CN103491968A - 蜜蜂粉霜组合物、提取方法及其用途 - Google Patents

蜜蜂粉霜组合物、提取方法及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及经纯化的蜜蜂粉霜的组合物，制备所述经纯化的蜜蜂粉霜的组合物的方法和蜜蜂粉霜在减轻或者治疗炎症中的用途。

Description

蜜蜂粉霜组合物、提取方法及其用途
技术领域
本发明涉及从蜡粉霜提取和纯化的用于治疗炎症的天然产品的领域。
背景技术
炎症影响很多个体，并且是各种不同疾病的基本症状。一般而言，炎症是动物用来响应有害刺激的一种身体防御性反应，以保护受伤部位并有助于愈合过程。如所知道的那样，病原体、刺激物或者受损细胞能够触发炎性反应，从而引起急性和慢性形式的炎症。急性炎症一般被定义为身体对有害刺激的初始反应，其涉及血浆和白细胞向受伤部位移动的增加。慢性炎症一般被定义为身体对受损组织的延迟反应，这导致在较长时间内血流的增加和组织的肿胀。
尽管炎症对愈合有帮助，但是炎症过程中涉及的生物化学事件级联会导致各种不同症状，包括变应性反应、动脉硬化症和类风湿性关节炎。例如，暴露于变应原会引发炎症，其中敏化免疫系统会响应于外来物体而引发抗体生成。在这种情况下，炎性介质例如组氨酸被释放，导致发痒、肿胀和粘液生成。在其他实例中，动脉壁中的慢性炎症会导致动脉硬化症，从而导致斑块形成和动脉狭窄。类风湿性关节炎涉及攻击个体的滑膜关节的炎性反应，从导致疼痛和畸形。
已经有五种变应性反应得到鉴定。这些变应性反应包括：变态反应(直接的，I型)、细胞毒性和抗体依赖性的(II型)、免疫复合物介导性的(III型)、迟发型超敏反应的细胞介导的免疫记忆反应并且与抗体无关的(IV型)和自身免疫性疾病和受体介导的(V型)。直接的或I型变应性反应很大程度上归因于IgE抗体，不过lgG抗体能够参与并调节变应性反应。变态反应通常是由于免疫细胞、肥大细胞和嗜碱性粒细胞亚群在抗原与细胞表面上的IgE抗体受体反应时受到激活而造成的，化学介质通过作用于临近的免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞和平滑肌细胞而引发变应性反应，并且更长时间地促进其他炎性和免疫细胞(嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)流入到组织中。炎性细胞的流入使患者复发并且有时推迟或者延长变应性或者超敏感性反应。也能够在立即型和迟发型变应性反应与迟法型慢性损伤之间形成差别。可以根据发生的部位限定I型变应性反应。哮喘反应发生在肺部，鼻炎发生在鼻部，结膜炎、虹膜炎和葡萄膜炎发生在眼部，风疹(荨麻疹)、特应性皮炎和湿疹发生在外皮肤真皮中，血管神经性水肿发生在真皮皮下组织、粘膜及粘膜下层组织。在循环和胃肠道系统中的全身变应性反应经常会危及生命。过敏性休克，一种最严重的变应反应形式，是一种医疗紧急情况。它往往是严重的，并且有时在以前致敏反应之后暴露于特异性抗原(例如胡蜂毒液或者青霉素)时可以引起易感个体的致命的全身性反应。过敏性休克的特点是呼吸道症状、昏厥、瘙痒、风疹、咽喉或其他粘膜的肿胀以及血压的突然下降。过敏性休克的症状包括头晕、意识丧失、呼吸困难、舌头肿胀、皮肤发蓝、支气管痉挛、低血压和死亡。
哮喘可以临床定义为间歇性的、可逆性的气道阻塞症状，本身表现为一些临床实体：变应性哮喘、支气管哮喘、运动诱发哮喘、化学品诱发哮喘和哮喘持续状态。哮喘可分为两种类型。外源性哮喘通常由外部试剂，例如变应原(如尘螨、花粉、蜇伤、药物或食品)所引发，并且通常在生命早期得到诊断。内源性哮喘，一般在生命后期患上，可以被充血和炎性组织、感染、内源性儿茶酚胺(如肾上腺素)、药物(如阿司匹林)、紧张或劳累所引发。炎症反应也可以由很多刺激所引发，所述刺激包括热和化学烧伤、暴露于毒素、由于暴露于环境(例如冻伤)而受损的组织、感染(包括细菌、病毒、寄生虫)、物理伤害、免疫反应(包括变应性反应和自身免疫性症状)、暴露于辐射以及碎片或灰尘等异物的存在。
炎症的症状包括患发部位发红、肿胀和/或关节疼痛、关节僵硬，甚至在某些情况下关节功能丧失。发烧、发冷和疲劳也可能是个体中炎性反应的副作用。除了这些副作用之外，很多疾病可能由如下原因引起：慢性炎症(包括哮喘)、枯草热、肌腱炎、滑囊炎、关节炎、糖尿病、心脏病、动脉粥样硬化、特应性皮炎(湿疹)、接触性皮炎、牛皮癣、过敏性肠综合征、克罗恩病、结肠炎、回肠炎、胃炎、憩室炎、溃疡性结肠炎、肝炎、肾炎、狼疮性红斑、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病甚至是癌症。
治疗炎症通常涉及使用药物如非甾体类和甾体类抗炎药，非甾体类抗炎药(NSAID)可以包括非处方药如阿斯匹林、布洛芬或萘普生。非甾体抗炎药通常通过阻断负责前列腺素生成的环氧合酶，一组促进炎症的脂质化合物，来发挥作用。其他药品包括甲氨蝶呤、柳氮磺胺吡啶、抗肿瘤坏死因子药物、环磷酰胺(cydophosphamide)和霉酚酸酯。
甾体类药物治疗往往涉及使用皮质类甾醇，皮质类甾醇作用于免疫系统以阻断引发变应性和炎性反应的物质的生成。像非甾体抗炎药那样，皮质类甾醇抑制前列腺素的生成，从而降低了个体中的正常炎症反应。
免疫选择性抗炎衍生物(imSAlD)是另一个类抗炎化合物。一般来说，imSAlD是改变免疫细胞(白细胞)响应炎症反应所造成的激活的一类肽。
天然方法也可用于治疗炎症。诸如柳树皮、绣线菊、姜、人参和甘草等草药已被证明显示出抗炎性能。除了维生素Bi2、C和E以及矿物铜和锌之外，ω-3脂肪酸也被证明诱导抗炎反应。
诸如益生菌(probiotics，被定义为生活在哺乳动物的肠道中的健康微生物)、益生元(prebiotics，刺激健康细菌生长的非易消化食物组分)等营养药物食品也显示出抗炎性能。牛初乳(Symbiotics，其组合益生菌与益生元)可用于治疗、减轻和减少与炎症有关的症状。
上述治疗方法的缺点是与直接使用有关的不利影响和/或联合风险。无论是胃肠道的还是肾脏的影响(其能够导致高血压)，它们都是使用非甾体抗炎药的最常见的副作用。心血管疾病的风险可能并潜在地对怀孕期间的胎儿造成不良影响。由于前列腺素保护胃部并有助于血液凝固，因此非甾体抗炎药可能导致胃溃疡并促进出血。
皮质类甾醇妨碍白细胞的功能，而白细胞保持免疫系统的正常运作。随着时间的推移，皮质类甾醇的使用可以影响负责皮质类甾醇的自然生成的肾上腺的功能。它们还可以增加高血压和骨骼疾病例如骨质疏松症的风险。除了睡觉问题和消化不良之外，胃部不适和呕吐也是常见的。个体对感染的抵抗力降低是一种风险，并且长期使用可导致器官衰竭。
益生元、益生菌或它们的组合(牛初乳)在被加入到食物产品中时存在改变它们的治疗效果的风险。不同的制备方法可能赋予不同的健康效果。因此，它们的质量难以保证。它们也可能会由于微生物的活性而导致胃肠气胀(gas)和/或腹胀(bloating)。
虽然维生素和矿物质的使用通常被视为是安全的，但是过量使用可导致不良副作用。维生素C当超过推荐量时可导致恶心和腹泻，而维生素E可导致虚弱和疲劳。在某些个体中，维生素Bi2可能会引起腹泻和失眠。
抗炎化合物的另一种天然来源是各种蜂产品。更具体地说，一些蜂制品，在作为营养药物食品使用或者局部施用时，已知提供抗炎反应。这样的蜂产品包括蜂蜡、蜂胶(propotis)、蜂王浆、蜂蜜、蜂粮和蜂花粉。
借助背景且已知的是，蜂蜡是蜜蜂用来构建蜂窝的化合物，并且由游离脂肪酸(12%至14%)、游离的伯脂肪醇(1%)、线性蜡单酯和羟基单酯(35%至45%)、复合蜡酯(15%至27%)以及主链长度为C27-C33的奇数直链烃(12%至16%)组成。掺入花粉和蜂胶使得蜂蜡具有独特的黄色。蜂胶是由蜜蜂从植物来源收集的树脂状混合物，并且被用作修补蜂窝的密封剂。蜂王浆是蜜蜂分泌物，用来饲喂注定要成为蜂王的幼虫，它作为食物来源，被用来引发蜂王形态的发育。蜂蜜是一种蜜蜂的食物来源，使用来自花朵的花蜜制成。蜂粮是使用蜂蜜和花蜜压成颗粒的花粉，用来作为存储花粉的一种方法。蜂花粉是蜜蜂的主要能量来源。
