CN103160503A - 玉米种质抗大斑病qtl的snp分子标记及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及分子标记领域,具体地涉及玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记及其应用。根据本发明的玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记为:PZE-109053835PZE-103102855SYN12735SYN18302SYN30756PZE-103171599SYN30351PZE-104141072PZE-108071872PZE-110066840。上述SNP分子标记可以用于抗玉米大斑病的早期预测和筛选,还可以用于抗玉米大斑病型玉米的选育。
Description
技术领域
本发明涉及分子标记领域,具体地涉及玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记及其应用。
背景技术
玉米作为C4植物的代表,光合作用效率高,在常见农作物中单产最高,被称为谷物之王,是世界和我国播种面积第一的作物。然而,随着玉米需求一步增加,耕地在减少,气候有进一步恶化的趋势;而全球人口以每年一亿人的速度爆炸式增长,能新开发的耕地极其有限,玉米供需关系很可能进一步趋紧。
近几十年来,农业发达国家如美国的玉米育种发展极快,美国的玉米平均亩产为我国的近两倍,其中良种的贡献估计为百分之五十以上。先锋公司的品种先玉335等以其高产、优质等特性在我国春玉米区彻底击败国内所有品种,使美国种质成为东北地区的主要玉米种质。玉米大斑病为病原菌引起,是玉米的一种主要疾病,在全球玉米种植区域内发生。近年来在我国东北春玉米主产区发病率大幅上升,但先玉335等不抗大斑病,成为玉米产量的主要影响原因之一。所以用美国的高产、优质且抗大斑病种质改良适应东北地区的先玉335等玉米种质,建立抗大斑病、高产、优质且适应当地环境的种系是保障我国粮食安全的当务之急。
近年来,随着玉米B73自交系全基因组测序的完成和高通量DNA测序技术的突飞猛进,国内外科学家已经成功地完成了许多玉米自交系的重测序。大量的玉米SNP分子标记被发现,相应的高通量玉米指纹芯片已被商业化。McMullen等运用高通量玉米指纹芯片和巢式关联作图(Nested Association Mapping),精确定位了玉米花期及叶片角度的主效QTL。严建兵等用全基因组扫描(GWS)定位了玉米油相关的主效QTL。
虽然Poland等于2011年用巢式关联作图精确定位一些抗大斑病QTL,但他们使用的主要是热带玉米资源,回交导入温带商业种质资源时,是否有效难以确定,即使有效,连锁的不利近等位基因需多代回交才能删除。本发明直接利用大量美国温带商业玉米自交系,使用全基因组扫描精确定位温带商业玉米群内的抗大斑病QTL并将其用于改良适应东北的美国商业玉米种质,则可成功解决以上难题。
发明内容
本发明的目的是提供玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记。
本发明的再一目的是提供上述玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记的应用。
根据本发明的玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记为:
PZE-109053835
PZE-103102855
SYN12735
SYN18302
SYN30756
PZE-103171599
SYN30351
PZE-104141072
PZE-108071872
PZE-110066840
。
根据本发明的具体实施方式,上述玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记通过包括以下步骤的方法获得:
(1)以115个美国玉米自交系,检索美国农业部种质资源信息中心所有专利过期自交系的性状信息,有大斑病抗性记录的共有115个自交系,经试验鉴定,其中感大斑病的有64个自交系,抗大斑病的51个自交系;
(2)使用Illumina公司开发的玉米Infinium50K高密度商业芯片(该芯片覆盖了遍布玉米全基因组的5万6千个SNP位点)测量115个玉米自交系的高密度指纹,使用TASSEL软件
http://www.maizegenetics.net/index.php?option=com_content&task=view&id=8 9&Itemid=119对测得的115个自交系的高密度指纹进行了聚类分析;
(3)玉米抗大斑病主效QTL的全基因组扫描(GWAS)定位,对步骤(1)所得的玉米抗大斑病性状结果和步骤(2)所得的基因型数据,使用TASSEL中的MLM算法进行了分析,检测到抗病相关QTL。
(4)选取10个互不连锁的QTL,发现以下SNP位点与抗玉米大斑病有关,
PZE-109053835
PZE-103102855
SYN12735
SYN18302
SYN30756
PZE-103171599
SYN30351
PZE-104141072
PZE-108071872
PZE-110066840
