CN111544568A

CN111544568A - 一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用

Info

Publication number: CN111544568A
Application number: CN202010448879.1A
Authority: CN
Inventors: 孙卫斌; 王晴晴
Original assignee: Suzhou Zhihui Intelligent Technology Co ltd
Current assignee: Suzhou Zhihui Intelligent Technology Co ltd
Priority date: 2020-05-25
Filing date: 2020-05-25
Publication date: 2020-08-18
Anticipated expiration: 2040-05-25
Also published as: CN111544568B

Abstract

本发明公开一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用，属于牙骨质再生技术领域，该药物组合物包括药效学上有效量的两亲性寡肽，所述两亲性寡肽包括氨基酸序列为如SEQ ID No.1所示的亲水性肽和疏水性尾部，以及，药学上可接受的药物辅料；本发明使用模拟CEMP1的寡肽在牙本质表面再生釉质样组织并封闭牙本质小管，从而改善牙本质过敏症的治疗；自组装寡肽对酸蚀牙本质具有很强的结合能力，促进磷灰石微晶的沉积和定向生长，从而在牙本质表面构建了一个釉质样结构；然后，再生的微晶在牙本质小管内深度沉积，并确保牙本质小管的有效阻塞；因此，模拟CEMP1的两亲性寡肽在未来牙本质过敏症的治疗中具有很大的应用潜力。

Description

一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用

技术领域

本发明涉及牙骨质再生技术领域，特别是涉及一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用。

背景技术

牙本质过敏症(Dentine hypersensitivity，DH)是口腔科的常见病及多发病，DH在普通人群中的患病率约为15-25％。DH可定义为对口腔环境中的刺激(如温度、化学物质、渗透压和机械效应)做出反应的短暂而剧烈的疼痛或不适。DH的发生被认为是由于牙釉质、表层牙本质和牙骨质的丧失而引起的深层牙本质的暴露。牙本质小管被牙冠部的牙釉质、表层牙本质和牙根上的牙骨质覆盖和缠绕，保护深层牙本质免受外部刺激。患DH的患者在服用刺激性食物时经常会感到疼痛或不适，因此在大多数情况下需要进行干预。

流体动力学理论是目前被广泛接受的DH发病机制。根据这一理论，牙本质小管中的液体在外部刺激后双向流动并作用于暴露的深层牙本质，再反过来激活牙髓/牙本质边界区域中的伤害感受器并引起疼痛。基于此，牙本质表面的釉质样和牙骨质样矿化结构的重建是治疗牙本质过敏症的有效方法。牙本质硬组织的主要成分是磷灰石微晶，其形成和生长主要由天然非胶原蛋白(NCPs)控制。例如，釉原蛋白在牙釉质的定向生长过程中起主要的结构作用。牙本质磷蛋白(DPP)是牙本质细胞外基质中的主要非胶原蛋白之一，并被认为在牙本质的矿化中起关键作用。牙骨质蛋白1(CEMP1)是仅在牙骨质中表达的组织特异性蛋白，并且影响磷灰石微晶的成核、组成和形态，调控牙骨质的矿化这些天然的非胶原蛋白由于含有许多带电荷的氨基酸，如天冬氨酸、谷氨酸和磷丝氨酸等。因此，这些非胶原蛋白具有很高的阴离子特性，能够吸引钙离子来诱导生物矿化。而这些生物矿化过程能够在深层牙本质表面构建一层无机矿物，保护牙本质牙髓免受外部刺激。然而，由于天然NCPs的提取和纯化在不易获得，其在口腔临床中的广泛应用仍然有限。

仿天然非胶原蛋白的仿生寡肽类含有大量的功能性重复序列，如天冬氨酸、谷氨酸和磷酸化丝氨酸，它们被认为是促进磷灰石微晶形成的关键。基于此，人们制造了不同种类的多肽或寡肽来重建牙体硬组织结构。例如，一种模拟釉原蛋白的两亲性寡肽被用于釉质样组织的重建。来源于DPP的天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸重复氨基酸序列已被证明能够诱导矿化和封闭牙本质小管，因此在牙本质过敏症的治疗中具有应用潜能。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用，以解决上述现有技术存在的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种药物组合物，包括：

