CN103293038A - 存储含有细胞的无色生物样品的变色介质及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质及制备方法，制备方法为：（1）将2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料溶解在无水乙醇中，制成A溶液；（2）将滤纸浸没于所述A溶液中，浸泡1-2分钟，取出，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质；本发明在使用时，将含有细胞的无色生物样品，如唾液、细胞培养液或泪液等涂于该介质上，接触部位会由粉红色变为白色，可以方便地为后续工作人员提取细胞样品进行DNA分析提供指示。

Description

存储含有细胞的无色生物样品的变色介质及制备方法
技术领域
本发明属于生物载体制造领域，特别是涉及一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质及制备方法。
背景技术
在室温下对各种生物样品进行收集、储存、运输和纯化其核酸并进行PCR、SNP分析、STR分型以及限制酶解作用分析是目前在医学诊断、法医学鉴定、流行病学预防检测等领域常用的操作技术和方法。中国专利“吸附储存DNA的介质和制备方法,专利号201010219304.9”只适用于血液的吸附存储以及后续的基因分析检测。在日常工作中采集血液进行基因分析是一种创伤性的采样方法，常常受到受试者精神上甚至肢体上的抵触。同时，由于血液的暴露也会对采样人员产生污染的可能。因此近年来口腔细胞的采集受到了高度重视，其非创伤，安全、无污染以及易接受性均优于采集血液。但是，由于唾液是无色的，采集后涂于以纸为基材的DNA存储卡上，使得后续工作人员进行DNA分析时很难辨识样品附着区，造成工作效率显著降低。“溶致变色效应”（solvatochromism）指的是某些作为溶质的化合物随着溶剂极性的变化,这类化合物的吸收和发射光谱的强度、位置以及谱带的形状均将发生改变,溶液的颜色也将随之发生变化。这类化合物被称为溶致变色化合物。其中最具代表性的化合物是2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料(Reichardt's betaine dye，CAS10081-39-7),该化合物在不同的极性溶剂中显示出不同的颜色变化，如在甲醇中为粉红色，在乙醇中为紫红色，在异丙醇中为蓝色，在丙酮中为绿色，而在水中会变成无色的。唾液以及其它生物基质99%的成分含量是水，因此，可以利用该化合物的颜色变化很容易地反映出纸质介质上唾液或其它无色生物基质存在的部位。
发明内容
本发明的目的是提供一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法。
本发明的第二个目的是提供另一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法。
本发明的第三个目的是克服现有技术存在的“将含有细胞的无色生物样品，采集后涂于以纸为基材的DNA存储卡上，使得后续工作人员进行DNA分析时很难辨识样品附着区，造成工作效率低下的不足，提供上述方法制备的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
本发明的技术方案概述如下：
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量比为1：1000-50的比例，将2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料溶解在无水乙醇中，制成A溶液；
（2）将滤纸浸没于所述A溶液中，浸泡1-2分钟，取出，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质；
或将所述A溶液喷淋在滤纸表面，使全部滤纸均匀喷湿，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
第二种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量比为1：1000-50的比例，将2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料溶解在质量浓度为5%-25%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将所述B溶液印刷于滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
所述滤纸优选为木浆滤纸或棉纤维滤纸。
所述含有细胞的无色生物样品为唾液、细胞培养液或泪液。
上述方法制备的存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
本发明在使用时，将含有细胞的无色生物样品，如唾液、细胞培养液或泪液等涂于该介质上，接触部位会由粉红色变为白色，可以方便地为后续工作人员提取细胞样品进行DNA分析提供指示。
附图说明
图1为实施例1制备的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的照片。
图2为实施例1制备的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质在涂覆唾液后的照片。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。下面的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发明作任何限制。
实施例1
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于50克质量浓度为20%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将B溶液印刷于棉纤维滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质，该介质为粉红色，见图1。
用口腔试子粘取唾液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色，见图2。
实施例2
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于50克无水乙醇中，制成A溶液；
（2）取木浆滤纸若干，浸于A溶液中1分钟，取出，30-40℃烘干，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取细胞培养液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例3
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于100克无水乙醇中，制成A溶液；
（2）取棉纤维滤纸若干，浸于A溶液中2分钟，取出，30-40℃烘干，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取泪液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例4
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于1000克无水乙醇中，制成A溶液；
（2）将A溶液喷淋在棉纤维滤纸表面，使全部滤纸均匀喷湿，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取唾液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例5
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于50克无水乙醇中，配成A溶液；
（2）将A溶液喷淋在木浆滤纸表面，使全部滤纸均匀喷湿，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取细胞培养液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例6
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于200克质量浓度为10%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将B溶液印刷于木浆滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取泪液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例7
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于500克质量浓度为25%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将B溶液印刷于木浆滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取泪液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例8
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于1000克质量浓度为5%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将B溶液印刷于木浆滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取细胞培养液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。
实施例9
一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，包括如下步骤：
（1）称取2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料1克，溶解于1000克无水乙醇中配制成A溶液；
（2）取棉纤维滤纸若干，浸于A溶液中1分钟，取出，30-40℃烘干，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
用口腔试子粘取唾液涂覆在该介质上，在涂覆区域内在数秒钟内由粉红色变为白色。

Claims (5)

1.一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，其特征是包括如下步骤：
（1）按质量比为1：1000-50的比例，将2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料溶解在无水乙醇中，制成A溶液；
（2）将滤纸浸没于所述A溶液中，浸泡1-2分钟，取出，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质；
或将所述A溶液喷淋在滤纸表面，使全部滤纸均匀喷湿，干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
2.一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，其特征是包括如下步骤：
（1）按质量比为1：1000-50的比例，将2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料溶解在质量浓度为5%-25%的聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液中，搅拌均匀，制成B溶液；
（2）以丝网印刷方式将所述B溶液印刷于滤纸上，挥发干燥，即制成一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
3.根据权利要求1或2所述的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，其特征是所述滤纸为木浆滤纸或棉纤维滤纸。
4.根据权利要求1或2所述的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法，其特征是所述含有细胞的无色生物样品为唾液、细胞培养液或泪液。
5.权利要求1-4之一的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质的制备方法制备的一种存储含有细胞的无色生物样品的变色介质。
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