CN103505450B

CN103505450B - 洛铂在制备治疗前列腺癌药物中的应用

Info

Publication number: CN103505450B
Application number: CN201210208664.8A
Authority: CN
Inventors: 窦啟玲; 王平; 隋东虎; 冯志刚
Original assignee: Guizhou Yibai Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Guizhou Yibai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-06-25
Filing date: 2012-06-25
Publication date: 2016-03-09
Anticipated expiration: 2032-06-25
Also published as: CN103505450A

Abstract

本发明涉及洛铂在制备治疗前列腺癌药物中的应用，特别是在制备治疗非激素依赖性前列腺癌药物中的应用，所述洛铂的有效治疗量为20-50mg/m²体表面积，本发明为前列腺癌提供了新的治疗药物并拓展了洛铂及其制剂的临床应用。

Description

洛铂在制备治疗前列腺癌药物中的应用

技术领域

本发明涉及洛铂在制备治疗前列腺疾病癌中的应用，属于化学药物新用途的领域。

背景技术

前列腺癌，是发生于男性前列腺组织中的恶性肿瘤，是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果。前列腺癌的发病率具有明显的地理和种族差异。在欧美等发达国家和地区，它是男性最常见的恶性肿瘤，其死亡率居各种癌症的第二位；在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势。前列腺癌的病因尚未查明，可能与遗传、环境、性激素等多种因素有关。前列腺分泌功能受雄激素睾九酮调节，促性腺激素的黄体生成素发挥间接作用。2004年美国一项研究发现了一个能够增加男性前列腺癌风险的基因KLF6(Kruppe样因子6)。该研究表明这种与细胞生长有关的基因的一个常见变异体能够使前列腺癌风险增加50%。前列腺癌常有排尿障碍，腰部、骶部、坐骨神经等疼痛，淋巴结或血行转移症状，以及日渐虚弱、消瘦乏力、进行性、恶病质或肾功能衰竭的全身症状。

防治前列腺癌，有中药治疗、内分泌治疗双磷酸盐药物治疗以及免疫治疗等方法，但利用抗肿瘤药物治疗前列腺癌，是近几年来才受到重视的，这主要是因为约20%～30%的前列腺癌不依赖雄激素。化疗主要适合晚期转移性前列腺癌病人，经内分泌治疗或放射治疗失败后，可采用化疗。作为辅助性治疗往往可以起到内分泌治疗及放疗无法替代的效果。

洛铂(Lobaplatin，D-19466)又名洛巴铂，是继顺铂、卡铂之后由德国爱斯达制药股份有限公司(ASTAMedicaAG)研发的第三代铂类抗肿瘤药物。其化学名称为：1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂。分子式为C₉H₁₈N₂O₃Pt，分子量为397.34。研究表明，洛铂对多种动物和人肿瘤细胞株有明确的细胞毒作用，与顺铂和卡铂的抑瘤作用相当或者更好，毒性作用与卡铂相同，且与顺铂无交叉耐药。抗癌活性强，毒性较小，溶解度好，在水中稳定，主要用于乳腺癌、小细胞肺癌及慢性粒细胞性白血病的治疗。

本发明申请人分别在专利申请号为CN201010556219.1、名称为“一种以草酸盐制备洛铂三水合物的方法”和专利申请号为CN201010500619.0、名称为“一种抗肿瘤药物制剂的制备方法”的发明专利中公开了洛铂三水合物的制备方法以及注射用洛铂的制备方法。虽然之前的研究表明洛铂可以用于制备治疗乳腺癌、小细胞肺癌等多种病症，但未见利用洛铂及其制剂对前列腺癌方面的治疗作用的专利文献和研究报道。本申请人在随后的研究中还意外的发现，洛铂及其制剂可以用于前列腺癌的治疗。

发明内容

本发明的目的是提供洛铂的一种新用途，实质上是洛铂在制备治疗前列腺癌症药物中的应用，尤其是洛铂在制备治疗非激素依赖性前列腺癌药物中的应用。

所述洛铂的有效治疗量为20-50mg/m²体表面积，优选30-40mg/m²体表面积。

所述的应用是将洛铂制成注射制剂，如冻干粉针剂、小容量注射液或大容量注射液。优选注射用冻干粉针剂。

在应用时，可以根据需要加入或不加入药学上常规载体，如赋形剂、稳定剂、表面活性剂、调节剂等，按照药学领域的常规方法制备成所需剂型。

给药途径为静脉注射给药。

本发明洛铂及注射用洛铂可以是上市药品，也可以按照专利申请号为CN201010556219.1或CN201010500619.0中的方法来进行制备。

为了使本领域普通技术人员更好的理解本发明，本申请人进行了一系列实验研究，以证明本发明的效果：

具体实施方式：

实施例1、洛铂的体外抗前列腺癌细胞的活性研究

1.1材料及试剂：

1.1.1药物名称和批号：洛铂为白色冻干粉，批号20070501；卡铂为白色粉末，批号20060703；顺铂为黄色粉末，批号36-014050704。多西他赛，白色粉末，批号268070506；紫杉醇，白色粉末，批号030902；长春瑞滨，批号080504。

