CN103163084B

CN103163084B - 一种检测虾类产品新鲜度的表征方法

Info

Publication number: CN103163084B
Application number: CN201310081017.XA
Authority: CN
Inventors: 李军生; 胡金鑫; 阎柳娟; 黄国霞
Original assignee: Guangxi University of Science and Technology
Current assignee: Guangxi University of Science and Technology
Priority date: 2013-03-14
Filing date: 2013-03-14
Publication date: 2015-02-04
Anticipated expiration: 2033-03-14
Also published as: CN103163084A

Abstract

一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，涉及一种新鲜度的检测方法，采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品中的TMA和TMAO，并通过数据处理得到TMA/TMAO摩尔比值，然后将测得的虾类产品的挥发性盐基氮的值与TMA/TMAO摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值。本发明方法可以改善当前传统检测方法存在的主观性、复杂性、准确性低等缺点，显著提高了水产检测方法的准确性和客观性，具有降低成本、检测灵敏、测定效果好的优点。

Description

一种检测虾类产品新鲜度的表征方法

技术领域

本发明涉及一种新鲜度的检测方法，特别是一种检测虾类产品新鲜度的表征方法。

背景技术

近年来，随着我国加入WTO，我国渔业以更加开放的姿态融入世界渔业发展格局。随着国家减船转产计划和发展远洋渔业的优惠政策的实施，远洋渔业特别是大洋性公海渔业得到较快的发展。我国水产品对外贸易也蓬勃发展。1999年进出口贸易总量达265.32万吨，贸易总额44.3亿美元；2000年，进出口贸易量405万吨，贸易额达到56.8亿美元；2010年进出口贸易量716.06万吨，贸易总额203.64亿美元。自2002年起，中国水产品出口量位居全球第一。现在，中国不仅是全球最大的水产养殖国，也是全世界唯一的水产品养殖产量超过捕捞产量的国家。我国原有的水产品的质量安全标准存在明显的缺陷和不足，急需修改完善，以提高国人对进口水产品的鉴别能力，保护国人的生命安全。因此，开展水产品的质量安全研究，提升我国水产品质量安全水平，无论是对促进中国水产品产业发展，还是保护百姓的身体健康都是有意义和必需的。

虾类等水产品的质量和新鲜程度评价，一直是人们高度关注。由于传统评价水产品质量和新鲜程度基本上沿用感官目测，化学检测，物理测定，微生物检测等进行。其中，感官法主要通过外观(肉质组织、体表色泽等)、气味、虾肉的紧松程度（触觉）等进行。感官法过于简单而不具备足够的说服力。化学法则通过检测挥发性盐基态氮(TVBN)、组胺、生物胺、三甲胺、K值、酸价、过氧化值、硫代巴比妥酸值等进行。物理法通过测定僵硬指数(R I 值)、电导度、氧化还原电位等进行。微生物法通过检测普通细菌数、腐败细菌数、病原细菌数等进行。国内许多学者也对水产品的新鲜度的评价方法作过一些研究，如电子鼻技术、液相色谱法、气相色-质谱联用技术、生物阻抗法、近红外光谱法等，申请了一些相关专利如公开号为CN101825594、CN101915815、CN1760665、CN101012477、CN101592624等专利。以上检测，事项繁多，程序烦琐，难以应用到实际，且检测不灵敏，检测不出新鲜度的等级，只能检测出腐败程度。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种准确、有效、简便的检测虾类产品新鲜度的表征方法，以改善当前传统检测方法存在的主观性、复杂性、准确性低等缺点，显著提高了水产检测方法的准确性和客观性。

解决上述技术问题的技术方案是：一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品样品中的三甲胺和氧化三甲胺的含量，并通过数据处理得到三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值，然后将测得的虾类产品样品的挥发性盐基氮的值与三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品样品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值，将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值进行对比，得到虾类产品样品的新鲜度。

本发明的进一步技术方案是：该方法具体包括下述步骤：

A.对虾类产品样品进行处理：将虾类产品样品沥干、碾碎；

B.获取数据：

B1.用还原剂Fe-EDTA将虾类产品样品中的TMAO全部还原成TMA,将虾类产品样品中原有的TMA和还原后虾类产品样品中的总TMA分别抽提于无水甲苯中，与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，比色，获取吸光度；