药效学上有效量的两亲性寡肽，所述两亲性寡肽包括氨基酸序列为如SEQ IDNo.1所示的亲水性肽和疏水性尾部；以及，药学上可接受的药物辅料。

进一步地，所述疏水性尾部为硬脂酸衍生物。

进一步地，所述药学上可接受的药物辅料选自聚乙二醇、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙烯吡咯烷酮、壳聚糖、葡聚糖、磷脂酰甘油。

本发明还提供一种上述的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)合成寡肽粉末

通过固相合成法合成，使用自动合成仪从C末端到N末端逐步进行；

(2)两亲性寡肽的自组装

将寡肽粉末溶解在去离子水中，用1mol/L氯化钙溶液引发两亲性寡肽的自组装；

(3)将步骤(2)的悬浮液超声混合，4℃孵育，得到自组装后的两亲性寡肽；

(4)使药物辅料负载自组装后的两亲性寡肽。

本发明还提供一种上述的药物组合物在制备治疗/预防牙本质过敏的药物中的应用。

本发明公开了以下技术效果：

本发明使用模拟CEMP1的寡肽在牙本质表面再生釉质样组织并封闭牙本质小管，从而改善牙本质过敏症的治疗。自组装寡肽对酸蚀牙本质具有很强的结合能力，促进磷灰石微晶的沉积和定向生长，从而在牙本质表面构建了一个釉质样结构。然后，再生的微晶在牙本质小管内深度沉积，并确保牙本质小管的有效阻塞。因此，模拟CEMP1的两亲性寡肽在未来牙本质过敏症的治疗中具有很大的应用潜力。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为两亲性寡肽的自组装特性，其中，A为自组装寡肽的扫描电镜图像，B为自组装寡肽的透射电镜图像，C为自组装寡肽的圆二色谱结果，D为与无机钙和磷相互作用后的自组装寡肽的扫描电镜图像和元素分布图；

图2为酸蚀牙本质的特征，其中，A为酸蚀牙本质的扫描电镜图像的表面视图，B为A图的放大，C为酸蚀牙本质的扫描电镜图像的断面视图，D为酸蚀牙本质的能谱分析；白色箭头为牙本质小管；

图3为自组装寡肽与酸蚀牙本质的结合能力，其中，A为自组装寡肽与酸蚀牙本质结合的扫描电镜图像，B为A图的放大，C为两亲性寡肽粉的红外光谱分析，D为自组装寡肽与酸蚀牙本质结合的红外光谱分析；黑色箭头为两亲性寡肽自组装形成的纳米纤维结构；

图4为寡肽诱导矿物质沉积，其中，A为一天内矿物沉积的扫描电镜图像的表面视图，B为A图的放大，A1为A的断面视图，B1为B的断面视图，C为两天内矿物沉积的扫描电镜图像的表面视图，D为C图的放大，C1为C的断面视图；D1为D的剖面图；

图5为寡肽在牙本质表面构建了釉质样组织，并诱导牙本质小管阻塞。其中，A为扫描电镜图像的表面视图，B为A放大，C为能谱分析，D为A的断面视图，E为D放大，F为牙本质小管阻塞图；

图6为釉质样组织的XRD分析；

图7为自组装寡肽的细胞相容性，其中，A为自组装寡肽上的细胞增殖实验，B为实验组光镜图像，C为对照组光镜图像。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

实施例1两亲性寡肽的制备和实验

1.两亲性寡肽的制备

两亲性寡肽由模拟CEMP1的亲水性肽序列()ASN-ASN-CYS-CYS-CYS-CYS-ARG-ARG-GLU-SER((p))和作为硬脂酸衍生物的疏水性尾部(C₁₆H₃₁COOH)组成。通过固相肽合成法合成寡肽，使用自动合成仪从C-末端到N-末端逐步进行。

