CN103228668A

CN103228668A - 抗糖尿病的苯基丙酮酸烯醇糖苷

Info

Publication number: CN103228668A
Application number: CN2010800701355A
Authority: CN
Inventors: E·周伯特; S·J·费伊; J·罗; T·乌尔温; R·佳吉
Original assignee: ZADEC APS
Current assignee: ZADEC APS
Priority date: 2010-10-07
Filing date: 2010-10-07
Publication date: 2013-07-31
Anticipated expiration: 2030-10-07
Also published as: CA2813617A1; EP2625184A1; EP2625184B1; US20130310331A1; ES2526660T3; US9221860B2; WO2012045363A1; CN103228668B; US10174065B2; JP2013538862A; CA2813617C; US20160083411A1

Abstract

提供了抗糖尿病的苯基丙酮酸烯醇糖苷及其衍生物，用作药物，尤其是用作使血糖正常的药物，即用于将为肥胖、前驱糖尿病或患有糖尿病、肥胖和/或X综合征的哺乳动物的血糖水平降至正常水平。因此，本发明的化合物有助于控制血糖水平，即通过平衡血糖水平帮助身体；有助于保持平衡的血糖水平，特别是保持患有糖尿病的人体中的平衡血糖水平；通过促进细胞的葡萄糖摄取和通过降低糖水平起辅助作用，由此改善或恢复葡萄糖耐量；优化血糖响应；使葡萄糖耐量正常化。

Description

抗糖尿病的苯基丙酮酸烯醇糖苷

发明领域

本发明涉及用作药物、尤其是使血糖正常的药物的化合物，即它们用于使为肥胖、前驱糖尿病或患有糖尿病、肥胖和/或X综合征的哺乳动物血糖降至正常水平。

发明背景

糖尿病定义了代谢病中的一种复杂形式，其源自多种诱发因素且特征在于葡萄糖代谢受损，通常与蛋白质和脂肪代谢受损相关。这导致禁食和餐后血清葡萄糖水平升高，如果不进行治疗，则导致并发症。

已知4种不同形式的糖尿病：(1)1型糖尿病(T1D)；(2)2型糖尿病(T2D)；(3)所谓的妊娠糖尿病，其在妊娠过程中开始或在该过程中被首次确认；和(4)一些主要基于遗传缺陷的其他形式。糖尿病的两种主要形式为1型和2型糖尿病，其中T2D是最普遍的形式。

有许多理论解释导致1型糖尿病的胰腺胰岛素产生受损。参考文献涉及两篇论文。第一篇为Lernmark A,Sehlin J,

IB,Kromann H,Nerup J.的“Possible toxic effects of normal and diabeticpatient serum on pancreatic B-cells”，其发表在Diabetologia.1978Jan14；14(1):25-31中。第二篇是“Autoimmune Imbalance and DoubleNegative T Cells Associated with Resistant,Prone and DiabeticAnimals”,Hosszufalusi,N.,Chan,E.,Granger,G.和Charles,M.；JAutoimmun,5:305-18(1992)。这些论文显示胰岛炎症中断了胰岛素产生。特别地，胰岛中产生胰岛素的β细胞受到免疫攻击破坏。这种β细胞破坏被视为因几种类型的免疫细胞攻击所致，包括NK(天然杀伤)细胞和双阴性（double negative）T-淋巴细胞。鉴定针对一些蛋白质(例如GAD65、胰岛素等)的抗体用作检测T1D的诊断参数之一。甚至这样的自身免疫攻击被视为胰岛自身改变后的继发事件且这些改变可能在糖尿病临床发作前许多年就已经开始。

T2D与高血糖症、高胆固醇血症和高脂血症相关。T2D中对胰岛素无敏感性导致肝、肌肉和脂肪组织的葡萄糖利用减少，并且导致血糖水平升高。不受控制的高血糖症与不同器官例如眼、心脏、血管、肾和神经的功能障碍和衰竭相关，由此因微血管和大血管疾病风险增加而导致早产死亡率增加，所述的微血管和大血管疾病包括肾病、神经病、视网膜病、腿和足溃疡形成、脂肪肝病、高血压、心血管病和脑血管疾病(中风)、所谓的糖尿病并发症。近期的证据显示严格的血糖控制是预防T2D中的这些并发症的主要因素。因此，通过药物或治疗方案的最佳血糖控制是用于治疗T2D的重要手段。

T2D是主要在成年人中发生的糖尿病形式，在他们中，在疾病的早期有足够的胰岛素产生可利用，而在胰岛素作用中存在缺陷，尤其是在胰岛素-介导的利用和周围组织中葡萄糖代谢方面。与T2D相关的不同组织中的改变在检测到临床症状前也存在了许多年。

根据血糖水平升高诊断T2D。在改进通过血糖水平升高诊断糖尿病后，疗法例如膳食和锻炼和/或可用的药物可以导致血糖水平暂时改善，而不能阻止疾病发展。这些疗法的失败率与持续的β细胞减少率相关。

T2D的发病率在全世界逐步增加。尽管遗传因素可能起作用，但是这种增加通常归因于生活方式的改变，例如采取西方膳食即高脂肪，导致肥胖，这可能是促成这种疾病增加的因素。生活方式因素例如脂肪摄取增加和锻炼减少已经被证实与肥胖和胰岛素抵抗相关。在大鼠中，高脂肪饲喂诱导与胰岛素刺激的糖酵解和糖原合成减少相关的胰岛素抵抗状态。这种疾病是周围胰岛素响应组织例如肌肉和脂肪组织的结果，显示对胰岛素的响应显著减少，导致血液中循环葡萄糖和脂肪酸增加。对于胰岛素响应低导致糖酵解减少，由此启动肝中的糖原异生和糖原分解，这两者在正常条件下处于由胰岛素"关闭"状态。

胰腺细胞能够通过产生过量的胰岛素和增加分泌的胰岛素量应对最初的胰岛素抵抗期。产生的用于维持血糖量正常的超高胰岛素血症最终引起细胞功能障碍，导致充分显现的糖尿病。显然T2D取决于周围和细胞水平上发生的损伤。

糖尿病被视为潜伏危险的，因为目前已知无法治愈。然而，不同的治疗方案已经用于改善糖尿病。

目前，用胰岛素治疗T1D患者。令人遗憾地，胰岛素的应用目前需要多个次每日剂量，通常通过自我注射给药，其中确定胰岛素的适合剂量需要由患者或施药的临床医师频繁地评估尿或血液中的糖。未预定的给予过度剂量的胰岛素可以导致血糖过低，其副作用在于从血糖轻度异常到昏迷状态乃至死亡。

T2D的疗法最初包括膳食和生活方式改变(包括增加锻炼)。当这些措施无法维持足够的血糖控制时，用口服降血糖药和/或外源性胰岛素治疗患者。目前用于治疗T2D的口服药物活性剂包括促进胰岛素分泌的那些(磺酰脲活性剂)、改善肝中胰岛素作用的那些(双胍药)、胰岛素致敏剂(噻唑烷二酮类)和起抑制胃肠道中葡萄糖摄取作用的活性剂(α-糖苷酶抑制剂)。双胍类例如二甲双胍在上世纪50年代后期可用于治疗2型糖尿病，且从此以来成为有效的降血糖药。作为胰岛素致敏剂，二甲双胍主要对肝起作用，其中它抑制葡萄糖释放。还证实二甲双胍抑制呼吸链的复合物I的酶活性且由此损伤线粒体功能和细胞呼吸，所以在这种作用下降低ATP/ADP之比，而该比例可活化AMP活化的蛋白激酶，导致短期的分解代谢响应和长期的胰岛素致敏。经证实这种药物在单一疗法和与磺酰脲类或胰岛素的联合疗法中有效。

然而，目前可利用的活性剂一般因高血糖症中的进行性退化而无法维持长期足够的血糖控制，所述的高血糖症是因胰腺细胞功能进行性丧失所致。能够维持靶向血糖水平的患者比例随时间明显减少，从而迫使给予另外的/可替代选择的药物活性剂。此外，这些药物可能存在不需要的副作用且与高的原发性和继发性衰竭比例相关。

因此，对于具有最少副作用的预防、控制和/或治疗糖尿病和预防与之相关的如上所述的身体并发症的化合物存在需求。许多患者关注可替代疗法，它们可以将与高剂量药物相关的副作用减少至最低限度且得到累加的临床有益性。糖尿病是一种进行性和慢性疾病，通常无法识别，直到显著的损害发生至负责产生胰岛素的胰腺细胞和心血管系统为止。因此，还对研发新的治疗处于风险中的人的糖尿病的方法存在递增的关注，尤其是老年人，还有肥胖儿童(其处于发生T1D或T2D的高风险中)。由于T2D通常与来自X综合征("代谢综合征")例如高甘油三酯血症或血脂异常的症状相关，所以本发明的化合物还用于治疗或预防X综合征。

已经重新集中于通过葡萄糖依赖性胰岛素分泌控制的基于胰岛的胰岛素分泌。这种手段具有稳定和恢复β细胞功能的潜能。在这方面，目前已经鉴定了几种孤儿G-蛋白偶联受体(GPCR's)，它们优先在β细胞中表达且牵连葡萄糖依赖性胰岛素分泌(GDIS)。GPR119是细胞表面GPCR，其在人(和啮齿动物)以及在分泌胰岛素的细胞系中高度表达。天然存在的长链脂肪酸酰胺、油酰基乙醇酰胺(OEA)和几种长链饱和和不饱和溶血磷脂素类例如1-棕榈酰基-溶血磷脂胆碱和2-油酰基-溶血磷脂胆碱和合成化合物目前已经被鉴定为GPR119的配体。对大鼠紧急给予合成小分子GPR119激动剂减少了24h累积食物摄取，没有明显的改变运动行为，而在长期研究中，减少了累积食物摄取和降低了体重，表明GPR119激动剂可以是有效的减肥药。合成GPR119激动剂还仅在血糖升高条件下增加了胰岛素从分离的稳定的小鼠胰岛中释放并且改善了糖尿病小鼠和膳食诱导的肥胖小鼠的葡萄糖耐量，没有导致低血糖症。GPR119激动剂由此具有作为产生体重减轻的抗高血糖药起作用的潜能。

GPR119作为治疗2型糖尿病和肥胖的潜在靶标存在几个潜在的优点。首先，由于GPR119-介导的胰岛素分泌是葡萄糖依赖性的，所以几乎没有或不存在血糖过低风险。第二，GPR119激动剂的体重减轻效力应促成糖尿病和前驱糖尿病肥胖受试者中的抗高血糖效力，而活化GPR119能够同时治疗常见的肥胖和葡萄糖耐量降低/糖尿病并存病。第三，GPR119在人(主要是在胰岛和GI道中)的有限组织分布表明与其他组织中GPR119活性相关的副作用的机会可能更少。第四，GPR119激动剂可以具有恢复或保护胰岛功能的潜能，因为GPR119激动剂增加GLP-1水平。GLP-1是影响GDIS和对胰岛发挥抗细胞凋亡和增殖作用的肠降血糖素激素。在GPR119激动作用时对胰岛的保护作用可能是高度有利的，因为长期糖尿病疗法通常导致胰岛活性逐步下降，使得在用多种口服抗高血糖药治疗的延长期限后，通常必须用每日胰岛素注射治疗2型糖尿病患者。通过恢复或保护胰岛功能，GPR119激动剂可以延缓或防止2型糖尿病患者中的胰岛功能下降和缺失。

发明概述

本发明涉及式I的化合物或其生理学可接受的盐：

其中

Ar是芳族或杂芳族单环或稠合双环或三环系统；

n是0、1或2；

R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、芳基、C_1-6-烷基、C_2-6-炔基、C_2-6-烯基、C_3-10-环烷基、C_3-10-环烷基-C_1-3-烷基、C_5-10-环烯基、C_5-10-环烯基-C_1-3-烷基、C_1-4-烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、氨基羰基、C_1-4-烷基氨基羰基、二-(C_1-3-烷基)氨基羰基、吡咯烷-1-基羰基、哌啶-1-基羰基、吗啉-4-基羰基、哌嗪-1-基羰基、4-(C_1-4-烷基)哌嗪-1-基羰基、C_1-4-烷氧羰基、氨基、C_1-4-烷基氨基、二-(C_1-3-烷基)氨基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、吗啉-4-基、哌嗪-1-基、4-(C_1-4烷基)哌嗪-1-基、C_1-4-烷基羰基氨基、C_1-6-烷氧基、C_3-10-环烷氧基、C_5-10-环烯氧基、芳氧基、C_1-4-烷基硫基、C_1-4-烷基亚磺酰基、C_1-4-烷基磺酰基、C_3-10-环烷基硫基、C_3-10环烷基亚磺酰基、C_3-10-环烷基磺酰基、C_5-10-环烯基硫基、C_5-10-环烯基亚磺酰基、C_5-10-环烯基磺酰基、芳基硫基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基、氰基和硝基，

X¹独立地选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X²选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X³独立地选自-O-和-CH(X¹)-；

