CN103491976B - 用于处理与缺乏血液供给、休克和神经损伤相关的疾病的方法和组合物 - Google Patents

Abstract

一种药物组合物，其包含：脂质组分；两亲型乳化剂和极性液体载体。所述脂质组分和两亲型乳化剂在极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)。所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物，并可以被用于处理与缺乏血液供给相关的疾病和升高血压。

Description

用于处理与缺乏血液供给、休克和神经损伤相关的疾病的方法和组合物

相关申请

本申请要求于2011年1月14日提交的美国临时申请第61/432,919号和于2011年5月27日提交的美国临时申请第61/490,816号的优先权。通过引用方式将上述两件申请的全部内容并入到本申请中。

技术领域

技术领域为医疗处理，特别是，用于处理与缺乏血液供给、休克和神经损伤相关的疾病的方法和组合物。

背景技术

休克为由包括失血、血管舒张或脱水的原因导致循环不足的结果。循环下降使细胞丧失氧和营养，并激活强大的炎症应答。在由导致大量失血的战争、事故和攻击造成的损伤或由于大面积感染造成的损伤之后出现这种状态。目前的治疗方法为快速输入液体以恢复循环容量。这样的快速输入液体可以与直接使血管收缩的药剂结合。输入液体和施用使血管收缩的药物都会引起血压提升。然而，休克的病理生理学远比通过简单地增加容量和对血管施加压力以形成更高的血压就能矫正的情形复杂。一旦已经发生休克并持续更长时间，大量的称作介质的有毒物质被释放至血液中。这些介质引发危险的状态，这种危险的状态与在导致休克的事件之前存在的状态明显不同。

用于处理休克的目前的方法效果有限。复苏液的实例为以下二者之一：包括从血液中快速扩散出去的多种盐(例如，林格氏乳酸盐)的类晶体和包括胶体的类晶体或者在血液中停留更长时间的大分子(例如，包含羟乙基淀粉、由天然来源的淀粉得到血容量扩张剂)。使用二者已经观察到大量的并发症。羟乙基淀粉促进出血，这在大量失血后是起相反作用的性能。过度依赖血管收缩药将会升高血压，但却降低了组织灌注，这会导致组织坏死和死亡。

因此，需要能够携带氧和营养物至组织并且减少炎症反应的低成本治疗性容量扩张剂。

发明内容

本发明的一个方面涉及包含脂质组分、两亲型乳化剂和极性液体载体的药物组合物。所述脂质组分和两亲型乳化剂在极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)。所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物。

本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其包含：10%-80%(w/v)的选自大豆油、芡欧鼠尾草籽油(chia bean oil)和海藻油(algae oil)的脂质组分；1%-5%(w/v)的选自卵黄磷脂和α-磷脂酰胆碱的两亲型乳化剂；2%-5%(w/v)的甘油或甘露醇；5%(w/v)的白蛋白；0.1fM-10mM的组氨酸或半胱氨酸；以及极性液体载体，其中，所述脂质组分和两亲型乳化剂在极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)，其中，所述LM具有100～500nm的平均直径，以及其中，所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物。

本发明的另一方面涉及用于升高休克患者的血压的方法。所述方法包括如下步骤：向所述患者输入有效量的药物组合物，其包含脂质组分、两亲型乳化剂和极性液体载体，其中，所述脂质组分和两亲型乳化剂在极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)，其中，所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物，其中，以大于200ml/min的速率以等于或大于休克患者的正常血容量10%的量输入所述药物组合物。

本发明的另一方面涉及用于处理休克患者的方法。所述方法包括：(a)向所述患者输入有效量的第一药物组合物，其包含：含有大豆油的第一脂质组分、第一两亲型乳化剂和第一极性液体载体，其中，所述第一脂质组分和第一两亲型乳化剂在第一极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)，其中，所述第一药物组合物不含血红素和碳氟化合物；和(b)向所述患者输入有效量的第二药物组合物，其包含：含有芡欧鼠尾草籽油的第二脂质组分、第二两亲型乳化剂和第二极性液体载体，其中，所述第二脂质组分和第二两亲型乳化剂在第二极性液体载体中形成自由移动的LM，其中，所述第二药物组合物不含血红素和碳氟化合物。

附图说明

将参照下面的附图进行详细的描述，其中类似的附表标记指示类似的成分，其中：

图1为包含脂质核(黄色)并被乳化剂包裹的胶束的图示，所述乳化剂可以为磷脂或其它两亲型分子(淡紫色头部黑色尾部)。所述极性液体载体围绕所述胶束。这些组分一起形成乳液。所述极性液体可以为水。这种乳液可以通过超声向混合物增加能量、使用均化器或微流化器而形成。

图2为显示胶束浓度与氧含量之间的线性关系的图。使用质谱分析法测量氧含量。指定为“运载容量”的Y轴为其中两种液体均暴露在相同的条件下，乳液中的氧含量与水中的氧含量的比率。X轴为包含胶束的乳液。通过对由1～3克的精制大豆油、0.1克的大豆卵磷脂和0.24克的甘油组成的混合物和将该混合物定容至10ml的水进行超声处理来制备乳液。各点为5个样品的平均值。

图3为显示在严重的失血性休克之后在用不同的药物组合物处理的小鼠中的收缩压的图表。LM为仅商业购买型号20%大豆油的乳液(英脱利匹特(Intralipid))。RL为林格氏(L)乳酸盐。在所有的[复苏]液体的实验中，在输液之前现测的平均血压为4.6+/-1.2mmHg。减去输入液体之前现测的收缩压。各点为6-7个小鼠的平均值。使用正反非配对学生t检验，对于图3和图4的收缩压和舒张压，**均表示=p<0.01，*均表示p<0.05。

图4为显示在严重的失血性休克之后在用不同的药物组合物处理的小鼠中的舒张血压的图表。LM为仅商业购买型号20%大豆油的乳液(英脱利匹特)。RL为林格氏(L)乳酸盐。在所有的实验中，在输液之前现测的平均血压为4.6+/-1.2mmHg。减去输入液体之前现测的舒张压。各点为6-7个小鼠的平均值。P值与在图3中的相应的收缩压的意义相同。

图5为显示输液之后的平均血压占出血前平均血压的百分比的图，其中小鼠在严重失血性休克后用包含白蛋白的[复苏]液体处理或者小鼠用自体血(shed blood)处理。零时间点为在起始输液后测量的第一血压。在任何组的输液前血压之间没有显著差异。各点为6-7个小鼠的平均值。VS为5%的白蛋白与20%的Intralipid的组合。NSA为在154mM NaCl中的5%的白蛋白。RLA为在林格氏乳酸盐中的5%的白蛋白。使用正反、非配对学生t检验，在5、15和30分钟时，VS显著高于(p<0.05)自体血。

具体实施方式

本发明的一个方面涉及一种用于使用药物组合物处理与缺乏血液供给相关的疾病的药物组合物。所述药物组合物包含亲脂性组分、乳化剂和极性液体载体。所述亲脂性组分被分散在极性液体载体中以形成乳液，该乳液通常包含具有极性外表面和用亲脂性组分和/或其它疏水分子填充的内疏水空间的单层胶束。在某些实施方式中，也可以采用由脂质双层组成的脂质体。在天然的或改性的血红素不存在的情况下，可以使用所述药物组合物以提升血压并将氧运载至组织。所述药物组合物不含血红素、血红素衍生物、全氟化碳或全氟化碳衍生物。

如在本文中使用，如果组合物不包含任何血红素、血红素衍生物、全氟化碳和全氟化碳衍生物，或者如果组合物包含低于0.1%w/w水平的血红素、血红素衍生物、全氟化碳和全氟化碳衍生物，即为组合物“不含血红素、血红素衍生物、全氟化碳和全氟化碳衍生物”。

如在图1中所示，脂质组分和乳化剂形成被极性载体液体(显示为在两亲型分子的周围的白色空间)包围的含脂质胶束(LM)。所述两亲型乳化剂分子占据脂质界面的外围。两亲型乳化剂分子的亲脂性末端向内指向脂质，并且两亲乳化剂分子的极性末端向外指向极性载体液体。由于相对于水或其它水性环境，疏水气体(例如，氧)优先溶解在胶束的脂质核中，本发明的药物组合物提供了运载氧和其它疏水气体至身体组织的能力。由本发明的LM组成的乳液能够反转失血性休克的低血压特征，并且吸收和释放亲脂性气体，例如，氧气和一氧化氮。在药物组合物中的LM还能够产生渗透力并吸收血管开放的介质(例如，前列腺素、一氧化氮、白细胞三烯和血栓素(hromboxane)以及其它亲脂性介质，例如，血小板激活因子。

在某些实施方式中，LM具有10至5000nm范围内的直径。具有10至5000nm范围内的直径的LM的胶体性能促进它们停留在血管内的空间。在其它实施方式中，LM具有100至500nm范围内的直径。在又一其它实施方式中，LM具有小于100nm的直径(纳米乳液)。在任何病因为毛细血管渗透性提高的休克中，纳米乳液将比更大的结构更易于进入胞间隙。在某些实施方式中，所述纳米乳液包含直径为2-300nm的胶束的混合物。在其它实施方式中，所述纳米乳液包含具有大约1-30纳米的平均直径的胶束(纳米-胶束)。在这种尺寸下，所述胶束能够通过上皮细胞层并进入胞间隙。在其中血管空间的渗透性没有提高或者为了促进亲脂性介质的细胞吸收或为了促进可以有利地调节细胞内机制的分子或细胞组分的进入的情况下，可以采用纳米-胶束。这种调节作用也可以在胞间隙内起效，特别是在血管壁渗透性升高的情况下。例如，由失血或脓血病导致的休克的一个机制为毛细血管渗漏。这种毛细血管渗漏是由内皮细胞死亡和嗜中性粒细胞作用导致的。它是由细胞活素(例如IL-1和TNF)以及一氧化氮介导的。嗜中性粒细胞粘附到损伤的内皮细胞上，并释放活性氧簇和细胞壁损伤酶(例如，髓过氧化物酶)。所述纳米-胶束通过毛细血管渗漏可以进入间质并在胞间隙内提供抗炎症作用。

在一些实施方式中，所述药物组合物包含具有100～400nm范围内的直径的大胶束和具有在1～30nm范围内的直径的纳米-胶束的混合物。较大的胶束将趋向于停留在血管内空间中并保持血管内容量，而纳米-胶束可以进入间质，在那里它们通过阻挡活性氧簇并输送有益分子，例如凋亡抑制剂(如Z-VAD-FMY、凋亡抑制肽)或线粒体完整性保护剂（如环孢霉素A、线粒体内孔开口抑制剂)来有利地影响存活率。纳米-胶束还可以负载信号转导的调节剂(例如，二酰基甘油或环-GMP)或抗氧化剂(例如，辅酶Q10)。在某些实施方式中，大胶束占药物组合物的10～40%(w/w)，而纳米-胶束占药物组合物的5～30%(w/w)。在其它实施方式中，大胶束(100-400nm)是由大豆油制成，而纳米胶束(1-30nm)是由芡欧鼠尾草籽油制成，其具有比大豆油更好的抗炎症作用。