上述蜂产品被理解为具有各种各样的保健益处，并普遍将它们加入到食物产品和营养药物食品中，并且需求大。例如，各种蜂产品已被用作免费药物(complimentary medicine)以治疗各种疾病。除了治疗炎症之外，据称蜂产品还已被用来对感冒和流感病毒提供防护，以提高精力和性欲，减少压力和抑郁、调节激素、抑制不健康的食欲、减轻体重、重建骨骼和组织、治疗阳痿和胃溃疡、以及作为膳食补充剂以对抗癌症、高胆固醇和心脏疾病。
具体来说，蜂花粉作为一般的预防用药，被认为提供保护以防止感冒和流感病毒、增加精力、性欲、耐力和心境、降低压力和抑郁、调节激素、抑制瘾头和不健康的食欲、减轻体重、重建骨骼、组织和肌肉、治疗贫血、哮喘、变应性疾病、阳痿、出血性胃溃疡、高空病，并且作为膳食补充剂已经用于癌症、高胆固醇疾病、心脏疾病[1,2]以及前列腺治疗[3]。德国联邦卫生局(German Federal Board of Health)已经认识到蜂花粉作为药物[2]。蜂胶，由于其抗微生物和免疫调节性能，被天然保健医生用来缓解炎症、病毒性疾病、溃疡、皮肤病、治疗普通感冒、创伤和烧伤、喉咙痛和牙菌斑[1,3]。蜂王浆被提出具有治疗骨骼脆弱、内分泌系统紊乱、关节炎、哮喘、阳痿和不育、帕金森氏病、生长迟缓、细菌性感染和其他疾病的益处[1]。用于健康目的使用蜂王浆没有被广泛报道[3]。即使是蜂蜜，一种常见的食物来源，是天然的精力增进剂、免疫系统的构建者和许多常见疾病，如割伤和烧伤、舒缓喉咙痛等的助剂。它是一种润肤剂并含有抗微生物性能[1]。
蜂花粉是花朵的花粉、蜜蜂消化液和花蜜的混合物，是蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质的丰富来源。它含有各种次生植物产品，如类黄酮、类胡萝卜素和萜烯[4]。关于其在变态反应中的用途，蜂花粉诱发患花粉变态反应患者的口腔脱敏[5]，并且几次最近的动物研究表明，蜂花粉抑制变应性反应。具体而言，蜂花粉的苯酚提取物(phenotic extract)抑制了足水肿、IgE(免疫球蛋白E)和IgG1(免疫球蛋白G1)卵清蛋白特异性生成、白细胞向肺部的转移(支气管肺泡灌洗(BAL))、卵清蛋白致敏小鼠的肺部中的嗜酸性粒细胞过氧化物酶(eosinophil peroxidise，EPO)活性。每天口服蜂花粉的小鼠显著降低了IgE特异性抗原诱发皮肤肥大细胞活化，并且体外降低见于肥大细胞降解(degranuatlofl)，而且在抑制IgE与受体(FcERI)的结合之后肿瘤坏死因子生产可以读取FcεRI[6]。
从蜂蜡(Apis mellifera)中纯化的高级脂族伯醇具有细胞保护作用，并在动物和人类中表现出适度的抗溃疡效果[7]。三十烷醇是该混合物的最丰富组分，称为D-002，在二十八烷醇和二十六烷醇之后，而二十四烷醇、三十二烷醇和十四烷醇以较低的浓度存在[8]。与蜂蜡和变态反应有关的期刊引文显示倾向于引起变态反应，而不是阻止它们[9,10]，蜂胶也有类似的发现报道[11,12]。
还已知的是，一些蜂产品如蜂花粉等在某些个体中诱发变应性反应，特别是那些患有豚草变态反应的人。蜂产品的纯化往往涉及很多提取步骤，以获得经分离的产物。这些步骤可能涉及多种有机溶剂、皂化和研磨，长时间的悬浮液形成，从其他植物性化合物的复合混合物中分离出蜂产品以及与诸多添加剂混合以增加生物活性(bloactivity)。
除了上文所述之外，现有专利的综述证实“蜂产品”的使用已经受到与使用这些产品所产生的各种健康益处有关的广泛研究。
例如，涉及蜂产品的以前工作包括Gamble等的美国专利7,141,611，其从蜂蜡和蜂花粉提取脂肪醇以在医药、食品和膳食补充剂中用作抗炎剂；授予Dato的美国专利6,482,442公开了一种含有蜂蜜、橄榄油以及蜂蜡、蜂胶、蜂王浆、蜂蜜和花粉的组合物，以治疗包括炎症在内的各种疾病；授予Ho等的美国专利7,351,739、授予De Gregorlo的美国专利6,342,255、授予Sembrano的2010/0034905，授予Mohammadi等的8,649,178以及授予McClung的6,579,543公开了使用花粉和/或蜂花粉来治疗炎症；授予CorviMora等的美国专利7,763,282、授予Glavas的2010/0074964公开了使用蜂胶治疗炎症；授予Miyata等的美国专利201010048128公开了使用蜂王浆治疗炎症；以及美国专利2,494,907提到蜂蜡粉霜(beeswax bloom)含有用以防止美国幼虫腐臭病蔓延的杀菌应用磺胺类药物的能力。
虽然在用以治疗炎症以及其他紊乱和病症的天然产品中具有越来越高的商业价值，但是现有产品仍然存在问题和困难，这限制了它们的整体作用和安全性。
本发明的一个目的是避免或减轻上述缺点中的一些或所有缺点。
发明内容
本发明提供了天然的抗炎组合物，所述组合物包含蜡粉霜的提取物。
在另一个方面，本发明提供了一种用于预防或治疗需要治疗的动物中的炎症疾病的方法，所述方法包括向所述动物施用治疗有效量的包含蜡粉霜的提取物的组合物。
本发明还提供了包含蜡粉霜的提取物的食物、饮料、营养药物食品、药学制剂、化妆品、生物药物、膳食补充剂、保健产品、调味品和调味料。
本发明还提供了包含蜡粉霜的提取物的局部制剂。
根据本发明，提供了一种从蜂蜡提取蜜蜂粉霜的方法，所述包括以下步骤：溶解蜜蜂粉霜于水性溶剂中以制得蜜蜂粉霜溶液。
在另一个方面，本发明提供了治疗有效量的蜜蜂粉霜提取物在治疗炎症中的用途，其中，所述用途可包括局部施用。
在结合附图和实施例阅读本发明的优选实施方式的说明之后，本领域的技术人员将更加清楚本发明的这些和其它目的和优点。本领域的技术人员将认识到，本发明的其他实施方式是可能的，并且本发明的细节在许多方面可以进行修改，所有这些都不脱离本发明的概念。因此，下面的附图、说明和实施例应被认为是说明性的而不是限制性的。
附图说明
现在将仅通过举例方式参考附图来描述本发明的实施方式，其中：
图1是来自体外研究的结果的图，其显示蜜蜂粉霜对致敏大鼠肠的卵清蛋白诱导的收缩反应的影响；
图2来自体外研究的结果的图，其显示在针对单独抗原的反应进行归一化时，蜜蜂粉霜对致敏大鼠肠的卵清蛋白诱导的收缩反应的影响；
图3是来自体外研究的结果的图，其显示蜜蜂粉霜以致敏大鼠肠的蜜蜂粉霜收缩反应与卵清蛋白诱导的收缩反应的比率表示的影响；以及
图4是来自体外研究的结果的图，其显示蜜蜂粉霜以致敏大鼠肠中采用抗原的蜜蜂粉霜收缩反应与采用碳酰胆碱的收缩反应的比率表示的影响。
具体实施方式
下文提供了本发明的一个或多个实施方式的详细描述以及展示本发明的原理的附图。因此，所述详细描述通过举例方式而不是通过限制方式阐述了本发明。所述描述将无疑使本领域的技术人员能够制造和使用本发明，并且描述了本发明的若干个实施方式、调整、变型、替代形式和用途，包括目前本发明人认为实施本发明的最佳方式。应当清楚理解的是，可以对所描述的本发明进行常规的改变和调整，并且这样的改变和调整直接落在本发明的精神和范围内。
换句话说，结合所述实施方式描述本发明，但本发明并不限定于任何的实施方式。本发明的范围仅由权利要求限制，并且本发明包括许多替代方式、修改方式和等同方式。许多具体的细节在下面的描述中给出，以提供对本发明的彻底理解。提供这些细节仅出于示例目的，本发明可以根据权利要求实施而没有一些或者所有这些具体细节。为了清楚的目的，没有详细描述在与本发明相关的技术领域中已知的技术资料，使得本发明没有受到不必要的蒙蔽。
在本公开内容和权利要求(如果有的话)中，术语“包含”和它的衍生词(包括“含”和“含有”)包括所述的整体或元素中的每一个，但不排除包括一个或多个另外的整体或元素。
如本文所用的，与测量量有关的术语“约”是指在该测量量中的正常变化，如进行所述测量并给予了与测量目的相称的关注水平的本领域的技术人员所预期的那样。
如本文所用的，单数形式“一种”、“一个”和“所述”包括复数个对象，除非上下文另有明确指出。例如，参考“取代基”，其包括一个单一的取代基，以及两个或更多个取代基，等等。
如本文所用的，术语“例如”、“如”、“诸如”或者“包括”的意思是指引入进一步阐明更一般的主题的示例。除非另有说明，否则这些示例仅作为一种用于理解在本公开内容中的应用的辅助手段来提供，并且不意味着以任何方式加以限制。
