CN103251654B - 珍珠粉维生素ce胶囊及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种珍珠粉维生素CE胶囊。现在市面上出售的保健品大多补充元素种类单一，这些产品所含的有效成分虽被摄入，但机体对其吸收的效果很差。本珍珠粉维生素CE胶囊内容物由以下组分按照所示重量份比例配制而成：珍珠粉：135～165、天然维生素E：18～22、预胶化淀粉：176.4～215.6、硬脂酸镁：3.6～4.4、包衣维生素C：117～143。本发明还涉及一种珍珠粉维生素CE胶囊的制备方法。本发明可联合补充免疫器官所必须的微量元素，同时通过合理配伍，增强各组分对其他组分的促进作用，广泛适用于各年龄段群体增强自身免疫功能，尤其适用于免疫力低下的人群。

Description

珍珠粉维生素CE胶囊及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种能够增强人体免疫力的功能性营养保健品，特别涉及一种珍珠粉维生素CE胶囊及其制备方法。

背景技术

维生素和微量元素是维持人体健康和生理机能正常必不可少的物质，但由于日常饮食中营养搭配的不合理、作息时间不规律或劳累过度等原因，常常导致维生素和微量元素缺乏，其中以钙离子、维生素C和维生素E的缺乏最为严重，在发达国家，定期使用营养保健品补充维生素和微量元素已经成为日常生活习惯。

钙离子、维生素C和维生素E对于人体的作用极为广泛，其中对人体免疫力的影响最为直接，其不但直接参与免疫细胞的形成，而且还间接催化促进免疫组织在免疫器官中发挥其相应的抗菌抗病毒作用。

现在市面上出售的保健品大多补充的元素种类较为单一，在具有相互促进吸收的部分维生素或微量元素未得到相应补充的情况下，这些产品所含的有效成分虽然被摄入，但最终机体对其吸收和利用的程度较差。

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何克服现有技术的上述缺陷，提供一种珍珠粉维生素CE胶囊及其制备方法。

为解决上述技术问题，本珍珠粉维生素CE胶囊内容物由以下组分按照所示重量份比例配制而成：

珍珠粉：135～165         天然维生素E：18～22

预胶化淀粉：176.4～215.6 硬脂酸镁：3.6～4.4

包衣维生素C：117～143。

上述天然维生素E优选D-α-生育酚醋酸酯。

作为优化，所述包衣维生素C由以下组分按照所示重量份比例配制而成：

维生素C113.49～138.71乙基纤维素：3.51～4.29。

作为优化，每1000粒本珍珠粉维生素CE胶囊的配方为：

珍珠粉：135g～165g          天然维生素E：18g～22g

预胶化淀粉：176.4g～215.6g  硬脂酸镁：3.6g～4.4g

维生素C：113.49g～138.71g   乙基纤维素：3.51g～4.29g。

本珍珠粉维生素CE胶囊的制备方法包括以下步骤：。

1）预混：

按上述的配方量将珍珠粉、预胶化淀粉按投入混合机中混合10min～20min；

2）总混：

将经步骤1）预混后的珍珠粉、预胶化淀粉和按上述配方量的天然维生素E、包衣维生素C、硬脂酸镁投入混合机混合20min-30min；

3）填充：

用胶囊填充机进行填充，0.5g/粒，即得本珍珠粉维生素CE胶囊。

本发明制备的珍珠粉维生素CE胶囊可联合补充免疫器官所必须的钙元素、维生素C和维生素E等具有相互促进吸收效果的维生素和微量元素，同时通过合理配伍，增强各组分对其他组分的促进作用，广泛适用于各年龄段群体增强自身免疫功能，尤其适用于免疫力低下的人群。