将寡肽粉末溶解在去离子水中，用1M氯化钙溶液引发两亲性寡肽的自组装。

之后，将悬浮液超声混合以促进钙离子的扩散，然后在4℃孵育，得到自组装后的寡肽。

利用远紫外圆二色谱对自组装寡肽的二级结构进行了表征。将自组装的寡肽在磷酸盐缓冲溶液(PBS)(pH＝7.4)中超声稀释，以获得浓度为100μg/ml的澄清溶液。在190-280nm的波长范围内，用0.1厘米光程长的样品池在扫描激光偏振光谱仪下测量三次。然后，减去PBS缓冲液光谱。

在扫描电子显微镜下观察自组装寡肽的大小和形态。将自组装寡肽涂覆在透射电子显微镜网格上，并在室温下进一步用0.3m 1-乙基-3(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺(EDC)和0.06M N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联。在检测之前，对样本进行梯度脱水和临界点干燥。

随后，表征了自组装寡肽与无机钙和磷相互作用的能力。将包覆自组装寡肽的透射电镜网格与15mL仿生矿化溶液一起密封在聚乙烯管中，并在37℃下孵育24小时。样品进行梯度脱水和临界点干燥，然后进行扫描电镜加元素分析的检测。

2.酸蚀牙本质薄片的制备

使用完整的人类第三磨牙制备牙本质薄片。患者同意参与当前的研究并签署书面知情同意书。收集的牙齿保存在4℃的70％乙醇溶液中，并在一个月内使用。从每颗牙齿上切下厚度为2.0毫米的冠状牙本质，然后用低速金刚石锯切割成牙本质薄片。在流水下分别用240、400、600、800、1200和2000目粒度的碳化硅纸抛光牙本质薄片表面。随后，在超声波下依次用洗涤剂水、无水丙酮、乙醇和去离子水(DW)连续清洗牙本质薄片20分钟。

用37％磷酸凝胶涂覆牙本质薄片，使其脱矿质30s，然后用去离子水彻底洗涤，从而获得酸蚀后的牙本质薄片。用扫描电镜加元素分析对酸蚀牙本质片的表面和断面进行了表征和分析。

3.两亲性寡肽和酸蚀牙本质的结合分析

利用衰减全反射傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)和扫描电镜分析对自组装寡肽与酸蚀牙本质的结合进行了表征。对于ATR-FTIR，通过检测纯寡肽粉末获得寡肽的标准光谱。将浓度为1mg/ml的自组装寡肽滴在酸蚀牙本质板的表面。然后用去离子水(DW)对涂覆自组装寡肽的牙本质板进行冲洗。之后，所有的样品在检验前都要空气干燥。对于扫描电镜分析，在检测之前，将具有或不具有自组装寡肽涂层的酸蚀牙本质板进行梯度脱水和喷金处理。

4.人工唾液中酸蚀牙本质的再矿化

含1.5mM氯化钙、0.9mM磷酸二氢钾、130mM KCl、1.0mM NaN₃和20mM HEPES的人工唾液用于酸蚀牙本质的再矿化。将酸蚀后的牙本质薄片随机分为实验组和对照组。在实验组中，用自组装寡肽包被酸蚀后的牙本质薄片24h；而对照组中的薄片浸泡在去离子水中相同的时间。然后，将所有牙本质薄片密封在含15ml人工唾液的聚乙烯管中矿化1、2、5天。在随后的检测之前，对样品进行梯度脱水和临界点干燥。首先在扫描电镜下对再矿化牙本质的表面和横截面进行了表征。在扫描电镜检测前，样品通过用喷金处理来提高其导电性。再矿化牙本质的成分和结构用X射线衍射进行了表征，其2θ范围为10°-70°。使用Origin 6.0(OriginLab，USA)分析获得的数据，并与羟基磷灰石微晶的标准衍射峰卡(JCPDS编号09-4032)进行比较。

