CN103520190A - 防治老年神经退行性疾病的高能物质及其医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于老年神经退行性疾病的高能物质，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸肌酸、乙酰辅酶A、腺苷三磷酸、左旋肉碱、S-腺苷甲硫氨酸、鸟苷三磷酸、胞苷三磷酸、焦磷酸、1,3-二磷酸甘油酸、琥珀酰辅酶A中的一种或几种高能化合物及其衍生物。本发明的有益效果在于，发现了高能物质用于老年神经退行性疾病，特别是老年人群以延缓和预防痴呆，并证明本发明的高能物质是合理、安全并且经济的治疗神经退行性疾病特别是防治老年痴呆的新型药物。

Description

防治老年神经退行性疾病的高能物质及其医药用途

技术领域

本发明属于老年神经退行性疾病的药物应用领域，特别涉及一种利用高能物质治疗老年神经退行性疾病。

背景技术

神经退行性疾病(Neurodegenerative disease)是一组由慢性进行性的中枢神经组织退行性而产生的疾病的总称，共同的病理为脑或（和）脊髓神经元退行性变化、脱失。在老年人群中，主要包括阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）（早老性痴呆或老年性痴呆）、小脑萎缩症、多发性硬化症、帕金森氏病、原发性侧索硬化、脊髓性肌萎缩症等。

用于老年神经退行性疾病的已经上市的药物较少，主要包括治疗帕金森病的拟多巴胺药、胆碱受体阻断药，比如左旋多巴、卡比多巴、司立吉兰、恩他卡、美金刚、溴隐亭等；治疗阿尔茨海默病的他克林（Tacrine）、盐酸多奈哌齐、氢溴酸加兰他敏、石杉碱甲、利凡斯的明、褪黑素。但是人们对该疾病的研究一直都在进行，比如中国专利CN200780053708、中国专利CN200980128111、中国专利CN201080013941、中国专利CN201180022597、中国专利CN201180037537、中国专利CN201180046374、中国专利CN201180053509、中国专利CN201080057546均公开了基于不同的治疗机理的药物在神经退行性疾病的应用。

高能化合物是体内天然存在的一类含高能量的物质，它们在分解时会释放出远高于其他化合物的自由能。现有技术中，没有将高能化合物用于神经退行性疾病治疗的报道。

发明内容

申请人在长期的研究中发现了一组“高能化合物”，它们能够有效地提高神经细胞的能量水平，促进神经传导。更重要的是，它们还具有显著的保护神经细胞和提高动物认知功能的作用，并优于国际和国内目前的同类药物。因此，高能化合物可以作为安全有效的一类全新药物被用于防治老年痴呆和其他老年退化性疾病。

现代社会随着经济发展和生活水平的提高，人类的寿命大大延长，但也带来了一系列老年病的快速增加。其中最为可怕的是老年痴呆症，它摧残大脑思维和记忆功能，使老人生活不能自理，给家庭和社会造成沉重的经济压力和精神负担，成了严重的社会问题。所以近几十年来，世界各国都加强了对它的研究。但是，这些研究至今仍没有突破性进展，也没有找到任何药物可以快速有效地治疗老年痴呆。目前，虽然美国有三个处方药上市，也有很多天然营养药物在使用中，但它们改善痴呆症状的效果极为有限，更没有延缓大脑退化和预防痴呆的作用。

在这种形势下，申请人的试验室多年来筛选和对比了大量的药物，其中包括多种中草药提取物，抗氧化剂，免疫力增强剂，毒素清除剂和神经介质稳定剂等。从这些试验中我们意外地发现了十一种“高能化合物”在实验条件下呈现出显著的增加细胞能量水平和强化细胞抵抗力的作用。进一步研究表明，它们还有刺激神经传导，保护脑细胞，减缓细胞退化过程的效果。下面详细介绍本发明的技术方案。

