CN103002871A

CN103002871A - 锦葵色素用来促进头发生长

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Publication number: CN103002871A
Application number: CN2011800330542A
Authority: CN
Inventors: R·K·伯加尔; P·帕玛; J·S·罗吉尔斯
Original assignee: Unilever NV
Current assignee: Unilever NV
Priority date: 2010-07-06
Filing date: 2011-07-04
Publication date: 2013-03-27
Also published as: JP2013529670A; WO2012004227A1; BR112012031680A2; EP2590623A1

Abstract

脱发的问题是男性和女性都关注的主要头发问题之一。对于男性来说，这一问题的最明显的表现是被称为斑秃的男性型脱发。然而，头发脱落而导致的头发稀疏也是男性和女性都关注的问题。患有脱发的个人经常由于其在外观上的变化而发生心理问题，例如社交恐惧症、焦虑和抑郁。本发明涉及一种包含锦葵色素或其衍生物的头发护理或口服降血压组合物。本发明还涉及用于增加头发纤维直径、刺激头发生长、保持头发或减少脱发、刺激毛发生长期或休止期阶段的毛囊生长、增加头发纤维密度和预防或治疗脱发的美容方法。

Description

锦葵色素用来促进头发生长

技术领域

本发明涉及一种含有锦葵色素(malvidin)或其衍生物的头发护理组合物。本发明还涉及一种用于增加头发纤维直径、刺激头发生长、保持头发或减少脱发、刺激毛发生长期或休止期阶段的毛囊生长、增加头发的纤维密度和预防或治疗脱发的美容方法。

背景技术

脱发是男性和女性关注的主要头发问题之一。对于男性来说，这一问题最明显的表现是被称为斑秃的男性型脱发。然而，头发脱落而导致的头发稀疏也是男性和女性都关注的问题。遭受脱发困扰的个人经常由于其在外观上的变化而发生心理问题，例如社交恐惧症、焦虑和抑郁。

已进行了各种尝试来解决这些问题。例如，减轻压力可以有助于减缓脱发(由于压力通常可能与脱发的时期相关联)。以非常不同的方式起作用的许多药物已被广泛使用。例如虽然可能存在着显著的副作用，施用于头皮上的免疫抑制剂已显示出斑秃的暂时逆转。双氢睾酮抑制剂例如非那雄胺(口服给药的形式)的使用已获得批准且5-α还原酶抑制剂如酮康唑也被推荐。其他药物包括钾通道开放和血管扩张剂化合物如米诺地尔(2％w/w的局部用溶液的形式)和二氮嗪。

米诺地尔最初是作为一种口服抗高血压药物(Loniten^TM)生产的，其被发现也有毛发增多效果。Messenger等人(Br.J.Dermatol.，150/2，186-194(2004))，在临床试验中证明，局部使用的米诺地尔增加头发的生长和直径，引起毛发生长期的诱导和延长毛发生长期的长度并因此延长头发的长度。就作用方式来说，Sanders等人(J.Invest.Dermatol.，107/2，229-234(1996))已证明，米诺地尔能够通过开放钾离子通道在NIH 3T3成纤维细胞中增加细胞增殖。Messenger等人证明，其他钾通道开放剂表现出类似的毛发增多效果。Lachgar等人(Br.J.Dermatol.，138/3，407-41 1(1998))已证明，米诺地尔增加了血管内皮生长因子(VEGF)(其在头发生长的血管生成和毛囊生长周期中起着重要的作用)。在毛乳头细胞中，Li等人(J.Invest Dermatol.，117/6，1594-1600(2001))已经证明，米诺地尔结合K_ATP通道的磺酰脲受体SUR2B成分，从而导致ATP(其转化为腺苷)的分泌和导致VEGF水平的提高。

米诺地尔的副作用包括头皮瘙痒和头皮屑，往往是由于其局部用制剂所需的醇。口服米诺地尔的副作用包括脸和四肢的肿胀、快速和不规则的心跳、头晕和心脏损伤。锯叶棕和绿茶提取物(其中都包含5-α还原酶抑制剂)以及银杏提取物(其包含活性血管扩张剂)的草药治疗已被使用。非侵入性的治疗包括头皮的精油按摩。咖啡因也被确认为人类头发生长的体外刺激剂和降低睾酮诱导的毛囊生长抑制。