5.自组装寡肽的细胞相容性

如前所述，本发明中的寡肽来源于牙骨质蛋白1(CEMP1)。因此，利用牙周膜细胞进行自组装寡肽的细胞相容性评价。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析来评估自组装寡肽对牙周膜细胞增殖活性的影响。将自组装寡肽加入到含有1％胎牛血清和1％青霉素/链霉素的DMEM培养基中。自组装寡肽在DMEM培养基的最终浓度分别为0、5、10、20和40μg/ml。将牙周膜细胞接种在密度为4×10⁴/ml的96孔板中培养1、3、5和7天。在每个时间点，弃去培养基，96孔板用PBS洗涤，然后加入含有10μl CCK-8的在100μl DMEM培养基。避光条件下孵育1.5小时。在450nm的波长下，测定吸光度的值并用GraphPad软件进行数据分析用t检验进行统计比较(p<0.05)。

实施例2结果和表征

1.两亲性寡肽的制备

牙本质表面的釉质、表层牙本质和牙骨质的丧失可能是牙本质小管暴露的最常见原因。因此，牙体硬组织的重建是治疗牙本质敏感的重要研究领域。牙体组织无机矿物的形成，如成核、相变和取向生长，需要有机生物分子的调节。在本发明中，寡肽是根据负责牙骨质矿化的CEMP1的功能性氨基酸序列和双亲分子的原理设计的。双亲性寡肽可以通过疏水相互作用自组装成超分子结构。因此，将生物活性肽暴露于水环境中以调节矿化。

在本发明中，Ca²⁺用于触发双亲寡肽的自组装。如图1A和图1B所示，两亲性寡肽自组装成直径约20nm的三维(3D)纳米纤维。EDX分析显示了包括碳、氮和氧在内的元素的存在，这是由于自组装寡肽的氨基酸残基的存在(图1A，插图)。CD分析显示在大约205和194纳米处分别有负带和正带，这代表了自组装寡肽的典型螺旋结构。这一观察表明两亲性寡肽分子可以自组装成具有一定构象的超分子纳米纤维。据报道，生物大分子的特定二级结构可以优先与磷灰石微晶的特定面相互作用，从而对矿物的成核和形态产生影响。

在含钙和磷的溶液中浸泡后，无机矿物被锚定在宿主纳米纤维上，使得纳米纤维更易辨别。扫描电镜和能谱图显示沿纳米纤维排列的无机矿物主要由钙和磷组成(图1D)。因此，两亲性寡肽可以在钙离子存在下自组装成具有典型螺旋结构的纳米纤维。此外，自组装寡肽从溶液中吸引无机矿物质锚定在其表面，这赋予其诱导酸蚀牙本质再矿化的潜力。

2.酸蚀牙本质的特征

在本发明中，酸蚀牙本质用于模拟牙本质过敏症的情况。酸蚀牙本质的表面和断面视图使用扫描电镜和元素分析进行评估。如图2A和2B所示，羟基磷灰石微晶脱矿，使得胶原原纤维暴露。由于牙本质脱矿，所有牙本质小管都是开放和空的。如横截面图所示(图2C)，脱矿的厚度约为6μm。由于胶原纤维的暴露，元素分析能够检测到碳和氮、氧元素。此外，还有少量的钙和磷元素，它们可能来自残余磷灰石微晶(图2D)。这些观察表明，37％磷酸凝胶可导致牙本质的有效脱矿，这可以是下面使用的牙本质敏感模型的简单模拟。

3.自组装寡肽与酸蚀牙本质的结合

使用商用磷酸凝胶对牙本质进行脱矿处理，以模拟导致牙本质胶原纤维暴露的牙本质敏感模型。因此，与酸蚀后的牙本质的结合强度对于寡肽实现其功能非常重要。如图3A和图3B所示，观察到直径远小于牙本质胶原纤维的纳米纤维。这些纳米纤维包覆在牙本质胶原纤维表面。重要的是，这些纳米纤维的大小和形态与自组装寡肽相似。

