CN103109001B - 制造诊断组合物的方法以及由其制得的组合物 - Google Patents
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Abstract
一方面,本发明提供一种制造亲水性丝组合物的方法。所述方法包括:提供至少一股丝纤维,用碱溶液处理该丝纤维以提供至少一股脱胶丝纤维,以及用处理溶液处理所述脱胶丝纤维以提供亲水性丝组合物。进一步用至少一种试剂固定所述脱胶丝纤维或所述亲水性丝组合物以制造丝基诊断组合物。本发明提供一种由本发明的方法制得的丝基诊断组合物以及一种包括所述丝基诊断组合物的诊断设备。另一方面,本发明提供一种制造诊断设备的方法。所述方法包括:提供至少一股诊断纤维组合物,提供至少一股疏水性纤维组合物,将所述至少一股诊断纤维组合物和所述至少一股疏水性纤维组合物交织。在一个实施方案中,所述诊断纤维组合物和所述疏水性纤维组合物均基于丝。
Description
技术领域
本发明总体上涉及制造诊断组合物的方法,更具体地,涉及制造丝基诊断组合物的方法。
背景技术
对于包括医学测试、毒素检测和法医分析在内的各种应用,检测分析物是必要的,这些分析物包括蛋白质、DNA/RNA和体液的代谢产物以及其他生物源的样品。全球迫切需要对所述分析物的改良的即时测试(Yager,P.;Domingo,G.J.;Gerdes,J.,Point-of-care diagnosticsfor global health.Annu Rev Biomed Eng2008,10,107-44)。对这些应用设计的现有系统存在数个缺陷,例如高成本、松散以及延迟的结果。因此,尚未满足的很大需求是开发低成本、便携、方便操作且对检测显示出高效率的系统。这些系统也应该能够迅速地从生物源的样品中识别出宽范围的分析物。
在过去的十年里,微流体、芯片上实验室方法作为这些问题中一些问题的解决方案已获得重视。然而,缺少让学术实验室的概念能转化成工业生产的成熟的制造方法阻碍了现有的用于制造微流体芯片上实验室设备的技术。用于微电子制造的传统方法为此目的所作的调整是指将早期微流体设备合成在玻璃或硅中。然而,这些材料需要昂贵的加工条件和高额的资本投入。
为了解决这个问题,探索了若干不同材料和处理方法用来制造微流体设备(Becker,H.;Locascio,L.E.,Polymer microfluidic devices.Talanta2002,56(2),267-287)。这些材料包括塑料,例如PDMS(聚二甲硅氧烷)(McDonald,J.C.;Whitesides,G. M.,Poly(dimethylsiloxane)as a material for fabricating microfluidic devices.Acc Chem Res2002,35(7),491-9)、PMMA(聚甲基丙烯酸甲酯)(Klank,H.;Kutter,J.P.;Geschke,O.,CO(2)-laser micromachining and back-end processing forrapid production ofPMMA-based microfluidic systems.LabChip2002,2(4),242-6)和COC(环烯烃共聚物)(Pu,Q.;Oyesanya,O.;Thompson,B.;Liu,S.;Alvarez,J.C.,On-chip micropatterning of plastic(cylic olefincopolymer,COC)microfluidic channels for the fabrication of biomoleculemicroarrays using photografting methods.Langmuir2007,23(3),1577-83)。塑料相对便宜,且塑料具有例如其加工性能、透明度以及低至微米范围形成复杂图案的能力的优势。然而,塑料也有一些缺陷,例如它们天然的疏水性质(这阻碍了简单的毛细流动)、它们的碳足迹以及缺乏容易地适应大规模制造微流体塑料芯片的成熟的制造方法。另外,对于塑料基的微流体设备,仍然需要能够引导流体流动并能够提供从塑料芯片读出的复杂且昂贵的读出器,这使整个设备以及操作不适合非常低成本并稳健的即时测试诊断。