在EP 0842427中已经在先描述了一种通过测量在不存在氨基糖苷类抗生素的情况下，在低血清条件下细胞有丝分裂来鉴别钾通道开放剂的体外筛选试验，其确认钾通道通过使用多个钾通道阻滞剂(，更特别地K_ATP特异性拮抗剂，如甲苯磺丁脲或者格列本脲)与弱的非选择性的钾通道孔阻滞剂如四乙基铵(TEA)结合而参与到有丝分裂效应中。

发明简述

在本发明的第一个方面，提供了以选自于洗发剂、护发素、发胶、摩丝、凝胶剂、油、乳霜、蜡和洗液形式的包含锦葵色素或其衍生物的头发护理组合物解决上述脱发问题的解决方案。

锦葵色素是经验化学式为C₁₇H₁₅O₇+的在自然界中非常丰富的O-甲基化花青素。它主要是产生红葡萄酒的颜色的原因，葡萄是其来源之一。它也是一种在报春花植物中发现的产生蓝色色素的花青素之一。锦葵色素的IUPAC名称是3，5，7-三羟基-2-(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)色烯翁，并具有以下化学结构：

锦葵色素或其衍生物可以是葡萄(Vitis vinifera)皮、报春花(Primula polyanthus)的花和锦葵(Malva sylvestris)花中任一种的水性提取物的形式。优选地锦葵色素或其衍生物的重量范围为组合物重量的0.00001至30％，优选为0.0001至15％，最优选为0.001至5％。

衍生物包括糖甙类如葡萄糖苷或半乳糖苷、酰基和丙二酰基衍生物。特定的衍生物是锦葵色素苷、锦葵色素的二糖苷、锦葵色素-3-葡糖苷、在紫葡萄皮中发现的锦葵色素的3-糖苷和樱草素，锦葵色素的3-半乳糖苷。锦葵色素苷是作为草药如锦葵属(锦葵)、樱草属和杜鹃花属中的色素被发现的。其可以发现于多种常见的食物中，包括但不限于以下：萝卜、西红柿、芜菁、土豆、青椒、豇豆、青豆、橄榄(绿橄榄和乌榄)、洋葱、茄子、甘蓝、胡萝卜、甜菜、鳄梨、玉米、核桃、腰果、红辣椒、芥菜籽、肉桂、西瓜、大黄、草莓、榅桲、桃子、梨、李子、无花果、葡萄(红葡萄和绿葡萄)、苹果、杏，香蕉、黑莓、蓝莓、波森莓(boysenberry)、樱桃、蔓越莓、黑醋栗、蟹肉、白蛋白(牛奶)、奶酪、酸奶、黄油、糖用甜菜和蜂蜜。

在本发明的第二个方面，一种头发护理组合物，其包含锦葵色素或其衍生物以及选自于阳离子表面活性剂、脂肪物质、悬浮剂、硅氧烷、抗头屑剂、阴离子表面活性剂、两性表面活性剂、两性离子表面活性剂和香料的成分。

在本发明的第三个方面，提供了一种用于刺激头发生长的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

在本发明的第四个方面，提供了一种用于增加头发纤维密度的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

在本发明的第五个方面，提供了一种用于增加头发纤维直径的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

在本发明的第六个方面，提供了一种用于保持头发或减少脱发的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

在本发明的第七个方面，提供了一种用于预防或治疗脱发的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

在本发明的第八个方面，提供了一种用于刺激毛发生长期诱导的美容方法，该方法包括向需要的人的头皮或头发应用本发明的第一个或者第二个方面的头发护理组合物的步骤。

发明详细描述

根据本发明的头发护理组合物的最终产品形式可以适当地是，例如，洗发剂、护发素、发胶、定型摩丝、凝胶剂、油、霜剂、蜡或洗剂。特别优选的产品形式是免洗型产品，尤其是洗后护发素(免洗型)，以及头发处理产品，如发用精华素。