X⁴选自-O-和(-CH₂)_m-；

X⁵=-O-或(-CH₂)_m-；

m是0、1、2或3；

A选自–H、-CH₃、-CO₂H、-CO₂R⁵、-SO₃H；-SO₂HNR⁵；-PO(OH)₂；-CONH(CO)R⁵；-CONH(CO)H、-CONHSO₂R⁵；-CONHCN；和

其中标记为＊的键连接乙烯；且

R⁵选自C₁-C₆直链或支链烷基、C₂-C₆直链或支链烯基或炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、碳环和杂环；

条件是：

·当X³是-O-且至少一个X¹是OH时，X²不是–OH；

·如果R¹、R²、R³和R⁴是-H，则当X¹是–OH、X³和X⁴是-O-、X²是-CH₂OH、n是1且X⁵是(-CH₂)_m-时，A不是-CO₂H或-CO₂R⁵，其中m是0；且

·如果R¹、R²或R³选自C_1-6-烷氧基、C_3-10-环烷氧基、C_5-10-环烯氧基、芳氧基和羟基，则R¹、R²或R³不在X⁵的对位上。

本发明的化合物特别用于治疗T1D、T2D、肥胖和/或X综合征。本发明还涉及包含这些化合物的膳食和药物组合物，并且涉及治疗哺乳动物包括人的T1D、T2D、肥胖和/或X综合征的方法，该方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的式I的化合物的步骤。不限于特定作用方式，可能的情况是本发明化合物的大部分治疗效果可以归因于其GPR119激动作用。因此，本发明还涉及作为GPR119激动剂的本发明的化合物。

在本发明的上下文中，"治疗"还包括共同治疗和预防和控制。

本发明上下文中的动物可以是哺乳动物，包括人。除人外优选的哺乳动物实例还有狗、猫、豚鼠、(长腿野兔)兔、野兔、雪貂、马和反刍动物(牛、绵羊和山羊)。

本发明的发明人已经发现了式I的化合物，其中

Ar是苯；

n=1；

R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、C_1-6-烷基、C_2-6-炔基、C_2-6-烯基、C_3-10-环烷基、C_3-10-环烷基-C_1-3-烷基、C_5-10-环烯基、C_5-10-环烯基-C_1-3-烷基、C_1-4-烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、氨基羰基、C_1-4-烷基氨基羰基、二-(C_1-3-烷基)氨基羰基、吡咯烷-1-基羰基、哌啶-1-基羰基、吗啉-4-基羰基、哌嗪-1-基羰基、4-(C_1-4-烷基)哌嗪-1-基羰基、C_1-4-烷氧羰基、氨基、C_1-4-烷基氨基、二-(C_1-3-烷基)氨基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、吗啉-4-基、哌嗪-1-基、4-(C_1-4烷基)哌嗪-1-基、C_1-4-烷基羰基氨基、C_1-6-烷氧基、C_3-10-环烷氧基、C_5-10-环烯氧基、芳氧基、C_1-4-烷基硫基、C_1-4-烷基亚磺酰基、C_1-4-烷基磺酰基、C_3-10-环烷基硫基、C_3-10环烷基亚磺酰基、C_3-10-环烷基磺酰基、C_5-10-环烯基硫基、C_5-10-环烯基亚磺酰基、C_5-10-环烯基磺酰基、芳基硫基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基、氰基和硝基；

A选自-CO₂H、-CO₂R⁵、-SO₃H；-SO₂HNR⁵；-PO(OR⁵)₂；-CN；-OR⁵；-NHCOR⁵；-CONZ(R⁵)；-CONH(CO)R⁵；-CONHSO₂R⁵；-COHNSO₂R⁵；-CONR⁵CN；和

其中标记为＊的链连接乙烯；

X¹是-OH；

X²是-CH₂OH、-OH、H、OMe和OAc；

X³是-O-；

X⁴是-O-；

X⁵是(-CH₂)_m-；

和/或

m=1，

排除这样的化合物，其中：

·当X³是-O-且至少一个X¹是OH时，X²不是–OH；

·如果R¹、R²、R³和R⁴是H，则当X¹是–OH、X³和X⁴是-O-、X²是-CH₂OH、n是1且X⁵是(-CH₂)_m-时，A不是-CO₂H或-CO₂R⁵，其中m是0；且

·如果R¹、R²或R³选自C_1-6-烷氧基、C_3-10-环烷氧基、C_5-10-环烯氧基、芳氧基和羟基，则R¹、R²或R³不在X⁵的对位上，

这些化合物是预防、控制和/或治疗动物包括人、尤其是哺乳动物包括人的非自身免疫性T2D、肥胖和/或X综合征的特别有效的活性剂。

最优选的化合物是式(I)的那些化合物，其中

A是–COOH；

n=1；

Ar是苯；

R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氰基和硝基，优选氢；

X¹是-OH；

X²是-CH₂OH；

X³是-O-；

X⁴是-O-；

X⁵是(-CH₂)_m-；

和/或

m=1。

本发明还涉及式II的化合物，用作药物：

在一个优选的实施方案中，本发明涉及式II的旋光异构体，即式III的化合物，用作药物：

当涉及式(II)的化合物时，式(III)的异构体是最优选的旋光异构体。优选关注化合物(II)或(III)的Z-型的另外的异构体，然而，E-型也有活性。

本发明的化合物(II)和(III)特别用于治疗T1D、T2D、肥胖和/或X综合征。本发明还涉及包含该化合物的膳食和药物组合物，并且涉及治疗哺乳动物包括人的T1D、T2D、肥胖和/或X综合征的方法，该方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的式II的化合物的步骤。

本发明还涉及式IV的化合物，用作药物：

其中

Ar是芳族或杂芳族单环或稠合双环或三环系统；

n是0、1或2；

X¹独立地选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X²选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X³独立地选自-O-和-CH(X¹)-；

X⁴选自-O-和(-CH₂)_m-；

X⁵=-O-或(-CH₂)_m-；

m是0、1、2或3；

A选自-H、-CH₃、-CO₂H、-CO₂R⁵、-SO₃H；-SO₂HNR⁵；-PO(OH)₂；-CONH(CO)R⁵；-CONH(CO)H、-CONHSO₂R⁵；-CONHCN；和

其中标记为＊的键连接乙烯；且

条件是当X³是-O-时，X²不是-OH；且至少一个X¹是OH。

本发明的发明人已经发现了式(IV)的化合物，其中

Ar是苯；

n=1；

R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、C_1-6-烷基、C_2-6-炔基、C_2-6-烯基、C_3-10-环烷基、C_3-10-环烷基-C_1-3-烷基、C_5-10-环烯基、C_5-10-环烯基-C_1-3-烷基、C_1-4-烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、氨基羰基、C_1-4-烷基氨基羰基、二-(C_1-3-烷基)氨基羰基、吡咯烷-1-基羰基、哌啶-1-基羰基、吗啉-4-基羰基、哌嗪-1-基羰基、4-(C_1-4-烷基)哌嗪-1-基羰基、C_1-4-烷氧羰基、氨基、C_1-4-烷基氨基、二-(C_1-3-烷基)氨基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、吗啉-4-基、哌嗪-1-基、4-(C_1-4烷基)哌嗪-1-基、C_1-4-烷基羰基氨基、C_1-6-烷氧基、C_3-10-环烷氧基、C_5-10-环烯氧基、芳氧基、C_1-4-烷基硫基、C_1-4-烷基亚磺酰基、C_1-4-烷基磺酰基、C_3-10-环烷基硫基、C_3-10环烷基亚磺酰基、C_3-10-环烷基磺酰基、C_5-10-环烯基硫基、C_5-10-环烯基亚磺酰基、C_5-10-环烯基磺酰基、芳基硫基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、羟基、氰基和硝基，

其中标记为＊的键连接乙烯；

X¹是-OH；

X²是-CH₂OH、-OH、H、OMe和OAc；

X³是-O-；

X⁴是-O-；

X⁵是(-CH₂)_m-；

和/或

m=1，

最优选的化合物是式(IV)的那些化合物，其中

A是–COOH；

n=1；

Ar是苯；

X¹是-OH；

X²是-CH₂OH；

X³是-O-；

X⁴是-O-；

X⁵是(-CH₂)_m-；

和/或

m=1。

本发明还涉及式如上述所定义的式I-IV的化合物在如下方面中的应用：

·有助于控制血糖水平，即通过平衡血糖水平有助于身体；有助于保持平衡的血糖水平，特别是在患有糖尿病的人中；通过促进细胞的葡萄糖摄取和通过降低糖水平起辅助作用，由此改善或恢复葡萄糖耐量；降低血糖水平；优化血糖响应；使葡萄糖耐量正常化；即式I的化合物可以是α-糖苷酶抑制剂、高血糖症治疗剂和/或控制剂和降血糖药；和改善T1D；

·减少美味渴望；

·减少食欲；

·保护或改善胰腺β-细胞功能，由此促进健康胰腺功能；即式I的化合物是胰腺β-细胞功能改善剂；

·例如通过辅助恢复/促进胰岛素敏感性治疗或控制胰岛素敏感性；即式I的化合物可以是胰岛素致敏剂；

·延缓、预防或控制非自身免疫性T2D且由此还预防糖尿病伴随的障碍/并发症例如如上所述的一种，即式I的化合物可以是T2D预防剂。

本发明的化合物特别预以预防处于发生这种疾病的高危中的那些个体的非自身免疫性T2D，例如患有前驱糖尿病、葡萄糖耐量降低(IGT)或肥胖的个体。

本发明还涉及药物组合物，其包含至少一种式I-IV的化合物或其生理学可接受的盐与一种或多种惰性载体和/或稀释剂。

本发明还涉及式I-IV的化合物或这种化合物的生理学可接受的盐之一在制备适合于治疗或预防疾病或病症例如糖尿病的药物组合物中的应用。

本发明还涉及至少一种式I-IV的化合物在制备适合于治疗代谢紊乱的药物组合物中的应用。

式I-IV的化合物特别适合于预防或治疗疾病，特别是代谢紊乱或病症，例如T1D和T2D、糖尿病并发症(例如视网膜病、肾病或神经病、糖尿病足、溃疡、大血管病)、代谢性酸中毒或酮病、反应性低血糖症、超高胰岛素血症、葡萄糖代谢紊乱、胰岛素抵抗、代谢综合征、不同起因的血脂异常、动脉粥样硬化和相关疾病、肥胖、高血压、慢性心力衰竭、水肿和高尿酸血症。这些物质也适合于预防β细胞变性，例如细胞凋亡或胰腺β细胞坏死。这些物质还适合于改善或恢复胰腺细胞功能性且还适合于增加胰腺β细胞数量和大小。本发明的化合物还可以用作利尿药或抗高血压药和适合于预防和治疗急性肾衰竭。

特别地，式I-IV的化合物包括其生理学可接受的盐适合于预防或治疗：糖尿病，特别是T1D和T2D；和/或糖尿病并发症。

实现用于治疗或预防的相应的活性所需的剂量通常取决于所给予的化合物、患者、疾病或病症性质和严重性和给药方法和频率，并且由患者的医生决定。就本领域技术人员而言，这特别取决于吸收效率、代谢和排泄速率。另外，肠环境可以影响本发明化合物的吸收和稳定性。为了该目的，可以任选与其他活性物质、与一种或多种惰性常用载体和/或稀释剂一起配制根据本发明制备的式I的化合物，所述的常用载体和/或稀释剂例如是玉米淀粉、乳糖、葡萄糖、微晶纤维素、硬脂酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、酒石酸、水、水/乙醇、水/甘油、水/山梨醇、水/聚乙二醇、丙二醇、鲸蜡基硬脂基醇、羧甲基纤维素或脂肪物质例如硬脂或其适合的混合物，以生产常规的盖仑制剂（galenic preparations），例如素片（plain tablet）或包衣片、胶囊、粉末、溶液、混悬液或栓剂。

式I-IV的化合物或其生理学可接受的盐与另一种活性物质组合的应用可以同时进行或交错进行，但特别地在短时间期限内进行。如果同时给予它们，则将两种活性物质一起给予患者；而如果交错给予它们，则将两种活性物质在小于或等于12小时内依次给予，但特别地在小于或等于6小时期限内。

因此，在另一个方面中，本发明涉及药物组合物，其包含式I-IV的化合物或这种化合物的生理学可接受的盐和至少一种上述作为组合伴侣的活性物质，任选与一种或多种惰性载体和/或稀释剂。

本发明的一个方面是本发明的化合物在治疗(包括预防)通过GPR119介导的疾病和病症中的应用。

本发明的一个方面是本发明的化合物在治疗(包括预防)代谢紊乱或病症例如糖尿病和/或肥胖中的应用。

本发明的一个方面是本发明的化合物在制备用于治疗(包括预防)代谢紊乱或病症例如糖尿病和/或肥胖的药物中的应用。

本发明的一个方面是治疗(包括预防)代谢紊乱或病症例如糖尿病和/或肥胖的方法，包含给予本发明的化合物。

本发明的一个实施方案是以葡萄糖不依赖和依赖性方式增加GLP-1分泌的方法，通过给予GPR119激动剂例如本发明的化合物来进行。

本发明的一个实施方案是减少食物摄取的方法，通过给予GPR119激动剂例如本发明的化合物来进行。

发明详述

术语"膳食组合物"包含任意类型的(强化的)食品、(强化的)(动物)饲料和饮料，也包括临床营养物且还包括膳食补充剂和相应的添加剂：食品添加剂、饮料添加剂、饲料添加剂。还包括功能性食品/饲料，即用维生素或药物强化的食品/饲料，以提供另外的特定保健益处；和营养制品，即具有营养价值的丸剂或其他药物产品。

