CN103529038A - 一种凝胶中dna条带智能识别系统及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种凝胶中DNA条带智能识别系统及方法,该系统包括凝胶成像仪和计算机。所述凝胶成像仪通过数据线连接计算机,用于通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机。所述计算机用于根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别,其中,计算机中预存有使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小数据。本发明由计算机辅助识别凝胶中DNA条带的大小和组成的模式,便于快速分析多条带DNA凝胶电泳结果。
Description
技术领域
本发明涉及DNA条带识别技术领域,尤其涉及一种凝胶中DNA条带智能识别系统及方法。
背景技术
相同的DNA分子组合在不同成分或者浓度的凝胶中,或者不同的电压下电泳时,甚至仅仅由于电泳时间不同,凝胶中DNA条带的大小和组成都会呈现不同的模式。当前实验人员多通过肉眼比对来分辨DNA的组成,这在密集的多条带DNA情况下很难得到准确结果。
发明内容
本发明的目的在于通过一种凝胶中DNA条带智能识别系统及方法,来解决以上背景技术部分提到的问题。
为达此目的,本发明采用以下技术方案:
一种凝胶中DNA条带智能识别系统,其包括凝胶成像仪和计算机;
所述凝胶成像仪通过数据线连接计算机,用于通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机;
所述计算机用于根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别,其中,计算机中预存有使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小数据。
本发明公开了一种凝胶中DNA条带智能识别方法,其包括如下步骤:
A、使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小,并将该数据存入计算机数据库;
B、凝胶成像仪通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机;
C、计算机根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别。
本发明提供的凝胶中DNA条带智能识别系统及方法由计算机辅助识别凝胶中DNA条带的大小和组成的模式,便于快速分析多条带DNA凝胶电泳结果。
附图说明
图1为本发明实施例提供的凝胶中DNA条带智能识别系统框图;
图2为本发明实施例提供的凝胶中DNA条带智能识别方法流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。可以理解的是,此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明,而非对本发明的限定。另外还需要说明的是,为了便于描述,附图中仅示出了与本发明相关的部分而非全部内容。
请参照图1所示,图1为本发明实施例提供的凝胶中DNA条带智能识别系统框图。
本实施例中DNA条带智能识别系统包括凝胶成像仪101和计算机102。
所述凝胶成像仪101通过数据线103连接计算机102,用于通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机102。
所述计算机102用于根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪101输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别,其中,计算机102中预存有使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小数据。
如图2所示,图2为本发明实施例提供的凝胶中DNA条带智能识别方法流程图。
本实施例中凝胶中DNA条带智能识别方法具体包括如下步骤:
步骤S201、使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小,并将该数据存入计算机数据库。
步骤S202、凝胶成像仪通过摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机。
步骤S203、计算机根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别。
