CN103257441B - 一种非相干数字全息三维动态显微成像系统与方法 - Google Patents

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Abstract

非相干数字全息三维动态显微成像系统与方法,属于光学衍射成像和非相干数字全息技术领域。采用基于位相空间光调制器的单次曝光相移技术和非相干光照明情形下实现动态样品的三维显微成像,在全息图拍摄光路中,入射光为由样品透射或反射的非相干光,经过准直透镜汇聚以及空间光调制器的调制后,被所述的图像传感器接收,图像传感器,空间光调制器均与计算机进行连接。其中空间光调制器上加载了在计算机中制作生成衍射分光的位相掩膜图样。为使系统可以一次曝光记录多幅相移全息图,需要将空间光调制器上的位相加载方法调整为分区域相移加载方式。本发明能够通过单次曝光同时记录多幅非相干数字全息图,可用于对光源相干性要求较低的实时性三维成像,并且系统内不需要任何移动或扫描部件。

Description

一种非相干数字全息三维动态显微成像系统与方法
技术领域
本发明公开了一种基于空间光调制器实现衍射分光和分区相移的非相干数字全息三维动态显微成像系统与方法,属于光学衍射成像和非相干数字全息技术领域。
背景技术
非相干光源照明的情形下,通光适当的光学技巧将来自同一点光源的光波分为两束,利用这两束光干涉记录下来的干涉图样成为子全息图,对于实际的扩展物体,可以认为是许多点源的集合,非相干光照明下物体可以认为是许多子全息图的叠加而成的,该全息图称为非相干全息图。G.Cochran等提出了三角干涉全息,T.Poon等提出荧光扫描全息,J.Rosen提出了菲涅耳非相干关联全息术,都可以实现非相干全息图的记录,但是都存在一定的局限。例如三角干涉全息光路实现相移困难、荧光全息必须扫描以及菲涅耳非相干关联全息术需要多次曝光记录多幅全息图等。为了兼顾光源的相干性、系统的结构和成像分辨率等性能,同轴系统作为记录非相干全息图的光路具有一定的优势,但是基于同轴共路拍摄得到的全息图的直流项和共轭像会与待测样品的像相互重叠,严重干扰待测样品的再现像,降低系统的成像质量。消除直流项和共轭像干扰的方法之一为相移技术,但是需要在拍摄过程中多次曝光来记录多幅相移全息图,从而不适于对动态样品或动态过程成像。目前用于解决这个问题的常用方法是单次曝光相移技术,并且已经有不同的实现单次曝光相移的方法提出,Awatsuji等人通过在图像传感器CCD前面装配一个周期性偏振的阵列器件,以达到同时记录多幅带有不同常数位相因子的相移全息图的目的。这种方法需要在光路中额外添加一个光学器件,会引入更多的畸变或噪声,而且这种器件的规格要求比较严格,制作难度大、成本高;Kimbrough等人提出了基于空间载波的方法记录的多幅相移全息图的方法,但是这种方法与离轴全息的记录方法类似,要求参考光与记录平面的法线呈一定的夹角,并且需要对参考光进行一定的位相编码。Araiza-Esquivel等人基于泰伯效应提出了一种同时记录多幅相移全息图的方法,这种方法也需要在参考光的光路上装配一个振幅型光阑,并要求光阑的参数符合图像传感器CCD的要求。可以看出,为了同时记录多幅相移全息图,需要一些特殊器件的辅助,这些器件在规格要求以及制作难度上往往都很高,并且多余的光学器件不仅会使成像系统复杂,也会增加光路的畸变和噪声。上述单次曝光相移的方法都是针对采用激光等良好相干光源的数字全息系统中。非相干数字全息系统中目前尚未有关于采用单次曝光相移的方法报道。
发明内容
为了使非相干全息术可以用于记录动态样品或动态过程,并且保证不增加系统的复杂性、不需要额外添加和制作辅助器件获取单次曝光多相移全息图,本发明提供了一种基于空间光调制器实现衍射分光和分区域相移的单曝光非相干数字全息三维动态显微成像的系统与方法。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