如本文所用的，术语“动物”是指动物界的任何成员，优选包括人类。
如本文所用的，术语“食物”或“食物产品”或“食物材料”是指用于动物用途包括人类用途的任何安全的、可摄取的产品，并且“功能性食品”、膳食补充剂、营养药物食品和“特制食物(designer food)”。
如本文所用的，术语“天然保健产品”是指维生素和矿物质、草药、顺势疗法药物和益生菌。
如本文所用的，“功能性食品”是指这样的一种产品，其在外观上类似于作为普通膳食的一部分而消费的传统食物，但它除了纯粹的营养优势之外，还展示了生理学上的益处。
如本文所用的，“营养药物食品”是指一种非药物产品的形式，其以一般与食物无关的但是具有生理学益处或者提供防病保护或有助于疾病或者病症的治疗的丸剂、粉剂、饮剂以及其他药学形式制备。
如本文所用的，“生物药物”是指从天然植物及其衍生物中提取的保健化合物或组合物。
在世界任何地方，营养药物食品、功能性食品、天然保健产品、生物药物和特制食品可以添加有或者包含提供医疗或保健益处(包括疾病的预防和治疗)的组分。
如本文所用的，“局部”是指受试对象(例如患者)的任何局部表面，如皮肤(包括头皮下)、鼻、窦、阴道、阴茎、尿道或肛门的表面。
如本文所用的，“治疗”是指出于抵抗炎性疾病、紊乱或症状目的的对病人的处理和护理。该术语拟包括减轻、改善或缓解症状和并发症和/或治愈或消除疾病、紊乱或病症。
术语“治疗有效量”或“有效量”是指达到所需的治疗或美容效果所需的组合物的量。
如本文所用的，术语“粉霜(bloom)”(也称为“反霜(fat bloom)”)是指在脂质基蜡组合物的表面上(“表面反霜”)或者在类似于在脂质基组合物内的松散填装粉末的β(贝塔)相晶体的同质中(“内部反霜”)形成的膜。反霜的原理通常被理解为蜡从亚稳相向热动力学上更加稳定的相的转变。由于反霜是一个热力学驱动的过程，因此它最终将出现在不处于其热动力学最有利的状态(例如处在β初始(β')相(beta prime phase)的蜡组合物)的脂质基蜡组合物中。虽然β'相不是热力学上最有利的状态，但是蜡烛的组合物可以设计成蜡从β'相向β相的转变为年级而不是月级或者日级。还可以通过在高温(高温可以为脂质蜡组合物提供必要的能量以发生相转变)储存蜡烛来加剧反霜。表面上的脂肪晶体随时间在尺寸上增大而首先形成暗淡的外观，在表面上有白色或者浅灰色的沉积物(相对于曾经是光泽表面的情况)。在白色沉积物变得可见之前，产品一般变得暗淡和模糊，失去了高光泽表面。尽管整个产品的质地在反霜的早期阶段之前没有显著变化，但是暗淡的外观和白色沉积物使得其对于消费者来说看起来老而陈旧。随着生长，反霜也显现出本身，这看起来像花椰菜，形成在蜡烛的表面或者内部(一般在其燃烧之后)，然后使金属熔池能够再固化。
对于蜂蜡，当蜡的一些低熔融组分转移至蜡烛的表面时，粉霜升至蜡烛的表面[13]。但是，它是一种一般未见报道的蜂蜡产品。在数据库MEDLINE(OVID),PubMed,Web of Science和Biological Sciences中采用关键词“蜂蜡”和“粉霜”检索时，并没有找到与粉霜的应用和组成有关的任何文献。组成粉霜的任何低熔融组分均未得到鉴定。蜂蜡提取粉霜还未受到针对其他蜂产品所进行的观测的科学研究。
粉霜也在由植物产生的角质层蜡上形成，并且被认为对昆虫寄生虫提供防护，因为其减少了粘附表面并且提供更少的粘附性表面[15,16]。除了所述物理功能之外，蜂蜡粉霜的其他作用或效果未得而知，不过对蜂巢上的粉霜似乎对蜜蜂没有影响[171，抗捕食者作用尚未讨论。
如上所述，蜜蜂粉霜是随时间在蜂蜡上形成的粉状涂层，其被理解为蜂蜡的转移至蜂蜡的表面的低熔点组分。特别是，它是在老化蜂蜡蜡烛上经常见到。
根据本发明，描述了提取蜜蜂粉霜的方法、蜜蜂粉霜组合物和蜜蜂粉霜的用途。特别是，蜜蜂粉霜被证明具有抗炎性能，如采用肠组织来研究蜜蜂粉霜对变应性反应的影响所进行的体外研究所证明的。
提取和纯化方法
根据本发明，提供了一种从蜂蜡提取蜜蜂粉霜的方法，所述包括以下步骤：在水性溶剂溶解蜜蜂粉霜以形成蜜蜂粉霜溶液。在另一个实施方式中，步骤a包括从蜂蜡的外表面刮下蜜蜂粉霜粉末，将刮下的蜜蜂粉霜粉末悬浮于水性溶剂中并从水性溶剂中除去颗粒物质。
水性溶剂是指用作溶解剂的物质或者能够溶解另一种物质的物质。最常见的溶剂是水。溶解不溶于(或者几乎不溶于)水的物质的其他普通溶剂有丙酮、醇、甲酸、乙酸、甲酰胺、BTX、二硫化碳、二甲基亚砜、四氯化碳、氯仿、醚、四氢呋喃、糠醛和己烷。它们可被分类为极性的和非极性的。极性溶剂像水具有电荷分布不均匀的分子，每个分子留有比其他末端更活跃的末端。一般极性溶剂具有O-H键，其中水(HOH)、(CH3OH)和乙酸(CH3COOH)就是例子。丙醇、丁醇、甲酸、甲酰胺是极性溶剂。含有C-O实键而没有O-H键的偶极性溶剂有丙酮[(CH3)2C=O]、乙酸乙酯(CH3COOCH2CH3)、甲基乙基酮、乙腈、Ν,Ν-二甲基甲酰胺和二甲基亚砜。非极性溶剂，如四氯化碳(CCl4)、苯(C6H6)和乙醚(CH3CH2OCH2CH3)具有电荷均匀分布的分子，并且与水不混溶。己烷、四氢呋喃和二氯甲烷是非极性溶剂。极性溶剂是亲水性的而非极性溶剂是亲脂性的。极性反应物会溶解在极性溶剂中。非极性溶剂溶解非极性化合物最好。油和水不混合，而是分成两层。极性有三种量度，即，“偶极矩”、“介电常数”和“水混溶性”。虽然低的偶极矩和小的介电常数表明是非极性溶剂，但是极性和非极性溶剂之间并没有明确的边界。极性反映了存在于同一分子中的极性(OH)组分和非极性烃组分之间的平衡。如果烃特性相对增加，那么极性降低。在工作基础上，可与水混溶的溶剂是极性的。
优选的是，所述水性溶剂包括一种或多种亲水性组分。或者，水性溶剂选自包括丙酮、醇、甲酸、乙酸、甲酰胺、BTX、二硫化碳、二甲基亚砜、四氯化碳、氯仿、醚、四氢呋喃、糠醛和己烷的组。更优选的是，所述溶剂是水性醇，但是可以使用其他醇，包括但不限于，甲醇和丙醇。最优选的是，所述溶剂是水性乙醇。
在一个更优选的形式中，所述提取方法包括：
a)从蜡材料中移出粉霜以形成“粗制粉霜”；
b)干燥所述粗制粉霜以形成“干粉霜”；
c)将所述干粉霜溶解在含水溶剂中，如上所述。
在一个优选的实施方式中，所述蜡材料来自蜂蜡。在更优选的实施方式中，所述蜂蜡或蜡材料是一种或者多种蜂蜡蜡烛或块。干燥可以通过蒸发、加热或其他任何传统的干燥步骤进行。在一个最优选的实施方式中，干粉霜于步骤c)中溶解在醇和水(最优选为乙醇和水)的亲水性混合物中。
在另一个实施方式中，蜜蜂粉霜溶液中的蜜蜂粉霜的浓度为1.0mg/mL以上。
从粉霜中提取的组合物
在某些优选的实施方式中，从蜡粉霜中提取和纯化的本发明的组合物包含一种或多种蛋白质、脂肪酸和肽。
更优选的是，所述组合物包含约20重量%至30重量%的作为ω脂肪酸最优选作为ωn-9脂肪酸的总脂肪酸。ωn-9脂肪酸(普遍被称为ω-9脂肪酸)是在n-9位置(即，从脂肪酸的末端起第9个键)共同具有最终的碳-碳双键的不饱和脂肪酸家族。在一个最优选的形式中，所述组合物包含20重量%至30重量%的油酸。
蛋白质是由一种或者多种通常折叠成球状或纤维状形式以利于生物学功能的多肽组成的生化化合物。多肽是通过相邻氨基酸残基的羰基和氨基之间的肽键键合在一起的氨基酸的单条线性聚合物链。
食物中的蛋白质浓度的经典测定法是凯氏定氮法和杜马斯法，并且在本技术领域中是众所周知的。这些测试确定样品中的总氮。只要氮量乘以一个因数(其取决于样品中所预期的蛋白质种类)，就可以确定总蛋白。此值被称为“粗蛋白”含量。
令人惊奇地发现的是，采用本发明的方法从蜡粉霜提取和纯化的组合物比残留蜂蜡具有显著校多的粗蛋白，并比蜂蜡具有浓度显著较高的长链脂肪酸。甚至更优选的是，从蜡粉霜提取和纯化的组合物比蜂蜡具有显著较多的ωn-9脂肪酸、比蜂蜡显著较多的C16：0(棕榈酸)、比蜂蜡显著较多的C18：3n3(α-亚麻酸)、比蜂蜡显著较多的C24：0(二十四烷酸)。尽管不打算受任何与本发明的组合物的抗炎性能有关的作用理论所约束，但是推测所述成分以比蜂蜡提取物高的水平联合提供了优越的抗炎作用。
