CN103417386A - 一种用于治疗牙本质过敏的磷酸钙基齿科修复材料 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料。本发明的用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料,由先涂抹于牙本质表面的双亲功能多肽和后涂抹于所述多肽处理后牙表面的纳米羟基磷灰石构成;所述多肽与所述纳米羟基磷灰石分别独立包装;所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。实验证明,本发明药物能够成功封堵暴露的牙本质小管,在暴露的牙本质表面形成一层致密的羟基磷灰石矿物层。且封堵后不易被腐蚀,可以提高封堵治疗的长期有效性,对牙本质过敏的治疗有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于治疗牙本质过敏的基于功能多肽和纳米磷酸钙的齿科修复材料。
背景技术
牙本质过敏是一种常见的牙科疾病,其病状为牙齿对外部冷热酸甜等刺激会产生疼痛反应。造成牙本质过敏的原因有很多,例如牙冠处牙釉质的缺损和齿龈退缩造成的牙根部位牙骨质缺失。经典理论认为牙本质过敏的根本原因,是暴露的牙本质小管内的组织液会因为外部的刺激而流动,从而刺激牙髓腔里的神经受体,引发疼痛反应。目前针对牙本质过敏的治疗手段都存在持效时间短、不稳固、需重复治疗等缺陷。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种通过封堵牙本质小管治疗牙本质过敏的齿科修复材料。
本发明所提供的用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料(也即用于封堵牙本质小管的材料),由双亲功能多肽和纳米羟基磷灰石组成,按顺序先后涂抹于牙本质小管裸露表面(也即由先涂抹于暴露牙本质表面的双亲功能多肽和后涂抹于所述多肽处理后的牙表面的纳米羟基磷灰石构成);所述双亲功能多肽与所述的纳米羟基磷灰石分别独立包装;所述双亲功能多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
本发明提供的用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料,还可由先涂抹于暴露牙本质表面的双亲功能多肽溶液和后涂抹于所述多肽溶液处理后的牙表面的纳米羟基磷灰石构成;所述多肽溶液与所述纳米羟基磷灰石分别独立包装;所述多肽溶液是由多肽溶解在5%的氨水中制备而成的,多肽在溶液中的浓度为1mg/ml;所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
双亲功能多肽和纳米羟基磷灰石在制备用于治疗牙本质过敏的材料(或用于封堵牙本质小管的材料)中的应用也属于本发明的保护范围;所述多肽的氨基酸序列如SEQID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
上述材料或应用中,所述纳米羟基磷灰石按照如下方法制备:将每0.25g羟基磷灰石粉体溶于10ml浓度为0.5mol/L的盐酸溶液中,制备成溶液;然后滴加浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液,引发羟基磷灰石沉淀,直至溶液pH值达到8.5,此时溶液中生成白色絮状纳米羟基磷灰石沉淀,然后用离子水清洗,即得。
上述材料或应用中,在所述多肽涂抹于牙表面10分钟之后,再涂抹所述纳米羟基磷灰石。
上述材料或应用中,所述纳米羟基磷灰石在一分钟内涂抹三次。
上述材料或应用中,所述多肽的结构式如式Ⅰ所示。
实验证明,本发明材料能够成功封堵暴露的牙本质小管,在暴露的牙本质表面形成一层致密的羟基磷灰石矿物层。且封堵后不易被腐蚀,可以提高封堵治疗的长期有效性,对牙本质过敏的治疗有重要意义。
附图说明
图1为牙本质切片表面暴露出的牙本质小管的扫描电镜图。
图2为牙本质切片表面E8DS多肽结合实验。图中左上角为通过计算荧光强度,估测的结合多肽的停留量。
图3为牙本质小管封堵实验的扫描电镜图。(A)(B)为实验组结果,(A)为表面,(B)为断面;(C)(D)为对照组结果,(C)为表面,(D)为断面。
图4为封堵后的牙本质切片的抗腐蚀实验的扫描电镜图。(A)对照组;(B)实验组。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1、双亲功能多肽和纳米羟基磷灰石用于治疗牙本质过敏
多肽制备:双亲功能多肽的氨基酸序列为EEEEEEEEDSESSEEDR(SEQ IDNO:1),是人工合成得到的,并对其中的三个丝氨酸进行了磷酸化处理,其结构式如式Ⅰ所示:以下将式Ⅰ所示多肽简称E8DS多肽。