非相干数字全息三维动态显微成像系统,包括依次放置的白光光源1,汇聚透镜2,孔径光阑3,滤波片4,待测样品5,准直透镜6,分束棱镜或二向色分束棱镜7,空间光调制器8;其特征在于:由白光光源1发出的入射光依次通过汇聚透镜2、孔径光阑3、滤波片4,入射光照明待测样品5,由待测样品5透射或反射的光波,经过准直透镜6准直后垂直入射分束棱镜或二向色分束棱镜7的表面,透射光垂直入射空间光调制器8并经过空间光调制器8的调制并反射后,沿原路返回分束棱镜或二向色分束棱镜7,经分束棱镜或二向色分束棱镜7反射的光被图像传感器9接收,图像传感器9与空间光调制器8均与计算机10进行连接;
其中,为能使空间光调制器8起到一个衍射分光元件的作用,在计算机10中制作生成衍射分光的位相掩膜图样;为单次曝光同时记录多幅相移全息图,将空间光调制器8上的位相加载方法调整为分区域相移加载方式;图像传感器9接收到的干涉图样传入计算机10中;
所述光路中,滤波片4和待测样品5依次被装配在白光光源1的出射端,由待测样品5反射或透射的光波入射到与其距离等于焦距的准直透镜6前表面上,出射的准直光束与分束棱镜或二向色分束棱镜7垂直,分束棱镜的后方装配纯相位型空间光调制器8,在经过空间光调制器8以及分束棱镜或二向色分束棱镜7的反射光路上装配图像传感器9。
所述的白光光源1为宽带扩展的非相干光源,所述会聚透镜2对光源成像,所述孔径光阑3位于会聚透镜2形成的光源像面附近。
所述的滤光片4中心波长为633nm,带宽为10nm,滤波后的光源相干长度为39.4μm。
所述空间调制器6采用分辨率为1920×1080像素,像元尺寸为8μm×8μm的纯相位空间调制器,其相位线性调制范围为0-2π;图像传感器7采用1920×1080像素,像元尺寸为8μm×8μm的CCD相机,空间光调制器6与图像传感器7之间满足1:1像素匹配。
非相干数字全息三维动态显微成像方法,该方法利用空间光调制器8纯相位的调制模式,加载衍射分光位相图样对入射光波分光,并通过加载分区域相移位相模式用于单次曝光同时记录多幅相移全息图;具体步骤如下:
1)通过改变或调换滤光片4,控制滤波后的中心波长、带宽,控制光源的时间相干性;通过调整孔径光阑3的孔径大小,控制光源的空间相干性,以及在待测样品5表面产生的相干面积的尺寸,从而优选图像传感器9的记录位置,以便在图像传感器9上得到边缘条纹调制度大于0.2和直径5mm以上的全息图;
2)所述空间光调制器8为相位型反射式空间光调制器,并在空间光调制器8上分别随机选取一半像素加载一个平面波和一个球面波位相图样,形成一个对入射光波分光的衍射分光图样;
3)将空间光调制器8的幅面分成多个2×2像素的方形区域,根据每一个区域中加载平面波位相像素的位置,额外加载相移角度;方形区域左上,右上,左下,右下位置的像素分别对应0、π/2、π、3π/2四个相移角度;在图像传感器9对应的像素位置分别记录多幅相移全息图;
4)根据空间光调制器8上加载相移角度的位置分布,将图像传感器9采集的全息图中带有相同相移角度的像素分别提取出来,保持它们在全息图中的相对位置不变,分别填到四幅与全息图分辨率相同的空白图片中,得到四幅相移全息图;拆分得到的全息图通过在计算机10中进行四步相移运算,合成为一幅包含有物光波的复值全息图;
5)全息图的再现通过在计算机10中对全息图应用菲涅耳标量衍射传播方法获得。
本系统的主要优点在于:采用空间光调制器8作为一个周期性位相调制器件,这样可以免于在光路中添加额外的阵列器件以引起畸变和噪声,从而也不必考虑制作这种器件的难度问题。通过在空间光调制器上特定位置的像素添加相应的位相因子,对平面参考光进行位相调制,从而实现单次曝光同时记录分区相移全息图。本发明能够在非相干光源照明的同轴共路的数字全息显微成像系统中,实现单次曝光同时记录一幅分区相移的非相干数字全息图,通过数值再现算法重建待测样品的三维形貌和内部结构信息,可用于对光源相干性要求较低的实时性三维成像系统中。