附图说明

下面结合附图对本发明珍珠粉维生素CE胶囊及其制备方法作进一步说明：

图1是本珍珠粉维生素CE胶囊的制备方法流程。（图中虚线内为10万级洁净区）

具体实施方式

实施例1：如图1所示，本珍珠粉维生素CE胶囊的制备方法包括以下步骤：

1）预混：

按照所示质量称取以下各组分，

珍珠粉：150g      天然维生素E：20g

预胶化淀粉：196g  硬脂酸镁：4g

维生素C：126.1g   乙基纤维素：3.9g。

按上述配方量将珍珠粉、预胶化淀粉按投入混合机中混合10min-20min；

2）总混：

将经步骤1）预混后的珍珠粉、预胶化淀粉和按步骤1）所述的配方量的天然维生素E、包衣维生素C、硬脂酸镁投入混合机混合20min-30min；

3）填充：

用胶囊填充机进行填充，0.5g/粒，即得本珍珠粉维生素CE胶囊A。

实施例2：按所示质量称取下列各组分，

珍珠粉：135g        天然维生素E：22g

预胶化淀粉：176.4g  硬脂酸镁：4.4g

维生素C：113.49g    乙基纤维素：4.29g。

重复实施例1所述制备方法，即制得本珍珠粉维生素CE胶囊B。

实施例3：按所示质量称取下列各组分，

珍珠粉：1165g       天然维生素E：18g

预胶化淀粉：215.6g  硬脂酸镁：3.6g

维生素C：138.71g    乙基纤维素：3.51g。

重复实施例1所述制备方法，即制得本珍珠粉维生素CE胶囊C。

增强免疫力功能实验

1材料与方法

1.1样品

本珍珠粉维生素CE胶囊A，送检方推荐日服用建议剂量为0.5g/日。

1.2实验动物

清洁级雄性Balb/c小鼠，体重18g～22g。四川大学华西实验动物中心提供（合格证号：SCXK（川）2009-09号）。使用屏障级动物房（许可证号：四川省实验动物管理委员会SYXK（川）2009-011）饲养。

1.3剂量选择

动物购回，基础饲料喂饲3天后，按随机分组原则分为0.08g/kg.bw组、0.17g/kg.bw组和0.25g/kg.bw组（分别相当于送检方推荐的日服用建议剂量的10倍、20倍和30倍）及对照组。实验组以相应剂量的样品（称取送检样品1.25g，加灭菌水至100mL混匀，作为高剂量组灌胃液，将灭菌水1份，高剂量组灌冒液2份混匀后灌胃即为中剂量组，用灭菌水对倍稀释中剂量组灌胃液，混匀后灌胃即为低剂量组），对照组以灭菌水灌胃，灌胃量均为20mL/kg.bw，每天一次，连续灌胃30天。

1.4主要仪器与试剂

1.4.1主要仪器BSA224S电子天平：德国赛多利斯股份公司；数显游标卡尺：上海塞拓五金工具有限公司；Model680型酶标仪：BI0-RAD。MC0-15AC CO₂孵箱：三洋电机国际贸易有限公司；WFJ7200分光光度计：尤尼柯（上海）仪器有限公司。

1.4.2主要试剂绵羊红细胞(SRBC)：采自健康绵羊颈静脉；鸡红细胞(CRBC)：采自健康公鸡心脏血；氧化型辅酶I：Sigma公司产品；一得阁墨汁：北京一得阁工贸公司；ConA：Sigma公司产品；MTT：Sigma公司产品；补体：4只健康豚鼠的混合血清。

1.5实验方法

1.5.1脏器／体重比值测定：连续灌胃30天后，称取动物体重，颈椎脱臼处死动物，取出脾脏、胸腺，分别称出脾脏、胸腺重量，计算脏器／体重比值（以mg/10g表示）。

1.5.2迟发型变态反应（足跖增厚法）：在连续灌胃的第25天，每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2mL免疫，继续灌胃4天后，测量左后足跖厚度，测量3次取平均值；然后在测量部位皮下注射20%(v/v)SRBC，每只20μL。注射后24小时测量左后足跖厚度，测量3次取平均值。计算攻击前后足跖厚度的差值，以差值表示小鼠足跖增厚的程度。

1.5.3ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）：连续灌胃30天后，颈椎脱臼处死动物，无菌取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank′s液洗3次，用完全1640培养液配成3×10⁶个／mL细胞悬液。将每份脾细胞悬液加入24孔培养板中，1mL／孔，2孔／份样品，一孔加75μL ConA液（相当于7.5μg／mL），一孔作为对照，置CO₂培养箱培养68h后，取出培养板，每孔轻轻吸取0.7mL上清液，加入0.7mL不含小牛血清的1640培养液，及50μLMTT液(5mg/mL)，继续培养4h。取出培养板，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打使紫色结晶完全溶解。将溶解液移入2mL比色杯中，在570nm波长处测定OD值。

1.5.4血清溶血索测定（血凝法）：在连续灌胃的第25天，每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2mL免疫，继续灌胃5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置1小时，剥离，2000r/min离心10分钟，收集血清，用生理盐水将血清作倍比稀释，每份稀释12孔，将不同稀释度的血清置于血凝板中，每孔100μL，再加入0.5%SRBC悬液100μL，混匀，置湿盒37℃，3小时后观察结果，记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。

1.5.5抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）：在连续灌胃的第25天，每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2mL免疫，继续灌胃5天后，颈椎脱臼处死小鼠，取出脾脏，撕碑，过200目筛网后，用Hank′s液洗3次，用完全1640培养液配成5×106个/mL细胞悬液备用。在含有0.5mL(45℃～50℃)表层培养基的小试管中加入50μL10%SRBC及20μL己配好的脾细胞悬液，迅速混匀，加于挂膜玻片上，凝固后，将玻片扣放在片架上，置CO₂培养箱培养1.5h，在玻片架凹槽内加入用SA缓冲液稀释的补体，继续培养1.5h后，计数溶血抗体生成细胞数。