本发明的膳食组合物还可以包含保护性水胶体(例如树胶、蛋白质、改性淀粉)、粘合剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣衣料、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油、脂肪、蜡、卵磷脂等)、吸收剂、载体、填充剂、共同的化合物（co-compound）、分散剂、湿润剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、味道掩蔽剂、增重剂、胶冻剂（jellyfying agent）、凝胶成形剂、抗氧化剂和抗微生物剂。

本发明的另一个目的是药物组合物，其包含至少一种如所定义的式I-IV的化合物且优选如上所述的情况和常用药用载体。

除药学可接受的载体和至少一种式I-IV的化合物外，本发明的药物组合物还可以包含常用的药用添加剂和佐剂、赋形剂或稀释剂，包括、但不限于水、任意来源的明胶、植物树胶、木质素磺酸盐、滑石粉、糖、淀粉、阿拉伯树胶、植物油、聚亚烷基二醇、矫味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、湿润剂、填充剂等。载体材料可以是适合于口服/胃肠外/可注射给药的有机或无机惰性载体材料。

本发明的膳食和药物组合物可以是任意的盖仑形式，其适合于对动物体包括人体施用，尤其是任意常用于口服施用的形式，例如固体形式，例如食品或饲料(用于它们的添加剂/补充剂)、食品或饲料混合物、强化食品或饲料、片剂、丸剂、颗粒、锭剂、胶囊和泡腾制剂，例如粉末和片剂；或液体形式，例如溶液、乳剂或混悬液，例如为饮料、糊剂和油混悬液。可以将糊剂填充入硬或软壳胶囊，其中胶囊的特征在于例如(鱼、猪、家禽、牛)明胶基质、植物蛋白或木质素磺酸盐。其他应用形式的实例是用于舌下、透皮、胃肠外或可注射施用的形式。膳食和药物组合物可以是控制(延缓)释放制剂形式。此外，已经证实通过使本发明的化合物结合第二种分子，例如一些肽类，稳定性增加，从而延长了活性期限。本发明还包括代谢成更具有活性的本体的前药。

饮料包括无醇和醇饮料以及添加到饮用水和液体食品中的液体制品。无醇饮料是，例如软饮料、运动饮料、果汁、柠檬水、近水饮料（near-water drink）(即具有低卡含量的基于水的饮料)、茶和基于乳品的饮料。液体食品是，例如汤和乳制品。

式I-IV的化合物以及包含它们的植物材料和植物提取物(及其混合物)和包含它们的膳食/药物组合物由此适合于治疗动物，包括人。

因此，本发明涉及治疗动物包括人的T1D和/或非自身免疫性T2D、肥胖和/或X综合征的方法，该方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的如上述所定义的式I的化合物。

在本发明的上下文中的动物可以是哺乳动物，包括人。哺乳动物包括人的优选的实例是灵长类、狗、猫、豚鼠、家兔、野兔、雪貂、马和反刍动物(牛、绵羊和山羊)。

就人而言，式I-IV的化合物的适合的每日剂量可以在0.00003mg/kg体重－60mg/kg体重/天。更优选每日剂量可以为0.0003－6mg/kg体重，优选每日剂量可以为0.0003－3mg/kg体重/天，尤其优选每日剂量可以为0.003－0.3mg/kg体重/天，最优选每日剂量可以为0.015－0.06mg/kg体重/天。

本发明的化合物可以以一种以上形式结晶，特征地称作多晶型物且这种多晶型("多晶型物")属于本发明化合物的范围。多态现象一般可以随温度、压力或它们两者改变而响应，且也可以因结晶过程的变化导致。多晶型物的区别在于不同的物理特征，例如x-射线衍射图案、溶解度和熔点。

本文所述的某些化合物能够作为立体异构体存在，例如通过具有手性碳、亚砜硫或双键，其中化合物可以作为R或S对映体或E或Z异构体存在。本发明的范围包括本发明化合物的所有这种各个异构体、外消旋体、纯化对映体和富含对映体的混合物。

典型地，但绝非完全地，本发明的盐是药学可接受的盐。术语"药学可接受的盐"范围内包括的盐是指本发明化合物的无毒性盐。本发明化合物的盐可以包含酸加成的盐。代表性的盐包括乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、乙二胺四乙酸钙、右旋樟脑磺酸盐（camsylate）、碳酸盐、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐（estolate）、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、对α-羟乙酰氨基苯砷酸盐（glycollylarsanilate）、己基间苯二酚酸盐（hexylresorcinate）、海巴明、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、马来酸一钾、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡萄糖胺、草酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、钾、水杨酸盐、钠、硬脂酸盐、次醋酸盐（subacetate）、琥珀酸盐、硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘、三甲基铵和戊酸盐。非药学可接受的其他盐可以用于制备本发明的化合物且它们应被视为构成本发明的另一个方面。

在本发明范围内包括所述式的化合物的溶剂合物。"溶剂合物"是指溶质(在本发明中是本发明的化合物或其盐或生理学功能衍生物)和溶剂形成的可变化学计算量的复合物。就本发明的目的而言，这种溶剂应不干扰溶质的生物活性。优选所用的溶剂是药学可接受的溶剂，例如水、乙醇和乙酸。

可以使用一般已知的合成方法得到本发明的化合物。优选通过下列在下文中更详细描述的本发明方法得到这些化合物。

优选合成方法的以下描述涉及β-D-吡喃葡糖基和β-D-吡喃半乳糖基构型的终产物。α-D-吡喃葡糖基或α-L-吡喃葡糖基构型(或任意其他吡喃糖或呋喃糖)形式的相应化合物的合成对本领域技术人员而言通过类似方式显而易见，且由此原因，不再提供解释且为清楚起见提供合成路线图。

在如下方案中给出了得到本发明化合物的一般合成途径。

一般合成途径1(RX-2和RX-3)

(Z)-3-乙氧基-1-(2-硝基苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-酸钾(B2).根据Khour和Skibo(J.Org.Chem.2007,72,8636-8647)进行本合成。在氮气气氛中向叔丁醇钾(1.64g,14.58mmol)在10mL干苯的浆中加入草酸二乙酯(2.1g,14.58mmol)。滴加2-硝基甲苯(2g,14.56mmol)在30mL干苯中的溶液，即刻形成红色固体。将该反应混合物在室温再搅拌45min。通过过滤收集红色固体沉淀，用苯洗涤，得到3-(2-硝基苯基)-2-氧代丙酸乙酯的钾盐B2，收率为68%。

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(2-硝基苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C2).在0℃在氮气气氛中在15min期限内将2-硝基苯基丙酮酸乙酯钾盐B2(100mg,0.36mmol)在干DMF(3mL)中的溶液滴加到预先冷却的搅拌的2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖(149mg,0.36mmol)在干DMF(2mL)中的溶液中。使温度逐步升至室温。将反应混合物搅拌15h，用冷却的饱和NaCl水溶液(25mL)使反应停止。用乙酸乙酯(3x30mL)萃取，干燥(MgSO₄)，减压浓缩，通过快速色谱法纯化(SiO₂,己烷-苯-丙酮-甲醇,5:4:5:1)，分离纯的得到的化合物C2，收率为40%。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(2-硝基苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C3).在0℃在氮气气氛中在15min期限内将2-硝基苯基丙酮酸乙酯钾盐B2(100mg,0.36mmol)在干DMF(3mL)中的溶液滴加到预先冷却的搅拌的2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖(149mg,0.36mmol)在干DMF(2mL)中的溶液中。使温度逐步升至室温。将反应混合物搅拌15h，用冷却的饱和NaCl水溶液(25mL)使反应停止。用乙酸乙酯(3x30mL)萃取，干燥(MgSO₄)，减压浓缩，通过快速色谱法纯化(SiO₂,己烷-苯-丙酮-甲醇,5:4:5:1)，分离纯的得到的化合物C3，收率为50%。

步骤3:水解

(Z)-3-(2-硝基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-2).将酯C2(20mg,0.035mmol)溶于THF(0.4mL)，加入到LiOH(8.44mg,0.352mmol)的0.3mL水溶液中。将该反应混合物在室温搅拌3小时。蒸发溶剂，通过使用0.1%TFA的水溶液将反应混合物酸化至pH<5。过滤该溶液，冷冻干燥，得到RX-2，为淡黄色固体，伴随得到三氟乙酸锂，进一步通过制备型HPLC、使用乙腈-水作为洗脱剂纯化，分离产物，为白色固体，冷冻干燥后定量收率:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.22(d,J=7.9Hz,1H),7.90(dd,J=8.2,1.2Hz,1H),7.70–7.56(m,1H),7.52–7.38(m,1H),7.03(s,1H),5.04(d,J=7.4Hz,1H),3.74(dd,J=12.0,2.4Hz,1H),3.63(dd,J=12.0,5.2Hz,1H),3.44–3.34(m,3H),3.21(m,1H)；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇NO₁₀Na⁺:394.0745,测定值394.0755.

(Z)-3-(2-硝基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-3).将酯C3(20mg,0.035mmol)溶于THF(0.4mL)，加入到LiOH(8.44mg,0.352mmol)的0.3mL水溶液中。将该反应混合物在室温搅拌3小时。蒸发溶剂，通过使用0.1%TFA的水溶液将反应混合物酸化至pH<5。过滤该溶液，冷冻干燥，得到化合物RX-3，为淡黄色固体，伴随得到三氟乙酸锂，进一步通过制备型HPLC、使用乙腈-水作为洗脱剂纯化，分离产物，为白色固体，冷冻干燥后定量收率:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.12(d,J=7.8Hz,1H),7.86(d,J=8.1Hz,1H),7.55(t,J=7.6Hz,1H),7.39(t,J=7.8Hz,1H),7.19(s,1H),4.96(d,J=7.7Hz,1H),3.73(d,J=3.0Hz,1H),3.65–3.44(m,3H),3.39(dd,J=9.7,3.3Hz,1H),3.34(t,J=6.1Hz,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ149.85,146.87,133.87,133.83,129.83,129.76,125.01,119.00,103.57,77.10,74.96,72.76,69.93,61.90；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇NO₁₀Na⁺:394.0745,测定值394.075.

RX-4－RX-30的合成

(通过可替代选择的途径合成中间体B18)

(2-氟苯基)丙酮酸乙酯(B4).向Mg粉（Mgturnings）(0.231g,9.51mmol)在乙醚(1.5mL)中的混悬液中加入2-氟苄基氯(1.25g,8.65mmol)在乙醚(9mL)中的溶液，滴加到回流的反应混合物中。将该化合物搅拌10min，冷却至室温，在0°C滴加到草酸二乙酯(2.53g,17.29mmol)在乙醚(17mL)中的溶液中。将该反应混合物在室温搅拌2小时，用1M盐酸水溶液使反应停止，用乙醚萃取。用盐水洗涤合并的萃取物，用硫酸镁干燥，减压浓缩。通过在室温短程蒸馏（bulb to bulbdistillation）除去过量的草酸二乙酯，通过快速色谱法纯化残余物(SiO₂,15-20%乙酸乙酯于石油醚中)，得到相应的化合物B4，为无色油状物，收率为70%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(2-氟苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C4).根据Marais等人(J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1,1996,2915-2918)进行反应:在0℃在无水条件下和氮气气氛中将在干DMF(3.3mL)中的3-(2-氟苯基)-2-氧代丙酸乙酯B4(100mg,0.476mmol)逐滴转入(在15min期限内)剧烈搅拌的氢化钠(13mg,0.523mmol)在DMF(3.0mL)中的混悬液中。将该混合物在0℃再搅拌1h，在0℃滴加到剧烈搅拌的2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(196mg,0.476mmol)在干DMF(3mL)中的溶液中。使温度升至室温，持续搅拌15h，用冷却的饱和NaCl水溶液(10mL)使反应停止。用乙酸乙酯(3x25mL)萃取，干燥(MgSO₄)，减压浓缩，通过快速色谱法纯化(SiO₂,己烷-苯-丙酮-甲醇,5:4:5:1)，分离得到的化合物伴随烯糖（glycal）杂质，进一步通过制备型HPLC纯化，分离纯的得到的化合物C4，为白色固体形式，收率为22%。

(Z)-3-(2-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-4).将酯C4(20mg,0.037mmol)溶于THF(0.4mL)，加入LiOH·H₂O(8.86mg,0.37mmol)的水(0.3mL)溶液。将该反应混合物在室温搅拌1小时，然后用Dowex50-X8树脂酸化至pH<3，过滤，浓缩，通过制备型HPLC、使用乙腈-水作为洗脱剂纯化残余物。冷冻干燥后，分离终产物，收率为87%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.31(t,J=7.1Hz,1H),7.24(dd,J=13.6,5.8Hz,1H),7.14(s,1H),7.07(t,J=7.6Hz,1H),7.03–6.96(m,1H),5.17(d,J=7.4Hz,1H),3.66(dd,J=12.0,2.2Hz,1H),3.52(dd,J=12.0,5.2Hz,1H),3.41–3.23(m,3H),3.17–3.11(m,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.72,161.83(d,¹J_C,F=249.7Hz),144.28,132.66,131.71,125.15,122.48,115.93(d,1C),115.78(d,1C),,102.66,78.59,78.07,75.64,71.35,62.50；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇FO₈Na⁺:367.0800,测定值367.0800.