在一个优选的形式中，所述组合物是包含比率为约1.4至1.6：1的CI6:0和C18：1n9的蜜蜂粉霜提取物。在一个优选的形式中，所述组合物是包含比率为约5至7：1的C18：1n9与C18：3n3的蜜蜂粉霜提取物。在一个优选的形式中，所述组合物是包含比率约为约2.2至2.9：1的C16:1和总粗蛋白。
在一个最优选的实施方式中，提取组合物包含表1中整个中间列所列举的组分。
组合物的用途
可以设想的是，本发明的组合物可以有益地以局部制剂施用于动物以治疗或改善炎性病症。对于外部应用，所述组合物可以被制成乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、喷雾剂、洗剂、皮肤滋补剂、香波或摩丝。皮肤喷雾剂一般由雾化共聚物，如聚乙烯吡咯烷酮和乙酸乙烯酯等组成，也可以用作定型洗剂。皮肤凝胶制剂在组成上类似于喷雾剂，但是呈凝胶和无醇形式，可以涂布皮肤。皮肤摩丝是在压力下从雾化罐释放的泡沫。皮肤护理组合物可被配制成疏水性或亲水性的乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、润肤剂、喷雾剂、洗剂、皮肤滋补剂、香波或摩丝，这些制剂可以适当地含有本领域已知适于用在皮肤护理组合物类型的额外(可选)组分，并且这样的进一步的成分可以包括矿脂、蜡、羊毛脂、硅酮、脂质体、植物油、矿物油、增塑剂、香料、防腐剂、渗透促进剂、pH调节剂或其他适用于局部皮肤组合物的组分。这样的组分可以润湿皮肤、稳定活性化合物、增加药物与皮肤的接触和局部浓度、控制药物缓释、和/或帮助减少皮肤破损、防止皮肤萎缩、纤维化和感染，并促进皮肤伤口的愈合，如果需要的话。
本发明进一步提供了一种治疗或改善非粘膜局部组织的适应症的方法，所述方法包括：周期性地向受到所述疾病或病症影响的组织施加包含治疗有效量的蜡粉霜提取物的适当组合物的组合物。
本发明还包括将所述组合物施加在膜、贴剂或粘性固体制剂上面或者里面。本发明还提供洗剂、凝胶剂、乳膏剂、软膏剂及或栓剂，其包含：有效量的草本生物活性剂的适当组合物，所述生物活性剂包含如本文所述的活性剂，可选的是，其中所述组合物进一步在粘膜表面上形成粘膜粘附性涂层。
本发明的组合物可以配制成局部或粘膜治疗中所采用的许多组合物中任意组合物。例如，所述组合物可以配制成浴液(bath)或浸液、溶液、洗剂、凝胶剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、适于释放所述组合物的敷料、滴注溶液或泡沫等。在某些实施方式中，所述组合物以储库或粘性贴剂或者膜(如US2007/149902中所述)施加。
在某些实施方式中，所述组合物被配制成洗剂、凝胶剂、乳膏剂、软膏或栓剂。
其他剂型
本发明提供了一种用于治疗或预防炎症的方法，所述炎症包括冠状动脉斑块炎症、细菌诱导性炎症、病毒诱导性炎症和与创伤、急性疼痛和手术过程相关的炎症，所述方法包括向动物施用非毒性且治疗有效量的组合物，所述组合物包括经提取和纯化的蜡粉霜。
令人惊奇地发现，本发明的提取物和组合物表现出优异的抗炎活性，因此具有广泛的各种治疗和美容用途。
在某些实施方式中，所述组合物结合其它施用形式施用，所述其他施用形式例如为膜、贴剂或粘膜粘附性固体剂型。所述固体剂型可以在施用所述组合物之前、同时或之后施加。所述固体剂型能够帮助将药物输送至影响更严重的或机械更容易到达的组织，而所述组合物将药物输送至其他地方。所述固体剂型中的药物可以与本发明的组合物的药物相同或不同。例如，可以采用WO02/094300和美国专利No.7,285,295中描述的剂型。或者，可以采用于2007年6月20日申请、名称为“Anti-Inflammatory Dissolvable Film”、序列号为11/765,587的申请中所描述的膜。
在某些实施方式中，针对全身性施用调整其他剂型，例如通过口服剂型或通过静脉注射剂型。
本文描述的所需效果可以采用许多不同的方式来实现。本发明的化合物和组合物可以通过能够与药品、营养药物食品、食物和饮料等结合使用的任何常规方法来施用。
一种用于治疗炎症的药物组合物，所述炎症包括冠状动脉斑块炎症、细菌诱导性炎症、病毒诱导性炎症和与创伤、急性疼痛和手术程序相关的炎症，所述组合物包含如本文所述的蜡粉霜提取物和可选的佐剂或载体。
一种用于治疗和减轻炎症的方法，所述炎症包括冠状动脉斑块炎症、细菌诱导性炎症、病毒诱导性炎症和与创伤、急性疼痛和手术程序相关的炎症，所述方法包括向动物施用非毒性且治疗有效量的如本文所述的蜡粉霜提取物和可选的佐剂或载体。
剂量
实现所期望的治疗或美容效果所需的化合物或组合物的量当然取决于很多因素，如施用方式、动物(待治疗的受试对象)的病症和大小。这种剂量调整完全处在本领域的技术人员的能力范围之内。
然而，作为一个指导原则，假设在粉霜提取物中的活性组分的分子量为约300道尔顿，所述组合物的有效临床剂量在口服施用时可以如下所示(以受试对象的每kg重量计)：
约10μg/kg至3mg/kg
更优选为约100μm/kg至1mg/kg
更优选为约500μg/kg至800μg/kg的窄范围
比上面所述的那些剂量较低的剂量可能对于局部应用是足够的，并且可以为约10μg至1mg/剂量(或者甚至更低)，即，比口服摄入所需的低至少70倍。
本发明的化合物和组合物可以通过如下方式施用于患者：
·局部施加
·在药物组合物中，其中它们与合适的载体或者赋形剂混合以用于口服、含服或其他常规用法
·混合在食物中
·混合在饮料中
·混合在营养药物食品中
·混合在膳食补充剂如维生素和咀嚼片中
·组合作为生物药物制剂的一部分
使用生理上可接受的载体将这里所公开的用于实践本发明的化合物和组合物配制成适于全身性施用的剂量是处在本发明的范围之内。载体的正确选择和合适的制造实践、本发明的化合物和组合物，特别是配制成溶液的那些化合物和组合物可以通过胃肠外施用，如通过静脉内注射施用。所述化合物和组合物可以使用本领域所熟知的药学上可接受的载体容易地配制成适合于口服施用的剂量。这样的载体使本发明的化合物和组合物可以被配制成片剂、丸剂、胶囊(包括软凝胶胶囊)、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂和悬浮剂等以供待治疗患者口服摄入。
包含一种或多种本发明化合物的药物组合物包括其中以有效量包含以实现它们的预期目标的活性组分的组合物。有效量的确定完全处在本领域的技术人员的能力范围之内，尤其在本文提供的详细披露内容的基础上。
除了所述活性组分之外，这些药物组合物还可以含有合适的药学上可接受的载体，所述载体包括便于将活性化合物加工成药学上可以使用的制剂的赋形剂和辅料。配制用于口服施用的制剂可以是片剂、糖锭剂、胶囊剂或溶液剂的形式。
本发明的输送组合物可以通过本身已知的方式，例如常规的混合、溶解、制粒、糖衣制备、制粉、乳化、包封、包埋或冷冻干燥工艺进行制造。
用于肠胃外施用的制剂包括水溶性形式的粉霜提取组合物的水溶液。此外，可以将活性化合物的悬浮液制备成适当的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或媒介物包括脂肪油如芝麻油或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯或脂质体。水性注射悬浮液可以含有增加悬浮液的粘度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。可选的是，该悬浮液还可以包含合适的稳定剂或增加所述化合物的溶解度的试剂以允许制备高度浓缩的溶液。
用于口服使用的制剂可以通过以下方式获得：将活性组合物与固体赋形剂组合，可选地研磨所得的混合物，并且在添加合适的辅料(如果需要的话)之后，加工颗粒混合物，从而得到片剂或糖锭剂内核。合适的赋形剂包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的话，可以加入崩解剂，如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或藻酸或其盐，如藻酸钠。
