CN103018072A - 一种集束式植物叶片采集、粉碎器的使用方法 - Google Patents

Abstract

一种集束式植物叶片取样、粉碎器由外盒、内盒、塑料样品管和不锈钢珠构成，一次可采集、粉碎几十个，甚至几百个植物叶片样品。操作简捷高效，质量符合分析要求，不易产生错乱、不会造成交叉污染。使用方法：现在室内对取样、粉碎器中的样品管进行编号、标记，在取样现场按照顺序将样品装入样品管，回到室内将多孔插板连同样品管一起放在外盒底部用液氮冷冻，取出后进行手摇震荡粉碎样品。

Description

一种集束式植物叶片采集、粉碎器的使用方法

所属领域

本发明属于一种农业科学研究的方法，具体地说是一种集束式植物叶片采集、粉碎器的使用操作方法。

背景技术

随着分子生物学的飞速发展，规模化提取植物DNA和蛋白质已成为常规研究工作程序。现有的植物样品采集及研磨程序，首先是在低温条件下(使用冰袋或液氮)将样品采到小纸袋或一次性手套中带回实验室，在研钵中加入样品和液氮，用研磨棒进行研磨，将研磨后的粉末装至样品管中，然后进行后续处理。上述操作有取样、研磨、清洗3个步骤，取样时间与样品多少有关，一个样品的研磨及装样则至少需1~2min，此后还需要清洗研钵、研棒，擦拭干净，然后才能再次研磨及装样。此办法费时费力，且样品数目较多时，一方面容易因研钵清洗不干净会产生DNA交叉污染，另一方面则耗费大量人力、卫生纸及自来水等。新近出现的一种高通量植物叶片粉碎器，其结构是在样品管中加入一个钢珠，装入植物样品后，放在泡沫塑料盒中用液氮冷冻，然后用漏勺捞起，插入样品管盒的一端，每个样品管盒（72孔）不超过36个，然后上下震荡，利用粉碎器中的钢珠将植物样品撞击粉碎。这种粉碎器与原有的研钵研磨法相比，大大提高了工作效率，减少了交叉污染的风险，但也存在一些不足。一是大批量取样时无法进行提前标记，需要在采集地临时标记，限制了工作效率的提高；二是将粉碎器放在泡沫塑料盒中液氮冷冻，然后用漏勺捞起，插入样品管盒，这个操作比较繁琐，有待进一步改进。如果能解决上述两个问题，就可以大幅度提高工作效率，有益于植物样品分析的进行。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型的植物叶片采样、粉碎器。不但设备简单，操作容易，而且具有对植物叶片样品可以批量采集、批量粉碎，更加快捷高效的特点，且样品间互相不会交叉污染。