(3-氟苯基)丙酮酸乙酯(B5).如对B4所述，使用3-氟苄基溴(1.250g,8.64mmol)、镁(0.231g,9.51mmol)和草酸二乙酯(2.52g,17.30mmol)制备标题化合物，为无色油状物形式，收率为80%，即刻用于下一步。

C5

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C5).如对C4所述，通过使用3-(3-氟苯基)-2-氧代丙酸乙酯B5(100mg,0.476mmol)、氢化钠(13mg,0.523mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(196mg,0.476mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为79%。

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-5).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为85%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.66(d,J=10.9Hz,1H),7.47(d,J=7.8Hz,1H),7.23(m,1H),6.92(m,1H),6.87(s,1H),5.05(d,J=7.8Hz,1H),3.79–3.68(m,2H),3.56(m,2H),3.47–3.36(m,2H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ167.75,164.06(d,¹J_C,F=243.1Hz),137.21(d,³J_C,F=8.6Hz),130.79(d,³J_C,F=8.3Hz),127.62,127.59,123.12,117.71(d,²J_C,F=23.0Hz),116.29(d,²J_C,F=21.6Hz),103.66,77.27,75.15,72.99,70.03,61.99；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇FO₈Na⁺:367.0800,测定值367.0796.

苯基丙酮酸乙酯(B6).如对B4所述，使用苄基溴(1.250g,7.31mmol)、镁(0.195g,8.04mmol)和草酸二乙酯(2.136g,14.62mmol)制备标题化合物，为无色油状物形式，收率为80%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-3-氧代-1-苯基丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C6).如对C4所述，使用(3-(苯基)-2-氧代丙酸乙酯B6(100mg,0.520mmol)、氢化钠(13.73mg,0.572mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(214mg,0.520mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为37%。

(Z)-3-苯基-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-6).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为92%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄)δ7.86(d,J=7.3Hz,2H),7.30(t,J=7.4Hz,2H),7.23(m,1H),6.81(s,1H),4.97(d,J=7.6Hz,1H),3.90–3.81(m,2H),3.72–3.62(m,2H),3.58-3.48(m,2H)；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₈ClO₈Na⁺:348.0821,测定值348.0812.

(4-氯苯基)丙酮酸乙酯(B7).如对B4所述，使用4-氯苄基氯(1.250g,7.76mmol)、镁(0.208g,8.54mmol)和草酸二乙酯(2.269g,15.53mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为74%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(4-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C7).如对C4所述，使用3-(4-氯苯基)-2-氧代丙酸乙酯B7(100mg,0.441mmol)、氢化钠(11.65mg,0.485mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(181mg,0.441mmol)制备。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为66%。

(Z)-3-(4-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-7).如对(RX-4)所述制备该化合物，为白色固体形式，收率为93%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.74(d,J=8.6Hz,2H),7.17(d,J=8.6Hz,2H),6.64(s,1H),4.88(d,J=7.8Hz,1H),3.78–3.66(m,2H),3.57(m,2H),3.41(m,2H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ171.46,150.37,134.73,134.15,132.59(2C),129.13(2C),118.94,104.39,77.36,75.63,73.17,70.13,62.15；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇ClO₈Na⁺:383.0505,测定值383.0515.

(2-溴苯基)丙酮酸乙酯(B8).如对(B4)所述，使用2-溴苄基溴(1.250g,5.00mmol)、镁(0.134g,5.50mmol)和草酸二乙酯(1.462g,10.00mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为80%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-溴苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C8).如对C4所述，使用3-(2-溴苯基)-2-氧代丙酸乙酯B8(100mg,0.369mmol)、氢化钠(9.74mg,0.406mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(152mg,0.369mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为17%。

(Z)-3-(2-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-8).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为88%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.21(d,J=7.8Hz,1H),7.51(d,J=8.0Hz,1H),7.33–7.21(m,2H),7.10(t,J=8.4Hz,1H),5.13(d,J=7.4Hz,1H),3.67(dd,J=12.0,2.2Hz,1H),3.54(dd,J=12.0,5.1Hz,1H),3.32–3.23(m,3H),3.12(m,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.77,144.20,134.41,133.66,133.26,131.14,128.38,125.54,123.23,102.58,78.52,77.99,75.51,71.29,62.45；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇BrO₈Na⁺:427.0000,测定值427.0002.

(3-甲氧基苯基)丙酮酸乙酯(B9).如对B4所述，使用3-甲氧基苄基溴(1.5g,7.46mmol)、镁(0.199g,8.21mmol)和草酸二乙酯(2.18g,14.92mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为74%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(3-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C9).如对C4所述，使用3-(3-甲氧基苯基)-2-氧代丙酸乙酯B9(100mg,0.369mmol)、氢化钠(11.88mg,0.495mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(185mg,0.450mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为62%。

(Z)-3-(3-甲氧基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-9).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为94%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.73(s,1H),7.30–7.17(m,2H),7.05(s,1H),6.86(dd,J=7.1,2.3Hz,1H),5.14(d,J=7.7Hz,1H),3.89–3.80(m,5H),3.66(ddd,J=25.2,11.2,6.2Hz,2H),3.54(dd,J=9.6,3.4Hz,1H),3.48(t,J=6.0Hz,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ167.38,160.97,142.92,135.86,130.10,126.16,124.56,117.14,115.56,103.57,77.19,75.01,73.09,70.00,62.08,55.98；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₆H₂₀O₉Na⁺:379.1107,测定值379.1010.

(3-三氟甲基苯基)丙酮酸乙酯(B10).如对B4所述，使用3-三氟甲基苄基溴(2.5g,10.46mmol)、镁(0.280g,11.50mmol)和草酸二乙酯(3.06g,20.92mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为78%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-3-氧代-1-(3(三氟甲基)苯基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C10).如对C4所述，使用3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代丙酸乙酯B10(100mg,0.384mmol)、氢化钠(10.14mg,0.544mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(158mg,0.384mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为22%。

(Z)-3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-10).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为96%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.16–7.99(m,2H),7.46(m,2H),7.00(s,1H),5.10(d,J=7.7Hz,1H),3.79–3.69(m,2H),3.55(m,2H),3.47–3.37(m,2H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.82,144.41,135.74,135.03,131.85,131.53,130.09,128.11,126.14,123.80,103.55,77.20,75.01,72.94,69.97,61.97；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₆H₁₇F₃O₈Na⁺:417.0768,测定值417.0767.

(2-氯苯基)丙酮酸乙酯(B11).如对B4所述，使用2-氯苄基氯(1.250g,7.76mmol)、镁(0.208g,8.54mmol)、草酸二乙酯(2.269g,15.53mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为74%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C11).如对C4所述，使用3-(2-氯苯基)-2-氧代丙酸乙酯B11(100mg,0.441mmol)、氢化钠(11.65mg,0.485mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(181mg,0.441mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为16%。

(Z)-3-(2-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-11).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为88%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.26(d,J=9.1Hz,1H),7.31(m,2H),7.26–7.12(m,2H),5.15(d,J=7.0Hz,1H),3.67(d,J=12.0Hz,1H),3.54(dd,J=12.0,5.1Hz,1H),3.35–3.23(m,3H),3.13(m,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.76,144.33,135.08,133.11,132.60,130.99,130.31,127.83,120.38,102.58,78.54,78.00,75.54,71.29,62.45；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇ClO₈Na⁺:383.0505,测定值383.0490.

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(4-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C12).如对C4所述，使用3-(4-氯苯基)-2-氧代丙酸乙酯B7(100mg,0.441mmol)、氢化钠(11.65mg,0.485mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(181mg,0.441mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为22%。

(Z)-3-(4-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-12).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为84%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄)δ7.76(d,J=8.6Hz,2H),7.25(d,J=8.6Hz,2H),6.92(s,1H),5.12(d,J=7.5Hz,1H),3.66(dd,J=12.0,2.2Hz,1H),3.52(dd,J=12.0,5.2Hz,1H),3.33(ddd,J=28.5,18.0,8.6Hz,3H),3.17–3.10(m,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.98,143.40,135.62,133.48,133.10(2C),129.47(2C),124.26,102.87,78.58,78.09,75.65,71.32,62.50；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇ClO₈Na⁺:383.0505,测定值383.0506.

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(2-氟苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C13).如对(C4)所述，通过使用3-(2-氟苯基)-2-氧代丙酸乙酯B4(100mg,0.476mmol)、氢化钠(13mg,0.523mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(196mg,0.476mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为79%.

(Z)-3-(2-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-13).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为96%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.36(td,J=7.8,1.6Hz,1H),7.23(ddd,J=15.4,5.4,1.7Hz,1H),7.14(s,1H),7.07(t,J=7.7Hz,1H),6.98(ddd,J=10.7,8.3,1.1Hz,1H),5.09(d,J=7.7Hz,1H),3.76(dd,J=3.4,0.8Hz,1H),3.70(dd,J=9.7,7.7Hz,1H),3.55(ddd,J=26.3,11.2,6.2Hz,2H),3.43(dd,J=9.7,3.4Hz,1H),3.39(td,J=6.2,1.0Hz,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ169.41,164.35(d,¹J_C,F=249.6Hz),146.85,135.46,134.20,127.77,124.99,118.45(d,1C),118.37(d,1C),105.94,79.73,77.48,75.47,72.53,64.48；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇FO₈Na⁺:367.0800,测定值367.0809.

(3-苯基苯基)丙酮酸乙酯(B12).如对B4所述，使用3-苯基苄基溴(1.250g,5.06mmol)、镁(0.135g,5.56mmol)和草酸二乙酯(1.478g,10.12mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为无色油状物形式，收率为80%，即刻用于下一步。

三乙酸(2R,3S,4R,5R,6S)-2-(((Z)-1-([1,1'-联苯]-3-基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C14).如对C4所述，使用3-(3-芳基苯基)-2-氧代丙酸甲酯B12(100mg,0.373mmol)、氢化钠(9.0mg,0.373mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(153mg,0.373mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为26%。

(Z)-3-([1,1'-联苯]-3-基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-14).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为98%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.24(t,J=1.7Hz,1H),7.70–7.58(m,3H),7.53–7.47(m,1H),7.38–7.29(m,3H),7.26–7.19(m,1H),7.06(s,1H),5.05(d,J=7.8Hz,1H),3.78(m,2H),3.56(ddd,J=32.3,11.2,6.1Hz,2H),3.46(dd,J=9.7,3.4Hz,1H),3.41(td,J=6.1,0.9Hz,1H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ167.41,143.18,142.36,141.97,135.12,130.78,130.17,129.94(2C),129.81,128.52,128.41,128.17(2C),126.29,103.89,77.23,75.06,73.08,69.99,62.09；ESI-HRMS m/z:计算值C₂₁H₂₂O⁸Na⁺:425.1207,测定值425.1216.

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-甲氧基-3-氧代-1-(噻吩-2-基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C15).如对C4所述，使用2-氧代-3-(噻吩-2-基)丙酸甲酯B13(Otava,100mg,0.543mmol)、氢化钠(13.03mg,0.373mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(223mg,0.543mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为23%。

(Z)-3-(噻吩-2-基)-2-(((2R，3S，4R，5S，6S)-3，4，5-三羟甲基-６-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-15).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为棕色固体，收率为98%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.40(d,J=5.1Hz,1H),7.28(d,J=4.1Hz,1H),7.21(s,1H),6.94(dd,J=5.1,3.7Hz,1H),5.21(d,J=7.8Hz,1H),3.86(dd,J=9.6,7.8Hz,1H),3.77(d,J=3.0Hz,1H),3.55(m,2H),3.45(dd,J=9.7,3.4Hz,1H),3.40(t,J=6.1Hz,1H)；¹³C NMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.82,140.45,137.54,131.89,130.34,127.58,120.02,102.99,77.18,75.13,73.06,70.12,62.08；ESI-HRMS m/z:计算值C₁₃H₁₆O₈SNa⁺:355.0459,测定值355.0469.

三乙酸(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-氯-6-氟苯基)-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H吡喃-3，4，5-三酯(C16).如对C4所述，使用2-氧代-3-(2-氯-6-氟苯基)丙酸甲酯B14 (Otava, 100mg, 0.434 mmol)、氢化钠(10.41 mg, 0.434 mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(178 mg, 0.434 mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为26%。

(Z)-3-(2-氯-6-氟苯基)-2-(((2R，3S，4R，5S，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-16).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为棕色固体，定量收率:¹H NMR (400 MHz,MeOH-d₄)δ7.22(m,2H),6.99(t,J=8.7Hz,1H),6.92(s,1H),4.52(d,J=7.4Hz,1H),3.67(d,J=2.5Hz,1H),3.45(m,2H),3.33–3.24(m,2H),3.11(m,1H)；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₆ClFO₈Na⁺:401.0410,测定值401.0409.