附图说明
图1非相干数字全息三维动态显微成像系统一个优选实施例的结构原理图;
图2空间光调制器特定位置加载相应位相因子示意图;
图3从记录的全息图中获得的一幅分区相移全息图的原理示意图;
图4计算机模拟获得的重建像;
图5计算机模拟传统相移方法获得的重建像;
图6实验方法流程图
图中:1.白光光源,2.汇聚透镜,3.孔径光阑,4.滤光片,5.待测样品,6.准直透镜,7.分束棱镜,8.空间光调制器,9.图像传感器,10.计算机。
具体实施方式
下面通过计算机模拟以及附图对记录过程进行说明:
本实施例的光路示意图如图1所示:所述全息图的拍摄光路由白光光源1,汇聚透镜2,孔径光阑3,滤光片4,待测样品5,准直透镜6,分束棱镜7,空间光调制器8,图像传感器9,计算机10组成。入射光照射待测样品,由待测样品5透射的光波经过准直透镜6汇聚以及空间光调制器8的调制后,被所述的图像传感器9接收。计算机模拟光路示意图中的光波传播的过程,使用的光源中心波长为633nm,计算平面分辨率为1080×1080像素,采样间隔8μm×8μm。
在计算机10中生成空间光调制器加载的图样时,分别生成平面波和球面波的相位,并且在平面波中加载额外的相移角度,具体的加载方法是:将空间光调制器8的幅面分成多个2×2像素的方形区域,根据每一个区域中加载平面波位相像素的位置,额外加载相移角度。方形区域左上,右上,左下,右下位置的像素分别对应0、π/2、π、3π/2四个相移角度,相移角度的加载方式如图2所示。记录全息图后,需要将全息图拆分成多幅相移全息图,拆分方法是根据空间光调制器8上加载相移角度的位置分布,将图像传感器9采集的全息图中带有相同相移角度的像素分别提取出来,保持它们在全息图中的相对位置不变,分别填到四幅与全息图分辨率相同的空白图片中,得到四幅相移全息图。拆分后获得的相移全息图位相分布示意图如图3所示。经过拆分后的每一幅相移全息图中存在很多不带有相移角度的像素,这些像素的值通过计算与它们相邻像素值的平均值得出,首先对于两个带有相移角度像素之间的空白像素,计算这两个带有相移角度像素的值的平均值,并将平均值填入它们之间的空白像素,经过这一步后仍会剩下空白像素,计算位于这些空白像素上下左右的像素的值的平均值,并将平均值填入空白像素中。
对这些全息图应用相移算法即可得到恢复物光的复值全息图并且在计算机中通过数值计算后得到重建像,
UPS4=(I1-I3)+i(I2-I4) 1)
式1)中,I1,I2,I3,I4分别是记录的四幅相移全息图,重建像如图4所示。采用三次曝光三步相移得到的全息图重建像如图5所示。两者做比较,可以看出应用本发明的方法获得的重建像质量与多次曝光相移得到的全息图重建像质量相当,但是本发明的方法可以通过单次曝光记录分区相移全息图,并且系统简单紧凑,从而适用于动态样品和动态过程的全息三维成像。

Claims (4)

1.非相干数字全息三维动态显微成像系统,包括依次放置的白光光源(1)、汇聚透镜(2)、孔径光阑(3)、滤波片(4)、待测样品(5)、准直透镜(6)、分束棱镜(7)、空间光调制器(8);其特征在于:由白光光源(1)发出的入射光依次通过汇聚透镜(2)、孔径光阑(3)、滤波片(4),入射光照明待测样品(5),由待测样品(5)透射或反射的光波,经过准直透镜(6)准直后垂直入射分束棱镜(7)的表面,透射光垂直入射空间光调制器(8)并经过空间光调制器(8)的调制并反射后,沿原路返回分束棱镜(7),经分束棱镜(7)反射的光被图像传感器(9)接收,图像传感器(9)与空间光调制器(8)均与计算机(10)进行连接;