一种集束式植物叶片取样粉碎器产品的结构：

1. 一种集束式植物叶片取样、粉碎器由外盒、内盒、塑料样品管和不锈钢珠构成。

2. 外盒

①外盒采用泡沫塑料制作，用以保温隔热。

②外盒由外盒盒体和外盒盒盖构成。

③外盒呈立方体状。

3.内盒

①内盒由聚丙烯硬质塑料制作。

②内盒由内盒盒体、内盒盒盖和内盒多孔插板构成。

③多孔插板位于内盒盒底与盒盖之间。

4.多孔插板的每个插孔中安插一只塑料样品管。一个内盒中可安插多个塑料样品管。

5.不锈钢珠置于塑料样品管的底部。

6.一个外盒中可叠放一个或几个内盒。

一种集束式植物叶片取样、粉碎器是这样使用的：

1.    一种集束式植物叶片取样、粉碎器的使用分为取样准备、现场取样、冷冻处理、震荡粉碎四个步骤。

2.    取样准备

① 按照实际的植物叶片采样量选取一款适宜规格的集束式植物叶片取样粉碎器。

② 取样前先取出样品管进行编号、标记。

③ 将标记后的样品管顺序插回内盒中，加盖。

④ 将内盒放入外盒中，加盖。

⑤ 气温高于30℃时取样须在外盒中放置冰袋，以降低样品的温度，增加保存时间。

3.现场取样

① 剪取幼嫩的植物叶片，卷成筒状装入样品管。

② 盖紧样品管的盖子。

③ 将样品管按顺序插入内盒，盖好内盒的盖子。

④ 将内盒放回外盒中。

⑤ 封紧外盒盒盖。

3.    冷冻处理

① 在室内取出所有内盒，并将盒中的样品管连同多孔插板一起取出。

② 将样品管连同多孔插板放入外盒底部，保持样品管不从插板上脱离。

③ 向外盒内注入液氮，注入量以平叶片的位置为宜。

④ 立即盖紧外盒盒盖。

⑤ 静置1min，利用液氮-196℃的超低温度，将管内的叶片样品冻成脆片。

⑥ 外盒中一次可放1-2个多孔插板。

4.    震荡粉碎

① 从液氮中取出多孔插板和样品管。

② 将多孔插板和样品管放回原内盒，盖好内盒盖。

③ 握住内盒的一端，用力急速上下震荡10秒钟左右，利用样品管内钢珠反复的上下撞击，将远端试管内的植物叶片样品砸成粉末。

④ 握住内盒的另一端，用力快速上下震荡10秒钟左右，粉碎另一远端样品管中的叶片样品。

⑤ 从样品管中倒出钢珠。

⑥ 依次将所有内盒中的样品进行粉碎处理。

⑦ 将样品管及其插板重新放入内盒中，置于-20℃保存备用。

一种集束式植物叶片取样粉碎器产品的好处：

1.将植物叶片样品的取样、粉碎联为一体，操作更加便捷高效。

2. 可以在采样前对样品管在室内编号、标注，准确，高效。由于集束式植物叶片取样粉碎器可以放置多个内盒，一个内盒中又可以安插多个存放样品的样品管。可以在取样之前先在室内对内盒及样品管进行集中编号，将取样现场的部分工作提前到室内进行，简化野外操作程序，不但可以提高效率，而且减少取样现场出错的机会。而现有的一种高通量植物叶片粉碎器，由于没有事先进行集合安置，处于凌乱无序状态，不便提前在室内进行标记和排序，这就加重了野外、田间的工作量，在大规模采集样品的情况下，麻烦更为突出。

3.冷冻操作更加方便快捷。

由于集束式植物叶片取样粉碎器将多个样品管预先束集在一个内盒中，多个样品管内的植物叶片样品从采样到液氮冷冻、再到震荡粉碎始终保持在一个相对固定的位置上，不会造成样品的混乱和差错，保证了实验室内操作的有序高效。而现有的一种高通量植物叶片粉碎器在经过液氮冷冻之后要用漏勺捞起，然后再一个个安插的到样品管盒中，两者的效率差异不言而喻。