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C17).如对C4所述，使用3-(3-氟苯基)-2-氧代丙酸乙酯B5(100mg,0.476mmol)、氢化钠(13mg,0.523mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(196mg,0.476mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为19%。

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3，4，5，-三羟基-6-(羟甲基）四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-17).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为92%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.69–7.60(m,1H),7.45(d,J=7.8Hz,1H),7.25(m,1H),6.96(ddd,J=8.4,2.6,0.8Hz,1H),6.92(s,1H),5.17(d,J=7.6Hz,1H),3.68(dd,J=12.0,2.3Hz,1H),3.52(dd,J=12.0,5.4Hz,1H),3.32(m,3H),3.15(m,1H)；¹³C NMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.78,164.04(d,¹J_C,F=243.2Hz),143.86,137.04(d,³J_C,F=8.5Hz),130.90(d,³J_C,F=8.4Hz),127.66,127.63,124.04,117.69(d,²J_C,F=23.0Hz),116.56(d,²J_C,F=21.7Hz),102.68,78.63,78.11,75.69,71.45,62.61；ESI-HRMS m/z:计算值C₁₅H₁₇FO₈Na⁺:367.0800,测定值367.0800.

(3-甲基苯基)丙酮酸乙酯(B15).如对B4所述，使用3-甲基苄基溴(1.250g，6.75mmol)、镁(0.181g，7.43mmol)和草酸二乙酯(1.974g，13.51mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为无色油状物形式，收率为72%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-3-氧代-1-(间-甲苯基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C18).如对C4所述，使用3-(3-甲基苯基)-2-氧代丙酸乙酯B15(100mg,0.485mmol)、氢化钠(11.64mg,0.485mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(199mg,0.485mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为25%。

(Z)-3-(间-甲苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-18).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为96%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.64(s,1H),7.58(d,J=7.7Hz,1H),7.13(t,J=7.7Hz,1H),7.03(d,J=7.6Hz,1H),6.94(s,1H),4.97(d,J=7.7Hz,1H),3.82–3.69(m,2H),3.61–3.49(m,2H),3.47–3.33(m,2H),2.24(s,3H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ167.69,142.77,139.05,134.43,132.40,130.83,129.23,129.00,126.37,103.76,77.11,75.02,73.02,70.04,61.99,21.40；ESI-HRMS m/z:计算值C₁₆H₂₀O₈Na⁺:363.1051,测定值363.1055.

三乙酸(2S，3S，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-3-氧代-1-(间-甲苯基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3，4，5-三酯(C19).如对C4所述，使用3-(3-甲基苯基)-2-氧代丙酸乙酯B18(100mg,0.485mmol)、氢化钠(11.64mg,0.485mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(199mg,0.485mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为19%。

(Z)-3-(间-甲苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-19).如对(RX-4)所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，定量收率:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.60(s,1H),7.57(d,J=7.8Hz,1H),7.14(t,J=7.7Hz,1H),7.04(d,J=7.6Hz,1H),6.94(s,1H),5.08(d,J=7.7Hz,1H),3.66(dd,J=12.0,2.3Hz,1H),3.51(dd,J=12.0,5.3Hz,1H),3.45–3.23(m,3H),3.16–3.09(m,1H),2.24(s,3H)；¹³CNMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.64,141.90,138.26,133.76,131.51,130.02,128.46,128.08,125.43,102.13,77.71,77.30,74.92,70.62,61.82,20.64；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₆H₂₀O₈Na⁺:363.1051,测定值363.1044.

三乙酸(2S，3S，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-3-氧代-1-(3-(三氟甲基)苯基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3，4，5-三酯(C20).如对C4所述，使用3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代丙酸乙酯B10(100mg,0.384mmol)、氢化钠(10.14mg,0.544mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(158mg,0.384mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为22%。

(Z)-3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-20).如何RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为82%:¹HNMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.22(s,1H),7.93(d,J=7.7Hz,1H),7.48(m,2H),7.03(s,1H),5.22(d,J=7.4Hz,1H),3.70(dd,J=12.0,2.2Hz,1H),3.50(dd,J=12.0,5.5Hz,1H),3.44–3.31(m,2H),3.28–3.15(m,2H)；¹³C NMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.56,144.23,135.80,134.97,131.79,131.47,130.09,128.00,126.16,123.97,102.69,78.66,78.01,75.72,71.59,62.75；ESI-HRMS m/z:计算值C₁₆H₁₇F₃O₈Na⁺:417.0768,测定值417.0757.

三乙酸(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-氯苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3，4，5-三酯(C21).如对C4所述，使用3-(2-氯苯基)-2-氧代丙酸乙酯B11(100mg,0.441mmol)、氢化钠(11.65mg,0.485mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(181mg,0.441mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为36%。

(Z)-3-(2-氯苯基)-2-(((2R，3S，4R，5S，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-21).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为89%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.31(m,1H),7.39–7.26(m,2H),7.24–7.13(m,2H),5.07(d,J=7.7Hz,1H),3.76(d,J=4.2Hz,1H),3.65(dd,J=9.7,7.7Hz,1H),3.62–3.50(m,2H),3.44–3.36(m,2H)；¹³C NMR(101MHz,MeOH-d₄):δ166.99,144.50,135.13,133.42,132.62,131.03,130.29,127.98,120.52,103.40,77.26,74.98,72.94,70.07,62.02；ESI-HRMSm/z:计算值C₁₅H₁₇ClO₈Na⁺:383.0505,测定值383.0495.

三乙酸(2S，3S，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-（3-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3，4，5-三酯(C22).如对C4所述，使用3-(3-甲氧基苯基)-2-氧代丙酸乙酯B9(100mg,0.369mmol)、氢化钠(11.88mg,0.495mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(185mg,0.450mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为22%。

(Z)-3-(3-甲氧基苯基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-22).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为84%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ7.58–7.53(m,1H),7.24–7.11(m,2H),6.94(s,1H),6.79(ddd,J=7.4,2.5,1.9Hz,1H),5.14(d,J=7.6Hz,1H),3.72(s,3H),3.67(dd,J=12.0,2.4Hz,1H),3.52(dd,J=12.0,5.3Hz,1H),3.43–3.23(m,3H),3.14(m,1H)；¹³C NMR(101MHz,MeOH-d₄):δ167.18,160.95,142.87,135.93,130.17,125.92,124.47,116.70,115.89,102.78,78.57,78.10,75.82,71.46,62.57,55.84；ESI-HRMS m/z:计算值C₁₆H₂₀O₉Na⁺:379.1000,测定值379.1007.

三乙酸(2R，3S，4R，5S，6S)-2-(((Z)-1-([1，1′-联苯]-3-基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3，4，5，-三酯(C23).如对C4所述，使用3-(3-芳基苯基)-2-氧代丙酸乙酯(B14)(100mg,0.373mmol)、氢化钠(9.0mg,0.373mmol)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(153mg,0.373mmol)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为16%。

(Z)-3-([1，1′-联苯]-3-基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-23).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为91%:¹H NMR(400MHz,MeOH-d₄):δ8.27(s,1H),7.75(d,J=7.7Hz,1H),7.70–7.64(m,2H),7.58(d,J=8.4Hz,1H),7.44(m,3H),7.33(m,1H),7.13(s,1H),5.25(d,J=7.6Hz,1H),3.77(dd,J=12.0,2.3Hz,1H),3.60(dd,J=12.0,5.5Hz,1H),3.55–3.33(m,3H),3.29–3.22(m,1H)；ESI-HRMS m/z:计算值C₂₁H₂₂O₈Na⁺:425.1207,测定值425.1205.

(2-溴苯基)丙酮酸乙酯(B16).如对B4所述，使用3-溴苄基溴(1.250g，5.00mmol)，镁(0.134g，5.50mmol)和草酸二乙酯(1.462g，10.00mmol)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为80%，即刻用于下一步。

三乙酸(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(3-溴苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C24).如对C4所述，使用3-(3-溴苯基)-2-氧代丙酸乙酯B16(100mg,0.369mmol)、氢化钠(9.74mg,0.406mmol)和2,3,4,6四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(152mg，0.369mmol)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为24％。

(Z)-3-(3-溴苯基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3，4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-24).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，定量收率：¹H NMR(400MHz，MeoH-d₄)：δ8.03(t，J＝1.8Hz，1H)，7.66(d，J＝7.8Hz，1H)，7.34(m，1H)，7.16(t，J＝7.9Hz，1H)，6.83(s，1H)，5.13(d，J＝7.5Hz，1H)，3.69(dd，J＝12.0，2.3Hz，1H)，3.53(dd，J＝12.0，5.5Hz，1H)，3.41-3.22(m，3H)，3.16(m，1H)；¹³C NMR(101MHz，MeoH-d₄)：δ167.62，145.44，137.31，133.97，132.36，130.97，130.17，123.19，122.68，102.89，78.66，78.17，75.73，71.49，62.75；ESI-HRMSm/z：计算值C₁₅H₁₇Br0₈Na⁺：427.0000，测定值427.0011.

(3-氟苯基)丙酮酸乙酯(B17).如对B4所述，使用3-溴苄基溴(1.250g，5.00mmo1)、镁(0.134g，5.50mmo1)和草酸二乙酯(1.462g，10.00mmo1)制备标题化合物。分离产物，为无色油状物形式，收率为80％，即刻用于下一步。

三乙酸(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-乙氧基-1-(3-氟苯基)-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3，4，5-三酯(C25).如对C4所述，使用3-(3-溴苯基)-2-氧代丙酸乙酯B17(100mg，0.369mmo1)、氢化钠(9.74mg，0.406mmo1)和2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(152mg，0.369mmo1)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为24％。

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-25).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为98％：¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)δ7.98(t，J＝1.7Hz，1H)，7.75(d，J＝7.9Hz，1H)，7.39-7.33(m，1H)，7.16(t，J＝7.9Hz，1H)，6.89(s，1H)，5.06(d，J＝7.7Hz，1H)，3.81-3.69(m，2H)，3.57(ddd，J＝29.4，11.2，6.2Hz，2H)，3.41(m，2H)；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₅H₁₇BrO₈Na⁺：427.0000，测定值427.8897.

三乙酸(2S,3R,4R,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-溴苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(C26).如对C4所述，使用3-(2-溴苯基)-2-氧代丙酸乙酯B8(100mg，0.369mmo1)、氢化钠(9.74mg，0.406mmo1)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(152mg，0.369mmo1)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为24％。

(Z)-3-(2-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-26).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，定量收率：¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)δ8.26(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.50(dd，J＝8.1，1.2Hz，1H)，7.29-7.21(m，2H)，7.13-7.06(m，1H)，5.05(d，J＝7.7Hz，1H)，3.76(d，J＝2.6Hz，1H)，3.67-3.49(m，3H)，3.39(m，2H)；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₅H₁₇Br0₈Na⁺：427.0000，测定值427.0012.

三乙酸(2S，3S，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-3-甲氧基-3-氧代-1-(噻吩-2-基)丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4，5-三酯(C27).如对C4所述，使用2-氧代-3-(噻吩-2-基)丙酸甲酯B15(Otava，100mg，0.543mmo1)、氢化钠(13.03mg，0.373mmo1)和2,3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(223mg，0.543mmo1)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为18％。

(Z)-3-(噻吩-2-基)-2-(((2R，3S，4R，5R，6S)-3,4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-27).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为棕色固体，收率为84％：¹H NMR(400MHz，MeoH-d₄)δ7.42(dd，J＝4.3，0.9Hz，1H)，7.29-7.22(m，2H)，6.95(dd，J＝5.1，3.8Hz，1H)，5.31(d，J＝7.8Hz，1H)，3.67(dd，J＝12.1，2.3Hz，1H)，3.53(ddd，J＝26.3，10.6，6.7Hz，2H)，3.36-3.23(m，2H)，3.18-3.12(m，1H)；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₃H₁₆0₈SNa⁺：355.0459，测定值355.0443.

三乙酸(2S，3S，4R,5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(2-氯-6-氟苯基)-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4，5-三酯(C28).如对C4所述，使用3-(2-氯-6-氟苯基)-2-氧代丙酸甲酯B16(100mg，0.434mmo1)、氢化钠(10.41mg，0.434mmo1)和2,3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(178mg，0.434mmo1)制备标题化合物。分离化合物，为白色固体形式，收率为8％。

(Z)-3-(2-氯-6-氟苯基)-2-(((2R，3S，4R,5R,6S)-3,4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-28).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为94％：¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ7.28-7.15(m，2H)，7.01(t，J＝8.2Hz，1H)，6.88(s，1H)，4.67(d，J＝6.7Hz，1H)，3.47(qd，J＝11.9，3.6Hz，2H)，3.19-3.11(m，3H)，2.89-2.81(m，1H)；¹³C NMR(101MHz，MeOH-d₄)：δ165.61，δ160.88(d，¹J_C，F＝251.8Hz)，145.81，134.89(d，³J_C，F＝5.0Hz)，130.59(d，³J_C，F J＝9.5Hz)，125.13(d，³J_C，F＝3.5Hz)，121.77(d，²J_C，F ＝19.6Hz)，115.22，1114.58(d，²J_C.F ＝22.7Hz，102.59，77.22，76.96，74.41，70.18，61.47；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₅H₁₆CIF0₈Na⁺：401.0410，测定值401.0407.