以上10个SNP位点详细信息如以下表1所示。
表1
其中参照系的“效应值(effect)”为0,“观测数值”是指在“115”个自交系中具有该SNP位点的自交系的数目。
本发明的调控玉米大斑病抗性的主效QTL的SNP分子标记可以用于抗玉米大斑病的早期预测和筛选,还可以用于抗玉米大斑病型玉米的选育。
本发明的调控玉米大斑病抗性的主效QTL的SNP分子标记直接以DNA的形式表现,在玉米的各个组织、各个发育阶段均可检测到,不受季节、环境限制,不存在表达与否等问题;表现为中性,不影响目标性状的表达;SNP适于快速、规模化筛查。基因组筛选中SNPs往往只需+/-的分析,而不用分析片段的长度,利于发展自动化技术筛选或检测SNPs。
具体实施方式
实施例1
(1)以115个美国玉米自交系,检索美国农业部种质资源信息中心所有专利过期自交系的性状信息,有大斑病抗性记录的共有115个自交系,经试验鉴定,其中感大斑病的有64个自交系,抗大斑病的51个自交系;
(2)使用Illumina公司开发的玉米Infinium50K高密度商业芯片(该芯片覆盖了遍布玉米全基因组的5万6千个SNP位点)测量115个玉米自交系的高密度指纹,使用TASSEL软件
http://www.maizegenetics.net/index.php?option=com_content&task=view&id=8 9&Itemid=119对测得的115个自交系的高密度指纹进行了聚类分析;
(3)玉米抗大斑病主效QTL的全基因组扫描(GWAS)定位,对步骤(1)所得的玉米抗大斑病性状结果和步骤(2)所得的基因型数据,使用TASSEL中的MLM算法进行了分析,检测到抗病相关QTL。
(4)选取10个互不连锁的QTL,发现以下SNP位点与抗玉米大斑病有关,
PZE-109053835
PZE-103102855
SYN12735
SYN18302
SYN30756
PZE-103171599
SYN30351
PZE-104141072
PZE-108071872
PZE-110066840
实施例2
(1)选取4个已知大斑病抗性的玉米自交系,其中2个抗病(LH190、PHN29),2个感病(CR1HT、J8606);
(2)使用Illumina公司开发的玉米Infinium50K高密度商业芯片(该芯片覆盖了遍布玉米全基因组的5万6千个SNP位点)测量这4个玉米自交系的高密度指纹;
(3)检测实例1所开发的10个抗病SNP位点,结果发现,利用以上10个SNP可以将抗病与感病自交系区分开来,抗病性鉴定与SNP结果一致。
Claims (5)
1.玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP分子标记为:
PZE-109053835
PZE-103102855
SYN12735
SYN18302
SYN30756
PZE-103171599
SYN30351
PZE-104141072
PZE-108071872
PZE-110066840
。
2.根据权利要求1所述的玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记,其特征在于,所述SNP标记的等位基因位点如下所示:
PZE-109053835 C
PZE-103102855 C
SYN12735 A
SYN18302 G
SYN30756 T
PZE-103171599 T
SYN30351 G
PZE-104141072 G
PZE-108071872 G
PZE-110066840 C
。
3.一种获得玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)以115个大斑病抗性记录的美国玉米自交系作为材料,经试验鉴定,其中感大斑病的有64个自交系,抗大斑病的51个自交系;
(2)使用Illumina公司开发的玉米Infinium50K高密度商业芯片测量115个玉米自交系的高密度指纹,使用TASSEL软件
http://www.maizegenetics.net/index.php?option=com_content&task=view&id=8 9&Itemid=119对测得的115个自交系的高密度指纹进行了聚类分析;
(3)玉米抗大斑病主效QTL的全基因组扫描定位,对步骤(1)所得的玉米抗大斑病性状结果和步骤(2)所得的基因型数据,使用TASSEL中的MLM算法进行了分析。
(4)选取10个互不连锁的QTL,发现以下SNP位点与抗玉米大斑病有关,
PZE-109053835
PZE-103102855
SYN12735
SYN18302
SYN30756
PZE-103171599
SYN30351
PZE-104141072
PZE-108071872
PZE-110066840
。
4.权利要求1所述玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记在抗玉米大斑病的早期预测和筛选中的应用。
5.权利要求1所述玉米种质抗大斑病QTL的SNP分子标记在抗玉米大斑病型玉米的选育的应用。
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