本发明提供了一种防治老年神经退行性疾病的高能物质，其中高 能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸(phosphoenol pyruvate)(PEP)、磷酸肌酸(phosphocreatine)(PCr)、乙酰辅酶A(acetyl coenzymeA)(ACoA)、腺苷三磷酸（adenosine triphosphate）（ATP）、左旋肉碱(acetyl-L-carnitine)(ALC)、S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosinemethionine)(SAM)、鸟苷三磷酸(guanosinetriphosphate)(GTP)、胞苷三磷酸(cytidine triphosphate)(CTP)、焦磷酸(pyrophosphate)(PP)、1,3-二磷酸甘油酸（DPG）、琥珀酰辅酶A（SCoA）中的一种或几种高能化合物及其衍生物。

第一种优选的高能物质包括磷酸肌酸和乙酰辅酶A，其中磷酸肌酸和乙酰辅酶A的重量份配比为0.1-2：0.1-1.5。进一步优选的是磷酸肌酸和乙酰辅酶A的重量份配比为1：0.75。

第二种优选的高能物质是在第一种高能物质的基础上，增加1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸，其中磷酸肌酸、乙酰辅酶A、1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸的重量份配比为0.1-2：0.1-1.5：0.1-1：0.1-1.5。进一步优选的是磷酸肌酸、乙酰辅酶A、1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸的重量份配比为1：0.75：0.5：0.75。

本发明特别给出了一种利用第二种高能物质制备的片剂，制备所述片剂的原料重量份组成为：

第三种优选的高能物质是高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸，所述磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸的重量份配比为0.1-1：0.1-2：0.1-2。进一步优选的是磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸的重量份配比为0.5-1：0.5-1.5：0.5-2。

第四种优选的高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸，所述磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸的重量份配比为0.1-2:0.1-1.2：0.1-2：0.1-1.5。进一步优选的是磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸的重量份配比为0.5-1:0.6-1：1-2：0.6-1。

本发明特别给出了一种利用第四种高能物质制备的片剂，制备所述片剂的原料重量份组成为：

本发明的高能物质可以与增效剂制成组合物，第一种增效剂为另外一种活性成分，所述活性成分包括但不限于咖啡因，尼古丁，卵磷脂，牛磺酸。

第二种增效剂为脂质体，所述脂质体可与所述高能化合物结合得到纳米脂质体。

本发明的高能物质还可以与增加细胞保护剂制成的组合物，其中增加细胞保护剂可以为抗氧化剂、免疫力、血液循环增强剂、神经介质稳定剂或抗炎剂中的一种或若干种。

本发明的高能物质可以与药用辅料制成的各种药物制剂，所述制剂包括口服制剂、注射制剂，所述口服制剂包括片剂、散剂、胶囊、口服液、颗粒剂，所述注射制剂包括无菌粉剂和注射液，所述无菌粉剂包括冻干粉针，所述注射液包括肌肉注射液、静脉注射液、颅内注射液和脊髓注射液。

本发明的口服制剂，所用药用辅料包括但不限于玉米淀粉，明胶，交联羧甲基纤维素，微晶纤维素,甘露醇，磷酸二钙，羧甲基淀粉钠和藻酸。

本发明的注射制剂，所用药用辅料包括悬浮剂、增溶剂、防腐剂、表面活性剂、润湿剂和着色剂。

本发明的高能物质可以与药用辅料制成的缓释剂型，所述缓释剂包括但不限于骨架型缓释剂、包衣缓释剂、缓释微囊、多层缓释片、缓释胶囊、磁性缓释制剂、树脂缓释剂和缓释膜剂。

在另一个方面，本发明提供了一种高能物质在防治老年神经退行性疾病的药物中的应用，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸肌酸、乙酰辅酶A、腺苷三磷酸、左旋肉碱、S-腺苷甲硫氨酸、鸟苷三磷酸、胞苷三磷酸、焦磷酸、1,3-二磷酸甘油酸、琥珀酰辅酶A中的一种或几种高能化合物及其衍生物。