一种集束式植物叶片取样粉碎器的创造性：

1.    首次将植物叶片样品的采集、粉碎器功能合为一体，形成一器两用的器具，使操作更加方便快捷。

2.    在植物叶片样品的采集、冷冻、粉碎过程中，各个植物叶片样品的位置固定，既提高工作效率，又使样品不易发生混乱、丢失，同时使工作台面整洁有序。

附图说明

图1. 一种集束式植物叶片采集、粉碎器剖面图

图2. 内盒构造图

图3. 多孔插板图

图中：1.外盒盒体；2.外盒盒盖；3.内盒盒体；4.内盒盒盖；5.内盒多孔插板；6.塑料样品管；7.不锈钢珠。

具体实施方式

实施方式一  集束式植物叶片取样、粉碎器1

1. 一种集束式植物叶片取样、粉碎器由外盒、内盒、塑料样品管和不锈钢珠构成。

2. 外盒：

①外盒用泡沫塑料制作。

②外盒由外盒体1和外盒盒盖2构成。

③外盒呈立方体状。

④外盒内部的长×宽×高为25×20×30cm。

3.内盒：

①采用聚丙烯硬质塑料制做。

②内盒由内盒盒体3、内盒盒盖4和内盒多孔插板5构成。

③多孔插板为72个插孔6的插板。

④多孔插板位于内盒盒底与盒盖之间。

4.多孔插板的每个孔中安插一个塑料样品管7。

5.每个塑料样品管的底部有一个不锈钢钢珠8。

6.一个集束式植物叶片取样粉碎器1内叠放8个内盒，共576个样品管，最多可取样576个植物叶片样品。

实施方式二  集束式植物叶片取样、粉碎器2

1. 一种集束式植物叶片取样、粉碎器由一个外盒、内盒、塑料样品管和不锈钢珠构成。

2. 外盒构造：

①外盒为泡沫塑料盒。

②外盒由外盒体和盒盖构成。

③外盒呈立方体状。

④外盒内部的长×宽×高为25×20×30cm。

3.内盒构造：

①内盒为聚丙烯硬质塑料制成。

②内盒由内盒体、内盒盖和多孔插板构成。

③多孔插板为60孔插板。

④多孔插板位于内盒盒底与盒盖之间。

4.每个多孔插板的插孔内安插一只塑料样品管。

5.塑料样品管为2ml样品管。

6.每个塑料样品管的底部有一个不锈钢钢珠。

7.一个集束式植物叶片取样粉碎器2内叠放6个内盒，共360个样品管，最多可取样360个植物叶片样品。

实施方式三  烟草叶片样品的采集和粉碎

1.     取样准备

① 选取内装6个内盒，每盒含60个样品管的集束式植物叶片取样粉碎器。

② 烟草叶片取样前先取出样品管进行编号、标记。

③ 将标记后的样品管顺序插回内盒中，加盖。

④ 将内盒放在外盒中，加盖。

⑤ 在外盒中放置冰袋，以降低样品的温度，增加保存时间。

2.     取样

① 剪取幼嫩的烟草叶片，卷成筒状装入样品管。

② 盖紧样品管的盖子。

③ 将样品管按顺序插入内盒，盖好内盒的盖子。

④ 将内盒放回外盒中。

⑤ 封好外盒的泡沫塑料盖。

3.     冷冻处理

① 在室内取出所有内盒，并将盒中的样品管连同多孔插板一起取出。

② 将样品管连同样品管插板放入外盒底部，保持样品管不从插板上脱离。

③ 向外盒内注入液氮，注入量与样品管中烟草叶片的位置平齐。

④ 立即盖紧外盒盒盖。

⑤ 静置1min。

⑥ 外盒中一次放入2个多孔插板。

4.     震荡粉碎

① 从液氮中取出多孔插板和样品管。

② 将多孔插板和样品管放回原内盒，盖好内盒盖。

③ 握住内盒的一端，用力急速上下震荡10秒钟，利用样品管内钢珠反复的上下撞击，将远端试管内的植物叶片样品砸成粉末。

④ 握住内盒的另一端，用力急速上下震荡10秒钟，粉碎另一远端样品管中的叶片样品。

⑤ 从样品管中倒出钢珠。

⑥ 依次将所有内盒中的样品进行粉碎处理。

⑦ 将样品管及其插板重新放入内盒中，置于-20℃保存备用。

实施方式四  小麦叶片样品的采集和粉碎

1.     取样准备

① 选取内装8个内盒，每盒含72个样品管的集束式植物叶片取样粉碎器。

② 小麦叶片取样前先取出样品管进行编号、标记。

③ 将标记后的样品管顺序插回内盒中，加盖。

④ 将内盒放在外盒中，加盖。

⑤ 在外盒中放置冰袋，以降低样品的温度，增加保存时间。

2.     现场取样

① 剪取幼嫩的小麦叶片，卷成筒状装入样品管。

② 盖紧样品管的盖子。

③ 将样品管按顺序插入内盒，盖好内盒的盖子。

④ 将内盒放回外盒中。

⑤ 封好塑料泡沫盒。

3.     冷冻处理

① 在室内取出所有内盒，并将盒中的样品管连同多孔插板一起取出。

② 将样品管连同样品管插板放入外盒底部，保持样品管不从插板上脱离。

③ 向外盒内注入液氮，注入量与样品管中小麦叶片的位置平齐。

④ 立即盖紧外盒盒盖。

⑤ 静置1min。

⑥ 外盒中一次放入2个多孔插板。

4.     震荡粉碎

① 从液氮中取出多孔插板和样品管。

② 将多孔插板和样品管放回原内盒，盖好内盒盖。

③ 握住内盒的一端，用力快速上下震荡10秒钟，利用样品管内钢珠反复的上下撞击，将远端试管内的植物叶片样品砸成粉末。

④ 握住内盒的另一端，用力快速上下震荡10秒钟，粉碎另一远端样品管中的叶片样品。

⑤ 从样品管中倒出钢珠。

⑥ 依次将所有内盒中的样品进行粉碎处理。

⑦ 将样品管及其插板重新放入内盒中，置于-20℃保存备用。

Claims (5)

1. 一种集束式植物叶片取样、粉碎器的使用分为取样准备、现场取样、冷冻处理、震荡粉碎四个步骤。
2. 取样准备

   ① 按照植物叶片采样量选取一款规格适宜的集束式植物叶片取样、粉碎器；

   ③ 采样前对采样、粉碎器内的样品管进行编号、标记；

   ④ 将标记后的样品管顺序插回内盒中，加盖；

   ⑤ 将内盒放入外盒中，加盖；

   ⑥ 气温高于30℃时取样须在外盒中放置冰袋，以降低样品的温度，增加保存时间。
3. 现场取样

   ① 剪取幼嫩的植物叶片，卷成筒状装入样品管；

   ② 盖紧样品管的盖子；

   ③ 将样品管按顺序插入内盒，盖好内盒的盖子；

   ④ 将内盒放回外盒中；

   ⑤ 封紧外盒盒盖。
4. 冷冻处理

   ① 在室内取出所有内盒，并将盒中的样品管连同多孔插板一起取出；

    将样品管连同多孔插板放入外盒底部，保持样品管不从插板上脱离；

    向外盒内注入液氮，注入量以平叶片的位置为宜；

    立即盖紧外盒盒盖；

    静置1min，利用液氮-196℃的超低温度，将管内的叶片样品冻成脆片；

    外盒中一次可放1-2个多孔插板。
5. 震荡粉碎

   ① 从液氮中取出多孔插板和样品管；

   ② 将多孔插板和样品管放回原内盒，盖好内盒盖；

   ③ 握住内盒的一端，用力急速上下震荡10秒钟左右，利用样品管内钢珠反复的上下撞击，将远端试管内的植物叶片样品砸成粉末；

   ④ 握住内盒的另一端，用力快速上下震荡10秒钟左右，粉碎另一远端样品管中的叶片样品；

   ⑤ 从样品管中倒出钢珠；

   ⑥ 依次将所有内盒中的样品进行粉碎处理；

   ⑦ 将样品管及其插板重新放入内盒中，置于-20℃保存备用。

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