调理表面活性剂

护发素组合物通常包含一种或更多的美容上可接受的且适合于局部应用于头发的调理表面活性剂。

适合的调理表面活性剂选自阳离子表面活性剂，其单独使用或以混合物使用。

本发明的组合物中有用的阳离子表面活性剂含有当其溶解在本发明的水性组合物中时带正电荷的氨基或季铵亲水部分。

用于本发明的护发素组合物的最优选的阳离子表面活性剂是其中烷基链长度为C16至C22的单烷基季铵化合物。

合适的阳离子表面活性剂的实例包括季铵化合物，特别是三甲基季铵化合物。

优选的季铵化合物包括十六烷基三甲基氯化铵、山嵛基三甲基氯化铵(BTAC)、氯化十六烷基吡啶、四甲基氯化铵、四乙基氯化铵、辛基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵、辛基二甲基苯甲基氯化铵、癸基二甲基苯甲基氯化铵、十八烷基二甲基苄基氯化铵、双十二烷基二甲基氯化铵、二(十八烷基)二甲基氯化铵、牛脂基三甲基氯化铵、椰油基三甲基氯化铵、PEG-2油烯基氯化铵和其中氯被卤素(例如，溴离子)、乙酸根、柠檬酸根、乳酸根、乙醇酸根、磷酸根、硝酸根、硫酸根或烷基硫酸根替代的它们的盐。进一步合适的阳离子表面活性剂包括具有CTFA命名Quaternium-5、Quaternium-31和Quaternium-18的那些材料。任何上述材料的混合物也可以是合适的。用于本发明的护发素中的特别有用的阳离子表面活性剂是十六烷基三甲基氯化铵，例如作为来自Hoechst Celanese的GENAMIN CTAC市售可得的。

伯、仲和叔脂族胺的盐也是合适的阳离子表面活性剂。

在本发明的护发素中，阳离子表面活性剂的水平优选为总组合物的0.01至10％w/w，更优选为0.05至5％w/w，最优选为0.1至2％w/w。

脂肪物质

本发明的护发素组合物优选地另外包含脂肪物质。“脂肪物质”是指脂肪醇、烷氧基化的脂肪醇、脂肪酸、甘油酯、甘油、植物不皂化物或其混合物。

代表性的脂肪醇含有8至22个碳原子，更优选地16至22个碳原子。脂肪醇通常是含有直链烷基的化合物。合适的脂肪醇的实例包括鲸蜡醇、硬脂醇及其混合物。这些材料的使用也有利于它们获得组合物的整体调理性能。

烷基链中具有约12至约18个碳原子的乙氧基化脂肪醇可以用于替代脂肪醇本身或在脂肪醇本身之外使用。合适的例子包括乙二醇十六烷基醚、聚氧乙烯(2)硬脂基醚、聚氧乙烯(4)十六烷基醚及其混合物。

本发明的护发素中的脂肪醇物质的水平合适地为从0.01至15％w/w，优选为从0.1至10％w/w，和更优选为从0.1至5％w/w。阳离子表面活性剂与脂肪醇的重量比适宜地是从10∶1至1∶10，优选地为4∶1至1∶8，最佳地是从1∶1到1∶7，例如1∶3。

悬浮剂

在优选的实施方式中，该头发护理组合物，特别地如果它是洗发剂，还含有从0.1至5％w/w的悬浮剂。

合适的悬浮剂选自于聚丙烯酸、丙烯酸的交联聚合物、丙烯酸与疏水性单体的共聚物、含羧酸单体与丙烯酸酯的共聚物、丙烯酸与丙烯酸酯的交联共聚物、杂多糖胶和结晶长链酰基衍生物，及其混合物。长链酰基衍生物理想地选自硬脂酸乙二醇酯、具有从16到22个碳原子的脂肪酸的链烷醇酰胺以及它们的混合物。聚丙烯酸是可作为Carbopol 420、Carbopol 488或Carbopol 493市售得到的。也可以使用以多官能剂交联的丙烯酸的聚合物，它们是可作为Carbopol 910、Carbopol 934、Carbopol 941和Carbopol 980市售得到的。含羧酸的单体与丙烯酸酯的合适共聚物的例子是Carbopol 1342。所有Carbopol(商标)材料可从Goodrich获得。适合的丙烯酸和丙烯酸酯的交联聚合物是Pemulen TR1或Pemulen TR2(均可从Lubrizol获得)。合适的杂多糖胶是黄原胶。