B2.将三甲胺配制成三甲胺标准溶液，用多波长薄层扫描仪分别获取三甲胺标准溶液的吸光度，根据吸光度与三甲胺浓度的关系得到吸光度与三甲胺浓度的线性关系，得到吸光度与三甲胺质量的线性方程，将步骤B1中得到的吸光度分别代入吸光度与三甲胺质量的线性方程中，获取还原后虾类产品样品中总TMA的质量和虾类产品样品中原TMA的质量；

B3.根据步骤B2中得到的数据，获取虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TMA)；

B4.根据步骤B3中得到的数据，通过下列公式得到三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值：

式中，m(TMA)为虾类产品样品中三甲胺含量，单位为mg/100g；

m(TMAO)为虾类产品样品中氧化三甲胺含量，单位为mg/100g；

M(TMAO)为TMAO的相对分子质量；

M(TMA)为TMA的相对分子质量；

B5.按照步骤B1～B4测定虾类产品样品中TMA/TMAO摩尔比值的同时，测定挥发性盐基氮值，根据三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与挥发性盐基氮值的变化关系，应用最小二乘法得到TMA/TMAO摩尔比值与TVB-N值的线性方程为：

Y=aX+b

式中X表示TMA/TMAO摩尔比值，Y表示TVB-N值，a、b分别为系数；

B6.参照水产行业标准SC3113-2002，将挥发性盐基氮标准值代入步骤B5中得到的线性方程，得到用以评定虾类产品样品新鲜度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值；

C.将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与评定新鲜度的TMA/TMAO摩尔比值的标准值进行对比，即可得知虾类产品样品的新鲜度。

步骤A所述的对虾类产品样品进行处理包括下述步骤：

A1.所述的虾类产品样品为鲜虾时：将鲜虾用清水冲洗后，剔除死亡与损伤个体，保留鲜活、大小均一的个体，用碎冰使虾休眠，去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉沥干、碾碎；

A2.所述的虾类产品样品为冻虾时：用温度小于30℃的流水对冻虾进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉沥干、碾碎；

A3.所述的虾类产品样品为虾肉制品时：用温度小于30℃的流水对虾肉制品进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后把虾肉制品沥干、碾碎；所述的虾肉制品为虾丸。

所述步骤B1的具体步骤为：取经过步骤A处理过的虾类产品样品于容器中，按1g样品加入2～4ml质量浓度3～8%三氯乙酸溶液计加入提取液三氯乙酸溶液，充分研磨至肌肉组织破碎后，于转速为3000～5000r/min离心10～30min，得到样品液，分别提取样品液于2只试管，向其中一只试管加入提取样品液体积1～2倍的还原剂Fe-EDTA，将加有Fe-EDTA的试管于50～70℃水浴中10～20min，分别向2只试管中依次加入提取样品液体积0.3～0.5倍的甲醛溶液、3～5倍的甲苯、1～2倍的饱和K₂CO₃溶液，振荡1～3min，静置3～7min，将上层甲苯层除水后，加入除水后甲苯层体积1～3倍的苦味酸-甲苯溶液，充分振荡混匀，比色，获取吸光度。