另一方面,纸基的侧向流免疫测定(LFI)采用例如广泛可用的家用验孕的各种快速测试在市场上取得了巨大的成功。以颜色改变形式的视觉读出装置用于检测,同时通过毛细管作用自动发生样品流动。另外,该设备的成熟的制造方法已经可用。然而,LFI也有一些缺陷。它们并不是非常可靠,且不能提供进行多元(multiplex)测试的能力。其原因之一在于纸基设备中缺少限定“流动路径”的能力(Martinez,A.W.;Phillips,S.T.;Butte,M.J.;Whitesides,G. M.;Patterned paper asa platform for inexpensive,low-volume,portable bioassays.Angew ChemZntEd Engl2007,46(8),1318-20)。
近来,Whitesides集团通过将纸图饰成选择性地亲水和疏水的部分而发展了该技术。因此能够限定图饰的流场。然而,纸基设备仍然有一些问题,例如缺乏机械稳定性以及缺少在不进行加热处理或不暴露于高应力的情况下能够沉积多种试剂的低成本的制造方法。最近,棉线也被开发作为微流体芯片制造的介质(Li,X.;Tian,J.;Shen,W.,Thread as a Versatile Material for Low-Cost Microfluidic Diagnostics.ACSApplied Materials&Interfaces2009,2(1),1-6)。在单独的棉线上或在已经缝合在塑料基材上的棉线上进行实验,并基于颜色改变的读出装置来检测试剂的存在。这些实验对于开发使用棉纤维或其他合适材料来制造即时测试诊断设备的高产量和可再生的方法不一定有益。因此,在本领域仍然极其需要解决与诊断设备、其制造、成本和可靠性相关的全部问题。
发明内容
一方面,本发明提供一种制造亲水性丝组合物的方法。该方法包括提供至少一股丝纤维。该方法随后包括用碱溶液处理所述至少一股丝纤维以提供至少一股脱胶丝纤维。接着,用处理溶液处理至少一股脱胶丝纤维。本发明还提供一种提供丝基组合物的方法。该方法包括将至少一种试剂固定到至少一股脱胶丝或亲水性丝纤维上以提供至少一股丝基诊断组合物。
在另一方面,本发明提供一种丝基诊断组合物,其中丝基诊断组合物由本发明的方法制得。
在又一方面,本发明提供一种诊断设备,其包括本发明的丝基诊断组合物。
附图说明
阅读如下详细的描述并参考附图将更好地理解本发明的这些和其他特征、方面和优点,在整个附图中相似的特征表示相似的部件,其中:
图1是表示本发明的制造亲水性丝组合物的方法的示例性步骤的流程图。
具体实施方式
除非上下文明确另外指出,否则在本说明书和权利要求书中所使用的单数形式“一种”和“该”、“所述”包括复数形式。
在本说明书中所使用的“股”指的是织造材料或编辫材料的单个元件(作为纱线或线)。
在本说明书中所使用的“分析物”指的是在分析方法中测定的物质或化学成分。例如,在免疫测定中,分析物可以是蛋白质配体或结合体,而在血糖测试中,分析物是葡萄糖。在一个实例中,分析物可以是乙肝病毒的标记基因。在另一示例性实例中,分析物可以包括待检测药品,例如血液分析中的古柯碱。分析方法可以包括,例如荧光法、质谱测定法、比色法、无线电成像法、电化学检测等,以及它们的组合。在一些实例中,分析物可以指抗体。在其他实例中,分析物可以指抗原。