为糖锭剂内核提供合适的包衣。为了这个目的，可以使用浓缩的糖溶液，其可以可选地含有阿拉伯树胶、滑石粉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚羧乙烯凝胶(carbopol gel)、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以将染料或颜料添加到片剂或糖锭剂包衣中以识别或表征不同的活性化合物剂量的组合。
可用于口服的药学制剂包括由明胶制成的推入配合式胶囊，以及由明胶和增塑剂如甘油或山梨糖醇制成的软密封胶囊。推入配合式胶囊剂可以含有与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁以及可选的稳定剂混合的活性组分。在软胶囊中，活性化合物可被溶解或悬浮在合适的液体，如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可以添加稳定剂。
口服的液体制剂可以呈例如乳剂、糖浆剂或酏剂，或者可以作为在使用前以水或其它适宜媒介物重新配制的干燥产品的形式存在。这样的液体制剂可含有常规的添加剂，例如悬浮剂如山梨糖醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶、氢化食用脂肪、乳化剂例如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯树胶；非水性媒介物(其可以包括食用油)，例如扁桃仁油、分馏的椰子油、油酯如甘油、丙二醇或乙醇的酯；防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸；以及如果需要的话，常规的调味剂或着色剂。
在本发明的另一种形式中，本发明的化合物和组合物可通过食物、饮料和营养药物食品施用，包括但不限于以下形式：
1)乳制品—如奶酪、黄油、牛奶和其他乳品饮料、涂酱(spread)和乳乳品混合物、冰淇淋和酸奶；
2)脂肪基产品—如人造黄油、涂酱、蛋黄酱、起酥油、烹饪和煎炸油和敷料；
3)谷物基产品—包括谷粒(例如，面包和面条)，不管这些商品是否经过蒸煮、焙烤还是以其他方式加工；
4)甜食—如巧克力、糖果、口香糖、甜品、非乳制品配料(例如Cool
Figure BDA0000378202910000161
)、果汁冰糕、酥皮和其他馅料；
5)饮料—不论是酒精类还是非酒精类饮品，并且包括可乐及其他软饮料、果汁饮料、膳食补充剂和膳食替代饮料，如以
Figure BDA0000378202910000162
和
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为商标名售卖的那些饮料；
6)杂项产品—包括蛋和蛋制品、加工食物如汤、预制面酱和预成型的饭菜等。
本发明的化合物和组合物可通过诸如混合、输注、注射、共混、分散、乳化、浸渍、喷雾和捏合等技术被直接加入食品、营养药物食品或饮料中而没有进一步改变。或者，所述化合物和组合物可在被摄入之前由消费者直接施加至食品上或饮料中。这些都是简单和经济的输送方式。
虽然本文所述的组合物、方法和工艺的形式构成了本发明的优选实施方式，但是应当理解的是，本发明并不限于这些精确的形式。如本领域的技术人员而言清楚了解的那样，可以将上述的各种实施方式组合以提供进一步的实施方式。如果有必要的话，本发明组合物、方法和工艺(包括其特定的组分)的诸多方面可加以改变以最好地采用本发明的系统、方法、节点和组分和概念。这些方面被认为是充分地处在本发明所要求保护的范围之内。例如，上述的各种方法可以省略一些行为，包括其他的行为，和/或以不同于所示的实施方式中给出的顺序执行行为。
另外，在本文所教导的方法中，各种行为可能会以不同于所展示和描述的顺序来执行。此外，所述方法可以省略一些行为，和/或采用额外的行为。
根据以上描述，可以对本发明系统、方法和制品进行这些和其他的改变。一般而言，在后面的权利要求中，所使用的术语不应该被解释为将本发明限制于说明书和权利要求书中所公开的具体实施方式，而是应该被解释为包括所述权利要求所限定的所有可能的实施方式和全部范围的等同物。因此，本发明并不限于本公开内容，相反，本发明的范围完全由后面的权利要求来确定。
实施例：
实施例1：提取和纯化步骤
材料与方法
使用刮刀通过刮擦蜂蜡蜡烛获得蜜蜂粉霜。所述蜡烛通过当地零售商获得，并且全部蜡烛都是由同一批次获得。在使用之前，将蜂蜡蜡烛大致地冷却1至2周。蜂蜡蜡烛中的蜡来自不用化学品的农场。在蜡中没有包含维生素E、胡桃油或动物副产物。
蜡烛在15℃的环境温度下被存储在密封的玻璃罐中数周，这个时间对于使粉霜显现在蜡烛的表面上是足够的。刮擦蜡烛并将刮擦物收集到由金属盖密封的玻璃容器中并于15℃存储。刮擦蜡烛获得的产物含有蜂蜡污染物，该蜂蜡污染物通过使用醇萃取来去除。还可以在采用或者未采用机械作用例如搅拌和/或超声处理的情况下，通过施用水/乙醇混合物洗涤蜂蜡来从蜂蜡分离出蜜蜂粉霜。
从蜂蜡刮擦物将蜜蜂粉霜提取到1mm的70%乙醇和30%过滤水的混合物中。对溶液进行5次超声处理，时间为1分钟，在500rpm(约40克力)对所得的悬浮液离心3分钟以除去大的颗粒物质。该颗粒物质主要是蜂蜡。收集悬浮液并以500l等分试样储存于-20℃。在本研究中使用的稀释液和含有10mg/ml蜜蜂粉霜的基准母液为数纳克(ng/ml；109g/ml)级。在Krebs缓冲液中配制所有来自母液(悬浮液)的稀释液。本研究所用的样品量在表1中显示。
表1.添加至毫升的有机浴液体积的蜜蜂粉霜的不同剂量的N-值。
纳克/ml N
100.0 7
35.0 5
10.0 7
3.5 5
1.0 7
实施例2：体内大鼠研究
统计分析
数据表示为平均值±标准误差。使用Student t检验对成对样品进行数据分析。如果p<0.05，认为差异具有显着性。采用使用绝对偏差的中值的修正Z分数进行孤立点分析，绝对值大于4.0的Z分数被标记为潜在的离群值，并排除相应的数据值。
动物
对初始体重为150g的雄性Spragueoawley大鼠(Charles RiverLaboratories,Montreal,QC)保持700小时至1900小时的光照，并让它们自由进食和饮水。使用50ng的百日咳毒素(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)作为佐剂以1mg卵清蛋白(OA)致敏大鼠。
体外过敏反应
致敏后5至8周，将大鼠的终端真皮(terminal deum)切下并将1厘米的切片安在25ml器官浴槽(organ bath)中，所述器官浴槽装有碳酸氢盐Krebs缓冲液，张力为1.0g。使用Grass Force Displacement Transducer FT03(Quincy,MA>测量响应于OA和碳酰胆碱(CAR;(2-[(氨基羰基)氧基-N,N,N-三甲基乙铵)，一种胆碱能激动剂(Sigma-Aldrich)所产生的等长收缩力。使用PoMew软件(Polybytes,Inc.,Cedar Rapids,IA)记录数据。让组织平衡30mm，在此期间，使用缓冲液将它们洗涤数次，并调节所施加的张力。
将8个组织节段安装在单独的组织浴槽中，每个组织节段用于评估肠组织是否响应于抗原而引起收缩反应。其他组织使用蜜蜂粉霜浓度之一进行处理。蜜蜂粉霜的每个剂量使用来自4只不同动物的最少4个肠节段。对抗原没有收缩反应的情况下，将组织丢弃，并且采用另外的动物。
以10-8M的剂量使用对照抗变应性化合物(肽foG(D-苯基丙氨酸-谷氨酸盐-甘氨酸))。在图中，该化合物被看作是对照。
通过将蜜蜂粉霜添加至独立浴槽中并温育10分钟，然后使用1mg的AR抗原挑战来确定蜜蜂粉霜的抗过敏反应性能。达到峰值收缩反应之后，洗涤组织3次，重新建立基线并得到响应于10-5M CAR的峰值收缩反应。然后从组织刮下粘膜，确定肌肉的质量。将反应确定为克力/毫克湿组织。
测量在峰浓度时对OA和CAR的收缩反应，并计算克力/克湿组织。结果以如下三种方式表示：
i)OA诱导性收缩反应(克力/毫克湿组织)的振幅，
ii)蜜蜂粉霜反应与OR反应的比率(蜜蜂粉霜/OA)(即动物相比于对照)，
iii)OA和CAR诱导性收缩反应(ONCAR)的比率(即组织相比于对照)。
示例：蜜蜂粉霜对肠组织的变应性反应的影响。
OA诱导性收缩反应