提供单位：洛铂由海南长安国际制药有限公司提供；卡铂为昆明贵研药业有限公司产品；顺铂、长春瑞滨为江苏豪森药业股份有限公司产品；多西他赛、紫杉醇为江苏恒瑞医药股份有限公司产品。

配制方法：以上药物均用无血清培养基配成相应浓度。

1.1.2细胞株

PC-3、DU145、LNCAP：人前列腺癌；均购自AmericanTypeCultureCollection（ATCC）。按照所提供的说明书培养。

1.3试剂及仪器

RPMI-1640、DMEM购自GibcoBRL公司；胎牛血清购自Hyclone公司；酶标仪：连续光谱光密度酶标仪，型号SPECTRAmax190，MolecularDevices公司；SRB购自Sigma。

1.2研究方法：MTT法；SRB法

1.2.1SRB法：细胞以含10％胎牛血清的培养液培养，使细胞一直处于对数生长期。细胞接种于96孔培养板，密度1-5×10⁴/ml。37℃，5％CO₂培养箱预培养24小时加药，药物设5－7个浓度，每个浓度设2个复孔，连续作用72小时。药物作用结束后，用三氯乙酸(TCA)固定细胞，清洗后加入SRB工作液，洗涤，用Trisbase溶解与蛋白结合的SRB，SPECTRAmax190酶标仪565nm波长下测定每个小孔的OD值。空白对照孔加20μl培养液。根据OD值，计算细胞生长抑制率：

抑制率(%)=(对照组OD值-用药组OD值)/对照组OD值×100%

根据不同浓度下药物对细胞生长的抑制率,以Logit方法计算IC₅₀值。生物统计软件程序来源于<<药理学计算与程序>>一书，人民卫生出版社1988年版，张文贵主编。

1.2.2MTT法：细胞以含10％胎牛血清的培养液培养，使细胞一直处于对数生长期。细胞接种于96孔培养板，密度1-5×10⁴/ml。37℃，5％CO₂培养箱预培养24小时加药，药物设5－7个浓度，每个浓度设2个复孔，连续作用72小时。药物作用结束后，加入MTT，继续培养4小时，加入三联液培养过夜。然后用SPECTRAmax190酶标仪在580nm波长下测定每个小孔的OD值。空白对照孔加20μl培养液。

数据处理过程同SRB法。

1.3试验结果

洛铂和顺铂均明显抑制体外培养的人前列腺癌细胞的生长，抑制作用具有明显的剂量依赖性，二者活性相当，而卡铂的活性明显较弱，见表1。

表1洛铂、顺铂和卡铂对体外培养前列腺癌细胞的IC₅₀总结

注：IC50又称半抑制浓度（或称半抑制率），指被抑制一半时抑制剂的浓度，即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度，IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低。

1.4试验结论

洛铂单用明显抑制多种体外培养的人前列腺癌细胞增殖；其活性与顺铂相当，明显强于卡铂。

实验例2、洛铂对人前列腺癌的体内疗效研究

2.1材料和试剂：

2.1.1药物名称和批号：

洛铂：白色粉末，海南长安国际制药有限公司生产，批号20070501；

卡铂：白色粉末，购自昆明贵研药业有限公司，批号20060703；

顺铂：黄色粉末，购自江苏豪森药业股份有限公司，批号36-014050704。

以上均为原料药。

2.1.2配制方法：洛铂、卡铂、顺铂均用5％GS配成相应浓度。

2.1.3实验动物

雄性BALB/cA-nude裸小鼠，6-7周，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。合格证号：SCXK（沪）2003－0003。饲养环境：SPF级。

2.2试验方法：

裸小鼠皮下接种人前列腺癌PC-3、DU145或LNCAP细胞，待肿瘤生长至100-300mm³后，将动物随机分组。给药剂量和给药方案见相应的表格。每周测2－3次瘤体积，称鼠重，记录数据。肿瘤体积（V）计算公式为：

V＝1/2×a×b²其中a、b分别表示长径、宽径。

2.3试验结果：

2.3.1洛铂对人前列腺癌PC-3的疗效洛铂明显抑制PC-3的生长，抑制作用具有明显的剂量依赖性。高剂量给药(15mg/kg)时，有1只小鼠出现药物相关性死亡。洛铂的疗效强于卡铂、弱于顺铂；而其毒性小于顺铂，大于卡铂。见表2。