本文中所使用的“抗体”指的是在识别特定抗原中所使用的蛋白质。特定抗原通常是疾病或某类疾病的标记。有时,抗体还可以被称为免疫球蛋白。抗体可以是第一或第二抗体。第一抗体是针对特定抗原的抗体,通常为不标记的。第一抗体也可以被称为捕获抗体。第二抗体是粘附到第一抗体的抗体,或粘附到第一抗体或捕获抗体内包括的片段的抗体。第二抗体包括标记,使其可用于检测。典型的标记包括:荧光部分、放射性化合物、酶联标记、磁活性粒子、纳米粒子、量子点、乳胶颗粒标记等,以及它们的组合。根据标记,用于检测、识别和量化的方法可以包括:荧光光谱法、无线电成像法、ELISA测试等。
本说明书中所使用的“抗原”是指被活体的免疫系统识别的分子。抗原还指可以被免疫系统识别的分子片段。通常已知的是,给定抗原对抗体显示出特异性,抗原的这种性质被使用于各种应用中。
如本说明书所述,本发明的一个方面提供一种制造亲水性丝组合物的方法。本发明方法中的示例性步骤由数字10表示,显示在图1中的流程图中。本发明的丝基诊断组合物是丝的衍生物。丝是从蚕获得的纤维,更特别地,是从桑蚕的幼虫获得的纤维。本发明中最有用的丝是能编织成纺织品的丝,例如由家蚕(Bombyx Mori)获得的丝,然而,可合成制造或由其他来源生产的丝的其他形式也可以用于本发明。化学上,丝纤维包含氨基酸链,其具有进一步用于结合有用部分的官能团。本说明书中所用的官能团是能够与其他活性物种相互作用形成物理结合或化学键的活性化学部分。
本发明的方法包括提供至少一股丝纤维,在图1中由数字12表示。该步骤通常可以包括分离出至少一股从合适的蚕获得的丝纤维。该丝纤维随后用碱溶液处理以生成至少一股脱胶丝,在图1中由数字14表示。本发明中所使用的碱溶液通常由具有强碱性的化合物溶解于含水混合物而获得。具有强碱性的典型的化合物包括但不限于:氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钙、氢氧化铵等,以及它们的混合物。处理方法可以包括:将丝纤维浸入碱溶液、向丝纤维喷洒碱溶液或本领域技术人员已知的任何这样的变体。在不受限于任何理论或原理的情况下,本领域技术人员知晓自然状态下获得的丝纤维包括胶质混合物涂层,该涂层包括名为丝胶的蛋白质,而能够用碱溶液有效地去除该涂层(Altman,G. H.;Diaz,F.、Jakuba,C.;Calabro,T.;Horan,R.L.;Chen,J.;Lu,H.、Richmond,J.;Kaplan,D.L.,Silk-based biomaterials.Biomaterials2003,24(3),401-416)。可以包括任选的洗涤步骤将多余的碱或其他外来材料洗掉。
该脱胶丝纤维随后用本发明方法中的处理溶液处理以生成亲水性丝组合物,在图1中由数字18表示。处理溶液通常包括水性基(aqueous-based)溶剂。水性基溶剂可以包括,例如,水性基缓冲液、去离子水、包含乙二醇的水等。该处理溶液包括阻滞剂。阻滞剂被用于保护脱胶丝纤维上的官能团,使得它们不妨碍例如固定抗体、检测等后续步骤。阻滞剂可以是这样的任何化学化合物:其具有脱胶丝纤维上可得的官能团的互补官能团,或包含通过例如疏水性相互作用的非特定性相互作用使试剂可以结合至丝纤维的基团。官能团的互补官能团是通过物理结合或化学键能够与官能团反应的官能团。例如,对于羧酸官能团,其互补官能团可以是能生成盐或反应生成酰胺键的胺类。相似地,羟基能够与羧酸反应生成酯。在本发明的一个实施方案中,该阻滞剂是牛血清白蛋白(bovine serum albumin),通常简称为BSA。在另一个实施方案中,阻滞剂是奶粉。