硅氧烷调理剂

本发明的头发护理组合物可以包含用于提高调理性能的硅氧烷调理剂的乳化小滴。

合适的硅氧烷包括聚二有机硅氧烷，特别是具有CTFA命名二甲硅油的聚二甲基硅氧烷。还适合用于本发明的组合物(特别是洗发剂和护发素)的是具有羟基末端基团的聚二甲基硅氧烷，其具有CTFA命名聚二甲基硅氧烷醇。还适合用于本发明的组合物的是具有轻度交联的硅酮橡胶，例如在WO 96/31 188中描述的。

合适的预形成的硅氧烷乳液的实例包括聚二甲基硅氧烷醇乳液DC2-1766、DC2-1784、DC-1785、DC-1786和DC-1788，其都购自Dow Corning。氨端聚二甲基硅氧烷乳液如DC2-8177和DC939(来自Dow Corning)和SME253(来自GE Silicones)也是适合的。

包括在本发明的洗发剂和护发素中的进一步优选的一类硅氧烷具有至少一个氨基官能团。

硅氧烷的总量优选为总组合物的从0.01至10％w/w，更优选为从0.3至5％w/w，最优选0.5至3％w/w，这是适当的水平。

非硅氧烷油性调理成分

根据本发明的头发护理组合物还可以包含分散的、非挥发性的、不溶于水的油性调理剂。

“不溶性的”是指该物质在25℃下在0.1％w/w的浓度是不溶于水的(蒸馏水或等同物)。

合适的油性或脂质物质选自烃油、脂肪酸酯和它们的混合物。

佐剂

本发明的头发护理组合物还可以包含适用于头发护理的佐剂。通常，这样的成分被单独地以总组合物的最多21％w/w，优选至多1％w/w的水平包含。

合适的头发护理佐剂包括氨基酸、糖和神经酰胺。特别优选的是去头屑剂，尤其是那些含有锌的去头屑剂，如吡硫锌(ZnPTO)。进一步优选的成分是苯咪丁酮。

定型聚合物

头发定型聚合物(如果存在)优选地存在于本发明的头发护理组合物中的量为从0.001至10％w/w，更优选为从0.1至10％(重量)，例如从1％至8％w/w。

头发定型聚合物是众所周知的。合适的头发定型聚合物包括含有使聚合物的性质呈现阳离子、阴离子、两性或非离子性的部分的市售聚合物。合适的头发定型聚合物包括，例如，嵌段和接枝共聚物。聚合物可以是合成的或天然来源的。

表面活性剂

洗发剂组合物优选地包含一种或更多的美容上可接受的和适合于头发局部应用的清洁表面活性剂。另外的表面活性剂可以作为乳化剂存在。

合适的清洁表面活性剂选自阴离子的、两性的和两性离子的表面活性剂及其混合物。该清洁表面活性剂可以是与乳化剂相同的表面活性剂，或者可以是不同的表面活性剂。

阴离子清洁表面活性剂

根据本发明的洗发剂组合物将典型地包含一种或更多的美容上可接受的和适合于头发局部应用的阴离子清洁表面活性剂。

合适的阴离子清洁表面活性剂的实例是烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷芳基磺酸盐、烷酰基羟乙磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-烷基肌氨酸盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷酸盐、烷基醚羧酸盐和α-烯烃磺酸盐，特别是其钠、镁、铵及单-、二-和三乙醇胺盐。