步骤B3中所述的虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TMA)按以下公式计算得到：

式中：A₁为虾类产品样品还原后的总TMA的量，单位为μg；

A₂为虾类产品样品中原有TMA的量，单位为μg；

V₁为提取液的总体积，单位为ml；

V₂为提取样品液的体积，单位为ml；

m为所取用的样品的质量，单位为g；

1.27为1mg三甲胺相当于氧化三甲胺的量。

本发明的原理基于氧化三甲胺是许多水生生物的天然组分，是鱼类、虾类等水产品的天然鲜味成分。氧化三甲胺广泛分布于各种海洋生物，例如：海洋软骨鱼、硬骨鱼、软体动物、藻类等，且含量较高，是体现水产品特色的鲜味成分。但是在鱼死亡后，由于受到微生物感染及鱼本身器官组织相关的酶影响，氧化三甲胺极易转变成具有显著腐臭味道的三甲胺。另一方面，生物体内的卵磷脂经微生物作用也分解产生三甲胺。三甲胺的含量也常被用来反应水产品新鲜程度的指标，Dyer(1945)曾对虾体内TMA的变化规律进行测定，发现该值只能对虾体的腐败程度进行指示，不能对虾的新鲜程度进行评级。三甲胺最早发现是由微生物分解胆碱、甜菜碱或氧化三甲胺而来，是海洋鱼类腐败的恶臭成分，三甲胺在鱼制品加工废液中含量十分丰富。鉴于氧化三甲胺与三甲胺之间存在明显的相互转化的关系，因此，在检测农药、抗生素、激素等残留的基础上，以天然、原生态、鲜活状态水产品品质作为参照，通过实时检测，以三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值可以科学有效地表征水产品质量与新鲜程度的变化，目前新鲜度的检测方法中没有采用三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值来评定虾类产品新鲜度的方法。

本发明方法的原理是利用在一定贮藏温度下，根据虾类产品样品在贮藏过程中三甲胺/氧化三甲胺（TMA/TMAO）摩尔比值的变化与挥发性盐基氮（TVB-N）值的相关方程，通过测定待测虾类产品样品贮藏过程中三甲胺/氧化三甲胺（TMA/TMAO）摩尔比值的变化，来评定虾类产品样品的鲜度指标。

由于采用上述技术方案，本发明之一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，具有以下有益效果：

1.准确、有效、简便：

由于氧化三甲胺与三甲胺之间存在明显的相互转化的关系，本发明应用苦味酸比色法对同一虾类产品中的具有腐败气味特征的三甲胺和具有水产鲜味特征的氧化三甲胺同时测定，通过三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值来评定虾类产品的新鲜度。本发明中用还原剂Fe-EDTA将虾类产品样品中的氧化三甲胺全部还原成三甲胺，三甲胺与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，与标准三甲胺样品进行比色，即可测得三甲胺的总量，采用比色法获取数据，通过数据处理得到用以评定虾类产品的新鲜度的三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值的标准值。

本发明的检测方法是在国内首次应用氧化三甲胺和三甲胺的特殊转换关系，提出三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值这一种虾类产品鲜度表征手段的。使用该方法检测虾类产品的新鲜度，可以改善当前传统检测方法存在的主观性、复杂性、准确性低等缺点，显著提高了水产检测方法的准确性和客观性。本发明提供了一种简便而有效的鲜度表征方法，为水产品质量安全提供了可靠的表征方法。

2.本发明中的检测方法所需样品少量，样品的消耗量低，并且本发明具有良好的经济效益，与传统的检测方法相比，本发明不需要耗费大量的人力、物力，不仅降低了成本，且测定效果好。

3.基于本发明方法的特点是测定虾类产品中的具有腐败气味特征的三甲胺和具有水产鲜味特征的氧化三甲胺的量，此方法不仅可对虾类产品的新鲜程度进行表征，还可延伸应用到其他水产品的鲜度检测中，适用范围广，便于推广使用。

下面，结合说明书附图和具体实施例对本发明之一种检测虾类产品新鲜度的表征方法的技术特征作进一步的说明。

附图说明：

图1：本实施例中贮藏温度为5℃条件下TMA/TMAO摩尔比值与TVB-N值的相关性图，

图1中，横坐标为TMA/TMAO摩尔比值，纵坐标为挥发性盐基氮值（单位为mg/100g）。

图2：本实施例中三甲胺的标准浓度与吸光度的线性关系图，

图2中横坐标为三甲胺的标准浓度（单位为μg/ml），纵坐标为吸光度。

具体实施方式：

鉴于氧化三甲胺与三甲胺之间存在明显的相互转化的关系，应用苦味酸比色法对同一虾类产品中的具有腐败气味特征的三甲胺（TMA）和具有水产鲜味特征的氧化三甲胺（TMAO）同时测定，通过测定虾类产品贮藏过程中三甲胺/氧化三甲胺（TMA/TMAO）摩尔比值的变化，来评定虾类产品的新鲜度，即以三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值作为评定虾类产品新鲜程度的指标。