1.5.6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（半体内法）：连续灌胃30天后，每只小鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1mL，30分钟后，颈椎脱臼处死，将其固定在鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1分钟，吸出腹腔洗液1mL，平均滴于2张载玻片上，置湿盒37℃30分钟，取出在生理盐水中漂洗、晾干、固定，4%Giemsa PBS染色3分钟，蒸馏水漂洗晾干，镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。

1.5.7小鼠碳廓清实验：连续灌胃30天后，按0.01mL/g bw从小鼠尾静脉注入1：4稀释的墨汁，立即计时，分别于2min、10min从小鼠内眦静脉丛取血20μL，加到含2mL0.1%Na2CO3溶液的试管中，混匀，用722分光光度计，在600nm波长处测定OD值（用0.1%Na2CO3溶液作空白对照）。

1.5.8NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶测定法）：连续灌胃30天后，颈椎脱臼处死动物，取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank′s液洗3次，用完全1640培养液配成2×107个/mL细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300μL分置于96孔培养板中，每孔100μL，每孔加靶细胞(YAC-1细胞，4×105个/mL)100μL，同时做靶细胞自然释放孔(靶细胞100μL+培养液100μL)及最大释放孔(靶细胞100μL+1%NP-40100μL)各8孔，37℃5%CO₂培养4小时，取出1500r/min离心5分钟。将各孔上清液100μL置于另一培养板中，每孔再加入100μL基质液，10分钟后加1mol/L HCl30μL终止反应，在490nm处测定O.D.值，计算NK细胞活性率。

1.6实验数据统计

采用各实验组与对照组均数比较的方差分析对数据进行处理。所用软件为《中国医学百科全书·医学统计学》统计软件包(PEMS3.0，四川大学华西公卫卫生统计学教研室)。

2结果

2.1珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠体重的影响

2.1.1血清溶血素、抗体生成细胞与迟发型变态反应测定组经方差分析，各剂量组与对照组相比，初始体重F=0.2780，P=0.8409；中期体重F=0.1301，P=0.9416；结束体重F=0.2483，P=0.8620，体重增长值F=0.3682，P=0.7763，均无显著性差异(P>0.05)，见表1。

表1．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠体重的影响

（血清溶血素、抗体生成细胞与迟发变态反应测定组）

2.1.2吞噬鸡红细胞组经方差分析，各剂量组与对照组相比，初始体重F=0.0221，P=0.9955；中期体重F=0.0627，P=0.9791；结束体重F=0.0797，P=0.9706；体重增长值F=0.3805，P=0.7676，均无显著性差异(P>0.05)，见表2。

表2．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠体重的影响（吞噬鸡红细胞组）

2.1.3NK细胞活性测定与淋转测定组经方差分析，各剂量组与对照组相比，初体重F=0.1221P=0.9465：中期体重F=0.3821P=0.7665；结束体重F=0.4257，P=0.7357：体重增长值F=0.8196,P=0.4912，均无显著性差异(P>0.05)，见表3。

表3．维生素CE胶囊A对小鼠体重的影响(NK细胞活性测定与淋转测定组)

2.1.4碳廓清测定组经方差分析，各剂量组与对照组比，初始体重F=0.0408，P=0.9888；中期体重F=0.1672，P=0.9178；结束体重F=0.0890，P=0.9656；体重增长值F=0.1837，P=0.9068，均无显著性差异(P>0.05)，见表4。

表4．珠粉维生素CE胶囊A对小鼠体重的影响（碳廓清测定组）

2.2珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠脏器／体重比值的影响

2.2.1脾脏／体重比位经方差分析，F=0.3903，P=0.7607。各剂量组分别与对照组小鼠相比，其脾脏／体重比值均无显著性差异(P>0.05)，见表5。

2.2.2胸腺／体重比经方差分析，F=0.0968，P=0.9613，各剂量组分别与对照组小鼠相比，其胸腺／体重比值均无显著性差异(P>0.05)，见表5。

表5．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠脏器／体重比值的影响

2.3珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

经方差分析，F=3.8657，P=0.0166。抗原攻击后24小时，0.08g/kg.bw、0.17g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其足跖肿胀度均无显著性差异(P>0.05)；0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其足跖肿胀度有显著性差舁(P<0.05)，见表6

表6．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

^*表示与对照组对比，P<0.05。

2.4ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)

经方差分析，F=0.7983，P=0.5025。各剂量组分别与对照组小鼠相比，其光密度差值均无显著性差异(P>0.05)，见表7。

表7．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠淋巴细胞转化的影响

2.5珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠血清溶血索产生的影响

经方差分析F=4.9038，P=0.0056。0.08g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体积数无显著性差异(P>0.05)；0.17g/kg.bw、0.25g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其抗体积数均有显著性差异(P<0.01)，见表8。