用于本发明的洗发剂组合物中的典型的阴离子清洁表面活性剂包括油烯基磺基琥珀酸钠、月桂基磺基琥珀酸铵、月桂基硫酸铵、椰油酰基羟乙磺酸钠、月桂基羟乙磺酸钠和N-月桂基肌氨酸钠。最优选的阴离子表面活性剂是月桂基硫酸钠、月桂基醚硫酸钠(n)EO(其中n的范围从1到3)、月桂基硫酸铵和月桂基醚硫酸铵(n)EO(其中n的范围从1到3)。

在本发明的洗发剂组合物中的阴离子清洁表面活性剂的总量一般是从5至30％w/w，优选地从6至20％w/w，更优选地从8至16％w/w。

助表面活性剂

该洗发剂组合物可以任选地包括助表面活性剂，优选地两性或两性离子型的表面活性剂，它可以被包括以从0至大约8％w/w，优选地从1至4％w/w的量被包括。

两性和两性离子表面活性剂的例子包括，烷基甜菜碱、烷基酰胺丙基甜菜碱、烷基磺基甜菜碱(磺基甜菜碱类)、烷基甘氨酸盐、烷基羧基甘氨酸盐、烷基两性丙酸盐、烷基两性甘氨酸盐、烷基酰氨丙基羟基磺基甜菜碱、酰基牛磺酸盐和酰基谷氨酸盐，其中的烷基和酰基基团具有从8至19个碳原子。用于本发明的洗发剂组合物中的典型的两性和两性离子表面活性剂包括月桂基氧化胺、椰油二甲基磺丙基甜菜碱，优选地月桂基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱和椰油酰两性基丙酸钠(sodium cocamphopropionate)。

另一种优选的助表面活性剂是非离子表面活性剂，它可以以从0至8％w/w，优选地从2至5％w/w的量被包括。

例如，可以包含在本发明的洗发剂组合物中的代表性的非离子表面活性剂包括脂肪族(C8-C18)直链或支链伯或仲醇或酚与烯化氧(通常是氧化乙烯，和一般具有从6至30个氧化乙烯基团)的缩合产物。

可以被包括在本发明的洗发剂组合物中的另外的非离子表面活性剂是烷基多糖苷(APG)。通常，APG是其中包含连接于(任选地通过桥接基团)一个或更多的糖基基团嵌段的烷基基团的烷基多糖苷。优选的APG是由下面的公式定义：

RO-(G)_n

其中R是支链或直链的C5至C20的烷基或烯基基团，G是糖基基团和n是从1至10。

该洗发剂组合物还可以任选地包括一种或多种阳离子助表面活性剂，被包括的量为0.01至10％w/w，更优选为从0.05至5％w/w，最优选从0.05至2％w/w。在下文中描述了与护发素组合物相关的有用的阳离子表面活性剂。

本发明的洗发剂组合物中的表面活性剂(包括任何助表面活性剂和/或任何乳化剂)的总量一般是从5至50％w/w，优选从5至30％w/w，更优选从10至25％w/w。

阳离子表面活性剂或聚合物

该阳离子表面活性剂是在本发明的组合物中用于增强调理性能的优选的成分。

合适的阳离子调理表面活性剂包括十六烷基三甲基氯化铵、山嵛基三甲基氯化铵、氯化十六烷基吡啶、四甲基氯化铵、四乙基氯化铵、辛基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵、辛基二甲基苯甲基氯化铵、癸基二甲基苯甲基氯化铵、十八烷基二甲基苄基氯化铵、双十二烷基二甲基氯化铵、双十八烷基二甲基氯化铵、牛脂三甲基氯化铵、二氢化牛脂二甲基氯化铵(例如，来自Akzo Nobel的Arquad 2HT/75)、椰油基三甲基氯化铵、PEG-2-油基氯化铵和它们的相应的氢氧化物、Quaternium-5、Quaternium-31、Quaternium-18及它们的混合物。