本发明的原理是用还原剂Fe-EDTA（乙二胺四乙酸铁钠）将虾类产品样品中的TMAO全部还原成TMA，将所得三甲胺抽提于无水甲苯中，与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，与标准三甲胺样品进行比色，即可测得三甲胺的总量，而虾类产品样品中TMAO的含量是由TMA的总量（TMAO还原成TMA的量+原TMA的量）与虾类产品样品中原有的TMA的量的差值换算所得出。所以，此方法在测定虾类产品样品中TMAO含量的同时也将TMA含量同时测出，然后得到三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值，再通过三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值来评定虾类产品样品的新鲜程度。

具体实施例：一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，括下述步骤：

A.对虾类产品样品进行处理：

A1.所述的虾类产品样品为鲜虾时：将鲜虾用清水冲洗后，剔除死亡与损伤个体，保留鲜活、大小均一的个体；碎冰使虾休眠，去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉沥干、碾碎后分装入密封袋中，贮藏于5℃的环境中进行不同鲜度指标的测定；

A2.所述的虾类产品样品为冻虾时：将冻虾放入容器底部后，用温度小于30℃的流水对冻虾进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后去除虾头、虾皮并剔除虾线，然后把虾肉沥干、碾碎后分装入密封袋中，贮藏于5℃的环境中进行不同鲜度指标的测定；

A3.所述的虾类产品样品为虾肉制品时：将虾肉制品放入容器底部后，用温度小于30℃的流水对虾肉制品进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后把虾肉制品沥干、碾碎后分装入密封袋中，贮藏于5℃的环境中进行不同鲜度指标的测定；所述的虾肉制品为虾丸。

B.获取数据：

B1.获取吸光度：

取经过步骤A处理过的虾类产品样品虾肉5g于容器中，加入15ml质量浓度为 5％的提取液三氯乙酸溶液，充分研磨至肌肉组织破碎后，于转速为4000r/min离心20min，得到样品液，分别取1ml的样品液于两个l0ml具塞试管中，向其中一个具塞试管中加入1ml的还原剂Fe-EDTA，将加有Fe-EDTA的具塞试管于60℃水浴中15min，向两只具塞试管中分别依次加入0.4ml甲醛溶液、4ml甲苯、1.2ml饱和K₂C0₃溶液，振荡2min，静置5min，将两只具塞试管中的上层甲苯层分别移入两只含有0.5g无水硫酸钠的试管中得到除水后的甲苯层溶液，分别移取两只试管中的除水后的甲苯层溶液2ml于两只干净的试管中，分别向两只装有2ml除水后的甲苯层溶液的试管中加入2ml苦味酸与甲苯质量比为1:5000的苦味酸-甲苯溶液，充分振荡混匀，于波长410nm处进行比色，同时做两个水的空白实验，获取还原后虾类产品样品中的总TMA和虾类产品样品中原TMA的吸光度及两个空白实验的吸光度（参见表一）。

表一：

	样品液的吸光度	空白实验的吸光度	样品液与空白的吸光度之差
				还原后虾类产品样品中的总TMA	0.166	0.139	0.027
虾类产品样品中原TMA	0.172	0.168	0.004

其中，本实施例中加入样品液和还原剂Fe-EDTA的具塞试管用于对还原后虾类产品样品中的总TMA作定量分析，另一个只加入样品液而没有加入Fe-EDTA的具塞试管用于对虾类产品样品中原有的TMA作定量分析。

B2.获取还原后虾类产品样品中的总TMA的质量和虾类产品样品中原TMA的质量：

将三甲胺按表二中的标准浓度配制成三甲胺标准溶液，用多波长薄层扫描仪分别获取三甲胺标准溶液的吸光度（参见表二），根据吸光度与三甲胺标准溶液的关系得到吸光度与三甲胺标准浓度的线性关系（参见图2），得到吸光度与三甲胺质量的线性方程y=0.0038x-0.0072（r²=0.9907），其中，y为吸光度，x为三甲胺的质量、单位为μg，r为相关系数。

