CN103271034B - 一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法，以液体石蜡为溶剂，将100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑和壬醛进行相同比例混合而成。该引诱剂是从植物挥发性物质中筛选出来的特异性组分，具有选择性高、针对性强的特点。通过使用该引诱剂，使小菜蛾绒茧蜂提早进入目标防治田内，并进入搜索状态，不往外逃散，增强其寄主搜索和攻击效率，提高其寄生率，对于提高小菜蛾绒茧蜂的控害作用，改善菜田害虫治理等具有重要意义。
Description
技术领域
本发明属于蔬菜害虫生物防治技术领域，具体涉及一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法。
背景技术
小菜蛾（Plutella xylostella Linnaeus）属鳞翅目菜蛾科, 是世界性十字花科蔬菜的重要害虫，其年发生代数多，世代重叠严重，繁殖系数高，寄主范围广，我国各省均有分布，在长江中下游及以南地区小菜蛾的发生为害尤为猖獗，并已成为影响蔬菜产量和品质的主要因素。据不完全统计，全世界每年用于防治小菜蛾的费用达40-50亿美元（Furlong, M.J., D.J. Wright,L.M. Dosdall. Diamondback moth ecology and management: problems, progress, and prospects [J]. Annual Review of Entomology, 2012, 58(26):517-541.）。以往主要依靠化学杀虫剂来防治小菜蛾，在小菜蛾发生的高发期，农民通常采用提高施药浓度、增加施药次数、使用高毒农药等方法来防治，结果导致既大量杀伤天敌，破坏了菜田的生态平衡，造成了害虫再猖獗，又导致蔬菜中农药残留严重超标，直接影响到人们的身体健康，带来一系列的生态和社会问题。
面对这样的局面，研究应用非化学杀虫剂来防治小菜蛾，生物防治成为最有效和应用前景最广的防治手段。研究人员对Bt杀虫剂与其他农药作过对比，结果发现Bt杀虫剂对小菜蛾的杀伤力比较理想（薛明，李强，李照会，等. 14 种杀虫剂对小菜蛾的药效试验 [J]. 农药, 1996, 35(6):37-39.）。然而，20世纪80年代起，国内外的试验发现小菜蛾对Bt杀虫剂产生了抗性，且小菜蛾对Bt基因工程菌和转基因抗虫植物均会产生与Bt杀虫剂相似的抗性。在中国、美国、法国、哥伦比亚等国家已开发出了多种白僵菌制剂用于防治小菜蛾（Milner, R. Prospects for biopesticides for aphid control [J]. Entomophaga, 1997, 42(2):227-239.）。白僵菌制剂与Bt杀虫剂相比，有两个优点：一是许多分离物有较宽的寄主范围，可以使多种昆虫染病；二是白僵菌通过侵染角质层来感染寄主，除了毛虫、甲虫和其他咀嚼口器昆虫外，还可感染蚜虫和叶蝉，但其用量较大、生产成本较高；白僵菌在液体培养基中通过发酵生产会产芽生孢子，其壁较薄，具有比分生孢子存活率低、贮存期短等缺点，尚需加以改进（Federici, B. A., Microbial pesticide [J].Pesticide Outlook, 1996, 38(6):22-27.）。目前研究较多、应用较广的是核型多角体病毒、质型多角体病毒和颗粒体病毒，它们具有致病力、专一性和抗逆性强等优点，但也存在着工业化生产困难，病毒多角体在紫外光及日光下易失活等众多问题（周利飞，杨德军. 昆虫病毒杀虫剂的研究概况 [J]. 植物医生, 2007, 20(3):8-9.）。
在小菜蛾寄生性天敌方面，也曾对寄生性天敌的种类、寄生潜力和功能、田间控害效果进行了研究，柯礼道等（1982）指出，在小菜蛾寄生性天敌中，真正能对小菜蛾种群起明显控制作用的只有少数几种。其中，小菜蛾绒茧蜂（Cotesia plutellae Kurdjumov）是小菜蛾幼虫单栖性寄生的重要天敌之一，其自然寄生率最高可达80%以上，对小菜蛾的种群数量有显著的控制作用，是农田生态系统的重要寄生性天敌（汪信庚，刘树生，何俊华，等. 杭州郊区小菜蛾寄生昆虫调查 [J]. 植物保护学报, 1998, 25(1):20-26.）。根据植物-昆虫-天敌三者间的协同进化关系，充分利用植物自身的防御机理，开发植物源的天敌引诱剂来增强对天敌的管理和利用，是一种安全、可持续、成本低、无公害的治虫新途径，发展前景十分广阔，必将在未来的害虫综合治理中，起到举足轻重的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法，该引诱剂是从植物挥发性物质中筛选出来的特异性组分，具有选择性高、针对性强的特点。通过使用该引诱剂，使小菜蛾绒茧蜂提早进入目标防治田内，并进入搜索状态，不往外逃散，增强其寄主搜索和攻击效率，提高其寄生率，对于提高小菜蛾绒茧蜂的控害作用，改善菜田害虫治理等具有重要意义。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂是以液体石蜡为溶剂，将100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑和壬醛进行相同比例混合而成。
