CN103290067A - 一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:将秸秆在蒸汽爆破反应器内用蒸汽加热,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体经高温蒸汽灭菌;将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,调节pH,酶解;接入耐高温酵母菌进行发酵;固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。本发明的方法提高了酶解和发酵的效率。糖化发酵固体含量高,所得发酵液体乙醇浓度高,节约了水资源。
Description
技术领域
本发明涉及生物质新能源技术领域,特别涉及一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法。
背景技术
几千年来,人们利用葡萄、大麦和土豆来生产酒精。近些年,通过非淀粉原料,木质纤维素来生产乙醇成为研究的热点。生物乙醇是一类较有前途的燃料,可以使用多种废弃原料例如玉米秸秆、稻草、水稻和废纸通过生物方法生产。纤维素乙醇可以作为化石能源的有益补充。中国生物质资源储量巨大,每年农业废弃物秸秆约为7亿吨,其它农业废物大约为1.3亿吨;每年城市固体废弃物大约为1.5亿吨;每年林业生物质资源可用于能源用途大约为3亿吨。乙醇可以与汽油混合用作清洁能源。作为一种燃料,乙醇比汽油清洁,并且可再生,对环境友好无污染。生物乙醇与当今能源危机和环境污染等问题的解决密切相关。
可以从多种途径利用木质纤维素原料生产乙醇。发酵法生产乙醇的方式有直接发酵法、间接发酵法、分步糖化发酵、固定化细胞发酵法和同步糖化发酵法等。其中同步糖化发酵法是最具发展潜力和优势的方法之一。一般认为,分布糖化发酵技术中产生的葡萄糖和纤维二糖能够抑制酶解,而同步糖化发酵过程将葡萄糖和纤维二糖消耗,降低了抑制作用,从而提高了乙醇的产量。尽管如此,同步糖化过程中也存在很多问题,例如酶解的最适温度(50℃)比发酵的最适温度要高(30℃),而同步糖化发酵过程中温度必须采用折中策略,降低了酶解和发酵的效率。同时,纤维素转化乙醇过程耗水较多,一般发酵固液比大约在12%以下进行,如何有效的降低水的利用,节约资源也是十分有益的。
因而,提高菌株的发酵温度和固体含量对于提高同步糖化发酵乙醇得率和节约资源十分必要。
发明内容
本发明的目的是针对现有的酶解和发酵最适温度差别较大,效率低;发酵过程乙醇浓度低,无法满足工业要求;发酵过程水的消耗较大等问题,提出一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法。
本发明的技术方案概述如下:
一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:将秸秆在蒸汽爆破反应器内用蒸汽加热,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体经高温蒸汽灭菌;将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,调节pH,酶解;接入耐高温酵母菌进行发酵;固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。
所述蒸汽加热的温度较好的是160℃-220℃,蒸汽加热反应的时间较好的是3-10min。
所述灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水的比例较好的是:1g、3FPU-30FPU和3-10g。
还可以在灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合后,加入营养物,所述营养物为酵母粉和蛋白胨,所述酵母粉加入后的浓度为5-10g/L,所述蛋白胨加入后的浓度为10-20g/L。
pH优选4.0-6.0。
接入耐高温酵母菌的密度为OD1.0-8.0。
所述秸秆优选玉米秸秆、水稻秸秆、高粱秸秆或小麦秸秆。
酶解的时间优选12-48h。
发酵的温度较好的是在36℃-42℃,发酵的时间较好的是在72h-168h。
本发明具有如下优点:
(1)本发明利用耐高温的酵母菌同步糖化发酵木质纤维素,提高了酶解和发酵的效率。
(2)本发明的同步糖化发酵固体含量高,所得发酵液体乙醇浓度高,节约了水资源。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明。
下面的实施例是为了使本领域的技术人员能够理好地理解本发明,但并不对本发明作任何限制。
本发明各实施例所使用的耐高温酵母菌为耐高温安琪酵母菌,实验证明,使用市售的其它品牌的耐高温酵母菌,也可以完成本发明的操作并得到相似的效果。
实施例1
一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:
将玉米秸秆在蒸汽爆破反应器内在200℃用蒸汽加热10min,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体在121℃,21mim条件下灭菌;按1g、15FPU和3g的比例将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,加入酵母粉和蛋白胨,使酵母粉加入后的浓度为5g/L,使蛋白胨加入后的浓度为10g/L,调pH=5.0,酶解36h;无菌操作,按照OD4.0接种密度接入耐高温酵母菌,在42℃,200rpm条件下,发酵168h,固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。乙醇浓度为52g/L,乙醇得率为理论得率的72%。
实施例2
一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:
将水稻秸秆在蒸汽爆破反应器内在180℃用蒸汽加热8min,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体在121℃,21mim条件下灭菌;按1g、3FPU和10g的比例将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,调pH=4.0,酶解48h;无菌操作,按照OD1.0接种密度接入耐高温酵母菌,在39℃,200rpm条件下,发酵72h,固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。乙醇浓度为19g/L,乙醇得率为理论得率的81%。
实施例3
一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:
将高粱秸秆在蒸汽爆破反应器内在160℃用蒸汽加热6min,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体在121℃,21mim条件下灭菌;按1g、30FPU和5g的比例将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,加入酵母粉和蛋白胨,使酵母粉加入后的浓度为10g/L,使蛋白胨加入后的浓度为20g/L,调pH=6.0,酶解24h;无菌操作,按照OD8.0接种密度接入耐高温酵母菌,在36℃,200rpm条件下,发酵96h,固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。乙醇浓度为32g/L,乙醇得率为理论得率的68%。
实施例4
一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,包括如下步骤:
将小麦秸秆在蒸汽爆破反应器内在220℃用蒸汽加热3min,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体在121℃,21mim条件下灭菌;按1g、12FPU和8g的比例将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,加入酵母粉和蛋白胨,使酵母粉加入后的浓度为5g/L,使蛋白胨加入后的浓度为10g/L,调pH=5.0,酶解12h;无菌操作,按照OD1.0接种密度接入耐高温酵母菌,在42℃,200rpm条件下,发酵120h,固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。乙醇浓度为26g/L,乙醇得率为理论得率的83%。
Claims (9)
1.一种提高同步糖化发酵木质纤维素乙醇得率的方法,其特征是包括如下步骤:将秸秆在蒸汽爆破反应器内用蒸汽加热,瞬间释放压力,得到固液混合物,固液分离,所得固体经高温蒸汽灭菌;将灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合,调节pH,酶解;接入耐高温酵母菌进行发酵;固液分离,所得液体为富含乙醇的发酵液体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是所述蒸汽加热的温度为160℃-220℃,蒸汽加热反应的时间为3-10min。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征是所述灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水的比例为:1g、3FPU-30FPU和3-10g。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征是在灭菌后的固体、纤维素酶和无菌水混合后,加入营养物,所述营养物为酵母粉和蛋白胨,所述酵母粉加入后的浓度为5-10g/L,所述蛋白胨加入后的浓度为10-20g/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征是所述pH为4.0-6.0。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征是接入耐高温酵母菌的密度为OD1.0-8.0。
7.根据权利要求1、2或3所述的方法,其特征是所述秸秆为玉米秸秆、水稻秸秆、高粱秸秆或小麦秸秆。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征是酶解的时间为12-48h。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征是发酵的温度为36℃-42℃,发酵的时间为72h-168h。
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