优选的是，高能物质在防治老年痴呆的药物中的应用。

进一步优选的是，在老年性肌肉萎缩、骨质疏松、脑血栓疾病的药物中的应用。

更进一步优选的是，在治疗老年人群的小脑萎缩症、多发性硬化症、帕金森氏病、原发性侧索硬化、脊髓性肌萎缩症的药物中的应用。

特别需要指出的是，本发明的高能物质的每日剂量范围为5-100毫克，可以实现上述发明的目的。进一步优选的是，高能物质的每日剂量范围为10-50毫克。

下面通过试验例对本发明进一步说明。

试验例1细胞内ATP含量测定

试验目的：确认高能化合物可以提高细胞中的能量水平。能量缺失是衰老过程中最根本性和最早期的变化，因此，用于预防老年痴呆的药物必须能够提升细胞中的能量（ATP）水平。

试验方法：本实验使用荧光素-荧光酶生物发光ATP检测试剂盒（购自Molecular Probe公司，俄勒冈州）进行。培养在12孔培养板中的细胞与重组的荧光素酶在37℃反应进行10分钟，然后用BioTekFlx800培养板阅读器在570nm处测定生物发光信号。

试验数值代表青年和老年各五个成纤维细胞株的平均ATP水平，这些细胞来自青年（18-25岁）或年老（82-95岁）的捐赠者各五人（细胞株购自ATCC,马里兰州）。Rot是能量代谢抑制剂。数值基于三次独立的测定，平均值+标准误差。*，P＜0.01；**，P＜0.001，与对照组比较（下同）。O代表老年。mM表示毫摩尔浓度。

试验结果：图1显示（i）老年人的成纤维细胞相比年轻细胞ATP水平显著降低；（ii）高能化合物（PEP，PCR，ACOA，GTP，ALC，SAM，CTP和PP）都强劲地提升了老年细胞的ATP水平；（iii）这些作用可以被Rot（能量代谢抑制剂）所抵消，表明升高的ATP确是由于促进了能量代谢所致。

试验例2细胞内钙离子成像

目的：确认高能化合物可以激活细胞内钙离子（Ca2+）信号。细胞内钙离子是神经传导和记忆过程关键调节因子，所以，能够促进胞内关键信号的药物才有希望改善大脑记忆和认知能力。

试验方法：用钙离子荧光染料Fluo-4将生长于培养皿中的细胞标记,然后加入试剂，保温后用Olympus激光共聚焦显微镜在波长488/516nm进行钙离子成像。由256×128像素的图片以每2秒1帧的速度收集记录。荧光强度转换为钙离子浓度时使用GraphPad软件。

试验结果：图2a显示，（i）随着PEP浓度的增加，激活的细胞数量和荧光信号强度都随之增强；（ii）这种效应可以被Bap（钙离子的特异性拮抗剂）或Rot所抑制，证明荧光信号确由钙离子所产生，而且这个过程需要能量输入。图2b显示钙离子信号的动力学曲线。图3显示钙离子激活的定量测定数据，表明不仅PEP，而且其他的高能化合物也有类似效果，它们也都对Bap或Rot敏感。

试验例3钙蛋白酶活性测定

目的：证明高能化合物还可以激活钙蛋白酶。钙蛋白酶是记忆和思维过程中一个关键的酶，它在老化中的失活导致了淀粉样蛋白和神经纤维缠结的沉积（老年痴呆的的两个诊断标志）。所以，激活钙蛋白酶就可以减少蛋白质积累。

试验方法：培养中的细胞首先与10μM荧光标记的并具有细胞渗透性的钙蛋白酶底物IV（购自EMD-Millipore公司，加州）在37℃进行保温15分钟，然后做动力学研究。钙蛋白酶作用所产生的荧光用BioTek Flx800培养板阅读器在波长360/480nm处测定。

试验结果：图4a显示（i）与年轻细胞相比，老年细胞中的荧光强度下降；（ii）PEP增高了老年细胞中的荧光强度，此效应被CPT（蛋白酶抑制剂）所抑制，表明荧光强度代表了钙蛋白酶活性。图4b显示钙蛋白酶活性的动态变化作为时间的函数。

图5显示钙蛋白酶活性定量测定的结果，其中包括：（i）老年细胞比年轻细胞中钙蛋白酶活性降低；（ii）PEP，PCR和AcoA强烈地并且随浓度增加而激活老年细胞中的钙蛋白酶；（iii）GTP，ALC，SAM和PP具有相似的作用。