在亲脂性核中的疏水气体的溶解性促进这些气体向组织的吸收和运送。也可以在用于调节血管紧张度和细胞凋亡过程的乳液中运载内源性产生的气体一氧化碳、一氧化氮和硫化氢。也可以负载氧用于输送至组织并增进有氧代谢。氙和氩为在失血性休克和其它病理状态(例如癫痫发作)中可以提供大脑保护的疏水性气体。这些气体的输送至大脑也可以缓解疼痛。

在某些实施方式中，在本发明的药物组合物中的胶束为自由移动的胶束，其未被包裹成任何类型的粒子。此外，胶束壁是由单层或双层的两亲型乳化剂分子组成，从而所述胶束可以容易地与接触所述药物组合物的组织的细胞膜融合。此外，在本发明的药物组合物中的胶束不含血红素、血红素衍生物、全氟化碳和全氟化碳衍生物。

与缺乏血液供给相关的疾病包括，但不限于，由出血、脱水、呕吐、严重烧伤、全身炎症反应综合征(SIRS)和药物(例如，利尿剂或血管舒张剂)导致的血容量不足。严重的血容量不足可能与毛细血管渗漏(CL)一起发生，其存在于的不同的疾病中，例如，多器官功能障碍(MODS)、败血病、外伤、烧伤、失血性休克、体外循环手术后(post-cardiopulmonary bypass)、胰腺炎和系统性毛细血管渗漏综合症，并在大量的住院患者(hospital patient)中引起发病和死亡。

亲脂性组分

所述亲脂性组分可以为任何药学上可接受的亲脂物质，例如脂质。如在图1中所示，亲脂性组分在胶束的疏水核中被运载。所述疏水核还可以由可以增进疏水气体吸收的添加剂组成，例如含支链的分子，其一个实例为三正辛基胺。在其它实施方式中，所述亲脂性组分以如红细胞血影(erythrocyteghosts)的结构的形式被俘获。

如在本文中所使用，术语“脂质”指的是自然界存在的或非自然界存在的脂溶性物质。脂质的实例包括，但不限于，脂肪酰基(fatty acyls)、甘油脂、磷脂、鞘脂、甾醇脂(sterol lipids)、异戊烯醇脂(prenol lipids)、糖脂(saccharolipids)、聚酮、非天然脂、阳离子脂、两亲型烷基氨基酸衍生物、二烷基二甲基铵(adialkyldimethylammonium)、聚甘油烷基醚、聚氧乙烯烷基醚、三正辛基胺、硼酸、三(3,5-二甲基-4-庚基)酯、甘油三酯、甘油二酯和其它酰基甘油，例如，四聚甘油(tetraglycerol)、五聚甘油(pentaglycerol)、六聚甘油(hexaglycerol)、七聚甘油(heptaglycerol)、八聚甘油(octoglycerol)、九聚甘油(nonaglyceol)和十聚甘油(decaglycerol)及其混合物。在某些实施方式中，所述亲脂性组分包含大豆油、芡欧鼠尾草籽油或海藻油。

在一个实施方式中，所述亲脂性组分为大豆油。所述亲脂性组分还可以从具有高浓度的抗炎症的Ω3脂肪酸的芡欧鼠尾草籽中得到。大豆油为形成血栓的和促凝血的，而因此将优选用于当需要凝固时的失血性休克的开始阶段。在出血不再是问题时，富含Ω3脂肪酸的油因其抗血栓形成性能而将是有利的。富含Ω3脂肪酸的油包括，但不限于，芡欧鼠尾草油(chia oil)、海藻油、南瓜油、亚麻籽油或鱼油。

在某些实施方式中，所述脂质组分包含具有顺式构型或反式构型的一个以上的链烯基官能团的不饱和脂肪酸。顺式构型表示相邻的氢原子或其它基团在双键的同侧。在反式构型中，这些部分在双键的不同侧。双键的刚性冻结了其构型，以及在顺式异构体的情况下，导致链弯曲并限制脂肪酸的构象自由。一般而言，链具有越多的双键就具有越低的挠性。当链具有许多顺式键时，在其最易得的构象中，其变得非常弯曲。例如，带有一个双键的油酸在其中具有“弯折(kink)”，而带有两个双键的亚油酸具有更显著的弯曲。带有三个双键的α-亚油酸有利于形成钩形。这种效果为：在受限的环境中，例如，当脂肪酸为在脂质双层中的磷脂部分或在脂质液滴中的甘油三酯部分时，顺式键限制了脂肪酸被紧密包裹的能力，并因此可以影响膜或脂肪的熔融温度。在一些实施方式中，所述脂质组分包含至多1%、2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%(w/w)的具有一个以上的顺式构型链烯基官能团的不饱和脂肪酸。

顺式-不饱和脂肪酸的实例包括，但不限于，4-癸烯酸、5-十二碳烯酸、粗租酸、棕榈油酸、油酸、反油酸、异油酸、岩芹酸、顺式9-二十碳烯酸、二十碳烯酸、芥酸、廿二烯酸、神经酸、西门木烯酸和三十碳烯酸(lumepueicacid)；n-3型不饱和脂肪酸，例如，α-亚麻酸、十八碳四烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸；n-6型不饱和脂肪酸，例如，亚油酸、反亚油酸(linoelaidic acid)、γ-亚麻酸、双-高-γ-亚麻酸和花生四烯酸；共轭脂肪酸，例如，共轭亚油酸和α-桐酸；在其5-位具有双键的脂肪酸，例如，皮诺敛酸、二十碳三烯酸(sciadonic acid)、刺柏酸和十八碳三烯酸(columbinic acid)；除了上述列出之外的多价不饱和脂肪酸，例如，十六碳三烯酸(hiragonic acid)、十八碳-4,8,12,15-四烯酸、鲱鱼酸和尼史尼克酸；支链脂肪酸，例如，异丁酸、异戊酸、异酸(iso acid)和反异酸(anti-iso acid)；羟基脂肪酸，例如，α-羟酸、β-羟酸、霉菌酸和多羟基酸；环氧-脂肪酸；酮-脂肪酸；以及环状脂肪酸。在某些实施方式中，所述亲脂性组分还包含两亲型分子。

所述脂质组分可以组成药物组合物的大约1-80%、5-50%(w/v)、10-40%(w/v)或10-30%(w/v)。在某些实施方式中，所述脂质组分组成药物组合物的大约10%、大约15%、大约20%、大约25%、大约30%和大约35%(w/v)。

乳化剂

所述乳化剂可以为将使其疏水尾在胶束的亲脂性核中并且使其亲水端与极性载体接触的任何两亲型化合物或两亲型分子。所述乳化剂的实例为蛋磷脂、纯磷脂或两亲型肽。

如在本文中使用，术语“两亲型化合物”指的是同时具有亲水性和亲脂性性能的化合物。两亲型化合物的实例包括，但不限于，自然界存在的两亲型化合物，例如，磷脂、胆固醇、糖脂、脂肪酸、胆汁酸和皂苷；以及合成的两亲型化合物。

磷脂的实例包括天然的和合成的磷脂，例如，磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰胆碱、鞘磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂和氢化磷脂。

糖脂的实例包括甘油糖脂和鞘糖脂。甘油糖脂的实例包括双半乳糖甘油二酯(例如，双半乳糖二月桂酰甘油酯(digalactosyl dilauroyl glyceride)、双半乳糖二肉豆蔻酰甘油酯(digalactosyl dimyristoyl glyceride)、双半乳糖二棕榈酰甘油酯(digalactosyl dipalmitoyl glyceride)和双半乳糖二硬脂酰甘油酯(digalactosyl distearoyl glyceride))和半乳糖甘油二酯(例如，半乳糖二月桂酰甘油酯、半乳糖二肉豆蔻酰甘油酯、半乳糖二棕榈酰甘油酯和双半乳糖二硬脂酰甘油酯)。鞘糖脂的实例包括半乳糖脑苷脂、乳糖基脑苷脂和神经节苷脂。

甾醇的实例包括胆固醇、胆固醇半琥珀酸酯、3β-[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)氨基甲酰基]胆固醇、麦角固醇和羊毛固醇。

在一个实施方式中，所述乳化剂为蛋磷脂。在另一实施方式中，所述乳化剂为大豆卵磷脂或α-磷脂酰胆碱。

所述乳化剂可以组成药物组合物的大约0.1-5%(w/v)。在某些实施方式中，所述脂质组分组成药物组合物的大约0.5%、大约0.75%、大约1%、大约1.2%、大约1.5%和大约2%(w/v)。

极性液体载体

所述极性液体载体可以为能够与脂质形成乳液的任何药学上可接受的极性液体。术语“药学上可接受的”指的是具有如下性能的分子体和组合物：具有足够纯度并且质量适合用于本发明的组合物或药剂的制剂中，并且当合适地施用给动物或人时，不会产生有害反应、过敏反应或其它不良反应。由于人用(临床或非处方药)和兽医用都同样地包括在本发明的范围内，药学上可接受的制剂将包括人用或兽医用的组合物和药剂。在一个实施方式中，极性液体载体为水或基于水的溶液。在另一实施方式中，所述极性液体载体为非水的极性液体，例如，二甲基亚砜、聚乙二醇和极性硅酮液体(siliconeliquid)。

基于水的溶液通常包含生理学相容的与全血等渗压或近等渗压的电解质赋形剂。所述载体可以为，例如，生理盐水、盐水-葡萄糖混合物、林格氏溶液、乳酸盐化的林格氏溶液、洛林二氏溶液、克雷伯-林格氏溶液、哈特曼氏平衡盐溶液、肝素化的柠檬酸钠-柠檬酸-右旋糖溶液和聚合物血浆代用品，例如，聚氧化乙烯、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇和环氧乙烷-丙二醇缩聚物。所述药物组合物可以额外地包含其它组分，例如，药学上可接受的载体、稀释剂、填充剂和盐，对其它组分的选择取决于使用的剂型、待处理的疾病、根据本领域的普通技术人员的决定的所要实现的特定目的和这样的添加剂的性能。

乳液的气体运载容量

以例如胶束和/或红细胞血影形式的在乳液中的脂质组分为乳液提供了比纯粹的水溶液运载更大量的亲脂性气体的能力。具体地，所述亲脂性气体溶解进入乳液的亲脂性部分从而与脂质组分和可能存在于乳液的亲脂性部分中的其它疏水液体物质形成均一的溶液。