纳米羟基磷灰石的制备:把0.25g羟基磷灰石粉体(分子量502.31,购买于中国化学试剂有限责任公司),溶于10ml浓度为0.5mol/L的盐酸溶液中,制备成溶液。然后滴加浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液,引发羟基磷灰石沉淀,直至溶液pH值达到8.5左右,此时溶液中生成大量的白色絮状的纳米羟基磷灰石沉淀,然后用离子水清洗三次备用。使用前超声分散5分钟。
牙本质切片制备:磨牙平行于咀嚼面,下边沿着牙骨质—釉质分界线,切成厚度约为1mm的薄片。随后将这些薄片磨去周围的釉质层。制得的牙本质切片表面暴露出的牙本质小管的扫描电镜图如图1。
实验一、E8DS多肽和牙本质基质结合能力实验
荧光基团接枝的E8DS多肽,可以在一定激发光源下,发出绿色荧光。可以认为其荧光强度与多肽的含量成正比,所以通过检测荧光强度可以半定量估算在牙本质基质上结合多肽的相对含量。具体实验方法如下:在室温下把处理好的牙本质切片浸泡在配制好的接枝荧光基团的E8DS多肽溶液里12小时。之后用去离子水冲洗样品,洗掉多余残留的多肽。之后在暗室里用蠕动泵,以1ml/min的速度,用去离子水不断冲经过多肽预处理的牙本质切片,持续4周。每周用荧光显微镜对荧光显微镜观察并拍摄荧光照片,并对其强度进行测量计算。结果显示,在连续4周的冲洗后,仍有43.7%左右的多肽停留在牙本质基质表面,说明E8DS多肽与牙本质基质蛋白有很好的结合力。而且亮度分布均匀,证明多肽在牙本质基质上分布均匀,这有利于纳米羟基磷灰石与多肽结合,进而封堵暴露的牙本质小管。结果如图2所示。
实验二、牙本质小管封堵实验。
将E8DS多肽溶于5%(体积百分含量)氨水中,制备成浓度为1mg/ml的多肽溶液。
实验组:先将牙本质切片在E8DS多肽溶液中浸泡10分钟,然后把制备好的纳米羟基磷灰石均匀的涂抹在多肽表面,一分钟内涂抹三次。
对照组:用商业脱敏剂极固宁做对照。
在扫描电镜下观察每组封闭牙本质小管的效果。结果显示(图3),实验组封堵效果较好,表面形成一层致密的羟基磷灰石的矿化层。而对照组,表面仍有暴露出来的牙本质小管,而且散落着一些磷酸钙杂体,没有形成致密的矿物层。
实验三、封堵后的抗腐蚀实验
为了检测多肽E8DS的作用和封堵效果的有效性,把封堵后的样品分别置于搅动的30ml磷酸缓冲溶液(PBS)中15min进行腐蚀冲洗实验。之后用扫描电镜观察样品表面牙本质小管封堵效果。
封堵样品有二组:
实验组:实验二中实验组方法得到的样品。
对照组:不用多肽E8DS进行预处理,直接涂抹纳米羟基磷灰石封堵的样品。
结果显示(图4),实验组的牙本质切片,与封堵材料纳米羟基磷灰石的结合力明显增强,经过15min腐蚀试验后,封堵矿物层依然完好无损,没有牙本质小管暴露出来。对照组:未经多肽处理的,部分区域的羟基磷灰石矿物被腐蚀掉,露出牙本质小管。
Claims (6)
1.一种用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料,由先涂抹于暴露牙本质表面的双亲功能多肽和后涂抹于所述多肽处理后的牙表面的纳米羟基磷灰石构成;所述多肽与所述纳米羟基磷灰石分别独立包装;
所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
2.一种用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料,由先涂抹于暴露牙本质表面的双亲功能多肽溶液和后涂抹于所述多肽溶液处理后的牙表面的纳米羟基磷灰石构成;所述多肽溶液与所述纳米羟基磷灰石分别独立包装;
所述多肽溶液由多肽和体积百分含量为5%的氨水构成,多肽在所述多肽溶液中的浓度为1mg/ml;
所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
3.多肽和纳米羟基磷灰石在制备用于治疗牙本质过敏的齿科修复材料中的应用;
所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,且其中的丝氨酸均经过磷酸化处理。
4.根据权利要求1或2所述的材料或权利要求3所述的应用,其特征在于:所述纳米羟基磷灰石按照如下方法制备:将每0.25g羟基磷灰石粉体溶于10ml浓度为0.5mol/L的盐酸溶液中,制备成溶液;然后滴加浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液,引发羟基磷灰石沉淀,直至溶液pH值达到8.5,此时溶液中生成白色絮状纳米羟基磷灰石沉淀,然后用离子水清洗,即得。
5.根据权利要求1-4中任一所述药物或应用,其特征在于:在所述多肽涂抹于牙表面10分钟之后,再涂抹所述纳米羟基磷灰石。
6.根据权利要求1-5中任一所述药物或应用,其特征在于:所述纳米羟基磷灰石在一分钟内涂抹三次。
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