表8．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠血清溶血素抗体积数的影响

^**表示与对照组对比，P<0.01。

2.6扰体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）

经方差分析，F=5.4382，P=0.0033。0.08g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体生成细胞数无显著性差异(P>0.05)；0.17g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体生成细胞数有显著性差异(P<0.05)；0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体生成细胞数有显著性差异(P<0．01),见表9。

表9．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠抗体生成细胞的影响

^*表示与对照相比，P<0.05，^**表示与对照组对比，P<0.01。

2.7珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

2.7.1吞噬百分率经方差分析，F=3.6533，P=0.0211。0.08g/kg.bw、0.17g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率均无显著性羞异(P>0.05)；0.25g／kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率有显著性差异(P<0.05)。

2.7.2吞噬指数经方差分析，F=3.14589，P=0.0365。0.08g/kg.bw、0.17g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数均无显著性差异(P>0.05)；0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数有显著性差异(P<0.05)，见表10。表10．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

^*表示与对照组相比，P<0.05。

2.8小鼠碳廓清实验

方差分析，F=7.4306，P=0.0005。0.08g/kg.bw，其吞噬指数a无显著性差异(P>0.05)；0.17g/kg.bw、0.25g/kg.bw剂量组分别与对熙组小鼠相比，其吞噬指数a均有显著性差异(P<0.01)，见表11。

表11．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠碳廓清的影响

^**表示与对照组相比，P<0.01。

2.9参珠粉维生素CE胶囊对小鼠NK细胞活性的影响

经方差分析，F=1.9677，P=0.1352，各剂量组分别与对照组小鼠相比，其NK细胞活性率均无显著性差异(P>0.05)，见表12。

表12．珍珠粉维生素CE胶囊A对小鼠碳廓清的影响

分别用珍珠粉维生素CE胶囊B、珍珠粉维生素CE胶囊C代替珍珠粉维生素CE胶囊Ａ，重复上述增强免疫力功能动物实验，所得结果无实质性差别，略。

3小结

分别经口给予小鼠(Balb/c)0.08g/kg.bw0.17g/kg.bw和0.25g/kg.bw剂量的本汤珍珠粉维生素CE胶囊A30天后，未见本检品对小鼠体重和增重有不良影响。小鼠脏器／体重比值测定中，各剂量组分别与对照组小鼠相比，其脏器／体重比值均无显著差异(P>0.05)。在小鼠迟发型变态反应实验中，抗原攻击后24小时，0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其足跖肿胀度有显著性差异(P<0.05)。小鼠血清溶血素实验中，0.17g/kg.bw、0.25g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其抗体积数均有显著性差异(P<0.01)。小鼠抗体生成细胞实验中，0.17g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体生成细胞数有显著性差异(P<0.05)；0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其抗体生成细胞数有显著性差异(P<0.01)。小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验中，0.25g/kg.bw剂量组与对照组小鼠相比，其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率、吞噬指数均有显著性差异(P<0.05)。在小鼠碳廓清实验中，0.17g/kg.bw、0.25g/kg.bw剂量组分别与对照组小鼠相比，其吞噬指数a均有显著性差异(P<0.01)。据评价标准可认为本珍珠粉维生素CE胶囊具有增强免疫力功能。

本发明包括但不限于上述实施方式，任何符合本发明权利要求书描述的产品，均落入本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种珍珠粉维生素CE胶囊，其特征是：其内容物由以下组分按照所示重量份比例配制而成：

珍珠粉：135～165           天然维生素E：18～22

预胶化淀粉：176.4～215.6   硬脂酸镁：3.6～4.4

包衣维生素C：117～143。

2.根据权利要求1所述的珍珠粉维生素CE胶囊，其特征是：所述包衣维生素C由以下组分按照所示重量份比例配制而成：

维生素C113.49～138.71         乙基纤维素：3.51～4.29。

3.根据权利要求1所述的珍珠粉维生素CE胶囊，其特征是：每1000粒配方为：

珍珠粉：135g～165g           天然维生素E：18g～22g

预胶化淀粉：176.4g～215.6g   硬脂酸镁：3.6g～4.4g

维生素C：113.49g～138.71g    乙基纤维素：3.51g～4.29g。

4.一种珍珠粉维生素CE胶囊的制备方法，其特征是：该方法包括以下步骤：

1)预混：

按权利要求1-2或3所述的配方量将珍珠粉、预胶化淀粉投入混合机中混合10min～20min；

2)总混：

将经步骤1)预混后的珍珠粉、预胶化淀粉和按权利要求1-2或3所述的配方量的天然维生素E、包衣维生素C、硬脂酸镁投入混合机混合20min-30min；

3)填充：

用胶囊填充机进行填充，0.5g/粒，即得本珍珠粉维生素CE胶囊。