当数据以g张力/g组织提供时，两个剂量的蜜蜂粉霜(3.5和35ng/ml)显著地抑制了致敏大鼠肠的抗原引发性收缩(图1)。当针对抗原(OR)反应进行归一化时，三个剂量(3.5、10和35ng/ml)的蜜蜂粉霜对抗原诱导性收缩显示出显著的抑制作用(图2)。这些差异反应了在10ng/ml剂量的蜜蜂粉霜时异常高较高的反应(离群值)。对照显著地抑制了抗原诱导性收缩。
蜜蜂粉霜反应与OA反应的比率
当考虑蜜蜂粉霜和CA的收缩反应的比率时(即动物相比于对照)，蜜蜂粉霜在3.5、10和35ng/ml时对致敏大鼠肠的抗原诱导性收缩显示出显著的抑制作用(图3)。对照显著地抑制了抗原诱导性收缩。
OA和CAR诱导性收缩反应的比率
采用OA：CAR比率(即组织相比于对照)，蜜蜂粉霜在35、10和35ng/ml时对致敏大鼠肠的抗原诱导性收缩显示出显著的抑制作用(图4)。对照没有显著地抑制OA:CAR比率。
讨论
蜜蜂粉霜在3.5、10和35ng/ml剂量时对致敏大鼠肠的抗原诱导性收缩显示出显著的抑制作用。这种抑制作用在原始数据(图1和2)、动物相比于对照(图3)和组织相比于对照(图4)中观测到。采用蜜蜂粉霜所见到的-40%的抑制作用严格与对照所见到的匹配。
虽然用以提取蜜蜂粉霜的方法将有利于收集脂质分子，但是一些亲水性蛋白也会被提取。虽然蜂花粉是所有蜂产品(蜂胶、蜂王浆、蜂蜜、蜂蜡、蜂粮、蜜蜂粉霜)的前体，但是蜂花粉和蜜蜂粉霜具有不同的组分，这是因为蜜蜂粉霜溶解于较为亲水的水和乙醇的混合物中，而使用具有较低亲水性的溶剂，如二氯甲烷、或者氯仿:甲醇的混合物来提取蜂蜡。水：乙醇提取倾向于分离游离的脂肪酸、游离的伯脂肪醇和蛋白质，而不是蜡酯和直链烃。
根据本发明的蜜蜂粉霜可以以各种形式包括加入到局部皮肤软膏剂、锭剂和胶囊而有效地治疗炎症。
虽然本发明已就优选的实施方式及其优选的用途进行描述和阐述，但是本发明应不局限于此，这是因为可以在其中进行修改和变化，这些修改和变化，如本领域的技术人员所理解的，处在本发明的完整的预期范围之内。
实施例3：粉霜提取物分析
将POS收缩(contract)至提取物并分析来自蜂蜡的粉霜的组成。另外，评价了粉霜形成(bloom development)的储存条件。
目的
1.评价适合粉霜形成的储存条件。
2．使用由客户提供的方法从蜂蜡提取粉霜。
3．蜜蜂粉霜和残留蜂蜡的组成分析(包括总酚含量、残留溶剂、脂肪酸组成、总脂肪醇含量、粗蛋白含量和元素分析)。
1.材料与方法
1.1材料
将蜂蜡(块和蜡烛)用于加工试验。
用于粉霜提取的无水乙醇购自Commercial Alcohols,Winnipeg,MB.。
1.2设备
真空烘箱：Fisher ISOTEMPa真空烘箱281型(Fisher Scientific,Toronto,ON)。
旋转真空蒸发仪：Buchi Rotavapor R-151旋转蒸发仪(BrinkmannInstruments,Mississauga,ON)。
加工方法
粉霜形成
为了增加蜂蜡块和蜡烛上用于粉霜形成的表面积，使一些块液化，并倒入浅的方盘中以形成蜂蜡片。在黑暗和光照下将蜂蜡片和块于室温储存。根据客户的要求，一个蜡片样品于室温保存在玻璃真空罐中。此外，三根蜡烛燃烧4小时，然后将其于黑暗中储存以助于粉霜形成(24)。
粉霜提取
使用金属刮刀刮擦蜂蜡蜡烛、块和片。根据实施例1中提供的方法提取粉霜。提取后，在旋转蒸发仪和真空烘箱中干燥粉霜和残留的蜂蜡以获得总干重。然后将干燥的粉霜溶解在100ml的70%的乙醇中并在组成分析之前放在冰箱中。
组成分析
对在真空烘箱中干燥的粉霜提取物和残余蜂蜡进行下列分析：
粗蛋白：AOC Ba4e-93
总脂肪酸组成：AOAC969.33
总酚含量：Slinkard和Singleton法的改进方法(29)
总脂肪醇：Jimenez等的改进方法(25)
另外，对残留的蜂蜡进行以下分析：
元素分析：AOCS Ca20-99
残留溶剂：AOCS Cg4-94
结果与讨论
粉霜形成
粉霜提取
提取总量为0.59g的干粉霜并将其溶解在100ml的70%的乙醇中。将粉霜/乙醇母液(5.9g/ml)(其颜色为浅黄色)储存在冰箱中并用于组成分析。当将溶液储存在冰箱中时，观察到白色松软的析出物。
组成分析
粉霜和残留的蜂蜡的总酚含量、粗蛋白、总脂肪酸和总脂肪酸醇含量示于表1中。在粉霜提取物中的粗蛋白含量(其基于存在于样品中的总氮进行估算)显著较高于残留蜂蜡中的粗蛋白含量。根据文献(25)，在蜂蜡中观察到羟基脂肪酸，但是，由于GC柱的差异，在本分析中，没有鉴定羟基脂肪酸。在粉霜提取物中没有检测到脂肪醇，但是在残留的蜂蜡中检测到4种饱和脂肪醇。
讨论
一些研究表明，蜂花粉(其包含约35%的蛋白质)的抗变应性作用可能归因于花粉中酚类化合物、高级脂族伯醇、脂溶性组分的存在(26、27和28)。在本研究中，残留蜂蜡中的酚含量和脂族醇均显著地高于粉霜提取物中的酚含量和脂族醇。但是，含氮化合物(如蛋白质、肽、氨基酸)、C16：0、C18：1n9和C18:3n3在本发明的粉霜组合物中显著较高。
表2.粉霜提取物和残留蜂蜡的组成分析
分析物(以mg/g样品表示) 粉霜提取物 残留蜂蜡
总酚含量1 3.2 248
粗蛋白 40.8 3.4
总脂肪酸组成2
C12:0 1.3 0.3
C14:0 1.9 0.4
C15:0 0.2 ND
C16:0 115.8 60.1
C16:1n7 2.0 0.2
C17:0 0.3 ND
C17:1 0.4 0.1
C18:0 7.3 2.6
C18:1n9 71.8 10.7
C18:1 0.7 0.1
C18:2 7.7 0.2
C18:3n3 11.8 6.1
C18:4 ND 0.2
C20:0 1.3 1.0
C20:1 2.2 0.6
C20:5n3 ND 0.2
C22:0 8.4 2.7
C22:1n9 0.8 0.1
C21:5n3 ND 0.1
C22:4n6 0.3 14.7
C22:5n6 0.4 0.2
C24:0 21.3 27.4
C24:1n9 1.7 ND
其他 10.1 4.6
总脂肪酸 267.7 132.6
总饱和物 157.8 94.5
总单不饱和物 79.6 11.8
总多不饱和物 20.2 21.7
总ω3 11.8 6.6
总ω6 8.4 15.1
总ω9 76.5 11.4
总脂肪醇3
C24:0 ND 0.69
C26:0 ND 0.62
C28:0 ND 0.74
C30:0 ND 1.7
1总酚含量表示为mg没食子酸当量/g样品。
2这里只是列出常见的脂肪酸。不常见的脂肪酸例如羟基脂肪酸和支链脂肪酸没有分析。
3鉴定到多达30个碳链长度的饱和脂肪醇。
ND：没有检测。
残留蜂蜡的残留溶剂和元素分析显示在表3中。由于粉霜提取物样品的量有限，因此没有测量残留溶剂和元素的存在。
表3.残留蜂蜡的残留溶剂(乙醇)和元素分析
分析 残留蜂蜡
残留溶剂 乙醇＜1.0ppm
元素分析
磷 5.60ppm
镁 0.94ppm
钾 ＜0.50ppm
钠 ＜0.50ppm
钙 9.26ppm
铜 ＜0.05ppm
铁 1.38ppm
参考文献
1.Fields D.The Health Benefits of Bee Products(蜂产品的健康益处).2010[2010年10月25日引用，2010]；可从http://www.suitel01.com/content/the-benefits-of-bee-products-a292871获得.
2.Lyngheim L,Scagnetti J.Bee Pollen:Nature's Miracle Health Food(蜂花粉：天然的惊人的保健食品),Hollywood,California:Wilshire Book Company,1979.
3.Hellner M,Winter D,von Georgi R,Munstedt K.Apitherapy:usage andexperience in german beekeepers(蜂疗：德国养蜂人中的应用和经验).EvidBased complement Altemat Mod2008;5(4):475-479.