中间体(4-溴苯基)丙酮酸甲酯(B18)的合成

通过对应于Busca等人(Org.Bioorg.Chem.2004，2，2684-2691)所述的一种方法的途径进行合成。

4-(4-溴亚苄基)-2-甲基噁唑-5(4H)-酮.将4-溴苯甲醛(2.88g，35.10mmo1)、N-乙酰基-甘氨酸(3.80g，32.40mmol)和乙酸钠(2.88g，35.1mmol)在乙酐(13.79g，135mmol)中的混合物回流1h，同时持续搅拌。冷却后，用冰使反应停止，在冰浴中剧烈搅拌1h，以使其沉淀。过滤，得到化合物，收率为64％。

3-(4-溴苯基)-2-羟基丙烯酸.将4-(4-溴亚苄基)-2-甲基噁唑-5(4H)-酮(1.00g，3.76mmol)在3M盐酸水溶液(3mL，9.00mmol)中的混悬液回流搅拌3h。将该反应混合物冷却至室温，以便结晶。过滤，得到标题化合物，收率为72％。

(4-溴苯基)丙酮酸甲酯(B18).在0℃向3-(4-溴苯基)-2-氧代丙酸(70.0mg，0.288mmol)在DMF(2mL)中的溶液中加入DBU(72.2mg，0.288mmo1)和碘甲烷(204mg，1.440mmo1)。将该反应混合物在相同温度搅拌2.5小时。用1M HCl酸化该反应体系，用乙醚(3x 25mL)萃取，干燥(MgSO₄)，减压浓缩，真空干燥，得到淡棕色油状化合物B18，收率为68％，照此用作下一步。

三乙酸(2S，3S，4R,5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(4-溴苯基)-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4，5-三酯(C29).如对C4所述，使用3-(4-溴苯基)-2-氧代丙酸甲酯B18(100mg，0.389mmo1)、氢化钠(10.27mg，0.428mmo1)和2,3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-葡萄糖溴化物(160mg，0.389mmo1)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为34％。

RX29

(Z)-3-(4-溴苯基)-2-(((2R，3S，4R,5R,6S)-3,4，5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-29).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为94％：¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)δ7.69(d，J＝8.5Hz，2H)，7.41(d，J＝8.6Hz，2H)，6.91(s，1H)，5.12(d，J＝7.5Hz，1H)，3.66(dd，J＝12.0，2.3Hz，1H)，3.52(dd，J＝12.0，5.2Hz，1H)，3.32(m，3H)，3.17-3.11(m，1H)；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₅H₁₇Br0₈N_a ⁺：427.0000，测定值427.0016.

三乙酸(2S，3R，4R,5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((Z)-1-(4-溴苯基)-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-2-基)氧基)四氢-2H-吡喃-3,4，5-三酯(C30).如对C4所述，使用3-(4-溴苯基)-2-氧代丙酸甲酯B18(100mg，0.389mmo1)、氢化钠(10.27mg，0.428mmo1)和2,3,4,6-四-O-乙酰基-α-D-半乳糖溴化物(160mg，0.389mm01)制备标题化合物。分离得到的化合物，为白色固体形式，收率为11％。

(Z)-3-(4-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-30).如对RX-4所述制备标题化合物，得到产物，为白色固体，收率为96％：¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)δ7.71(d，J＝8.6Hz，2H)，7.39(d，J＝8.6Hz，2H)，6.90(s，1H)，5.03(d，J＝7.7Hz，1H)，3.78-3.67(m，2H)，3.55(ddd，J＝28.8，11.2，6.2Hz，2H)，3.46-3.36(m，2H)；ESI-HRMS m／z：计算值C₁₅H₁₇Br0₈Na⁺：427.0000，测定值427.0017.

通过下列实施例进一步示例本发明。

实施例1

3-苯基-2-(3，4，5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基氧基)-丙烯酸 (RX1)

通过溶剂萃取、然后是SPE和半制备型HPLC从批量路易波士(rooibos)(红灌木，Aspalathuslinearis)分离苯基丙酮酸的烯醇糖苷(本文的RX1)。或者，如Marais等人所述分离该化合物(TetrahedronLetters，1996)。

如图1中所示，RX1能够降低猴子的血糖持续延长的时间期限。图1显示在单剂量RX1(在约70.5ug／6.78kg动物＝10.4ug／kg BW下测试)后6h内糖尿病灵长类M1081的血糖水平降低(基线葡萄糖6.3mmol／L)。

实施例2

未治疗和RX-1治疗的前驱糖尿病猴子的葡萄糖刺激的胰岛素分泌率AUC值

用10ug/kg RX-1每日3次与膳食一起治疗前驱糖尿病丝绒猴(禁食血糖水平在4.0－5.5mM)7天。在1.75g/kg口服葡萄糖刺激后0、5、10、15、30、60、90、120和180分钟时采集血样。计算的AUC值是指在0–120min时间间隔内平均的葡萄糖刺激的胰岛素分泌值。每组使用4只猴子(治疗组，RX1-治疗)。如从图2中所见，RX-1治疗将胰岛素分泌降低了46%，同时得到了更好的血糖控制。

实施例3

转化的3T3–L1脂肪细胞中的葡萄糖摄取

使用补充有胰岛素、地塞米松和异丁基甲基黄嘌呤的改进的DMEM分化培养基转化3T3-L1细胞，培养3天。然后在补充有10%FCS的改进的DMEM中将转化的3T3-L1脂肪细胞培养另外5天，然后接触胰岛素、二甲双胍和本发明的化合物(参见表1)。5天处理后使用比色葡萄糖氧化酶法(Biovision Inc,USA)测定三(3)小时期限内的葡萄糖摄取量。

表1显示用相关提取物进行两(2)天预致敏后3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取数据，然后使用包含8mM葡萄糖的培养基进行三(3)小时葡萄糖摄取测定。葡萄糖浓度栏表示接触三(3)小时细胞后培养基中剩余的葡萄糖浓度。葡萄糖摄取栏表示3小时接触后从培养基中的葡萄糖摄取量。SD表示标准偏差。根据相关溶剂媒介物计算的百分比增加和P=值分别反映在最后的两栏中。

3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取试验显示3-苯基-2-(3,4,5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基氧基)-丙烯酸(RX-1)、三乙酸(2R,3R,4S,5R,6S)-2-(乙酰氧基甲基)-6-((Z)-3-甲氧基-3-氧代-1-苯基丙-1-烯-2-基氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三酯(RX-1-三乙酸酯)和3-苯基-2-((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基氧基)丙烯酸(Z)-甲酯(RX-1丙烯酸酯)在3小时培养期限内显著增加了葡萄糖摄取量。

表1

3T3-L1脂肪细胞：葡萄糖摄取数据

实施例4

Rx-1在肥胖、胰岛素抵抗的Wistar大鼠中的降糖特性分析

本研究的目的在于确定Rx-1的降糖特性是否与参与葡萄糖摄取、胰岛素信号传导、脂肪酸氧化、细胞因子信号传导和肝和肌肉中的胰高血糖素受体的基因表达和参与胰高血糖素加工的基因表达、胰岛素表达和对胰腺中β-细胞发育重要的转录因子相关。

方法和结果

给3周龄雄性大鼠饲喂高脂肪膳食24周以诱导肥胖和胰岛素抵抗。此后，每日用0.3mg/kg Rx-1治疗大鼠2周，然后每日用3mg/kgRx-1治疗7天。在治疗前、用0.3mg/kg Rx-1治疗2周后和再次用3mg/kg Rx-1治疗7天后测定禁食葡萄糖浓度。用3mg/kg Rx-1治疗后，处死大鼠，取出肝、肌肉和胰腺活检组织。定量实时PCR用于测定肝和肌肉样品中12种基因和胰腺样品中10种基因的表达。

使大鼠寄居在Primate Unit(Medical Research Council,SouthAfrica)。根据标准操作方法(Diabetes Discovery Platform,MedicalResearch Council)进行大鼠处置，包括饲喂、葡萄糖测定和处死。简言之，给3周龄大鼠饲喂高脂肪膳食24周以诱导T2D。研究组由13只大鼠组成，通过每日管饲0.3mg/kg Rx-1治疗8只大鼠2周，然后用3mg/kg Rx-1治疗7天。5只大鼠用作对照组，仅用水治疗3周。治疗后处死大鼠，采集肝、肌肉和胰腺组织，根据制造商的推荐贮存在RNalater(Ambion)。本研究得到南非医学研究委员会(MedicalResearch Council of South Africa)的伦理委员会批准。

-从肝组织中的RNA提取

从RNAlater取出组织，称重(80-100mg)，放入包含1ml Trizol(Invitrogen)和不锈钢珠(Qiagen)的2ml微量离心管。用TissueLyser(Qiagen)在25Hz下将组织匀化6min,，在4°C以12,000g离心10min，取出上清液，在室温温育5min。此后，加入0.2ml氯仿(Sigma)，剧烈振摇15秒，然后在室温温育3min，不时搅拌。将样品在4°C以12,000g离心15min，将水相转入新试管。通过添加0.5ml异丙醇沉淀RNA，充分混合30秒，置于-20°C过夜。第二天，在4°C将试管以12,000g离心20min。用1ml75%乙醇洗涤沉淀，在4°C以12,000g离心15min。重复洗涤步骤。第二次洗涤后，通过将试管置于PCR箱内成开口状态(冰上)2小时风干沉淀。通过在这种温育过程中将试管不时地在纸巾上印记除去过量的液体。通过添加100μl不含RNase的水并且在55°C温育10min重新混悬沉淀。使用分光光度计(NanodropTechnologies)测定RNA浓度。此后，用RNeasy小型试剂盒、根据制造商的说明(Qiagen)纯化RNA，使用Nanodrop再次测定浓度。通过用Turbo不含DNase的DNA(Ambion)处理RNA和根据制造商的说明在37°C温育90min除去基因组DNA，但使用1.5x单位的DNase和所述试剂盒推荐的温育时间。简言之，在37°C将20μgRNA与1.5μl(3个单位)DNase、5μlDNase缓冲液和不含核酸酶的水在50μl最终反应体积中温育45min，此后，再加入3个单位的DNase，再温育45min。通过添加所述试剂盒提供的1/5体积(10μl)的DNase失活试剂使DNase失活。将反应体系在室温温育2min，以14,000rpm离心1.5min。取出上清液，使用Nanodrop测定RNA浓度。使用RNA6000Nano试剂盒与如制造商(Agilent technologies)推荐的2100Bioanalyser集成在一个芯片上的实验室系统测定DNase-处理的RNA的质量。

-逆转录

使用如制造商(Applied Biosystems)推荐的高容量逆转录试剂盒将提取自肝、肌肉和胰腺的RNA转化成cDNA。简言之，将2μg DNase-处理的RNA加入到10μl体积的不含核酸酶的水中。此后，加入2μl反应缓冲液、0.8μl dNTPs、2μl随机引物、1μl RNase-抑制剂、1μl逆录酶和3.2μl不含核酸酶的水。设置不含逆录酶的相同反应体系(-RT反应)以研究基因组DNA污染。将反应体系在25°C温育10min，37°C温育120min，85°C温育5s，以使逆录酶失活。将cDNA样品贮存在-20°C至表达分析为止。

-定量实时PCR、数据采集和评价

通过进行RT反应的qRT-PCR研究基因组DNA污染的程度。将由肝、肌肉和胰腺制备的未稀释的cDNA(±RT反应)与12.5μl SYBRGreen混合物(Applied Biosystems)、2.25μl10μM Gapdh正向引物(900nM)、2.25μl10μM Gapdh反向引物(900nM)和H₂O在25μl终体积中混合。加入全部试剂后，将PCR试管简单地旋转以确保全部溶液在试管底部。使用ABI7500序列检测系统仪器(AppliedBiosystems)、使用Absolute Quantification(AQ)软件(SDS V1.4)和将全部样品标记为未知进行PCR反应。使用通用循环条件；50°C，2min；95°，10min；然后是95°C、15s和60°C、1min的40个循环。添加解离曲线。在延伸步骤(60°C1min)过程中获取数据。试验后，使用阈值循环的默认设定值(CT)和基线，将Ct值输出至Excel用于分析。

为了分析基因表达，将由肝、肌肉和胰腺制备的25ng cDNA与12.5μl Taqman通用PCR主混合物（Taqman universal PCR mastermix）(Applied Biosystems)、1.25μl基因特异性引物和探针混合物(预先研发的Taqman基因表达测定法,Applied Biosystems)和H₂O在25μl终体积中混合。所用的Taqman测定法列在表1中。后缀_m表示测定，其探针使相关基因的外显子-外显子接头旋转，由此不检测基因组DNA，而后缀_s表示测定，在单一外显子内设计其引物和探针，这种测定法检测基因组DNA。