配制如上所述的小菜蛾绒茧蜂的引诱剂的方法包括以下步骤：
（1）100μl/ml的单一组分溶液的配制
100μl/ml的苯甲醛溶液的配制：将100μl的苯甲醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的法呢烯溶液的配制：将100μl的法呢烯标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的苯乙腈溶液的配制：将100μl的苯乙腈标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的顺-3-己烯醇溶液的配制：将100μl的顺-3-己烯醇标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的反-2-己烯醛溶液的配制：将100μl的反-2-己烯醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的桉树脑溶液的配制：将100μl的桉树脑标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的壬醛溶液的配制：将100μl的壬醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
（2）小菜蛾绒茧蜂的引诱剂的配制
将步骤（1）得到的100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑以及壬醛溶液进行相同比例混合。
本发明的显著优点在于：
（1）能与环境相容
植物源引诱剂的组成成分是天然的化合物，在长期的进化过程中已形成了其固定的参与能量与物质循环代谢途径，不存在化学农药残留期长的问题，故应用植物源引诱剂对环境是相对安全的。
（2）对非靶标生物安全
植物源引诱剂是从植物挥发性物质中筛选出来的特异性组分，具有选择性高、针对性强的特点，其作用方式主要是通过挥发出来的气味来引诱小菜蛾绒茧蜂，无胃毒作用或触杀作用，因此对非靶标生物是安全的。
（3）原料丰富，开发费用低
植物源引诱剂取材于植物，原料通常易得，同时与化学农药高额的开发费用相比，具有开发费用低，成本低的优点。
总之，利用植物源引诱剂引诱天敌，提高天敌的定位和寄生效率，进而抑制和削弱害虫在自然界的生存和繁殖能力，在保护环境的同时保护自然资源，提高环境质量，达到生态效益、经济效益和社会效益的统一。
附图说明
图1是小菜蛾绒茧蜂对各混配物的趋性行为反应示意图，*表示在同一组合中小菜蛾绒茧蜂的选择行为反应差异显著。
具体实施方式
实施例1
一、引诱小菜蛾绒茧蜂的配方的配制
1.1 100μl/ml的单一组分溶液的配制
100μl/ml的苯甲醛溶液的配制：将100μl的苯甲醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的法呢烯溶液的配制：将100μl的法呢烯标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的苯乙腈溶液的配制：将100μl的苯乙腈标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的顺-3-己烯醇溶液的配制：将100μl的顺-3-己烯醇标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的反-2-己烯醛溶液的配制：将100μl的反-2-己烯醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的桉树脑溶液的配制：将100μl的桉树脑标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
100μl/ml的壬醛溶液的配制：将100μl的壬醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡油中，并混合均匀。
1.2 引诱小菜蛾绒茧蜂的配方的配制
将上述步骤1.1得到的100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑以及壬醛溶液进行同等比例混合。