表二：

标准浓度μg/ml	0	10	20	40	60	80
							吸光度(扣空白)	0	0.016	0.063	0.159	0.223	0.285

表二中所述的扣空白为扣除水的空白实验所得到的吸光度。

将步骤B1中得到的样品液与空白的吸光度之差的值分别代入步骤B2中得到的线性方程中，得到还原后虾类产品样品中的总TMA的质量A₁和虾类产品样品中原有的TMA的质量A₂。

B3.获取虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TMA)：

将步骤B1和步骤B2中的数据代入下述公式中，得到虾类产品样品中TMAO的含量m(TMAO)和虾类产品样品中TMA的含量m(TMA)：

式中：A₁=9μg：为实施例中虾类产品样品中的TMAO还原成TAM和虾类产品样品中原TMA量的总和（即还原后虾类产品样品的总TMA的量），单位为μg；

A₂=2.94μg：为实施例中虾类产品样品中原有TMA的量，单位为μg；

V₁=15ml：为实施例中提取液的总体积，单位为ml；

V₂=1ml：为实施例中提取样品液的体积，单位为ml；

m=5g：为实施例中所取用的虾肉的质量，单位为g；

1.27为1mg三甲胺相当于氧化三甲胺的量。

本实施例中虾类产品样品中TMAO和TMA含量的测定结果以mg/100g来表示。

B4.获取三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值：

将步骤B3中得到的虾类产品样品中TMAO和TMA含量代入下列公式中得到三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值：

式中，m(TMA)为虾类产品样品中三甲胺的含量，单位为mg/100g；

m(TMAO)为虾类产品样品中氧化三甲胺的含量，单位为mg/100g；

M(TMAO)为TMAO的相对分子质量；

M(TMA)为TMA的相对分子质量。

B5.获取TMA/TMAO摩尔比值与TVB-N值的线性方程：

参照水产行业标准ST/T3032-2007《水产品中挥发性盐基氮的测定》的测定方法来对虾类产品样品在贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)进行测定，得到挥发性盐基氮值（参见表三）。

参照步骤B1～B4来对虾类产品样品在贮藏过程中三甲胺/氧化三甲胺（TMA/TMAO）摩尔比值的变化进行测定，得到（TMA/TMAO）摩尔比值（参见表三）。

根据虾类产品样品在贮藏过程中三甲胺/氧化三甲胺（TMA/TMAO）摩尔比值与挥发性盐基氮（TVB-N）值的变化关系（参见表三），利用SPSS（20.0）软件对TVB-N值与TMA/TMAO摩尔比值的相关性进行分析(参见图1)，应用最小二乘法得到TMA/TMAO摩尔比值与TVB-N值的线性方程为：

Y=0.153X+9.272 (r=0.902)

式中X表示TMA/TMAO摩尔比值，Y表示TVB-N值、单位为mg/100g，r为相关系数。

表三：

挥发性盐基氮（mg/100g）	5.25	7.22	15.35	20.68	25.69
						TMA/TMAO摩尔比值	0	0.47	1.21	69.27	111.13

根据实验表明，在5℃条件下，TMA/TMAO摩尔比值与TVB-N值均随贮藏时间的增加而增加，且这两种表征方法间均存在着显著的相关性（p＜0.05）。

B6.获取用以评定虾类产品样品新鲜度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值：

参照水产行业标准SC3113-2002中用以评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值：TVB-N值（mg/100g）≤15mg/100g为一级新鲜；15mg/100g＜TVB-N值（mg/100g）≤20 mg/100g为二级新鲜；TVB-N值（mg/100g）＞20mg/100g为样品开始腐败。将此标准值带入步骤B5中得到的线性方程中，可得到用以评定虾类产品样品新鲜度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值（参见表四）。

表四：

C.评定新鲜度：将步骤B4中得到的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与步骤B6中表四中TMA/TMAO摩尔比值的标准值进行对比，即可得知虾类产品样品的新鲜度。

作为本实施例的一种变换：本发明可以应用到其他水产品的新鲜度检测中。

Claims

1.一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：采用苦味酸比色法同时测定出虾类产品样品中的三甲胺和氧化三甲胺的含量，并通过数据处理得到三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值，然后将测得的虾类产品样品的挥发性盐基氮的值与三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值进行相关性分析，得到相关方程，再将评定新鲜等级的挥发性盐基氮标准值代入到相关方程中，可得到评定虾类产品样品新鲜程度的三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值，将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值的标准值进行对比，得到虾类产品样品的新鲜度。