为更好的理解上述实施例,下面对凝胶中DNA条带相关知识进行简要说明。
一、线性DNA分子的迁移率与其分子量的对数值成反比。
理论上,当已知某DNA分子的大小,分子构型(环形,线性或超螺旋),电场强度,电泳时间和凝胶浓度等条件,可以预测点用后DNA在凝胶上的位置。反之,如果知道电泳后DNA的位置,则可以推断出DNA的大小。
二、影响凝胶迁移速度的因素。DNA为碱性物质,在电泳(缓冲液pH=8)时带负电荷,在一定电场力作用下向正极泳动。而DNA链上的负电荷伴随着DNA分子量的增加而增加,荷质比是一常数,故电泳中DNA的分离类似分子筛效应。电泳中影响DNA分子泳动的因素很多,主要分两方面:DNA分子特性和电泳条件。
(1)、DNA分子大小。DNA分子越大在胶中的摩擦阻力就越大,泳动也越慢,迁移速率与线状DNA分子质量的对数值成反比。
(2)、DNA分子构型。对于质粒DNA分子即使具有相同分子质量,因构型不同也会造成电泳时受到的阻力不同,最终造成泳动速率的不同。常规电泳中质粒DNA分子的3种构型泳动速率:超螺旋最快、线状分子次之,开环分子最慢。
(3)、不同的胶浓度。对于同种DNA分子胶浓度越高,电泳速率越慢。不同胶浓度对于DNA片段呈线性关系有所区别,浓度较稀的胶线性范围较宽,而浓的胶对小分子DNA片段呈现较好的线性关系。所以常规实验中对于小片段DNA分子的分离采用高浓度的胶分离(有时甚至用2%的凝胶),而对于分离大片段则用低浓度的凝胶。
(4)、电场强度。电泳时为了尽快得到实验结果,所用的电场强度约为5V/cm,这样的场强下虽能得到结果,但分辨率不高。在精确测定DNA分子大小时,应降低电压至1V/cm。电场强度偏高时电泳分离的线性范围会变窄,电压过高时也会由于电泳中产生的大量热量导致DNA片段的降解。实验中要根据需要选择合适电压,如对于DNA大片段的分离可适当选择较低电压进行(在Southern杂交中的DNA电泳),避免托尾现象的产生;而对于小分子DNA,由于其在凝胶中的快速扩散会导致条带模糊,可选用相对较高的电泳以缩短电泳时间。
(5)溴化乙锭简称EB。电泳中的染色剂,具有扁平结构,能嵌入到DNA碱基对间,对线状分子与开环分子影响较小而对超螺旋态的分子影响较大。当DNA分子中嵌入的EB分子逐渐增多时,原来为负超螺旋状态的分子开始向共价闭合环状转变,电泳迁移速度由快变慢;当嵌入的EB分子进一步增加时,DNA分子由共价闭合环状向正超螺旋状态转变,这时电泳迁移速率又由慢变快。这个临界点的游离EB质量浓度为0.1g/ml-0.5g/ml,即电泳时所加的浓度。因此一般电泳可以忽略此因素,而对于特殊电泳,消除此因素影响可采用电泳后染色。
(6)电泳缓冲液。目前有3种缓冲液适用于天然双链DNA的电泳:TAE、TBE和TPE。一般常用的DNA电泳选用TAE较多,其电泳时间较快,而且成本比较低,但是其缓冲容量较低,需经常更换电泳液。
本发明由计算机辅助识别凝胶中DNA条带的大小和组成的模式,便于快速分析多条带DNA凝胶电泳结果。
注意,上述仅为本发明的较佳实施例及所运用技术原理。本领域技术人员会理解,本发明不限于这里所述的特定实施例,对本领域技术人员来说能够进行各种明显的变化、重新调整和替代而不会脱离本发明的保护范围。因此,虽然通过以上实施例对本发明进行了较为详细的说明,但是本发明不仅仅限于以上实施例,在不脱离本发明构思的情况下,还可以包括更多其他等效实施例,而本发明的范围由所附的权利要求范围决定。
Claims (2)
1.一种凝胶中DNA条带智能识别系统,其特征在于,包括凝胶成像仪和计算机;
所述凝胶成像仪通过数据线连接计算机,用于通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机;
所述计算机用于根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别,其中,计算机中预存有使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小数据。
2.一种凝胶中DNA条带智能识别方法,其特征在于,包括如下步骤:
A、使用一维荧光强度扫描技术确定多条带的DNA大小,并将该数据存入计算机数据库;
B、凝胶成像仪通过其摄像头采集实验中的凝胶图像,输出给计算机;
C、计算机根据输入的包括实验中凝胶的成分、浓度、电泳时间在内的相关参数,预测出反应凝胶中DNA条带的大小和组成的图像即预测图谱,并对凝胶成像仪输出的凝胶图像进行分析,获得DNA电泳结果图像即实际图谱,用预测图谱与实际图谱进行比对,完成凝胶中DNA条带的识别。
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