在一个实施方式中，所述亲脂性气体为氧气。氧气在脂质中的溶解度比在水中的高4.41倍(Battion et al,J.Amer.Oil Chem.Soc.1968,45:830-833)。因此，具有更高脂质含量的乳液会比具有更少脂质含量的乳液能够运载更多的氧。在一个实施方式中，所述乳液具有大约1～80%(w/v)的脂质含量。在其它实施方式中，所述乳液具有大约10-80%(w/v)、20-60%(w/v)、大约20-50%(w/v)、大约20-40%(w/v)或大约20-25%(w/v)的脂质含量。在又一实施方式中，所述乳液具有大约21.8%的脂质含量。在某些实施方式中，所述乳液是通过在常规空气的存在下混合脂质组分和极性液体组分而制备。在其它实施方式中，所述乳液通过使常规空气或纯氧经过乳液鼓泡达到要求的时间而进一步充氧。由于可能形成空气栓塞而不希望在循环中出现气泡，因此将不得不加入气泡捕捉器以除去气泡仅留下已经溶解在胶束核、极性载体中或附着到蛋白质或其它添加剂上的气体。为了避免气泡的产生，也可以通过轻微移动混合物室内的乳液使胶束与富含结合气体的大气达到平衡来将所述气体载入胶束中。载入也可以在大于1个大气压下进行，接着释放压力以允许释放多余的气体。

在另一实施方式中，所述亲脂性气体为氙气(Xe)或氩气(Ar)。在其它实施方式中，所述亲脂性气体为一氧化氮(NO)。在其它实施方式中，所述亲脂性气体为硫化氢(H₂S)。在其它实施方式中，所述亲脂性气体为一氧化碳(CO)。

在一个实施方式中，所述药物组合物包含载入有气体混合物(例如，氧、硫化氢、一氧化碳和/或一氧化氮的混合物)的胶束。在另一实施方式中，所述[复苏]药物组合物包含载入有多种气体的胶束的混合物。例如，胶束的混合物可以包含50%的载入有NO的胶束和50%的载入有O₂的胶束。

刚性的非平面分子

所述[复苏]药物组合物可以进一步包含具有刚性非平面结构的分子。这种分子将为胶束结构的疏水核中的气体分子产生更大的不规则性和更大的空间，从而改善胶束的气体运载容量。这种分子的实例包括，但不限于，(+)纳洛酮、(+)吗啡和(+)纳屈酮。

在一个实施方式中，具有刚性非平面结构的分子为(+)纳洛酮，不同于阿片受体拮抗药(-)纳洛酮，其不会结合到阿片受体上，并且不会像(-)纳洛酮那样增加疼痛。在另一实施方式中，以10^-5-10^-4M的浓度使用(+)纳洛酮。在其它实施方式中，以10^-4M或更高的浓度使用(+)纳洛酮。

在复苏过程中，在导致内皮细胞(EC)损伤和毛细血管渗漏(CL)的再灌注组织（缺血-再灌注损伤）中可以引发炎症过程。在败血病和其它疾病中，可能由所述疾病引发系统性炎症，以及以类似的次序导致EC损伤、CL和需要复苏的最终的低血容量性休克。因此，在一个实施方式中，以产生抗炎症效果的10^-5-10^-4M的浓度使用(+)纳洛酮(Simpkins CO,Ives N,Tate E,JohnsonM.Naloxone inhibits superoxide release from human neutrophils.Life Sci.1985Oct14;37(15):1381-6)。

具有非平面结构的分子还包括具有支链结构的有机分子。这种分子的实例包括，但不限于，三正辛基氨、三正己基胺、硼酸、三(3,5,-二甲基-4-庚基)酯、金属配合的和非金属配合的次卟啉二甲基酯及其衍生物、六苯基硅杂环戊二烯和硅酮聚合物。

血浆组分

所述药物组合物可以进一步包含血浆组分。在一个实施方式中，所述血浆为动物血浆。在另一个实施方式中，所述血浆为人血浆。尽管不想受限于任何特定的科学理论，人们相信施用血液替代品可以将血凝固因子的浓度稀释至不合意的水平。因此，使用血浆作为运载氧组分的稀释剂避免了这个问题。可以通过本领域已知的任何方法采集血浆，条件是红细胞、白细胞和血小板被基本除去。优选地，其是使用自动的血浆单采（plasmaphoresis）仪器得到的。血浆单采仪器为市售可得的，包括，例如，通过超滤或通过离心将血浆从血液中分离的仪器。基于超滤的血浆单采仪器，例如Auto C,A200(由Baxter International Inc.,Deerfield,IL制造)，是合适的，因为其有效地除去了红细胞、白细胞和血小板，同时保留了血凝固因子。

可以使用抗凝血药采集血浆，其中许多抗凝血药为本领域所熟知。优选的抗凝血药为螯合钙，例如柠檬酸盐。在一个实施方式中，0.2-0.5%，优选0.3-0.4%，并且最优选0.38%的最终浓度的柠檬酸钠被用作抗凝血药。所述血浆可以为新鲜的、冷冻的、混合的和/或无菌的。尽管来自外源的血浆可以是优选的，但是使用在配制和施用药物组合物之前从个体那里采集的自体血浆也是在本发明的范围内。

除了来自天然来源的血浆之外，也可以使用合成的血浆。如在此使用的术语“合成血浆”指的是包含至少一种血浆蛋白质的任何水溶液。也可以使用与血浆蛋白质类似的蛋白质。

胶渗压剂(oncotic agent)

在一个实施方式中，除了脂质胶束外，所述药物组合物进一步包含胶渗压剂。所述胶渗压剂是由尺寸足以防止它们穿过毛细血管床的窗孔进入身体组织的组织间隙从而从循环中损失的分子组成。胶渗压剂的实例包括，但不限于，葡聚糖(例如，低分子量的葡聚糖)，葡聚糖衍生物(例如，羧甲基葡聚糖、羧基葡聚糖、阳离子葡聚糖和葡聚糖硫酸酯)，羟乙基淀粉，羟丙基淀粉，支化的、未取代或取代的淀粉，明胶(例如，改性明胶)，白蛋白(例如，人血浆、人血清白蛋白、加热的人血浆蛋白质和重组人血清白蛋白)，PEG，聚乙烯吡咯烷酮，羧甲基纤维素，阿拉伯树胶，葡萄糖，右旋糖(例如，一水合葡萄糖)，低聚糖(例如，寡糖)，多糖降解产物，氨基酸，以及蛋白质降解产物。其中，特别优选的为低分子量葡聚糖、羟乙基淀粉、改性明胶和重组白蛋白。

由于其抗氧化效果，白蛋白也可以用于使活性氧簇与胶束的组分的相互作用最小化，以及其还可以稳定胶束结构。在一个实施方式中，所述胶渗压剂为大约2%、5%、7%或10%(w/v)的白蛋白。在另一实施方式中，所述胶渗压剂为多糖，例如，在30,000至50,000道尔顿(D)的分子量范围内的葡聚糖。在又一实施方式中，所述胶渗压剂为多糖，例如，在50,000至70,000D的分子量范围内的葡聚糖。高分子量的葡聚糖溶液因它们从毛细血管中的较低速的渗漏而更有效地防止组织肿胀。

在一个实施方式中，当与上述讨论的钠、钙和镁的氯盐，来自钠的有机盐的有机离子和己糖一起使用时，多糖的浓度足以达到约为28mm Hg的接近正常人血清的胶体渗透压。

在另一个实施方式中，所述胶渗压剂为药物组合物的2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%或5%，至多30%(w/v)量的甘油或甘露醇。在其它实施方式中，药物组合物包含2-5%w/v量的甘油或甘露醇。

类晶体剂

所述药物组合物可以进一步包含类晶体剂。所述类晶体剂可以为药物组合物组分形式的任何类晶体，其优选能够达到大于800mOsm/l的同渗容摩，即，它使得药物组合物“高渗”。合适的类晶体的实例和它们在药物组合物中的浓度包括，但不限于，在6%w/v葡聚糖中的3%w/vNaCl、7%NaCl、7.5%NaCl和7.5%NaCl。在一个实施方式中，所述[复苏]药物组合物具有800至2400mOsm/l之间的同渗容摩。

当所述药物组合物进一步包含类晶体并且为高渗时，所述药物组合物可以提供优于其它包含胶体组分的组合物的用于快速恢复血液动力学参数的功能性。小容量的高度高渗的类晶体输入(例如，1-10ml/kg)在出血被控制的情况下，在快速并持续恢复可接受的血液动力学参数方面提供明显的益处。在另一实施方式中，使用的脂质乳液为。在另一实施方式中，使用的脂质乳液为20%的。在一个实施方式中，所述脂质包含抗炎脂质，例如，Ω-3脂肪酸。通过加入甘油也可以达到高渗透性。

抗炎药和免疫调节剂

在一个实施方式中，本发明的药物组合物进一步包含抗炎药或免疫调节剂。显示抑制活性氧簇的抗炎药的实例包括，但不限于，组氨酸、白蛋白、(+)纳洛酮、前列腺素D₂、苯基烷基胺类分子。其它抗炎化合物和免疫调节剂药物包括单独使用或组合使用的下列物质：干扰素；干扰素衍生物，包括干扰素β-1b（betaseron）、β-干扰素；前列腺素衍生物，包括伊洛前列素、西卡前列素；糖皮质激素，包括氢化可的松、强的松龙、甲基强的松龙、地塞米松；免疫抑制剂，包括环孢霉素A、甲氧补骨脂素、柳氮磺吡啶、咪唑硫嘌呤、氨甲蝶呤；脂肪氧合酶抑制剂，包括弃白通(zileutone)、MK-886、WY-50295、SC-45662、SC-41661A、BI-L-357；白细胞三烯拮抗药；肽衍生物，包括ACTH及其类似物；可溶性TNF-受体；抗-TNF-抗体；白细胞介素或其它细胞因子的可溶性受体；抗白细胞介素或其它细胞因子的受体的抗体、T-细胞-蛋白；以及钙泊三醇（calcipotriol）及其类似物。

电解质

在一个实施方式中，本发明的[复苏]药物组合物进一步包含一种以上的电解质。在本发明中使用的电解质通常包括多种用于药物用途的电解质。电解质的实例包括钠盐(例如，氯化钠、碳酸氢钠、柠檬酸钠、乳酸钠、硫酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、醋酸钠、甘油磷酸钠、碳酸钠、氨基酸钠盐、丙酸钠、β-羟基丁酸钠和葡萄糖酸钠)，钾盐(例如，氯化钾、乙酸钾、葡萄糖酸钾、碳酸氢钾、甘油磷酸钾、硫酸钾、乳酸钾、碘化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、柠檬酸钾、氨基酸钾盐、丙酸钾和β-羟基丁酸钾)，钙盐(例如，氯化钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙、甘油磷酸钙、泛酸钙和乙酸钙)，镁盐(例如，氯化镁、硫酸镁、甘油磷酸镁、乙酸镁、乳酸镁和氨基酸镁盐)，铵盐(例如，氯化铵)，锌盐(例如，硫酸锌、氯化锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌和乙酸锌)，铁盐(例如，硫酸铁、氯化铁和葡萄糖酸铁)，铜盐(例如，硫酸铜)，以及镁盐(例如，硫酸镁)。在这些中，特别优选的是氯化钠、氯化钾、氯化镁、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、乳酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、乙酸钾、甘油磷酸钾、葡萄糖酸钙、氯化钙、硫酸镁和硫酸锌。