所述处理溶液进一步包括表面活性剂。在不受限于任何理论的情况下,预期经表面活性剂处理的脱胶丝纤维促进在纤维表面上的水性基液体的流动。本发明中所用的典型的表面活性剂包括但不限于:离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂等,离子型表面活性剂,例如为全氟辛酸、全氟辛基磺酸盐、十二烷基硫酸钠、月桂基硫酸铵,和其他烷基硫酸酯盐、月桂基醚硫酸钠、烷基苯磺酸盐、十六烷基三甲基溴化铵、西吡氯铵、聚乙氧基牛脂胺、苯扎氯铵、苄索氯铵、(3-[(3-胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸内盐)、十二烷基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰子两性甘氨酸(cocoampho glycinate);非离子型表面活性剂,例如为烷基聚(环氧乙烷)、聚(乙烯醇)、基于聚(乙烯乙二醇)的山梨聚糖衍生物,包括系列(如20、80)、系列(如80)、系列(如72)、系列(如Triton X-100),烷基酚聚(环氧乙烷)、聚(环氧乙烷)的共聚物和聚(氧化丙烯),包括:系列(如F-127)、烷基糖苷,包括:辛基葡糖苷、癸基麦芽糖苷、脂肪醇,例如甲基醇、油醇、十二烷基二甲胺氧化物。在一个示例性实施方案中,表面活性剂是基于聚(乙二醇)的聚山梨醇酯,有时也被称为山梨聚糖衍生物。在一个特定示例性实施方案中,表面活性剂是20。
所述处理溶液可以进一步包含聚(乙二醇)。如本领域技术人员将了解,可以得到各种分子大小、链长、支化度和支链长度、交联和其他分子变化的聚(乙二醇)。任何具有适当的分子特性的聚(乙二醇)可以使用于本发明中。从若干来源商业获得具有特定分子量和线性的聚(乙二醇)。亲水性聚合物促进对流动在丝基诊断组合物的表面上的液体的粘性的控制。本领域技术人员将能够认识到无需过度实验就可以通过适当地选择所述处理溶液的组分和各组分的浓度以容易的方式控制在丝基诊断组合物表面上的液体的流率。
可以包括任选的洗涤步骤以去除任何外来材料、过量材料和/或来自亲水性丝组合物的未结合材料。
本发明方法可以进一步包括将至少一种试剂固定到至少一股亲水性丝组合物上的步骤以形成至少一股丝基诊断组合物,该步骤未在图1中显示。或者,本发明方法可以包括将至少一种试剂固定到至少一股脱胶丝纤维上的步骤,随后用处理溶液处理以生成至少一股丝基诊断组合物,该步骤也未在图1中显示。如已经所述的,丝纤维包含官能团。通过适当地利用官能团可将试剂固定到脱胶丝或亲水性丝组合物上。通过本领域技术人员已知的各种技术可以实现固定。所述技术可以包括但不限于,例如,浸渍、共价结合、涂布、浸浴、冲压,或它们的组合。使用上述一种或多种技术,可以实现将试剂简单的物理附着或化学结合到丝。可以包括任选的洗涤步骤以去除任何过量的未结合的试剂和其他外来材料。由此可以获得丝基诊断组合物。
可以使用本发明检测的分析物可以包括任何化学品,例如麻醉剂或易爆物、抗体、抗原、核酸等。作为第一试剂出现的抗体通常是第一抗体。可以用于固定的抗体可以包括但不限于,例如,hcG抗体、HIV-p24抗体、HIV-gp120抗体、FSH抗体、TSH抗体、肌钙蛋白抗体和镰状疟原虫抗体等。
在本发明中可用作第一试剂的抗原包括,例如p24、gp120、gp41、HIVII-gp105、gp36、丙肝-NS3、NS5、核心抗原、β-Hcg(怀孕)、TSH(甲状腺)、FSH(雌性激素)、肌钙蛋白-T(心脏)、CpkMb、BNP、肌红蛋白、Hb1Ac、PSA、AFP、CEA、CA125、CA19.9、孕酮、睾丸激素、雌甾二醇。如本说明书中所述,本发明方法包括固定至少一种试剂。当所述方法包括固定第二试剂时,所述第二试剂可以是第二抗体。在一些实施方案中,第二试剂是第二抗体。当第二试剂是第二抗体时,丝基诊断组合物以这样的方式形成:第二抗体在第一抗体的上游出现。以该方式形成组合物确保了当允许液体沿着组合物流动时,第二抗体在第一抗体之前暴露于液体。该组合物对于三明治型免疫测定非常有用,其中第二抗体包括可检测基团,且与第一抗体和抗原形成像三明治的结构。
本发明的丝基诊断组合物的典型表现是以织物纤维的形式。然而,也可以设想丝基诊断组合物的其他形式。这可以包括,例如,膜结构、单股、圆柱等。在成品应用中所使用的丝基诊断组合物的确切性质对本领域技术人员来说是将是显而易见的。