2. 根据权利要求1所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：该方法具体包括下述步骤：

A.对虾类产品样品进行处理：将虾类产品样品沥干、碾碎；

B.获取数据：

B1.用还原剂Fe-EDTA将虾类产品样品中的氧化三甲胺全部还原成三甲胺,将虾类产品样品中原有的三甲胺和还原后虾类产品样品中的总三甲胺分别抽提于无水甲苯中，与苦味酸作用，形成黄色的苦味酸三甲胺，比色，获取吸光度；

B2.将三甲胺配制成三甲胺标准溶液，用多波长薄层扫描仪分别获取三甲胺标准溶液的吸光度，根据吸光度与三甲胺浓度的关系得到吸光度与三甲胺浓度的线性关系，得到吸光度与三甲胺质量的线性方程，将步骤B1中得到的吸光度分别代入吸光度与三甲胺质量的线性方程中，获取还原后虾类产品样品中总三甲胺的质量和虾类产品样品中原三甲胺的质量；

B3.根据步骤B2中得到的数据，获取虾类产品样品中氧化三甲胺的含量m2和虾类产品样品中三甲胺的含量m1；

式中，m1为虾类产品样品中三甲胺含量，单位为mg/100g；

m2为虾类产品样品中氧化三甲胺含量，单位为mg/100g；

M2为氧化三甲胺的相对分子质量；

M1为三甲胺的相对分子质量；

B5.按照步骤B1～B4测定虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值的同时，测定挥发性盐基氮值，根据三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与挥发性盐基氮值的变化关系，应用最小二乘法得到三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值与TVB-N值的线性方程为：

Y=aX+b

式中X表示三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值，Y表示TVB-N值，a、b分别为系数；

C.将测得的虾类产品样品中三甲胺/氧化三甲胺的摩尔比值与评定新鲜度的三甲胺/氧化三甲胺摩尔比值的标准值进行对比，即可得知虾类产品样品的新鲜度。

3.根据权利要求2所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：步骤A所述的对虾类产品样品进行处理包括下述步骤：

A3.所述的虾类产品样品为虾肉制品时：用温度小于30℃的流水对虾肉制品进行解冻，解冻至无硬块和冰晶为止，然后把虾肉制品沥干、碾碎。

4.根据权利要求2或3所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：所述步骤B1的具体步骤为：取经过步骤A处理过的虾类产品样品于容器中，按1g样品加入2～4ml质量浓度3～8%三氯乙酸溶液计加入提取液三氯乙酸溶液，充分研磨至肌肉组织破碎后，在转速为3000～5000r/min的离心条件下离心10～30min，得到样品液，分别提取样品液于2只试管，向其中一只试管加入提取样品液体积1～2倍的还原剂Fe-EDTA，将加有Fe-EDTA的试管于50～70℃水浴中10～20min，分别向2只试管中依次加入提取样品液体积0.3～0.5倍的甲醛溶液、3～5倍的甲苯、1～2倍的饱和K₂CO₃溶液，振荡1～3min，静置3～7min，将上层甲苯层除水后，加入除水后甲苯层体积1～3倍的苦味酸-甲苯溶液，充分振荡混匀，比色，获取吸光度。

5.根据权利要求4所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：步骤B3中所述的虾类产品样品中氧化三甲胺的含量m2和虾类产品样品中三甲胺的含量m1按以下公式计算得到：

式中：A₁为虾类产品样品还原后的总三甲胺的量，单位为μg；

A₂为虾类产品样品中原有三甲胺的量，单位为μg；

V₁为提取液的总体积，单位为ml；

V₂为提取样品液的体积，单位为ml；

m为所取用的样品的质量，单位为g；

1.27为1mg三甲胺相当于氧化三甲胺的量。

6.根据权利要求3所述的一种检测虾类产品新鲜度的表征方法，其特征在于：所述的虾肉制品为虾丸。