然后通过红外光谱评估寡肽与酸蚀牙本质的结合。如图3C所示，寡肽粉末显示出典型的红外光谱。1072cm^-1和1203cm^-1处的峰来自磷酸官能团，这可能归因于寡肽的磷酸丝氨酸。1664cm^-1、1540cm^-1和1403cm^-1处的条带分别来自寡肽的酰胺I、酰胺Ⅱ和酰胺Ⅲ基团。2921cm^-1左右的条带是由寡肽的疏水尾部产生的亚甲基(CH₂)形成的。此外，3419cm^-1的峰归因于酰胺N-H拉伸。在寡肽涂层之前和之后，以及在DW冲洗之后，酸蚀刻的牙本质的FTIR光谱显示在图3D中。

酸蚀牙本质板单独显示磷酸官能团和酰胺(I，Ⅱ，Ⅲ，NH-)基团的弱峰，可能分别来自磷灰石微晶和牙本质胶原原纤维。用自组装寡肽包被后，PO₄ ^3-和酰胺(I，Ⅱ，Ⅲ，NH-)基团的峰显著增加。此外，与酸蚀牙本质薄片相比，PO₄ ^3-在约559cm^-1处出现新的峰。酸蚀牙本质板缺少这个峰的可能原因是牙本质脱矿。结果表明，大量的自组装寡肽结合在酸蚀牙本质上。更重要的是，这些特征峰在用去离子水洗涤后仅略有下降，这表明大多数自组装寡肽仍保留在酸蚀后的牙本质表面。综上所述，自组装寡肽对酸蚀牙本质具有良好的结合能力，并能抵抗酸蚀牙本质的冲洗。

4.再矿化的特征

4.1再矿化的扫描电镜观察

本发明将可自组装成超分子纳米纤维的两亲性寡肽应用于牙本质过敏症的治疗。寡肽由模拟CEMP1的生物活性肽(ASN-ASN-CYS-CYS-CYS-CYS-ARG-ARG-GLU-SER((p))和疏水尾(C₁₆H₃₁COOH))组成。生物活性肽的极性氨基酸残基如ASN、ARG、GLU和磷酸丝氨酸是能与钙和磷相互作用以诱导矿化的特殊单元。如图4A和4B所示，在一天内，许多直径约20nm的珍珠项链状矿物颗粒沉积在酸蚀牙本质表面。由于这些矿物颗粒的存在，暴露的牙本质胶原纤维变得模糊不清。此外，牙本质小管被这些矿物颗粒堵塞。EDS分析表明，这些颗粒含有许多自有机寡肽的碳和氧元素(图4B，插图)。在选定的区域也有一定含量的来自颗粒状矿物的钙和磷元素。该颗粒状矿物可能是羟基磷灰石微晶的前体，因为钙和磷元素的量非常少。此外，这些矿物的大小和形态类似于由自组装寡肽形成的那些矿物质(图1D)。这些观察表明，这些珍珠项链状的矿物质是由自组装寡肽形成的。图4A1和B1显示了一天内通过自组装寡肽再矿化的牙本质的断面视图。矿物沉积层的厚度约为3μm，新沉积的矿物可以交织到表面胶原纤维的多孔结构中，以无序的方式沉积。此外，在再矿化层和深层新鲜牙本质之间暴露出一层没有矿物质交织的胶原纤维。两天后，更多的矿物质在牙本质表面再生(图4C)。这些矿物质甚至完全覆盖了胶原纤维和牙本质小管。这些矿物的放大图显示在图4D中。仍然存在珍珠项链状的矿物质，这些矿物质锚定在自组装寡肽的纳米纤维上。此外，棒状定向晶体从珍珠项链状前驱体开始产生。断面视图显示了与一天内相似的结构特征(图4C1和D1)。

三天后，成熟的杆状微晶沉淀在酸蚀的牙本质表面上，使得胶原原纤维不可分辨并堵塞牙本质小管(图5A和B)。此外，再矿化层表面也有一些裂纹，这可能是由于样品在制备过程中脱水而产生的。元素分析表明，所选区域的主要成分是钙和磷元素(图5C)。在横截面视图中，沉淀的微晶在牙本质表面上形成厚度约为28.98毫米的釉质样层。放大图显示沉淀微晶的定向生长，其类似于天然釉质。这些微晶甚至沉淀在从小管壁向小管中心延伸的牙本质小管中(图5F)。这些观察结果表明，在牙本质表面应用仿生寡肽模型可以有效地封闭酸蚀牙本质上的牙本质小管和再生釉质样组织。基于流体动力学假说，任何能够通过再生牙本质表面上的釉质样组织或阻塞牙本质小管来降低牙本质流体传导性的生物材料被认为在降低牙本质过敏症的临床症状方面是有效的。因此，仿生寡肽模型在牙本质敏感的治疗中的应用前景广阔。此外，在釉质样层和深层非脱矿牙本质之间没有脱矿胶原原纤维暴露，表明脱矿胶原原纤维可以再矿化(图5E)。