图6a、图6b进一步表明，在老年细胞中，PEP或PCR激活钙蛋白酶的效应至少持续6小时。因此，高能化合物可以在老年人中用来提高钙离子信号和钙蛋白酶活性。

试验例4

目的：确认高能化合物在细胞中可以诱导出钙离子脉冲波。钙离子脉冲波通过频率和振幅的变化调节神经介质的释放，所以这是检验具有生理活性的钙离子激活剂的另一个关键指标。并非所有的钙离子激活剂都有此作用。

试验结果：高能化合物在神经细胞中诱导出钙离子波浪形脉冲，将低浓度的PEP，PCR或ATP（10μM）加入SH-SY5Y人脑神经细胞株中后，用激光共聚焦显微镜记录的钙离子波浪形脉冲。

如图7所示，PEP，PCR，ATP在脑神经细胞中诱导出钙离子脉冲波，这表明它们是有生理活性的钙离子激活剂，可以用于改善脑功能。

试验例5Western免疫印迹法测定sAPPα蛋白的释放

试验目的：证明高能化合物促进细胞中sAPPα的释放并减少动物脑中的Aβ蛋白沉积。老年痴呆的一个重要特征是淀粉样蛋白(Aβ)的积累（它导致细胞死亡），而促进sAPPα释放就会减少Aβ的产生和减少它在脑中的沉积，从而延缓老年痴呆的进程。

试验方法：在12孔培养板中，将细胞与试验药物在37℃下保温2小时，然后收集细胞释放的蛋白质，并用标准的SDS-PAGE和Western免疫印迹法鉴定sAPPα蛋白（可溶性淀粉样蛋白前体）。使用的检测探针是单克隆抗-sAPPα抗体（购自EMD-Millipore公司，加州）。

使用十月大（体重60-80克）的hAPP-Tg转基因小鼠（购自JacksonLaboratories公司,缅因州；此小鼠携带人的APP基因，在6个月后出现Aβ蛋白沉淀），用静脉注射PEP或PCR（15毫克/公斤体重），3周后杀死小鼠制成脑组织切片，再与抗-Aβ抗体反应，然后用罗丹明荧光标记的第二抗体染色，最后用荧光显微镜拍照。

试验结果：图8a显示ACoA,ATP和PCr有力地促进细胞sAPPα的释放，但对照物β-actin却没有变化，表明高能化合物的作用具有特异性；图8b显示ACoA,ATP和PCr随浓度增加而促进sAPPα的释放，而没有高能键的化合物（ADP和Cr）却无此效应，说明高能键所提供能量起着关键作用。

图9表明，注射PEP或PCR后，老年痴呆动物模型小鼠（hAPP-Tg）脑中的海马区（负责记忆）和皮质区（负责认知）中的Aβ蛋白沉积显著减少。

试验例6神经细胞保护作用的测定

试验目的：证明高能化合物确有神经细胞保护作用。用于防治老年痴呆的药物必须具有这一功效。

试验方法：SH-SY5Y人脑神经细胞株在37℃培养中加入0.5μM Rot或0.5μM Rot+1mM PEP保温3天。其中每天取出细胞样品进行存活和形态的显微镜检查。

试验结果：如图10所示，上排表明，加入Rot后，SH-SY5Y人脑神经细胞在两天后全部死亡；下排表明，Rot与PEP同时加入后，两天后大部分细胞都存活下来（箭头指示存活的神经细胞丝），证明PEP具有细胞保护作用。

试验例7Morris大鼠水下迷宫试验

试验目的：证实高能化合物确能改善动物的认知功能，并且其效果优于现在的同类药物。这是检验老年痴呆药物的最重要指标。

试验方法：用Wistar大鼠（雄性，体重200-250g；购自JacksonLaboratories,缅因州）进行静脉注射生理盐水（对照）或试验药物（15毫克/公斤体重），3周后用Morris水下迷宫方法进行空间记忆测试，收集到的数据进行统计分析。