使用ABI7500序列检测系统仪器(Applied Biosystems)、使用如上所述的通用循环条件进行PCR反应。一式两份运行全部样品。用使用ABI相对定量(RQ)软件(SDS V1.4)、使用Ct阈值0.1分析ABI7500仪器生成的数据。通过使用2^-ΔΔCt法测定相对表达水平，其中ΔΔCt=(Ct_{所研究的基因}-Ct_管家基因)_治疗的-(Ct_{所研究的基因}-Ct_管家基因)_对照。将基因表达对管家基因标准化以校准cDNA载量差异。将两种基因表达测定β-肌动蛋白(ActB)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Gapdh)(表1)用作内源性对照。将RQ软件对两个内源性对照各自生成的相对基因表达数据或对两个内源性对照平均值校准的数据输出至Microsoft Excel并且进行分析。

-统计学分析

在使用双-尾未配对t检验(GraphPad Prism3.02版软件,SanDiego,California,USA)进行处理前后对校准的基因表达数据进行统计学分析。统计学显著性表示为P值≤0.05。

本研究的目的在于确定用Rx-1治疗是否会影响OB/IR Wistar大鼠肝和肌肉中参与葡萄糖摄取、胰岛素信号传导、脂肪酸氧化、细胞因子信号传导和碳水化合物代谢的基因表达水平。分析Rx-1治疗对胰腺中参与胰高血糖素加工、胰岛素表达和转录因子的基因表达的影响。分析治疗后基因表达特性可以洞察Rx-1作用机制。

将Rx-1治疗的和对照大鼠中的基因表达水平对ActB、Gapdh或ActB和Gapdh平均值校准。尽管基因表达根据所用的内源性对照的不同而改变，但是Rx-1治疗上调肝中参与葡萄糖摄取(Glut1和Glut2)、胰岛素信号传导(IR和IRS2)、脂肪酸氧化(PPARα)、细胞因子信号传导(SOCS3)和碳水化合物代谢(GcgR)的基因。Rx-1治疗不影响肌肉样品中这些基因的表达。在胰腺中，Rx-1治疗增加参与胰高血糖素加工、GLP-1R、Gcg和GcgR、编码胰岛素的基因Ins1和Ins2和转录因子Isl1和Pdx1的基因表达。在胰腺中未观察到具有统计学显著性的改变。Rx-1治疗不影响Pcsk2和巢蛋白的表达。在本研究中不能检测到Neuro3。

Rx-1治疗增加OB/IR大鼠肝中Gck基因表达。然而，这种增加不具有统计学显著性。Gck是主要在肝中表达的酶，其中它对葡萄糖敏感并且将其转化成葡萄糖-6-磷酸，即糖酵解的第一步(Agius,2008)。已经报道大量因素包括胰岛素(Iynedjian等人1988)和酚类化合物(Valentova等人2007)上调肝中的Gck基因表达。Rx-1治疗降低肌肉中Gck mRNA水平。以前已经报道了肌肉不是Gck活性的主要来源。

本研究显示用Rx-1治疗的OB/IR Wistar大鼠肝中Glut1和Glut2表达增加。这些动物肌肉中Glut4mRNA水平不受治疗影响。葡萄糖对细胞代谢和通过糖酵解合成ATP和柠檬酸循环是重要的。GLUT蛋白家族成员介导促进的葡萄糖转运入细胞，GLUT蛋白家族成员属于更大的12种跨膜束转运蛋白的超家族。目前，已经鉴定了13种哺乳动物葡萄糖转运蛋白同种型(Joost等人2002)。这些蛋白质以组织-和细胞-特异性方式表达。

GLUT1得到广泛表达并且介导葡萄糖转运入红细胞且遍在血脑屏障，并且向大部分细胞提供基础葡萄糖需求。它还在将葡萄糖转运通过上皮和内皮屏障组织中起作用。Makni等人(2008)报道了Glut1多态性涉及突尼斯人群体中的T2D。

GLUT2是在肝细胞、胰腺β细胞及肠和肾上皮细胞基底外侧膜中表达的高-Km同种型。患有葡萄糖耐量降低的芬兰受试者的Glut2基因中的单核苷酸多态性(SNPs)与发生T2D的三倍风险相关(Laukkanen等人2005)。

GLUT4仅在胰岛素敏感组织、脂肪和肌肉中表达。它负责增加餐后状态下这些组织中的增加的葡萄糖处理并且在全身葡萄糖动态平衡中是重要的。胰岛素刺激导致GLUT4从细胞内的胞内小囊泡易位至质膜和增加的葡萄糖摄取。GLUT4易位失败导致胰岛素抵抗和T2D。Glut4基因表达和功能在胰岛素抵抗、T2D、肥胖和衰老过程中减少(Karnieli等人2008)。

IR mRNA水平在治疗的大鼠肝中增加，而水平在这些动物肌肉中不变。IR是由结合胰岛素的胞外域和具有酪氨酸激酶活性的胞内域组成的跨膜蛋白。胰岛素结合后，IR的底物酪氨酸激酶活性启动细胞磷酸化反应级联，其中它使大量底物包括IRS1和IRS2磷酸化。这些磷酸化底物随后用作结合和活化细胞激酶例如Pi3k的对接分子，导致葡萄糖摄取、细胞生长和蛋白质合成(Youngren,2007)。IR功能和信号传导受损与胰岛素抵抗和T2D相关。

Rx-1治疗增加治疗的大鼠肝中IRS2基因表达。IRS1mRNA水平在肝中不变，而IRS1和IRS2mRNA水平在这些动物肌肉中不变。已经鉴定了4种胰岛素受体底物(IRS)蛋白亚型(Thirone等人2006)，其中IRS1和IRS2最为重要。在IRS蛋白质作用中存在组织特异性差异，其中IRS1在骨骼肌中起显著作用，而IRS2在肝中更为重要(White,2002)。

Pi3k仅在肝中得到上调。然而，这种上调并不显著。Pi3k在胰岛素信号传导中起关键作用且已经证实在患有T2D的患者组织中钝化。大量研究提供了证据，其表明能够通过靶向Pi3k自身或其上游和下游介体治疗胰岛素抵抗，即T2D的主要原因(Jiang和Zhang,2002)。

Rx-1治疗后PPARα在肝中得到显著地上调。PPARα主要在肝中表达而在肌肉中达到的程度较低，其中它控制脂质代谢和糖稳态(Lefebvre等人2006)。PPARα激动剂已经用于治疗肥胖、胰岛素抵抗和T2D。其中PPARα改善胰岛素抵抗的机制之一通过上调用于脂肪酸代谢的基因来进行。

SOCS1和SOCS3mRNA的表达在Rx-1治疗的大鼠的肝和肌肉中增加。SOCS3仅在肝中的上调显著地增加。SOCS1和SOCS3是8种蛋白质家族中的2个，认为它们以负反馈方式调节对细胞因子的细胞响应(Yasukawa等人2000)。研究证实SOCS1和SOCS3表达在OB/IR小鼠肝中增加(Ueki等人2005)。肝SOCS1或3表达的反义引物-介导的敲除逆转肥胖糖尿病小鼠中的胰岛素抵抗，从而强烈支持SOCS蛋白质在肥胖相关胰岛素抵抗中的作用(Ueki等人2005)。在本研究中得到的相反结果集中于参与细胞因子信号传导、胰岛素抵抗和T2D的复杂基因网状结构。SOCS蛋白质的主要功能在于作为细胞因子信号传导负调节剂，因此，这些基因的表达增加可以导致细胞因子信号传导减少，这在胰岛素抵抗和T2D过程中是有益的(Krebs和Hilton,2001)。

Rx-1治疗增加治疗后肝和肌肉中的GcgR基因表达。GcgR的上调不具有统计学显著性。Charbonneau报道高脂肪膳食饲喂大鼠将总肝GcgR减少了约55%(Charbonneau等人2007)。我们的数据由此表明了Rx-1治疗逆转膳食诱导的GcgR下调。

Rx-1治疗后GLP1R基因表达在胰腺中增加。肠降血糖素激素胰高血糖素样肽1(GLP1)和葡糖依赖性促胰岛素肽或也称作抑胃肽(GIP)刺激碳水化合物和脂肪摄入后的胰岛素释放，从而维持葡萄糖动态平衡(Kieffer和Habener,1999)。编码GLP1R的基因的破坏导致葡糖耐受不良和不能分泌对葡萄糖响应的胰岛素(Scrocchi等人1996)。活化GLP1R诱导β-细胞新生和增殖(Xu等人1999)，同时抑制细胞凋亡(Li等人2003)。

Rx-1治疗增加胰腺中Pdx1、Ins1和Ins2基因表达。先前的研究以已经报道GLP1治疗增加转录因子Pdx-1(也称作IDX-1、STF1和IUF1)和胰腺中胰岛素的mRNA和蛋白质水平(Doyle和Egan,2007)。我们的实验室中的其他研究显示循环GLP1水平在Rx-1治疗OB/IR大鼠的血液中增加(Louw等人2008)。

由于已经证实RX-1可以增加GLP-1基因表达的表达和GLP-1循环水平，所以可能的情况是RX-1通过结合与调节肠降血糖素分泌相关的受体之一起作用。它们称作GPR40、43、119、120和131(也称作TGR5)(例如Zhao YF,Pei J,Chen C.J Endocrinol.2008Sep；198(3):533-40.Epub2008Jun12.Activation of ATP-sensitivepotassium channels in rat pancreatic beta-cells by linoleic acidthrough both intracellular metabolites and membrane receptorsignalling pathway)。

Cornish J,MacGibbon A,Lin JM,Watson M,Callon KE,TongPC,Dunford JE,van der Does Y,Williams GA,Grey AB,Naot D,Reid IR.Modulation of osteoclastogenesis by fatty acids.Endocrinology.2008Nov；149(11):5688-95.Epub2008Jul10。

Robert M Jones,James N Leonard,Daniel J Buzard&JuergLehmann GPR119agonists for the treatment of type2diabetes ExpertOpin.Ther.Patents(2009)19(10))。

或者，RX-1可以与分子如钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白(SGLT家族)发生相互作用(Gribble FM,Williams L,Simpson AK,ReimannF.Diabetes.2003年5月；52(5):1147-54.A novel glucose-sensingmechanism contributing to glucagon-like peptide-1secretion from theGLUTag cell line.)(O'Malley D,Reimann F,Simpson AK,GribbleFM.Diabetes.2006Dec；55(12):3381-6.Sodium-coupled glucosecotransporters contribute to hypothalamic glucose sensing).(KrimiRB,Letteron P,Chedid P,Nazaret C,Ducroc R,Marie JC.Resistin-like molecule-beta inhibits SGLT-1activity and enhancesGLUT2-dependent jejunal glucose transport.Diabetes.2009Sep；58(9):2032-8.)。

Pdx1通过结合其促进剂活化胰岛素基因表达且还延长胰岛素mRNA半衰期(Poitout等人2006)。在啮齿动物中的体外和体内研究已经证实胰岛素基因表达在葡萄糖和脂肪酸长期水平升高情况下显著下降(Poitout等人2006)。胰岛素被基因胰岛素1(Ins1)和胰岛素2(Ins2)编码。推定在啮齿动物中，Ins1因RNA介导的复制-转录过程而来源于Ins2。人仅具有一种胰岛素基因，其与高度保守的啮齿动物Ins2同源(Madadi等人2008)。

Gcg、GcgR和Isl1mRNA水平在Rx-1治疗后的OB/IR大鼠胰腺中增加。胰高血糖素是在肝中表达的激素，其中它刺激葡萄糖产生。Isl1在胰内分泌细胞胚胎发育中具有关键作用(Ahlgren等人1997)。在2008年，Koya等人报道用重组Pdx-1治疗链脲霉素诱导的糖尿病小鼠促进β-细胞再生和肝细胞分化，从而恢复血糖正常。他们还证实这些小鼠肝和胰腺中Isl1和Gcg mRNA水平在重组Pdx-1治疗后得到上调。Charbonneau等人(2007)显示总肝GcgR蛋白质含量在饲喂高脂肪膳食的大鼠中减少且GcgR蛋白质水平在锻炼后适度增加。

巢蛋白是胰岛干细胞标记且已经表明巢蛋白-阳性细胞代表了多能胰腺干细胞群，其可以用于未来的细胞替代疗法以治愈糖尿病(Lumelsky等人2001)。相反，Delacour等人(2004)证实巢蛋白在成人胰腺外分泌细胞中表达且表明巢蛋白不是胰岛内分泌细胞的特异性标记。在我们的研究中，巢蛋白mRNA水平不受Rx-1治疗影响。

在未治疗或治疗大鼠中未检测到Neurogenin3。Neurogenin-3是在内分泌先祖细胞中表达的转录因子并且是在胰腺中内分泌细胞发育所需的(Habener等人2005)。Lee等人(2006)报道Neurogenin-3不在成年小鼠胰腺组织中表达。这些结果与其他人(Dor等人2004)的报道一致，他们报道现存的β-细胞复制是成年小鼠中β-细胞再生的主要机制。

Pcsk2或前转变酶2(proconvertase2)(PC2)mRNA水平不受Rx-1治疗影响。在α-细胞中，PC2裂解高血糖素原产生胰高血糖素(Wideman等人2006)。