单独的或与一种或多种其它的阳离子调理表面活性剂混合的一类合适的阳离子调理表面活性剂中的另一个例子是酰胺胺和酸的组合。可用于本发明的优选的酰胺胺包括硬脂酰胺-丙基二甲基胺、硬脂酰胺丙基二乙基胺、硬脂酰胺乙基二乙基胺、硬脂酰胺乙基二甲基胺、棕榈酰胺丙基二甲基胺、棕榈酰胺丙基二乙基胺、棕榈酰胺乙基二乙基胺、棕榈酰胺乙基二甲基胺、山嵛酰胺丙基二甲基胺、山嵛酰胺丙基二乙基胺、山嵛酰胺乙基二乙基胺、山嵛酰胺乙基二甲基胺、花生酰胺基丙基二甲基胺、花生酰胺基丙基二乙基胺、花生酰胺基乙基二乙基胺、花生酰胺基乙基二甲基胺以及它们的混合物。该酸可以是任何的能够使头发护理组合物中的酰胺胺质子化从而形成实际上是一个非永久的季铵或伪季铵阳离子表面活性剂的叔胺盐的有机或无机酸。本文中有用的合适的酸包括盐酸、乙酸、酒石酸、富马酸、乳酸、苹果酸、琥珀酸以及它们的混合物。适宜地，酸以足够的量包含以质子化所有存在的酰胺胺。

阳离子聚合物是用于增强调理性能的优选成分。合适的阳离子聚合物可以是被阳离子取代的均聚物或可以由两种或更多种类型的单体形成。该聚合物的重量平均分子量(Mw)通常是在100000到2百万道尔顿之间。阳离子聚合物存在于洗发剂组合物中的水平通常是组合物的0.01至5％，优选为0.05至1％，更优选从0.08至0.5％w/w。合适的阳离子聚合物包括，例如，阳离子多糖聚合物、具有阳离子胺或季铵官能的乙烯基单体与水溶性间隔单体如(甲基)丙烯酰胺、烷基和二烷基(甲基)丙烯酰胺、烷基(甲基)丙烯酸酯、乙烯基己内酯和乙烯基吡咯烷的共聚物。烷基和二烷基取代的单体优选具有C1-C7烷基基团，更优选地C1-3烷基基团。其它合适的间隔物包括乙烯基酯、乙烯基醇、马来酸酐、丙二醇和乙二醇。

本发明的组合物中该阳离子性表面活性剂或聚合物存在的水平一般为从0.01至5％w/w，优选为从0.05至1％w/w，更优选为从0.08至0.5％w/w。

脂肪醇和阳离子表面活性剂在调理组合物中结合使用被认为是特别有利的，因为这会导致阳离子性表面活性剂分散于其中的层状相的形成。阳离子表面活性剂与脂肪醇的重量比适当地是从1∶1至1∶10，优选为从1∶1.5至1∶8，最佳地从1∶2至1∶5。如果阳离子表面活性剂与脂肪醇的重量比太高，这可能会导致来自组合物的眼睛刺激。如果它太低，对于有些消费者可能感到头发干涩。

任选成分

本发明的头发护理组合物可以包含用于增强性能和/或消费者可接受性的其它成分。这样的成分包括香料、染料和颜料、pH调节剂、珠光剂或遮光剂、粘度调节剂及防腐剂或抗菌剂。这些成分中的每一个将以有效地完成其目的的量存在。通常，这些任选的成分独立地以组合物的高达5％w/w的水平包含。

根据本发明的头发护理组合物是使用本领域技术人员已知的方法生产的。

实施例1：根据本发明的头发生长溶液组合物(％重量)

名称	商品名	功能	％
				乙醇	乙醇	载体	45.00
丙二醇	丙二醇	载体	37.80
				Glabranin		活性物质	0.1
肉豆蔻酸异丙酯	Estol 1514	载体	10.00
				羟丙基纤维素	Klucel M	增稠剂	1.00
DMDH乙内酰脲	Glydant	防腐剂	0.20
				水			至100

实施例2：根据本发明的头发生长洗液组合物(％重量)