试验结果：图11上排显示，（i）在注射了PEP或PCr后，大鼠在Morris水迷宫试验中减少了找到隐藏的水下平台的时间，即改善了空间记忆功能；（ii）更重要的是，PEP或PCr与咖啡因合使用显示出更好的功效（咖啡因可以促进药物通过血脑屏障）。下排显示，在注射了Rot而记忆力严重受损的大鼠中，PEP或PCr单独使用或者与咖啡因结合使用都具相似的作用。

图12显示大鼠Morris水迷宫试验数据的统计分析结果：（i）在注射了Rot记忆力严重受损的大鼠中，八种高能化合物（ATP,PEP,PCr,ACoA,GTP,DPG,SAM,SCoA）都表现出显著的改进记忆的作用，并且这一作用明显优于Mem（Memantine,美金刚，老年痴呆的现用药物）；（ii）PEP,PCr和ACoA与咖啡因结合使用则效果更佳。

小结：统计学分析

图1-12代表性的主要试验结果，为简化起见，每一个图中并未包括所有的十一种高能化合物,因为这些化合物的检验指标都极为相似。

试验表明，这些高能化合物可以提升细胞内的能量水平，激活钙离子信号和钙蛋白酶，减少小鼠脑中的Aβ蛋白沉积，同时改进大鼠的空间记忆功能，而且其作用明显优于现有的同类药物。这提示了高能化合物可以作为安全有效的一类新型药物用于防治老年痴呆症。

本发明的有益效果在于，提供了系列高能物质治疗神经退行性疾病药物的同时，阐明了高能化合物的作用机制以及跟神经传导的关系。在体内，自由能是生物代谢、生长、运动和大脑活动的第一驱动力。在大脑老化中，高能化合物和自由能都逐渐减少，所以补充这些化合物就可以增加自由能。其道理就像给特定人群补充胰岛素、免疫球蛋白和激素一样，可以促进体内相应的代谢或信息传导途径。事实上，有些高能化合物比如腺苷三磷酸和磷酸肌酸已经被用于青年人增强肌肉活力，焦磷酸已被用于预防老年骨质疏松，这表明这些化合物对人体是安全的，但它们目前还没有被用于预防老年痴呆。肌肉骨骼的老化和大脑老化的本质都是能量的缺失，所以增强大脑认知能力与增强肌肉骨骼活力在老年人中应该也可以同步进行。

虽然很多生物大分子都含有能量，比如长链脂肪酸和蛋白质，但它们难以被大脑利用，因为大脑的主要“燃料”是葡萄糖，而高能化合物是葡萄糖代谢的中间产物，所以增加高能化合物就会加速葡萄糖代谢，增加大脑能量水平。高能化合物都是小分子物质，比大分子物质更容易进入大脑。

目前其他药物也被用于预防老年痴呆，比如抗氧化剂，免疫力增强剂，抗炎剂，毒素清除剂以及神经介质稳定剂等，但它们的效果极为有限。这是因为生命的本质是能量的积累和消耗，而能量缺失才是老化的最根本原因和可以进行人为干预的最早期变化，它引发了自由基、蛋白质缠结和毒素的积累，导致免疫力和神经介质的缺失，所以这些变化是老化的现象而非起因，因此用它们作为药物标靶也就难以达到预防记忆力和认知功能缺失的效果。

大脑记忆和思维高度依赖能量供应，而脑退化和痴呆的早期原因是能量的缺失。最近的研究表明，能量代谢的衰退是老化过程的最根本和最早期的变化，它随之引起氧化自由基和有毒物质和蛋白质的积累，损害人体免疫功能，最后导致细胞活力和大脑功能的减退，发展到严重程度就是痴呆。所以，提高脑中的能量水平是预防老年痴呆的一个理想的切入点。

本发明发现，提高大脑能量水平才是最合理的预防干预的切入点，而高能化合物可能是最理想的药物用于老年人群以延缓和预防痴呆。所以，高能化合物是合理、安全并且经济的治疗神经退行性疾病特别是防治老年痴呆的一类全新型药物。