钙、钠、镁和钾离子的浓度通常在所述离子于血浆中的正常生理浓度的范围内。一般而言，这些离子的所需的浓度是由溶解的钙、钠和镁的氯盐得到的。所述钠离子也可以来自溶解的也在溶液中的钠的有机盐。

在一个实施方式中，钠离子浓度在70mM至大约160mM的范围内。在另一实施方式中，钠离子浓度在大约130至150mM的范围内。

在一实施方式中，钙离子浓度在大约0.5mM至4.0mM的范围内。在另一实施方式中，钙离子浓度在大约2.0mM至2.5mM的范围内。

在一个实施方式中，镁离子浓度在大约0至10mM的范围内。在另一实施方式中，镁离子浓度在大约0.3mM至0.45mM的范围内。在本发明的[复苏]药物组合物中最好不包含过量的镁离子，因为高的镁离子浓度不利地影响心肌收缩活性。在本发明的优选的实施方式中，所述溶液包含亚生理(subphysiological)量的镁离子。

在一个实施方式中，钾离子浓度在0-5mEq/l K⁺(0-5mM)，优选2-3mEq/lK⁺(2-3mM)的亚生理范围内。因此，所述药物组合物允许用于稀释在存储的输入血中的钾离子浓度。因此，可以更加容易地控制高浓度的钾离子和潜在的心律失常，以及由其引起的心功能不全。包含亚生理量的钾的药物组合物也可用于个体的血液置换和低温保持的目的。

在一个实施方式中，氯离子浓度在大约70mM至160mM的范围内。在另一实施方式中，氯离子浓度在110mM至125mM的范围内。

离子的其它来源包括钠盐(例如，碳酸氢钠、柠檬酸钠、乳酸钠、硫酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、醋酸钠、甘油磷酸钠、碳酸钠、氨基酸钠盐、丙酸钠、β-羟基丁酸钠和葡萄糖酸钠)，钾盐(例如，乙酸钾、葡萄糖酸钾、碳酸氢钾、甘油磷酸钾、硫酸钾、乳酸钾、碘化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、柠檬酸钾、氨基酸钾盐、丙酸钾和β-羟基丁酸钾)，钙盐(例如，葡萄糖酸钙、乳酸钙、甘油磷酸钙、泛酸钙和乙酸钙)，镁盐(例如，硫酸镁、甘油磷酸镁、乙酸镁、乳酸镁和氨基酸镁盐)，铵盐，锌盐(例如，硫酸锌、氯化锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌和乙酸锌)，铁盐(例如，硫酸铁、氯化铁和葡萄糖酸铁)，铜盐(例如，硫酸铜)，以及镁盐(例如，硫酸镁)。在这些中，特别优选的是氯化钠、氯化钾、氯化镁、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、乳酸钾、乙酸钠、柠檬酸钠、乙酸钾、甘油磷酸钾、葡萄糖酸钙、氯化钙、硫酸镁、氯化胆硷和硫酸锌。

碳水化合物和氨基酸

所述药物组合物可以包含碳水化合物或碳水化合物的混合物。合适的碳水化合物包括，但不限于，简单的己糖(例如，葡萄糖、果糖和半乳糖)、甘露醇、山梨糖醇或本领域已知的其它碳水化合物。在一个实施方式中，所述药物组合物包括生理水平的己糖。“生理水平的己糖”包括在2mM至50mM之间的己糖浓度。在一个实施方式中，药物组合物包含5mM的葡萄糖。偶尔，需要增加己糖的浓度从而向细胞提供营养。因此，如有必要，己糖的范围可以扩大至大约50mM，以提供最少卡路里的营养。

其它合适的碳水化合物包括多种用于药物用途的糖类。糖类的实例包括木糖醇、糊精、丙三醇(glycerin)、蔗糖、海藻糖、甘油(glycerol)、麦芽糖、乳糖和赤藻糖醇。

所述药物组合物可以包含氨基酸或氨基酸的混合物。合适的氨基酸包括，但不限于，丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天门冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸和2-氨基戊烯酸(aminopentaenoic acid)。在一个实施方式中，所述氨基酸选自组氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸和半胱氨酸中。在另一实施方式中，所述药物组合物包含已知用于预防细胞凋亡的氨基酸。这样的氨基酸的实例包括谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸和2-氨基戊烯酸。

可以以如下浓度范围使用氨基酸：0.1fM-200mM、0.1fM-100pM、100pM-10nM、10nM-10μΜ、0.01-200mM、0.2-50mM或0.5-2mM。在一个实施方式中，以1mM的浓度使用氨基酸。

缓冲剂

本发明的药物组合物可以进一步包含生物缓冲剂以使液体的pH值保持在pH值为7-8的生理范围内。生物缓冲剂的实例包括，但不限于，N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-羟基丙磺酸(HEPES)、3-(N-吗啉基)丙磺酸(MOPS)、2-([2-羟基-1,1-双(羟甲基)乙基]氨基)乙磺酸（2-([2-Hydroxy-1,1-bis(hydroxymethyl)ethyl]amino)glyci ethanesulfonic acid）(TES)、3-[N-三(羟基-甲基)甲基氨基]-2-羟基乙基]-1-哌嗪丙磺酸(EPPS)、三[羟甲基]-氨基乙烷(THAM)和三[羟甲基]甲基氨基甲烷(TRIS)。

在一个实施方式中，所述缓冲剂为组氨酸、咪唑、保留咪唑环的两性位点的取代的组氨酸或咪唑化合物、包含组氨酸的寡肽、或者甘氨酰甘氨酸或上述物质的混合物。组氨酸也能够还原活性氧簇并抑制细胞皱缩(参见，Simpkins等人，J Trauma.2007,63:565-572)。可以以大约0.0001M至大约0.2M、优选大约0.0001M至大约0.01M的浓度使用组氨酸或咪唑。在一个实施方式中，以大约1mM的浓度使用组氨酸。

在另一实施方式中，本发明的药物组合物使用常见的生物组分以保持体内的生物pH值。简单来说，一些生物化合物，例如，乳酸盐，能够在体内代谢并与其它生物组分作用以保持在动物体内的生物学适当的pH值。即使在低体温和大量失血的条件下，所述生物组分有效地保持生物学适当的pH值。常见的生物组分的实例包括，但不限于，羧酸、其盐和其酯。羧酸具有RCOOX的结构通式，其中R为支链或直链的包含1至30个碳原子的烷基、链烯基或芳基，其中碳原子可以被取代，以及X为氢或钠，或可以附着在氧位置上的其它生物相容的离子取代基，或者为包含1-4个碳的短的直链或支链烷基，例如，-CH₃、-CH₂CH₃。羧酸和羧酸盐的实例包括，但不限于，乳酸和乳酸钠、柠檬酸和柠檬酸钠、葡萄糖酸和葡萄糖酸钠、丙酮酸和丙酮酸钠、琥珀酸和琥珀酸钠、以及乙酸和乙酸钠。

凝血促进剂

在没有控制流血的情况下，过激的高容量复苏通过干扰早期形成的软血栓和通过稀释凝血因子可能会加剧失血。在某些实施方式中，所述药物组合物可以进一步包含一种以上的凝血促进剂。凝血因子实例包括，但不限于，因子7、凝血酶和血小板。这些因子可以来自天然或非天然来源。在某些实施方式中，将因子7以70-150IU/kg的浓度加入到药物组合物中，将凝血酶原复合物以15-40IU/kg的浓度加入到药物组合物中，以及将血纤蛋白原以50-90mg/kg的浓度加入到[复苏]药物组合物中。也可以加入天然来源或合成的血小板或血小板替代品。

抗氧化剂

在某些实施方式中，所述药物组合物可以进一步包含一种以上的抗氧化剂。抗氧化剂的实例包括，但不限于，亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、焦亚硫酸钠(sodium pyrosulfite)(例如，焦亚硫酸钠(sodium metabisulfite))、甲醛次硫酸氢钠(CH₂OHSO₂Na)、抗坏血酸、抗坏血酸钠、异抗坏血酸(erythorbic acid)、异抗坏血酸钠、半胱氨酸、半胱氨酸盐酸盐、高半胱氨酸、谷胱甘肽、硫代甘油、α-二羟丙硫醇、乙二胺四乙酸钠、柠檬酸、柠檬酸异丙酯、二氯异氰尿酸钾、巯基乙酸钠、焦亚硫酸钠1,3-丁二醇、乙二胺四乙酸二钠钙、乙二胺四乙酸二钠、氨基酸亚硫酸盐(例如，L-赖氨酸亚硫酸盐)、丁基羟基茴香醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、没食子酸丙酯、棕榈酸抗坏血酸酯(ascorbylpalmitate)、维生素E及其衍生物(例如，dl-α-生育酚、生育酚醋酸酯(tocopherolacetate)、天然维生素E、d-δ-生育酚、混合的生育酚和水溶性生育酚(trolox))、愈创木脂、去甲二氢愈创木脂酸(NDGA)、L-抗坏血酸硬脂酸酯、大豆卵磷脂、棕榈酸、抗坏血酸、苯并三唑和戊赤藓醇基(pentaerythrityl)-四[3-(3,5-二-叔丁基-4-羟基苯基)丙酸酯]2-巯基苯并噻唑。其中，优选地为亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、抗坏血酸、高半胱氨酸、dl-α-生育酚、生育酚醋酸酯、谷胱甘肽和水溶性生育酚。

其它组分

除了上述讨论的组分外，所述药物组合物还可以进一步包含其它添加剂，其包括，但不限于，抗生素，例如，青霉素、氯唑西林、双氯西林、头孢菌素、红霉素、阿莫西林-克拉维酸钾、氨苄西林、四环素、三甲氧苄二氨嘧啶-磺胺甲基异噁唑、氯霉素、环丙沙星、氨基葡糖苷(例如，妥布拉霉素和庆大霉素)、链霉素、磺胺药、卡那霉素、新霉素、陆地单菌霉素(landmonobactams)；抗病毒剂，例如，盐酸金刚烷胺、金刚烷乙胺、阿昔洛维、泛昔洛韦、膦甲酸钠、更昔洛韦钠、5-碘脱氧尿苷、病毒唑、索利夫定、三氟尿苷、伐昔洛韦、缬更昔洛韦、喷昔洛韦、阿糖腺苷、地达诺新、司他夫定、扎西他宾、齐多夫定、干扰素α和依度尿苷；抗真菌剂，例如，盐酸特比萘芬、制霉菌素、两性霉素B、灰黄霉素、酮康唑、硝酸咪康唑、氟胞嘧啶、氟康唑、依曲康唑、克霉唑、苯甲酸、水杨酸、伏立康唑、卡泊芬净和二硫化硒；维生素，氨基酸，血管扩张剂，例如，醇和多元醇，表面活性剂，抗有害细胞因子的抗体，例如，肿瘤坏死因子(TNF)或白细胞介素，以及有血管效力的介质和免疫调节剂(mediators of vascular potency andimmunomoduators)，例如，前列腺素、白细胞三烯、阿片黑皮质素前体和血小板活化因子。