实施例3：用锦葵色素体外增加成纤维细胞的生长

以下描述的实验观察活性物质对在低营养环境下细胞生长潜能的效果，即活性物质对促有丝分裂的细胞生长因子的效果，而不是鉴别本身促有丝分裂的活性物质。

在50μL的二甲基亚砜(DMSO)中加入氯化锦葵色素(FischerScientific)，并涡旋混合至溶解。将5ml的DMSO中的锦葵色素加入达尔伯克必需基本培养基(DMEM)中，该培养基含有2％v/v胎牛血清(FCS)，以得到10μg/mL的锦葵色素溶液。使用如上的DMSO/DMEM/FCS制备系列稀释液。使用1mM的如上的DMSO/DMEM/FCS中的米诺地尔作为阳性对照。还制备了含2％v/v的FCS的DMEM中的DMSO对照。

将来自NIH3T3D4细胞系(European collection of animal cellcultures，Health Protection Agency Porton Down，England)的成纤维细胞培养在没有抗生素的DMEM培养基中。用10mL的Hank′s培养基中的0.25％w/w的胰蛋白酶和0.038％w/v的EDTA脱除细胞5分钟，加入10mL的含有10％v/v FCS的DMEM，并将细胞在1000rpm下离心2分钟。除去培养基后，在10mL的含10％v/v的FCS的DMEM中洗涤细胞，并在1000rpm下离心2分钟。然后将细胞重新悬浮于10mL含有10％v/v FCS的DMEM中并使用细胞计数室计数。制备每100μL含有5000个细胞(50,000个细胞每毫升)的细胞悬浮液并将100μL的细胞悬浮液接种到96孔板中。在37℃下空气中5％v/v二氧化碳的气氛的培养箱中使细胞粘附过夜。用DMEM(不含FCS)洗涤各孔三次后，向8个孔中的各孔添加100μL的测试溶液(每毫升DMSO/DMEM/FCS含1、0.1和0.01μg锦葵色素，含有或不含10μM的格列苯脲(一种钾离子通道阻滞剂)和0.1mM的四乙基铵(TEA，一种直接结合钾离子通道的钾离子通道阻滞剂)。连续5天每天加入含有锦葵色素的新鲜培养基。

5天后用比色法(来自Promega的Promega CellTiter Reagent)在试验培养基中测定细胞数。向各孔中加入20μL试剂，并如前地孵育板一小时。在450nm处读出吸光率，结果示于表1中。

表1：锦葵色素对成纤维细胞生长和钾离子通道开放的影响(结果表示8个重复的具有SD(标准偏差)的平均值；通过student t检验测量的与对照显著不同的仅锦葵色素及锦葵色素与抑制剂的组合显示为^*P＜0.05)。

从表1中看出，锦葵色素明显是钾离子通道开放剂以及这导致成纤维细胞生长。

Claims

1.一种包含锦葵色素或其衍生物的头发护理组合物，其为选自于洗发剂、护发素、发胶、摩丝、凝胶剂、油、乳霜、蜡和洗液的组合物形式。

2.一种头发护理组合物，其包含锦葵色素或其衍生物以及选自于阳离子表面活性剂、脂肪物质、悬浮剂、硅氧烷、抗头屑剂、阴离子表面活性剂、两性表面活性剂、两性离子表面活性剂和香料的成分。

3.根据权利要求1或权利要求2的头发护理组合物，其中锦葵色素或其衍生物是葡萄皮、报春花的花和锦葵花中任一种的水性提取物的形式。

4.根据上述权利要求中任一项的头发护理组合物，其中的锦葵色素或其衍生物的重量范围为组合物重量的0.00001至30％，优选为0.0001至15％，最优选为0.001至5％。

5.根据上述权利要求中任一项的头发护理组合物，其中该头发护理组合物还包含进一步的头发生长活性物质。

6.一种用于刺激头发生长的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。

7.一种用于增加头发纤维密度的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。

8.一种用于增加头发纤维直径的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。

9.一种用于保持头发或减少脱发的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。

10.一种用于预防或治疗脱发的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。

11.一种用于刺激毛发生长期诱导的美容方法，该方法包括向头皮或头发应用锦葵色素或其衍生物或者根据权利要求1至5中任一项的头发护理组合物的步骤。