其中,为能使空间光调制器(8)起到一个衍射分光元件的作用,在计算机(10)中制作生成衍射分光的位相掩膜图样;为单次曝光同时记录多幅相移全息图,将空间光调制器(8)上的位相加载方法调整为分区域相移加载方式;图像传感器(9)接收到的干涉图样传入计算机(10)中;
所述光路中,滤波片(4)和待测样品(5)依次被装配在白光光源(1)的出射端,由待测样品(5)反射或透射的光波入射到与其距离等于焦距的准直透镜(6)前表面上,出射的准直光束与分束棱镜(7)垂直,分束棱镜的后方装配纯相位型空间光调制器(8),在经过空间光调制器(8)以及分束棱镜(7)的反射光路上装配图像传感器(9);所述分束棱镜(7)为二向色分束棱镜;所述的白光光源(1)为宽带扩展的非相干光源,所述汇聚透镜(2)对光源成像,所述孔径光阑(3)位于汇聚透镜(2)形成的光源像面附近;
将空间光调制器(8)的幅面分成多个2×2像素的方形区域,根据每一个区域中加载平面波位相像素的位置,额外加载相移角度;方形区域左上,右上,左下,右下位置的像素分别对应0、π/2、π、3π/2四个相移角度;在图像传感器(9)对应的像素位置分别记录多幅相移全息图;
根据空间光调制器(8)上加载相移角度的位置分布,将图像传感器(9)采集的全息图中带有相同相移角度的像素分别提取出来,保持它们在全息图中的相对位置不变,分别填到四幅与全息图分辨率相同的空白图片中,得到四幅相移全息图;拆分得到的全息图通过在计算机(10)中进行四步相移运算,合成为一幅包含有物光波的复值全息图。
2.如权利要求1中所述的非相干数字全息三维动态显微成像系统,其特征在于:所述的滤波片(4)中心波长为633nm,带宽为10nm,滤波后的光源相干长度为39.4μm。
3.如权利要求1中所述的非相干数字全息三维动态显微成像系统,其特征在于:所述空间光调制器(8)采用分辨率为1920×1080像素,像元尺寸为8μm×8μm的纯相位空间光调制器,其相位线性调制范围为0-2π;图像传感器(9)采用1920×1080像素,像元尺寸为8μm×8μm的CCD相机,空间光调制器(8)与图像传感器(9)之间满足1:1像素匹配。
4.利用权利要求1中所述系统进行非相干数字全息三维动态显微成像方法,其特征在于:该方法利用空间光调制器(8)纯相位的调制模式,加载衍射分光位相图样对入射光波分光,并通过加载分区域相移位相模式用于单次曝光同时记录多幅相移全息图;具体步骤如下:
1)通过改变或调换滤波片(4),控制滤波后的中心波长、带宽,控制光源的时间相干性;通过调整孔径光阑(3)的孔径大小,控制光源的空间相干性,以及在待测样品(5)表面产生的相干面积的尺寸,从而优选图像传感器(9)的记录位置,以便在图像传感器(9)上得到边缘条纹调制度大于0.2和直径5mm以上的全息图;
2)所述空间光调制器(8)为相位型反射式空间光调制器,并在空间光调制器(8)上分别随机选取一半像素加载一个平面波和一个球面波位相图样,形成一个对入射光波分光的衍射分光图样;
3)将空间光调制器(8)的幅面分成多个2×2像素的方形区域,根据每一个区域中加载平面波位相像素的位置,额外加载相移角度;方形区域左上,右上,左下,右下位置的像素分别对应0、π/2、π、3π/2四个相移角度;在图像传感器(9)对应的像素位置分别记录多幅相移全息图;
4)根据空间光调制器(8)上加载相移角度的位置分布,将图像传感器(9)采集的全息图中带有相同相移角度的像素分别提取出来,保持它们在全息图中的相对位置不变,分别填到四幅与全息图分辨率相同的空白图片中,得到四幅相移全息图;拆分得到的全息图通过在计算机(10)中进行四步相移运算,合成为一幅包含有物光波的复值全息图;
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