在某些实施方式中，药物组合物可以进一步包含有益的阴离子，例如，乳酸根或谷氨酸根。包含高渗乳酸根的组合物已经发现能有效地降低患有急性血流动力学不良应激(acute hemodynamic distress)的患者的脑水肿。在一个实施方式中，所述药物组合物包含250至2400mM的乳酸或乳酸根。在另一实施方式中，所述药物组合物包含250至2400mM的乳酸或乳酸根以及2至10mM的钾。

在某些其它实施方式中，所述药物组合物可以包含取代的阳离子。例如，所述药物组合物可以包含胆碱以取代钠离子。

在某些实施方式中，所述药物组合物进一步包含抗癌药和/或细胞内信号分子，例如，cAMP和二酰甘油。在其它实施方式中，所述药物组合物进一步包含一种以上的细胞器或细胞器组分，例如，整体或部分的内质网、核糖体和线粒体。

在其它实施方式中，所述药物组合物可以与红血球、变性的红血球或血液的其它细胞组分混合。

在又一其它实施方式中，所述药物组合物进一步包含丙鸦片黑素皮质素片段，例如，β内啡肽、黑色素细胞刺激素内啡肽(melonocyte stimulatinghormone enkephalins)或鸦片剂以减轻免疫反应并提供止疼。β内啡肽也可以以0.01-100nm、优选0.1-10nm、更优选大约1nm的最终浓度使用以调节在败血性状态的嗜中性的功能(参见，例如，Simpkins等人，J Natl MedAssoc.1988,80：199-203)。

在又一其它实施方式中，所述药物组合物进一步包含一种以上的用于处理精神病或预防精神病的亲神经药。

所述药物组合物具有吸收由于创伤或失血性休克产生的毒性化学分子/生物分子的能力。例如，在创伤/失血性休克之后，在肠道和胸导管淋巴结中产生的淋巴因子可以导致急性肺损伤和红血细胞变形。其它毒性化学分子/生物分子包括，但不限于，白细胞三烯、前列腺素、一氧化氮、内毒素和肿瘤坏死因子(TNF)。在药物组合物中脂质乳液允许有效吸收脂质化学分子/生物分子。在某些实施方式中，所述药物组合物进一步包含毒性化学分子/生物分子的拮抗剂，例如，内毒素的抗体。

在一个实施方式中，所述药物组合物包含10-50%(w/v)的大豆油、1-1.5%(w/v)的大豆卵磷脂和1-1.5%(w/v)的甘油。在另一实施方式中，所述药物组合物进一步包含10-30%(w/v)的大豆油、1-1.5%(w/v)的大豆卵磷脂、1-1.5%(w/v)的甘油、102mM NaCl、28mM Na(L)乳酸盐和4mM KCL。在另一实施方式中，所述药物组合物进一步包含10-30%(w/v)的大豆油、1-1.5%(w/v)的大豆卵磷脂、1-1.5%(w/v)的甘油、102mM NaCl、28mM Na(L)乳酸盐、4mM KCL和1mM组氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸或半胱氨酸。所述药物组合物是在如下条件下制备的：形成5μm或更小的平均直径的胶束。在一个实施方式中，在所述药物组合物中的胶束具有1μm或更小的平均直径。在另一实施方式中，在所述药物组合物中的胶束具有0.3μm或更小的平均直径。在另一实施方式中，在所述药物组合物中的胶束具有0.1μm或更小的平均直径。在另一实施方式中，在所述药物组合物中的胶束具有0.03μm或更小的平均直径。在又一实施方式中，在所述药物组合物中的胶束具有0.01μm或更小的平均直径。在另一实施方式中，所述疏水组分是在红细胞血影内运载的。通过要处理的疾病过程，根据需要，其它油，例如来自芡欧鼠尾草籽、南瓜籽或其它来源的油可以被用于利用它们的能力以负调节或正调节凝血、增殖、免疫响应或营养的过程。在某些实施方式中，上述药物组合物进一步包含大约2-40%(w/v)、大约2-20%(w/v)、大约4-10%(w/v)或大约5%(w/v)的白蛋白或白蛋白聚合物，或者与氨基酸或肽接合的白蛋白聚合物，其在胶束形成后加入到所述药物组合物中。

在某些实施方式中，本发明的药物组合物包含选自大豆油、芡欧鼠尾草籽油和海藻油中的脂质组分，选自磷脂和a-磷脂酰胆碱中的乳化剂，以及0.2-20mM、0.5-10mM、0.5-5mM或0.5-2mM的最终浓度的氨基酸或正乙酰基氨基酸。在某些实施方式中，所述药物组合物具有0.1、0.2、0.5、1、2.5、5、7.5或10mM的最终氨基酸浓度。所述乳化剂：脂质组分比(w/w)为大约1:400至大约1:20，优选大约1:200至大约1:50。在一个实施方式中，所述乳化剂：脂质组分比(w/w)为大约1:100。在另一实施方式中，所述乳化剂：脂质组分比(w/w)为大约1.2:100。

所述药物组合物不含Ca⁺⁺、K⁺和Mg⁺⁺和Al⁺⁺⁺，以及血红素、血红素衍生物、全氟化碳和全氟化碳衍生物。在某些实施方式中，在使用之前(例如，在使用之前24小时之内)，将Ca⁺⁺和K⁺现加入到药物组合物中。由于Al⁺⁺⁺对骨骼、大脑、血细胞生成、血红素合成、球蛋白合成、铁吸附和代谢以及胎儿发育具有毒性，所有的油和其它组分必需尽可能地具有最低量的Al⁺⁺⁺。在某些实施方式中，所述药物组合物包含小于25mg/l、20mg/l、10mg/l或5mg/l浓度的Al⁺⁺⁺。在其它实施方式中，所述药物组合物不含Al⁺⁺⁺，即，通过常规的方法不能检测到。

在一个实施方式中，所述药物组合物包含大豆油、卵黄磷脂和氨基酸、β-内啡肽或最终浓度为0.1毫微微克分子(fM)至10mM的在毫微微克分子浓度或更高的浓度下起作用的其它调质。

药物组合物的制备

通过混合脂质组分、乳化剂、水性载体和其它组分以形成乳液可以制备所述药物组合物。常用的混合方法包括，但不限于，搅拌、振荡、均化、振动、微流化和超声。在一个实施方式中，通过混合预形成的脂质乳液(例如，或)与水性载体和其它组分形成所述药物组合物。此外，所述药物组合物可以在红细胞血影中运载。具体地，所述乳液应该以如下方式制备：允许亲脂性气体溶解入乳液的亲脂性部分，而没有形成可能增加气体栓塞风险的微泡。

在某些实施方式中，将白蛋白或白蛋白聚合物或者与氨基酸或肽接合的白蛋白聚合物以2-40%(w/v)、大约2-20%(w/v)、大约4-10%(w/v)或大约5%(w/v)的量加入到药物组合物中。在胶束形成之后，将白蛋白或白蛋白聚合物或者与氨基酸或肽接合的白蛋白聚合物加入所述药物组合物中。在一个实施方式中，混合所述脂质组分、乳化剂、水性载体和其它非白蛋白组分形成乳液。然后，将白蛋白、白蛋白聚合物或者与氨基酸或肽接合的白蛋白聚合物以所需的浓度溶解在乳液中。

在一个实施方式中，根据下面的配方制备药物组合物：

配方1

A部分

大豆油20%=20克

甘油2.25%=2.25克

卵黄磷脂2.4%=2.4克

加水至100ml的最终容积

加氢氧化钠直至pH=8.0

搅拌或超声以制备具有300-400nm的平均直径的胶束

B部分

NaCl102mM=0.6克

Na(L)乳酸盐28mM=0.31克

KC14mM=0.03克

CaCl₂1.5mM=0.06克

人血清白蛋白5%=5克

可以单独使用A部分，或者在使用前24小时内与B部分混合。

配方2

A部分

大豆油20%=20克

甘油2.25%=2.25克

卵黄磷脂2.4%=2.4克

加水至100ml的最终容积

加氢氧化钠直至pH=8.0

搅拌或超声以制备具有300-400nm的平均直径的胶束

B部分

NaCl102mM=0.6克

Na(L)乳酸盐28mM=0.31克

KCl4mM=0.03克

CaCl₂1.5mM=0.06克

1mM氨基酸组氨酸或半胱氨酸

β-内啡肽 1nM

可以单独使用A部分，或者在使用前24小时内与B部分混合。

在一些实施方式中，在使用前，使A部分或A部分和B部分的混合物载入有氧气、一氧化氮、一氧化碳、氙气、氩气、硫化氢、其它疏水性气体或这些气体的混合物。这些气体可以用于休克以在起始注射后为需氧代谢输送氧，提供起始一氧化碳注射以免受再灌注损伤，用于开放在血管疾病或与血管缩窄（constrication）或梗塞相关的状态中的脉管，氙或氩保护免受外伤性脑损伤或癫痫发作的影响，或者硫化氢用于促进长期组织保护。载入有一氧化氮的胶束也被用作抗高血压药物。通过高压灭菌可以使A部分、B部分或者A部分和B部分的混合物消毒。

在一些实施方式中，促进凝固的大豆油被作为抗炎药并降低凝固的芡欧鼠尾草籽油替换。在一个实施方式中，具有大豆油的药物组合物被用在发生出血的输液起始阶段中。当出血不再是重要问题时，具有芡欧鼠尾草籽油的药物组合物被用于输液的在后阶段。

在一些其它实施方式中，在A部分的甘油被甘露醇替换。在其它实施方式中，蛋磷脂被α-磷脂酰胆碱替换，以减少因卵蛋白造成蛋卵磷脂的污染而引起的蛋白质污染和过敏反应的来源。在又一其它实施方式中，在配方2的B部分的氨基酸被N-乙酰基氨基酸所替换。

在一个实施方式中，所述药物组合物为未充氧的药物组合物。如在本文中所使用，术语“未充氧的药物组合物”指的是在大气中制备的且没有通过任何充氧装置或方法载入有氧的制剂。

在某些实施方式中，所述药物组合物在临床应用前可以载入有亲脂性气体。这样的气体的实例包括，但不限于，氧气、氙气、氩气、一氧化氮、一氧化碳、硫化氢。如在本文中所使用，“载入有亲脂性气体的药物组合物”指的是已经进行了增加在所述药物组合物中的这种亲脂性气体的含量的步骤的药物组合物。通过使亲脂性气体经过药物组合物鼓泡所需的一段时间，或者通过在压力下在亲脂性气体的存在下搅拌药物组合物，可以将亲脂性气体载入所述药物组合物。

在一个实施方式中，通过使纯氧气或具有在21%至100%(v/v)，优选40%至100%(v/v)，更优选60%至100%(v/v)，并且最优选80%至100%(v/v)范围内的氧含量的气体经过所述混合物鼓泡30秒以上，优选1至15分钟，更优选1-5分钟，使所述药物组合物充氧。也可以在压力下加入氧气，接着通过将压力降至为一个大气压。在一个实施方式中，在应用前，所述药物组合物被现充氧。所述药物组合物可以使用便携式氧气筒或便携式氧气浓缩器(例如，由在Andover,MA的Philips Healthcare生产的Evergo便携式冲击剂量氧浓缩器（Portable Pulse Dose Oxygen concentrator）)来充氧。