4.Campos M,Markham KR,Mitchell KA,Proenca da Cunha A.AnApproach to the Characterization of Bee Pollens via their Flavonoid/PhenolicProfiles(通过它们的类黄酮/酚谱表征蜂花粉的一种方法).PHYTOCHEMICAL ANALYSIS1997;8:181-185.
5.Stickl H,Kerscher G.(Treatment of hay fever with new pollencapsules(采用新型花粉胶囊对干草热进行的治疗)).Fortschr Med1980;98(10):343-346.
6.Ishikawa Y,Tokura T,Ushlo H,Niyonsaba F,Yamamoto‘1,Tadokoro T等.Lipid-soluble components of honeybee-collected pollen exert antiallergiceffect by Inhibiting lgE-mediated mast cell activation in vivo(蜜蜂收集的花粉的脂溶性组分通过抑制IgE介导的肥大细胞体内激活发挥抗变应性影响).Phytother Res2009;23(11):1581-1586.
7.Mendoza S,Noa M,Perez Y,Mas R.Preventive effect of D-002,amixture of long-chain alcohols from beeswax,on the liver damage induced withCCI4in rats(D-002，一种来自蜂蜡的长链醇的混合物，对大鼠中由CCI4诱导的肝损伤的保护作用).J Med Food2007;10(2):379-383.
8.Más R.D-002.Drugs of the Future(未来药物)2001;26:731—744.
9.Garcia M,del Pozo MD,Diez J,Munoz0,de Corres LF.Allergic contactdermatitis from a beeswax nipple-protective(来自蜂蜡奶嘴保护性的变应性接触性皮炎).Contact Dermatitis1995;33(6):440-441.
10.Harper JI,Gray W,Wilson-Jones E.Cryoglobulinemia andangiomatosis(冷球蛋白血症和血管瘤病).Br J Dermatol1983;109(4):453-458.
11.Jensen CD,Andersen KE.Allergic contact dermatitis from cera alba(purified propolis)in a lip balm and candy(来自唇膏和糖果中的白蜂蜡(经纯化的蜂胶)的变应性接触性皮炎).Contact Dermatitis2006;55(5):312-313.
12.Rajpara S,Wilkinson MS,Kng CM,Gawkrodger DJ,English JS,Statham BN等.The importance of propolis in patch testing--a multicentresurvey(蜂胶在贴剂检验中的重要性—多中心调查).Contact Dermatitis2009;61(5):287-290.
13.Van Allen J.Annie’s Apitherapy.2010[2010引用；可从http://www.anniesapitherapy.com/beeswax.htm获得.
14.Small AV,Small AVSmall AVs;Beecomb Foundation(蜂巢建立),assignee.名称未知.美国专利2,494,907.1947.
15.Duotting PS,Ding H,Neuteld J,Eigenbrode SD.Plant waxy bloom onpeas affects infection of pea aphids by Pandora necaphidis(豌豆上的植物蜡状粉霜通过Pandora necaphidis影响豌豆蚜的感染).J lnvertebr Pathol2003;84(3):149-158.
16.Eigenbrode SD.The effects of plant epicuticular waxy blooms onattachment and effectiveness of predatory insects(植物叶表皮蜡状粉霜对食肉性昆虫的粘附和有效性的影响).Arthropod Struct0ev2004;33(1):91-102.
17.Lyttle S.Lyttle P.New Zealand Beeswax Ltd.2010年10月10日,2010[2010年10月25日引用,2010];Welcome to New Zealand Beeswax Ltd.
http://www,beeswax.co.nZ/iflfOrmatiOrLhtm.
18.Metwally E,Pires JM,Moore GJ,Bet us DA,Davison JS,Mathison ftSubmandibular gland tripeptide FEG(Phe-Glu-Gly)and analogues:keys tostructure determination(颌下腺三肽FEG(Phe-Glu-Gly)和类似物：结构决定的关键).Peptides200223(1):193-199.
19.Kosecka U,Marshall JS,Crowe SE,Bienenstock J,Perdue MI-I.Pertussis toxin stimulates hypersensitivity and enhances nerve-mediated antigenuptake in rat intestine(百日咳毒素刺激大鼠肠中的超敏性并增强神经介导的抗原吸收).Am J Physic!1994;267(5Pt1):G745-753.
20.lglewicz B,Hoaglin D.第16卷：How to Detect and Handle Outliers(如何检验并处理离群值),1993.
21.Methods NSe-HoS.Detection of Outliers(检测离群值)–页码-1.3.5.17.2010[2010年7月30日引用,2010];可从httpl/www.itl.nist.gov/div898/handbook/获得.
22.lshikawa Y,Tokura T,Nakano N,Hara M,Niyonsaba F,Ushio H等,inhibitory effect of honeybee-collected pollen on mast cell degranulation in vivoand in vitro(蜜蜂收集花粉对肥大细胞体内和体外脱粒的抑制作用).J MedFood2008;11(1):14-20.
23.Medeiros KCP,Figueiredo CAV,Figueredo TB,Freire KRL,SantosFAR,Alcantara Neves NM等.Anti-allergic effect of bee pollen phenolic extractand myricetin in ovalbumin-sensitized mice(蜂花粉酚提取物和杨梅酮在卵清蛋白致敏小鼠中的抗变应性作用).Journal of Ethnopharmacalogy2008;119:41-46.
24.How to Create Bloom on Beeswax Candles(如何在蜂蜡蜡烛上形成粉霜).http://www.ehow.com/how_4866142_create-bloom-beeswax-candles.html-- 于2011年11月8日.