2.3.2洛铂对人前列腺癌DU145的疗效与对PC-3的作用类似，洛铂同样剂量依赖性地抑制DU145的生长；其疗效和毒性介于顺铂和卡铂之间。见表3。

2.3.3洛铂对人前列腺癌LNCAP的疗效洛铂剂量依赖性地抑制LNCAP的生长；其疗效和毒性介于顺铂和卡铂之间。见表4。

表2洛铂、卡铂、顺铂对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制的疗效

注：d0:第一次给药时间；dn：第一次给药后20天；ivd0、7：静脉注射第0、7天；TV：肿瘤体积；RTV：相对肿瘤体积；*P<0.01vs对照

表3洛铂、卡铂、顺铂对人前列腺癌DU145细胞生长抑制的疗效

注：d0:第一次给药时间；dn：第一次给药后16天；ivd0、7：静脉注射第0、7天；TV：肿瘤体积；RTV：相对肿瘤体积；*P<0.01vs对照

表4洛铂、卡铂、顺铂对人前列腺癌LNCAP细胞生长抑制的疗效

2.4结论：

洛铂明显抑制人前列腺癌PC-3、DU145、LNCAP的生长，抑制作用具有剂量依赖性。其疗效大于卡铂，略小于顺铂；而毒性大于卡铂，小于顺铂。上述试验结果表明洛铂及其制剂可以应用于前列腺癌的治疗。

实验例3、洛铂与顺铂对照治疗非激素依赖性前列腺癌的临床试验

3.1临床资料：共计观察320例，年龄40-75岁，全部病例均经影像学诊断，并经前列腺癌穿刺病理证实为前列腺癌；经抗雄激素治疗明显下降，以后又呈逐渐上升的趋势；骨髓造血功能无明显受损，肝肾功能基本正常；6个月内未接受过放射治疗或紫杉醇类化疗或其他治疗，预计生存期在3个月以上。洛铂组242例，顺铂组78例。

3.2实验用药：

洛铂1：洛铂原料药，海南长安国际制药有限公司生产，批号为20080503；

洛铂2：按照专利申请CN201010556219.1实施例3的方法制备；

洛铂3：按照专利申请CN201010500619.0实施例1的方法制备；

顺铂原料药：齐鲁制药有限公司生产，批号为003012CF。

3.2方法：洛铂（LBP）20mg/m²、30mg/m²、40mg/m²、50mg/m²分别在每周期第1天使用；顺铂(DDP)80mg/m²每周期第1天使用，静脉滴注时间>3小时，接受DDP之前需按照说明书进行预防用药。28天为1个疗程，共进行6个疗程的化疗。化疗结束后每周检查血常规，每次化疗前均检查生化常规、PSA（前列腺特异型抗原）等，并观察疼痛改善情况及不良反应。注：m²为人体表面积。

3.2.1主要疗效评价标准：

按WHO实体瘤近期疗效评价标准进行评价，分别为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）、进展（PD）,CR+PR计算总有效率（RR），CR+PR+SD计算疾病控制率，毒副反应评价标准以CTCAE3.0为依据。

3.2.2PSA的水平评价：

PSA水平下降≥50%评价为有效，疗效评价主要是根据PSA值、临床症状及生存时间（生存时间以化疗开始日期计算）。

3.3结果：

3.3.1临床疗效：洛铂和顺铂组的疗效评价见下表5。

表5洛铂和顺铂对前列腺癌的疗效评价对比

由表5可知，洛铂和顺铂对前列腺癌的治疗效果相当，且洛铂略好一些，P均大于0.05。另外由上述数据得出，洛铂用量为20-50mg/m²体表面积，有较好治疗效果，优选30-40mg/m²体表面积。

3.3.2PSA的水平评价：

化疗结束后，患者血PSA（前列腺特异型抗原）降至正常水平者（<4ng/ml）洛铂组平均22例，顺铂组19例，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；PSA值下降≥50%者洛铂组平均31例，顺铂组28例，两组比较差异无统计学意义；PSA值下降不明显者洛铂组平均28例，顺铂组31例，两组比较差异无统计学意义，见表6。

表6洛铂与顺铂对前列腺癌患者PSA值的影响

3.4结论：由洛铂和顺铂对前列腺癌的临床疗效和对PSA的水平评价结果可以看出，洛铂和顺铂在治疗人体的非激素依赖性前列腺癌方面，具有相似的疗效。

Claims

1.洛铂在制备治疗非激素依赖性前列腺癌药物中的应用，其特征在于：洛铂的有效治疗量为30-50mg/m²体表面积。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：洛铂的有效治疗量为30-40mg/m²体表面积。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于：是将洛铂制成注射制剂，所述的注射制剂为冻干粉针剂、小容量注射液或大容量注射液。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述注射制剂是冻干粉针剂。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述注射制剂是通过加入或不加入药学上常规的载体采用常规方法制备而成，载体可选自赋形剂、稳定剂、表面活性剂、调节剂。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于：该洛铂制剂的给药途径为静脉注射给药。