在一个实施方案中,丝基诊断组合物被用作编织在一起的纤维材料。挑选适合制造丝基诊断组合物的纤维材料的重要标准是其机械稳定性以及存在的制造方法,该方法足以精确地制造复杂图案并是可规模化的(scalable),使得能够以低成本生产大量的丝基诊断纤维组合物。丝是符合这些标准的材料,另外,丝具有其他理想的性质,例如作为天然纤维可生物降解。作为多肽,丝提供若干能够用于官能化生物分子的官能团。另外,丝编织工艺提供在不采用高温或高剪切加工的情况下将特定官能团导入图案中的能力。这包括利用编织简单处理线并将线并入到特定点。
本发明方法特别有吸引力,是由于其有益于在给定的时间期限内扩大化制造大量诊断设备。本发明方法进一步使用已经存在的技术和设备。在本发明中,已经成功地显示出对在用于生产诊断设备制造的纺织品制造中的现有方法的适应性。该适应包括对材料及其制备的谨慎选择,以及为了适应要求对技术略微修改。材料和方法的经济可行性也使其成为可行的选择。
丝基诊断组合物包括两端部,它们其中的一端部被指定为样品导入端口。通常,将用于分析的样品导入诊断纤维组合物,作为水溶液或水悬浮液或水乳状液。本领域技术人员应当理解,可以在丝基诊断组合物上的任何点将样品导入。样品可以包括待分析的分析物。分析的类型可以是多方面的。例如,在一个实施方案中,分析可以包括确定分析物是否存在。在另一实施方案中,分析可以包括出现在样品中的分析物的浓度和/或量。在其它一些实施方案中,这些分析的组合可以包括确定分析物是否存在,如果存在,则确定分析样品中的分析物的量和/或浓度。在将样品导入到样品导入端口后,样品沿着诊断纤维组合物流动。在不受限于任何理论的情况下,通过诊断纤维组合物的溶液的流动由毛细管作用支配,在本领域中有时也被称为毛细作用。典型的样品包括但不限于:汗液、血液、尿液、精液等。本说明书中所使用的“样品”包括整个液体,或者可以指用于分析的液体的组分。流动路径在丝基诊断组合物的另一端部处结束,此端部被指定为吸收端口。在一个实施方案中,试剂出现在诊断纤维组合物上的某位置处,吸收端口出现在经过诊断纤维组合物上试剂位置的流动方向上,使得样品流经试剂并在吸收端口处结束。在另一实施方案中,用本领域已知的合适的方式添加试剂,从而实现原位试剂固定。随后,将样品导入到诊断纤维组合物上。当包括分析物和试剂的样品相互作用时,它们相互结合并生成络合物,络合物停止流动,同时溶液流动直到其到达吸收端口。如果样品不包括分析物,则没有络合物生成,并因此继续流动直到其到达吸收端口。
存在第二试剂的情况下,样品首先与出现在第一试剂上游的第二试剂接触,如果分析物存在,则分析物与第二试剂生成第一络合物,随后包括第一络合物的溶液流动到达第一试剂,生成包括分析物、第一试剂和第二试剂的第二络合物。第二络合物在这一点停止流动。如果样品不包括分析物,则不生成第一络合物和第二络合物,样品流动直到其到达吸收端口。当丝基诊断组合物上不再有剩余的流动区域时,溶液停止流动。也可以设想进一步步骤:通过用过量的样品液体经过第一试剂洗涤以去除未结合的第二试剂。通过本领域技术人员已知的方法可以实现对络合物的分析。这些方法可以包括,例如荧光、共焦显微、光学显微、比色、电化学方法等,以及它们的组合。
在一些实施方案中,样品端口可以包括可以促进添加样品以及可以进一步用于例如分离组分的其他附加功能的材料。本说明书中可使用的一些示例性功能包括:从液体中分离血细胞、从低分子材料中分离较高分子量的组分等。实现上述功能的特定组合物在本领域中是已知的,可以在本发明中适当地采用这些特定组合物。
在其他一些实施方案中,吸收端口可以进一步包括吸收剂材料,例如促进样品流动的棉、硝化纤维、聚(丙烯酸)等。
典型的丝基诊断组合物还可以包括标记,该标记向使用者指出一点,该点指出样品导入端口。为了从本发明的丝基诊断组合物获得有用分析所需的样品量将取决于丝基诊断组合物的构造,本领域技术人员在无需过度实验可以获得该样品量。