25.Jiminez,J.J.,Bernal,J.L.,Aumente,S.,Toribio,J.B.Jr.(2003)Qualityassurance of commercial beeswax(商业蜂蜡的质量保证)11.Gaschromatography-electron impact ionization mass spectrometry of alcohols andacids(醇和酸的气相色谱-电子撞击离子化质谱).第1007卷,101-116.
26.Medeiros,K.C,Figueiredo,C.A.,Figueredo,T.B.,Freire,K.R.,Santos,F.A，，Alcantara-Neves,N.M.,Silva,T.M.,Piuvezam,M.R.(2008)Anti-allergiceffect of bee pollen phenolic extract and myricetin in ovalbumin-sensitizedmice(蜂花粉酚提取物和杨梅酮在卵清蛋白致敏小鼠中的抗变应性作用).第119卷,41-46.
27.Mendoza,S.,Noa,M.,Pbez,Y.,Mas,R.(2007)Preventive effect ofD-002,a nixture of long-chain alcohols from beeswax,on the liver damageinduced with CCI4in rats(D-002，一种来自蜂蜡的长链醇的混合物，对大鼠中由CCI4诱导的肝损伤的保护作用).第10卷,379-383.
28.lshikawa,Y.,Tohura,T.,Niyonsaba,F.,Yamamoto,Y.,Tadokoso,T.,Ogawa,H.,Okumura,.(2009)Lipid-soluble components of honeybee-collectedpollen exert allergenic effect by inhibiting IgE-mediated mast cell activation invivo(蜜蜂收集的花粉的脂溶性组分通过抑制IgE介导的肥大细胞体内激活发挥抗变应性影响).第23卷,1581-1586.
29.Slinkard,K.&Singleton,V.L.(1977)Total Phenol Analysis:Automation and Comparison with Manual Methods(总酚分析：自动化与手动方法的比较).Am.J.Enol.Vitric,第28卷(1).49-55.

Claims (29)

1.一种抗炎组合物，所述抗炎组合物包含蜡粉霜的提取物。
2.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物包含至少一种蛋白质、脂肪酸和肽。
3.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物包含约20重量%至30重量的以ωn-9脂肪酸计的总脂肪酸。
4.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物包含比率为约1.4至1.6:1的C16:0和C18:1n9。
5.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物包含比率为约5至7:1的C18:1n9和C18:3n3。
6.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物包含比率为约2.2至2.9:1的C16:0和总粗制蛋白质。
7.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述蜡粉霜衍生自蜂蜡。
8.一种用于预防或治疗需要治疗的动物中的炎症疾病的方法，所述方法包括向所述动物施用治疗有效量的包含蜡粉霜的提取物的组合物。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述组合物包含至少一种蛋白质、脂肪酸和肽。
10.根据权利要求8所述的方法，其中，所述组合物包含约20重量%至30重量的以ωn-9脂肪酸计的总脂肪酸。
11.根据权利要求8所述的方法，其中，所述组合物包含比率为约1.4至1.6:1的C16:0和C18:1n9。
12.根据权利要求8所述的方法，其中，所述组合物包含比率为约5至7:1的C18:ln9和C18:3n3。
13.根据权利要求8所述的方法，其中，所述组合物包含比率为约2.2至2.9:1的C16:0和总粗制蛋白质。
14.一种从蜂蜡中提取蜜蜂粉霜的方法，所述方法包括如下步骤：将蜜蜂粉霜溶解在水性溶剂中以制得蜜蜂粉霜溶液。
15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述蜡粉霜衍生自蜂蜡。
16.根据权利要求14所述的方法，其中在溶解之前，以粉末形式从所述蜂蜡的外部表面刮下蜜蜂粉霜，然后将所述蜜蜂粉霜悬浮在水性溶剂溶液中，并且随后去除颗粒物质。
17.根据权利要求14所述的方法，其中，所述蜜蜂粉霜溶液中的蜜蜂粉霜的浓度为10mg/ml以上。
18.根据权利要求14所述的方法，其中，所述水性溶剂是亲水性的。
19.根据权利要求14所述的方法，其中，所述水性溶剂选自由包含如下物质组成的组：丙酮、醇、甲酸、乙酸、甲酰胺、BTX、二硫化碳、二甲基亚砜、四氯化碳、氯仿、醚、四氢呋喃、糠醛和己烷。
20.根据权利要求14所述的方法，其中，所述水性溶剂是水性醇。
21.根据权利要求14所述的方法，其中，水性溶剂是乙醇/水。
22.治疗有效量的蜜蜂粉霜提取物在治疗炎症中的用途。
23.根据权利要求22所述的用途，其中，所述用途包括局部施用。
24.包含蜜蜂粉霜提取物的食物产品。
25.包含蜜蜂粉霜提取物的饮料。
26.包含蜜蜂粉霜提取物的营养药物食品。
27.包含蜜蜂粉霜提取物的药物制剂。
28.包含蜜蜂粉霜提取物的膳食补充剂。
29.包含蜜蜂粉霜提取物的局部制剂。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112022881A (zh) * 2020-09-08 2020-12-04 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种蜂花粉脂提物及其提取方法与应用

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ712641A (en) 2013-08-12 2017-03-31 Decima Health Ltd Reaction platform and method for making pollen based materials in combination with beeswax and uses thereof
US10434123B2 (en) 2013-08-12 2019-10-08 Decima Health Limited Reaction platform and method for making pollen based materials and uses thereof
CN106535931A (zh) * 2014-08-25 2017-03-22 艾慕恩治疗公司 卵蛋白制剂及其制备方法
US10232048B1 (en) 2014-11-18 2019-03-19 Divine Api-Logics, LLC Apitherapy method and composition

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1125096A (zh) * 1994-12-23 1996-06-26 戴默实验室股份公司 由来自蜂蜡的高级脂肪伯醇组成的天然混合物
CN1522239A (zh) * 2001-04-27 2004-08-18 豪泽公司 从天然产物中获得的高分子量脂族伯醇及其用途

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2494907A (en) 1947-11-18 1950-01-17 Arthur V Small Beecomb foundation
ZA845962B (en) 1983-08-10 1985-11-27 Richardson Vicks Inc Topical treatment of skin inflammatory disorders
US4623667A (en) * 1985-06-28 1986-11-18 Richardson-Vicks Inc. Topical treatment of skin inflammatory disorders
AT406731B (de) 1998-04-24 2000-08-25 Dado Suleiman Stoffgemisch zur topischen anwendung
US6342255B1 (en) 1998-09-15 2002-01-29 Codex V S.R.L. Topical pharmaceutical compositions useful for the treatment of cutaneous of circulatory pathologies on inflammatory, immune, proliferative of degenerative basis
AU2001268451A1 (en) 2000-06-13 2001-12-24 Fd Management, Inc. Cosmetic composition for stressed skin under extreme conditions
JP4456796B2 (ja) 2001-09-27 2010-04-28 株式会社林原生物化学研究所 コラーゲン産生増強剤の製造方法とその用途
US6579543B1 (en) 2002-02-22 2003-06-17 Jackie H. McClung Composition for topical application to skin
ITMI20022549A1 (it) 2002-12-02 2004-06-03 Actimex S R L Composizione quaternaria comprendente come sostanza attiva la propolis.
US7351739B2 (en) 2004-04-30 2008-04-01 Wellgen, Inc. Bioactive compounds and methods of uses thereof
US20100074964A1 (en) 2008-03-10 2010-03-25 Zdenko Glavas Super brown cream
US20100034905A1 (en) 2008-08-05 2010-02-11 Ruben Sembrano Method of treating burns

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1125096A (zh) * 1994-12-23 1996-06-26 戴默实验室股份公司 由来自蜂蜡的高级脂肪伯醇组成的天然混合物
CN1522239A (zh) * 2001-04-27 2004-08-18 豪泽公司 从天然产物中获得的高分子量脂族伯醇及其用途

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
D. CARBAJAL: "Anti-inflammatory activity of D-002:an active product isolated from beeswax", 《PROSTAGLANDINS, LEUKOTRIENES AND ESSENTIAL FATTY ACIDS》 *
NOA M: "Effect of D-002 on the Pre-ulcerative Phase of Carrageenan-induced Colonic Ulceration in the Guinea-Pig", 《J. PHARM. PHARMACOL.》 *
S. P. KURSTJENS: "The Proteins of Beeswax", 《NATURWISSENSCHAFTEN》 *
李光: "蜂蜡的现代研究", 《中国医药导报》 *
龚蜜: "蜂蜡表面的覆盖物——粉霜", 《蜜蜂杂志》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112022881A (zh) * 2020-09-08 2020-12-04 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种蜂花粉脂提物及其提取方法与应用

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