两亲性寡肽可以自组装成超分子纳米纤维。这种3D纳米纤维可以模拟天然牙釉质形成过程中的有机基质，并诱导牙本质表面的釉质样组织再生。此外，人工唾液用于模拟Ca²⁺和PO₄ ^3-的释放。据文献报道，在天然牙釉质形成中，Ca²⁺和PO₄ ^3-的供应是单向的。在本发明中，Ca²⁺和PO₄ ^3-离子可能在自组装寡肽中朝向牙本质表面定向扩散，从而形成定向微晶。此外，牙釉质样组织和下面的牙本质表面之间的界面是完整的，并且没有出现裂纹。这一观察表明，所用的寡肽可以诱导牙本质胶原纤维的再矿化。

4.2再矿化的XRD表征

在本发明中，应用XRD测量来评估由自组装寡肽形成的晶体的晶格形态。图6显示了所有组的牙本质表面的XRD图案。酸蚀牙本质的XRD分析在2θ≈26゜和31゜处显示相对平坦的低强度峰，这表明晶格无机相的缺损。在寡肽处理组中，衍射峰显示2θ为25.91゜、31.781゜、39.861゜、46.721゜和49.481゜，分别对应于羟基磷灰石的晶格002、211、310、222和213(JCPDS编号09-0432)。此外，在对照组中，在大约26゜和31゜处仅存在2θ，表明酸蚀牙本质中的矿化度差。XRD分析表明，自组装寡肽形成的釉质样组织结晶度高。

5.自组装寡肽的细胞相容性

应用于口腔环境的生物材料需要良好的细胞相容性。在本发明中，将自组装寡肽添加到培养基中以评估细胞相容性。由于寡肽来源于牙骨质蛋白1，因此牙周膜细胞用于表征细胞相容性。在实验组中，牙周膜细胞在含有自组装寡肽的培养基中培养，而在对照组中，细胞在纯培养基中培养。在细胞培养期间，实验组和对照组在第1天和第3天的细胞增殖没有显示出显著差异(P>0.05)(图7A)。然而，第5天和第7天的细胞增殖表现出显著差异。在5天培养中，当寡肽浓度大于20μg/ml时，实验组细胞相容性优于对照组。培养7天后，浓度为5μg/ml的实验组开始表现出比对照组更好的细胞相容性。CCK8检测表明，该寡肽具有很好的细胞相容性，甚至能促进牙周膜细胞的增殖，可安全应用于口腔临床。

以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

序列表

<110> 苏州知会智能科技有限公司

<120> 一种治疗牙本质过敏的药物组合物及其制备方法、应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Asn Asn Cys Cys Cys Cys Arg Arg Glu Ser

1 5 10

Claims

1.一种药物组合物，其特征在于，包括：

药效学上有效量的两亲性寡肽，所述两亲性寡肽包括氨基酸序列为如SEQ ID No.1所示的亲水性肽和疏水性尾部；

以及，药学上可接受的药物辅料。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述疏水性尾部为硬脂酸衍生物。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药学上可接受的药物辅料选自聚乙二醇、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙烯吡咯烷酮、壳聚糖、葡聚糖、磷脂酰甘油。

4.一种权利要求1-3任一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)合成寡肽粉末

(2)两亲性寡肽的自组装

(4)使药物辅料负载自组装后的两亲性寡肽。

5.一种权利要求1-4任一项所述的药物组合物在制备治疗/预防牙本质过敏的药物中的应用。