附图说明

图1细胞内ATP含量测定结果；

图中，ATP levels表示ATP水平、young表示青年、old表示老年，+Rot表示该组增加能量代谢抑制剂、O代表老年、O+PEP表示老年组应用磷酸烯醇式丙酮酸、O+PCr表示老年组应用磷酸肌酸、O+ACoA表示老年组应用乙酰辅酶A、O+GTP表示老年组应用鸟苷三磷酸、O+ALC表示老年组应用乙酰左旋肉碱、O+SAM表示老年组应用S-腺苷甲硫氨酸、O+CTP表示老年组应用胞苷三磷酸、O+PP表示老年组应用焦磷酸，“*”表示P＜0.01，“**”表示P＜0.001，mM表示摩尔浓度mol/L。

图2a、PEP激活SH-S Y5Y脑神经细胞内的钙离子信号

图中，mM表示摩尔浓度mol/L、+Bap表示添加钙离子的特异性拮抗剂、+Rot表示该组增加能量代谢抑制剂

图2b、PEP激活SH-S Y5Y脑神经细胞内的钙离子信号中钙离子信号的动力学曲线

图中，横坐标代表时间（s），纵坐标代表荧光强度（FI）。

图3、ATP、PEP、PCr和ACoA激活细胞内钙离子的定量测定

图中，纵坐标中AU代表将图2b中的荧光信号强度转换成钙离子浓度后的任意单位，Glu是谷氨酸，为常用的钙离子激活剂。

+Bap表示添加钙离子的特异性拮抗剂、+Rot表示该组增加能量代谢抑制剂、mM表示毫摩尔浓度mol/L、nM表示纤摩尔浓度（1nM＝10^-9mM）、μM表示微摩尔浓度（1μM＝10^-6mM）

图4a、PEP提升老年成纤维细胞中的钙蛋白酶活性

图中，young表示青年、old表示老年、O+PEP表示老年组应用磷酸烯醇式丙酮酸、O+CTP+PEP表示老年组应用胞苷三磷酸和磷酸烯醇式丙酮酸；

图4b、PEP提升老年成纤维细胞中的钙蛋白酶活性数据对于时间进程做图

图中，纵坐标Calpain Activity（F360/480）代表钙蛋白酶活性，横坐标Time代表时间（分钟）、young表示青年、old表示老年、O+PEP表示老年组应用磷酸烯醇式丙酮酸、O+CTP+PEP表示老年组应用胞苷三磷酸和磷酸烯醇式丙酮酸、Blank代表对照细胞。

图5、高能化合物提升钙蛋白酶活性的相对效力

图中，纵坐标Calpain Activity代表钙蛋白酶活性、young表示青年、old表示老年、O+PEP表示老年组应用磷酸烯醇式丙酮酸、O+PCr表示老年组应用磷酸肌酸、O+ACoA表示老年组应用乙酰辅酶A、O+GTP表示老年组应用鸟苷三磷酸、O+ALC表示老年组应用乙酰左旋肉碱、O+SAM表示老年组应用S-腺苷甲硫氨酸、O+PP表示老年应用焦磷酸、mM表示摩尔浓度mol/L。