另一方法可以允许乳液与充满待加入的气体的大气平衡。在大多数情况下，气泡捕捉器是必需的，以除去可能变为气体栓塞的气泡。用于特定组成的药物组合物的平衡时间可以由实验确定。

在一个实施方式中，所述药物组合物包含充氧的脂质乳液。如在本文中使用，术语“充氧的脂质乳液”或“充氧的药物组合物”指的是充气的脂质乳液或已经被迫使吸收了氧气使得其中包含的氧气的总浓度大于在大气平衡条件下的相同的液体中存在的浓度的充气流体的具体类型。

试剂盒

本发明的另一方面涉及复苏试剂盒。在一个实施方式中，所述复苏试剂盒包含充氧的药物组合物和至少一种添加剂。添加剂的实例包括，但不限于，胶渗压剂、类晶体剂(crystalloid agent)、血管扩张剂、心脏麻痹剂（cardioplegicagent）或强心药、自由基清除剂或介质、细胞信号调质和受体激动剂或拮抗药。在另一实验中，所述试剂盒进一步包含静脉输液(IV)组件。在另一实施方式中，所述充氧的药物组合物包含在一个以上的用于紧急用途的预载入的注射器中。

在另一实施方式中，所述试剂盒包含药物组合物和便携式氧容器，其可以在应用之前用于现向药物组合物再充氧。所述氧容器可以包含纯氧气或氧气与硫化氢和/或一氧化碳和/或一氧化氮的气体混合物。在其它实施方式中，所述试剂盒包含药物组合物和用于在应用之前用环境空气向药物组合物现充氧的空气泵。

在另一实施方式中，所述试剂盒包含药物组合物和用于在应用之前用从环境空气过滤的氧气向药物组合物现充氧的便携式氧浓缩器。在一个实施方式中，所述便携式氧浓缩器为在Andover,MA的Philips Healthcare生产的Evergo便携式冲击剂量氧浓缩器。

在另一实施方式中，所述试剂盒包含药物组合物和制氧罐，所述制氧罐能够通过化学反应制备氧气。可以被用于制备氧气的化学物质包括，但不限于，氯酸钠、过氧化钠和超氧化钾。

在另一实施方式中，所述试剂盒进一步包含除泡装置，例如，气泡捕捉器。

在另一实施方式中，所述试剂盒包含用本发明的药物组合物预填充且容易被推送至休克患者的血流中的注射器。在某些实施方式中，所述注射器具有60-500cc的容量。在其它实施方式中，所述注射器还配有导出管。所述药物组合物还可以预载入有氧气、一些其它气体或其它有益物质。在另一实施方式中，所述试剂盒包含用本发明的药物组合物预填充的药筒。所述药筒可以被卡扣入装置中，所述装置会将所述药物组合物以所需的速率输入患者。

处理方法

本发明的另一方面涉及一种用基于脂质的药物组合物处理与缺乏血液供给相关的疾病的方法。与缺乏血液供给相关的疾病包括，但不限于，血容量不足、局部缺血、血液稀释、外伤、败血症性休克、癌症、贫血症、心搏停搏、缺氧和器官灌注。如在本文中使用的术语“血容量不足”指的是在体内循环液体(血液或血浆)的体积不正常地降低。这种疾病可能是由“出血”或者血液从血管中溢出引起的。如在本文中使用术语“局部缺血”指的是部分身体的血液不足，通常是由血管的功能性收缩和实际梗塞引起的。与缺乏血液供给相关的疾病还包括如下情形：其中，血管内容积可能正常，但是血管扩张。实例为败血症性休克，其中例如源于内皮的松弛因子的介质导致血管的健康状态和对儿茶酚胺的响应性下降。源于内皮的松弛因子的实例为一氧化氮。前列腺素E为使血管扩张的另一分子。

所述药物组合物可以在静脉内、动脉内或心内施用给需要这种处理的个体。根据使用的药物组合物的目的、控制失血的能力或恢复自主心肌收缩的能力，所述药物组合物的施用可以存在数秒、数小时、几天或几周的时间。例如，当用作用于处理严重失血性休克的血容量扩张剂和氧载体时，通常的施用时间过程尽可能地迅速，其可以为从大约1ml/kg/小时至大约150ml/kg/min或从大约10ml/kg/min至大约150ml/kg/min。为了处理严重失血性休克，以足以升高患者的血压的量和输液速率给予患者所述药物组合物。在某些实施方式中，以500-4000ml、500-2000ml、500-1000ml、1000-4000ml和1000-2000ml的量给予所述药物组合物。在某些实施方式中，以等于患者的正常血容量的大约10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%或90%的量在30-300秒时间内给予所述药物组合物。在某些实施方式中，以200-4000ml/min的速率给予所述药物组合物。在其它实施方式中，以约1000-4000ml/min的速率给予所述药物组合物。在其它实施方式中，以约200-2000ml/min的速率给予所述药物组合物。在其它实施方式中，以约100-1000ml/min的速率给予所述药物组合物。在又一实施方式中，以约500-700ml/min的速率给予所述药物组合物。在一些实施方式中，给予所述药物组合物，而无需充氧。在其它实施方式中，所述药物组合物为充氧的药物组合物。所述输液速度可以从低的5ml/min至120升/小时变化。由于出血量大的事实，容积或速率没有上限，并且会以提供足够的组织灌注和组织生存力所需的速率和容积来给予所述药物组合物的输入。

本发明的另一方面涉及用于提升需要这种处理的个体的血压的方法。在某些实施方式中，所述血压指的是收缩压。所述方法包括向患者施用有效量的本发明的药物组合物。在一个实施方式中，所述个体为丢失其血容量的至少15%的哺乳动物。在另一实施方式中，所述个体为丢失其血容量的15%至30%的哺乳动物。在另一实施方式中，所述个体为丢失其血容量的至少30%的哺乳动物。在另一实施方式中，所述个体为丢失其血容量的30%至40%的哺乳动物。在另一实施方式中，所述个体为丢失其血容量的至少40%的哺乳动物。在另一实施方式中，所述个体处于失血性休克。在又一实施方式中，所述个体处于严重失血性休克。如在本文中所使用，术语“失血性休克”指的是由丢失血容量的至少15%导致的休克状态。如在本文中所使用，术语“严重失血性休克”指的是由丢失血容量的至少30%导致的休克状态。

在一个实施方式中，提升患有失血性休克或严重失血性休克个体的血压所需要的“有效量”的药物组合物为丢失的血容量的40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、120%、150%、200%或300%。通常地，最初以等于丢失血容量的至少40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%的容量输入所述药物组合物来升高血压。在需要的基础上，使用更大的量(例如，150%至300%甚至更大)。

在另一实施方式中，升高患有失血性休克或严重失血性休克个体的血压所需要的“有效量”的药物组合物为使个体的收缩压恢复至70mmHg、80mmHg、90mmHg或更高所需的量。

其它的血液动力学参数，例如，大脑、肾、心脏、肌肉、脾或其它组织的灌注，心排血量，心搏排血量指数，由近红外光谱或其它装置测量的线粒体氧化磷酸化，血乳酸盐或膜极化，也可以被用于确定升高个体的血压所需的药物组合物的“有效量”。

当将本发明的药物组合物施用给个体并经过其循环时，例如心脏麻痹剂或强心药的多种药物可以被直接地施用进个体的循环系统，直接地施用给个体的心肌层，或加入到本发明的药物组合物中。加入这些组分以实现所需的生理效果，例如保持规律的心脏收缩活性、停止心脏纤维颤动或者完全抑制心肌层或心肌收缩活性。

心脏麻痹剂为导致心肌层收缩停止的物质，其包括麻醉剂，例如，利多卡因、普鲁卡因和奴佛卡因；以及足以实现心肌层收缩抑制的浓度的一价阳离子，例如钾离子。足以实现这种效果的钾离子的浓度通常过超过15mM。

在个体的恢复期间，可以将个体保留的血液或从血液捐献者得到的血液与所述的药物组合物的混合物再输入至个体。输入全血直至个体实现可接受的血细胞比容，通常等于或超过大约30%的血细胞比容，以及已经实现了复苏的目标，例如，正常的乳酸盐或60%至76%之间的混合静脉氧饱和度。当已经实现这些目标时，中止快速输液，在使用常规的程序关闭外科伤口之后，个体苏醒。在某些实施方式中，本发明的药物组合物被用于处理休克，包括，但不限于，神经原性休克、心源性休克、肾上腺机能不全休克和败血症性休克。

本发明的另一方面是能够通过一氧化氮的可逆吸收来升高血压。血红素和一氧化氮合酶抑制剂在除去一氧化氮时非常有效。然而，它们不易于引起释放一氧化氮。在血压提升时，一氧化氮的这种强效的和不可逆的吸收可以导致致命性的血管收缩。相反，所述药物组合物吸收一氧化氮，因为一氧化氮在脂质中更大的溶解性。这种机制不如前述的方法强效，但是其是高度可逆的。这种机制方法提供了一氧化氮的可变的储源，其以随着一氧化氮的局部浓度变化的方式吸收或释放一氧化氮。

在某些其它实施方式中，腹膜内地、经皮地、肠内地、直肠内地和通过吸入施用所述药物组合物。

本发明的另一方面涉及使用上述药物组合物使肺严重损伤并且即使用特殊的通气模式也不能吸收氧气的患者充氧的方法。载入有氧的药物组合物可以通过循环将氧输送至组织，并允许肺从损伤中恢复。就此而言，所述药物组合物可以用于替换体外膜式氧合(ECMO)。

本发明的另一方面涉及在换血疗法和全循环灌注中使用药物组合物以冲洗含有害物质(例如，传染原、癌变剂、毒剂)的血液的方法。在两种情况中，所述药物组合物可以包含由20%的脂质胶束和带有白蛋白或不带有白蛋白的等渗盐水组成的乳液。所述药物组合物还可以被用于吸收由于创伤、失血性休克或其它形式的休克导致产生的有毒的化学分子/生物分子。可以加入或不加入氧气或其它气体。

用携带氙气/氩气的药物组合物处理癫痫发作或神经损伤

本发明的另一方面涉及使用通过本发明的药物组合物携带的氙气或氩气来处理癫痫发作或神经损伤的方法。氙气是无色、重的、无味的惰性气体。氙气已经被用作全身麻醉剂。已经提出氙气麻醉的两种生理机制。第一种涉及抑制在突触的细胞膜中的钙ATP酶泵，ATP酶泵是细胞用于除去钙(Ca²⁺)的机制(参见，例如，Franks,JJ等人，Anesthesiology82:108-117)。第二机制涉及麻醉剂与脂质膜之间的非特异性相互作用(参见，例如，Heimburg,T andJackson AD,2007,Biophysical Journal92:3159-65)。氙气具有71%的最小肺泡浓度(MAC)，使得其比作为麻醉剂的N₂O强效50%。因此，其可以以具有更低的缺氧风险的各种浓度与氧一起使用。

