血清白蛋白质量比1:2.4）；
2） 一边进行超声波振荡处理一边缓慢滴加3 ml甲醇（上述溶液1.5倍体积），超声波振荡1.5 h，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
实施例3
金纳米粒子的制备与实施例1相同
牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备
1） 向2ml金纳米粒子水溶液（浓度1 mg/ml）中加入2 mg的牛血清白蛋白（金纳米粒子与牛血清白蛋白质量比1:1）；
2） 一边进行超声波振荡处理一边缓慢滴加4 ml无水乙醇（上述溶液2倍体积），继续超声波振荡1h；
3） 滴加20μL的1%戊二醛溶液，继续超声波振荡1h，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
实施例4
牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备
1） 向2 ml金纳米粒子水溶液（浓度0.5 mg/ml）中加入2 mg的牛血清白蛋白（金纳米粒子与牛血清白蛋白质量比1:2）；
2） 一边进行超声波振荡处理一边缓慢滴加1.5ml无水乙醇（上述溶液0.75倍体积），继续超声波振荡1h；
3） 滴加80 μL的1%戊二醛溶液，继续超声波振荡1h，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
实施例5
金纳米粒子的制备（金纳米星）
将20ml正己醇，30ml triton x-100，100ml环己烷缓慢搅拌混合得到微乳，边搅拌边向微乳中缓慢滴加5ml 20mM的氯金酸水溶液，搅拌1h后再向微乳中滴加 50ul 5%的羟胺水溶液，微乳由金色变为黑色，继续搅拌1h，离心得到沉淀，乙醇洗涤3次，去离子水洗涤3次，制得如图4所示的金纳米星。
牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备
1） 向2 ml金纳米星水溶液（浓度2 mg/ml）中加入6 mg的牛血清白蛋白（金纳米粒子与牛血清白蛋白质量比1:1.5）；
2） 一边进行超声波振荡处理，一边缓慢滴加3ml甲醇（上述溶液1.5倍体积），继续超声波振荡1.5 h，制得牛血清白蛋白包覆金纳米星。
图5表明金纳米星已经被包埋在牛血清白蛋白中。
Claims (5)
1.一种牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
1) 金纳米粒子水溶液中加入牛血清白蛋白，金纳米粒子与牛血清白蛋白的质量比为1:（1～5）；
2) 一边超声波振荡一边向上述溶液中缓慢滴加0.5～2倍体积的有机溶剂，继续超声波振荡，制得牛血清白蛋白包覆金纳米粒子。
2.根据权利要求1所述的牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，其特征在于：步骤1）中，所述金纳米粒子水溶液的浓度为0.5～2 mg/ml。
3.根据权利要求1所述的牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，其特征在于：步骤2）中，所述的有机溶剂为无水乙醇、乙二醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇、丙酮、四氢呋喃中的任意一种或几种的组合。
4.根据权利要求1或3所述的牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，其特征在于：在步骤2）滴加完有机溶剂后，再加入少量的1%戊二醛水溶液，超声波振荡。
5.根据权利要求4所述的牛血清白蛋白包覆金纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述1%戊二醛水溶液的加入量为5～100μL。
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