图6a、PEP和PCR激活钙蛋白酶作用的持续时间

+PEP表示应用磷酸烯醇式丙酮酸、Rest表示未刺激细胞、min表示分钟、h表示小时

图6b、PEP和PCR激活钙蛋白酶的时间进程

图中，纵坐标Calpain Activity代表钙蛋白酶活性，纵坐标代表荧光强度转换为钙蛋白酶活性并与对照组的相对百分比。

图7、高能化合物在神经细胞中诱导出钙离子波浪形脉冲

图中，横坐标代表时间（秒），纵坐标代表荧光强度（FI）

图8a、高能化合物促进了sAPPα蛋白释放。

图中，mM表示毫摩尔浓度mol/L，-sAPPα为单克隆抗-sAPPα抗体，β-actin（肌动蛋白）作为对照；

图8b、将图8a中的sAPPα反应斑作定量密度测定并与ADP和Cr比较

图中，图8b显示ACoA,ATP和PCr随浓度增加而促进sAPPα的释放，而没有高能键的化合物（ADP和Cr）却无此效应，说明高能键所提供的能量起着关键作用

ADP表示二磷酸腺苷，Cr表示肌酐，mM（log）表示毫摩尔浓度mol/L的对数值

图9、ACoA和PP减少了小鼠脑中的Aβ蛋白沉积。

图中，Cortex表示皮质区、Hippo表示海马区、Ctrl表示对照组、ACoA表示乙酰辅酶A、PP表示焦磷酸。

图10、高能化合物的神经细胞保护作用

图中，Rot表示能量代谢抑制剂，Rot+PEP表示能量代谢抑制剂与磷酸烯醇式丙酮酸混合组，day表示天。

图11、PEP和PCr提高了大鼠的空间记忆力及咖啡因的辅助作用

图中，Control表示对照组，PCr表示磷酸肌酸，PCr+Caf表示磷酸肌酸与咖啡因合用，PEP表示磷酸烯醇式丙酮酸，PEP+Caf表示磷酸烯醇式丙酮酸与咖啡因合用，Rot表示能量代谢抑制剂，Rot+PCr表示能量代谢抑制剂与磷酸肌酸合用，Rot+PCr+Caf表示能量代谢抑制剂与磷酸肌酸与咖啡因合用，Rot+PEP表示能量代谢抑制剂与磷酸烯醇式丙酮酸合用，Rot+PEP+Caf表示能量代谢抑制剂与磷酸烯醇式丙酮酸与咖啡因合用。

图12、高能化合物提高大鼠的空间记忆优于Memantine（美金刚）

图中，Relative efficacy（%）表示相对疗效，UT（untreated）表示未用药物的对照组动物，Rot表示能量代谢抑制剂，Rot+MeM表示能量代谢抑制剂与美金刚合用，Rot+ATP表示能量代谢抑制剂与腺苷三磷酸合用，Rot+PEP表示能量代谢抑制剂与磷酸烯醇式丙酮酸合用，Rot+PCr表示能量代谢抑制剂与磷酸肌酸合用，Rot+ACoA表示能量代谢抑制剂与乙酰辅酶A合用，Rot+GTP表示能量代谢抑制剂与鸟苷三磷酸合用，Rot+DPG表示能量代谢抑制剂与1,3-二磷酸甘油酸合用，Rot+SAM表示能量代谢抑制剂与S-腺苷甲硫氨酸合用，Rot+SCoA表示能量代谢抑制剂与琥珀酰辅酶A合用，(Rot+PEP表示能量代谢抑制剂与磷酸烯醇式丙酮酸合用，Rot+PCr表示能量代谢抑制剂与磷酸肌酸合用，Rot+ACoA表示能量代谢抑制剂与合用)+Caf表示与咖啡因合用。

具体实施方式

实施例1片剂

辅料（玉米淀粉150g，交联羧甲基纤维素40g，微晶纤维素50g）

制得1000片，每片0.5g

实施例2片剂

辅料（玉米淀粉100g，甘露醇75g，硬脂酸镁5g，藻酸钠25g）

制得1000片，每片0.5g

实施例3注射粉剂

磷酸肌酸50g、乙酰辅酶A37.5g

辅料（山梨醇10g、聚乙二醇10g）。

制得1000支，每支含磷酸肌酸50mg、乙酰辅酶A37.5mg

实施例4冻干粉针

磷酸烯醇式丙酮酸5g、乙酰左旋肉碱10g和焦磷酸10g

辅料（甘露醇2.5g）

制得1000支，每支含磷酸烯醇式丙酮酸5mg、乙酰左旋肉碱10mg和10mg焦磷酸

以上所述实施例仅仅是本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。

Claims (14)

1.一种防治老年神经退行性疾病的高能物质，其特征在于，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸肌酸、乙酰辅酶A、腺苷三磷酸、左旋肉碱、S-腺苷甲硫氨酸、鸟苷三磷酸、胞苷三磷酸、焦磷酸、1,3-二磷酸甘油酸、琥珀酰辅酶A中的一种或几种高能化合物及其衍生物。