氙气也可以为N-甲基-d-天冬氨酸受体(NMDA受体)的拮抗物，并且可以被用于处理大脑损伤。所述NMDA受体加重了由缺氧造成的损伤，并且氙气作为神经保护剂比具有不良副作用的氯胺酮或一氧化氮表现更好(Ma,D.;等人，2002,British Journal of Anaesthesia89:739-746)。

不受限于任何理论，人们相信谷氨酸兴奋性中毒与疾病(例如外伤性脑损伤和局部缺血/中风)的损伤进展有关，并且相信氙气的神经保护作用是通过在其甘氨酸结合位点处的NMDA受体的竞争性抑制来介导。

氩气(Ar)为已经在大脑局部缺血和外伤性脑损伤的体外模型中显示神经保护性能的另一惰性气体(Loetscher等人，Crit Care2009,13:R206)。

在一个实施方式中，携带氙气或氩气的药物组合物被用于处理个体的癫痫发作、神经元损伤和/或脑局部缺血。所述处理包括：将足够量的携带氙气或氩气的药物组合物输入至所述个体所需的一段时间。携带氙气或氩气的药物组合物可以通过在填充有氙气的容器中混合除气的脂质组分和除气的极性液体或通过使氙气经过除气的药物组合物鼓泡而制备。如前所述，所述药物组合物的气体运载量与其脂质含量成正比。因此，当需要高氙气剂量时，使用具有高脂质含量(例如，30-50%v/v)的药物组合物。在另一实施方式中，用氙气和氧气的混合物使所述药物组合物饱和，其中载入氙气或氩气的百分比为10至80%(v/v)。在一个实施方式中，用氙气/氩气:氧气的比率为50:50、60:40、70:30、75:25或80:20(v/v)的氙气/氩气和氧气的混合物使所述药物组合物饱和。在又一实施方式中，所述药物组合物为用氙气或氩气饱和的第一药物组合物和用氧气饱和的第二药物组合物的混合物。在又一实施方式中，氙气或氩气与其它挥发性麻醉剂(例如，七氟烷)一起使用。

与NMDA受体有关的可处理的神经元损伤包括，但不限于，缺血性中风、由于创伤导致的颅内出血，或者由出血或其它形式的休克或癫痫发作疾病导致的缺氧性脑损伤，以及脑炎。

在一个实施方式中，神经元损伤为由甲基-D-天冬氨酸盐(NMDA)-型谷氨酸盐受体介导的损伤。在另一实施方式中，所述神经元损伤为由脑内缺氧导致的损伤。

在某些实施方式中，以20至100,000ml/小时，500至100,000ml/小时，或5000至60,000ml/小时的速率输入携带氙气、氩气、Xe/O₂或Ar/O₂的药物组合物。根据患者的疾病或具体需要，输液可以持续数分钟至数周。在某些实施方式中，输入携带氙气、氩气、Xe/O₂或Ar/O₂的药物组合物3至600分钟，5-300分钟，10-120分钟，10至24小时或1至7天。

在另一实施方式中，携带氙气的药物组合物还携带所需量的一氧化碳以防止病理状态(例如，局部缺血再灌注损伤)的进展。

在另一实施方式中，携带氙气的药物组合物还携带所需量的硫化氢以调节脑灌注和促进器官存活。

在另一实施方式中，携带氙气的药物组合物与用于处理神经元损伤的低温(32℃-34℃)结合使用。考虑到氙气在处理心力衰竭中的效用，其也可以类似地用于心脏疾病(Baumert JH,Falter F,Eletr D,Hecker KE,Reyle-Hahn M,Rossaint R.Xenon anaesthesia may preserve cardiovascular function in patientswith heart failure.Acta Anaesthesiol Scand.2005Jul;49(6):743-9.)。

在一个实施方式中，所述氙气/氩气处理是在神经元损伤或脑局部缺血的72小时内使用。

在另一实施方式中，所述氙气/氩气处理是在神经元损伤或脑局部缺血的24小时内使用。

在另一实施方式中，所述氙气/氩气处理是在神经元损伤或脑局部缺血的8小时内使用。

在另一实施方式中，所述氙气/氩气处理是在神经元损伤或脑局部缺血的4小时内使用。

在另一实施方式中，所述氙气/氩气处理是在神经元损伤或脑局部缺血的2小时内使用。

用本发明的药物组合物处理败血症性休克的低血压

本发明的另一方面涉及一种用药物组合物处理个体的败血症性休克以吸收内源性地产生的一氧化氮的方法。败血症性休克或败血症为其中急性炎症、低血压和血液凝固造成向器官输送血液危险性地减少的病况。因为不能向微循环输送氧气和不能利用氧气，一旦这种情况波及到组织，患者的器官开始一个接着一个地衰竭。目前，能做的只有支持性治疗。一氧化氮在失血性休克和败血症性休克的病理生理学中都起到非常显著的作用。从内皮细胞中释放的过量的一氧化氮引起动脉血管平滑肌细胞松弛、血管紧张度的降低和低血压，这导致不能进行微循环的灌注。此外，一氧化氮可与活性氧簇相互作用，并且形成有毒产物，例如，过氧亚硝酸盐。在这种情况下，除去过量的一氧化氮会是有益的。因此，在一个实施方式中，所述方法包括用一段所需的时间向所述个体施用有效量的药物组合物以从循环系统中吸收或除去内源性释放的一氧化氮。可以以大约20ml/小时至15,000ml/分钟的速率，优选以4000ml/分钟的速率静脉内或动脉内施用所述吸收一氧化氮的药物组合物。

用本发明的携带一氧化氮的药物组合物处理血管收缩和/或高血压

由于提升的血管阻力，出现了一些疾病，例如，雷诺氏病。其它的实例为变异型心绞痛、脑动脉痉挛和动脉粥样硬化。在这种情况下，载入具有一氧化氮的药物组合物将缓解血管收缩。同样在镰状细胞危象中，载入有一氧化氮和氧气的胶束的组合是有用的，其中，载入有一氧化氮的胶束打开收缩的小血管，同时载入有氧气的细胞将氧气输送至局部缺血组织。氧自由基将被乳液内的抗氧化剂部分清除。在所有的实施方式中，根据生理需要，携带一氧化氮的药物组合物还携带所需量的氧或其它气体。在另一实施方式中，携带一氧化氮的药物组合物还携带所需量的一氧化碳以防止病理状态(局部缺血再灌注损伤)的进展。

在另一实施方式中，携带一氧化氮的药物组合物还携带所需量的硫化氢以促进脑的再灌注并调节细胞凋亡。

器官的保存

本发明的另一方面涉及使用所述的药物组合物保存哺乳类供体生物体的器官的生物完整性的方法。在一个实施方式中，所述个体的器官被冷冻，并使用泵循环装置(例如，离心泵、滚轮泵、蠕动泵或其它已知和可用的循环泵)将所述药物组合物灌注到个体器官中。通过手术插入至适当的静脉和动脉的插管将所述循环装置连接至个体器官。当将所述药物组合物施用至冷冻的个体器官时，通常通过动脉插管施用，并通过静脉插管从个体中除去，丢弃或存储。在另一实施方式中，在室温范围(15℃至25℃)的温度下灌注药物组合物。在另一实施方式中，在亚体温范围(25℃至34℃)的温度下灌注所述药物组合物。在另一实施方式中，在体温范围(34℃至39℃)的温度下灌注所述药物组合物。

当在器官移植过程中用于器官灌注时，所述药物组合物可以施用数小时的时间。在某些实施方式中，所述药物组合物包含利用其免疫抑制效果的芡欧鼠尾草籽油。

诊断

本发明的药物组合物还可以用作诊断工具。由于其疏水性，所述药物组合物能够吸收在多种疾病状态下产生的脂质部分。在药物组合物已经通过血液循环之后，对它的分析可以显示将上述脂质部分释放至血液中的疾病的存在。一个实例为在与导致内源性一氧化碳的产生增加的血红素氧化酶的诱导相关的败血症性休克或其它疾病中一氧化碳和一氧化氮的产生增加。

实施例

提出下面的实施例从而向本领域的普通技术人员提供怎样实施本发明的方法的完整公开和描述，并且下面的实施例并不用来限制本发明的范围。对于使用的数字(即，数量、温度等)已经努力确保其准确，但是应该考虑到一些实验误差和偏差。除非另外指出，份为重量份，分子量为重均分子量，温度为摄氏温度，以及压力为大气压或近大气压。

实施例1：方法和材料

通过超声制备的脂质乳液：通过混合1-3克的大豆油、0.12克的大豆卵磷脂和0.24克的甘油和使得体积达到10ml的水来制备多种浓度的脂质乳液。将这种混合物放入到15ml的管形瓶中，并使用超声细胞破碎机在冰浴中乳化。

通过均化和微流化制备脂质乳液：制备由大豆油(SIGMA,St.Louis)组成的乳液。所述组合物由如下组分组成：20%-50%w/v的大豆油、去离子水、变化量的乳化剂(磷脂酰胆碱(Avanti Polar Lipids,Alabaster,Ala.)或卵黄磷脂(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO.)，含有或不含有5%的人血清白蛋白(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO.)。在形成胶束后加入白蛋白。一些样品中还包含154mM的NaCl。用高剪切旋转器/定子均化器将混合物均化5分钟。A微流化器(Microfluidics,Newton,Mass.)被用于通过Silverson均化器制备的粗乳液的最终的均化。

市售可得的脂质乳液：20%(由Baxter International Inc.,Deerfield,IL售卖)被用作模型脂质乳液。其是由20%的大豆油、1.2%的卵黄磷脂、2.25%的甘油、水和调节pH值至8的氢氧化钠组成。市售可得的另一模型脂质乳液为由Hospira in Lake Forest,I11售卖的III20%。这种乳液是由20%的大豆油、1.2%的蛋磷脂、2.5%的甘油、水和调节pH值至8.3的NaOH组成。

使用质谱分析测定乳液中的氧含量：使用由Juan Rodriguez博士实验室开发的技术(Cornelius J,Tran T,Turner N,Piazza A,Mills L,Slack R,Hauser S,Alexander JS,Grisham MB,Feelisch M,Rodriguez J."Isotope tracingenhancement of chemiluminescence assays for nitric oxide research"Biol Chem.Feb;390(2):181-9(2009))。在溶解气体分析之前，在2.0ml的试管中将一些样品(各自1ml)开放地放在空气中30分钟。在其它实验中，乳液被放置在15ml的试管中。在研究时，顶部空间（headspace）被气体填充，通过与位于其一侧的试管平衡超过60分钟而允许气体进入乳液以提高气体乳液反应。在37℃下，将从这些液体中抽出的各50μL注入至包含由32ml的1M的HCl和4ml的0.5M的抗坏血酸组成的36ml的轻度酸性溶液的西弗斯清洗容器中。向溶液中持续的倒入高纯度氦以将从样品中释放的任何氧输送至质谱仪(HP5975)中用于直接气体分析。当注入RL和脂质乳液样品时，使用Peakfit积分对在m/z=32处产生的信号进行积分，并与由使用蒸馏水得到的信号进行比较。