二、小菜蛾绒茧蜂对混配物的触角电位反应
将20μL的上述步骤1.2得到的混配物均匀地滴于巴斯德滴管内的“之”字形滤纸条上，巴斯德滴管的末端与触角电位仪的刺激气流控制装置相连接，送气管管口与小菜蛾绒茧蜂的触角纵向垂直，相距约1cm，并通以湿润的持续气流，流速为100ml/min，每隔40s刺激一次，每次刺激的时间为0.5s，刺激气流流速为25ml/min。由于在所测定的单一组分中，小菜蛾绒茧蜂对100μl/ml的顺-3-己烯醇的触角电位反应最大，故以100μl/ml的顺-3-己烯醇作参照，刺激顺序为液体石蜡、顺-3-己烯醇、待测混配物、顺-3-己烯醇、液体石蜡。混配物在同一根小菜蛾绒茧蜂的触角上平行刺激3次，重复测定6根触角。
小菜蛾绒茧蜂对混配物的触角电位反应采用触角电位反应相对值表示，其计算公式为：A=（B－C）/（D－C）×100%；式中：A表示小菜蛾绒茧蜂对混配物的触角电生理反应的相对值；B表示小菜蛾绒茧蜂对混配物的触角电生理反应值；C表示混配物测定前后，小菜蛾绒茧蜂对液体石蜡的触角电生理反应值的平均值；D表示混配物测定前后，小菜蛾绒茧蜂对参照溶液顺-3-己烯醇的触角电生理反应值的平均值。
触角电位反应的测定结果显示，该混配物能引起小菜蛾绒茧蜂较强烈的触角电位反应，触角电位反应相对值达到了183.793±6.985%。
实施例2
分别取100μl的上述步骤1.2得到的混配物均匀滴于滤纸条上放入一边的味源瓶中，另一边以滴有100μl的液体石蜡的滤纸作为对照，采用“Y”型嗅觉仪测定小菜蛾绒茧蜂对混配物的趋向反应。选择触角完整且行为较活跃的小菜蛾绒茧蜂用于测试。生测时，由释放管管口将单头小菜蛾绒茧蜂放至“Y”型管基部，然后观察记录小菜蛾绒茧蜂10 min内对气味源的行为反应。当小菜蛾绒茧蜂爬至超过某臂2/3处并持续30 s以上，就记为该寄生蜂对该气味源作出选择，若小菜蛾绒茧蜂引入10 min后仍不作出选择，则判定为无选择，并结束对该寄生蜂的行为测定。每测定5头小菜蛾绒茧蜂后调换嗅觉仪两管臂的方位，以消除位置引起的误差，每测定完10头小菜蛾绒茧蜂更换洁净的“Y”型管，每处理共计测定60头小菜蛾绒茧蜂，每头小菜蛾绒茧蜂只测试1次。
小菜蛾绒茧蜂的行为选择反应采用卡平方（χ 2）测验法进行显著性差异检测，未作出选择的寄生蜂不进行分析。小菜蛾绒茧蜂对混配物的定向行为反应的测定结果表明（见附图1），该混配物对小菜蛾绒茧蜂具有显著的引诱作用（χ 2=6.231，df=1，P=0.018）。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (2)
1.一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂，其特征在于：以液体石蜡为溶剂，将100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑和壬醛进行相同比例混合而成。
2.一种配制如权利要求1所述的小菜蛾绒茧蜂的引诱剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）100μl/ml的单一组分溶液的配制
100μl/ml的苯甲醛溶液的配制：将100μl的苯甲醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的法呢烯溶液的配制：将100μl的法呢烯标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的苯乙腈溶液的配制：将100μl的苯乙腈标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的顺-3-己烯醇溶液的配制：将100μl的顺-3-己烯醇标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的反-2-己烯醛溶液的配制：将100μl的反-2-己烯醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的桉树脑溶液的配制：将100μl的桉树脑标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
100μl/ml的壬醛溶液的配制：将100μl的壬醛标准化合物加入到900μl的液体石蜡中，并混合均匀；
（2）小菜蛾绒茧蜂的引诱剂的配制
将步骤（1）得到的100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑以及壬醛溶液进行相同比例混合。
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