2.如权利要求1所述高能物质,其特征在于，所述高能物质包括磷酸肌酸和乙酰辅酶A，所述磷酸肌酸和乙酰辅酶A的重量份配比为0.1-2：0.1-1.5；优选的磷酸肌酸和乙酰辅酶A的重量份配比为1：0.75。

3.如权利要求2所述高能物质,其特征在于，所述高能物质还包括1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸，所述磷酸肌酸、乙酰辅酶A、1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸的重量份配比为0.1-2：0.1-1.5：0.1-1：0.1-1.5；优选的磷酸肌酸、乙酰辅酶A、1,3-二磷酸甘油酸、腺苷三磷酸的重量份配比为1：0.75：0.5：0.75。

4.用权利要求3所述高能物质制备的片剂，其特征在于，制备所述片剂的原料重量份组成为：

5.如权利要求1所述高能物质,其特征在于，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸，所述磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸的重量份配比为0.1-1：0.1-2：0.1-2；优选的所述磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰左旋肉碱和焦磷酸的重量份配比为0.5-1：0.5-1.5：0.5-2。

6.如权利要求1所述高能物质,其特征在于，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸，所述磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸的重量份配比为0.1-2:0.1-1.2：0.1-2：0.1-1.5；优选的所述磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰辅酶A、胞苷三磷酸、焦磷酸的重量份配比为0.5-1:0.6-1：1-2：0.6-1。

7.用权利要求6所述高能物质制备的片剂，其特征在于，制备所述片剂的原料重量份组成为：

8.如权利要求1所述高能物质与增效剂制成组合物，其特征在于，所述增效剂为另外一种活性成分，所述活性成分包括但不限于咖啡因，尼古丁，卵磷脂，牛磺酸；或者所述增效剂为脂质体，所述脂质体可与所述高能化合物结合得到纳米脂质体。

9.如权利要求1所述高能物质与增加细胞保护剂制成的组合物，其特征在于，所述增加细胞保护剂为抗氧化剂，所述抗氧化剂包括白藜芦醇、维他命；或者所述增加细胞保护剂为免疫力或血液循环增强剂，所述免疫力或血液循环增强剂包括中草药；或者所述增加细胞保护剂为神经介质稳定剂或抗炎剂，所述神经介质稳定剂或抗炎剂包括他克林（Tacrine）、盐酸多奈哌齐、氢溴酸加兰他敏、扑热息痛。

10.如权利要求1所述高能物质与药用辅料制成的制剂，其特征在于，所述制剂包括口服制剂、注射制剂，所述口服制剂包括片剂、散剂、胶囊、口服液、颗粒剂，所述注射制剂包括无菌粉剂和注射液，所述无菌粉剂包括冻干粉针，所述注射液包括肌肉注射液、静脉注射液、颅内注射液和脊髓注射液；

所述口服制剂的药用辅料包括玉米淀粉，明胶，交联羧甲基纤维素，微晶纤维素,甘露醇，磷酸二钙，羧甲基淀粉钠和藻酸；所述注射制剂的药用辅料包括悬浮剂、增溶剂、防腐剂、表面活性剂、润湿剂和着色剂。

11.如权利要求1所述高能物质与药用辅料制成的缓释剂型，其特征在于，所述缓释剂包括骨架型缓释剂、包衣缓释剂、缓释微囊、多层缓释片、缓释胶囊、磁性缓释制剂、树脂缓释剂和缓释膜剂。

12.一种高能物质在防治老年神经退行性疾病的药物中的应用，所述高能物质包括磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸肌酸、乙酰辅酶A、腺苷三磷酸、左旋肉碱、S-腺苷甲硫氨酸、鸟苷三磷酸、胞苷三磷酸、焦磷酸、1,3-二磷酸甘油酸、琥珀酰辅酶A中的一种或几种高能化合物及其衍生物。

13.如权利要求12所述的高能物质在防治老年痴呆、老年性肌肉萎缩、骨质疏松、脑血栓疾病、小脑萎缩症、多发性硬化症、帕金森氏病、原发性侧索硬化、脊髓性肌萎缩症的药物中的应用。

14.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述高能物质的每日剂量范围为5-100毫克；优选的所述高能物质的每日剂量范围为10-50毫克。

Images