动物和动物程序：使用重量为27-47克的雄性和雌性小鼠。品种或者为CD-1或NFR2。所有的比较均使用相同的品系。使用皮下施用的氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉剂使小鼠麻醉。为了防止由于麻醉剂的心脏抑制效应导致的数据的偏移，在所需麻醉剂多于计算剂量的罕见情况中，中止实验，并使小鼠安乐死。一旦清楚小鼠被良好地麻醉，将导管插入颈动脉。在3分钟内尽可能多地移除血液。这导致丢失血容量的55%和在没有任何输液情况下的100%的致死率。在血液移除后，立即施用输液2分钟。

以等于已经移除的血液的量的体积施用药物组合物、复苏液(林格氏乳酸盐)或自体血。使用由Columbus Instruments(Columbus,OH)制备的BP-2监测仪在颈动脉处测量血压。该监测仪以电压的方式测量血压。作出标准曲线。使用下面的公式将测量的电压转化为血压(BP)。

BP=[电压-0.1006]/0.0107

对小鼠没有应用加温措施。没有采取措施支持呼吸。

失血性休克的大鼠模型使用大鼠的实验是通过田纳西大学健康科学中心动物保护和使用委员会同意的。购买重量在200至300g之间的斯普拉-道来氏大鼠，其颈动脉和同侧颈静脉被预插管。这些大鼠被皮下给予氯胺酮/甲苯噻嗪麻醉。在确定麻醉生效之后，将颈动脉插管连接到血压监测仪上。通过按照需要除去或输入自体血，使大鼠流血至40mmHg的平均血压并保持该水平45分钟。在休克的45分钟末，输入等于除去血液量的体积的测试药物组合物。在复苏后，记录血压45分钟，之后存活的大鼠通过放血进行安乐死。

统计分析：使用正反、非配对学生t检验分析数据。

实施例2：本发明的药物组合物的氧和一氧化氮含量

20%I.V.脂肪乳液(由Baxter International Inc.,Deerfield,IL售卖)被用作样品药物组合物(LM)。的组合物是由20%的大豆油、1.2%的卵黄磷脂、2.25%的甘油、水和调节pH值至8的氢氧化钠组成。使用质谱仪测量在样品中的氧含量。如在表1中所示，LM的氧含量接近林格氏乳酸盐(RL)的两倍，RL为大量失血时输入的标准复苏液。水的氧含量指定为值1。RL的氧含量稍微低于水的氧含量。如在表2中所示，通过使氧气经过LM鼓泡大约1分钟使LM的氧含量增加5倍。在氧载入后，与具有最小可接受血红素水平(即，7.0g/dl)的血液相比，LM的氧含量是有利的。

表1林格氏乳酸盐和20%的氧含量。各平均值为3个样品的结果。

                      林格氏乳酸盐      20%

       氧含量*        0.91±0.11*        1.78±0.09*

*氧含量表示为相对于水中的氧含量的量

表2在1atm下在多种液体中的氧溶解度

在25℃下和海平面压力下的氧含量

⁺从在http://www.engineeringtoolbox.com/oxygen-solubility-water-d_841.html中的“The Engineering Toolbox”在新鲜水和海水中的氧的溶解度得到。

这些数据显示LM可以载入有足以供应需氧代谢的氧。

这点进一步通过如下事实证实：在正常情况下仅有30%的结合到血红素上的氧被使用。在严重应激下(例如，严重失血性休克)，可能从血红素中卸下60%。相反，考虑到从LM中释放氧比从血红素中快3倍，所有溶解在LM中氧应该易得。对于血红素，公开的释放时间为17.5毫秒，而当我们从LM中消除氧时测量的分开时间小于5毫秒。

图2显示乳液氧含量对脂质胶束浓度的线性依赖性。通过对1～3克的大豆油、0.12克的大豆卵磷脂和0.12克的甘油和使混合物的体积至10ml的水的混合物进行超声处理来制备胶束。将所述混合物放入到15ml的试管中，并使用超声破碎机在冰浴中乳化。各点为2-3次实验的平均值。Y轴为相对于水的乳液的氧含量。X轴为乳液的大豆油浓度。

实施例3：本发明的药物组合物的一氧化氮吸收量

在另一组实验中，我们测量了通过市售可得的20%大豆油乳液，LiposynIII20%吸收的一氧化氮。所述乳液包含在水中的20%的大豆油、1.2%的蛋磷脂和2.5%的甘油。使用NaOH将pH值调节至8.3。通过平衡加入氧气，其中将200μl的乳液置入到15ml的管形瓶中。将在氦中的100ppm的一氧化氮用于吹洗顶部空间两分钟，小心不要鼓泡液体。进行六十分钟，使样品与置于其一侧的试管达到气体-液体平衡从而使气体-乳液接触最大化。结果示于下面的表3中。

表3：20%的大豆油乳液(Liposyn III20%)和水的NO含量，单位摩尔/升

实施例4：本发明的药物组合物在恢复患有严重失血性休克的小鼠的动脉压中的效果。

在小鼠中测定实施例2中的药物组合物(LM)对血压的影响。小鼠被麻醉，并将导管置入到颈动脉中。通过颈动脉移除所有能够移除的血液。在移除血液之后，给予等于移除的血液量的RL或LM。6只小鼠在LM组中，以及6只小鼠在RL组中。观察时间为1小时。给予RL的两只小鼠在10分钟内死亡。给予LM的所有小鼠在观察的整个一小时内存活直至在1-4小时被安乐死。只要动物开始从麻醉中醒来或者到达观察期末，就对动物实施安乐死以防止痛苦。

图3和4显示在失血之后和在输入RL或LM后的时间=0、30和60分钟时的收缩血压(图3)和舒张血压(图4)之间的差异。Y轴表示用在输液后得到的血压减去在失血后的mm Hg血压。X轴显示输液后的特定的时间。使用非配对正反t检验分析所有数据的统计学意义。这些图显示LM提升的血压比RL高(p<0.01)。

在其它实验中，包含20%和5%(w/v)白蛋白的药物组合物是通过将白蛋白(Sigma Aldrich,99%纯度，无脂肪酸，基本无球蛋白，目录号A3782-5G)溶解在20%中至50mg/ml的最终浓度而制备的。使用上述的实验程序测试含有白蛋白(VS)的新的药物组合物。以50mg/ml溶解在生理盐水(NSA)和林格乳酸盐(RLA)中的白蛋白和自体血(即，之前从小鼠中移除的血液)用作对照。在图5中，Y轴显示通过输入多种流体实现的平均血压(表示为失血前的平均血压的百分比)。X轴显示输液后的特定时间。数据显示，即使是对于自体血，VS在保持血压方面也是更具优势的。舒张血压也得到类似的结果(未示出)。对于每个时间点，标记6-7个小鼠的平均值。在5、15和30分钟时，自体血与VS之间的差异具有统计学意义(P＜0.05)。

实施例5：本发明的药物组合物在恢复患有严重失血性休克的大鼠的动脉压中的效果。

在其它实验中，使麻醉的大鼠流血至40的平均血压，并使用自体血维持45分钟。在该时间段的末期，在2分钟内给予测试液。所述测试液体为(1)包含混合有5%的白蛋白的20%Intralipid、NaCl102mM、Na(L)乳酸盐28mM、KCL4mM的乳液，(2)林格氏乳酸盐，(3)人造血浆溶液和(4)自体血。结果示于表4中。

表4：药物组合物在恢复患有严重失血性休克的大鼠的动脉压中的效果

对肺、肝、肾、脾脏、心脏和肠进行苏木精和曙红组织病理学检查。没有发现乳液的有害影响。

这些实验结果与如下事实一致：在所述药物组合物中的脂质胶束能够运用渗透力并吸收血管开放介质，例如，前列腺素、一氧化氮、白细胞三烯和血栓素。

实施例6：包含氨基酸的药物组合物在恢复患有严重失血性休克的大鼠动脉压中的效果。

在另一实验中，如在实施例4中所述，诱导小鼠的失血性休克。然后用包含20%Intralipid、102mM NaCl、28mM Na(L)乳酸盐、4mM KCL的对照乳液，或包含对照乳液和1mM的组氨酸或酪氨酸或苯丙氨酸或半胱氨酸的测试乳液对小鼠进行复苏。表4显示药物组合物在恢复患有失血性休克的小鼠的动脉压中的效果。

表5：药物组合物在恢复患有失血性休克的小鼠的动脉压中的效果。

并不是表示为限制。本领域的技术人员将会认识到在如在所附的权利要求中定义的本发明的实质和范围内多种变化是可能的，以及它们的等同体，其中，除非相反地指出，术语应该被理解成最广泛的含义。

Claims (14)

1.一种药物组合物，其包含：

脂质组分，所述脂质组分选自大豆油、芡欧鼠尾草籽油和海藻油，其用量为所述药物组合物的10％-40％(w/v)；

两亲型乳化剂，所述两亲型乳化剂为1％-5％(w/v)量的卵黄磷脂或α-磷脂酰胆碱；

极性液体载体，和

最终浓度为0.5-10mM的氨基酸，

其中，所述脂质组分和两亲型乳化剂在所述极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)，以及其中，所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述药物组合物包含具有100～400nm范围内的直径的大胶束和具有在1～30nm范围内的直径的纳米-胶束的混合物。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其包含最终浓度为1mM的氨基酸。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其进一步包含2-5％(w/v)的甘油或甘露醇。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其进一步包含2.25％(w/v)的甘油或甘露醇。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其进一步包含3-7％(w/v)的白蛋白。

7.根据权利要求1所述的药物组合物，其进一步包含5％(w/v)的白蛋白。

8.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述两亲型乳化剂为2.4％(w/v)量的卵黄磷脂或a-磷脂酰胆碱。

9.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述脂质组分选自大豆油、芡欧鼠尾草籽油和海藻油，其用量为所述药物组合物的20％(w/v)。

10.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述组合物不含Ca²⁺、Mg²⁺和K⁺。

11.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述组合物不含Al³⁺。

12.一种药物组合物，其包含：

10％-80％(w/v)的选自大豆油、芡欧鼠尾草籽油和海藻油的脂质组分；

l％-5％(w/v)的选自卵黄磷脂和α-磷脂酰胆碱的两亲型乳化剂；

2％-5％(w/v)的甘油或甘露醇；

5％(w/v)的白蛋白；

0.1fM-10mM的组氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸或其混合物；以及

极性液体载体，

其中，所述脂质组分和两亲型乳化剂在所述极性液体载体中形成自由移动的运载脂质胶束(LM)，其中，所述药物组合物包含具有100～400nm范围内的直径的大胶束和具有在1～30nm范围内的直径的纳米-胶束的混合物，以及其中，所述药物组合物不含血红素和碳氟化合物。

13.根据权利要求12所述的药物组合物，其中，所述组合物不含Ca²⁺、Mg²⁺和K⁺。

14.根据权利要求12所述的药物组合物，其进一步包含最终浓度为0.1-10mM的β-内啡肽。