概括地说，本研究显示在Rx-1治疗的大鼠肝中参与葡萄糖摄取、胰岛素信号传导、脂肪酸代谢和细胞因子信号传导的基因上调。编码激素胰岛素和胰高血糖素的基因表达在这些大鼠胰腺中增加，而转录因子Pdx1和Isl1也得到上调。GcgR mRNA水平在Rx-1治疗的大鼠肝和胰腺中均得到增加。这些结果一起表明在OB/IR大鼠中Rx-1治疗可以逆转胰岛素抵抗和增加脂肪酸氧化。

参与葡萄糖摄取(Glut1和Glut2)、胰岛素信号传导(IR和IRS2)、脂肪酸氧化(PPARα)、细胞因子信号传导(SOCS1和SOCS3)和胰高血糖素受体的基因在Rx-1治疗的大鼠肝中得到上调。仅胰高血糖素受体在肌肉中得到上调。其他基因的表达基本上未改变。参与胰高血糖素加工(GLP1R、Gcg和GcgR)、胰岛素表达(Ins1和Ins2)和转录因子(Isl1和Pdx1)的基因在Rx-1治疗的大鼠的胰腺中得到上调。Rx-1治疗不影响Pcsk2和巢蛋白的表达，而不能检测到neuro3。

结论

基因表达分析是可以洞察Rx-1降糖作用机制的有用技术。来自本研究的结果表明Rx-1在肝中起作用，其中它刺激葡萄糖摄取、胰岛素信号传导和脂肪酸氧化。此外，Rx-1显然抑制细胞因子信号传导，即胰岛素抵抗和2型糖尿病的标志。在胰腺中，Rx-1处理增加了编码胰岛素转录因子Isl1和Pdx1和GLP1R的基因表达。有意义地，GLP1水平在这些大鼠的血液中也得到增加。我们的结果一起表明Rx-1可以逆转肥胖、胰岛素抵抗大鼠中的胰岛素抵抗和增加葡萄糖摄取和脂肪酸氧化。

实施例5

RX-1类似物在转化的3T3–L1脂肪细胞中的葡萄糖摄取

按照用于2-脱氧-[³H]-D-葡萄糖的操作方案测定将测试化合物给予Chang细胞后RX-1和选择的类似物的葡萄糖摄取。设计下文更详细描述的方案是为了测试RX-1(和RX-1类似物)介导的葡萄糖摄取。在表中，显示了RX-1和有代表性的类似物的摄取的EC50值。

表2

化合物	EC50(微摩尔)
		RX-1	3.224
RX-2	9.353
		RX-4	80.77
RX-5	114.2
		RX-10	105.1
RX-16	6.986
		RX-18	9.5
RX-19	180.7
		RX-20	5.7
RX-21	285.7

化合物操作

将粉末形式的RX-1和RX-1类似物贮存在RT(20-24℃)下和真空干燥的暗处。

储备溶液

RX-1储备溶液(1.0mM).

为每次试验运行制备新鲜的RX-1储备溶液。

就1.0mM RX-1储备溶液而言，将3.3mg RX-1溶于补充有0.1%BSA的10ml DMEM(不含酚红、葡萄糖L-谷氨酰胺和丙酮酸盐)。

RX-1类似物储备溶液(5或4mM)

通过用200无菌组织培养级的水稀释化合物制备在低温小瓶(DrugMode)中提供的RX-1类似物的储备溶液。得到5mM储备溶液。如果类似物确实完全溶解，则再加入50μl甲醇(将这一结果清楚地记录在记录卡片上)。得到4mM储备溶液。将储备溶液始终保持在冰上，将类似物以20μl等分部分贮存在-80C，然后应用。将融化的管清楚地标记。

工作溶液

RX-1(10μM)阳性对照溶液

·为了制备作为阳性对照的10μM RX-1溶液。将30μl加入补充有8mM葡萄糖的2970μl改进的DMEM培养基中。

RX-1类似物(31.6μM)测试溶液

·为了制备31.6μM RX-1类似物测试溶液。将19μl5mM加入到补充有8mM葡萄糖的2981μl改进的DMEM培养基中。为了由4mM储备溶液制备31.6μM RX-1类似物测试溶液，将24μl加入到补充有8mM葡萄糖的2976μl改进的DMEM培养基中。

24-孔培养板中的细胞接种

·根据MRC细胞培养SOPs中所述的方法培养Chang细胞：TC-B2a融化细胞和TC-B1a细胞系维持–一般原理。

确保细胞处于对数期(即<70%汇合率)和少于20次传代。

·使用0.25%(w/v)胰蛋白酶/0.53mM EDTA溶液收集细胞。

·计数细胞，在EMEM(具有丙酮酸盐和NEAA，但不含包含10%FBS的L-谷氨酸盐(Lonza,USA)(Gibco,UK)中再混悬至30000细胞/ml(Chang细胞接种密度24-孔培养板=30000细胞/ml)，吸取1ml/孔细胞混悬液至24-孔培养板，相当于30000细胞/孔。

2-脱氧-[³H]-D-葡萄糖摄取试验

·细胞生长3天后，抽吸培养基

·在37℃用预温热的DPBS将细胞洗涤1次

·加入500μl预温热37oC的DMEM/0.1%BSA(不含酚红、葡萄糖和丙酮酸盐)至血清饥饿细胞中以除去残留的葡萄糖和FBS

·在37°C在加湿气体和5%CO₂中温育30min

·抽吸DMEM/0.1%BSA(不含酚红、葡萄糖和丙酮酸盐)

·如培养板中指定的配置制备测试稀释液(参见下文)

·根据培养板配置加入500μl预温热37℃的测试稀释液/孔

·在37°C在加湿气体和5%CO₂中温育3hrs

·除去测试培养基，用DPBS(37℃)将细胞洗涤1次

·将包含0.5μCi/ml³H-2-DOG的250μl测试培养基加入到每个孔中使用(0.5μl³H到1ml培养基)

·在37°C在加湿气体和5%CO₂中温育15min

·抽吸培养基

·为了终止反应，用冰冷的DPBS将细胞洗涤2次

·抽吸DPBS，确保孔尽可能地干燥

·通过加入1ml0.3N NaOH/1%SDS裂解细胞，在37℃温育至少45min

·充分混合细胞裂解液，然后用于LSC和Bradford蛋白质测定

Claims

1.式I的化合物或其生理学可接受的盐：

其中

Ar是芳族或杂芳族单环或稠合双环或三环系统；

n是0、1或2；

X¹独立地选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X²选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X³选自-O-和-CH(X¹)-；

X⁴选自-O-和(-CH₂)_m-；

X⁵=-O-或(-CH₂)_m-；

m是0、1、2或3；

其中标记为＊的键连接乙烯；且

R^５选自C₁-C₆直链或支链烷基、C₂-C₆直链或支链烯基或炔基、芳基、芳烷基、杂芳基、碳环和杂环；

条件是：

·当X³是-O-且至少一个X¹是OH时，X²不是–OH；

2.权利要求1的化合物，其中X⁵是(-CH₂)_m-。

3.权利要求1或2的化合物，其中m是0。

4.权利要求1－3任一项的化合物，其中Ar是苯、噻吩或吡啶，优选苯。

5.权利要求1－4任一项的化合物，其中X¹是–OH或-C(O)R⁵。

6.权利要求1－5任一项的化合物，其中X³和X⁴是-O-。

7.权利要求1－6任一项的化合物，其中n是1。

8.权利要求1－7任一项的化合物，其中A是–COOH。

9.权利要求1－8任一项的化合物，其中X²是-CH₂OH。

10.权利要求1－9任一项的化合物，其中R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氰基和硝基，优选氢。

11.权利要求1－10任一项的化合物，其中R¹和R²是氢。

12.权利要求1－11任一项的化合物，其中R⁴是氢。

13.权利要求1－12任一项的化合物，用作药物。

14.权利要求1－12任一项的化合物，用作用于治疗包括糖尿病、肥胖和/或X综合征的代谢病的药物。

15.如上述权利要求任一项所定义的式I的化合物，用作葡萄糖摄取抑制剂例如α-糖苷酶抑制剂、用作高血糖症治疗剂和/或控制剂、用作葡萄糖转运蛋白激活剂、用作降血糖剂、用作降血脂剂、用作肠降血糖素激动剂或促分泌素、用作胰岛素致敏剂、用作胰腺β-细胞功能改善剂、用作肝葡萄糖生成抑制剂、用作胰岛素或肠降血糖素模拟物和/或用作胰岛素释放促进剂。

16.治疗动物包括人的T1D、非自身免疫性T2D、肥胖和/或X综合征的方法，所述方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的如权利要求1－12的一项或多项所定义的式I的化合物的步骤。

17.式IV的化合物，用作药物：

其中

Ar是芳族或杂芳族单环或稠合双环或三环系统；

n是0、1或2；

X¹独立地选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X²选自-OH、-CH₂OR⁵、H、-OR⁵和-C(O)R⁵；

X³选自-O-和-CH(X¹)-；

X⁴选自-O-和(-CH₂)_m-；

X⁵=-O-或(-CH₂)_m-；

m是0、1、2或3；

其中标记为＊的键连接乙烯，且

条件是当X³是-O-时，X²不是-OH；且至少一个X¹是OH。

18.权利要求17的化合物，其中Ar是苯。

19.权利要求17或18的化合物，其中X₁是–OH，X₃和X₄是-O-，且n是1。

20.权利要求17－19任一项的化合物，其中A是–COOH。

21.权利要求17－20任一项的化合物，其中X₂是-CH₂OH。

22.权利要求17－21任一项的化合物，其中m是0。

23.权利要求17－22任一项的化合物，其中R¹、R²、R³和R⁴独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、氰基和硝基，优选氢。

24.如权利要求17－23任一项所定义的式IV的化合物，用作葡萄糖摄取抑制剂例如α-糖苷酶抑制剂、用作高血糖症治疗剂和/或控制剂、用作葡萄糖转运蛋白激活剂、用作降血糖剂、用作降血脂剂、用作肠降血糖素激动剂或促分泌素、用作胰岛素致敏剂、用作胰腺β-细胞功能改善剂、用作肝葡萄糖生成抑制剂、用作胰岛素或肠降血糖素模拟物和/或用作胰岛素释放促进剂。

25.如权利要求17－23任一项所定义的式IV的化合物，用于治疗1型糖尿病(T1D)、非自身免疫性2型糖尿病(T2D)、肥胖和/或X综合征。

26.权利要求25的应用，其中所用的化合物用作葡萄糖摄取抑制剂例如α-糖苷酶抑制剂、用作高血糖症治疗剂和/或控制剂、用作降血脂剂、用作肠降血糖素激动剂或促分泌素、用作胰岛素致敏剂、用作胰腺β-细胞功能改善剂、用作肝葡萄糖生成抑制剂、用作胰岛素或肠降血糖素模拟物和/或用作胰岛素释放促进剂。

27.药物组合物，包含至少一种如权利要求17－23的一项或多项所定义的式IV的化合物和常用的药用载体。

28.权利要求27的药物组合物，其中式IV的化合物选自如权利要求23所定义的化合物。

29.治疗动物包括人的T1D、非自身免疫性T2D、肥胖和/或X综合征的方法，所述方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的如权利要求17－23的一项或多项所定义的式IV的化合物的步骤。

30.式II的化合物或其生理学可接受的盐：

用作药物。

31.式III的化合物或其生理学可接受的盐：

用作药物。

32.如权利要求30或31所定义的式II或III的化合物，用于治疗糖尿病例如1型糖尿病(T1D)或2型糖尿病(T2D)、肥胖和/或X综合征。

33.治疗动物代谢病的方法，所述代谢病包括糖尿病、肥胖和/或X综合征，所述动物包括人，所述方法包含对有此需要的动物包括人给予有效剂量的如权利要求30或31所定义的式II或III的化合物的步骤。

32.化合物，选自：

(Z)-3-(2-硝基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-2)；

(Z)-3-(2-硝基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-3)；

(Z)-3-(2-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-4)；

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-5)；

(Z)-3-苯基-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-6)；

(Z)-3-(4-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-7)；

(Z)-3-(2-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-8)；

(Z)-3-(3-甲氧基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-9)；

(Z)-3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-10)；

(Z)-3-(2-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-11)；

(Z)-3-(4-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-12)；

(Z)-3-(2-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-13)；

(Z)-3-([1,1'-联苯]-3-基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-14)；

(Z)-3-(噻吩-2-基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-15)；

(Z)-3-(2-氯-6-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-16)；

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-17)；

(Z)-3-(间-甲苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-18)；

(Z)-3-(间-甲苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-19)；

(Z)-3-(3-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-20)；

(Z)-3-(2-氯苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-21)；

(Z)-3-(3-甲氧基苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-22)；

(Z)-3-([1,1'-联苯]-3-基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-23)；

(Z)-3-(3-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-24)；

(Z)-3-(3-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-25)；

(Z)-3-(2-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-26)；

(Z)-3-(噻吩-2-基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-27)；

(Z)-3-(2-氯-6-氟苯基)-2-(((2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-28)；和

(Z)-3-(4-溴苯基)-2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙烯酸(RX-30)。