本发明的丝基诊断组合物可以进一步包括着色剂、软化剂、本说明书中提到的那些用于各种目的其他添加剂。为了装饰的目的,可以用这些添加剂提供额外的特征,或将更大的功能性添加到现有的诊断设备。另外,本发明的丝基诊断组合物可以安装到基材上。可以存在所述基材以向丝基诊断组合物提供强度和机械完整性。基材可以选自本领域技术人员已知的许多坚固材料,且可以包括,例如,金属背板如钢、铁、钛、合金等、塑料如聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯等、硬纸板、木材和其他等,以及它们的组合。
可以进一步设想将本发明的丝基诊断组合物包装在合适的密封体内以保护其不受环境因素如在运输中的处理、阳光、水分、湿度等影响。在这种情况下,密封体可以以这样的方式设计:其能够被打开以允许接近所述设备。或者,该密封体可以以这样的方式存在:有仅用于样品导入接口的开口,使得即使在操作过程中,所述设备的其余部分也被全部包住。适合所述设备的密封体可以具有例如透明度、强度、耐水性、可塑性等性质。能良好地作为设备密封体的一些有用的材料可以包括但不限于:玻璃、塑料如聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯等。
本说明书中所描述的发明提供编织作为可选择的制造技术用于制造丝基诊断组合物和进一步的基于织品的诊断设备,其中基于织品的诊断设备也可以被称为“织品芯片”。这些诊断设备可以是重复使用型,或者可以是一次性使用、可抛弃的设备。丝编织是在世界许多地方都发展到很高技术水平的工艺,复杂图案的尺寸仅局限于单根线的厚度,且复杂图案可以以高度并行化的方式编织。该技术能够适用于在本发明中使用。
本发明的丝基诊断组合物可以用于在各种应用中进行的任何试验。例如,在夹心免疫检测中使用本发明的丝基诊断组合物的情况下,将用于样品中抗原的定性检测的样品导入到丝基诊断组合物的样品端口上。导入后,随着样品由于毛细管作用沿着丝基诊断组合物流动,样品首先与第二试剂(检测抗体)接触,因为第二试剂出现在第一试剂(捕获抗体)的上游。如果分析物(抗原)存在,其与第二试剂生成第一络合物。随后,包括第一络合物的溶液流动到达第一试剂(捕获抗体),生成包括分析物、第一试剂和第二试剂的第二络合物。第二络合物在这一点停止流动,并能够目测到粉/红色带。如果样品不包括分析物,则不生成第一络合物和第二络合物,样品流动直到其到达吸收端口。当该设备上不再有剩余的流动区域时,溶液停止流动。
在间接免疫检测中使用本发明的丝基诊断组合物的情况下,将用于抗体的定性检测的样品导入到样品端口上。导入后,随着样品由于毛细管作用沿着丝基诊断组合物流动,样品首先与第二试剂(检测抗体)接触,因为第二试剂出现在第一试剂(捕获抗原)的上游。如果分析物(抗体)存在,则其与第二试剂生成第一络合物。随后,包括第一络合物的溶液流动到达第一试剂(捕获抗原),生成包括分析物、第一试剂和第二试剂的第二络合物。第二络合物在这一点停止流动,并能够目测到粉/红色带。如果样品不包括分析物,则不生成第一络合物和第二络合物,样品流动直到其到达吸收端口。当该设备上没有剩余的流动区域时,溶液停止流动。
实施例
亲水性纤维组合物
天然丝纤维包括蜡质外层覆盖物,其必须通过被称为脱胶的工序将其去除。通过将丝线浸没入1M NaOH的溶液中脱胶天然丝纤维,制得允许毛细管流动的亲水性丝线。随后将线浸入包含0.1%20、牛血清白蛋白(BSA)和1%PEG(MW400)的溶液中。发现该处理过的线具有更均匀的流动性质,并且还防止了蛋白质非特异性结合到丝线。
在线上涂布捕获抗体/抗原
由于脱胶丝非特异性地结合到蛋白质,通过将亲水性纤维组合物浸入在Tris缓冲盐水中包含1mg/mL蛋白质的免疫球蛋白G溶液中而将捕获抗体直接涂布在亲水性纤维组合物上。
在线上涂布第二抗体
使用已知方法(.A.D.McFarland,C.L.Haynes,C.A.Mirkin,R.P.Van Duyne和H.A.Godwin,“Color My Nanoworld,”J.Chem.Educ.2004,81,544A;Secondary antibody conjugation to gold-Conjugation ofColloidal Gold to Proteins by Constance Oliver From:Methods inMolecular Biology,Vol.115:Immunocytochemical Methods and ProtocolsEdited by:L.C.Humana Press Inc.,Totowa,NJ)制备40nm尺寸金结合的第二抗体。将金溶液(其为澄清的深粉色溶液)标记的第二抗体应用于该丝线,之前先用包含1%蔗糖、0.2%Tween20、1%牛血清白蛋白(BSA)和1%聚(乙二醇)(分子量400)的溶液处理丝线。
合并经涂布的线
纺织工使用单独标记的线轴将涂布捕获抗体和标记的第二抗体的线手动插入亲水性经线之间的特定点。将提花机控制系统中的特定线升起,使用梭子将涂布好的线在特定线之间穿梭。这导致经涂布的线交织在织品中的多个点处。
尽管在本说明书中说明并描述了本发明的仅仅某些特征,但是本领域技术人员将想到许多修改和改变。因此,应当理解,所附的权利要求书旨在覆盖落入本发明实质内的所有这些修改和改变。
Claims (14)
1.一种制造丝基诊断组合物的方法,所述方法包括:
提供至少一股丝纤维;
用碱溶液处理所述至少一股丝纤维以提供至少一股脱胶丝纤维;以及
将至少一种试剂固定到所述至少一股脱胶丝纤维上以提供固定试剂的丝纤维;以及
用包含阻滞剂的处理溶液处理固定试剂的丝纤维以提供丝基诊断组合物。
2.一种制造丝基诊断组合物的方法,其中所述方法包括:
提供至少一股丝纤维;
用碱溶液处理所述至少一股丝纤维以提供至少一股脱胶丝纤维;
用包含阻滞剂的处理溶液处理所述至少一股脱胶丝纤维以提供亲水性丝组合物;以及
将至少一种试剂固定到所述亲水性丝组合物上以提供丝基诊断组合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述处理溶液包括表面活性剂的水溶液。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述表面活性剂是山梨聚糖的衍生物。
5.根据权利要求3所述的方法,其中所述表面活性剂进一步包括聚(乙二醇)。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述阻滞剂是牛血清白蛋白。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述至少一种试剂是第一抗体。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述第一抗体选自hcG抗体、HIV-p24抗体、HIV-gpl20抗体、FSH抗体、TSH抗体、肌钙蛋白抗体和镰状疟原虫抗体。
9.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述至少一种试剂是第二抗体。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述第二抗体选自结合金或乳胶的hcG抗体、HIV-p24抗体、HIV-gp120抗体、FSH抗体、TSH抗体、肌钙蛋白抗体和镰状疟原虫抗体。
11.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述至少一种试剂是抗原。
12.根据权利要求1或2所述的方法,其中通过选自浸渍、共价结合、涂布、浸浴、冲压、或其组合的方法实现固定。
13.一种由权利要求1至12中任一项所述的方法制得的丝基诊断组合物。
14.一种包括权利要求13所述的丝基组合物的诊断设备。
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